临床免疫学检查ppt

（二）血清补体检测
补体（complement）是指血清中具有 酶活性的一组不耐热球蛋白。
A. C1～C9(C1q、r、s)； B. B因子、D因子、P因子、H因子； C. C1抑制物、C4结合蛋白、促衰变因子
等。
溶血程度与补体含量的关系:
补体相关的实验室检测：
1、总补体溶血活性测定（CH50） 反映主要补体C1～C9成分的综合水平。 试管法：正常参考值范围 50 ～100U/ml 脂质体免疫法：其范围23 ～46U/ml 测得值高：急性炎症、损伤、恶性肿瘤 测得值低：补体消耗相关疾病 补体合成降低（肝病） 先天性缺陷
粘膜局部 免疫

B细 I型
胞成 超敏
熟标 志
反应
健康人血清主要Ig含量(content)
（g/L）
年 龄 IgG
IgM
IgA
新生儿 6.6～17.5 0.01～0.06 0.06～0.21
6个月 2.6～6.9 0.08～0.57 0.26～1.00
1 岁 3.0～9.5 0.14～0.91 0.37～1.50
MM的主要免疫学特征：
①血清中出现大量的M蛋白：IgG＞35g/L, IgA＞20g/L, IgM＞15g/L, IgD＞
2.0g/L，IgE ＞2.0g/L；或尿中有本周蛋白（＞1.0g/24h 尿）； ②血清中正常Ig 水平明显降低； ③骨髓中有无限扩增的异常浆细胞 （≥15%）为主要病理特征，组织证实有浆 细胞瘤； ④有溶骨性损害。
经系统损害较多见
MM的发病机制
发病机制不明，与下列因素有关。 （1）是遗传与环境因素综合作用的结果。主要发生 在1号、11号、14号染色体，使浆细胞可发生永生化 （2）造血干细胞的异常 。形成浆细胞瘤。 （3）细胞因子的异常 。MM患者可有IL-6异常增高， 体外内实验证明IL-6可促使MM细胞增殖、生长和存 活，使MM细胞增多。IL-6增高直接效应是抑制IL-4的 产生，从而抑制了正常的体液免疫功能。 （4）与粘附分子、IL-6等信号传递受体和B细胞1～2 等抑制凋亡的受体高表达有关。
Ab
透射免疫比浊：
（turbidimetry）
在直射角度上测定光 的透射强度，以吸收 光单位（A）表示， A值与复合物量呈正 比。
散射免疫比浊（终点散射/速率散射）： （nephelometry）
在光路的5°-95°角的方向上测量散射光强度 和被测溶液中微粒浓度关系的一种方法。
散射光：一定波长的光线沿水平轴通过复合物 的混合液时导致光散射，散射光的强度与复合物 量呈正比。
临床Байду номын сангаас疫学检查
上海交通大学医学院 季育华 教授
范畴(category)：
1、感染性疾病(infection disease) 2、自身免疫性疾病(autoimmune ～) 3、超敏反应性疾病
(hypersensitivity ～ ) 4、免疫缺陷/增殖性疾病
(immunoabnormal ～ deficiency/proliferation)
本周蛋白（bence-jones protein）: 1847年由Bence-Jones在病人的尿液 中检出而命名。已知M蛋白不具有免疫活 性，无正常免疫球蛋白的功能，其轻链分 子小可通过肾小球滤过从尿排除。
（本周蛋白是从尿中检出的M蛋白轻链）
冷球蛋白的检测(定性)：
冷球蛋白的定量分析 鉴定沉淀中蛋白质类型，可将沉淀用冷缓冲 液洗涤后，再溶于巴比妥缓冲液中，固定电 泳或免疫电泳鉴定。 冷球蛋白检测的注意事项 采血过程要保温，用品用预温，4℃下放置时 间要一周，正常人血清也可含有冷球蛋白， 多数在80μg/L 以下。
测定抗原抗体反应达平衡时～ ，终点（end）
测定单位时间内抗原抗体形成最大量时～，速
率（rate）
临床意义（significance）：
1.血清多克隆Ig水平增高 患者血清中各型Ig均升高，常见于各种
感染特别是慢性(chronic)细菌感染，如肺结 核、慢性支气管炎、慢性肝病自身免疫性 (autoimmune)疾病。SLE患者以IgG、IgA升高 较多见，类风湿性关节炎——IgM增高为主。
但免疫球蛋白不都是抗体。
临床检测的血清免疫球蛋白
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgA1 IgA2 IgD IgE
重链
1 2 3 4 1 2
主要存在形式
单体 单体 单体 单体 五聚体 单体、双体 单体 单体
经典途径活化补体 ++ + +++ +++
immunoglobulin disease） 6、恶性淋巴瘤(malignant ～) 7、良性M蛋白血症(benign ～)
例:
多发性骨髓瘤 （multiple myeloma,MM）
是浆细胞异常增殖的恶性肿瘤，也称浆细 胞瘤（plasmocytoma）。是IPD中最 常见的一种类型。1873年由Butzky首先 并命名。
二、细胞免疫(cellular～)检测
参与机体细胞免疫反应的细胞 T淋巴细胞 B淋巴细胞 NK细胞（自然杀伤） 中性粒细胞
针对细胞的数量(amount)、活性（功 能 function）、表面标志物(membrane molecules )表达(express)程度～。
T细胞表面标志物(主要):
抗体（antibodies, Ab）是B细胞识别 抗原后增殖分化为浆细胞所产生的，能 与相应抗原特异性(specific)结合 (recognize antigen and binding)并 发挥免疫功能(antigen and antibody reaction)的球蛋白。
所有抗体都是免疫球蛋白，
新生儿、婴幼儿由于体液免疫功能尚不成 熟，免疫球蛋白的含量较成人低，需按年 龄组进行分析与判断。
关于血清IgE和IgD的测定： 血清总IgE为0.13～0.92mg/L; 血清总IgD为0.6～2.0mg/L; IgE值升高多见于超敏反应性疾病,骨髓瘤 IgD值升高多见于骨髓瘤等。
异常免疫球蛋白检测：
穿过胎盘
+++ + ++
结合吞噬细胞
+++ +++ + + +
结合肥大细胞和嗜
碱粒细胞
+++
与 SPA 结合
+ ++
NK 细 胞 介 导 的 ++ ADCC

++

免疫作用
抗感染、自身抗体

早期防 御作用

检测手段(method)：
(In fluid phase)
(Precipitation Reaction)
（ring、immune-turbidity、et al）
(In agar) （diffusion）
（electrophoresis）
(In fluid phase ) 絮状沉淀试验：
环 状 沉 Ag 淀 试 验
(human serum complement ～) （三）体液免疫相关其他检测
(others ～)
（一）血清免疫球蛋白检测
免疫球蛋白（Immunoglobulins, Ig） 是具有抗体活性或化学结构与抗体相似 的球蛋白。
可分为分泌型和膜型两种，前者主要 存在于血清等体液中，如Ab；后者称膜 型免疫球蛋白（membrane Ig，mIg）， 是B细胞膜上的抗原受体(receptor)。
MM的主要临床特征：
①进行性的骨质破坏，如骨质疏松和溶骨性病变， 常有骨痛、易骨折，为MM最典型特征； ②大量的M蛋白导致血液粘度增高,呈高粘血症或沉积 于肾小管中，肾小管上皮细胞淀粉样变性，发生肾病 综合征。损害中枢神经系统，可出现神经功能障碍； ③骨髓损伤可引起贫血、粒细胞和血小板减少； ④浆细胞浸润其他组织，如脊髓和神经根受压时引起 运动功能障碍等； ⑤男性多发，平均发病年龄46岁左右； ⑥恶性程度高，预后不良； ⑦易感染。
不同类型的多发性骨髓瘤:
类 型 发生率（%） 本周蛋白尿阳性（%） 临 床 特 点
IgG
50～60
50～70
典型症状
IgA
20～25
50～70 高粘综合征较多见
IgD
1～2
90 骨髓外病变、溶骨病 变多见，44%淀粉样变
IgE
0.01
少见
IgM
＜1
90 高粘综合征最常见
非分泌型 1～5
无
溶骨病变较少，神
2 岁 4.7～12.3 0.21～1.45 0.41～1.75
8 岁 6.3～15.0 0.46～2.51 0.47～2.20
12岁 7.0～15.5 0.58～2.91 0.49～2.40
18岁 7.3～15.5 0.70～3.21 0.51～2.61
成人 7.0～16.0 0.70～3.00 0.40～2.80
M蛋白/（Monoclonal immunoglobulins ） 由一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的 具有相同结构和电场移动率的Ig分子或分 子片段，一般不具有抗体活性,又称副蛋白 （paraprotein）。
冷球蛋白（cryoglobulin） 指血清中一种蛋白，4℃不溶解，30℃易于 凝聚，37℃便溶解。存在于多种疾病，参 与炎症或免疫复合物引起的疾病。
多克隆抗体(polyclonal antibody): 由不同的B细胞克隆产生的抗体.
单克隆抗体(monoclonal antibody): 由一个细胞克隆所产生的只识别单一 抗原决定簇的纯的抗体.