埃希菌属
10-1埃希菌属
二、致病性和免疫性
(一)致病物质
l_黏附素(adhesm) 大肠埃希菌的黏附寨能使细菌紧密黏着在泌尿道和肠道的细胞上，避免因排尿时尿液的冲刷和肠道的蠕动作用而被排除。大肠埃希菌黏附素的特点是特异性高。它们包括定檀园子抗原ItⅡ，Ⅲ(colonlzatlon fact…ntlgen，cFA／l，cFA／Ⅱ，cFA／Ⅲ)；集聚黏附菌毛I和Ⅲ(。ggregatl…dhe…ce flmbme，AAF／I，AAF／Ⅲ)；束形成菌毛(bundlef0…g ptll，Bfp)；紧密黏附素(Intl…)；P菌毛(因能与P血型抗原结合而命名)；Dr菌毛(能与m血型抗原结合)；I型菌毛(其受体含有p甘鳝糖)和侵袭质粒抗原(1…∞“pl…Ld antlgen，Ipa)蛋白等。
(4)肠出血型大肠埃希菌(en…)h…rhaglcE c。“，EHEc)：为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。1 982年首先在美国发现，血清型主要为0157：H7。1996年日本大阪地区发生流行，患者逾万，死亡l】人。5岁以下儿童易感染，感染茼量可低于loo个，夏季多见．症状轻熏不一，可为轻度水泻至伴剧烈腹痛的血便。约10％<lO岁患儿可并发有急性肾衰竭、血小板减少、溶血性贫血的溶血性尿毒综台征(hernfllync…一……d…e，HIJs)，死亡率达3％～5“。樗染食品是EHEc感染的重要传染源，如未煮透牛排和其他肉类制品、水、未经巴氏消毒过的牛奶、果汁和生的蔬菜和水果。牛可能是()157：H7的主要储存宿主。
～EH菌株表达志贺毒素、蔺称v一毒索或志贺样毒素)，即stx_I或stx_Ⅱ或二者，弓l起j三及钿砸徽绒毛酉五／E损伤。EHEc菌株还具有携带多种其他毒性因子的60—MI)只的质粒。stx_I与痢疾志贺菌产生的志贺毒素基本相同，stx_Ⅱ与stx_l有60％的同源，两型毒素均由溶原性噬菌体介导。Stx由1个A亚单位和5个B亚单位组成，B亚单位与宿主细胞特异糖脂受体(Gb3)结合，肠绒毛和肾上皮细胞有高浓度的糖脂受体。A亚单位内在化后可裂解60s核糖体亚单位的28s rRNA，阻止其与氨酰tRNA的结合，终止蛋白质合成，肠绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加。Hus的发生在表达stx_Ⅱ的EHEc中较多见，园stx-Ⅱ能选择性地破坏肾小球内皮细胞。这种破坏引起肾小球滤过减少和急性肾功能衰竭。stx还能刺激炎症细胞因子(肿瘤坏死因子a，白细胞介素6)的表达，除其他效应外，还可加强糖脂受体的表达。
肠杆菌科及埃希菌属
致人类腹泻五类大肠埃希菌
肠产毒性大肠杆菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli) 肠侵袭性大肠杆菌 EIEC (enteroinvasive E.coli) 肠致病性大肠杆菌 EPEC (enteropathogenic E.coli ) 肠出血性大肠杆菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli) 肠集聚型大肠杆菌EaggEC 肠集聚型大肠杆菌EaggEC (enteroaggregative E.coli)
4) 分子生物学鉴定
抗菌药物敏感试验
耐药性问题严重. 耐药性问题严重 天然耐药与获得性耐药 多重耐药菌株出现,根据药敏实验选用抗生素 根据药敏实验选用抗生素. 多重耐药菌株出现 根据药敏实验选用抗生素 耐药谱成为医院感染流行病学调查标志
抗体检测
主要用于伤寒和副伤寒的辅助诊断（肥大反应） 主要用于伤寒和副伤寒的辅助诊断（肥大反应）
肠杆菌科有24个菌属 肠杆菌科有24个菌属、 个菌属、 上百个菌种， 上百个菌种，常见的有大 肠杆菌、 肠杆菌、沙门菌和志贺菌 等。
临床意义
• 肠道外感染 肠道外感染：除志贺菌外多数肠杆菌均可 引起肠道外感染，且多为院内感染。 • 肠道内感染 肠道内感染：主要是埃希菌属、志贺菌属、 沙门菌属和耶尔森菌属引起的。
微生物检验
• 检验程序
微生物检验
• 标本采集 1.肠外标本 2.肠内标本：疾病早期，挑取有脓血部分。 • 标本直接检查无鉴别意义
微生物检验
• 分离培养 1.肠外标本:无菌部位标本用血琼脂 血培养用 无菌部位标本用血琼脂,血培养用
肉汤增菌,混有杂菌标本用 肉汤增菌 混有杂菌标本用MAC、EMB 混有杂菌标本用 、
微生物检验
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌属于肠杆菌科埃希氏菌属，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌，其细胞一般呈杆状，不具典型的细胞结构，其内的遗传物质没有与组蛋白结合，是长约1000微米的环状DNA分子。
大肠埃希菌细胞体限界膜（胞膜外）还有一层黏多糖蛋白构成的细胞壁，这和植物体细胞相似，胞体（菌体）宽约0.8μm，长2μm。
一般的条件下，大约20多分钟就繁殖一代。
此外，大肠埃希菌还有周鞭毛，兼性厌氧，对营养要求不高。
在麦康凯平板上形成红色、圆形隆起的菌落；在血琼脂平板上通常形成圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色、不透明的光滑、湿润菌落，少数菌株产生β-溶血环，少数呈黏液型菌落或较大、扁平、皱起的粗糙型菌落。
大肠埃希菌的抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。
现已知有171种O抗原，100种K抗原和56种H抗原。
一个菌株的抗原类型由特殊的0、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58（B4）:H2。
如需了解更多关于大肠埃希菌的结构信息，建议查阅生物学书籍或咨询专业生物学家获取准确信息。
埃希菌
大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上粘 稠菌落的特征（18-24h）
大肠杆菌O157菌落（SS平板）
KIA双糖管
（发酵葡萄糖和乳糖产酸产气， H2S –，动力+）
肠杆菌科细菌在克氏双糖铁琼脂（KIA）
抵抗力
对热的抵抗力较强，55℃经60min或60℃
加热15min仍有部分细菌存活。 在自然界的水中可存活数周至数月，在粪 便中存活更久。 胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。
2．胃肠炎（外源性感染，某些血清型）
①肠产毒素性大肠埃希菌 (enterotoxingenic E. coli, ETEC) 致病物质 定植因子：使细菌黏附到小肠上皮细胞上 肠毒素：LT、ST
重要血清型：O157：H7
O157让“卫生大国”蒙羞
日本历来自称“卫生大国”，一种自豪感溢于言表。 然而，有一种名不见经传的“尤物”——O157，却 屡屡肆虐日本列岛，让这个“卫生大国”蒙羞。 1990年，日本浦和市白鹭幼儿园就曾因园内的井 水被污染，造成了O157感染，导致319人患病，2名 幼儿死亡。 199l～1994年，日本每年约发现100例O157感染 者。其中，13岁以下的儿童占83％：除幼儿园、学 校出现集体发病外，还发现有家庭的零星发病。
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚 ↑ 吲哚试剂
大肠埃希菌、变形杆菌、霍 乱弧菌等
-
+
M -甲基红（methyl red）实验
葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇
葡萄糖→丙酮酸
甲基红 -
甲基红
+
产气肠杆菌— pH>5.4 大肠埃希菌— pH<5.4
+ +
埃希氏杆菌属菌落特征
埃希氏杆菌属菌落特征埃希氏杆菌是一类革兰氏阴性菌，具有较强的致病性。
在医学和生物学领域，埃希氏杆菌一直备受关注，因为它在引起多种疾病中起着重要作用。
埃希氏杆菌属（Escherichia）是革兰氏阴性杆菌菌属之一，菌落特征对于区分不同种类的细菌是至关重要的。
一、埃希氏杆菌属的历史发展埃希氏杆菌属是以奥地利科学家提奥多·埃希（Theodor Escherich）的名字命名的。
在1885年，埃希首次发现这种菌，当时他将其命名为“大肠杆菌”。
随着科学技术的进步和对埃希氏杆菌的研究不断深入，人们逐渐认识到埃希氏杆菌在人类健康中的重要性。
二、埃希氏杆菌属的分类和生物学特征埃希氏菌属包括多种不同种类的革兰氏阴性杆菌，其中最为常见的是大肠埃希氏菌（Escherichia coli）。
大肠埃希氏菌是一种肠道菌，通常存在于人和动物的肠道中。
除了大肠埃希氏菌外，埃希氏杆菌属还包括很多其他种类的细菌，它们具有不同的生物学特征和致病性。
三、埃希氏杆菌属菌落的形态特征埃希氏杆菌属的菌落通常呈不同的形态，这取决于具体的细菌种类。
一般来说，埃希氏杆菌的菌落呈灰白色或淡黄色，表面光滑而润湿。
在富含大肠埃希氏菌的培养基上生长的菌落通常呈现出乳白色，呈不规则的形状。
四、埃希氏杆菌属菌落的生长条件埃希氏杆菌属的细菌通常在高温下生长，最适宜的生长温度为37摄氏度。
此外，埃希氏杆菌对氧气的需求较高，通常为厌氧生物。
埃希氏杆菌通常在富含葡萄糖等碳源的培养基上生长良好。
五、埃希氏杆菌属菌落的营养要求埃希氏杆菌属的细菌对多种营养元素都有较高的要求，包括碳源、氮源、磷源和微量元素等。
埃希氏杆菌通常可以利用多种不同的碳水化合物作为碳源生长，如葡萄糖、乳糖等。
此外，埃希氏杆菌对磷的需求也较高，磷是其细胞壁合成和DNA合成的重要元素。
六、埃希氏杆菌属菌落的致病性埃希氏杆菌属的细菌具有较强的致病性，可以引起多种不同类型的疾病。
其中，大肠埃希氏菌是最为常见的致病菌之一，可以引起胃肠道感染、尿路感染等。
革兰阴性需氧和兼性厌氧性杆菌鉴定—埃希菌属(微生物检验课件)
微生物学检查与防治
❖ 肠道外感染
标本→涂片、染色→分离培养→鉴定 尿路感染时每ml尿含菌≥10万，有诊断价值
❖ 肠道内感染
用弱选择性培养基 分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等
❖ 卫生细菌学检查
卫生学标准：每ml饮水中细菌总数 ≤100个，每1000ml水中大肠杆菌≤3个， 每100 ml 瓶装汽水、果汁中，大肠杆菌 ≤5个。
2、耐热肠毒素（ST），分STa、STb两型 为低分子多肽，对热稳定 机制为激活细胞鸟苷酸环化酶，使 cGMP↑导致腹泻 LT和ST同时存在，致病性要强
▪ 所致疾病：
• 肠道外感染（内源性感染）
▪ 化脓性感染——定位转移
腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、 肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等
▪ 泌尿道感染——病原菌来自病人肠道（上行性）
大肠埃希菌检验程序
EMB平板上的E.coli
大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－） 右侧为对照（－－＋＋）
属鉴定特征
❖ 甲基红（+） ❖ 枸橼酸盐（-） ❖ 尿素（-） ❖ 发酵多种糖产酸
肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
致病性
❖ 致病物质
除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子 外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有： • 黏附素——具有高度特异性
▪ 3.肠出血性大肠埃希菌（ enterohemorrhagic E.coli ,EHEC）：O157:H7 出血性结肠炎， 溶血性尿毒综合征（HUS）
▪ 4.肠凝聚性大肠埃希菌 （ enteroaggregative E.coli EAEC）： 婴儿腹泻（持续性）
医学课件-埃希菌属
医学课件-埃希菌属1. 常见埃希菌种类介绍埃希菌属（Escherichia属）是一类革兰氏阴性杆菌，主要包括大肠杆菌（Escherichia coli）、致病性大肠杆菌（Pathogenic E. coli）、肠球菌（Shigella）等菌种。
其中，大肠杆菌是最为广泛分布的一种。
2. 大肠杆菌的基本特征（1）形态特征：大肠杆菌是一种革兰氏阴性杆菌，大小约为0.5-0.8μm×1.5-6μm，呈直杆状，有时会呈纺锤状。
（2）生长特性：大肠杆菌为好氧菌，最适生长温度为37℃，能够在普通营养培养基上生长繁殖。
（3）生物学特性：大肠杆菌能够发酵葡萄糖，产生酸和气体。
同时，它还能够代谢异糖、乳糖等其他糖类。
（4）致病特性：大肠杆菌可以在人体内引起各种疾病，包括泌尿系统感染、食物中毒、腹泻、肠炎等。
3. 食物中毒的传播途径大肠杆菌是一种主要通过食物传播的病原菌，可以通过食用含有菌体的肉类、蔬菜、水果、牛奶等生鲜食品而导致食物中毒。
4. 食物中毒的症状和预防措施食物中毒的主要症状包括腹泻、呕吐、发热、腹痛等，较为严重的病例还会导致肠出血、肾衰竭等病症。
预防食物中毒的关键在于加强食品卫生管理，在食品加工、储存、运输和销售的过程中避免对食品进行污染。
致病性大肠杆菌（Pathogenic E. coli）是指一类具有致病性的大肠杆菌菌株，主要包括大肠埃希菌、溶血性大肠埃希菌、肠出血性大肠埃希菌等。
致病性大肠杆菌通常具有以下特点：（1）能够生长在人类和动物的肠道内；（2）能够在某些情况下穿透肠道黏膜进入血液；（3）能够通过产生多种毒素对人体组织造成损害。
6. 肠出血性大肠埃希菌的症状和危害肠出血性大肠埃希菌（EHEC）是一种可以引起重症疾病和死亡的病原菌，通常通过食品传播。
其主要致病机理是通过产生细菌毒素破坏人体内皮细胞，导致小肠和大肠黏膜受损。
其主要症状为腹泻、腹痛、肠胀气等，较严重的病例还会伴随出血性结肠炎、急性肾衰等病症。
肠道杆菌(埃希菌属)
肠道杆菌（埃希菌属）
肠道杆菌是一大群寄居于人和动物肠道中的革兰阴性无芽孢杆菌
特点：多数有鞭毛、菌毛
生化反应：致病不分解乳糖、不致病菌多数能分解乳糖
抵抗力：用胆盐、煌绿
致病物质内毒素是肠道杆菌的主要致病物质
埃希菌属
大肠埃希菌（大肠杆菌）最常见，自婴儿出生后数小时就进入肠道并随终身
大肠埃希菌被用作粪便污染的监测指标，其数量多数可以反映物品被粪便污染程度
（一）生物学性状
1、形态：G-无芽孢、有鞭毛、菌毛
2、兼性厌氧菌落：灰白色菌活产酸并产气
3、抗原构造：O、H、K抗原
4、抵抗力：对碘胺类、链霉素、氯霉素敏感
大肠埃希菌能分解乳糖、产酸又产气
（二）致病性
1、定居因子：黏附素（菌毛）黏附于宿主肠壁
2、肠毒素：外毒素
3、K抗原：抗吞噬作用
所致疾病
（1）肠道外感染;肠道外感染以泌尿系统感染和化脓性炎症最为常见
（2）肠道内感染：
①肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）：5岁以下婴幼儿、旅行者腹泄
②肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：最早发现婴幼儿腹泄主要病原菌
③肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：大儿童、成人
④肠出血型大肠埃希菌（EHEC）
⑤肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）：引起婴幼儿持续性腹泄、脱水、血便
“大肠菌群数”作为饮水、食品等粪便污染的指标之一
每100ml生活饮水中，不得检出总大肠菌落，耐热大肠菌群和大肠埃希菌。
大肠埃希菌
大肠埃希菌埃希菌属：大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、伤口埃希菌致病因素；侵袭力K抗原和菌毛与炎症相关内毒素与发热、休克、DIC相关肠毒素耐热肠毒素和不耐热肠毒素cAMP水平升高，与腹泻相关所致疾病：肠道外感染：泌尿系统感染、菌血症、胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎常见于肠穿孔激发腹膜炎、腹腔内脓肿、肠道手术后激发感染肠道内感染：微腹泻至霍乱样严重腹泻、溶血性尿毒综合征根据其不同的血清型，毒力和所致临床症状的不同，分为：危险因素感染类型发病年龄主要临床表现肠毒素型大肠埃希菌（ETEC）海外旅行旅行者腹泻成人、儿童水样便肠致病型大肠埃希菌（EPEC) 急性腹泻﹤2岁婴儿、成人水样便肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC) 海外旅行志贺样脓血便成人粘液脓血便，含红白细胞肠出血型大肠埃希菌（EHEC) 未熟牛肉牛奶出血性肠炎儿童、老人血便、发热（白）肠凝聚型大肠埃希菌（EaggEC）急、慢性腹泻儿童腹泻水泻、呕吐ETEC：儿童腹泻和旅行者腹泻EPEC;：黏液便但无血液EIEC：志贺样脓血便（有红细胞、白细胞）EHEC：多为水源性或食源性感染，人与人之间通过粪口感染，产生Veno细胞毒素，抑制蛋白质合成并致Veno细胞病变，潜伏期3--5天，血便中无白细胞EaggEC:：:与世界各地慢性腹泻有关。
形态结构;:格兰阴性直短杆菌，多有鞭毛，能运动；引起场外感染的菌株有荚膜和周身菌毛抗原成分：O抗原多糖磷脂复合物(LPS），耐热，分型基础H抗原不耐热蛋白质K抗原多糖荚膜抗原，对热稳定血清型按O:K:H顺序培养特性：兼性厌氧，营养要求不高血琼脂上产生β溶血肠道选择培养基，发酵乳糖，形成有色菌落发酵多种糖产酸产气，吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐（1MVC)试验结果为+ + - -动力、吲哚、脲酶（MIU）反应为+ + -克氏铁琼脂上斜面和底层产酸产气，硫化氢阴性（AA+ -）微生物学检验采集标本;：静脉血，血培养痰液、脓、分泌物等尿液，3000r/min 10min，沉淀物涂片镜检：格兰阴性杆菌分离培养：痰液血平板、巧克力平板、沙保弱氏培养基尿液血平板、MAC、沙保弱氏培养基血液血培养鉴定：EMB上，扁平、粉红色有金属光泽MAC上粉红色或红色SS上红-粉或中央为粉红色，周围无色的菌落XLD上，不透明黄色的菌落大肠埃希菌一般不产生硫化氢血清分型：ETEC：生化反应鉴定加血清分型加肠毒素测定EPEC：生化反应鉴定加血清分型乳糖阳性用ELISA和细胞培养来检测EPECEIEC;：生化反应加血清分型及毒力鉴定多数此型菌动力阴性，乳糖不发酵或迟缓发酵，O152 和O124,，与志贺菌有的抗血清有交叉反应豚鼠眼结膜试验：角膜上皮细胞出现大量细菌和志贺菌鉴别：醋酸钠、葡萄糖胺利用试验和黏质酸盐产酸大肠埃希菌均阳性，志贺菌均阴性EHEC：生化鉴定加血清分型O157 ：H7 ，不发酵山梨醇。
兽医微生物学-肠杆菌科(埃希菌属+沙门氏菌属)
根据生化反应、血清学试验、DNA同源性研究 本科至少包括28个菌属，110个以上的菌种
1 ．布德维斯菌 Budvicia (1)
2 ．布特奥克斯菌 Buttiauxella (1)
3 ．西地西菌属 Cedeccea (5)
对大肠杆菌的正确认识
1.人和温血动物肠道内正常菌群成员之一，
人和动物出生后数小时即可经口就进入消化道后段，大量 繁殖而定居，并终生伴随。并经粪便不断散播于周围环境
2.某些血清型可引起畜禽疾病 3.大肠杆菌在环境卫生和食品卫生学中，常被 用作粪便直接或间接污染的检测指标。 4.本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实 验材料和研究对象
素大肠杆
E.coli菌多，（种1血0清0
EHEC)，
型
4）侵袭型大肠杆菌(Enteroinvasive E.coli ，EIEC)，
5）肠聚集型大肠杆菌(Enteroaggregative E.coli ，
EAEC)
• 此外,较常见的致病性大肠杆菌还有
– 败血性大肠杆菌 (Septicaemic E.coli ，
➢1.大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种, 均为菌体表面抗原。
➢是本菌血清型鉴定的物质基础。 ➢已确定的O抗原有173种，K抗原有80
种，H抗原有56种 ➢因此，自然界中存在高达数万种大肠
杆菌血清型可，但致病性大肠杆菌的 血清型数量是有限的。
（1）菌体抗原（O抗原）
➢化学本质——脂多糖（LPS）的多糖 侧链。 ➢耐热——121 ℃加热2h不破坏其抗原 性。 ➢173种，1个菌株仅含1种。其种类以 阿拉伯数字表示，可用抗O单因子血 清做玻板或试管凝集试验鉴定之。
埃希菌属及其鉴定
埃希菌属及其鉴定本属以大肠埃希菌为代表种。
1．细菌特性大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，直杆状，周鞭毛，能运动，有菌毛。
具有O抗原、H抗原、K抗原，其血清型别按O∶K∶H的顺序排列，以数字表示，如O111∶K58∶H2；O157∶H7等。
兼性厌氧，营养要求不高，菌落为灰白色、圆形，在肠道选择培养基上能发酵乳糖产酸形成不同颜色的菌落。
生化特征为：发酵多种糖类产酸产气，KIA：AA+-，脲酶-；IMViC++--。
2．临床意义大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起各种肠道外感染和肠道内感染。
引起肠道内感染的亦称为致腹泻大肠埃希菌，分为五组：（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC） ETEC致病机制主要通过产生LT和ST肠毒素导致腹泻和中毒症状，是旅游者腹泻和婴幼儿腹泻的常见病因，导致恶心、腹痛、低热和类似轻型霍乱的急性水样腹泻。
（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）是婴儿腹泻的重要病原菌，可导致发热、呕吐、严重水泻和粘液便，常引起婴儿脱水性酸中毒。
（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）与志贺菌有共同抗原，可引起类似志贺菌肠炎的症状，如发热、腹痛、水泻或典型菌痢的里急后重症状，并出现脓血粘液便。
（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）主要血清型为O157∶H7，引起出血性结肠炎（HC）。
表现为腹痛、水泻、血性便。
主要见于婴幼儿。
以暴发流行为主。
O157∶H7感染者中有少部分可发展成为溶血性尿毒综合征（HUS），出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾功能不全。
（5）肠凝聚性大肠埃希菌（EaggEC）引起婴儿急性或慢性水样腹泻伴脱水，偶有腹痛、发热与血便。
3．微生物学检验（1）标本采集无菌方法采集各类感染标本及时送检；粪便标本宜采集新鲜、有脓血、粘液的部分。
（2）检验方法1）显微镜检查为革兰阴性杆菌。
2）分离培养标本接种于BAP、SS、MAC/EMB培养基、或增菌培养基，置35℃孵育18～24h，观察菌落。
埃希氏菌属的标准操作程序
埃希氏菌属的标准操作程序1 概述埃希菌属是肠杆菌最常见的一群革兰阴性杆菌，广泛分布于环境中，是人类肠道的正常菌群，常为人体其他部位感染的致病菌，该菌属包括、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、和伤口埃希菌5个菌种。
大肠埃希菌是代表菌。
2形态与染色革兰阴性直短球菌，大小约为（1.1~1.5ul）×（2.0~6.0ul），多数有鞭毛，部分菌株有荚膜（微荚膜）和周身菌毛。
3 培养特性在血琼脂平板上菌落圆形，直径2~3mm、较大、稍凸、边缘整齐、灰白色、湿润，少数有β溶血环；在麦康凯平板上形成不透明、粉红色菌落，部分致病埃希菌可为无色菌落，少数成粘稠状菌落；在伊红亚甲蓝平板上为黑色菌落，有金属光泽，中国兰平板上为慷慨琼脂平板上程无色菌落。
赫尔曼埃希菌在血琼脂平板上形成较大、边缘整齐、湿润的黄色菌落；在麦康凯平板上呈黄色菌落；在营养琼脂平板上呈黄色菌落。
4生化反应典型发酵型埃希菌氧化酶实验阳性，KIA为A/A,发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇等多种唐，产酸产气，IMVIC为++––，动力阳性，硝酸盐还原阳性实验，大部分菌株不产硫化物。
不发酵型KIA为K/A，葡萄糖产酸不产气，不发酵乳糖、甘露醇。
致病性大肠埃希菌包括EIEC、ETEC、EPEC、EaggEC，需要结合血清学反应、毒力实验和临床症状。
5鉴别要点5.1本菌属特征：KIA为A\A，发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇，IMViC为++––，动力阳性。
5.2与志贺菌属的鉴别：通过赖氨酸脱羧酶、醋酸盐实验和血清分型的方法区分，埃希菌为阳性，而志贺菌为阴性。
5.3与变形杆菌德鉴别：IMViC都为++––，但埃希菌分解甘露醇，苯苯氨酸脱氨酶试验阴性，而变形杆菌则相反。
6细菌鉴定与药物敏感实验6.1形态染色革兰阴性直短杆状。
6.2分离培养谦性厌氧在血琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落，某些菌株可产生β任溶血，在肠道选择性培养基上可发酵乳糖。
埃希菌属分类和生物学特性
埃希菌属分类和生物学特性一、分类埃希菌属(Escherichia)包括（E.coli) ,嶂螂埃希菌(E.blattae)、弗格森埃希菌（E.fergusonii)、赫尔曼埃希菌(E.hermannii)、伤口埃希菌(E.vulneris）和近年新报告与儿童腹泻有关的E.albertii等。
本菌属细菌DNA的G+C的摩尔分数为48％～59％。
是最频繁的临床分别菌，也是肠杆科的主要成员，俗称。
婴儿诞生后数小时就定居于肠道并陪同终身。
该菌是人类重要条件致病菌，某些特别菌株是腹泻和泌尿道感染的重要细菌。
在环境和食品卫生学中，检测该菌作为被粪便污染的指标，我国饮水卫生标准规定大肠菌群数不高于3/L。
在分子生物学和基因工程讨论中，大肠埃希菌也是重要的试验材料。
二、生物学特性 1．形态与染色为革兰阴性短杆菌，大小为(0.4～0.7)um×(1～3)um，多数为周鞭毛，有一般菌毛和性菌毛，引起肠外感染菌株具有微荚膜。
2.培养特性养分要求不高，在一般养分琼脂上生长良好，菌落中等大小、凸起、灰白色、光洁、潮湿；某些菌株在血平板上呈β溶血；在EMB平板，发酵乳糖产酸，菌落呈紫红或紫黑色有金属光泽；在MAC和SS平板，分解乳糖产酸，菌落呈粉红色。
在液体培养基呈混浊生长。
3．生化反应发酵、乳糖、、产酸产气。
吲哚、甲基红、VP,盐(IMVic）实验的结果为+、+、-、-，此为的生化特征。
KIA培养基斜面和底层均产酸、产气，H2S阴性。
动力、、(MIU）培养基结果为+、+、-。
其他生化反应见表16-1。
4．抗原构造大肠埃希菌有O,H和K三种抗原。
①O抗原：血清学分型的基础，目前已超过171种。
②H抗原：大于56种。
③K抗原：按照耐热性不同，可分为L,A,B三型，一个菌株通常只含一个型别的K抗原。
血清型按O:K:H的挨次，以数字表示，如O111:K58,H2、O157，H7等。
三、临床意义（一）致病物质 1.侵袭力①K抗原：能抗吞噬，并有反抗抗体和补体的作用。
埃希菌、志贺菌属
快速诊断
分离培养 SS平板（无色透明小菌落）
荧光菌球试验 协同凝集试验
双糖培养基（生化反应）
血清学反应（玻片凝集）
最后诊断
防治原则
• 隔离患者、彻底治疗 – 切断传播途径 • 试用的口服菌苗：
– 链霉素依赖株重组活菌苗。 双价疫苗，具有广谱保护 作用。 • 磺胺药、氯霉素、痢特灵等 均有效，亦可选用环丙沙星、 菌必治等
群
型
1－10 1－6、x y变型 1－18 1
亚型
8a、8b、c 1a、1b、2a 、2b、 3a、3b、3c、4a、4b
•抵抗力
–比其他肠道杆菌弱，一般56～60℃
经10分钟即被杀死
–对酸和一般消毒剂敏感：1%石碳酸
15～30分钟死亡 ，在37℃水中存活20天， 在冰块中存活96天，蝇肠内可存活9～10 天
微生物学检查法
• 标本
– 粪便的脓血或粘液部分
• 分离培养与鉴定
– 鉴别或选择培养基 – 生化反应及血清学试验
• 毒力试验
– 接种于动物眼结膜（如有炎症，则为
有毒菌株 ）
•快速诊断
–免疫染色法
–免疫荧光菌球法
–协同凝集试验
–胶乳凝集试验
–PCR、杂交等方法
微生物学检查
新鲜脓血便/肛拭
及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存
卫生细菌学检查
大肠菌群 指在37℃，24小时内发酵乳糖产酸产 气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希 菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆 菌属等称大肠菌群。 大肠菌群指数 每1000毫升样品中的大肠菌群数 卫生标准： 大肠菌群数：饮水—不超过3个/1000ml 饮料—不超过5个/100ml
肠杆菌科概述、埃希菌属
破坏刷状缘 不产生肠毒素及其他外毒素 无侵袭力
Gut lumen
所致疾病
婴幼儿腹泻，热带国家、医院常流行 水性腹泻
Department of Microbiology, Harbin Medical University
肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）
致病物质
不产肠毒素，侵袭结肠
1982-first recognized as a pathogen 1985-associated with hemolytic uremic syndrome 1990-outbreak from drinking water 1991-outbreak from apple cider 1993-multi-state outbreak from fast food hamburgers 1995-outbreak from fresh produce 1996-outbreak in Japan -multi-state outbreak from unpasteurized apple juice
另外还有Vero毒素，又称志贺样毒素，由溶原性噬 菌体介导，为EHEC产生。作用使核糖体灭活，终止蛋 白质合成。 肠集聚耐热毒素为EaggEC产生，可导致大量液体分
泌。 所致疾病： 1、肠道外感染 条件致病菌感染 ，大肠杆菌移位 至肠外组织或器官引起肠道外感染，以泌尿系统感 染为主，如尿道炎、膀胱炎、败血症等。尿路感染 每ml尿菌量≥10万，可诊断。 2、肠道感染 表现为急性腹泻，为致病性大肠杆菌感染所 致，主要有五种类型：
临床意义
致病物质 所致疾病
返回
致病物质
菌毛或菌毛样结构
荚膜或微荚膜
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一、生物学特性
1、形态结构 为G-短小杆菌，多数有周身鞭毛、普通菌 毛和性菌毛。
8 大肠埃希菌（电镜下负染色） 大肠埃希菌（光镜下革兰染色）
8
大肠埃希（电镜彩 色照片）
一、生物学特性
2、培养与生化反应 兼性厌氧菌，营养要求不高，普通 琼脂平板37℃培养24小时即可形成菌落。因能发酵乳 糖，故在SS等鉴别培养基中，可形成红色菌落等。能 发酵多种糖类，产酸产气。
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学习目标
1. 掌握 致病性大肠埃希菌的主要生物学特性， 致病物质及所致疾病，防治原则。 2 .熟悉 大肠埃希菌的卫生学意义；消化道感染 细菌的微生物学检查。 3 .了解 肠道杆菌的共同特性。
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◆ 是人类和动物肠道中的正常菌群
◆ 以大肠埃希氏菌最为重要 ◆ 出生后数小时就进入肠道，并终生伴随 ◆ 大肠埃希菌是肠道的主要正常菌群，偶而也引 起条件致病，但也有致病性大肠杆菌
我国生活饮用水卫生标准（GB5749-2006）： 17 100ml饮用水中，不得检出大肠菌群
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四、防治原则
1、严格的无菌操作，防止医源性感染 2、良好的卫生习惯，防止尿路感染 3、保证饮食卫生安全 4、药物治疗选用敏感抗菌药 5、预防人类ETEC感染的人用疫苗正在研究中
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小结
1.肠道杆菌的共同特性 2.大肠埃希菌致病性 3.卫生细菌学检查
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二、致病性与免疫性
（一）致病物质
黏附素
内毒素
致病物质
外毒素
不耐热肠毒素（LT） 耐热肠毒素（ST） 12
其他
K
K抗原
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二、致病性与免疫性
（二）所致疾病
1. 肠外感染
多为内源性的机会感染，以化脓性感染和泌尿
道感染最为常见。
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二、致病性与免疫性
2. 肠内感染
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三、微生物学检查
病原生物学与免疫学
第四章
消化道感染细菌
一群经粪-口途径进入机体的消化道，引起消化道疾 病或全身性疾病的细菌 主要包括：肠杆菌科、弧菌属和螺杆菌属等 其中，肠杆菌科中与医学有关的细菌种类最多，包括 有埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、变形杆菌属、克 雷伯菌属和肠杆菌属等
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肠道杆菌的生物学共性
1、相似的形态染色 中等大小，G-杆菌，无芽胞，多 数有动力 2、简单的培养条件 3、活泼的生化反应
乳糖发酵试验--初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌 不发酵乳糖（菌落无色） 肠道非致病菌 发酵乳异
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第一节 埃希菌属
一、生物学特性 二、致病性与免疫性 三、微生物学检查 四、防治原则
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（一）临床标本检查 1、标本采集 肠外感染采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等； 肠 内感染采取粪便，或者可疑的水和食物。
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三、微生物学检查
2、标本的检查
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直接镜检
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分离培养与鉴定
三、微生物学检查
（二）卫生细菌学检查 在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指 标 大肠菌群指数 每1000ml水中大肠菌群数
9 大肠埃希菌在血琼脂平 板上的菌落
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大肠埃希菌在麦康琼脂 平板上的菌落
一、生物学特性
10 IMViC试验（+、+、-、-） （即为吲哚、甲基红、VP和枸橼酸盐试验）
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一、生物学特性
3、抗原结构 具有菌体（O）抗原、荚膜（K）抗原 和鞭毛（H）抗原三种，是血清学分型的依据。
4、抵抗力 一般
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