2液相色谱柱的正确安装和使用说明解析
柱色谱的组装及使用步骤
柱色谱的组装及使用步骤
柱色谱是一种常用的分离与纯化技术，其组装与使用步骤如下：
组装步骤：
1. 准备柱：将柱底塞子放置在柱底上，然后把柱管放入柱底，确保柱底与柱管之间无漏气。
2. 注入填料：将柱管倾斜，从顶端注入填料，用手轻轻敲击柱管帮助填料均匀分布，直到填料填满柱管。
3. 压实填料：用柱底塞子或适当大小的塞子在填料顶部轻轻压实填料，使填料紧密结合，防止颗粒流失。
使用步骤：
1. 平衡柱：将柱管与流动相连接，调整流速，通过柱底逐渐注入流动相，直到填料被完全浸泡。
这一步称为平衡柱，旨在保证填料表面与流动相充分接触并达到稳定状态。
2. 样品加载：将待分离的混合物样品通过进样口注入柱管顶端，允许样品进入填料中。
注意，样品浓度应适中，以避免柱塞或样品堵塞柱管。
3. 洗脱操作：控制流动相的流速和组成，通过改变流动相的性质或者使用梯度洗脱方法，逐渐洗脱样品中的目标化合物，使其在填料中有选择性地分离出来。
4. 收集分离物：根据洗脱出的目标化合物的时间窗口进行分馏收集，以得到纯净的目标化合物。
5. 柱后处理：将柱管内的填料用适当的溶剂进行再洗，并对填料重复压实，以备下次使用。
需要注意的是，每次使用前都需要检查柱管是否漏气和填料是
否存在杂质，以确保柱色谱系统的正常运行。
同时，观察流出液的吸光度或检测结果，判断柱色谱的分离效果，并根据需要调整柱床、填料和流动相的选择。
高效液相色谱柱的装柱方法
⾼效液相⾊谱柱的装柱⽅法
⾼效液相⾊谱柱的装柱⽅法
1. ⾊谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的，如果不能，则需要⼀个转换接头。
这个转换接头的尺⼨很重要，既要能防⽌漏液，⼜要避免过硬或尺⼨不合适⽽导致⾊谱柱接⼝螺纹的损坏；
2. 具体装液相⾊谱柱过程⼀般来说是
①先以合适的匀浆液（多为有机溶剂，成都摩尔科学仪器有限公司的《⾊谱柱维护⽂章》⼀中列的⽐较全，可供参考）将填料充分分散（可以借助搅拌、超声等⽅式）；
②在填料匀浆的过程中，完成准备⼯作，即把⾊谱柱接在匀浆罐的下端（⾊谱柱不接匀浆罐的⼀段要接好筛板和柱头，确保拧紧但不能拧死以免损坏⾊谱柱），打开匀浆罐上端和⽓泵之间的接头以便灌⼊匀浆液；
③匀浆液罐好后，接好匀浆罐上端接头，开始加压；
④选择合适的压⼒，就可以把填料压实了；
⑤稳定在适当的压⼒上压⼀定时间后，卸掉压⼒，卸下⾊谱柱，把接匀浆罐这⼀段的填料抹平，装上筛板和柱头即可使⽤。
3. 装⾊谱柱是个困难的过程，需要耐⼼摸索压⼒、匀浆液体积等参数，才能确保柱床均匀密实，达到最佳柱效和峰形。
如果装的不好，则可能出现柱效不够，或拖尾等问题。
⾼效液相⾊谱柱的装柱⽅法⼀般情况下都是这样操作的，特殊情况请联系⼚家或者代理商。
如果需要购买液相⾊谱柱。
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本公司提供的液相⾊谱柱规格种类齐全。
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(完整版)色谱柱的安装
色谱柱的安装色谱柱的正确安装才能保证发挥其最佳的性能和延长使用寿命。
正确的安装请参考以下步骤。
步骤1. 检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等检查气体过滤器和进样垫，保证辅助气和检测器的用气畅通有效。
如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物，需要将进样口的衬管清洗或更换。
步骤2. 将螺母和密封垫装在色谱柱上，并将色谱柱两端要小心切平步骤3. 将色谱柱连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。
正确合适的插入能最大可能地保证试验结果的重现性。
通常来说，色谱柱的入口应保持在进样口的中下部，当进样针穿过隔垫完全插入进样口后如果针尖与色谱柱入口相差1-2cm，这就是较为理想的状态。
（具体的插入程度和方法参见所使用GC的随机手册）避免用力弯曲挤压毛细管柱，并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与毛细柱接触摩擦，以防柱身断裂受损。
将色谱柱正确插入进样口后，用手把连接螺母拧上，拧紧后（用手拧不动了）用扳手再多拧1/4-1/2圈，保证安装的密封程度。
因为不紧密的安装，不仅会引起装置的泄漏，而且有可能对色谱柱造成永久损坏。
步骤4. 接通载气当色谱柱与进样口接好后，通载气, 调节柱前压以得到合适的载气流速（见下表）。
柱前压设置为Psi15m 25m 30m 50m 100m0.20mm 10-15 20-30 18-30 40-60 80-1200.25mm 8-12 13-22 15-25 28-45 55-900.32mm 5-10 8-15 10-20 16-30 32-600.53mm 1-2 2-3 2-4 4-8 6-14(以上仅为建议的起始设置，具体数值要依据实际的载气流速。
)将色谱柱的出口端插入装有己烷的样品瓶中，正常情况下，我们可以看见瓶中稳定持续的气泡。
如果没有气泡，就要重新检查一下载气装置和流量控制器等是否正确设置，并检查一下整个气路有无泄漏。
等所有问题解决后，将色谱柱出口从瓶中取出，保证柱端口无溶剂残留，再进行下一步的安装。
液相色谱柱的正确安装和使用说明
液相色谱柱的正确安装和使用说明液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。
被过滤广告一、液相色谱柱的安装：1、液相色谱柱的结构：a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。
7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。
3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。
为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。
压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2．5mm长或其他固定尺寸)。
在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。
空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。
但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。
b、柱填料：液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。
正相柱：多以硅胶为柱填料。
根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10µm的范围内。
另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。
也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10µm之间。
2，色谱柱的安装：a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
液相色谱实用技术(二)液相色谱柱的使用及保养
液相色谱实用技术（二）色谱柱的使用及保养色谱柱与仪器的联接❀不同公司的色谱柱接头不同。
处理不当时,会造成：✎色谱峰展宽(死体积)致使柱效下降或渗漏❀解决办法∶✎自制相应的转换接头✎使用“通用”型接头（锥箍及螺母）➠这种锥箍在不锈钢管上是活动的，即stop-depth的长度可调。
因此可以换接不同的色谱系统及色谱柱。
从WatersPhase Separations公司能得到一些PEEK工程塑料的接头,可用在各种类型的色谱柱上。
色谱柱的联接❀各种锥箍和管路接头长度示意图:色谱柱的联接❀Stop_depth长度不合适造成柱前死体积色谱柱的联接❀锥箍锥度不合适造成渗漏:Waters色谱柱的联接❀Waters及Phase Separations锥箍及螺母相同，但锥箍前露出的不锈钢管长度不同✎其长度被称为：“stop-depth”❀Waters除Spherisorb以外的各种品牌的色谱柱用的是“Waters”标准，其stop-depth的长度为0.130英吋❀Spherisorb品牌的色谱柱及Phase Separations 公司的其他品牌色谱柱用的是“Parker-style”标准，其stop-depth为0.090英吋测柱效-良好的色谱实验习惯❀拿到一根新色谱柱时，先测柱效❀保留在新色谱柱上测得的色谱图，并记录色谱测试条件❀定期检测柱效❀定期检测仪器的谱带展宽测柱效的方法❀色谱柱种类繁多,性能各异,测定方法亦各不相同❀Waters的色谱柱均附有Use and Care说明书,可按说明书所述方法测定❀以下是Waters反相C18柱的测定方法:✎流动相:乙腈/水=60:40;流速:1ml/min✎样品:50mg Acenaphthene(二氢苊)溶于100ml乙腈,加入600μl丙酮✎进样量5μl✎检测波长:254nm计算色谱柱的柱效 N理论塔板数计算公式：W σ 方法W tan 16切线法W h 5.54半峰高W 3σ9 3σW 4σ16 4σW 5σ255σ21÷øöçèæ=W V N σ18.70RV =plates8742 20.8018.7016 4N =úûùêëé=σ0.80W =I n j e c tI n j e c t0.68W =16.63RV =plates9569 268.063.16164N =úûùêëé=σ用“切线切线””法计算柱效不好的色谱柱的柱效反而比好色谱柱的要高，因为其拖尾部分测不出来7018.=R V plates8240 1.0318.7025N 25=úûùêëé= 1.03W =height 4.4%height 4.4%plates3334 N 5=úûùêëé=σ2441631625..6316.=R V 1.44W =Good ColumnI n j e c t I n j e c t 用“5σ”法计算柱效色谱柱的正确使用及操作❀流动相的转换✎特别是GPC柱❀流速(压力)的变化幅度❀温度的变化幅度❀专用色谱柱∶样品及溶剂的要求记住∶拿到一根从未用过的色谱柱时一定要先看其使用说明！正确使用色谱柱（一）❀样品方面✎除去微粒及杂质✎了解样品在流动相中的溶解度➠如样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出✎了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用正确使用色谱柱（二）❀流动相方面✎除去微粒✎纯度的要求➠超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低➠缓冲液的pH值，在填料的允许范围内➠缓冲液（盐）的浓度➠溶剂：色谱纯，并与填料相匹配➠溶剂中的杂质含量✎流动相对样品的溶解度➠有机溶剂或水的比例色谱柱的在线保护装置❀给色谱柱提供物理的保护✎除去样品及流动相中的颗粒❀给色谱柱提供化学的保护✎防止分析柱被化学污染❀装置✎在线过滤器✎自装填料保护柱✎预装保护柱在线过滤器❀In-Line Filter，部件号 WAT084560✎防止颗粒在色谱柱头累积✎优点：基本不影响柱效✎在需要高柱效的分析时中常用（如：氨基酸分析）❀可更换的消耗品✎更换滤芯，部件号 WAT005139 (5/pkgs)✎更换垫圈，部件号 WAT084567 (10/pkgs)保护柱❀可避免化学污染。
液相色谱柱使用说明
液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。
本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明，包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。
1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前，需要考虑以下几个因素：-样品的性质和分离要求：不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。
根据样品的极性、大小和稳定性等因素，选择合适的柱子（例如反相柱、正相柱、离子交换柱等）。
-流动相的选择：根据样品溶解度和分离要求，选择合适的流动相（溶剂、缓冲液等）。
2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净：使用纯溶剂（如甲醇、乙醇等）反复冲洗柱床，直至流出的溶液无色透明。
-将液相色谱柱连接至色谱仪：在连接针嘴前，先用一根塑料贴纸封住柱子的两端，然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。
-将柱子连接到色谱仪：将柱子放入色谱仪的支架上，并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。
3.样品的准备和加载-样品的准备：将样品溶解在适当的溶剂中，使其达到合适的浓度，并在必要时进行过滤或稀释。
-样品的加载：使用自动进样器或手动进样器，将样品加载到液相色谱柱中。
避免过量的样品装载和过高的进样速度。
确保样品溶液完全进入柱子，并记录样品加载的详细信息。
4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸：始终保持柱子中的液相色谱柱湿润，避免出现干涸和损坏的情况。
在使用完毕后，必要时用合适的溶剂进行洗脱，然后用空气或氮气进行保护。
-遵循柱子的使用范围：柱子通常有推荐的温度和压力范围。
超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。
-避免高浓度的盐类溶液：高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响，导致柱子的损坏或压力升高。
5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗：根据使用频率，定期清洗液相色谱柱。
使用纯溶剂进行冲洗，以去除残留的样品和杂质。
-保持柱子湿润：柱子在存储期间应保持湿润。
用合适的溶剂进行洗脱，并用盖子密封柱子的两端，以避免柱床干燥。
高效液相色谱柱的正确使用 液相色谱操作规程
高效液相色谱柱的正确使用液相色谱操作规程色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。
高效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。
1.加装保护柱保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。
尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。
保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。
保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(5～1次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
2.过滤流动相和样品流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。
当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。
所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。
要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。
装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
液相色谱仪色谱柱更换说明书
液相色谱仪色谱柱更换说明书一、引言液相色谱仪作为一种重要的分析仪器，广泛应用于生物医药、食品安全、环境监测等领域。
而作为液相色谱仪中关键的组成部分，色谱柱的选择和更换对于保证仪器正常运行和分析结果准确性起着至关重要的作用。
本说明书旨在向用户提供液相色谱仪色谱柱更换的操作指南，以确保用户能够正确、高效地更换色谱柱。
二、准备工作在更换色谱柱之前，需要完成以下准备工作：1. 准备好新的色谱柱，并确保其与当前使用的色谱柱相匹配。
注意检查色谱柱型号、尺寸和填充物等信息。
2. 检查色谱仪的运行状态，确保仪器处于正常工作状态，无故障和异常情况。
3. 关闭色谱仪的主电源开关，确保仪器处于断电状态，以保证安全操作。
三、更换色谱柱步骤按照以下步骤进行色谱柱的更换：1. 打开液相色谱仪的前盖，找到色谱柱的位置。
根据仪器类型，可能需要解除色谱柱紧固夹或螺纹连接器。
2. 使用合适的工具（如扳手）松开色谱柱与色谱仪连接的接头，并将旧色谱柱从仪器中取出。
3. 将新的色谱柱轻轻地插入色谱仪中，并确保接头连接紧密。
注意不要强行插入或过度旋转，避免损坏色谱柱和仪器。
4. 使用工具紧固色谱柱与色谱仪连接的接头。
在紧固过程中，要注意适度的力度，以免造成接头破坏。
5. 关闭液相色谱仪的前盖，确保色谱柱安装牢固，不松动。
四、测试和验证1. 打开液相色谱仪的电源开关，启动仪器并进行系统的自检。
2. 针对待分析的样品，运行一次标准测定或校准物质的测试，以验证色谱柱更换后仪器的正常工作和测试结果的准确性。
3. 检查色谱图、峰形和尖峰对称性等参数，确保仪器的分离效果和分析性能与更换色谱柱前一致。
4. 如发现异常情况或测试结果不符合要求，及时关闭仪器并与相关技术人员进行联系，对可能的故障或问题进行解决。
五、注意事项在进行液相色谱仪色谱柱更换时，应注意以下事项：1. 操作前务必断电，并确保色谱柱更换过程中处于安全状态。
2. 根据实际情况选择合适的色谱柱类型和规格，以满足分析要求。
2液相色谱柱的正确安装和使用说明
2，色谱柱的安装：
• a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、 尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 • b、拧下柱两端接头的密封堵头放回 包装盒供备用。 • c、按柱管上标示的流动相流向，将 色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出 口相连接(如条件允许，建议在柱前使用 保护柱)；柱的出口与检测器连接。
• 连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的 不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封 用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。 连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底， 然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止， 再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈，切记不要用 力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现 象，请用扳手继续顺时针拧1/4圈，直至不漏液 为止。
二、液相色谱柱的使用：
• 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测 试，并将结果保存起来，作为今后评价 柱性能变化的参考。但要注意：柱性能 可能由于所使用的样品、流动相、柱温 等条件的差异而有所不同；另外，在做 柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中 的条件进行(出厂测试所使用的条件是最 佳条件)，只有这样，测得的结果才有可 比性。
1、样品的前处理：
• a、最好使用流动相溶解样品。 • b、使用予处理柱除去样品中的强极 性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 • 、使用0.45µ m的过滤膜过滤除去微 粒杂质。Fra bibliotek、流动相的配制：
• 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相 之间质量交换而达到分离的目的，因此 要求流动相具备以下的特点： • a、流动相对样品具有一定的溶解能 力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长 时间保留在柱中)。
• b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学 反应(特殊情况除外)。 • c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用 较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降 低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高 温度的方法降低流动相的黏度)。 • d、流动相的物化性质要与使用的检测器 相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外 吸收较低的溶剂配制。
色谱柱的使用说明
色谱柱的使用说明色谱柱是一种在色谱分析中广泛使用的关键设备，它能够通过分离混合物中的组分以及测定它们的相对含量。
不同的色谱柱具有不同的分离机理和特点，因此每种色谱柱在使用前都需要仔细阅读其使用说明书，以了解其正确的使用方法和注意事项。
以下是色谱柱使用说明的一般内容：1.色谱柱的储存：色谱柱在储存期间需要避光、避湿、避高温，以免对其质量产生不良影响。
柱子应垂直存放，避免受到侧面压力。
定期检查柱子上是否有裂纹、损坏或其他异常情况。
2.安装色谱柱：在安装色谱柱前，需要进行适当的准备工作，如用洗涤剂或溶剂清洗色谱柱，以去除表面的杂质。
然后在柱子的接口处使用密封垫圈，确保柱子和接口之间的密封性。
安装时，需要根据仪器的要求和色谱柱的规格调整柱床高度和流速。
安装完成后，检查柱床是否均匀填充。
3.色谱条件的选择：正确选择色谱条件对于得到准确的分析结果至关重要。
色谱柱的选择应根据样品的特性、分离需求和分析目标来确定。
例如，对于非极性化合物的分离，应使用非极性柱；对于极性化合物的分离，则需要使用极性柱。
此外，还需合理选择进样方式、流速、温度等色谱条件，并根据需要进行优化。
4.样品的制备和进样：对于色谱分析之前，样品可能需要经过一系列的预处理步骤，如萃取、浓缩、溶解等。
进样前，需要对样品进行适当的稀释，以避免柱子堵塞或过载。
确保样品进样前是清洁无杂质的，以免污染柱子或影响分析结果。
还需根据样品的特性，选择适当的进样方式，如气相色谱中的气态进样、液相色谱中的静态进样或动态进样等。
5.色谱的运行和操作：在进行色谱分析时，需要根据选择的色谱条件设置好仪器的运行参数，如载气流速、柱温、检测器灵敏度等。
同时，还需注意检测器的基线稳定性、测量范围、线性范围等，以确保准确的定量分析。
在运行过程中，还需注意实验室的环境条件，如温度、湿度等，并及时记录实验过程和结果。
6.色谱柱的维护和保养：为了延长色谱柱的使用寿命和维持准确的分析结果，需要进行定期的维护和保养工作。
色谱柱 操作规程
色谱柱操作规程
《色谱柱操作规程》
一、使用前准备
1.1 检查色谱柱是否有损坏或污染
1.2 准备好色谱柱需要用到的溶剂和试剂
1.3 准备好色谱仪器和相关设备
二、装柱操作
2.1 检查柱子的填料是否均匀，如有不均匀情况需重新填料2.2 使用正确的柱子连接件连接色谱柱和色谱仪
2.3 用适当的方法装载样品进入色谱柱
2.4 在装载样品之前，进行柱子的平衡操作，以确保实验的准确性
三、流动相操作
3.1 准备好流动相，确保流动相的纯度和稳定性
3.2 用注射器将流动相缓慢地注入色谱柱中，直到柱子完全充满
3.3 确保流动相的压力和流速在正常范围内
四、运行及维护
4.1 启动色谱仪器，设置好运行参数
4.2 监控运行过程中的色谱柱压力和流速
4.3 如果发现异常情况，立即停止运行并检查色谱柱及相关设备
4.4 实验结束后，用适当的方法对色谱柱进行保养和清洗，以
确保下次使用时的准确性和稳定性
五、安全注意事项
5.1 操作过程中要严格遵守化学品的安全操作规程
5.2 避免色谱柱受到外部物质的污染和损坏
5.3 注意色谱柱及相关设备的维护和保养，确保使用安全和稳定性
六、记录和报告
6.1 在操作过程中要及时记录实验数据和观测结果
6.2 对实验结果进行分析和总结，撰写实验报告
6.3 如有必要，将实验结果提交并交流给相关部门或同行
以上即是《色谱柱操作规程》，希望能够对使用色谱柱的实验人员有所帮助。
如何正确使用液相色谱柱和气相色谱柱？
如何正确使用液相色谱柱和气相色谱柱？1 色谱柱的分类1.1 色谱柱主要分液相色谱柱和气相色谱柱。
1.2 液相色谱柱又分正相色谱柱和反相色谱柱1.3 气相色谱柱又分填充柱和毛细管柱，现填充柱基本上不用，一般都选用毛细管柱。
2 色谱柱使用2.1 液相色谱柱的使用2.1.1 使用前，一定要注意色谱柱的储存液与待分析样品的流动相之间是否互溶，如不互溶的话，应选用合适的溶剂先过渡，然后再换上流动相。
2.1.2 在反相色谱中，如果流动相中缓冲盐的浓度较高则应先用低浓度的甲醇或乙腈-水溶液（10-20%）冲洗20min左右，否则缓冲盐在高浓度的有机相中很容易析出，从而使色谱柱堵塞，无法恢复。
2.1.3 在正相色谱中，流动相中不应使用甲醇、乙腈，水等强极性试液冲洗，否则会影响色谱柱内填充物性质，造成色谱柱无法恢复；使用前可选用异丙醇清洗整个管路系统，用正己烷-异丙醇（90:10）先低流速起步，待柱压稳定在一定水平后再增加流速，冲洗20柱体积。
2.1.4 装色谱柱时应使流动相流路的方向与色谱柱标签上箭头所示方向一致。
除另有规定外，不宜反向使用，否则会导致色谱柱柱效明显降低，无法恢复。
2.1.5 色谱柱与进样器及其出口端与检测器之间应为无死体积连接，以免试样扩散2.1.6 新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。
2.1.7 进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，一般平衡3小时以上。
2.1.8 各色谱柱的使用应予登记，内容应包括日期、检测样品名称、批号及柱中的保存溶剂等（见“液相色谱仪维护保养规程”附件2）。
2.2 气相色谱柱的使用2.2.1 按仪器说明书所提供的正确插入距离将色谱柱安装在仪器上，同时检查是否漏气。
2.2.2 新柱子使用前应老化，此时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。
3 色谱柱的保存及维护3.1 液相色谱柱3.1.1 反相色谱柱：如使用缓冲液或含盐溶液作为流动相，每天实验结束后，应用10倍左右柱体积（对150mm柱长，约15ml）的低浓度的甲醇/乙腈-水溶液（10%-20%）冲洗，使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出，再用较高浓度的甲醇/乙腈-水溶液（80-100%）冲洗，使色谱柱中的强吸附物质冲洗出来。
色谱柱正确安装、启用与维护
色谱柱正确安装、启用与维护色谱柱是液相色谱仪的最核心部件，价格相对昂贵，请牢记它是高档仪器中的高档部件，给它以足够的尊重和关怀。
如避免强烈的碰撞和震动，不要让柱床变干，避免在严寒环境受冻等。
在内容正式开始之前，我们先了解一下液相色谱柱的基本结构，色谱柱由接头、螺帽、柱管、填料、垫圈及过滤片等组成。
色谱柱安装、启用和维护1、柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品，不是仪器原配的情况很多。
如果接头和柱头深度不匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。
接头比柱头深度长，不易拧紧而漏液；接头比柱头深度短，柱头内留有空隙而产生死体积，使谱带展宽和峰拖尾。
2、溶剂的匹配转换色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂，如果和流动相不匹配，使用前需进行转换。
特别是流动相含缓冲盐时，如保存溶剂是纯有机相或有机相比例高，直接将新柱接入使用，会导致缓冲盐在柱内结晶析出，最严重会将新柱永久不可逆地损坏。
正相柱保存溶剂一般为正己烷，如果要转换成HILIC柱模式使用，由于正己烷和甲醇乙腈的互溶性不好，转换中间需用二氯甲烷或乙酸乙酯过渡。
3、正确使用缓冲盐缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。
缓冲盐析出后，去除非常困难，因此，正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。
正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。
具体方法如下：1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1.0mL/min流速冲洗10个柱体积；使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2mL/min流速冲洗色谱柱过夜。
2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0mL/min流速冲洗10个柱体积。
柱色谱的使用方法
柱色谱的使用方法如下：
装柱。
干装法是在柱内装入2/3溶剂，在管口上放一漏斗，打开活塞，让溶剂慢慢地滴入锥形瓶中，接着把干吸附剂经漏斗以细流状倾泻到管柱内，同时用套在玻璃棒（或铅笔等）上的橡皮塞轻轻敲击管柱，使吸附剂均匀地向下沉降到底部。
填充完毕后，用滴管吸取少量溶剂把粘附在管壁上的吸附剂颗粒冲入柱内，继续敲击管子直到柱体不再下沉为止。
湿装法与干装法类似，所不同的是，装柱前吸附剂需要预先用溶剂调成淤浆状。
加样。
将柱内液面降到与柱面相齐时，关闭柱子。
用滴管小心沿色谱柱管壁均匀地加到柱顶上。
加完后，用少量溶剂把容器和滴管冲洗净并全部加到柱内，再用溶剂把粘附在管壁上的样品溶液淋洗下去。
液相色谱柱安装与使用说明
液相色谱柱安装与使用说明1.准备工作：事先准备好所需的色谱柱和色谱条件，选择适当的流动相和检测方法。
2.检查色谱柱：检查色谱柱的包装是否完好，确认柱头和底部不受损。
查看柱子的规格型号和有效期，确保符合实验要求。
3.柱连接：将色谱柱与液相色谱仪的柱接口相连接。
柱接口通常有螺纹接口和快速连接接口，按照仪器的要求选择合适的接口。
4.柱连接密封：使用适当的柱接口垫片来保证柱与柱接口之间的严密密封，以防止漏液和杂质污染。
5.流动相装填：根据实验需求选择合适的流动相，并根据仪器的要求装填到流动相贮箱中。
6. 流速设置：根据实验要求设置合适的流速，一般应在0.5-2.0mL/min的范围内。
7.初始温度设置：根据样品的性质和分析方法，选择合适的柱温度，并进行预热。
柱温度对于保证分离效果和保护液相色谱柱起到关键作用。
1.不要轻易触摸色谱柱的柱头和底部，以免造成污染或损坏。
2.在使用液相色谱柱之前，应用流动相洗涤柱子，以去除悬浮在柱子内的杂质和残留物。
3.色谱柱在长时间使用后会产生杂质沉积，应定期进行反向冲洗和再生。
4.柱温度的设置应根据样品的性质和方法进行优化，一般来说，越高的温度有助于加快分析速度，但也可能导致分离效果下降。
5.不同的流动相和检测方法可能对色谱柱造成不同程度的腐蚀和损害，需要根据实验要求选择合适的条件。
6.注意保持流动相的纯净度，避免使用未经过滤的溶剂。
7.使用完毕后，及时将色谱柱和流动相贮箱进行清洗和保存，以免柱子受到污染和损坏。
总结：液相色谱柱的正确安装和使用对于保证分析结果的准确性和重现性非常重要。
在安装液相色谱柱之前，必须仔细检查柱子的包装和品质，保证柱子的完好和有效期。
在使用过程中，要注意保持良好的实验操作和仪器维护，定期进行柱子的清洗和再生。
通过正确的安装和使用，可以有效延长柱子的使用寿命，保持分析结果的稳定性和准确性。
安装色谱柱时你应当知道什么 色谱柱如何操作
安装色谱柱时你应当知道什么色谱柱如何操作液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工获得正确牢靠的试验数据的必经之路。
色谱柱的安装：1.将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱，并完全排出流路内的空气。
装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下，使用双方都能相溶的液体做过渡。
将盐溶液置换成有机溶剂的时候，需要通过纯水、丙酮的次序来进行置换。
相反，从有机溶剂转换成盐溶液的情况下，需要通过丙酮、纯水的次序置换。
2.色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下，色谱柱的出入口可能会有空气残留。
这种情况下，必需先把空气完全排出后才连接到装置中。
避开快速加热，加热温度不要超过色谱柱的Z高负荷温度。
把柱子入口侧的螺栓打开，然后加温（一般加温到手心感到暖和的程度就充分了），等液体满出来以后接到装置上。
然后，打开出口处的螺栓，用泵送液，等确认出口处有液体流出后，连接到装置中。
这样操作，就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。
3.在泵运作的时候连接色谱柱。
确保能让流动相依照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。
4.色谱柱加温使用的时候，先用0.2～0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。
达到所定温度后，再渐渐的加添流量至测定流量。
色谱柱安装时需要注意的事项色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。
多为金属或玻璃制作。
有直管形、盘管形、U形管等形状。
液相色谱通常均接受填充柱。
色谱柱的分别效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。
下面介绍色谱柱安装时需要注意的事项。
色谱柱的安装：1）将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱，并完全排出流路内的空气。
装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下，使用双方都能相溶的液体做过渡。
色谱柱的安装,设置,老化和维护
色谱柱的安装,设置,老化和维护液相色谱柱的使用方法：1、色谱柱的使用说明：（1）、色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）、流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）、样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）、反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）、长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程
高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程一、NH2柱的使用原理NH2柱是一种液相色谱柱，使用时会采用氨基化的硅胶作为固定相。
由于硅胶表面的官能团是氨基基团，能够与样品中的极性分子发生相互作用，进而对分离进行调节。
二、NH2柱的使用方法1.连接装置安装NH2柱时应连接检测设备，如进样器，检测器等。
连接时，应先连接进样器，再连接检测器。
2.洗涤在第一次使用NH2柱时，需进行洗涤。
使用洗涤液流通2-3个小时后，清空出柱中的洗涤液，然后用纯水进行洗涤，以去除任何残留物。
3.平衡在柱洗干净后，应用该检测方法的溶液和需要分析的溶液对NH2柱进行平衡。
溶液中需要下降等温升级，升温速度不要过快，以避免硅胶固定相表面积损失过大。
4.样品处理样品应先进行过滤或系列化。
如果需要，还可进行脱盐处理。
接下来，可以直接使用这个样品进行连续检测，得到相对准确的定量分析结果。
5.清洗当分析结束后，应立即用纯水进行冲洗，避免任何污渍残留在NH2柱上。
三、NH2柱的保养方法1.不会使用的人员不得安装或拆卸NH2柱；2.应使用安全稳固的操作平台；3.注意检查NH2柱连接的阀门、管道及垫片是否严密；4.避免机械冲击，特别是避免NH2柱连接处遭到打击；5.存放NH2柱时应避免阳光直射，不能暴露在高温、潮湿、有酸性气体或腐蚀性气体的环境中；6.避免NH2柱柱筒陷入液相内，以避免液相侵犯NH2柱内部，导致NH2柱出现问题；7.保持NH2柱表面清洁，避免表面污垢的附着。
四、NH2柱的故障与解决方法NH2柱在使用过程中，可能会出现以下故障情况：1. 柱运行异常问题原因可能是样品处理不当：样品会形成附着在NH2柱表面上的沉淀，导致柱进行正常分离的障碍或减缓。
此时需要对样品进行再次过滤或降温等处理。
2. 样品无法通过柱可能是进样器或检测器出现故障。
需要关闭进样器或检测器，检查柱筒是否存在压力问题，如果发现气泡等问题，需要及时清洗气泡。
3. 封补过强的流量或特別严重的样品陈成很容易出现封补。
液相色谱柱维护与使用指南
液相色谱柱维护与使用指南色谱柱是整个液相分离系统的核心，而色谱柱的安装，活化/平衡，使用，维护/清洗以及保存是发挥色谱柱性能的重要过程。
笔者收集了Waters,Phenomenex,纳谱分析（国产）以及安捷伦的液相色谱柱使用指南。
笔者综合几家的使用指南，总结如下：1 .安装现代色谱柱上一般都会标明流向，我们应该按照流向进行正确安装,后期也许可以进行反冲,但前期还是尽量不要反冲。
当安装新色谱柱时，必须确保连接管路与新色谱柱匹配。
如果色谱柱末端与系统接头匹配不佳，新色谱柱的性能会受到不良影响（诸如：柱效下降、峰形拖尾等）或者发生渗漏。
同时色谱柱的接头应照最大压力进行选择，如下图为安捷伦推荐的接头。
最大系统压力 推荐的接头部件号最高400barInfmity1abQuickTurn 接头（手紧式）接头：5067-5966最高800barInfmity1abQuickTurn 接头（带有安装工具）接头：5067-5966安装工具：5043-0915 最高1300barInfinity1abQuickConnect 快速连接接头接头：5067-5965如需了解更多信息和部件号，请参见《Agi1entInfinity1ab 接头产品样本》（5991-5164CHCN ）。
2 .活化/平衡通常，色谱柱出厂时保存于100%乙精中。
将色谱柱更换至其它流动相体系之前，务必要确保流动相的兼容性。
为避免流动相缓冲液在色谱柱或色谱系统中析出，使用五倍柱体积的水/有机溶剂混合溶液冲洗色谱柱，其中有机溶剂含量与所需缓冲盐流动相的有机溶剂含量相同或更低（例如，使用60%的甲醇水溶液冲洗色谱柱和系统，然后再更换为60%甲醇/40%缓冲液的流动相）。
对于反相分离来说，完成平衡至少用10倍柱体积的流动相（参见下表中的色谱柱体积）。
当反压达到恒定且色谱柱基线稳定时，可认为该柱达到完全平衡。
对于具有较短的化学链（例如C8、苯基、CN ）固定相的色谱柱，应小心确保在使用色谱柱之前对其进行了彻底的平衡。
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2，色谱柱的安装：
• a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、 尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 • b、拧下柱两端接头的密封堵头放回 包装盒供备用。 • c、按柱管上标示的流动相流向，将 色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出 口相连接(如条件允许，建议在柱前使用 保护柱)；柱的出口与检测器连接。
• 连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的 不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封 用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。 连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底， 然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止， 再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈，切记不要用 力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现 象，请用扳手继续顺时针拧1/4圈，直至不漏液 为止。
二、液相色谱柱的使用：
• 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测 试，并将结果保存起来，作为今后评价 柱性能变化的参考。但要注意：柱性能 可能由于所使用的样品、流动相、柱温 等条件的差异而有所不同；另外，在做 柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中 的条件进行(出厂测试所使用的条件是最 佳条件)，只有这样，测得的结果才有可 比性。
• b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学 反应(特殊情况除外)。 • c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用 较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降 低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高 温度的方法降低流动相的黏度)。 • d、流动相的物化性质要与使用的检测器 相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外 吸收较低的溶剂配制。
• 头的密封。为了尽量减少柱外死体积， 在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通 过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后 再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压 变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环 后露出的管长度应严格控制在2．5mm长 或其他固定尺寸)。
• 在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢 滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲 出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材 质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物 的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意， 柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避 免腐蚀。 • b、柱填料：
1、样品的前处理：
• a、最好使用流动相溶解样品。 • b、使用予处理柱除去样品中的强极 性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 • 、使用0.45µ m的过滤膜过滤除去微 粒杂质。
2、流动相的配制：
• 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相 之间质量交换而达到分离的目的，因此 要求流动相具备以下的特点： • a、流动相对样品具有一定的溶解能 力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长 时间保留在柱中)。
பைடு நூலகம்
b、柱填料：
• 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相 之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。 • 正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可 分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3— 10µ m的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键 合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 •
• 反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表 面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填 料。也有无定型和球型之分。 • 常用的其他的反相填料还有键合C8、 C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3— 10µ m之间。
• e、流动相沸点不要太低，否则容易产生 气泡，导致实验无法进行。 • f、在流动相配制好后，一定要进行 脱气。除去溶解在流动相中的微量气体 既有利于检测，还可以防止流动相中的 微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择：
• 因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不 同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的 色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。 对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择 1ml/min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml/min 为佳。 • 当选用最佳流速时，分析时间可能延长。 可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分 析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙 腈的含量)。
液相色谱柱的正确安装和使用 说明
• 液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液 相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱 柱的正确安装和使用，是液相色谱工作 的关键；也是液相色谱工作者获得正确 可靠的实验数据的必经之路。
一、液相色谱柱的安装：
• 1、液相色谱柱的结构： • a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 • 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端 螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端 是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英 寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间 放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16 英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压 环用于柱接