TB-IGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
人IgA-抗组织转谷氨酰胺酶抗体(IgA-tTG)酶联免疫分析
人IgA-抗组织转谷氨酰胺酶抗体(IgA-tTG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E11907h特异性:本试剂盒可同时检测人IgA-tTG,且与其他抗体无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法半定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中IgA-tTG含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用组织转谷氨酰胺酶包被酶标板,制成固相载体。
向微孔中先加入待测样品进行反应,然后再加入辣根过氧化物酶标记抗人IgA-tTG抗体进行反应,经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IgA-tTG呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品中IgA-tTG的效价(抗血清最终能显色的最高稀释倍数记为效价)。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
3.辣根过氧化物酶标记抗人IgA抗体稀释液(HRP-anti-human IgA Diluent):1×10ml/瓶。
4.辣根过氧化物酶标记抗人IgA抗体(HRP-anti-human IgA):1×120μl/瓶(1:100)。
5.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
6.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
7.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
酶联免疫分析仪 操作说明书
酶联免疫分析仪L-MR-A操作说明书Operations ManualL-MR-A-2022.6版目 录contents前 言开 箱 检 查重 要 说 明1. 重要的安全操作信息2. 安全提示3. 售后服务第一章 简介第二章 产品特点1. 正常工作条件2. 基本参数和性能第三章 基本操作说明1. 仪器构成2. 损伤检查3. 安装要求4. 安装步骤第四章 软件操作指南1. 开机2. 用户登入3. 运行界面4. 报告界面5. 设置界面6. 帮助界面第五章 维护与保养、贮存与运输1. 维护与保养2. 贮存与运输第六章 故障分析与处理第七章 随机配件1 1 2 2 2 3 3 4 4 5 6 6 7 7 7 8 8 9 11 28 35 41 44 44 46 47 48用户在安全操作仪器之前需要对仪器是如何工作的有一个完整的了解。
用户在运行仪器之前,请仔细阅读这本手册。
在操作、维护和修理本仪器的所有过程,须遵守下面的基本安全防范措施。
如果不遵守这些措施或本手册其它地方指出的警告,可能影响到仪器提供的保护及仪器的预期使用范围。
感谢购置酶联免疫分析仪。
本用户手册包含仪器功能和操作过程等,为了确保正确使用仪器,在操作仪器前请仔细阅读手册。
请妥善保存手册,以便碰到问题时快速阅读。
用户第一次打开仪器包装箱时,请对照装箱单检查仪器和配件,若发现仪器或配件错误、配件不齐或是不正常,请与销售商或生产商联系。
前 言开 箱 检 查重 要 说 明1. 重要的安全操作信息2. 安全提示- 本仪器是符合GB9706.1标准的I类B型普通设备。
本仪器是室内使用的产品。
-生物污染。
所有测试样品、质控品、校准品等,均应视为具有传染性,接触时应当戴手套;与测试样品接触过的部件均视为具有传染性,接触时应戴手套。
-注意:人体伤害。
在酶标仪正在运行检测时,禁止将手或身体其它部分置于仪器前方15cm以内,以防受到伤害及损坏仪器。
-操作人员不要试图打开或维修仪器,这样做会使您失去保修资格,也可能会受到电击。
检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
清洗去除非特异抗体。
抗人 IgM 的辣根过氧化物(HRP)结合物加入后在 37℃下孵育 1 小时。此步骤与之前形成的抗原抗 体复合物结合。
洗去未结合物。
加入 TMB 底物,底物由过氧化物酶水解,减少底 物的液体产生蓝色产物。
加入终止液,蓝色变为黄色并且在由 ELISA 读数 仪在波长为 450nm 上读取吸光度。 吸光度与结合到包被抗原的特异性抗体的水平成
公式计算:
COL=样本吸光度/COV COV:临界值 NC:阴性质控 COL:临界指数 3. 结果解释: 图 1:肺炎衣原体抗体与 450nm 下吸光度之间的关系
吸光度 (450nm) O.D<1.4XC
OV 1.4XCOV≤ O.D≤1.5×
COV
COL
<1.4
1.41.5
结果
阴性 没有检 测 IgM 抗体 临界值 低水 平的 IgM 抗体
1) 阳性质控:吸光度应在 450nm 波长下≥0.8。 2) 阴 性 质 控 : 阴 性 质 控 的 吸 光 度 平 均 值 在 450nm 波长下为 0.1< NC ≤ 0.4 2. 计算 COV 和 COL 值:
COV=NC×2 NC=在 450nm 波长下检测两个阴性质控吸光度的平均 值
酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
大鼠降钙素原(PCT)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中PCT含量。
实验原理用纯化的PCT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的PCT抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的PCT呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成1,000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml,15.6pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0 pg/ml。
如配制500pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液:1×10ml/瓶。
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T6.0pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨质疏松含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨质疏松水平。
用纯化的人骨质疏松抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨质疏松,再与HRP标记的骨质疏松抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的骨质疏松呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨质疏松浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、 检验申请单独检验项目申请:人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV (1+2)]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆,用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml 的全血标本,或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ,离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间:室温(15-25℃)下可稳定48h ,普通冰箱中(2-8℃)稳定7d ,在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛,避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程 生效日期: 年 月 日版本:第1版第 页,共 页3.方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时,该抗体和固化的抗原结合于反应板上,并进一步与酶结合物相结合,在TMB 底物参与反应的情况下,产生显色反应。
结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
88.6%(39/44)
国外mparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TSPOT.TB in Children
Latent TB检出高
Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosis
临床应用案例
肺外结核辅助诊断:
➢某院感染科,女,75岁 ➢临床症状:发热数日,胸痛,干咳 ➢检测结果:X射线胸腔积液影像,积液涂片(-)、积液培养
(-)、TB-IGRA T-N 350pg/ml,积液单核细胞增多,血沉 快 ➢结果分析:对于肺外结核的诊断,涂片与培养的阳性率极低, TB-IGRA(+),结合其他非特异辅助指标可明确诊断肺外结 核。
A
25
NTM(非结核分枝杆菌)比例增高
2000 年全国流调分离的抗酸杆菌菌株中,NTM 菌株占11. 1% , 其中90% 为非结核分枝杆菌肺病。
NTM 肺病的临床表现与结核病相似, 既可有全身中毒症状, 亦有局部损害表现。但症状和体征缺乏特异性,20%-50% 的病 人无明显症状,除非做菌型鉴定,凭临床表现难与肺结核病相 鉴别。
A
16
TB-IGRA 产品特性
➢高灵敏度,检出率85%以上
➢高特异性
RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
该抗原具 有较强的Thl细胞免疫原性,且在所有制备卡介 苗的菌株及环 境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原,不受卡介苗和非分
支杆菌影响
IFNg
人(Human)结核分枝杆菌相关γ-干扰素(TB-IGRA)-NEWA
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)结核分枝杆菌相关γ-干扰素(TB-IGRA)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被结核分枝杆菌相关γ-干扰素(TB-IGRA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌相关γ-干扰素(TB-IGRA)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人结核杆菌IgGTBIgG酶联免疫分析ELISA
人结核杆菌IgG(TB-IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆及相关液体样本中结核杆菌IgG(TB-IgG)水平,感染人的血液学诊断。
实验原理:本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人结核杆菌IgG(TB-IgG)。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中结核杆菌IgG(TB-IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中人结核杆菌IgG(TB-IgG)的存在与否。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存阴性对照×1瓶×1瓶2-8℃保存阳性对照×1瓶×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
TB-IGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T 10pg/ml-240pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA),再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
生,生长迅速,且在含PNB(对硝基苯甲酸)和含TCH (噻吩二羧 酸肼)选择性培养基上均可生长,而结核分枝杆菌只在TCH选择 性培养基上生长。
06.16.2011
A
26
使用抗TNF药物前排查结核的意义
发病率 /100.000 患者/年
100
136
80
发病率 /100.000 患者/年
60
40
20
0 抗TNF药物
14.4
英国普通人群
Dixon W G et al. Ann Rheum Dis 2010;69:522–528. Tubach et al. Arthritis & Rheum 2009; 60: 1884-1894
A
11
结核检测的方法比较
• 不能区分卡介 苗接种者
• 不能区分NTM • 48-72小时复诊
接触史 临床症状 病原/病理
TST(结核菌素皮试)
• 不能区分NTM • 检出率低20% • 肺外结核难
涂片 镜检
结核 诊断
X射线
• 耗时长4-8周 • 检出率低50% • 涂阴检出低
22%-38% • 肺外结核难
A
20
临床应用案例
肺结核辅助诊断:
➢某院呼吸科病人,男 ➢临床症状:发热1周,咳嗽 ➢检测结果:TB-IgG(-),TB-IGRA(+)T-N的值是21.5pg/ml ➢结果分析:TB-IgG灵敏度低,易漏检。 ➢临床诊断:肺结核 ➢备注:2011年,WHO建议不再使用结核抗体检测结核感染
人甲状腺结合球蛋白(TBG)酶联免疫分析试剂盒
人甲状腺结合球蛋白(TBG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:E0305hUSCNLIFE TMn本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中甲状腺结合球蛋白(TBG)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗TBG抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TBG抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的TBG呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,0.78 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制25 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )50 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液A:1×10ml。
5. 检测稀释液B:1×10ml。
6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
TBIGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
T B I G R A酶联免疫分析试剂盒说明书集团文件发布号:(9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T 10pg/ml-240pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA),再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
猴免疫球蛋白A IgA)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书
猴免疫球蛋白A(IgA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T0.8µg/ml -240µg/ml使用目的:本试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猴免疫球蛋白A(IgA)水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA),再与HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猴免疫球蛋白A(IgA)浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(48µg/ml)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24µg/ml 5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液12µg/ml 4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液6.0µg/ml 3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液3.0µg/ml 2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液1.5µg/ml 1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
TBIGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
T B I G R A酶联免疫分析试剂盒说明书Document serial number【LGGKGB-LGG98YT-LGGT8CB-LGUT-人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T10pg/ml-240pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA),再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法
96T人骨质疏松酶联免疫分析试剂盒使用方法 检测范围:6.0pg/ml-200pg/ml 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨质疏松含量。
实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨质疏松水平。
用纯化的人骨质疏松抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨质疏松,再与 HRP 标记的骨质疏 松抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的 骨质疏松呈正相关。
用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(0D 值),通过标准曲线计算样品中人骨质疏松浓度。
试剂盒组成1 •标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能 马上进行试验,可将标本放于 -20 C 保存,但应避免反复冻融 2. 不能检测含 NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。
操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50山,待测样品孔中先加样品稀释液 40山,然后再加待测样品10 d (样品最终稀释度为 5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37 C 温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50 d ,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50 4,再加入显色剂B50 d,轻轻震荡混匀,37 C避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50 4,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
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人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
10pg/ml-240pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA),再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素(TB-IGRA)浓度。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。