利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子LX
2020届鹤山市第三中学高三生物三模试题及答案解析
2020届鹤山市第三中学高三生物三模试题及答案解析一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1.绿藻被认为是21世纪人类最理想的健康食品，螺旋藻（属蓝细菌）的藻蓝蛋白能提高淋巴细胞活性，增强人体免疫力。
下列关于绿藻和螺旋藻的叙述不正确的是（）A. 二者的遗传物质都是DNAB. 绿藻和螺旋藻合成蛋白质的场所都是核糖体C. 电子显微镜下都能观察到核糖体和细胞膜D. 绿藻和螺旋藻的叶绿体都能进行光合作用2.某种蛋白质山两条多肽链构成，共有肽键500个，缩合形成两条肽链氨基酸分子和生成的水分子数分别是（）A.498和498B.500和500C.502和500D.502和5023.在我国西部大开发的战略中，“保护天然林”和“退耕还林(草)”是两项重要内容，采取这两项措施的首要目标是()A.开展生态旅游B.发展畜牧业C.增加木材产量D.改善生态环境4.下列与真核生物细胞核有关的叙述，错误的是A. 细胞中的染色质存在于细胞核中B. 细胞核是遗传信息转录和翻译的场所C. 细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心D. 细胞核内遗传物质的合成需要能量5.原核细胞和真核细胞最明显区别在于（）A.有无核物质B.有无细胞质C.有无核膜D.有无细胞膜6.生物大分子是构成生命的基础物质，下列有关生命活动主要承担者——蛋白质的说法错误的是（）A.蛋白质的营养价值主要取决于其含有的非必需氨基酸的种类B.蛋白质与某种RNA结合，可成为“生产蛋白质的机器”C.蛋白质与糖类结合，可成为细胞间互相联络的“语言”D.某些蛋白质具有的螺旋结构，决定了其特定的功能7.下列关于“观察洋葱根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验的叙述，正确的是（）A.参与洋葱根尖细胞有丝分裂的细胞器有核糖体、中心体等B.高倍显微镜下可观察到细胞内染色体数目加倍的变化过程C.实验所用解离液由质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精配制而成D.该实验也可选用洋葱鳞片叶的内表皮细胞作为实验材料8.下列有关生物进化的叙述，错误的是（）A. 基因频率是指在一个种群基因库中，某个基因占全部等位基因数的比率B. 突变和基因重组都是随机的、不定向的，不决定生物的进化方向C. 抗生素可以诱发细菌产生相应的抗性突变D. 共同进化不仅发生在不同物种之间，也发生在生物与无机环境之间9.农科所技术员研究温度对某蔬菜新品种产量的影响，将实验结果绘制成如图曲线。
2024年统编版2024选修3生物下册月考试卷578
2024年统编版2024选修3生物下册月考试卷578考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______ 姓名：______ 班级：______ 考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、关于桑椹胚和囊胚的比较，下列叙述正确的是A. 桑椹胚的内细胞团将来可发育成胎儿的各种组织B. 囊胚的滋养层细胞具有发育的全能性C. 囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的D. 囊胚的进一步扩大会导致透明带的破裂2、人类13号染色体上Rb基因突变是导致视网膜母细胞瘤的原因之一。
已知Rb基因表达产物pRb蛋白可与调控因子E2F结合，进而抑制E2F的功能。
E2F可与靶基因结合启动靶基因的表达，最终能促进细胞分裂，过程如图所示。
下列分析不合理的是（）A. Rb基因可能是一种与癌变有关的抑癌基因B. Rb基因突变产生的新基因是其等位基因C. E2F通过调控DNA聚合酶的合成促进细胞分裂D. 可以通过修复造血干细胞中的Rb基因治疗该病3、CD47是一种细胞膜表面糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。
为验证抗CD47的单克隆抗体可以减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（）A. 实验流程中CD47充当抗原的作用B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的单克隆抗体C. 对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体D. 预期实验结果为：实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组4、中国科学院孙强团队对一流产雌性猕猴进行克隆；成功获得“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。
下图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述正确的是（）A. 过程①将成纤维细胞注射在放射冠和透明带间，可降低对卵细胞的损伤B. 过程②在培养基中加入动物血清，可为激发成纤维细胞核的全能性提供物质条件C. 过程③进行同步发情处理，可降低代孕母猴对“中中”、“华华”的免疫排斥反应D. 与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物5、“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（）A. 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒B. 在小鼠胚胎细胞培养过程中，需要通过筛选才能获得具有无限分裂能力的细胞C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选D. 单克隆抗体制备过程中，第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体6、下图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期；下列叙述不正确的是（）A. ①过程发生了基因自由组合，增加了后代的多样性B. ②过程通过有丝分裂增殖C. a时期可分离得到胚胎干细胞D. ②→④过程，细胞分化程度逐渐增大7、在实验室内利用胚胎干细胞（ES细胞）制作小鼠胚胎模型，探究人类某些疾病的发病机制。
高三生物选修《现代生物科技专题》高考真题汇编习题及答案
2018届现代生物科技专题真题汇编1、2013全国课标卷Ⅰ阅读如下材料：材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在;得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草..材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性;科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造;使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸;在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键;提高了T4溶菌酶的耐热性..材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体;科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内;成功产出兔甲的后代;证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育..回答下列问题：1材料甲属于基因工程的范畴..将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法..构建基因表达载体常用的工具酶有和..在培育转基因植物是;常用农杆菌转化发;农杆菌的作用是..2材料乙属于工程范畴..该工程是指以分子生物学相关理论为基础;通过基因修饰或基因合成;对进行改造;或制造制造一种的技术..在该实例中;引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的序列发生了改变..4材料丙属于胚胎工程的范畴..胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内;使之继续发育成新个体的技术..在资料丙的实例中;兔甲称为体;兔乙称为体..2、2013全国课标卷Ⅱ甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物;甲含有效成分A;乙含有效成分B..某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物..回答下列问题：1为了培养该新型药用植物;可取甲和乙的叶片;先用____ __酶和__ __酶去除细胞壁;获得具有活力的____ ____;再用化学诱导剂诱导二者融合..形成的融合细胞进一步培养形成____ ___组织;然后经过___ ____形成完整的杂种植株..这种培养技术称为_____ ___..2上述杂种植株属于多倍体;多倍体是指_ ..假设甲和乙有性杂交的后代是不育的;而上述杂种植株是可育的;造成这种差异的原因是________ _ ..3这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖..经植物组织培养得到的_______ ___ 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子..3、2013天津卷花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病;野生黑芥具有黑腐病的抗性基因..用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化;并丧失再生能力..再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合;以获得抗黑腐病杂种植株..流程如下图..据图回答下列问题：1过程①所需的酶是..2过程②后;在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在;这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志..3原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压;其作用是..原生质体经过再生;进而分裂和脱分化形成愈伤组织..4若分析再生植株的染色体变异类型;应剪取再生植株和植株的根尖;通过、、染色和制片等过程制成装片;然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目..5采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增;得到两亲本的差异性条带;可用于杂种植株的鉴定..下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果..据图判断;再生植株1—4 中一定是杂种植株的有..6对杂种植株进行接种实验;可筛选出具有高抗性的杂种植株..4、2013山东卷科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞iPS;继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠;流程如下：1从黑鼠体内获得体细胞后;对其进行的初次培养称为;培养的细胞在贴壁成长至充链满培养皿底时停止分裂;这种现象称为2图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得;该过程称为;也可从灰鼠体内取出卵子;通过后进行早期胚胎培养获得..3图中重组囊胚通过技术移入白鼠子宫内继续发育;暂不移入的胚胎可使用方法保存..4小鼠胚胎干细胞ES可由囊胚的分离培养获得;iPS与ES细胞同样具有发育全能性;有望在对人类iPS细胞进行定向后用于疾病的细胞治疗..5、2013福建卷克隆猪成功率较低;与早期胚胎细胞的异常凋亡有关..Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因;用PCR 技术可以检测该基因转录水平;进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系..克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图..请回答：1图中重组细胞的细胞核来自细胞;早期胚胎移入受体子宫后继续发育;经桑椹胚、囊胚和胚最终发育为克隆猪..2在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数;进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数;从而反映出Bcl-2 基因的转录水平..①图中X 表示过程..②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列;以便根据这一序列设计合成用于PCR 扩增;PCR 扩增过程第一轮循环的模板是..6、2013海南卷单纯疱疹病毒I型HSV-I可引起水泡性口唇炎..利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1..回答下列问题：1在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中;先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白;一段时间后;若小鼠血清中抗__ __的抗体检测呈阳性;说明小鼠体内产生了__ __反应;再从小鼠的_ ___中获取B淋巴细胞..将该B淋巴细胞与小鼠的___ _细胞融合;再经过筛选、检测;最终可获得所需的杂交瘤细胞;该细胞具有的特点是__ __ ..2若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体;可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的____中使其增殖;再从___ _中提取、纯化获得..3通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白;其原因是该抗体具有___ _ 和___ _等特性..7、2014新课标Ⅰ卷某研究者用抗原A分别免疫3只同种小鼠X、Y和Z;每只小鼠免疫5次;每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数;结果如下图所示..若要制备杂交瘤细胞;需取免疫后小鼠的B淋巴细胞染色体数目40条;并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数目60条按一定比例加入试管中;再加入聚乙二醇诱导细胞融合;经筛选培养及抗体检测;得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞..回答下列问题：1制备融合所需的B淋巴细胞时;所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上;则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的..达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中;最适合用于制备B淋巴细胞的是小鼠;理由是..2细胞融合实验完成后;融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外;可能还有;体系中出现多种类型细胞的原因是..3杂交瘤细胞中有个细胞核;染色体数目最多是条..4未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活;原因是..8、2014海南卷下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内;制备“工程菌”的示意图..请据图回答：1获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板;在酶的催化下;合成互补的单链DNA;然后在作用下合成双链DNA;从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列;推测出相应的mRNA序列;然后按照碱基互补配对原则;推测其DNA的序列;再通过化学方法合成所需基因..2利用PCR技术扩增DNA时;需要在反应体系中添加的有机物质有、、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶;扩增过程可以在PCR扩增仪中完成..3由A和载体B拼接形成的C通常称为..4在基因工程中;常用Ca2＋处理D;其目的是..9、2014山东卷人组织纤溶酶原激活物htPA是一种重要的药用蛋白;可在转htPA 基因母羊的羊乳中获得..流程如下：1htPA基因与载体用_________切割后;通过DNA连接酶连接;以构建重组表达载体..检测目的基因是否已插入受体细胞DNA;可采用_________技术..2为获取更多的卵母细胞;要对供体母羊注射促性腺激素;使其__________..采集的精子需要经过__________;才具备受精能力..3将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________..为了获得母羊;移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________..利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体;这体现了早期胚胎细胞的__________..4若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________;说明目的基因成功表达.. 10、2014新课标Ⅱ卷植物甲具有极强的耐旱性;其耐旱性与某个基因有关..若从该植物中获得该耐旱基因;并将其转移到耐旱性低的植物乙中;有可能提高后者的耐旱性..回答下列问题：1理论上;基因组文库含有生物的基因；而cDNA文库中含有生物的基因..2若要从植物甲中获得耐旱基因;可首先建立该植物的基因组文库;再从中出所需的耐旱基因..3将耐旱基因导入农杆菌;并通过农杆菌转化法将其导入植物的体细胞中;经过一系列的过程得到再生植株..要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达;应检测此再生植株中该基因的;如果检测结果呈阳性;再在田间试验中检测植株的是否得到提高..4假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交;子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时;则可推测该耐旱基因整合到了填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”..11、2014天津卷嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶BglB是一种耐热纤维素酶;为使其在工业生产中更好地应用;开展了以下试验：Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶（1）PCR扩增bglB基因时;选用基因组DNA作模板..（2）右图为质粒限制酶酶切图谱..bglB基因不含图中限制酶识别序列..为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒;扩增的bglB基因两端需分别引入和不同限制酶的识别序列..（3）大肠杆菌不能降解纤维素;但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力;这是因为..Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响（4）据图1、2可知;80℃保温30分钟后;BglB酶会；为高效利用BglB酶降解纤维素;反应温度最好控制在单选..A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中;加入诱变剂可提高bglB基因的突变率..经过筛选;可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因..（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比;上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高;其原因是在PCR过程中多选..A.仅针对bglB基因进行诱变B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变12、2015新课标卷Ⅱ已知生物体内有一种蛋白质P;该蛋白质是一种转运蛋白;由305个氨基酸组成..如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸;240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸;改变后的蛋白质P1不但保留P的功能;而且具有了酶的催化活性..回答下列问题：⑴从上述资料可知;若要改变蛋白质的功能;可以考虑对蛋白质的进行改造..⑵以P基因序列为基础;获得P1基因的途径有修饰基因或合成基因..所获得的基因表达时是遵循中心法则的;中心法则的全部内容包括的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动;即：..⑶蛋白质工程也被称为第二代基因工程;其基本途径是从预期蛋白质功能出发;通过和;进而确定相对应的脱氧核苷酸序列;据此获得基因;再经表达、纯化获得蛋白质;之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定.. 13、2015新课标卷ⅠHIV属于逆转录病毒;是艾滋病的病原体..回答下列问题：1用基因工程方法制备HIV的某蛋白目的蛋白时;可先提取HIV中的;以其作为模板;在的作用下合成..获取该目的蛋白的基因;构建重组表达载体;随后导入受体细胞..2从受体细胞中分离纯化出目的蛋白;该蛋白作为抗原注入机体后;刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是..该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV;检测的原理是..3已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见;但是在艾滋病患者中却多发..引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分细胞;降低了患者免疫系统的防卫功能..4人的免疫系统有癌细胞的功能;艾滋病患者由于免疫功能缺陷;易发生恶性肿瘤..14、2015安徽卷科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊;以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白;其技术路线如图..（1）由过程①获得的A为_____________________..（2）在核移植之前;必须先去掉受体卵母细胞的核;目的是_______________________..受体应选用___________期卵母细胞..（3）进行胚胎移植时;代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生______________;这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能..4采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆;理论上可获得无限个转基因绵羊;这是因为__________________________________________________..15、2015福建卷GDNF是一种神经营养因子..对损伤的神经细胞具有营养和保护作用..研究人员构建了含GDNF基因的表达载体如图1所示;并导入到大鼠神经干细胞中;用于干细胞基因治疗的研究..请回答：1在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中;使用胰蛋白酶的目的是..2构建含GDNF基因的表达载体时;需选择图1中的限制酶进行酶切..3经酶切后的载体和GDNF基因进行连接;连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接如图1所示..为鉴定这3种连接方式;选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切;并对酶切后的DNA片段进行电泳分析;结果如图2所示..图中第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的..4将正向连接的表达载体导入神经干细胞后;为了检测GDNF基因是否成功表达;可用相应的与提取的蛋白质杂交..当培养的神经干细胞达到一定的密度时;需进行培养以得到更多数量的细胞;用于神经干细胞移植治疗实验..16、2015重庆卷某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题;引进了具高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛..1拟进行如下杂交：♂A具高产奶基因的纯种×♀B具适宜本地生长基因的纯种→C 选择B作为母本;原因之一是胚胎能在母体内正常..若C中的母牛表现为适宜本地生长;但产奶量并不提高;说明高产奶是性状..为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛;根据现有类型;最佳杂交组合是;后代中出现这种母牛的概率是假设两对基因分别位于不同对常染色体上.. 2用以上最佳组合;按以下流程可加速获得优良个体..精子要具有受精能力;需对其进行处理；卵子的成熟在过程中完成..在过程4的培养基中含有葡萄糖;其作用是..为筛选出具有优良性状的母牛;过程5前应鉴定胚胎的..子代母牛的优良性状与过程的基因重组有关..3为了提高已有胚胎的利用率;可采取技术..17、2016全国卷1某一质粒载体如图所示;外源DNA插入到Amp r或Tet r中会导致相应的基因失活Amp r表示氨苄青霉素抗性基因;Tet r表示四环素抗性基因..有人将此质粒载体用BamH I酶切后;与用BamH I酶切获得的目的基因混合;加入DNA连接酶进行连接反应;用得到的混合物直接转化大肠杆菌;结果大肠杆菌有的未被转化;有的被转化..被转化的大肠杆菌有三种;分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌..回答下列问题：1质粒载体作为基因工程的工具;应具备的基本条件有______________答出两点即可..而作为基因表达载体;除满足上述基本条件外;还需具有启动子和终止子..2如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选;在上述四种大肠杆菌细胞中;未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的;其原因是______________；并且______________和______________的细胞也是不能区分的;其原因是_____________..在上述筛选的基础上;若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落;还需使用含有原因是_____________的固体培养基..3基因工程中;某些噬菌体经改造后可以作为载体;其DNA复制所需的原料来自于_____________18、2016全国卷III图a中的三个DNA片段上以此表示出了EcoR I、BamH I 和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点;图b为某种表达载体示意图载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的..根据基因工程的有关知识;回答下列问题：1经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接;理由是____________..2若某人利用图b所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子;如图c所示..这三种重组子中;不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有____________;不能表达的原因是____________..3DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶;常见的有____________和____________;其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________..19、2016全国卷II下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物二倍体的流程..回答下列问题：1图中A表示正常细胞核;染色体数为2n;则其性染色体的组成可为____________..过程①表示去除细胞核;该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行;去核时常采用_______的方法..②代表的过程是__________..2经过多次传代后;供体细胞中______的稳定性会降低;因此;选材时必须关注传代次数..3若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同;从遗传物质的角度分析其原因是______..4与克隆羊“多莉”培养成功一样;其他克隆动物的成功获得也证明了__________..20、2017 海南卷甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料;利用植物组织培养技术繁殖该植物..回答下列问题：1以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体;在一定条件下进行组织培养;均能获得试管苗;其原理是__________..2甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中;均加入一定量的蔗糖;蔗糖水解后可得到__________..若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗;该细胞应具备的条件是____________填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”..3图中A、B、C所示的是不同的培养结果;该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的;这两种激素是________..A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______形成的..4若该种植物是一种杂合体的名贵花卉;要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉;可用组织培养方法繁殖;在培养时;___________填“能”或“不能”采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体;原因是____________..21、2017 新课标Ⅰ卷真核生物基因中通常有内含子;而原核生物基因中没有;原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制..已知在人体中基因A有内含子可以表达出某种特定蛋白简称蛋白A..回答下列问题：1某同学从人的基因组文库中获得了基因A;以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A;其原因是_____________________..2若用家蚕作为表达基因A的受体;在噬菌体和昆虫病毒两种载体中;不选用____________________作为载体;其原因是_____________________..3若要高效地获得蛋白A;可选用大肠杆菌作为受体..因为与家蚕相比;大肠杆菌具有_________________答出两点即可等优点..4若要检测基因A是否翻译出蛋白A;可用的检测物质是___________________填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”..5艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献;也可以说是基因工程的先导;如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示;那么;这一启示是_________________________..22、2017 新课标Ⅱ卷几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分;几丁质酶可催化几丁质水解..通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内;可增强其抗真菌病的能力..回答下列问题：1在进行基因工程操作时;若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA;常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料;原因是__________________________..提取RNA时;提取液中需添加RNA酶抑制剂;其目的是__________________________..2以mRNA为材料可以获得cDNA;其原理是__________________________..3若要使目的基因在受体细胞中表达;需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞;原因是__________________________答出两点即可..4当几丁质酶基因和质粒载体连接时;DNA连接酶催化形成的化学键是__________________________..5若获得的转基因植株几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中抗真菌病的能力没有提高;根据中心法则分析;其可能的原因是__________________________..23、2017 新课标Ⅲ卷编码蛋白甲的DNA序列序列甲由A、B、C、D、E五个片段组成;编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成;如图1所示..回答下列问题：1现要通过基因工程的方法获得蛋白乙;若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列TTCGCTTCT……CAGGAAGGA;则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙;原因是_________________________________..2某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中;在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等;还加入了序列甲作为_____________________;加入了________________作为合成DNA的原料..3现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白;要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用;某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组;其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙;另一组作为对照;培养并定期检测T淋巴细胞浓度;结果如图2..①由图2 可知;当细胞浓度达到a时;添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加;此时若要使T淋巴细胞继续增殖;可采用的方法是__________________..细胞培养过程中;培养箱中通常要维持一定的CO2浓度;CO2的作用是__________________..②仅根据图、图2可知;上述甲、乙、丙三种蛋白中;若缺少______填“A”“B”“C”“D”或“E”片段所编码的肽段;则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果..2018届现代生物科技专题参考答案1、1显微注射法限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可感染植物;将目的基因转移到受体细胞中2蛋白质现有蛋白质新蛋白质氨基酸3同供受2、1纤维素酶果胶酶原生质体愈伤再分化或分化植物体细胞杂交2体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中;前者染色体联会异常;而后者染色体联会正常3胚状体、不定芽、顶芽、腋芽3、1纤维素酶和果胶酶2叶绿体3保持原生质体完整性细胞壁4双亲或花椰菜和黑芥解离漂洗51、2、4 6黑腐病菌4、1原代培养接触抑制2冲卵体外受精3胚胎移植冷冻或低温4内细胞团细胞诱导分化5、1体原肠2①反转录②引物Bcl-2 cDNA6、1 HSV—1蛋白体液免疫脾脏骨髓瘤无限增值且产生专一抗体2腹腔腹水3纯度高特异性强7、1四Y Y小鼠的抗体效价最高2B淋巴细胞相互融合形成的细胞;骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的;且融合率达不到100%31 100 4不能无限增殖8、1逆转录酶DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸2引物目的基因或A基因模板3基因表达载体4使其成为感受态细胞;使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子9、1同种限制性核酸内切酶或同种限制酶；DNA分子杂交或核酸探针2超数排卵；获能处理3显微注射法；性别鉴定；全能性4htPA或人组织纤溶酶原激活物10、1全部部分2筛选3乙表达产物耐旱性4同源染色体的一条上11、1嗜热土壤芽孢杆菌2NdeⅠBam HⅠ3转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶4失活 B 5A、C12、1氨基酸序列或结构2P P1DNA和RNA或遗传物质DNA→RNA、RNA→DNA RNA→蛋白质或转录、逆转录、翻译3设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能13、1RNA 逆转录酶cDNA或DNA2抗体抗原抗体特异性结合3T或T淋巴4监控和清除14、1含目的基因的表达载体..2保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞MⅡ3免疫排斥反应4整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养15、1使细胞分散开2XhoⅠ3②4抗体传代16、1生长发育或胚胎发育隐性♂A×♀C 1/82获能或增强活力③供能性别、高产奶和适宜生长的基因②3胚胎分割17、1 能自主复制能稳定遗传含有标记基因具有多个酶切位点或其他合理答案..2 都不具有氨苄青霉素抗性基因;无法在含有氨苄青霉素的培养基上生长；含有质粒载体；含有插入了目的基因的重组质粒；都具有氨苄青霉素抗性基因;能在含有氨苄青霉素的培养基上生长；四环素..3 受体细胞18、1Sau3AⅠ限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同2甲、丙在基因表达载体中;启动子应位于目的基因的首端;终止子应位于目的基因的尾端;这样目的基因才能表达..图中甲、丙均不符合;所以不能表达目的基因的产物3E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶19、1XX或XY 显微操作去核法胚胎移植2遗传物质3卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响4已经分化的动物体细胞核具有全能性..20、1绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性;在一定条件下能发育成完整的植。
安徽卷
安徽卷1．血浆中的抗体是由浆细胞产生的分泌蛋白，下表列出的抗体肽链合成与抗体加工的场所，正确的是（）2．下图为大豆叶片光合作用暗反应阶段的示意图，下列叙述正确的是 ( )A.CO2的固定实质上是将ATP中的化学能转化为C5中的化学能B.CO2可直接被[H]还原，再经过一系列的变化形成糖类C.被还原的C3在有关酶的作用下，可再形成C5D.光照强度由强变弱时，短时间内C5含量会升高3．下图是某同学在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时拍摄的显微照片，下列叙述正确的是（）A.甲细胞中每条染色体的着丝点排列在细胞板上B.乙细胞中染色体被平均分配，移向细胞两极C.甲和乙细胞中的染色体数目相等，DNA含量相同D.统计图中处于分裂期的细胞数可计算细胞周期长短4. Qβ噬菌体的遗传物质（Qβ RNA）是一条单链RNA，当噬菌体侵染大肠杆菌后，QβRNA立即作为模板翻译出成熟蛋白、外壳蛋白和RNA 复制酶（如图所示），然后利用该复制酶复制QβRNA 。
下列叙述正确的是（）A、Qβ RNA的复制需经历一个逆转录过程B、QβRNA的复制需经历形成双链RNA的过程C、一条Qβ RNA模板只能翻译出一条肽链D、Qβ RNA复制后，复制酶基因才能进行表达5. 现有两个非常大的某昆虫种群，个体间随机交配，无迁入和迁出，无突变，自然选择对A和a基因控制的性状没有作用。
种群1的A基因频率为80%，a的基因频率为20%；种群2的A基因频率为60%, a的基因频率为40%。
假设这两个种群大小相等，地理隔离不再存在，两个种群完全合并为一个可随机交配的种群，则下一代中Aa的基因型频率是（）A 75%B 50%C 42%D 21%6. 下列关于植物生长素及其类似物的叙述，不正确．．．的是（）A.同一种植物的幼芽对生长素的反应敏感程度高于幼根B.棉花表现出的顶端优势与顶芽产生的生长素的极性运输有关C.在番茄花期喷洒一定浓度的2.4-D可防止落花落果D.用一定浓度的IBA溶液浸泡葡萄插条基部可诱导生根29.科研人员探究了不同温度（25℃和0.5℃）条件下密闭容器内蓝莓果实的CO2的生成速率的变化，结果见图1和图2。
专家测喝羊奶将能替代打针吃药
中国羊奶第一门户网站羊奶100网（ ） - 1 - 专家测喝羊奶将能替代打针吃药生病不再吃药打针，病人只需喝从转基因动物体内挤出的奶就可痊愈！11月11日，在上海市第九期院士讲坛上，医学遗传学专家曾溢滔院士透露，我国科学家在转基因动物乳腺生成器的研究上已取得突破性进展，不仅顺利获得转基因鼠、转基因鱼、转基因猪、转基因鸡等具有快速生长能力或抗病能力的动物种系，而且还成功研制出乳汁中具有能够治疗血友病凝血因子IX 的转基因羊，以及含有人血清蛋白基因的转基因试管牛。
“若一切进展顺利，在未来的5—10年内，转基因新药在我国就能进入临床试验阶段，开始引领新一代医药产业。
”曾溢滔介绍到，转基因动物是利用细胞分裂，染色体倍增的原理，通过实验的方法，将人或哺乳动物的某种功能基因导入哺乳动物的受精卵(或早期胚胎细胞)里，使导入的基因能够与受精卵的染色体DNA 整合在一起。
随着细胞分裂染色体倍增而倍增，使动物体内的每一个细胞都带有导入的基因，并能够将其稳定地遗传到下一代的同类动物。
其不仅彻底将基因的培育工作从实验室转移到动物体内，还能通过动物自身的繁衍生殖，“一劳永逸”且源源不断地生产基因产物，从而为新的基因工程获得成本低、活性高的基因药物研发开辟了一条新思路。
然而，如何让导入的功能基因在动物体内得到最好的控制和表达？经过长期试验，科学家们发现，若要通过转基因动物来生产生物医药，乳腺是最理想的表达场所，因为乳腺属于外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响动物自身的新陈代谢；而从转基因动物的乳汁中获取的目的基因产物，又具有产量高、易提纯，表达的蛋白经过充分的修饰建功后，有相当稳定的生物活性等特点。
“动物的乳腺成了一个生产车间”，曾溢滔表示，利用转基因动物，只需饲养大量的转基因牛、转基因羊等家畜，就可源源不断地从动物的乳汁中获取人类所需要的药物蛋白质。
甚至随着科学的进步，人类只需直接饮用转基因动物生产的乳汁，就可达到治疗、保健的效果，其所拥有的周期短、产量高、能传代等优点，绝对是传统生物医药产业所不可比拟的。
2020-2021学年长沙市田家炳实验中学高三生物下学期期中试题及答案解析
2020-2021学年长沙市田家炳实验中学高三生物下学期期中试题及答案解析一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 下图表示人体内某些淋巴细胞的分化和某种免疫过程，数字表示过程，字母表示细胞或物质。
下列叙述正确的是（）A. 由造血干细胞形成的a、b、c细胞内蛋白质的种类完全不同B. ④④过程属于体液免疫，④过程属于非特异性免疫C. ④④④过程都需要相应的细胞膜上受体的参与D. 与Y合成和分泌有关的具膜细胞器有内质网、高尔基体、线粒体和细胞膜2. 由图中曲线a、b表示物质跨（穿）膜运输的两种方式，下列表述正确的是（）A.脂溶性小分子物质不能通过方式a运输B.与方式a有关的载体蛋白覆盖于细胞膜表面C.方式b的最大转运速率与载体蛋白数量有关D.抑制细胞呼吸对方式a和b的转运速率均有影响3. 下列有关生理现象的叙述，正确的是A.被阉割的动物血液中促性腺激素含量将降低B.寒冷刺激皮肤引起皮肤血管收缩是条件反射C.某人眼球被意外撞击，产生金星四溅的感觉是非条件反射D.叩击膝盖下的韧带，小腿前踢过程中有化学物质传递信息4. 如图是生物体内常见的一种生理作用图示，下列叙述正确的是（）A.图中显示a具有高效性，反应完成后，a的性质未发生改变B.a成分均是蛋白质C.此类反应普遍在人体组织液中进行D.温度过高比温度过低对a的影响大5. 正确选择实验材料和方法是得出正确结论的前提，下列有关实验材料或方法的选择，正确的是（）A.利用废旧物品制作的真核细胞模型——概念模型B.人鼠细胞融合实验研究生物膜的流动性——荧光标记法C.提取并研究细胞膜的化学成分——公鸡的成熟红细胞D.观察叶绿体和线粒体——人口腔上皮细胞6. 下列关于细胞呼吸的叙述，正确的是A. 葡萄糖分解为丙酮酸需在有氧条件下进行B. 无氧呼吸过程能产生A TP，但没有[H]的生成C. 有氧呼吸过程中[H]在线粒体内膜与氧结合生成水D. 若细胞既不吸收O2也不放出CO2，说明细胞呼吸已经停止7. 油松种子表面含有脱落酸，水洗可以去除种子表面的大部分脱落酸，某实验小组探究了水洗和夹破种皮两种处理方式对油松种子萌发的影响，实验结果如图所示，下列叙述错误的是（）A. 脱落酸的含量能显著影响油松种子的萌发B. 油松种子的萌发主要与外种皮是否破损有关C. 该实验的自变量是脱落酸的含量和外种皮是否完整D. 外种皮可能通过影响水分和气体的通透性影响其种子萌发8. 水稻存在雄性不育基因：其中R(雄性可育)对r(雄性不育)为显性，是存在于细胞核中的一对等位基因；N(雄性可育)与S(雄性不育)是存在于细胞质中的基因；只有细胞质和细胞核中均为雄性不育基因时，个体才表现为雄性不育。
高考生物复习 课堂互动探究案4 动物细胞工程
课堂互动探究案4 动物细胞工程考点一动物细胞培养和细胞核移植任务驱动·探究突破任务1 补充动物细胞培养过程示意图，并填空(1)与植物细胞培养相比，动物细胞培养过程所用的培养基一般是__________培养基，并加入__________。
(2)动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶，第一次的作用是将剪碎的组织分散成________；第二次是将贴壁生长的细胞从瓶壁上________下来，其目的是避免动物细胞的________现象。
(3)动物细胞培养时加入CO2的主要作用是维持培养液的____；O2的作用是促进细胞________。
任务2 比较动物细胞培养与动物体细胞核移植的不同点易错警示细胞工程的两个总结(1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。
(2)克隆动物的起点是经过核移植后形成的重组细胞，其遗传物质主要来自供体，因此形成的个体性状主要同供体，但也有部分性状同受体。
动物细胞培养和核移植时注意的五个问题(1)在分散细胞时，需用胰蛋白酶分散细胞，不能用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.8，胰蛋白酶作用的适宜pH为7.2～7.8，而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。
(2)取供体动物的体细胞培养，一般选用10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。
(4)克隆动物绝大部分性状与供体动物相同，少数性状与提供去核卵母细胞的动物相同，与代孕动物的性状无遗传关系。
(5)从生殖方式的角度看，动物体细胞核移植技术(克隆)属无性生殖，重组细胞相当于受精卵，需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。
任务3 细胞核移植技术(1)理清克隆动物培育流程(2)细胞核移植技术中的三个注意点①动物细胞核移植技术，体现了动物细胞核的全能性而非细胞的全能性。
②克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。
2020年浙江省慈溪育才中学初中部高三生物期末考试试题及答案解析
2020年浙江省慈溪育才中学初中部高三生物期末考试试题及答案解析一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1.下列是对高等动物通过减数分裂形成配子以及受精作用的描述，其中正确的是（）A.每个卵细胞继承了初级卵母细胞1/4的细胞质B.等位基因进入卵细胞的机会并不相等，因为一次减数分裂只形成一个卵细胞C.进入卵细胞并与之融合的精子几乎不携带细胞质D.雌、雄配子彼此结合的机会相等，因为它们的数量相等2.一对同源染色体上的DNA分子之间一般不同的是A.相邻核苷酸之间的连接方式B.碱基种类C. (A＋G)/(T＋C)的比值D.碱基序列3.下列实验操作中，会达到预期实验目的的是（）A.用健那绿和吡罗红混合染色剂染色，可观察DNA和RNA在细胞中的分布B.将酶与底物在室温下混合，再做不同保温处理，可探究温度对酶活性的影响C.用新配制的NaOH与CuSO4混合液，水浴加热可检测待测样液中是否含有还原性糖D.用盐酸与酒精的混合液解离洋葱根尖，即可观察到有丝分裂不同时期的细胞4.如图表示一个细胞周期中每条染色体上DNA含量的变化，下列叙述错误的是（）A.bc段发生DNA分子的复制B.cd段细胞内一定存在染色单体C.de段表示着丝粒的分裂D.ef段核DNA含量是cd段的一半5.下列关于生物变异的说法，错误的是（）A. 四分体时期的交叉互换可实现一对同源染色体上非等位基因的重新组合B. 某生物染色体上某片段发生重复使基因表达水平升高，这属于有利变异C. 用秋水仙素处理二倍体的单倍体幼苗得到的一定是纯合子D. 基因突变一定会引起基因携带的遗传信息发生改变，但不一定会改变生物的性状6.下图1表示某动物精原细胞中的一对同源染色体。
在减数分裂过程中，该对同源染色体发生了交叉互换，结果形成了①~④所示的四个精细胞。
这四个精细胞中，来自同一个次级精母细胞的是（）A.①与②B.①与③C.②与③D.②与④7.细胞分化需要多种调控蛋白的共同调控，MyoD是一种在成肌细胞分化为骨骼肌细胞的过程中起关键作用的调控蛋白。
体外受精和早期胚胎培养
体外受精和早期胚胎培养1、华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有（）。
①转基因②核移植③体外受精④体细胞克隆⑤胚胎移植A：①③B：①④C：②⑤D：③⑤2、关于早期胚胎培养的说法，不正确的是（ )A. 发育培养液的成分通常含有血清B。
发育培养液的成分较一般动物细胞培养液的成分简单C. 动物种类不同，进行胚胎移植的早期胚胎所处阶段不同D. 进行胚胎移植之前,可将培养到适宜时期的早期胚胎进行保存3、关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊"的说法合理的是( ）A. 它们是通过相同的生殖方式获得亲本的优良性状B. 它们的遗传物质都只来自于一个亲本C。
它们在形成过程中一般都有卵细胞的参与D。
在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术4、下列关于牛体外受精及胚胎工厂化生产的叙述中，正确的是( ）.A：采集的卵母细胞应立即与精子共同培养才能受精B: 冷冻的精子解冻后即可与成熟的卵子受精C: 精子和卵细胞结合形成受精卵后应立即移入母牛子宫D：早期胚胎的培养通常需要加入血清5、不同动物胚胎移植的时间不同，但一般不会在下列哪个时期移植？（)A: 卵裂期B: 桑椹胚期C: 囊胚期D: 原肠胚期试管婴儿、人工种子和克隆动物均属于生物工程的成果，下列叙述正确的是( ）A. 三者都用到细胞工程的技术B. 三者都是在体外环境中完成的C. 试管婴儿属于无性生殖范畴D。
人工种子的胚状体是由受精卵发育而成的6、体外受精常用的采卵方法有（）。
①用促性腺激素处理后，从输卵管中冲取卵子②化学诱导法③电刺激法④从活体动物卵巢吸取卵母细胞A：①②B: ②③C：③④D: ①④7、如图表示通过体外受精培育试管牛的流程图,下列叙述错误的是（）A。
获取的精子经获能后才能进行体外受精B。
（2)过程只与细胞膜的流动性有关C. (3)过程的细胞增殖方式一定是有丝分裂D. （4)过程是胚胎移殖过程8、爱德华兹以他在体外受精技术领域做出的开创性贡献而获得2010年诺贝尔生理学或医学奖.关于体外受精技术叙述正确的是( ）A。
2020秋高中生物3达标训练：模块综合检测含解析
2020秋高中生物人教版选修3达标训练：模块综合检测含解析模块综合检测（时间：60分钟满分：100分）1．(12分)图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶Eco RⅠ、Bam HⅠ的酶切位点,amp R为青霉素抗性基因，tct R为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。
已知目的基因的两端分别有包括Eco RⅠ、Bam HⅠ在内的多种酶的酶切位点.(1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用Eco RⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有____________________、____________________、__________________三种。
若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行________.（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是____________________________;若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________________。
（3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________，其合成的产物是________。
(4）在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________________.答案：(1）目的基因—载体连接物载体—载体连接物目的基因-目的基因连接物分离纯化(其他合理答案也可）（2)载体—载体连接物目的基因—载体连接物、载体-载体连接物（3）启动子mRNA(4)Eco RⅠ和Bam HⅠ(不可只答一个酶）2．（10分）回答有关基因工程的问题：（1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。
高中生物选修三试卷
选修三综合测试卷(时间40分钟，总分100分)1.（2015新课标卷Ⅱ，40，16分）已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。
如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P 的功能，而且具有了酶的催化活性。
回答下列问题：⑴从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造。
⑵以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰基因或合成基因。
所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：。
⑶蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定。
2.（2015安徽卷，31Ⅱ，10分）科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。
（1）由过程①获得的A为_____________________。
（2）在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_________________ ______。
受体应选用___________期卵母细胞。
（3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_________ _____，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为__________________________________________________。
3.（2015年海南，31, 10分）在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。
2020届吉林市第十八中学高三生物下学期期末试卷及答案解析
2020届吉林市第十八中学高三生物下学期期末试卷及答案解析一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 蛋白质的结构和功能是多种多样的，下列有关叙述中，正确的是（）A.将抗体溶于NaCl溶液中会造成其生物活性的丧失B.高温条件下蛋白质的空间结构变得伸展、松散，同时肽键断裂C.某些化学物质可使蛋白质的空间结构发生改变D.组成人体蛋白质的必需氨基酸有13种2. 下列曲线中能正确表示人体消化酶作用规律的是A.Ⅰ和ⅠB.Ⅰ和ⅠC.Ⅰ和ⅠD.Ⅰ和Ⅰ3. 下列关于细胞膜成分及细胞膜流动镶嵌模型的叙述，错误的是（）A.组成细胞膜的蛋白质分子大多数可以运动B.蛋白质分子在细胞膜两侧是不对称分布C.磷脂双分子层构成细胞膜的基本支架D.磷脂分子的疏水端可以让水溶性分子和离子自由通过4. 观察3H标记核膜的变形虫，发现分裂期形成许多带放射性的单层小囊泡。
分裂形成的子细胞核大小与母细胞核相近，每个子细胞核放射性强度基本相同。
以下叙述正确的（）A.核膜的解体与重建有利于遗传物质的平均分配B.核膜在分裂间期裂解为许多小囊泡C.细胞核是遗传信息库，是细胞遗传和代谢的中心D.核膜上具有核孔，能够实现细胞之间频繁的物质交换和信息交流5. 下列各图箭头表示兴奋在神经元之间或神经纤维上的传导方向，其中不正确的是（）A. B. C. D.6. 如果某动物体细胞中DNA含量为2个单位（m）。
下图分别为雄性动物生殖细胞减数分裂DNA含量变化的曲线图和细胞示意图。
请回答：（1）细胞A是_______________________细胞，与之相对应的曲线段是________（以横轴上的数字段表示）。
（2）细胞B的名称是___________________________，DNA的含量是___________。
（3）曲线2-3时期DNA含量变化是由于______________的结果，减数第一次分裂结束DNA含量变化是由于_________________的结果。
2022-2023学年河北省部分学校高二5月联考生物试题
2022-2023学年河北省部分学校高二5月联考生物试题1.下列关于人体内环境与稳态的说法，错误的是（）A．内环境稳态包括渗透压、酸碱度和温度的稳定等B．正常人血浆pH维持稳定与血浆含有的缓冲物质有关C．细胞外液渗透压的大小主要受蛋白质含量的影响D．长期大量饮用碳酸饮料可能会影响内环境的稳态2.酵母菌和乳酸菌是制作传统发酵食品常用的微生物。
下列叙述正确的是（）A．制作泡菜和果酒时发挥作用的主要微生物分别是酵母菌和乳酸菌B．酵母菌和乳酸菌的遗传物质均是DNA，均主要分布在拟核中C．向发酵装置中通入一定量的O 2，有利于酵母菌和乳酸菌的生长繁殖D．酵母菌和乳酸菌发酵时均能利用原料中的葡萄糖，且不消耗O 23.下列有关细胞学说的叙述，正确的是（）A．细胞学说提出病毒不具有细胞结构，不属于生物B．细胞学说提出新细胞是通过有丝分裂或减数分裂得到的C．细胞学说使人们对生命的认识由细胞水平进入分子水平D．细胞学说提出一切动植物都由细胞和细胞产物所构成4. Ca²⁺和Na⁺在人体生命活动中是必不可少的。
下列叙述错误的是（）A．血液中的Ca²⁺含量过高，容易导致肌肉抽搐B．细胞中均有以无机离子形式存在的Ca²⁺和Na ⁺C．适当补充维生素D能促进肠道对钙的吸收D．人体缺乏Na ⁺会导致肌肉的兴奋性降低5.动物脂肪细胞中储存着大量的脂肪，这些脂肪以大小不一的脂滴形式存在。
下列说法正确的是（）A．脂肪是小麦细胞中的主要储能物质B．运动员长跑过程中体内脂肪大量转化为葡萄糖C．企鹅体内的脂肪具有缓冲、减压和保温的作用D．与等质量的糖类相比，脂肪分子中氧的含量更高6.纤维素是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖，但很难被人体消化。
下列叙述正确的是（）A．纤维素是一种广泛存在于动植物细胞内的多糖B．纤维素和淀粉都是植物细胞中主要的储能物质C．纤维素和蔗糖的基本组成单位都是葡萄糖D．纤维素和淀粉都是以碳链为基本骨架的大分子物质7.为探究稻田土壤中的细菌种类，某生物小组采集了稻田土壤样本并开展相关实验。
[中学]世界第一个动物乳腺生物反应器重组蛋白药物ATryn获准上市
![[中学]世界第一个动物乳腺生物反应器重组蛋白药物ATryn获准上市](https://img.taocdn.com/s3/m/ecfda7d06037ee06eff9aef8941ea76e59fa4a59.png)
2006年6月2日，对于欧洲患有先天性抗凝血酶缺失症的病人们是一个好日子，世界上第一个利用转基因动物乳腺生物反应器生产的基因工程蛋白药物——重组人抗凝血酶Ⅲ（商品名：A Tryn）的上市许可申请获得了欧洲医药评价署人用医药产品委员会肯定批准意见，该重组蛋白药物将在未来3个月内开始销售。
A Tryn的主要成分——重组人抗凝血酶Ⅲ具有抑制血液中凝血酶活性，预防和治疗急慢性血栓血塞形成，对治疗抗凝血酶缺失症有显著效果，据估计该药全球潜在市场每年高达1.5亿美元。
人抗凝血酶Ⅲ是一种人血液中重要的抗凝血因子，但是，作为药物很难从人血中提取该酶，而且由于该酶分子结构复杂，利用微生物发酵系统往往不能表达出这种酶或者表达出的重组蛋白活性丧失，而利用哺乳动物细胞培养体系则成本太高，产量也较低，无法满足该药的临床需求。
20世纪80年代中后期发展起来的转基因动物乳腺生物反应器体系则为生产这些分子结构复杂而且临床需求大的重组蛋白药物提供了可靠途径。
A Tryn是由全球最著名的动物乳腺生物反应器研发企业美国Genzyme转基因公司研制成功的，该药物最神奇之处在于重组人抗凝血酶Ⅲ不是从天然物质中提取，也不是通过微生物发酵或哺乳动物细胞培养基因工程制药体系生产，而是从转基因山羊奶液中生产出来的，即利用一种新的基因工程制药技术——转基因动物乳腺生物反应器制药技术生产的。
美国Genzyme转基因公司从1990年开始即致力于发展转基因山羊乳腺生物反应器技术生产重组人抗凝血酶Ⅲ，攻克了从转基因绵羊生产、重组蛋白表达研究、重组蛋白纯化、临床试验、上市申请到产品生产等环节的诸多技术和非技术障碍，最终使得A Tryn成为世界上第一个动物乳腺生物反应器生产的基因工程新药。
而该药物一旦上市，将掀起制药业的一场革命，也将开辟生物制药业的新纪元——即转基因动物乳腺生物反应器制药将逐渐取代低效的细菌发酵制药和高成本的哺乳动物细胞制药，成为最主要的基因工程制药技术。
2021届天津市第四十二中学高三生物期末试题及答案
2021届天津市第四十二中学高三生物期末试题及答案一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 小肠绒毛上皮细胞具有两种葡萄糖载体。
在面向肠腔的质膜顶区，具有葡萄糖—Na+同向转运，即葡萄糖与Na+的协同运输，具体情况是：顺浓度梯度每进入细胞膜2个Na+就可以逆浓度梯度带进1个葡萄糖分子；在质膜基底区和侧区，具有葡萄糖单向转运，即顺浓度梯度释放其他组织所需的葡萄糖。
下列相关说法错误的是（）A.小肠绒毛上皮细胞在面向肠腔的质膜顶区部位葡萄糖的运输属于主动运输B.小肠绒毛上皮细胞在质膜基底区和侧区部位葡萄糖的运输属于协助扩散C.葡萄糖进出小肠绒毛上皮细胞方式不同，但运输的载体相同D.当细胞内外Na+浓度相等时，Na+和葡萄糖的协同运输不能进行2. 下列关于酶的叙述正确的是（）A.所有的酶都是蛋白质B.能为反应物提供能量C.能高效催化化学反应D.不能脱离生物体起作用3. 下列有关细胞膜的流动镶嵌模型的叙述，正确的是（）A. 细胞膜上磷脂分子的疏水端朝向两侧，亲水端朝向内侧B. 细胞膜上的糖类全部都与蛋白质结合形成糖蛋白C. 细胞膜的流动性是细胞膜的功能特性D. 细胞膜上的糖蛋白与细胞表面的识别有关4. 生长素（IAA）主要促进细胞的伸长，而细胞壁的弹性非常小，影响细胞的伸长。
科学家根据“酸生长理论”和“基因活化学说”提出IAA对细胞伸长的作用机理如图。
下列说法正确的是（）A. 生长素与细胞膜受体结合可通过Ca2+引发H+以被动运输的方式向外运输B. 酸性条件下细胞壁的纤维素微丝伸长使细胞壁对细胞的压力减小，引起细胞横向生长C. 活化因子与生长素结合使相关基因在细胞核内表达，合成mRNA和蛋白质D. 生长素的调节作用依赖于细胞内的信息传递，体现了细胞结构和功能的联系5. 丈夫的哥哥患有半乳糖血病(一种常染色体隐性遗传病)，妻子的外祖母也有此病，家庭的其他成员均无此病。
2022-2023学年陕西省汉中市多校联考高二6月联考生物试题
2022-2023学年陕西省汉中市多校联考高二6月联考生物试题1.下图中①~③过程表示DNA分子在不同酶的作用下发生的变化，则①、②、③过程中发挥作用的酶依次为（）A．限制酶、DNA连接酶、解旋酶B．DNA聚合酶、解旋酶、限制酶C．限制酶、解旋酶、DNA连接酶D．DNA聚合酶、限制酶、解旋酶2.下列关于DNA重组技术的叙述，正确的是（）A．E.coli DNA连接酶可以连接平末端和黏性末端B．只有质粒能作为基因进入受体细胞的载体C．将目的基因导入大肠杆菌前一般先用Ca 2+对大肠杆菌进行处理D．受体细胞中检测到抗性标记基因就说明目的基因成功导入受体细胞中3.质粒是基因工程中常用的一种载体。
下列关于质粒的说法，错误的是（）A．质粒中的嘌呤碱基数和嘧啶碱基数是相等的B．一些质粒可以整合到目的细胞的染色体上，随受体DNA同步复制C．可以利用质粒上的特殊标记基因对目的基因进行筛选D．质粒至少应有三个限制酶切割位点，便于目的基因插入4.“SDS法”是提取DNA的常用方法，其提取液成分中的SDS能使蛋白质变性，EDTA是DNA酶抑制剂，Tris作为缓冲剂。
下列有关叙述错误的是（）A．EDTA能减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量B．SDS能破坏蛋白质空间结构，从而促进DNA和蛋白质分离C．Tris作为缓冲剂能维持pH的稳定，保证DNA结构正常D．SDS与蛋白质的结合遵循碱基互补配对原则5.家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力，将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药，但是获得的干扰素在体外不易保存。
下列说法错误的是（）A．可从免疫细胞中提取干扰素基因的mRNA，经逆转录获取目的基因B．可用质粒和目的基因构建重组载体后导入家蚕的受精卵C．检验干扰素基因是否已经导入家蚕细胞时，可使用PCR技术D．利用蛋白质工程对干扰素进行改造时，应从干扰素的氨基酸序列出发6.下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp r为氨苄青霉素抗性基因，tet r为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。
2021年北京市海淀国际学校高三生物期中试卷及答案
2021年北京市海淀国际学校高三生物期中试卷及答案一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1.如图表示人的肝细胞与甲、乙、丙三种细胞外液的物质交换关系，下列有关叙述正确的是（）A. 内环境是细胞代谢的主要场所B. 胰岛素、淋巴因子、神经递质均可分布于甲中C. 镰刀型细胞贫血症是因为乙中血红蛋白异常D. 内环境的稳态只与神经调节和体液调节有关2.某科学研究小组进行了赤霉素（GA）、生长素（IAA）对棉花幼苗生长影响的探究实验，结果如图所示。
下列相关叙述错误的是（）A.IAA和GA对幼苗生长的作用都具有两重性的特点B.与去除顶芽组相比，完整植株组单独使用GA的效果更显著C.生产中可以采取去顶芽的方式降低棉花植株的高度D.IAA和GA均是传递信息的分子，起调节生长的作用3.少数人注射青霉素后出现胸闷、气急和呼吸困难等过敏（超敏）反应症状，严重者发生休克。
以下有关叙述，正确的是A. 青霉素过敏反应的主要原因是机体免疫防御功能低下B. 青霉素引起的病理性免疫反应，具有特异性和记忆性C. 机体初次接触青霉素后，活化的浆细胞分泌淋巴因子D. 已免疫的机体再次接触青霉素后会发生自身免疫反应4.下列关于原核细胞与真核细胞的叙述，正确的是（）A. 真核细胞中有DNA，原核细胞中无DNAB. 真核细胞有生物膜，原核细胞无生物膜C. 真核细胞中有染色体，原核细胞中无染色体D. 真核细胞中有细胞器，原核细胞中无细胞器5.“淀粉—平衡石假说”认为植物依靠富含“淀粉体”的平衡细胞感受重力的刺激。
当重力方向发生改变时，平衡石细胞中的“淀粉体”就会沿着重力方向沉降，引起植物体内一系列信号分子的改变，如通过生长素的运输导致生长素沿着重力刺激的方向不对称分布，从而造成重力对植物生长的影响。
下列有关叙述错误的是（）A. “淀粉体”可感受重力的方向B. “淀粉体”能将重力信号转换成运输生长素的信号C. 茎的近地侧生长素分布较多，细胞生长快，使茎背地生长D. 根的近地侧生长素分布较多，细胞生长快，使根向地生长6.下列有关神经系统的叙述，不正确的是（）A. 大脑皮层主要是由神经元胞体及其树突构成的B. 大脑皮层运动代表区范围的大小与躯体中相应部位的大小不成比例C 排尿反射过程中既有分级调节也有反馈调节D. 大脑皮层言语区的H区受损，不能听见别人讲话的声音7.滑雪是冬奥会的重要比赛项目，下列表述正确的是A.运动前皮肤冷觉感受器兴奋，皮肤血管舒张，减少散热B.运动开始时下丘脑体温调节中枢兴奋，在此产生冷觉C.运动中甲状腺激素分泌增加，细胞代谢加快，增加产热D.运动后胰岛B细胞大量分泌胰岛素，血糖含量急剧下降8.下图表示种群特征之间关系，据图分析不正确的是（）A.①②③④依次为年龄组成、出生率死亡率和迁入率迁出率、种群数量、性别比例B.种群密度完全能反映③的变化趋势C.研究城市人口的变迁，迁入率和迁出率是不可忽视的D.种群数量还受自然气候等因素的影响9.果蝇常染色体上有基因N和基因Y，它们编码蛋白质的起始密码子对应的碱基序列分别位于图中所示的DNA序列中，起始密码子均为AUG。
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利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子LX 班级：生工《2》姓名：周誉学号：0802012040
【摘要】：
转墓因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达并从转基因动物奶中获取重组蛋白利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子LX是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景本文就转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子LX的载体构建研究现状以及存在的问题等作一综述。
【关键词】：乳腺生物反应器凝血因子lx 、血友病氏转基因动物
【正文】
人凝血因子,人体凝血系统中重要的凝血因子它的缺乏会导致一种性连锁遗传的出血性疾病—血友病。
目前主要靠替代疗法。
即注射正常人血浆制剂以补充患者所缺乏的hfix。
然而这种治疗存在着血液来源困难以及有从供血者传染肝炎病毒，爱滋病病毒等致病因子的危险。
因此，传统的从血浆中提取hfix的方法远远不能满足临床需要。
虽然通过重组DNA技术已能够在鼠肝细胞株中合成有生物活性的hfix。
但是产量低，成本昂贵也难以满足实际需要。
而转基因动物乳腺生物反应器是基因制药的新方法。
通过转基因动物建立哺乳动物乳腺生物反应器来生产珍贵的药用蛋白也是近年来生物工程领域的研究热点。
1.乳腺生物反应器生产人凝血因子lx
乳腺生物反应器是基于转基因技术平台使外源基因导人动物基因组中并定位表达于动物乳腺并能从动物乳汁中获取具有重要价值的重组蛋白的转基因动物的总称。
由于哺乳动物的乳房是一种天然的高效合成蛋白质的器官当外源基因的产物定向表达于乳腺时，可直接分泌于乳汁中而不损伤转基因动物本身特别是羊牛的泌乳量大，活性蛋白的产量高又容易收集。
因此转基因动物乳腺生物反应器就像一座生产活性蛋白的药物工厂只要牛羊吃的草就可以从奶中源源不断地生产出人类所需的药用蛋白质来.
根据临床实际需要来看,血友病性B传统治疗方法和基因治疗方法都不能满足实际临床需要。
利用哺乳动物细胞培养法和微生物发酵法生产LX成本极高,浓度低,纯化困难且生物活性低而乳腺生物反应器技术完全弥补了它们的不足.其优越性主要体现在乳汁分泌表达的药用蛋白经过哺乳动物体内复杂的加工和修饰其生化特性生物学活性和功能与天然蛋白完全相同.哺乳动物乳汁中的蛋白质种类较少主要是酪蛋白乳球蛋白乳清蛋白等因此提纯重组基因在乳汁中生产的目的蛋
白比较容易不需要复杂的工厂设备以哺乳动物的乳腺生物反映器生产药用蛋白是一个农业过程可以充分利用可再生的天然资源不会对环境造成不良影响动物乳房生产外源蛋白产量很高这会大大降低一些稀有药用蛋白的生产成本
根据有关专家分析利用转基因动物乳腺生物反应器生产有着非常广阔的前景
人凝血因子Ⅸ蛋白(hFIX)是治疗血友病B(Hemophilia B)的有效药物，临床治疗血友病B 所用人凝血因子Ⅸ来源于人血浆，不但成本高而且容易受到肝炎病毒和爱滋病毒的污染。
近年来，人们设想通过转基因动物乳腺组织即乳腺生物反应器生产hFIX蛋白，以开辟更广阔更安全的药物来源。
因此开展人凝血因子Ⅸ乳腺生物反应器的研究具有重要的经济意义和临床应用价值。
为了建立人凝血因子IX乳腺生物反应器，首先探索了通过病毒途径直接转染乳腺组织建立乳腺生物反应器的可行性，以MCK增强子，β-actin启动子控制hFIX小基因(minigene)表达顺序反向插人G1Na框架，构建复制缺陷反转录病毒载体并制备重组反转录病毒颗粒；以CMV启动子，hFIX cDNA和腺病毒框架构建腺病毒载体pAdCMVhFIX，与质粒pJM17共转染包装细胞制备含hFLX基因的重组腺病毒颗粒。
病毒颗粒通过直接转染活体奶山羊乳腺小叶和输人管导人两种方式建立了hFIX蛋白的乳腺表达系统和快速检测系统。
重组反转录病毒转染后，hFIX蛋白在奶山羊乳汁中的分泌表达量最高达47.9ng／m1，持续时间在2个周以上。
乳汁中hFIX蛋白80％以上具有生物学活性。
与输人管导人的方式相比，直接转染奶山羊乳腺小叶的方式转染乳腺组织，目的基因转染靶细胞的效率及其在乳汁中分泌表达的水平较高。
其次，构建了β-Casein基因，β-lactoglobulin基因控制的hFIX基因、LacZ基因乳腺组织特异性表达载体。
将hFIX基因乳腺表达载体转入了人乳腺腺癌细胞株(MCF-7细胞)，中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)，人胚肾上皮细胞(293细胞)，兔皮肤成纤维细胞(RSF细胞)中，研究了这些载体在离体细胞中的表达情况，发现MCF-7细胞较CHO细胞、293细胞、RSF 细胞更适合于作为乳腺特异性表达载体的离体表达系统，但与活体水平相比尚有缺陷。
以Stearylamine(SA)阳离子脂质体介导，尾静脉注射的方法将乳腺特异性表达载体导人哺乳期雌性小鼠的体内建立IX因子表达的快速检测系统；对一系列乳腺特异性表达载体构建的有效性，目的基因在乳汁中的表达水平作出评估；研究了β-casein基因的5’区，β-casein基因和hFIX基因各自的内含于1对hFIX基因在乳腺组织中表达调控的作用。
发现：β-casein基因5’端2．0kb的调控顺序可以指导hFLX基因在乳腺组织中的分泌表达；β-casein基因的intronl能够影响目的基因表达的乳腺组织特异性，可能其中含有乳腺特异性表达的顺序；hFIX基因自身的intronl能够明显提高hFIX基因在活体乳腺组织中的表达水平，和hFLX cDNA相比，hPⅨ基因自身的内含子1能够提高该基因在活体乳腺组织中的表达水平3倍以上；β-Lactoglobulin基因5’端873bp的调控顺序可以指导hFIX基因在乳腺组织中表达。
另外，将表达载体直接转入奶山羊的乳腺组织，研究了hFIX基因在奶山羊乳汁中分泌表达的可行性。
将通过以上研究筛选得到的pMCIXm表达载体采用显微注射技术注入小鼠和奶山羊受精卵细胞，获得6只外源基因稳定整合的转基因小鼠和5只转基因奶山羊．其中在2只转基因小鼠和1头奶山羊乳汁中测得hFIX蛋白的表达，表达水平在100ng/ml以上。
一期法证实，转基因小鼠和奶山羊乳汁中的hFIX蛋白具有凝血活性。
2 .建立乳腺生物反应器的基本方法。
建立hfix乳腺生物反应器的基本方法。
第一：载体构建，使基因的表达仅限于乳腺织，而且能够实现外源蛋白的全活性高水平分泌表达。
第二：用显微注射射技术将构建好的载体直接注射入山羊受精卵的原核中并将注射的受精卵移入假孕母羊输卵管内继续发育。
第三妊娠后出生的幼怠为转基因羊在它们的泌乳期选择乳汁中表达有hfix的母羊. 第四表达量最高的母羊产下的第二代公羊作为第三代转基因羊然后根据市场需要大量繁殖转基因羊。
3. 展望
据了解我国血友病发病率为1/100 000，故利用乳腺生物反应器生产人凝血因子LX在我国具有广阔开发前景和快速的经济效益。
目前人们利用转基因动物乳腺生物反应器生产hfix已取得了可喜的成绩。
但，首先，人们还应该在表达载体的构建方法上进一步改进更有利于大规模生产hfix。
其次还应该解决转基因动物的低效率，目的基因的低水平表达及随机整合等问题。
再者，还应该在产品的纯化技术上有所突破。
目前国内外均无成熟的纯化技术但是双水相体系用于分离纯化hfix纯度高达95%以上。
有望成为分离纯化转基因药物的新技术。
总之，随着新科技的不断开发与应用。
乳腺生物反应器必将成为一种简便大量低成本的生产药用蛋白的方法。
最终形成一种全新的生物医药产业这也将推动我国的转基因药物在!世纪的生物医药产业革命中占有一席之地。
【参考文献】
1.曾溢滔转基因动物与生物医药产业【J】. 生物学通报,1999,34(4):1-3
2.张克忠，崇松，陈立等人凝血因子LX乳腺特异性表达载体在离体细胞和
活体细胞中表达的初步研究【J】.复旦学报，1998,4
3.黄淑帧张克忠黄英等乳汁中分泌有活性的人凝血因子LX转基因羊的研制
【J】.科学通报，1998，（43）:783-784 ,。