甲胎蛋白异质体
甲胎蛋白异质体在鉴别肝细胞癌中的应用
［ 叶应妩 ， ５ ］ 王毓 三 ，申子瑜 ． 国临床检 验操作规 程． 全 南京 ： 南
京大学出版社 ， ０ ６ ９ ． ２ ０ ：２ ６
『１ 裴忠亚 ， 涛．Ｑ Ｏ ６ 孙 Ｉ２ ０尿沉渣分辨 正确率 调查． 医学 检验 与临
影 响 白细 胞 的 检 测 。 此外 ， 尿 液 中有 大 量 细 菌 、 当 大量 红 细 胞
Ｉ ２ ０ａ ｔ ｔ ｒ ｅｍ ｃｏｃｐ ｎ ｌ ｅ ｎ ｏ ｐ ｒｏ ｉ Ｑ ０ ｕｏ ｅ ｕｉ ｉｒｓｏｙａａｙ ｒａｄ ｃｍ ａｉ ｎｗｔ ｍａ ｄ ｎ ｚ ｓ ｈ
ｍａ ｕａ ｏ ｎ ｓ ｓｎ ｕ ｈ —ｏｅ ｔ ａ ｃ ｌ ｃ ａ ｎ ｌｃ ｕ ｔ ｕ ｉｇ ｆ ｃ ｓｒｓ ｎｈ ｌ ｅｌ ｈ ｍｂｅｓ ｒ．Ａｍ ｉ Ｊ Ｃｌｎ
・
７２ ・ ３
实用 医技杂志 ２ １ ０ ２年 ７月第 ｌ ９卷第 ７期
Ｊｕｎ ｆ ｒｃｉａ Ｍｅ ｉ １ ｅｈ ｉｕ ｓ Ｊｌ ０２， １ １ ，Ｎ ． ｏｌ ａ ０ ａｔ ｌ ｄｃ ｃｎｑ ｅ ， ｕｖ２ １ Ｖ０． ９ ０ ７ ｒｌ Ｐ ｃ ａＴ
鳞状上皮细胞 、 细菌 、 酵母 菌 、 结晶 、 黏液丝和精子等。每种成 分均可在荧光屏上显示其形态 ． 并可任意选取可疑 的成分进 行 人工复核 ， 是一 种全新尿液有形成 分的检测技术 。但 由于 各种 因素使 尿有形 成分形态 不典 型时 、 杂质较 多 、 尿液 中含 有 形态特征较为相似 的成 分时 ， 常导致某些检测项 目存 在一
定 程 度 的结 果 误 判 （ 假 阳 性 ） 如 果 不 予 以及 时 发 现 和 纠 即 。
亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体用于诊断肝癌的研究
亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体用于诊断肝癌的研究邢怀广;李捷;韩善乐【摘要】目的采用亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3),分析甲胎蛋白异质体AFP-L3在诊断肝癌的临床应用价值.方法选择121例甲胎蛋白AFP阳性患者血清(≥10ng/ml).使用亲和吸附离心管方法检测血清甲胎蛋白异质体AFP-L3,并且对研究对象进行跟踪,分析甲胎蛋白异质体用于临床在鉴别肝癌的作用.结果以甲胎蛋白异质体AFP-L3≥10%作为诊断指标,肝癌患者血清中甲胎蛋白异质体AFP-L3异常升高者明显高于其他肝病患者(P<0.01); 对58例临床确诊为肝癌的患者甲胎蛋白异质体AFP-L3的诊断灵敏度是79.31%;在63例临床诊断为其他肝脏疾病的患者甲胎蛋白异质体AFP-L3的诊断特异性达到92.06%,甲胎蛋白异质体AFP-L3的符合率85.95%.结论应用亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在肝癌与良性肝脏病变鉴别诊断中具有重要临床价值.【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2011(006)013【总页数】3页(P11-13)【关键词】甲胎蛋白异质体;肝癌;离心法【作者】邢怀广;李捷;韩善乐【作者单位】252004,聊城市人民医院放免室;252004,聊城市人民医院内科;莘县人民医院内科【正文语种】中文肝癌是世界上最常见的10种恶性肿瘤之一，全世界每年约有25万人肝癌［1］;肝癌发病之初较为隐匿，临床难以检出，临床诊断是一般多为晚期，治疗效果差，因此早期发现肝癌并且及时治疗可以提高患者的5年存活率。
近年随着影像学的发展，一部分体积小的肝癌患者得以及时发现，患者5年存活率有了一定的提高。
但是影像学技术检测用于诊断肝癌仍然受到很多的限制，使很多患者未能及时得到准确诊断，失去了最佳的治疗时机。
甲胎蛋白(AFP)定量检测是目前早期发现肝癌的主要血清学标志物，但是其他一些疾病也可能引起甲胎蛋白的升高，特别是属于肝癌高危监测人群的慢性肝炎、肝硬化患者［1，2］。
甲胎蛋白异质体比率（AFP-L3%）临床应用价值解析
甲胎蛋白异质体比率（AFP-L3%）临床应用价值解析甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是目前临床应用最广泛的肝癌辅助诊断血清标志物。
AFP诊断肝癌的敏感性为60%～70%，但在肝脏良性疾病，特别是肝癌高危人群，如慢性肝炎、肝硬化中也有部分患者会出现AFP升高。
妇女孕期及某些生殖系统疾病AFP也会升高。
AFP是一种单链糖蛋白，根据其与小扁豆凝集素（Lens culinaris agglutinin，LCA）的亲和力从低到高依次分为AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3。
AFP-L1主要见于良性肝病，AFP-L2主要由卵黄囊产生并多见于孕妇，而AFP-L3主要来源于肝癌细胞，也被称为甲胎蛋白异质体。
中国、日本及亚太肝癌诊疗指南中均将AFP作为肝癌的监测指标。
日本肝病学会（Japan Society of Hepatology，JSH）制定的肝癌诊疗指南中建议将AFP、AFP-L3和异常凝血酶原[脱γ羧基凝血酶原（des-gammacarboxyprothrombin，DCP），又称维生素K缺乏或拮抗剂Ⅱ诱导的蛋白质（protein induced by vitamin K absence or antagonistⅡ，PIVKAⅡ）]同时作为肝癌筛查的标志物，并建议高危人群每6个月做一次超声检查及AFP/AFP-L3/DCP检测以筛查肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC），超高危人群及预后随访则建议每3～4个月进行1次AFP/AFP-L3/DCP及影像学检查。
我国原发性肝癌诊疗规范（2011年版）中指出：血清AFP及其异质体是诊断肝癌的重要指标和特异性最强的肿瘤标志物，国内常用于肝癌的普查、早期诊断、术后疗效监测和随访，且有助于鉴别肿瘤的来源。
尽管美国肝病学会（American Association for the Study of Liver Diseases，AASLD）并未将血液标志物纳入临床肝癌诊疗指南，但美国食品与药品监督管理局（U.S. Food and Drug Administration，FDA）已于2005年批准AFP-L3检测试剂和方法用于临床肝癌预警。
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测对肝细胞癌的临床诊断价值
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测对肝细胞癌的临床诊断价值肝细胞癌是一种常见的恶性肿瘤，具有高发病率和死亡率。
早期的肝细胞癌常常没有明显的临床症状，因此很难及时发现和诊断。
目前，临床诊断肝细胞癌的方法主要包括肝脏超声检查、CT、MRI等影像学检查，以及血清标志物检测。
而甲胎蛋白（AFP）和异常凝血酶原（DCP）是常用的肝细胞癌的血清标志物。
单一指标的检测具有一定的局限性，因此研究者们开始探索多种标志物的联合检测方法，以提高对肝细胞癌的诊断准确性。
本文将介绍甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测对肝细胞癌的临床诊断价值。
一、甲胎蛋白异质体和血清异常凝血酶原简介甲胎蛋白是一种胚胎发育时期细胞产生的一种球蛋白，是一种特定的肿瘤标志物，目前主要用于肝癌、卵巢癌和睾丸肿瘤的筛查和辅助诊断。
DCP是凝血酶原的异常合成产物，其水平与肝癌的恶性度和预后密切相关。
甲胎蛋白和异常凝血酶原作为肝细胞癌的血清标志物，已经被广泛应用于临床诊断中。
甲胎蛋白的测定是目前肝细胞癌的一项非常重要的诊断指标。
一般来说，AFP水平在肝细胞癌患者的血清中明显升高。
由于其在其他一些肝病和非肝病病人中也会偶有升高，因此其特异性不高。
DCP在肝癌发生时有所上升，且其水平与肿瘤的恶性程度和预后有一定的相关性。
甲胎蛋白和异常凝血酶原的联合检测能够提高肝细胞癌的诊断准确性。
研究表明，甲胎蛋白异质体与肝癌的发展和预后密切相关。
在肝细胞癌患者中，一般有2种甲胎蛋白异质体（L3和L1）。
L3型甲胎蛋白以高分泌异常凝血酶原（DCP）为特征，在肝细胞癌患者中高度表达，而L1型甲胎蛋白以低分泌 DCP 为特征。
相关研究表明，对于不同亚型的肝细胞癌患者，甲胎蛋白异质体比率不同，因此其测定能够在一定程度上提高对肝细胞癌的诊断准确率。
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测已经被广泛应用于肝细胞癌的临床诊断中。
一些研究发现，联合检测患者的甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原水平，能够提高对肝细胞癌的早期诊断率和准确性。
甲胎蛋白异质体_AFP_L3_检测技术的研究进展
1前言甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是一种单链糖蛋白。
1970年Purves对肝癌患者血清作凝胶电泳时最先观察到AFP有不同的迁移率，因此提出甲胎蛋白异质体（alpha-fetoprotein variants）这一概念［1］。
随着生物化学及其相关分析技术的发展，研究人员发现不同来源的AFP，其糖链的组成和构型存在差异。
不同的植物凝集素能够特异性地识别一定的糖基，并与之结合。
根据与外源性凝集素亲和性的不同，可对AFP 的来源作出判断。
Taketa等［2］发现原发性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者血清中AFP与小扁豆素（lens culinaris agglutinin，LCA）结合后，电泳分成三带，依次命名为AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3，即LCA非结合型（AFP-L1、AFP-L2）和LCA结合型（AFP-L3）。
对比分析显示HCC患者AFP-L3比率比其它良性肝病患者明显升高。
现通常把与小扁豆素结合的AFP-L3称为AFP异质体，它是新一代的肿瘤标志物［3］。
2甲胎蛋白异质体（AFP-L3）检测的临床意义AFP属于胚胎性蛋白，是应用最广泛的肿瘤标志物。
大量研究证实，AFP分子的糖链异质性与其组织器官来源有关，不同生理病理状况可产生不同糖链结构，并且具有肿瘤特异性。
血清总AFP所含AFP-L1来自良性肝病，占其主要部分；AFP-L2来自孕妇；而AFP-L3则为肝癌细胞特有，AFP-L3>15%即可诊断为原发性肝癌。
AFP-L3诊断肝癌的敏感性为96.9%，特异性为92.0%，准确性为95.5%［4］。
AFP-L3值与总AFP 值无相关性，是独立于总AFP值的肝癌诊断因子［5］，是目前公认的肝癌鉴别诊断和早期诊断的指标，具有非常重要的临床意义［6］。
3甲胎蛋白异质体的检测技术测定AFP-L3常用的方法，是根据AFP异质体对植物凝集素（如小扁豆凝集素LCA、刀豆素ConA或豌豆凝集素PSA）结合能力的不同进行分离，然后应用免疫学方法进行定量测定。
甲胎蛋白异质体
强调肝癌的早期发现，早诊早治
肝癌所处阶段与预后之间的关系
早期
中间阶段
进展期
终末期
标准治疗 方案
单结节/3个结节= 3cm；无 卫星灶；无肝外转移 Child-Pugh A
根治性治疗：切除 及/或肝移植
多结节；无肝外 转移
化疗
门脉受累；肝外 转移
Sorafenib
Child-Pugh C
对症治疗
预期生存 时间
近年来有报道指出,以上述标准诊断原发性肝癌,敏感性为39-64%, 特异 性为76-91%, 对早期肝癌具有9-32%阳性预测值
有近1/3的HCC患者AFP为阴性（敏感性不足），同时20-50%的慢性肝炎、 肝硬化也合成AFP（特异性不足）, 这给HCC的诊断带来了困难。
特异性 不足
20-50%的慢性 肝炎、肝硬化 也合成AFP
肝癌标志物：
➢ 甲胎蛋白（AFP）测定
➢ 血清酶等其他肿瘤标记物检查
• 由于缺乏特异性，只作辅助诊断，如碱性磷酸酶、γ-谷胺酰转肽酶、乳酸脱氢酶的某些 同工异构酶
• 谷氨酰转肽酶（GGT）及其同工酶、α-L-岩藻苷酶(AFU)、异常凝血酶原（DCP）、高尔 基体蛋白 73(GP73)，5－核苷酸磷酸二酯酶(5'NPD)同工酶、醛缩酶同工酶 A（ALD-A） 和胎盘型谷胱甘肽S-转移酶（GST）等，还有异常凝血酶原（DCP）、铁蛋白(FT)和酸性 铁蛋白(AIF)等。部分 HCC 患者，可有癌胚抗原（CEA）和糖类抗原CA19-9等异常增高。
14
如何使用这一指标？
a.分别测定样本中总AFP浓度及其异质体AFP-L3的浓度 b.计算AFP-L3占总AFP比率（AFP-L3/AFP）
afp异质体名词解释
afp异质体名词解释AFP异质体是甲胎蛋白（AFP）的一种特殊存在形式。
甲胎蛋白是一种糖蛋白，在正常情况下，它主要由胎儿肝细胞及卵黄囊合成，在胎儿血液循环中具有较高的浓度，出生后则会逐渐下降到一个非常低的水平。
然而，在某些病理状况下，AFP会再度升高。
但这里的AFP并非是完全单一性质的物质，这就引出了AFP异质体的概念。
AFP异质体在分子结构上存在差异，主要是糖链结构的不同。
这种糖链结构的不同可导致它们在物理化学性质、生物学功能以及在体内的代谢过程等方面都有所区别。
从检测角度来看，不同的AFP异质体在电泳等分析手段下会表现出不同的迁移率。
在临床上，AFP异质体的检测有着非常重要的意义呢。
比如说在肝癌的诊断方面，肝癌患者血清中的AFP水平往往会升高，但是仅仅依靠总的AFP水平来诊断肝癌是不够准确的。
因为在一些良性肝病，像肝炎、肝硬化等情况下，AFP 也可能会升高。
而AFP异质体就像是一把更精准的钥匙。
肝癌细胞产生的AFP 异质体和良性肝病产生的有所不同，通过检测AFP异质体的比例等情况，可以提高肝癌诊断的特异性。
如果检测到某种特定的AFP异质体占比较高，那么患肝癌的可能性就相对较大。
再从肿瘤的发生发展机制来看，AFP异质体可能与肿瘤细胞的某些特殊生物学行为有关。
肿瘤细胞为了自身的生长、侵袭和转移，会对合成的AFP进行糖基化修饰，从而形成特殊的AFP异质体。
这些特殊的异质体可能会参与到肿瘤细胞与周围微环境的相互作用中。
比如说，它们可能会影响肿瘤细胞与免疫细胞之间的识别和相互作用，使得肿瘤细胞能够逃避免疫系统的攻击。
还可能会影响肿瘤细胞与血管内皮细胞的黏附等过程，从而促进肿瘤的转移。
在检测技术方面，随着科技的不断发展，对于AFP异质体的检测方法也越来越精确。
从早期的电泳法到后来的亲和层析法等，这些检测方法能够更准确地分离和识别不同的AFP异质体。
这有助于医生更好地判断患者的病情，制定更合理的治疗方案。
甲胎蛋白异质体测定对原发性肝癌诊断的作用
【 ｂ ｔ ｃ ｂ ｅｔ ｅ Ｔ ｖ ｌａ ｅｕｅ ｌ ｓ ａ ｅ ｐｏ ｉ ｖ ｒ ｎ （ Ｆ —３ ｉ ｅｒ Ａ ｓ ａ ｔ ０ ｊｃｉ ｏｅ ａ ｔ ｔ ｓｆ ｎ ｓ ｆ ｅ ｃ ｓｉ ｏ ｍ ｍｅ ｄｆ ｅｍ ａ ｒｍｅｔ ｆ ｌ — ｔ ｒｔ ｎ ａｉ ｔＡ ＰＬ ） ｎ ａ ｙ ｒ Ｊ ｖ ｕ ｅｈ ｕ ｅ ｎ ｒ ｎ ｕ ｈ ｏｔ ｕ ａ ｈ ｆｏ ｅ ａ ｌ
Ａ ＰＬ 对 肝癌和 良性 肝病 的诊 断具有重 要 意义 。 Ｆ —３
【 关键 词】 甲胎蛋 白异质体 ；原 发性 肝癌 ；肝硬 化 ； 慢性 肝炎
中图分 类号 ：Ｒ３ ． ７５ ７ 文献标 识码 ：Ｂ 文章编 号 ：１７－ １４ （０ ０ ６ ０ ８－ ２ ６ １ ８ ９ ２ １ ）３－ １０ ０
ｗａ ｎｎ ｒｂｎｇ ｖ ｒ ｉ ａｅａ ｄｐｉ ｒ ｖ ｒ ａ ｃｒＭｅｈ ｄ ｈ ｃｏｐｎｏｕ ｃｕ ｌ ｔ ｎ ｕｉａｉ ａｇｕｉｉ Ｌ Ａ） ｓｕｅ ｏａｅ ｎ ｉｇｆ ｅｉｎｌ ｅ ｓ ｓ ｎ ｒ ｙｌ ｅ ｎｅ． ｔｏ ｓＴ ｅｍｉｒｓ ｉｃｌｍ ｏ ｐｅ ｗｉ ｌ ｓｃｌ ｒ ｇ ｌｔ ｎ（ Ｃ ｗａ ｓｄｔ ｉ ｌ ｏ ｉ ｄｅ ｍａ ｉ ｃ ｄ ｈｅ ｎ ｓ ｎ ｏｓ ｔ
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甲胎蛋白异质体、高尔基体蛋白73在肝癌高危患者中的
甲胎蛋白异质体、高尔基体蛋白在肝癌高危患者中的预警作用研究的可行性报告一、本项目的背景和意义肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，全国每年死于肝癌的人数约有万人，占全世界肝癌死亡人数的。
原发性肝癌早期诊断困难，临床诊断时多已属中晚期且常伴有肝内转移，治疗难度大，生存期短。
我国原发性肝癌的发生绝大多数基于漫长的乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染过程，对于绝大多数原发性肝癌患者，有足够的时间进行肝癌预警。
早期发现肝癌并及时治疗可以提高五年生存率。
早期预警、早期诊断对于肝癌患者具有极其重要的意义。
年，美国肝病协会提出对于肝癌高危患者的监测方案，即每个月进行水平和超声检查[]目前是目前全世界应用最广泛的肝癌肿瘤标志物,已经应用了数十年[]，但在一些良性肝病患者中也会有不同程度的升高，特别是在高危人群如慢性肝炎和肝硬化患者中有的升高[]，降低了早期诊断的特异性，使得高危人群早期预警存在困难。
异质体是指氨基酸序列相同，而糖链或蛋白质等电点不同的，肝细胞坏死后再生性与癌产生性在糖链结构上存在差异，依据与小扁豆凝集素（）的亲和力，可分为三种类型：、和，其中主要存在于良性肝病中，来自孕妇，为原发性肝癌所特有[]，即通常所说的甲胎蛋白异质体。
是肝癌诊断的高特异指标，可以解决很难区分良、恶性病变的问题，被称为新一代肝癌标志物。
国外报道，与影像学相比较，在早期肝癌的诊断中可提前个月[]，第二军医大学东方肝胆外科医院的殷正丰报道[]，对例、影像学检查阴性、最后确诊为肝癌的病人异质体含量进行动态观察，发现异质体升高较影像学检查阳性早出现～个月。
异质体阳性预测肝癌发生的正确率为％[]。
美国于年批准该指标应用于肝癌预警[],并把诊断肝癌的阳性值界定为。
高尔基体蛋白（）是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，随着近年来基因技术、蛋白质组学、肿瘤免疫等研究飞速发展，被认为是最值得期待的肝癌血清标志物之一。
等[]于年首先提出,在肝癌患者血清中, 水平显著升高。
肿瘤标志物甲胎蛋白异质体检测及临床意义
肿瘤标志物甲胎蛋白异质体检测及临床意义一、概述甲胎蛋白异质体是由糖链结构不同的甲胎蛋白（AFP）衍生而来，包括AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3三种，其中AFP-L1主要存在于慢性肝炎和肝硬化患者血清中；AFP-L2主要来自卵黄囊肿瘤，怀孕期间母体内可检测到；AFP-L3为肝癌细胞特异性产生，对原发性肝癌诊断、预后和治疗及评价肝癌药物的疗效都具有非常重要的意义。
二、检测方法AFP-L3的常用检测方法是根据AFP异质体对植物血凝素（如LCA、刀豆素ConA或豌豆凝集素PSA）结合能力的不同，先进行异质体分离，然后应用免疫学方法进行定量检测；主要包括经典方法：亲和交叉免疫电泳法、亲和电泳免疫印迹法，推荐方法：亲和吸附离心管法。
三、参考区间正常人血清AFP-L3%（AFP-L3/总AFP）<10%。
各实验室最好根据本室使用的检测系统，检测一定数量的正常人群，建立自己的参考区间。
如用文献或说明书提供的参考区间，使用前应加以验证。
四、临床意义1、甲胎蛋白异质体阳性的妊娠妇女，也可出现AFP和AFP-L3结果增高情况，一般属于生理变化。
2、在原发性肝细胞癌（HCC）诊断中AFP-L3特异性高于总AFP，但敏感性与总AFP无明显差异；与其他指标如AFP、AFPmRNA或AFU等联合检测，可提高对HCC诊断的准确率。
3、肝癌辅助诊断指标AFP-L3值与总AFP值无相关性，是独立于总AFP值的肝癌辅助诊断指标。
4、AFP-L3>10%应高度怀疑肝癌的存在；AFPI3为低值时也不能否定肝癌的存在，因为约有15% ~30%的AFP阳性肝癌患者AFP-L3<10%。
5、某些肝脏良性疾病如急性肝炎、暴发性或重症肝炎、自身免疫性肝炎等也可能会出现AFP-L3的升高，建议与其他检查手段联合使用，综合判断。
6、目前认为AFP-L3 >25%提示为原发性肝细胞癌，可区别原发性肝细胞癌与非原发性肝癌、或者良性肝病引起的AFP升高。
甲胎蛋白异质体和异常凝血酶原
甲胎蛋白异质体和异常凝血酶原哎呀，今天我们聊聊甲胎蛋白异质体和异常凝血酶原这些听起来像是外星语的名词，别急，咱们慢慢来。
甲胎蛋白，这名字是不是听起来像个什么神秘的实验室产物？其实它是咱们身体里的一种蛋白质，主要在胎儿时期产生。
别小看它，成年的时候如果甲胎蛋白水平升高，可能就预示着一些健康问题，比如肝病或者某些肿瘤，真是让人心里咯噔一下。
不过，科学界的小伙伴们可不止盯着这一个蛋白，毕竟人类的身体可复杂了，像个百宝箱，什么都有。
再说说异常凝血酶原，这可真是个让人听了想捂耳朵的名词。
凝血酶原，这是一种帮助我们血液凝固的蛋白，如果没有它，咱们一不小心割到手，那血可就止不住了，真是“血流成河”的场面。
但有些时候，这个凝血酶原就会出现异常，可能让人觉得奇怪，像是班上的“捣蛋鬼”，总是搞些意想不到的事情。
这时候，血液的凝固功能可能就会出问题，太慢了就容易出血，太快了就可能引发血栓，真是让人烦恼。
咱们再聊聊这两者之间的关系。
很多时候，医生会把这两者放在一起研究，看看是不是有什么联系。
比如说，甲胎蛋白水平升高，可能意味着身体正在进行某种“战斗”，而这种战斗可能会影响凝血酶原的生成。
哦，瞧，医学真是神奇，像侦探故事一样，一点点拼凑出真相。
有人可能觉得这些东西离我们很远，实际上，关心这些指标，就像关心家里的宠物一样，能及时发现问题，早做应对，不然一不小心就会引发大麻烦。
别忘了，健康可不仅仅是靠这些数据来衡量的。
生活中，我们也得注意日常习惯。
比如说，饮食一定要均衡，别让自己成了“吃货”里的战斗机，毕竟“人是铁饭是钢”，吃得健康才能打下好基础。
再说，运动也不能落下，哪怕是一点小运动，像晨跑、健步走，都是对自己身体的投资。
健康的生活方式，可比任何检测指标都重要，咱们的身体就像一辆车，保养好了才能开得顺畅。
哦，还有心理健康，大家可别忽视了。
生活压力大，情绪起伏，那可也是影响健康的重要因素。
就像一个蛋糕，外表再好，里面如果是空心的，那也不算成功的蛋糕，对吧？所以，放松心情，适当调节，学会自我解压，这样才能让身体和心理都处于最佳状态。
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测对肝细胞癌的临床诊断价值
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测对肝细胞癌的临床诊断价值【摘要】甲胎蛋白是肝细胞癌的常见标志物，但其特异性和敏感性有限。
本研究探讨甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测在肝细胞癌诊断中的价值。
研究发现，甲胎蛋白异质体比率在肝细胞癌诊断中的应用具有重要意义，血清异常凝血酶原也是一个潜在的诊断标志物。
联合检测两者可以提高诊断的准确性和可靠性。
临床样本实验结果分析显示，联合检测在肝细胞癌早期诊断中具有显著优势。
本研究为肝细胞癌的临床诊断提供了重要参考价值。
展望未来研究方向包括深入探讨甲胎蛋白异质体和异常凝血酶原的生物学特性以及开展大规模临床试验。
临床实践推广建议包括加强医疗机构之间的合作交流，提高检测技术水平和规范诊断流程。
【关键词】关键词：甲胎蛋白异质体比率、血清异常凝血酶原、肝细胞癌、临床诊断、联合检测、临床实验、研究方向、临床实践、推广建议1. 引言1.1 背景介绍肝细胞癌是临床上常见的恶性肿瘤之一，具有高发病率和高死亡率的特点。
在肝细胞癌的早期诊断和治疗过程中，准确的临床诊断是至关重要的。
甲胎蛋白（AFP）是一种特异性肝癌标志物，其在肝细胞癌的诊断和预后评估中起着重要作用。
单独检测AFP存在着一定的局限性，因为它受到多种因素的影响，包括肝病病变、妊娠等。
近年来，研究表明甲胎蛋白异质体比率的检测对肝细胞癌的诊断具有更高的准确性和特异性。
甲胎蛋白异质体是由于糖基化改变引起的不同分子量的甲胎蛋白，其比率在肝细胞癌患者和非患者之间存在显著差异。
结合甲胎蛋白异质体比率与AFP水平的检测，可以提高肝细胞癌的诊断准确性。
异常凝血酶原（PIVKA-II）也被广泛应用于肝细胞癌的诊断中。
异常凝血酶原是一种未被carboxylated的凝血酶原，其水平在肝细胞癌患者中显著升高。
结合检测PIVKA-II和AFP水平，可以有效提高对肝细胞癌的诊断敏感性和特异性。
甲胎蛋白异质体比率和血清异常凝血酶原联合检测在肝细胞癌的临床诊断中具有重要的指导意义。
甲胎蛋白异质体
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检测原理
Glycoforms of Alpha-Fetoprotein (AFP) Glycoform AFP-L1 AFP-L2 AFP-L3 Affinity for LCA* Low Intermediate High Associated with inflammatory chronic liver disease Derived from yolk sac + tumors or metastatic liver cancer Expressed by malignant hepatocytes Comment
近年来有报道指出,以上述标准诊断原发性肝癌,敏感性为39-64%, 特异 性为76-91%, 对早期肝癌具有9-32%阳性预测值 有近1/3的HCC患者AFP为阴性（敏感性不足），同时20-50%的慢性肝炎、 肝硬化也合成AFP（特异性不足）, 这给HCC的诊断带来了困难。 特异性 不足
20-50%的慢性 肝炎、肝硬化 也合成AFP
来源于肝脏上皮的肝部恶性肿瘤，分为肝细胞癌 （HCC，>90%）、胆管细胞癌(~5%)、混合细胞癌(~5%)。 病因包括：病毒性肝炎和肝硬化；黄曲霉素；其他 化学致癌物；饮水污染等。
被称为“癌中之王”
4
临床表现
原发性肝癌早期多无典型症状，临床就诊者多为中晚期病人
右上腹疼痛 right upper quadrant pain 消化道症状 digestive tract symptom 出血倾向 hemorrhagic tendency
甲胎蛋白异质体AFP-L3介绍
目
1、肝癌早期发现很关键
录
2、为何单独检测AFP进行肝癌早期诊断效果不够
3、什么是甲胎蛋白异质体比值AFP-L3%
4、甲胎蛋白异质体AFP-L3%的临床意义
肝癌的早期诊断
肝癌疗效不尽如人意的最主要Байду номын сангаас因是诊断较晚。中晚期肝
癌通常伴有肝内外的转移，手术无法切除，“移植”已成 禁忌，介入栓塞治疗“力所不及”，药物治疗也难有显效。
60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 AFP-L3% AFP
AFP 明显，但未转阴 AFP-L3% 不明显
AFP ，但未转阴 AFP-L3% ，转阴
*手术不彻底
*手术可能较为彻底
文献：殷正丰，吴孟超．甲胎蛋白变异体作为肝细胞癌预后指标的研究． 肿瘤，2001，21：466-467,479. 文献：殷正丰．甲胎蛋白异质体作为肝癌标志物的临床应用． 实用肿瘤杂志，2004，19（1）：1-4. 文献： Li D, Mallory T. AFP-L3: a new generation of tumor marker for hepatocellular carcinoma. Clin Chim Acta., 2001, 313(1-2):15-19.
3、AFP-L3%与HCC的恶性程度相关
小肝癌中AFP-L3%的升高提示癌细胞是低 分化、多发的，AFP-L3%高的患者肿瘤倍增 时间短。 血清中AFP-L3比率升高的HCC患者通常预 后不好，应该接受积极的治疗和密切的随访。
甲胎蛋白异质体在鉴别良恶性肝病中的应用价值
８ ２ｌ
甲胎蛋 白异质体在鉴别 良恶性肝病 中的应用价值
丁
关键词 肝肿瘤 癌
贤
刘树业
周淑芬
血清
宋佐莉
诊断 ， 鉴别
甲胎蛋 白 甲胎蛋 白异质体
离心法
甲胎蛋 白（ Ｆ ） Ａ Ｐ 在临床 上作 为肝细胞 癌 的诊 断 以及疗 效观察指标 已经被广 泛认可 ， 但是 Ａ Ｐ只具有相对 特异 性 ， Ｆ 即肝 癌患者 中 Ａ Ｐ升高 ，部 分 良性 肝病患 者 中也 升高 ， Ｆ 因 此， 寻求肝癌早期诊 断特异性 指标 具有重要临床意义 。研究 发现 ， Ｆ Ａ Ｐ在不 同病理 情况下 产生的分子 糖链结 构不 同 ， 肝
２ 结 果
肝癌 Ａ Ｐ≥４ ０ ／ Ｆ ０ Ｌ组 、 癌 Ａ Ｐ＜４ ０ ／ 肝 Ｆ ０ ｇ Ｌ组 、 肝硬
化 组 、慢 性 肝 炎 组 及 自身 免 疫 肝 炎 组 患 者 血 清 Ａ Ｐ Ｌ／ Ｆ Ｆ — ３Ａ Ｐ
阳性 者分 别 为 ４ （ ９ ％） ４ （ ５ ％） ４ ８７ 、 （ ．％） ９ ７ ． 、 １７ ． 、 （ ．％） ３ ７９ ０ ９ 及 ３ ７３ 例 。肝癌组 与非肝癌组 Ａ Ｐ Ｌ ／ Ｆ （ ．％） Ｆ — ３Ａ Ｐ阳性率 比较 差异有统计学 意义 （７６ Ｖ ． ＝１ １ ， ７． Ｓ ０ ％ ８ ％， ２ ． Ｐ＜００ ）肝 ６ ．１ ； 癌 Ａ Ｐ≥ ４ ０ Ｆ ０ 组与 ＡＦ Ｐ＜４ ０ ｆ组 间 、肝硬化组 与 Ｆ ～ ３Ａ Ｐ阳性率 明显高于非肝 癌组 ， 差异有
统计学 意义 ，表明用本方法检测 的 Ａ Ｐ Ｌ ／Ｆ Ｆ — ３Ａ Ｐ＞１％为诊 ０ 断指标时 ， 可以有效的区分 良、 恶性肝病患者 ； 而低浓度 Ａ Ｐ Ｆ
人甲胎蛋白异质体3AFPL3酶联免疫分析试剂盒使用方法
人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)酶联免疫分析试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T50ng/L– 1600ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)水平。
用纯化的人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)，再与HRP标记的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)浓度。
1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（3200 ng/L）×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3．组织处理：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
甲胎蛋白异质体测定收费依据
甲胎蛋白异质体测定收费依据
（原创实用版）
目录
1.甲胎蛋白异质体的概念和作用
2.甲胎蛋白异质体测定的收费标准
3.甲胎蛋白异质体测定的临床意义
4.甲胎蛋白异质体测定与肝癌的关系
5.甲胎蛋白异质体测定的准确性和局限性
正文
甲胎蛋白异质体是一种在胎儿发育时期由肝脏部位合成的糖蛋白，其主要作用是运输和调节生长因子。
在成人体内，甲胎蛋白异质体的存在通常与病理性疾病有关，如肝癌、慢性肝炎和肝硬化等。
因此，甲胎蛋白异质体测定被广泛应用于临床辅助诊断。
甲胎蛋白异质体测定的收费标准因地区和医院而异。
一般来说，甲胎蛋白异质体测定的费用属于医疗保险报销范畴，患者只需承担部分费用。
具体收费标准可向当地医院或医疗保险部门咨询。
甲胎蛋白异质体测定在临床诊断中具有重要意义。
当甲胎蛋白异质体水平升高时，可能是因为患者存在病理性疾病，如肝癌、慢性肝炎和肝硬化等。
通过甲胎蛋白异质体测定，医生可以对患者进行进一步的诊断和治疗。
甲胎蛋白异质体测定与肝癌的关系尤为密切。
研究表明，甲胎蛋白异质体阳性的肝癌患者往往具有快速生长和早期转移的潜在可能。
因此，甲胎蛋白异质体测定在肝癌的早期诊断和病情监测中具有重要作用。
然而，甲胎蛋白异质体测定并非万能。
其准确性和局限性取决于多种因素，如检测方法、患者病情和医生经验等。
因此，在甲胎蛋白异质体测
定结果出来后，患者应在医生的指导下进行进一步的检查和治疗。
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甲胎蛋白异质体
甲胎蛋白异质体（Variants of AFP or molecular heterogenetic of AFP ）是一种单链糖蛋白，含糖量约为4％左右。
不同组织细胞合成的AFP，其糖链结构有所不同，对植物凝集素的结合能力也不相同，此种糖链结构不同的AFP称为AFP的亚型或变异体，也称为AFP分子异质体。
近年来对AFP异质进行了电泳、糖链结构及与植物凝集素结合能力等方面进行了深入研究。
有资料表明，AFP异质体存在着分子大小和电荷量的差异。
淀粉胶电泳将人肝癌血清AFP分为4种亚型；用SDS聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳发现AFP可分为分子量72kD 和kD两种成分；等电聚焦结合交叉免疫电泳可使胎儿AFP分成10种等电点不同的异质体。
这表明AFP异质体存在着电泳不无一性，这与其一级结构差异有关。
其C－末端结构基本相同，N末端至少有3种不同结构，这能否产生AFP电泳异质性有待于证实。
AFP结构中的糖链主要由甘露糖、半乳糖、N－乙酰葡萄糖和唾液酸，并以寡糖单位的形式组成。
AFP异质体糖链结构的差异主要表现在分支结构的不同，刀豆素A（ConA）结合型和非结合型AFP异质体的糖链结构模型差异表现在一个分支中有无－GLcNAc-Gal-NeuNAc结构。
对人肝癌AFP 糖链结构电泳研究发现，其寡糖分为中性（N）、酸性（A1，A2）三种成分。
进一步研究证实N两分支末端均由半乳糖组成，A1两分支末端分别为半乳糖和N－乙酰神经氨酸，A2则均为N －乙酰神经氨酸。
卵黄囊肿瘤的AFP其ConA亲和性组占50％左右，肝癌腹水中与LCA结合的AFP糖链中具有与Asn连接的N－乙酰基葡萄糖胺残基，而在非结合型异质体的糖链中无此成分。
根据AFP与外源性凝集素（Lectin）结合能力的差异，可分为不同的变异体。
采用扁豆凝集素（LCA）／刀豆素A亲和电泳或层析技术能将AFP分为LCA／ConA非结合型AFP（AFP －N－L／AFP－N－C）和LCA／ConA结合型AFP（AFP－R－L／AFP－R－C）两种。
新的Lectin 的应用，使AFP在糖链结构上异质体达9种之多。
AFP异质体的命名方法为：从阴极开始在LCA亲和电泳上AFP的条带依次为L1、L2、L3；在E－PHA亲和电泳上AFP的条带依次为P1、P2、P3、P4、P5；用ConA时按AFPC1、C2命名；alloA时按AFPA1、A2、A3命名。
AFPL2、L3完全不能分离，存在中间成分时按AFPL2、L3命名，AFPP4、P5分离不充分时命名为AFP－P4＋AFP －P5。
因此，AFP对不同的Lectin反应所表现的异质体不同，故可用于疾病的鉴别诊断。
AFP异质体亲和交叉免疫电泳检测法
【原理】
根据AFP对刀豆素（ConA）或小扁豆凝集素（LCA）结合能力的不同，可区别原发性肝细胞癌与非原发性肝癌引起的AFP升高，提高AFP对肝癌的诊断价值。
此法原理是将检样于含LCA的琼脂糖凝胶中电泳，与LCA结合型AFP在电泳时被阻留，而非结合型AFP则向阳极侧泳动。
然后，与首次电泳的方向垂直，在含抗AFP的琼脂糖胶中作第二次电泳。
此时被首次电泳分离的AFP异质体，将分别于含抗AFP的凝胶板中形成沉淀峰,根据峰的大小即可了解结合型或非结合型AFP所占的比例。
【试剂】
1．小扁豆凝集素（LCA）。
2．抗AFP血清：同ELISA法。
3．10.0g/L琼脂糖：琼脂糖1.0g加0.25mol/L pH8.6巴比妥缓冲液100ml，沸水浴中使溶，加入NaN3使达1.0g/L，按需要量分装后密塞，4℃保存。
4．125I－AFP。
【试剂】
1．小扁豆凝集素（LCA）。
2．抗AFP血清：同ELISA法。
3．10.0g/L琼脂糖：琼脂糖1.0g加0.25mol/L pH 8.6巴比妥缓冲液100ml，沸水浴中使溶，加入NaN3使达1.0g/L，按需要量分装后密塞，4℃保存。
4．125I－AFP。
【操作】
1．将10.0g/L琼脂糖融化后，在6cm×12cm洁净玻板之一侧浇注2cm×12cm（厚1.6cm）凝胶条（约需3.84ml凝胶液），凝固后于距内缘2～3mm处切割一0.5cm×10cm的槽。
2．用巴比妥缓冲液将LCA稀释成2mg/ml（－20℃可保存1个月），取80μl加入冷至56℃的已融化琼脂糖凝胶1ml中，混匀后浇注于上述槽中。
待凝固后，于此胶条上距阴极端0.5cm处打一直径0.2～0.3cm的孔，距此孔4.5cm处打第二个孔（第二份检样）。
3．两孔内各加一份待测血清，加样量5～10μl。
以1.0g/L溴酚蓝为指示剂，10V／cm 稳压电泳，至白蛋白泳出4cm时关闭电源。
4．将抗AFP血清按效价与融化并冷至56℃的琼脂糖胶液混合（琼脂糖最终浓度为9.0g/L，抗AFP达最适浓度），并浇注玻板的其余部分（4cm×12cm），约需含抗血清胶液7.68ml，使凝固。
5．于LCA胶条下1.5mm处空白凝胶内切割一0.2cm×10cm的细槽，槽内注入混有1.0g/L 溴酚蓝5μl的125I－AFP 20μl（约6万～7万cpm）。
如混入0.35ml融化的10.0g/L琼脂糖胶液中浇注更好。
10V／cm稳压电泳，电泳方向与第一次电泳垂直。
至白蛋白泳出4cm时终止。
6．电泳结束后，用滤纸覆盖于凝胶板表面，置37℃干燥后，于暗室覆盖X光底片，室温曝光48h，显影，定影后观察。
【结果判断】
将X光胶片置坐标纸上，以峰两侧水平线作基线，峰形下总面积（小格数）为100％，各所占面积（小格数）与总面积的百分比即AFP异质体的百分比。
AFP异质体亲和电泳免疫印迹法
【原理】
将含AFP的待检血清置于含LCA的琼脂糖凝胶中电泳。
LCA结合型AFP泳动速度慢，而CA非结合型AFP泳动速度快，形成前后2条区带。
用吸附有抗人AFP抗体的硝酸纤维素（NC）膜进行免疫印迹，再依次与酶标记抗人AFP抗体和酶底物反应则显色。
NC膜上可呈现2条着色区带，透明后用光密度计扫描，得出结合型与非结合型AFP所占百分比。
【试剂】
1．小扁豆凝集素（LCA）。
2．马抗人AFP抗体。
3．兔抗人AFP－HRP。
4．结合马抗人AFP抗体的硝酸纤维素膜（简称马抗人AFP－NC膜）；将NC膜剪裁成与凝胶板相同大小，浸于最适稀释浓度的马抗人AFP抗体溶液中，5min后取出，电吹风吹干，4℃保存，4周内稳定。
5．洗涤液：150mmol/L NaCl溶液，含0.05% Tween-20。
【操作】
1．用25mmol/L Tris-巴比妥缓冲液（pH 8.6）配制10g/L琼脂糖凝胶（内含2.0g/L LCA），浇注玻板。
凝胶厚度为1.0mm，长8cm，宽度视标本数而定，一般为1cm宽／每份标本。
在负极侧0.5cm处，切一条7mm长、1mm宽的加样槽，槽内加待检血清4μl。
电压15V／cm，电泳45min。
电泳毕，取下琼脂糖凝胶板。
2．将马抗人AFP－NC膜先用蒸馏水浸湿，仔细地覆盖于琼脂凝胶板上，再在NC膜上加
数层滤纸，上面置10g/cm2的重物。
约经30min，凝胶板上AFP电泳区带即转印至NC膜上。
3．将免疫印迹的NC膜浸入用20g/L牛白蛋白溶液最佳稀释的兔抗人AFP－HRP溶液中，37℃，经1h后取出。
NC膜用洗涤液洗3次。
最后将NC膜浸入酶底物溶液（DAB＋H2O2）中，待显现出二条棕黄色区带后，用蒸馏水冲洗数次，终止反应。
4．在阴极侧的区带为LCA结合型AFP；阳极侧的区带为LCA非结合型AFP，NC膜在空气中干燥后，用十氢萘透明，用光密度计在波长490nm扫描，打印出二条区带的百分数。
【参考值】
阴性
【临床意义】
1．AFP是一种糖蛋白，其寡糖链有多样性，AFPV与植物血凝素中的小扁豆以集素（Lens culinaris agglutinin, LCA）亲和力不同，而分为LCA亲和的（LCA－R）和与LCA非亲和（LCA－N）的两部分，原发性肝癌的AFP糖链中存有异质体。
2．AFPV检测能鉴别良恶性肝病，如LCR－R≥25％者多数（80％以上）为原发性肝癌。
LCA－N高者为良性肝病，如急慢性肝炎，肝硬化等。
3．对病程预后的判断：如肝癌切除后，AFPV随AFP转阴而消失，若AFP未转正常，但甲胎异质体含量明显下降的患者复发的危险性少，而AFP含量下降，AFPV含量相对恒定者，则术后容易复发。