酶活性的影响因素

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— 2
稀释唾液(滴)
10
10
10
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•
摇匀后，将各管置37℃水浴中处理。
• （2）每隔1min从pH6.8的试管中取1滴反应液滴于白瓷 板上，随后滴加稀碘液1滴，观察颜色变化。 • （3）待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液3滴。观察各 管颜色，比较各管中淀粉水解的程度。
【3】 20滴 100
10滴 100
10m
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10滴
3．pH对酶活性的影响
• （1）取3支试管，按表4-3编号后进行实验。 取淀粉与唾液淀粉酶
管号 1％淀粉(mL) 不同pH的缓冲液 （mL） 1 2 2 2 3 2
pH5.0
pH6.8 pH8.0
2
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2 —
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• 尿素酶 NaOH • CO(NH2)2 + H2O ------------ ( NH4 )2CO3 ------------ NH3 • • NH3 + 纳氏试剂(HgI2.2KI) ------------ NH2.Hg2I3 • (棕黄色)
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• 氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为其抑制剂。唾 液淀粉酶可催化淀粉生成各种不同大小的糊精及麦芽糖 。不同大小的糊精遇碘呈现不同颜色，可用颜色淀粉水 解程度，从而研究激活剂和抑制剂的影响。
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实验材料
• • • • • • • • 器材： 控温水浴锅（每个实验室3个） 制冰机 电磁灶 不锈钢锅 白瓷板 试管、滴管、移液管（1-2ml） 烧杯
2．温度对酶活性的影响
（1）取3支试管，按表4-2进行实验。 （2）按上述表格进行试验，实验完成后，比较各试管中 黄红色的深浅。 取尿素液
试管
与尿素酶液
0.1 %尿 素液
预温
尿素 酶溶 液
温度
时间
冷却
纳氏 试剂 10滴 10滴
【1】 20滴 冰水
10滴 冰水
10m in
【2】 20滴 55度 10滴 55度 10m in
酶反应条件的选择
主要内容
1
知识背景
实验原理 实验材料 实验方法
2
3 4
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知识背景
• 酶的化学本质是蛋白质，与一般催化剂 一样，只能催化热力学允许的化学反应， 但又具有不同于一般催化剂催化反应的 特点和反应机制
• 酶具有不稳定性，酶促反应的速率受酶浓度、 底物浓度、pH、温度、抑制剂及激活剂有关。
二、pH
• 淀粉水解产物与碘液反应生成不同的颜色反应 • 淀粉+碘生成蓝色 • 糊精+碘根据水解程度，由紫色到橙色，水解越彻底， 颜色越浅，直到生成无色糊精（碘不显色） 麦芽糖、 葡萄糖遇碘不显色
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三、激活剂和抑制剂
• 尿素酶为巯基酶，重金属离子可与其巯基结合而使尿素 酶的活性丧失。
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4、唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂
（1）取3支试管，按下表编号后进行实验。
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（2）将各管摇匀后，一起放入37℃水浴保温。 （3）每隔1min从第2支试管中取出1滴反应液滴于白瓷板 上，滴加稀碘液1滴，观察其颜色变化。 （3）待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液1-3滴。观察各 管颜色，比较各管中淀粉水解的程度。
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实验原理
Title
Title
温度对酶活性影响原理 酸碱度对酶活性影响原理
.
Title 抑制剂和激活剂影响原理
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一、温度
• 实验原理： • 一、尿素在酸、碱、酶作用下（酸、碱需加热）能水解 成氨和二氧化碳 • 新鲜大豆中含有较高活性的尿素酶，可以水解尿素生成 NH3 • CO(NH2)2 + H2O ------2NH3 + CO2 • 尿素养在尿素酶作用下，在中性或酸性环境下生成碳酸 胺，在NaOH环境下生成Na2CO3和NH3、NH3与纳氏试剂 作用，生成棕黄色碘化双汞胺
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• • • • • • • • • •
试剂： 蒸馏水 1%淀粉液 1%蔗糖液 0.1%尿素液、大豆尿素酶溶液 0.1%CuSO4、0.1%HgCl2、0.1%NaCl 1M NaOH、0.5M H2SO4 纳氏试剂 碘液 各种pH缓冲液：5.0；6.8；8.0
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尿素酶的抑制剂
试管 0.1 %尿 素液 20滴 氯化高 汞溶液 尿素酶 溶液 氯化 高汞 溶液 55度保 温 冷却 纳氏试 剂
【1】
1滴
充分
10滴
10滴
【2】
20滴
混匀
Leabharlann Baidu
10滴
10min 2滴
10滴
按上述表格中的顺序进行操作
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1、唾液淀粉酶应用液的制备
（1）每人取一个干净的饮水杯，装上蒸馏水。 （2）先用蒸馏水漱口，将口腔内的食物残渣清理干净。
（3）口含约20mL蒸馏水，做咀嚼动作1-2min，以分泌较 多的唾液。然后将口腔中的唾液吐入一个干净的小烧杯 中。
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