薄层色谱经验总结
薄层工作总结

薄层工作总结
薄层工作是一种广泛应用于科学研究和工程领域的技术,它可以用于材料表面
的分析、薄膜的制备、光学器件的加工等多个方面。
在过去的一段时间里,我有幸参与了一些薄层工作的研究和实践,通过这些经历,我对薄层工作有了更深入的了解,并积累了一些经验和心得。
在此,我想对这些经验进行总结,与大家分享。
首先,薄层工作需要严谨的实验设计和精密的实验操作。
在进行薄层工作之前,我们需要对实验目的、方法和步骤进行充分的思考和计划。
在实验操作过程中,需要严格控制各种参数,确保实验的准确性和可重复性。
此外,还需要使用各种先进的仪器设备,如薄膜沉积设备、光谱仪、显微镜等,来对样品进行表征和分析。
其次,薄层工作需要团队合作和交流。
在实际的工作中,我们常常需要与其他
领域的专家和同行进行合作,共同解决一些复杂的问题。
团队合作可以充分发挥每个人的专长和优势,提高工作效率和质量。
此外,与他人的交流和沟通也能够帮助我们开阔视野,学习他人的经验和见解,进而提升自己的能力和水平。
最后,薄层工作需要不断学习和创新。
随着科学技术的不断发展,薄层工作的
方法和技术也在不断更新和改进。
我们需要保持学习的热情,不断关注最新的研究成果和技术进展,不断提高自己的专业知识和技能。
同时,我们还需要勇于创新,敢于尝试新的方法和思路,以求在薄层工作中取得更好的成果。
总的来说,薄层工作是一项需要细心、耐心和技术的工作,但同时也是一项充
满挑战和乐趣的工作。
通过总结和分享自己的经验,我希望能够激励更多的人加入到薄层工作中,共同推动这一领域的发展和进步。
薄层色谱法实践技巧大总结

薄层色谱法实践技巧大总结薄层色谱法(TLC)是一种快速、简便、灵敏的分离和分析方法,在化学、药学、生物学等领域得到了广泛的应用。
然而,要想获得准确、可靠的实验结果,掌握一些实践技巧是非常必要的。
接下来,就为大家详细总结一下薄层色谱法的实践技巧。
一、实验准备1、选择合适的吸附剂常用的吸附剂有硅胶、氧化铝等。
硅胶适用于大多数有机化合物的分离,氧化铝则对某些极性较大的化合物有较好的分离效果。
在选择吸附剂时,要根据样品的性质和分离目的来确定。
2、制备薄板可以购买商品化的预制薄板,也可以自己制备。
自制薄板时,将吸附剂与适量的黏合剂(如羧甲基纤维素钠水溶液)混合均匀,调成糊状,均匀地涂布在玻璃板上,然后在室温下晾干,活化备用。
3、选择展开剂展开剂的选择是影响分离效果的关键因素之一。
一般根据“相似相溶”的原则,先尝试单一溶剂,如石油醚、乙酸乙酯、甲醇等,如果分离效果不理想,再考虑混合溶剂。
可以通过查阅相关文献或进行预实验来确定合适的展开剂。
4、样品的制备样品要尽可能纯净,溶解在适当的溶剂中,浓度不宜过高,以免出现斑点拖尾现象。
二、点样技巧1、点样量点样量要适中,过多会导致斑点扩散、重叠,过少则可能检测不到。
通常,点样量在 1-10μL 之间。
2、点样方式可以使用微量注射器、毛细管或点样器进行点样。
点样时,要保持点样点的直径小于 5mm,且尽量集中,以保证分离效果。
3、点样位置点样位置距离薄板底边 15-2cm 为宜,点与点之间的距离要适中,一般不少于 1cm,以避免斑点之间相互干扰。
三、展开技巧1、展开缸的准备展开缸要预先饱和,即将展开剂倒入展开缸中,盖上盖子,让缸内的气氛达到饱和状态。
这样可以减少边缘效应,提高分离效果。
2、展开方式可以采用上行展开、下行展开或水平展开等方式。
上行展开是最常用的方式,展开速度适中,分离效果较好。
3、展开距离展开距离一般为薄板长度的 3/4 左右,不宜过长或过短。
过长会导致斑点扩散,过短则可能分离不完全。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂
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最全的TLC经历薄层色谱〔TLC〕是一种非常有用的跟踪反响的手段,还可以用于柱色谱别离中适宜溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大〔标准〕或者是非极性的〔反相〕。
流动相那么是一种极性待选的溶剂。
在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反响混合物点在薄板上,然后利用毛细作用使溶剂〔或混合溶剂〕沿板向上移动进展展开。
根据混合物中组分的极性,不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘〞在极性的硅胶上,在薄板上移动的距离比拟短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保存较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf值来表达。
这是一个位于0~1之间的数值,它的定义为:化合物距离基线〔最先点样时已经确定〕的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱〔TLC〕实验步骤:1) 切割薄板。
通常,买来的硅胶板都是方形的玻璃板,必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进展切割。
在切割玻璃之前,用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置〔注意不要损坏硅胶面〕。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺,你便可方便地进展玻璃切割。
当整块玻璃被切割后,你就可以进一步将其分成假设干独立的小块了。
〔开场的时候,也许你会感到有一些难度,但经过一些训练以后,你便会熟练地掌握该项技术。
〕2) 选取适宜的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中,大多数极性物质不会移动,但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反,极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线,但并不使所有化合物都到达溶剂前端,Rf值最好在0.15~0.85之间。
虽然这个条件不一定都能满足,但这应该作为薄层色谱分析的目标〔在柱色谱中,适宜的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间〕。
那么,应该选取哪些溶剂呢?一些标准溶剂和他们的相对极性〔从LLP中摘录〕列于如下:强极性溶剂:甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂:乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂:环己烷,石油醚,己烷,戊烷常用混合溶剂:乙酸乙酯/己烷:常用浓度0~30%。
薄层色谱的体会总结
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薄层色谱的体会总结薄层层析和纸色谱操作注意事项一、应用:薄层色谱是一种微量、快速、简便的分析方法。
适用于微量样品的分离、鉴定和制备。
在中药制剂制备过程中,经适宜的工艺来取舍处方中各药材的各类成分,从而达到保持或改变药物作用性质或降低其毒副作用的目的。
而薄层色谱法具有分离与鉴定的双重功能,通过薄层图谱与对照品、对照药材的图谱相比较,除了能鉴出有效成分或特征成分外,还以完整的色谱图作为一个整体对制剂加以鉴别,提高了鉴别的准确性,尤其当有效成分尚不确切时,更显示出薄层色谱法的实用性。
薄层色谱分析法由于适合国情、简便、快速,能有效地、直观地反映药品地真实性、稳定性,现已成为中药制剂的鉴别和质量控制的行之有效的方法之一。
操作二、操作要点:(一)薄层层析1、铺制薄层板将吸附剂1份和水2.5-3.0份(或加入黏合剂的水溶液)在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,进行涂布(厚度为0.2~0.3mm),颠板,于室温下,置水平台上晾干,在反射光及透视光下检视,表面应均匀,平整,无麻点、无气泡、无破损及污染,于100-110℃烘30分钟,冷却后立即使用或置干燥箱中备用。
2、点样用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边1.0~1.5cm,样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。
若因样品溶液太稀,可重复点样,但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样,以防样点过大,造成拖尾、扩散等现象,而影响分离效果。
点样时必须注意勿损伤薄层表面。
注:在薄层色谱中,样品的用量对物质的分离效果有很大影响,所需样品的量与显色剂的灵敏度、吸附剂的种类、薄层的厚度均有关系。
样品太少,斑点不清楚,难以观察,但样品量太多时往往出现斑点太大或拖尾现象,以至不易分开。
3、展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜,密封,待展开至规定距离(一般为8~15cm),取出薄层板,晾干,待检测。
制作薄层色谱硅胶板经验总结
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制作薄层色谱硅胶板经验总结
(1)CMC配制:CMC的浓度为3-4‰。
在500ml烧杯中加入150ml水,在磁力搅拌器搅拌下慢慢加入1.75gCMC,促使其溶解,搅拌20min后,再加入350ml水,一直搅拌1h。
抽滤得CMC溶液待用。
(2)硅胶液配制:在研钵中加入约100ml上述CMC溶液,用研棒不断搅拌下,慢慢加
入硅胶GF254粉末(CMC水溶液的用量大约是硅胶质量的2-3倍之间),直至感到液体变得较粘稠状,且用研棒蘸取硅胶液可见粘丝状即可。
切记不能马上就开始铺板,需要将其再放置约十几分钟,以使硅胶粉末能够充分吸收水分溶胀,过早铺板,将会造成硅胶板起泡、起鼓或起楞等。
(3)铺板:用药勺取适量硅胶液置于玻璃板上,并用药勺大致均匀地摊开,尤其四个角及边缘铺满,然后将该玻璃板在桌面上做上下地且幅度要大些颠动几次即可。
(4)干燥:自然晾干十几小时。
(5)活化:放在恒温干燥箱里于105-110℃干燥30min,然后冷却室温,取出存放在干燥器保存,待用。
小型薄层色谱在药物合成中的使用方法经验总结
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小型薄层色谱在药物合成中的使用方法经验总结薄层色谱法(TLC,thin-layer chromatography)是一种在铺成薄层的固体上进行的平面色谱方法, 由俄国学者N·A·Izmailov等在1938年首次报导。
但直到1956 年德国学者E1Stahl较完整地发展了这个方法,TLC才得到广泛重视和研究,成为色谱法的一个重要分支,处于活跃和发展状态。
EStahl因此项工作获得IUPAC的Talanta(分析化学)大奖。
薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)具有相同的分离原理,是依据不同物质在流动相与固定相之间的吸附和解吸速率不同来进行物质的分离。
薄层色谱与纸色谱、柱色谱等属于传统分析;高效液相色谱、质谱、气谱等属于仪器分析。
随着时代的发展,仪器分析渐渐取代传统分析,现已成为主流。
仪器分析在精密性、准确性、连续性、重现性等方面,有着传统分析达不到的优点。
例如定量分析多组分有机混合物,或者在有标准品的情况下确定未知物时, HPLC法与TLC法比较,具有准确度高、重现性强的优点。
但是和传统分析比较,仪器分析主要的弱点就是不灵活,必须按照固定的程序操作,更改条件比传统方法繁琐得多。
其次是成本高的问题,先期投入大、人员培训周期长、运行维护的人力、物力费用高。
相反,这些正是传统分析的优点。
因此,在普通的有机合成、精细化工实验室,传统分析仍不可完全被代替,其优势在于灵活多变、应用方便、成本低廉。
TLC法有着悠久的历史,随着经济发展,对外交流增多,很多实验室已采用商品化的薄层板,如涤纶片基硅胶板。
商品化硅胶板和自制硅胶板相比,具有性能稳定、重现性高的特点,可进行半定量分析[1]。
总之,与经典的柱上色谱,常用的气相色谱、纸上色谱,以及较近发展起来的高效液相色谱比较,TLC有以下特点:1) 设备简单,操作方便;2)快捷,展开时间短;3)可采用多种固定相及显色手段,方法多样而高效;4)可广泛选择流动相;5)检出灵敏度高,一般可达10-10g 以下;6)样品量适用范围大;7)技术多样化, 特别是二维展开、浓度梯度展开等,展开机理亦有吸附、分配、离子交换、电泳、等电聚焦等多种,可联合采用数种手段,为其它色谱技术所不及。
制作薄层色谱硅胶板经验总结精编版
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制作薄层色谱硅胶板经验总结精编版薄层色谱是一种常用的物质分离和鉴定技术,通过在硅胶板上制作悬浮相,将待分离物质进样后在基质上进行分离,通过对色谱层的观察和分析,可以得到样品的分离情况和相对含量。
下面是我对制作薄层色谱硅胶板的经验总结。
1. 选择合适的硅胶板:硅胶板是薄层色谱的基质,质量的好坏直接影响到色谱层的质量和分离效果。
通常采用厚度为0.25-0.3mm的板材。
在选择时要注意背面颜色均匀,有透明感,无覆盖物质和明显的缺陷。
2.打磨和预处理硅胶板:为了去除硅胶板表面的不均匀和杂质,提高基质的均匀性,可以在背面用纸砂轻轻打磨硅胶板。
然后,用氮气或热风吹干板面,去除表面附带的水分和有机溶剂。
3.制作悬浮相:将所需的悬浮相混合物按比例加入玻璃瓶中,然后用纯净水调整到适当的浓度。
在制作过程中,可根据需要添加适量的吸附剂,如硅胶和活性炭,以增强分离效果。
4.涂敷悬浮相:在制作前,应将板面用无乳化洗涤剂和去离子水充分去洗,并用纯净水冲洗干净。
然后,倒入适量的悬浮相液体在硅胶板上,用旋转涂布器均匀涂布,以保证色谱层的均匀性和一致性。
5.干燥和活化:将涂敷好的硅胶板放在通风干燥的地方,待其完全干燥后,可进行活化处理。
活化可以用热风枪轻轻吹热板面,使其温度不超过100°C,以去除悬浮相中的残留水分和有机溶剂。
6.封装和保存:将活化处理好的硅胶板用无菌无灰纸或塑料封装袋包好,避免灰尘和湿气的侵入。
存放在阴凉、干燥、少光的环境中,可以延长存储时间和保持色谱层的质量。
7.薄层色谱分析:在进行薄层色谱分析时,首先根据实验需要切割出所需的色谱片,然后将样品点于硅胶板上,使用盖玻片封装好。
通常在铅笔线上方作标记,并在左上角写上样品信息。
然后将色谱片放入显色池中进行显色,观察颜色变化,并对色谱层进行分析和记录。
以上就是我对制作薄层色谱硅胶板的经验总结,这些步骤可以帮助保证制作出质量良好的色谱层,并提高色谱分离效果。
薄层色谱法实验报告结论
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薄层色谱法实验报告结论一、实验目的本次实验的目的是通过薄层色谱法(TLC)对混合物中的各组分进行分离和鉴定,掌握薄层色谱法的基本原理和操作技术,并对实验结果进行分析和总结。
二、实验原理薄层色谱法是一种基于吸附、分配、离子交换等作用,将混合物在固定相(通常是硅胶或氧化铝等吸附剂)和流动相(通常是有机溶剂)之间进行分配,从而实现分离的色谱技术。
混合物中的各组分在固定相上的吸附能力不同,在流动相中的溶解度也不同,因此在展开过程中,各组分移动的速度不同,从而在薄层板上形成不同的斑点,实现分离。
三、实验材料与仪器1、实验材料待分离混合物样品标准品硅胶 G 板展开剂(如乙酸乙酯石油醚、氯仿甲醇等)2、实验仪器层析缸点样毛细管紫外灯喷雾显色剂(如碘蒸气、硫酸乙醇溶液等)四、实验步骤1、制板将硅胶 G 与适量的蒸馏水在研钵中充分混合,调成均匀的糊状。
将调制好的硅胶糊均匀地涂布在干净的玻璃板上,形成厚度均匀的薄层。
室温下晾干,然后在105℃的烘箱中活化30 分钟,取出冷却备用。
2、点样用点样毛细管吸取适量的样品溶液,在距薄层板底边 15 20 cm 处轻轻点样,点样直径一般不超过 2 3 mm。
同时点上标准品溶液作为对照。
3、展开将点好样的薄层板放入预先装有展开剂的层析缸中,使展开剂的液面低于点样线。
盖上缸盖,让展开剂在密闭的缸内沿薄层板向上展开。
当展开剂前沿上升到距薄层板顶端 1 2 cm 处时,取出薄层板,晾干。
4、显色根据样品的性质选择合适的显色方法,如在紫外灯下观察荧光斑点,或用喷雾显色剂显色。
5、计算比移值(Rf 值)测量斑点中心到点样点的距离(a)和展开剂前沿到点样点的距离(b),计算比移值(Rf = a / b)。
五、实验结果与分析1、实验结果记录实验中观察到的斑点颜色、形状、大小等特征。
测量各斑点的 Rf 值,并与标准品的 Rf 值进行对比。
2、结果分析根据斑点的数量和位置,判断混合物中所含组分的种类和数量。
薄层色谱工作总结

薄层色谱工作总结
薄层色谱是一种常用的分离和分析技术,广泛应用于化学、生物、药学等领域。
在过去的一段时间里,我有幸参与了薄层色谱工作,并且积累了一些经验和心得。
在这篇文章中,我将对薄层色谱的工作进行总结,并分享一些我在实践中所学到的知识。
首先,薄层色谱的原理是利用不同物质在固定相和流动相的作用下,通过色谱
板上的分离和迁移来实现分离和检测。
在实际工作中,我们需要准备好色谱板、样品、溶剂和显色剂等实验材料,并严格按照操作规程进行操作。
在样品的制备和处理上,要注意保持样品的纯净度和稳定性,以确保色谱分离的准确性和可靠性。
其次,在薄层色谱的工作中,选择合适的色谱板和流动相是非常重要的。
不同
的固定相和流动相对于不同的样品具有不同的分离效果,因此需要根据实际情况进行选择。
在实验操作中,要注意控制色谱板的温度和湿度,避免外界因素对实验结果的影响。
另外,薄层色谱的结果分析也是至关重要的。
在色谱板上,我们可以通过裸眼
观察或者使用显色剂来观察样品的分离情况,并进行定性和定量分析。
同时,我们还可以使用扫描仪等仪器对色谱板进行数字化处理,以获得更加准确和可靠的实验结果。
总的来说,薄层色谱工作需要我们具备严谨的实验态度和扎实的理论基础。
通
过不断的实践和总结,我们可以不断提高自己的实验技能和分析能力,为科学研究和实际应用提供更加可靠和有效的数据支持。
希望我的总结和分享能够对正在从事或者将要从事薄层色谱工作的同行们有所帮助。
薄层色谱经验总结
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薄层色谱经验总结薄层色谱(Thin-layer chromatography,TLC)是一种常用的色谱分析技术,广泛应用于有机合成、药物分析和天然产物研究等领域。
以下是我在进行薄层色谱实验中的经验总结。
首先,样品的制备非常重要。
样品应当高纯度,如果样品含有杂质,可能会干扰实验结果或导致染色偏移。
对于无法蒸馏净化的样品,可以采用其他方法如碱处理、酸处理或萃取来除去杂质。
其次,色谱板的选择也是关键。
常见的色谱板材料有硅胶、铝箔、玻璃和聚胺酯,不同材料适用于不同类型的样品。
例如,硅胶色谱板适用于一般有机物的分析,而铝箔色谱板适用于氨基酸和蛋白质的分析。
在进行样品上色时,也需要注意控制上色的时间和浓度。
通常,上色时间不宜过长,以避免因染料溶液渗透过硅胶层而降低色谱分离效果。
另外,染料浓度也要适当,过高的浓度可能会造成带有阴影的色带,影响结果的准确性。
进行薄层色谱实验时,还需注意样品的施加量。
较少的样品量可能导致色谱带变窄,不易观察和分析;而较多的样品量则可能导致色谱带展宽。
因此,在操作过程中,需要根据实际需要和样品的性质,选择适当的样品施加量。
在样品施加的过程中,需要确保样品与色谱板表面的接触充分,避免施加不均匀。
为了确保样品施加均匀,可以使用加样器或者连续分析仪器。
对于有机化合物的分析,可以通过预吸附来增加色谱系统与样品之间的相互作用,进而提高分离效果。
在样品施加后,需要将色谱板置于色谱槽中,以实现样品的分离。
“移液法”是一种常用的单向移液方法,适用于色谱槽与色谱板比例较大的情况。
而“渗透法”则适用于色谱槽与色谱板比例较小的情况,可以在色谱板的底部放置几层滤纸,通过滤纸的渗透作用进行移液。
在移液过程中,需要注意移液的速度和移液液体的浓度。
过快的移液速度可能会导致色谱分离效果不理想,而过慢的移液速度可能会使液体在色谱板表面停滞时间过长,影响分析的准确性。
另外,移液液体的浓度也要适当,过高的浓度可能会导致色谱带的展开,降低分离效果。
_薄层色谱总结

薄层色谱方法总结1.方法原理(1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2) 样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极 -(诱导) - 偶极相互作用,氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
2.溶剂使用的溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯”,溶剂组成采用体积量比(如正丁醇 - 冰乙酸 - 水= 4:1:1,V/V/V),或者绝对量(如18ml 甲苯 + 2 ml 甲醇)。
其总量应足以使TLC/HPTLC 板的浸入深度约为5mm。
展开剂要求新鲜配制,不要多次反复使用,如需分层,则按要求放置分层后取需要的一相(上层或下层),备用。
一、溶剂选择规则:1、考虑分离成分的极性、溶解度、吸附度。
2、先加入极性较小的溶剂,若不容再加入少量极性大的溶剂3、一般根据相似相溶原则,需要注意,极性相差大的不混溶。
4、混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂。
5、展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂,就首先尝试使用该类展开剂,然后不断尝试比例,直到找到一个分离效果好的展开剂。
6、一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例(或者加入第三种溶剂),达到最佳效果;如果没有分开的迹象(斑点较“拖”),最好是换溶剂。
二、展开剂的选择条件:①对的所需成分有良好的溶解性;②可使成分间分开;②待测组分的Rf在0.2~0.8之间,定量测定在0.3~0.5之间;③不与待测组分或吸附剂发生化学反应;⑤沸点适中,黏度较小;⑥展开后组分斑点圆且集中;⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
三、溶剂极性参数表环已烷 :-0.2、石油醚(Ⅰ类,30~60℃)、石油醚(Ⅱ类,60~90℃)、正已烷:0.0、甲苯:2.4、二甲苯:2.5、苯:2.7、二氯甲烷:3.1、异丙醇:3.9、正丁醇:3.9、四氢呋喃:4.0、氯仿:4.1、乙醇:4.3、乙酸乙酯:4.4、甲醇:5.1、丙酮:5.1、乙腈:5.8、乙酸:6.0、水:10.2 1、一般来说,弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成,再根据需要加入甲醇、乙醇,乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性,以达到好的分离效果,适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离;2、中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成,由甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于蒽醌、香豆素,以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离;3、强极性溶剂,由正丁醇和水组成,也靠甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
薄层色谱经验总结

关于配制CMC-Na:1.先将称好的CMC加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,在加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短.2.CMC溶液的浓度0.3-0.7%比较合适,实际操作中0.4%~0.5%最为实用,浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑,浓度低了铺出来的板子不结实,轻轻一碰就掉渣,不好保存,而且点样时会很紧张,容易出洞.3.0.5%CMC-Na与水浴溶涨至充分搅拌溶涨,如果不好溶涨,可在溶胀前加几滴乙醇,比较好溶,但是尽量不加,因为加入乙醇后使CMC-Na的粘合性降低。
充分溶胀后,用脱脂棉垫到布氏漏斗上抽滤。
封口冷藏待用。
4.(1)CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑,否则,几天以后就会变绿,起霉。
注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄,而且可能有霉菌出现,绝对不能再使用。
(2)如果有抽滤装置你可以直接把CMC-Na溶液滤过,就可以不必等它沉淀再取上清液了(嘿嘿,我是急性子),还有两个好处一是节省CMC-Na溶液,二是倒滤过的CMC-Na溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了!)有个办法过滤CMC溶液,在布氏漏斗上平铺薄薄一层脱脂棉,千万保证每个小孔都没漏掉哦!用蒸馏水润湿脱脂棉,启动真空泵,抽紧后就可以放心大胆的倒CMC溶液了,保证滤过的溶液澄清透明,而且长时间放置不沉淀。
5.CMC-Na是一种高分子材料,而高分子材料的溶解必然都会有一个溶胀,溶解的过程,所以配制的时候,应该将称好的CMC-Na少量的撒在水的表面,让其自然沉降,注意要散开平铺,这样能够充分浸润,使其溶胀,之后可以置于水浴锅内加热溶解,当然如果你不是很急着用的话也完全可以,直接用水泡着放那,估计十天半月的也可以用了.6..CMC-Na的配制,大家也说了很多,我只是想说一下在CMC-Na的溶解过程中,可以使用可进行加热操作的磁力搅拌器,大概搅拌5小时,应该可得到满意的效果。
_薄层色谱总结分析

薄层色谱方法总结1.方法原理(1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2) 样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极- (诱导)- 偶极相互作用,氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
2.溶剂使用的溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯”,溶剂组成采用体积量比(如正丁醇- 冰乙酸- 水= 4:1:1,V/V/V),或者绝对量(如18ml 甲苯+ 2 ml 甲醇)。
其总量应足以使TLC/HPTLC 板的浸入深度约为5mm。
展开剂要求新鲜配制,不要多次反复使用,如需分层,则按要求放置分层后取需要的一相(上层或下层),备用。
一、溶剂选择规则:1、考虑分离成分的极性、溶解度、吸附度。
2、先加入极性较小的溶剂,若不容再加入少量极性大的溶剂3、一般根据相似相溶原则,需要注意,极性相差大的不混溶。
4、混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂。
5、展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂,就首先尝试使用该类展开剂,然后不断尝试比例,直到找到一个分离效果好的展开剂。
6、一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例(或者加入第三种溶剂),达到最佳效果;如果没有分开的迹象(斑点较“拖”),最好是换溶剂。
二、展开剂的选择条件:①对的所需成分有良好的溶解性;②可使成分间分开;②待测组分的Rf在0.2~0.8之间,定量测定在0.3~0.5之间;③不与待测组分或吸附剂发生化学反应;⑤沸点适中,黏度较小;⑥展开后组分斑点圆且集中;⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
三、溶剂极性参数表环已烷:-0.2、石油醚(Ⅰ类,30~60℃)、石油醚(Ⅱ类,60~90℃)、正已烷:0.0、甲苯:2.4、二甲苯:2.5、苯:2.7、二氯甲烷:3.1、异丙醇:3.9、正丁醇:3.9、四氢呋喃:4.0、氯仿:4.1、乙醇:4.3、乙酸乙酯:4.4、甲醇:5.1、丙酮:5.1、乙腈:5.8、乙酸:6.0、水:10.21、一般来说,弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成,再根据需要加入甲醇、乙醇,乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性,以达到好的分离效果,适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离;2、中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成,由甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于蒽醌、香豆素,以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离;3、强极性溶剂,由正丁醇和水组成,也靠甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
薄层色谱学习报告

超过 10 厘米,否则可引起色谱扩散影响分离效果。 最常用的吸附剂是氧化铝和硅胶。
(1)氧化铝: 国产层析用氧化铝有碱性、中性、酸性三种,以中性氧化铝应用较广。 特点:氧化铝为吸附力较强的极性吸附剂,它适用于中性或者碱性的亲脂性
化合物的分离。通常氧化铝的吸附能力与其自身的含水量有关。含水越多,吸附 活性越小,吸附能力越小。 (2)硅胶:
吸附 TLC:固定相为吸附剂上。
2.1 吸附薄层的基本原理
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们 的解吸附能力的不同,使各成分达到分离的。吸附作用主要由于物体表面作用力、 氢键、络合、静电引力、范德华力等产生。吸附强度决定于吸附剂的吸附能力, 还受被吸附成分的性质影响,更与展开剂的性质有关。
二、薄层色谱的简介
薄层色谱是将吸附剂或支持剂均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把要分离 的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于分 离在薄层上进行故而得名。根据分离的原理不同,薄层色谱可以分为两类:用吸 附剂铺成的薄层所进行的分离为吸附薄层色谱,吸附薄层色谱中常用的吸附剂为 氧化铝和硅胶;用纤维素粉、硅藻土等支持剂铺成的薄层进行分离的,属于分配 薄层色谱。
3.3 将选定的展开剂倒入展开池中,使其刚好没过薄层板边缘为宜。
盖好盖子,使展开池中展开剂达到饱和。
3.4 将化合物在标记过的基线处进行点样
点 样 是 将 经 处 理 后 的 样 品 点 加 在 薄 层 的 特 定 部 位 ,这 是 一 项 需 要 十 分 仔 细的操作步骤,点样的好坏会直接影响分离效果。
常用溶剂的极性从小到大排列顺序如下: 石油醚,环己烷,四氯化碳,甲苯,二氯甲烷,丙酮,乙酸乙酯,乙醇,乙 酸,水。 使用单一溶剂,往往不能达到很好的分离效果,使用混合溶剂通常使用一个 高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂,高极性的溶剂还有增加区分度的作用。 展开剂的比例要靠尝试。一般首先尝试文献中报道的该类化合物所使用的展 开剂,然后不断尝试不同比例,直到找到一个分离效果好的展开剂。展开剂的选 择条件:(1)对所需成分有良好的溶解性;(2)待分离物各组分之间的 Rf 在 0.2~0.8 之间;(3)不与待测组分或吸附剂发生化学反应;(4)沸点适中,黏度较小;(5) 展开后组分斑点圆且集中;(6)混合溶剂最好用新鲜配制。对于在硅胶中这种酸 性物质上易分解的物质,在展开剂里往往加一点点三乙胺,氨水,吡啶等碱性物 质来中和硅胶的酸性。选择所添加的碱性物质,还必须考虑容易从产品中除去, 氨水无疑是较好的选择。
薄层色谱方法总结
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薄层色谱方法总结1、一般根据相似相溶原则,需要注意,极性相差大的不混溶。
2、一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例(或者加入第三种溶剂),达到最佳效果;如果没有分开的迹象(斑点较“拖”),最好是换溶剂。
3、待测组分的Rf在0.2~0.8之间,定量测定在0.3~0.5之间4、一般来说,弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成,再根据需要加入甲醇、乙醇,乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性,以达到好的分离效果,适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离;5、中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成,由甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于蒽醌、香豆素,以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离;6、强极性溶剂,由正丁醇和水组成,也靠甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
7、甲酸通常指的是浓度85%左右的,含有水。
8、对于极性化合物,使用正丁醇对斑点扩散影响较小,因为化合物和硅胶的作用强。
9、点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边1.0~1.5cm,样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。
若因样品溶液太稀,可重复点样,但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样,以防样点过大,造成拖尾、扩散等现象,而影响分离效果。
10、PE(60-90)EtAc/PE=1:2 EtAc/PE/AcOH=15:5:1 EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年来我用这四种体系,没有出现过什么问题.我一直在用的是乙酸乙酯:环已烷,不断调节比例,直到有满意的Rf值,有拖尾时可能要加酸或碱,我一般乙酸和三乙胺11、铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。
12、样品溶液的含水量越小越好,样品溶液含水量大,点样斑点扩散大。
样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂

最全的TLC经验薄层色谱(TLC)是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。
流动相则是一种极性待选的溶剂。
在中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用毛细作用使溶剂(或混合溶剂)沿板向上移动进行展开。
根据混合物中组分的极性,不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上,在薄板上移动的距离比较短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf 值来表达。
这是一个位于0~1之间的数值,它的定义为:化合物距离基线(最先点样时已经确定)的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱(TLC)实验步骤:1) 切割薄板。
通常,买来的硅胶板都是方形的玻璃板,必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。
在切割玻璃之前,用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置(注意不要损坏硅胶面)。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺,你便可方便地进行玻璃切割。
当整块玻璃被切割后,你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。
(开始的时候,也许你会感到有一些难度,但经过一些训练以后,你便会熟练地掌握该项技术。
)2) 选取合适的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中,大多数极性物质不会移动,但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反,极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线,但并不使所有化合物都到达溶剂前端,Rf值最好在~之间。
虽然这个条件不一定都能满足,但这应该作为薄层色谱分析的目标(在柱色谱中,合适的溶剂应该满足Rf在~之间)。
那么,应该选取哪些溶剂呢?一些标准溶剂和他们的相对极性(从LLP中摘录)列于如下:强极性溶剂:甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂:乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂:环己烷,石油醚,己烷,戊烷常用混合溶剂:乙酸乙酯/己烷:常用浓度0~30%。
薄层色谱实践经验技巧总结
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7. 手工铺制的板子常用的有:硅胶G板和硅胶CMC-Na板。前者是煅石膏(石膏经140℃烘烤3—4小时)与硅胶按1—1.3:10混合均匀。每份硅胶G加水2—3份调成糊状,即可使用。后者的操作各位大虾已有论述。
8. 如果你铺板目的是做分析用的话,肯定得很仔细用心;如果仅是天然药化那种粗略检查过柱子得到的馏分纯度,那就没有必要这么复杂了,也就是说速度可以快点,板的要求也没有必要这么高;
15. 当展开剂极性差别很大时,特别是极性大的成分所占比例很小时,往往会出现溶剂脱混现象。在这种情况下,展开槽 饱和与不饱和差别没有显著性差异,薄层板上往往会出现类似分层的现象,所以只有换展开系统来调整。
16. 甲醇用量较小,而甲醇又易挥发,容易产生边缘效应,要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。
14. 展开剂的选择(分离单体):
(1)粗分,也就是当你的样品极性范围比较大的时候,可以直接采用极性较小的流动相。然后将前沿、原点以及前沿及原点间的硅胶分别刮下,提取。这样,样品就被分为几个部分,而各个部分的极性相差也比较小了。然后
再将这几部分分别进行下面的细分TLC 。
40. 制备CMC-Na时,我的方法是将CMC-Na加入沸腾的水中,慢加快搅,防止成团,完全溶解之后,自然沉降或者是抽滤(建议不用滤纸,太慢了,脱脂棉是个不错的选择)。
41. 对于CMC-Na溶液的配置,我认为最好提前几日配好,放置再用。配置时可用超声分散,对少量没有立即溶解的,放置后会逐渐消失。
薄层层析(TLC)实践经验技巧总结:
1. 药典:薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上,在展开容器内用展开剂展开,使供试品所含成分分离,所得色谱图与事宜的对照物按同法所得的色谱图对比,并可用薄层扫描仪进行扫描,用于鉴别、检查或含量测定。
最全的薄层色谱(TLC)经验
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最全的薄层色谱(TLC)经验薄层色谱(TLC)是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。
流动相则是一种极性待选的溶剂。
在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用毛细作用使溶剂(或混合溶剂)沿板向上移动进行展开。
根据混合物中组分的极性,不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上,在薄板上移动的距离比较短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf值来表达。
这是一个位于0~1之间的数值,它的定义为:化合物距离基线(最先点样时已经确定)的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱(TLC)实验步骤:1)切割薄板。
通常,买来的硅胶板都是方形的玻璃板,必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。
在切割玻璃之前,用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置(注意不要损坏硅胶面)。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺,你便可方便地进行玻璃切割。
当整块玻璃被切割后,你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。
(开始的时候,也许你会感到有一些难度,但经过一些训练以后,你便会熟练地掌握该项技术。
)2)选取合适的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中,大多数极性物质不会移动,但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反,极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线,但并不使所有化合物都到达溶剂前端,Rf值最好在0.15~0.85之间。
虽然这个条件不一定都能满足,但这应该作为薄层色谱分析的目标(在柱色谱中,合适的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间)。
薄层色谱实验小结
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薄层色谱实验小结
一、薄层板的制备
在薄层色谱实验中,薄层板的制备是关键步骤之一。
我们采用了优质硅胶G为基质,以10%的羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂,按照国标要求进行了制备。
制备过程中需要注意控制硅胶的粒度、粘合剂的浓度和涂布的均匀性,以确保薄层板的分离效果和重现性。
二、点样
点样是薄层色谱实验中的重要步骤,点样的位置、大小和深度都会影响分离效果。
我们采用了毛细管进行点样,确保点样量的准确性和均匀性。
点样过程中需要注意控制毛细管的直径和点样压力,以避免拖尾和扩散现象。
三、展开
展开是薄层色谱实验中的关键步骤,它决定了分离效果和分离时间。
我们采用了上行展开方式,以避免边缘效应和重现性差的问题。
展开过程中需要注意控制展开剂的种类、浓度和展开速度,以保证分离效果和分离时间的最优化。
四、显色
显色是薄层色谱实验中的重要步骤,它可以帮助我们判断各组分的性质和含量。
我们采用了多种显色方法,如紫外灯照射、碘熏、硫酸熏等,以获得最佳的显色效果。
显色过程中需要注意控制显色剂的种类、浓度和使用方法,以保证显色的准确性和重现性。
通过本次薄层色谱实验,我们成功制备了优质的薄层板,并掌握
了薄层色谱的基本操作技能。
在实验过程中,我们也发现了一些问题,如点样不均匀、展开不充分等,需要进一步改进和完善。
通过不断学习和实践,我们将进一步提高薄层色谱实验的技能和水平。
薄层色谱总结

薄层色谱总结简介薄层色谱(Thin Layer Chromatography,简称TLC)是一种常用的分离技术,广泛应用于化学、生化、药学等领域。
相比于其他分离方法,薄层色谱具有操作简便、分离效率高以及成本低廉等优点。
本文将对薄层色谱的原理、实验操作和应用进行总结。
原理薄层色谱的原理是通过样品组分在薄层固体质粒上的相互分配行为来实现分离。
在薄层色谱中,固定相通常为一层薄薄的固体,被涂刷或吹扩在一种称为色谱板的玻璃、铝或塑料基质上。
而液相则以毛细吸附相的形式存在,填充在固定相的孔隙中。
当样品溶液通过色谱板时,不同组分会在固定相和液相之间发生分配。
这是由于不同组分对固定相和液相的亲疏水性或极性的差异导致的。
根据样品组分与固定相和液相的相互作用力强度的不同,不同组分会在色谱板上发生分离。
实验操作材料准备进行薄层色谱实验需要准备的材料有:•薄层色谱板:选择合适的基质,可以根据需要选择不同的涂层(例如硅胶、氨基硅胶等)。
•涂层溶液:根据需要选择不同的涂层溶液,将其涂抹或吹扩在色谱板上。
•样品溶液:将待分离的化合物溶解在适当的溶剂中,使得其浓度适宜。
•原色标记剂:用于判定实验进展,一般为毒性较小的化合物。
实验步骤1.准备薄层色谱板:将涂层溶液涂抹或吹扩在色谱板上,注意均匀涂布以确保实验结果的准确性。
2.样品点样:使用微量注射器或毛细玻璃管,在色谱板上点样品溶液。
3.色谱板开发:将色谱板放入封闭的薄层色谱槽中,注入适当液相溶剂,待其上升至一定高度后取出。
4.开发结果观察:使用荧光灯、紫外灯或显色剂观察点样的位置、颜色和形态,并将其标记出来。
5.数据处理:根据开发结果,计算各组分相对迁移率(Rf值)或保留因子(k值)等参数。
应用领域薄层色谱在许多领域都有广泛的应用,包括但不限于:1.药学:用于药物的质量控制、药物纯度分析等。
2.化学:用于化合物的鉴定、定量分析以及分离纯化。
3.生物化学:用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离和鉴定。
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关于配制CMC-Na:1.先将称好的CMC加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,在加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短.2.CMC溶液的浓度0.3-0.7%比较合适,实际操作中0.4%~0.5%最为实用,浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑,浓度低了铺出来的板子不结实,轻轻一碰就掉渣,不好保存,而且点样时会很紧张,容易出洞.3.0.5%CMC-Na与水浴溶涨至充分搅拌溶涨,如果不好溶涨,可在溶胀前加几滴乙醇,比较好溶,但是尽量不加,因为加入乙醇后使CMC-Na的粘合性降低。
充分溶胀后,用脱脂棉垫到布氏漏斗上抽滤。
封口冷藏待用。
4.(1)CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑,否则,几天以后就会变绿,起霉。
注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄,而且可能有霉菌出现,绝对不能再使用。
(2)如果有抽滤装置你可以直接把CMC-Na溶液滤过,就可以不必等它沉淀再取上清液了(嘿嘿,我是急性子),还有两个好处一是节省CMC-Na溶液,二是倒滤过的CMC-Na溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了!)有个办法过滤CMC溶液,在布氏漏斗上平铺薄薄一层脱脂棉,千万保证每个小孔都没漏掉哦!用蒸馏水润湿脱脂棉,启动真空泵,抽紧后就可以放心大胆的倒CMC溶液了,保证滤过的溶液澄清透明,而且长时间放置不沉淀。
5.CMC-Na是一种高分子材料,而高分子材料的溶解必然都会有一个溶胀,溶解的过程,所以配制的时候,应该将称好的CMC-Na少量的撒在水的表面,让其自然沉降,注意要散开平铺,这样能够充分浸润,使其溶胀,之后可以置于水浴锅内加热溶解,当然如果你不是很急着用的话也完全可以,直接用水泡着放那,估计十天半月的也可以用了.6..CMC-Na的配制,大家也说了很多,我只是想说一下在CMC-Na的溶解过程中,可以使用可进行加热操作的磁力搅拌器,大概搅拌5小时,应该可得到满意的效果。
而且这样就可以使CMC-Na溶解,并且溶液更澄清。
.CMC-Na后处理,很多人说是过滤,或者抽滤,我觉得可能速度很慢,而且又容易浪费。
我的做法是离心,5000rpm离心20min。
倒出上清液,(非常清,也同时消除了过滤过程中可能发生的污染。
)更难能可贵的是,我可以收集下面没有充分溶解的CMC-Na。
继续加到水中,还可以配制!!何乐而不为呢?7.铺CMC-Na的薄层板,先将CMC-Na溶解完全,可将溶解成所需浓度加热后超声处理,再抽滤,可很快得到上清液关于薄层板的要求:1.载板要求平滑清洁,没有划痕,在使用前可用洗涤液或肥皂水洗涤,再用水冲洗干净,干。
2. 怎么样的玻璃算是干净:就是用洗洁精浸泡也好,用酸浸泡也好,当你觉得洗干净的时候,拿在手上立起来,如果发现水不是呈股流下,而是呈瀑布状态流下,那么说明你的玻璃已经洗干净了。
其实真正洗干净的玻璃,很快就可以晾干的。
3.怎样清洗用过后的薄层板,我试着用了洗衣粉、洗洁净,反复洗了数遍,仍然挂水珠。
铺制薄层板要求玻璃板干净、整洁、不挂水珠的。
建议用洗液泡。
如果还解决不了那就只好放弃这块玻璃板了,有说可以用盐酸的。
关于研磨及铺板要求:1. 取薄层层析硅胶重量与CMC-Na的体积比为1:4的比例(该比例能使硅胶板铺出的效果较好不至于掉渣也不至于板太硬)充分混合碾磨,至拿起碾锤能看到混合液与碾锤有一定的粘连。
即好。
薄层板一定要光滑无油污,取一定量的溶液置板上,用薄棒引导使其铺满板面,一手托起硅胶板另一手在下轻轻敲,转动板子均匀的敲匀。
2. 硅胶的研磨,当然是一个方向了,可以适量的加入一定量的无水乙醇或丙酮来消泡,也可以适当搅拌后放在干净容器内超声,效果都是不错的。
手工铺硅胶的用量一般10*20的约3~4克,硅胶和CMC-Na的用量一般是1:2.8~3,具体根据要铺板子的厚度和CMC-Na 的浓度决定。
3.依据薄层板使用需要,将适量研好的吸附剂倒到薄层板上,先用小锤将吸附剂荡匀,倾斜层析板,使吸附剂流至层析板一侧,待吸附剂蓄积一定量后,再反向倾斜层析板,使吸附剂回流;然后是另外两个方向,重复上述操作,后轻颠几下薄层板即可。
4.将载玻片置于平台上,用药匙舀取糊状硅胶,均匀地铺在载玻片表面。
铺板时,可以顺着板中间倒,也可以顺着某个边缘倒,也可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上,倒时也要注意不要引入小气泡。
如有需要,可以双手10个指头托住玻璃板,有节奏的颠簸,使得糊状硅胶分布匀称。
尤其是载板的四个角,容易高出玻璃板其他部位,所以要格外注意。
颠好的板,表面看上去要光滑平整,没有气孔。
薄层板铺好后一定要放置在平的台面上,否则难保证板面硅胶的厚度均匀。
5. 铺制好的薄层板先让其稍干后,即看不出有明显的水印,放入烘箱内用50度以下的温度并开鼓风干燥30分钟,再升温干燥至干,注意升温过快在使用的过程中有可能发生起层的现象不利于分离,以上方法经本人两年多的实践效果较好且耗时又不太长。
6. 10g吸附剂加入3滴95%乙醇以驱赶气泡;关于展开剂:1.分离的样品酸性比较大,一般在展开剂中加酸2.加甲酸是因为该样品是酸性的,加酸的量和该物质的酸性成正比关系,加水可能是因为你的样品是苷类的用酸水做一下缓冲,目的就是让斑点圆滑,不脱尾,展距良好。
3.饱和也非常重要,边缘效应很严重的不妨用下端浸在展开剂中的滤纸贴在展开缸的内壁,这样饱和效果会好一些4.1)在层析缸口涂适量凡士林,增加密封性;2)以展开剂边缘效应的大小,确定展开剂平衡时间的长短,一般平衡时间在30分钟即可。
5.有机溶剂的极性,甲醇>氯仿,因此在氯仿:甲醇:氨水(10:1:0.6)这个展开剂中,如果极性略大,可适当降低甲醇比例;如极性太小,可适当增大甲醇比例。
氯仿:甲醇:氨水10:1:0.6 和20:2:1.2 极性肯定是相同的,这有问题吗?另外还有一个问题,这个展开剂中,甲醇用量较小,而甲醇又易挥发,容易产生边缘效应,要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。
6.不同的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂不同(最好是不同分类组的溶剂),而不是比例不同。
或者使用不同的固定相。
关于展开:1.TLC中样品拖尾现象是什么原因?该如何解决?2.TLC中样品跑成几乎为一条线,斑点没有清晰的分离,想请教一下这是什么原因造成的?一般情况下该如何解决?造成问题1的原因基本相同:a、对于一些具有酸碱性的化学成分,在溶液中部分电离,事实上展开时存在分子、离子两种状态,以中性的有机试剂展开必然会出现两种层析行为,造成脱尾甚至是一条线。
b、展开剂选择不当c、点样量过大,样品超载解决办法:a、在展开剂中加几滴甲酸或冰醋酸;b、展开时以氨水饱和c、减少点样量d、参考文献,调整展开剂种类、比例2.我想问问,关于TLC二次展开,是在第一次展开显色后再在继续第二次展开,还是在第一次展开后,换另一种展开剂接着展开啊??请哪位大侠指点一下关于TLC的二次展开。
二次展开是依据样品定的,但肯定要在第一次展开后,将板晾干或吹干,再放入另一种展开剂中展开,有的样品二次展开还要换展开方向,和原方向垂直。
所以要以实际分离样品需要而定。
一般是因为样品成分多,极性差别有的大,有的关于显色:1.在工作中研究过用硫酸乙醇显色作定量分析的品种,但凡加了CMC的板都易烘糊,尤其是温度高于100度时,后改用不加CMC辅的水板来作,就不会有烘糊现象,故也可推论CMC 易于与硫酸起糊化反应。
感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1:3.5左右,而且研磨后要尽快涂布,不能易于凝固而难于涂布,我是百思不得其解,难道CMC还有类似稳定剂的作用2. “0.5%的板加热时间长了就会黑”,是在层析完,显色后吧,我也遇到过同样的情况,这只有严格控制加热显色的时间。
这个问题应该是这样回答:但凡加了CMC的板都易烘糊,尤其是温度高于100度时,若改用不加CMC辅的水板来作,就不会有烘糊现象,但不加CMC辅的板又太软,点样时容易点出洞,有个好办法是将CMC的浓度调至0.1%,这样就不易烘黑的。
不信你试试,我们这边药检所都这样做的3.关于薄层板加热变黑的问题,其实很容易解决:当喷完显色剂后不用在放烘箱里烘了,可以用电吹风在板子背面吹吹就能显色了.我们实验室里一般都采用此法,简便、快洁.如果一非想使用烘箱烘的话,一定要用带玻璃窗的,当看到显色了就取出,不然不好控制显色时间,时间过长,CMC容易碳化变黑4.各位楼主真是经验丰富,我铺的0.5%的板加热时间长了就会黑,有什么好着吗?根据我的经验,薄层版变黑与CMC-Na的浓度过大有关,如果你留意的话,你会发现,当显色剂中有浓硫酸时,加热时间稍长就会变黑(其他显色剂是没事的),我老师说这是因为浓硫酸把CMC-Na炭化了,其实[color=blue=这种情况你只要适当降低CMC-Na的浓度[/color]就可以了,当然如果不加CMC-Na的话容易把板弄破。
一般我都是显色后用电吹风吹的,要均匀吹,电吹风离板的距离要远些,防止部分会黑。
另还要注意显色剂,如果显色剂中含有硫酸,加热时间一定要掌握好,不可太长。
5.CP2000中277页苏氨酸的TLC的其它氨基酸检查似乎有问题: ...以"正丁醇\丁酮\浓氨溶液\水"为展开剂, 展开后,晾干,喷以茚三酮的丙酮溶液(1-50),...茚三酮与浓氨溶液起显色反应, 弄得整块板都有色,茚三酮氧化苏氨酸后再与释放出的氨气起反应生成的点在整块板中尚能看到,其它氨基酸就别想看了.氨基酸类的薄层鉴别过程中,显色前先将展完的板子在烘箱内烘一段时间,从而确保展开剂挥干净,效果不错关于裂板:1.板子会裂口,一则可能是因为硅胶的比例太大,二则可能是,板子要在常温下晾干后,再在烘箱中活化。
如果铺完不久就在较高温度下,裂口的几率就比较高的。
2.“晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了,有什么方法可以避免板子炸裂。
”你的板没有完全干透,表面看是干了,但是最中间的没有干,所以你直接放入105度的烘箱烘,当然会炸裂了,所以应该先用低温大约40度左右烘30分钟左右,再用105度活化,就可以解决这个问题了。
3.关于活化出现裂板、爆板的问题。
我从没有遇上过。
活化我是这样处理不要等到温度达到100度,而是设好温度后就将板子放在干燥箱,然后再通电加热,达到最高温度后停留5分钟左右即可。
这样水分是慢慢由内而外散发,而不是由外向内散发,避免了表面成膜,里面还在散发水气,岂有不裂、不爆的道理!。
关于点样:1.点样我本人没有什么技巧,导师教了我一招挺好用,写出来大家分享,就是在点样时食指放在点样管的上端,当点样管的下端与硅胶板接触的瞬间轻轻松动上端的食指,溶液自然从点样管出来,迅速提起点样管,就这样反复操作点出的斑点既小又均匀。