培养基性能测试指南
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培养基性能测试指南
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比浊管的浓度相同(找张白纸,打上平行直线,然后观察比较两管的浊度)。
4.2.2.3生长率测试用工作菌株
目标菌的定量、半定量和生长率试验常用每平板(或每试管)的接种水平为10CFU~100CFU。
4.2.2.4选择性测试用工作菌株
培养基选择性试验是将浓度为104CFU/mL~106CFU/mL的非目标菌工作菌株悬浮液接种到平板或试管上。
4.2.2.5培养条件
按相关标准或要求规定的条件对接种后的培养基进行培养。
固体培养基测试方法
4.3.1定量测试方法(Miles-Misra法)
4.3.1.1按4.2.2 的方法制备工作菌株菌液。
4.3.1.2测试平板和参照平板划分为4个区域并标记(也可不划分四个区域)。
4.3.1.3从最高稀释度开始,分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域
4.3.1.4将稀释液用L-玻璃棒涂满整个1/4区域,按标准规定的培养条件培养平板。
4.3.1.5对易计数的区域计数,按公式计算结果P R和S F
生长率P R的计算:P R = NS/NO
NS:从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。
N0:从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数(该菌落总数应≥100cfu )。
选择因子S F的计算:S F = DO - DS
DO:能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度。
DS:能在测试培养基上显示生长的最高稀释度。
非选择性培养培养基上目标菌的生长率最低应为; 选择性培养培养基上目标菌的生长率最低应为;非目标菌在选择性培养培养基上的S F至少为2。
4.3.2半定量测试方法(改进的平板划线法)
该方法适用于固体和液体培养基的性能测试,但仅能作为固体培养基的补充测试。
4.3.2.1按4.2.2 的方法制备工作菌株菌液。
4.3.2.2用3mm接种环按图1划线平板,A、B、C部分用接种环按0.5cm的间隔各划4条平行线,最后在D区内划一条连续的曲线。划线时可将模板放在平板下面。