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3
Diagnosis of Pulmonary TB Related to Numbers of Tubercle Bacilli
Case frequency
10
102
103
104
105
106
Poor microscopy (25%)
X-ray/clinical only (20%) Culture / PCR (25%)
结核病快速诊断进展
1
内容
1. 结核病实验室工作在结核病控制中的作用 2. 为什么要进行EQA 3. EQA 培训的重要意义 4. 结核病实验室相关的流行病学理论 5. 痰涂片镜检的操作原理 6. 全球结核病快速诊断进展
2
结核病实验室工作在结核病控制中的作用
• 诊断 （发现传染源） • 治疗 （确定治疗方案） • 疗效评价 • 结核病控制策略和措施的评估
potential pathogen isolated from or
detected in clinical samples
patient's clinical condition
12
如何推测特定病原体可以致病? • Koch‘s 推测
– 病原体必须在每一例病例中都出现 – 病原体可以从宿主中分离并且可以在纯培养基中生长 – 当特定的病原体接种到健康机体时特定的疾病会发生 – 病原微生物可以在实验动物中恢复
• 为区分物体不同的两点,这两点的光学成像必须落在视网 膜上不同的感光细胞上;
• 显微镜下,光线经过显微镜物镜折射成倒立放大的实像,然 后经目镜折射成正立放大的虚像;
• 经显微镜放大后,人眼就可以区分物体不同的两点,以达到 观察微小物体的目的;
• 由于光线衍射的原因,普通光学显微镜不能区别小于0.2微 米的物体；
16
分枝杆菌的发现历史
• 1590 年荷兰杨森父子发明了显微镜 • 19世纪末,显微镜技术、染色技术已应用于微生物
检测,分枝杆菌的发现条件已成熟 • 在发现结核菌前,科霍已是一位在微生物学方面取
得丰硕成果的学者.
17
Robert Koch – 第一个证明细菌可以致病
• 1876 • 传染病的微生物病因学
13
传染性疾病的冰山理论
poliomyelitis in a child 0.1-1% of infections are clinically apparent
rubella 50% of infections are clinically apparent
Spectrum of virulence
Good microscopy (55%)
← AFB per ml of sputum
Slide Courtesy: Van Deun A, Nov 2003
4
细菌 – 让人们联想到什么?
• 疾病 • 传染性 • 流行性 • 食物腐败 • 在目前已知的细菌中有1%的细菌可以导致人患病 • 在目前已知的细菌中有4%的细菌可以导致植物得病
21
分辨率和对比度
• 人的肉眼不能看清小于0.1毫米的物体 • 普通光学显微镜不能区别小于0.2微米的物体 • 电子显微镜不能看清小于0.1纳米的物体
22
电子显微镜下的结核分枝杆菌
Gram-positive Gram-negative
S. aureus
E.百度文库coli
Acid fast M. tuberculosis
95%已知细菌不具有致病性
5
为什么要进行EQA
• 增加人员的责任心 • 推行标准化、规范化操作 • 确保实验室服务质量的提高 • 生物安全的需要 • 加强实验室网络、采集信息
6
痰涂片镜检EQA 培训的意义
• 强化EQA的理解，有利于积极推广 • 提高实验室服务质量 • 提高对结核病实验室工作的重视 • 逐步提高结核病防治人员特别是结核病实验室
– 病因学 - 疾病的病因
• 建立 “科学规则” 来确定微生物和疾病的病 因和效应关系
• Koch’s 原理
18
Koch确定了3个重要疾病的病因
• 1. 霍乱 (fecal-oral disease)
– Vibrio cholerae
• 2. 结核病 (pulmonary infection)
– Mycobacterium tuberculosis
工作人员的地位
7
结核病实验室相关的流行病学理论
• 结核病的发病学和流行 • 冰山理论 • 水库理论 • 病因分析和疗效评价
8
核分枝杆菌在人体中的生活周期
感染 – 95%
感染
病变早期进展 - 5% 例如： HIV, 婴幼儿
后期表现 - 5% 例如：移民9
结核分枝杆菌的生活周期
感染
进入细胞内 侵犯人体免疫防御系统
Most microbes are never pathogenic
11
我们如何知道特定的病原微生物致病?
诊断和有效的治疗不仅依靠分离病原微生物， 而且在于建立实验室和病人临床症状的联系
Recognised syndromes
e.g. septicaemia, endocarditis, osteomyelitis meningitis, UTI, pneumonia pharyngitis
• 3. 炭疽(sheep and cattle)
– Bacillus anthracis
19
结核病
• 结核分枝杆菌：棒状抗酸菌.
可以在人与人之间传播
• 牛型结核杆菌: 美国的病例 数〈１％,不在人与人之间传
播
• 鸟胞内分枝杆菌，可以感染
AIDS晚期患者
20
Figure 24.9
光学显微镜的基本原理
classical clinical disease
less severe disease
asymptomatic infection
rabies
100% of infections
are clinically apparent
14
水库理论
发病 人数
现有病人数
死亡 人数
治愈 人数
15
痰涂片镜检的操作原理
改变细胞壁
人体内生存
免疫激活和营养限制 改变营养需要
由肺中排入空气中
免疫病理 释放抗原性蛋白
释放调控因子, 例如 sigma factors
10
微生物和人类
Very few microbes are always pathogenic
Many microbes are potentially pathogenic
Diagnosis of Pulmonary TB Related to Numbers of Tubercle Bacilli
Case frequency
10
102
103
104
105
106
Poor microscopy (25%)
X-ray/clinical only (20%) Culture / PCR (25%)
结核病快速诊断进展
1
内容
1. 结核病实验室工作在结核病控制中的作用 2. 为什么要进行EQA 3. EQA 培训的重要意义 4. 结核病实验室相关的流行病学理论 5. 痰涂片镜检的操作原理 6. 全球结核病快速诊断进展
2
结核病实验室工作在结核病控制中的作用
• 诊断 （发现传染源） • 治疗 （确定治疗方案） • 疗效评价 • 结核病控制策略和措施的评估
potential pathogen isolated from or
detected in clinical samples
patient's clinical condition
12
如何推测特定病原体可以致病? • Koch‘s 推测
– 病原体必须在每一例病例中都出现 – 病原体可以从宿主中分离并且可以在纯培养基中生长 – 当特定的病原体接种到健康机体时特定的疾病会发生 – 病原微生物可以在实验动物中恢复
• 为区分物体不同的两点,这两点的光学成像必须落在视网 膜上不同的感光细胞上;
• 显微镜下,光线经过显微镜物镜折射成倒立放大的实像,然 后经目镜折射成正立放大的虚像;
• 经显微镜放大后,人眼就可以区分物体不同的两点,以达到 观察微小物体的目的;
• 由于光线衍射的原因,普通光学显微镜不能区别小于0.2微 米的物体；
16
分枝杆菌的发现历史
• 1590 年荷兰杨森父子发明了显微镜 • 19世纪末,显微镜技术、染色技术已应用于微生物
检测,分枝杆菌的发现条件已成熟 • 在发现结核菌前,科霍已是一位在微生物学方面取
得丰硕成果的学者.
17
Robert Koch – 第一个证明细菌可以致病
• 1876 • 传染病的微生物病因学
13
传染性疾病的冰山理论
poliomyelitis in a child 0.1-1% of infections are clinically apparent
rubella 50% of infections are clinically apparent
Spectrum of virulence
Good microscopy (55%)
← AFB per ml of sputum
Slide Courtesy: Van Deun A, Nov 2003
4
细菌 – 让人们联想到什么?
• 疾病 • 传染性 • 流行性 • 食物腐败 • 在目前已知的细菌中有1%的细菌可以导致人患病 • 在目前已知的细菌中有4%的细菌可以导致植物得病
21
分辨率和对比度
• 人的肉眼不能看清小于0.1毫米的物体 • 普通光学显微镜不能区别小于0.2微米的物体 • 电子显微镜不能看清小于0.1纳米的物体
22
电子显微镜下的结核分枝杆菌
Gram-positive Gram-negative
S. aureus
E.百度文库coli
Acid fast M. tuberculosis
95%已知细菌不具有致病性
5
为什么要进行EQA
• 增加人员的责任心 • 推行标准化、规范化操作 • 确保实验室服务质量的提高 • 生物安全的需要 • 加强实验室网络、采集信息
6
痰涂片镜检EQA 培训的意义
• 强化EQA的理解，有利于积极推广 • 提高实验室服务质量 • 提高对结核病实验室工作的重视 • 逐步提高结核病防治人员特别是结核病实验室
– 病因学 - 疾病的病因
• 建立 “科学规则” 来确定微生物和疾病的病 因和效应关系
• Koch’s 原理
18
Koch确定了3个重要疾病的病因
• 1. 霍乱 (fecal-oral disease)
– Vibrio cholerae
• 2. 结核病 (pulmonary infection)
– Mycobacterium tuberculosis
工作人员的地位
7
结核病实验室相关的流行病学理论
• 结核病的发病学和流行 • 冰山理论 • 水库理论 • 病因分析和疗效评价
8
核分枝杆菌在人体中的生活周期
感染 – 95%
感染
病变早期进展 - 5% 例如： HIV, 婴幼儿
后期表现 - 5% 例如：移民9
结核分枝杆菌的生活周期
感染
进入细胞内 侵犯人体免疫防御系统
Most microbes are never pathogenic
11
我们如何知道特定的病原微生物致病?
诊断和有效的治疗不仅依靠分离病原微生物， 而且在于建立实验室和病人临床症状的联系
Recognised syndromes
e.g. septicaemia, endocarditis, osteomyelitis meningitis, UTI, pneumonia pharyngitis
• 3. 炭疽(sheep and cattle)
– Bacillus anthracis
19
结核病
• 结核分枝杆菌：棒状抗酸菌.
可以在人与人之间传播
• 牛型结核杆菌: 美国的病例 数〈１％,不在人与人之间传
播
• 鸟胞内分枝杆菌，可以感染
AIDS晚期患者
20
Figure 24.9
光学显微镜的基本原理
classical clinical disease
less severe disease
asymptomatic infection
rabies
100% of infections
are clinically apparent
14
水库理论
发病 人数
现有病人数
死亡 人数
治愈 人数
15
痰涂片镜检的操作原理
改变细胞壁
人体内生存
免疫激活和营养限制 改变营养需要
由肺中排入空气中
免疫病理 释放抗原性蛋白
释放调控因子, 例如 sigma factors
10
微生物和人类
Very few microbes are always pathogenic
Many microbes are potentially pathogenic