细菌鉴定学习

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细菌的分离鉴定与鉴定技术分析

细菌的分离鉴定与鉴定技术分析

细菌的分离鉴定与鉴定技术分析细菌是我们日常生活和工作中经常接触到的微生物。

它们的分离鉴定对于人们的健康和疾病治疗有重要的影响。

在医学、食品、化工、农业等领域中,细菌的分离鉴定技术也是非常重要的。

本文将从细菌的分离鉴定入手,介绍其基本原理、方法和现代鉴定技术。

一、细菌的分离鉴定基本原理细菌的分离鉴定是指在混合的细菌样品中,通过某些方法将不同的菌种分离出来,并对分离的细菌进行鉴定和分类。

分离鉴定是细菌学的基本方法,也是研究细菌生物学及其与人类和环境的关系的前提和基础。

细菌分离所需的基本条件是菌落形态的不同、生长条件的不同或者对特定的生物学染色有不同的反应,主要包括如下几种方法:1、分离鉴定法:将混合菌液接种于特制的培养基上,通过不同营养要求、不同生理代谢等方面的差异,使不同种类的细菌单独生长成为单菌株,最后进行分离鉴定。

2、生化鉴定法:利用微生物不同的代谢方式及对化学试剂的不同反应,来分析鉴定特定的菌种。

其优点是快速方便,可进行大规模筛查,但不同种类之间有重叠,不同试剂对同一品种的反应也不一定相同。

3、分子鉴定法:在细菌体内提取其DNA或RNA,然后使用特定的技术获得序列信息,利用基因序列的高度保守性和可变性进行分类鉴定,其优点是快速、准确性高,适用于复杂菌种的分类和鉴定。

二、细菌的分离鉴定方法(一)菌落计数法菌落计数法是一种直接观察菌落数的方法,常用于对食品、环境和水样的微生物污染和细菌总数的测定。

具体实验过程如下:1、准备适当的菌落计数培养基和其他必要的实验设备。

2、将待测试的样品适当稀释到指定的浓度,通常要将样品稀释至合适的浓度才能保证菌落数的精确计算。

3、接种适量的样品在培养基上,将其培养在恰当的温度、湿度和 pH 下。

4、放置一定的时间后,菌落会不断地生长、分裂以形成许多菌落。

5、用放大镜、突显灯或者过色的方法观察菌落的数量,计算出待测试样品的总菌落数目。

(二)生化鉴定法常见的生化鉴定法有氧气需求量法、革兰染色法、荧光凝集法、十字试验法等。

细菌培养鉴定

细菌培养鉴定

细菌培养鉴定细菌培养鉴定是微生物学中非常重要的一个实验技术,它可以帮助科学家们准确鉴定细菌的种类,并且渗透细菌的性质和特征。

下面将详细介绍细菌培养鉴定的步骤、方法和注意事项,希望能给正在探索微生物的同学们带来一些指导与帮助。

首先我们来简要介绍一下细菌培养的意义。

细菌是单细胞的微生物,它们数量庞大,广泛存在于自然界的各个环境中,有些细菌对人类和生态系统有益,有些则会引起疾病。

通过细菌培养鉴定,我们能够准确了解菌落的形态、生长速度、色素产生、代谢产物等特征,进而确定细菌属、种类以及其病原性。

细菌培养鉴定的步骤相对复杂,但只要仔细操作,就可以得到准确可靠的结果。

首先,我们需要准备菌液样本,这可以是从环境中采集到的细菌,也可以是临床患者体液中的细菌。

样本收集后,需要进行前处理,如稀释、离心、加入抑菌剂等步骤,以确保每次培养的开始纯净。

接下来是选用适当的培养基,不同的细菌可能对不同成分和pH值的培养基有不同的反应。

培养基可以是液体的,也可以是固体的。

液体培养基适合观察细菌液体培养平均生长量和产生的代谢产物,固体培养基则适合观察菌落形态、大小和色素产生等。

培养基准备好后,我们需要使用无菌技术将样本接种在培养基上。

接种可以通过传递接触、划线法、点菌法等方法进行。

划线法适合于探测革兰氏阳性菌的固体培养基,点菌法适合于分离菌落的操作。

接种后,需要将培养皿、试管等进行标记,以便后续的鉴定分析。

接种完毕后,我们需要放置培养皿在恰当的温度下进行培养。

不同的细菌对温度有不同的要求,一般常见的细菌在37摄氏度下可以得到较好的生长。

在培养过程中,我们需要定期观察菌落的生长情况,如形态、颜色、大小、边缘等。

最后,我们需要进行细菌鉴定。

这可以通过形态观察、染色反应、生理和代谢试验等方法来实现。

形态观察主要包括菌落形状、大小、边缘等特征,染色反应可以使用革兰氏染色、抗酸染色等方法,生理和代谢试验则可以通过酶活性、产气能力、酸碱反应等指标来判断。

细菌—细菌的鉴定(水产微生物课件)

细菌—细菌的鉴定(水产微生物课件)
)细菌鉴定的主要方法 1. 经典分类方法 (1)形态学特征检测:涂片、染色和显微镜技术检测细菌的基本形态、大小、染色性、基本构造、 特殊构造等。 (2)生理生化特性和生态条件测定:应用人工培养技术、生理生化反应测定细菌的培养特性、呼吸 类型、对盐度、pH值得耐受性以及对碳源、氮源等的利用和代谢等。
任务五 细菌的鉴定
一、细菌的鉴定 (三)细菌鉴定的主要方法 2. 分子分类法 (1)氨基酸顺序和蛋白质分析 (2)DNA碱基序列 (3)核酸杂交
任务五 细菌的鉴定
一、细菌的鉴定 (三)细菌鉴定的主要方法 3. 血清学试验和噬菌体分型 (1)血清学试验:生物体外进行不同细菌之间抗原与抗体反应试验,主要适用于抗原结构同源程度 高的细菌种内以及个别属内血清型的分类鉴定。 (2)噬菌体分型:噬菌体对宿主的感染和裂解作用常具有高度的特异性。
任务五 细菌的鉴定
二、细菌的分类与命名 (二)细菌的命名 采用生物学双命名法,用属名(在前,第一个字母大写)和种名(在后,小写)进行命名。如结核 分枝杆菌的学名是Mycobacterium tuberculosis
作业
1. 名词解释:荚膜,芽孢,菌落,纯培养,培养基。 2. 细菌的基本结构和特殊结构有哪些? 3. 按照培养基的物理状态,培养基分为哪几种类型? 4. 试述细菌各个生长时期的特点。 5. 培养基制备的原则。
任务五 细菌的鉴定
一、细菌的鉴定 (一)鉴定的依据
1. 形态特征 2. 生理生化特征 3. 血清学反应 4. 遗传学特征
任务五 细菌的鉴定
一、细菌的鉴定 (二)细菌的鉴定步骤
1. 获得该菌种的纯培养物 2. 查找权威的鉴定手册 目前国际上公认和普遍采用的细菌分类系统是《伯杰氏细菌学鉴定手册》1923年出版,至1994 年经过几次修订,已经出版了第九版。详细列出了细菌生态学、增值、分离培养和保藏等方法。

细菌的鉴定方法

细菌的鉴定方法

细菌的鉴定方法细菌是一类微小的单细胞生物,广泛存在于自然界中的各种环境中,对人类和其他生物有着重要的影响。

鉴定细菌的方法对于研究细菌的特性、功能和致病机制至关重要。

本文将介绍几种常用的细菌鉴定方法。

一、形态学鉴定法形态学鉴定法是最常用的细菌鉴定方法之一。

通过观察细菌的形态、大小、颜色、聚集方式等特征,可以初步判断细菌的属种。

典型的形态学鉴定方法包括显微镜观察、染色技术和培养基选择等。

显微镜观察可以帮助观察细菌的形态结构,染色技术如革兰氏染色、抗酸染色则可以帮助区分细菌的革兰氏阴性和阳性。

此外,不同的培养基选择也可以提供有关菌落形态、颜色和营养要求等信息。

二、生理生化鉴定法生理生化鉴定法是通过检测细菌的代谢功能和生化特性来进行鉴定。

常用的生理生化鉴定方法包括氧需求性试验、酶活性检测、代谢产物检测等。

氧需求性试验可以判断细菌的需氧性,酶活性检测则可以通过检测细菌是否产生特定的酶来鉴定其种属。

代谢产物检测可以通过检测细菌的代谢产物如产气、产酸和产色等来进行鉴定。

三、分子生物学鉴定法分子生物学鉴定法是近年来发展起来的一种高效、准确的细菌鉴定方法。

通过提取细菌的DNA,利用PCR、序列分析等技术进行鉴定。

例如,16S rDNA序列分析能够提供细菌的高度保守的序列信息,通过与数据库比对可以确定细菌的种属和亲缘关系。

此外,还有基于DNA指纹图谱的方法如RAPD、AFLP等可以用于快速鉴定细菌。

四、免疫学鉴定法免疫学鉴定法是通过检测细菌与抗原或抗体的特异性反应来进行鉴定。

常用的免疫学鉴定方法包括血清学试验、免疫电泳等。

血清学试验可以通过检测细菌与抗体的凝集、沉淀或荧光反应来进行鉴定。

免疫电泳则可以通过检测细菌的特异性抗原蛋白质条带模式来进行鉴定。

细菌的鉴定方法包括形态学鉴定法、生理生化鉴定法、分子生物学鉴定法和免疫学鉴定法等。

不同的鉴定方法可以相互印证,提高鉴定结果的准确性。

在实际应用中,可以根据需要选择合适的鉴定方法,结合多种方法进行细菌的鉴定,以得到准确可靠的结果。

细菌鉴定实验报告

细菌鉴定实验报告

细菌鉴定实验报告细菌鉴定实验报告引言:细菌是一类微小的单细胞生物,它们广泛存在于我们周围的环境中,包括土壤、水体、空气以及人体内部。

对细菌的鉴定是微生物学领域中非常重要的研究内容之一。

本次实验旨在通过一系列实验方法和技术,对采集到的细菌样本进行鉴定和分类,以进一步了解细菌的特性和功能。

实验材料与方法:1. 细菌样本采集:我们从不同的环境中采集了多个细菌样本,包括水样、土壤样本以及人体表面的样本。

2. 细菌培养基制备:根据实验需要,我们准备了不同种类的细菌培养基,包括富含葡萄糖的琼脂糖培养基、富含氨基酸的肉汤培养基等。

3. 细菌培养:将采集到的细菌样本分别接种在不同的培养基上,并进行恒温培养,观察细菌生长情况。

4. 形态观察:通过显微镜观察细菌的形态特征,包括大小、形状、颜色等。

5. 细菌染色:使用革兰氏染色法对细菌进行染色,观察细菌的染色反应和细胞壁结构。

6. 代谢特性测试:进行氧气需求性测试、酸碱反应测试等,以了解细菌的代谢特性。

7. 生物化学试验:通过进行一系列生物化学试验,如氧化酶试验、葡萄糖发酵试验等,对细菌进行进一步的鉴定。

8. 分子生物学分析:使用PCR技术对细菌进行基因分析,通过测序和比对,确定细菌的亲缘关系。

实验结果与讨论:通过以上实验步骤,我们获得了丰富的细菌鉴定数据,并对不同细菌进行了分类和鉴定。

在形态观察中,我们观察到了不同形状和大小的细菌,包括球菌、杆菌、螺旋菌等。

在革兰氏染色中,我们发现一些细菌染色为紫色,说明其细胞壁含有厚重的革兰氏阳性菌细胞壁,而另一些细菌染色为粉红色,说明其细胞壁为薄壁的革兰氏阴性菌。

在代谢特性测试中,我们发现一些细菌对氧气有较高的需求,只能在氧气充足的条件下生长,这些细菌被称为好氧菌;而另一些细菌则可以在无氧条件下生长,被称为厌氧菌。

此外,我们还观察到一些细菌在酸性环境下生长良好,而另一些细菌则适应碱性环境。

通过生物化学试验,我们发现一些细菌具有氧化酶活性,可以将某些底物氧化,产生特定的反应;而另一些细菌则不能产生氧化酶。

细菌菌种鉴定

细菌菌种鉴定

细菌菌种鉴定
细菌菌种鉴定是指通过一系列实验方法,确定未知细菌的种类。

常用的细菌菌种鉴定方法包括:
1. 形态学鉴定:通过观察细菌的形态、大小、颜色、排列方式等特征,初步判断细菌的种类。

2. 生理生化鉴定:通过检测细菌的代谢产物、酶活性、营养需求等生理生化特征,进一步确定细菌的种类。

3. 分子生物学鉴定:通过检测细菌的基因组 DNA、16S rRNA 基因序列等分子生物学特征,准确鉴定细菌的种类。

细菌菌种鉴定是细菌学研究和临床诊断的重要基础,对于预防和控制细菌感染具有重要意义。

细菌鉴定的方法和步骤

细菌鉴定的方法和步骤

细菌鉴定的方法和步骤
细菌鉴定是通过一系列方法和步骤来确定细菌菌种的过程。

以下是常用的细菌鉴定方法和步骤:
1. 收集样品:从目标环境或感染部位收集细菌样品,如血液、尿液、唾液、食物等,以便后续实验。

2. 培养:将细菌样品接种到适当的培养基上,提供足够的营养物质和环境来促进细菌的生长。

3. 纯化:将单个细菌菌落分离出来,并通过连续的传代培养使其得到纯化,以避免不同细菌种类的混杂。

4. 形态观察:观察细菌在固体培养基上的形态特征,如菌落的形状、颜色、大小等,以及在显微镜下的细胞形态,如形状、大小、结构等。

5. 染色:将细菌样品进行染色,如革兰氏染色、抗酸染色等,以便观察不同细菌的染色特征。

6. 生理生化试验:进行一系列生理生化试验,如代谢产物的产生、酶活性、氧需求等,以确定细菌的代谢特征。

7. 耐受性检测:测试细菌对温度、pH值、氧气和抗生素等环境因素的耐受性,以进一步确认鉴定结果。

8. 分子生物学分析:利用分子生物学技术,如PCR、序列分析等,通过对细菌的基因组或特定基因进行分析,来确定细菌的物种。

9. 鉴定结果:根据以上步骤的结果和参考文献,将细菌归类到已知的菌属或菌种中,最终得出细菌的鉴定结果。

需要注意的是,细菌鉴定是一个复杂的过程,通常需要准备鉴别试剂和设备,以及具备相关实验操作的技术和经验。

常见细菌鉴定ppt课件

常见细菌鉴定ppt课件
β溶血:溶血隐秘杆菌(明胶阴性) 化脓隐秘杆菌(明胶阳性)
(3)菌落无β溶血,多形:放线菌,CDC2群。
嗜血杆菌种间鉴定
菌名 流感 + 溶血 杜克雷 副流感 D 副溶血 X因子 V因子 马血溶血 + + + + + 乳糖 甘露糖 触酶 + + CO2
+
-
-
-
-
-
-
+ +
+
-
+ -
D +
奈瑟菌科不同属间的鉴别
0
0
96
0
化酶
(阳性%)
伴放线放线杆菌 人心杆菌 啮蚀艾肯菌 金氏金氏菌 99 %) (阳性 1 8 0 19 100 100 100
多杀巴斯德
98
96
一些嗜二氧化碳杆菌鉴定
试验 肯 葡萄糖 0 乳糖 0 麦芽糖 0 蔗糖 0 精氨酸 伴放线 99 狗咬CO2嗜纤维 人心 93 100 艾
0
95 0 0
大多数常见共栖菌及部位
部位 呼吸道
需氧菌
菌名
化脓性链球菌及其他β溶血链球菌 肺炎链球菌,金葡,CNS,柰色球菌 支原体, Stomatococcus, 莫拉菌, 肠道菌,微球菌,乳杆菌,嗜血杆菌 韦荣球菌,消化链球菌, 梭杆菌 卟啉单胞菌, 拟杆菌, 普雷沃菌, 真杆菌,双歧杆菌,丙酸杆菌 念珠菌
大多常见致病菌及部位
部位
骨和关节 需氧菌
菌名
金葡,淋球菌,链球菌,流感,肠道菌 假单胞菌,CNS,分枝杆菌 申克孢子菌,球孢子菌,念珠菌属
大肠杆菌,奇异变形,克勒伯菌, 肠杆菌,假单胞菌,肠球菌,腐生葡 金葡,TB,淋球菌, 脲原体 念珠菌属

细菌鉴定的方法范文

细菌鉴定的方法范文

细菌鉴定的方法范文细菌鉴定是一种通过对细菌进行分析和检测,确定其种类和性质的方法。

这项工作对于疾病的防治、环境监测和食品安全具有重要意义。

下面将介绍一些常用的细菌鉴定方法。

1.宏观形态观察:这是最简单的一种方法,通过肉眼观察细菌的形态和特征,如颜色、形状、大小等等。

例如,大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌,形状为短杆状。

2.静态染色法:常用的染色方法有革兰氏染色和抗酸染色。

革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性。

抗酸染色主要用于鉴定结核杆菌等抗酸菌。

3.内容染色法:包括草绿病毒染色、亚甲蓝抗体染色等。

草绿病毒染色主要用于发现弓形虫等内寄生单细胞病毒。

亚甲蓝抗体染色主要用于鉴定豌豆疫霉菌。

4.结构染色法:主要是通过染色剂染色来鉴定细菌细胞的结构,如纤毛、鞭毛、芽孢、囊壳等。

例如,芽孢染色可以用来鉴定芽孢细菌。

5.生理生化特性检测:通过研究细菌的生理生化特性来鉴定细菌。

包括对菌落形态、产生酶类和代谢产物的检测。

例如,通过测定氧化/发酵代谢特点、生长适宜温度和环境pH值等特性,可以鉴定一些肠道细菌。

6.免疫学方法:免疫学方法主要包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫电泳等,通过检测细菌产生的特异抗原或细菌抗原抗体的存在与否,来鉴定细菌种类。

7.分子生物学方法:这是近年来发展起来的一种新的细菌鉴定方法。

它利用PCR技术、DNA测序等分子生物学方法,可以准确快速地鉴定细菌种类。

例如,16SrRNA基因测序可以精确鉴定不同细菌的亲缘关系。

8.生物学方法:生物学方法主要包括生长特性、营养要求等的检测。

例如,黄曲霉菌需要45℃温度下才能生长,这一特征可以用来鉴定黄曲霉菌。

以上所述的方法只是细菌鉴定中的一部分,随着科学技术的不断发展,细菌鉴定方法也在不断更新和完善。

细菌鉴定的准确与否对于相关研究和应用都有着重要的意义,因此,进行鉴定时需要综合利用多种方法,以提高鉴定的准确性。

细菌分析鉴定实验报告

细菌分析鉴定实验报告

一、实验目的1. 学习细菌分离与培养的基本操作方法。

2. 掌握细菌形态观察、生理生化反应等方法在细菌鉴定中的应用。

3. 提高实验操作技能和微生物学基础知识。

二、实验原理细菌是微生物的一种,具有独特的形态、生理生化特性。

通过观察细菌的形态、生理生化反应等特征,可以鉴定细菌的种类。

本实验主要采用以下方法进行细菌分析鉴定:1. 形态观察:通过显微镜观察细菌的形态、大小、排列等特征。

2. 生理生化反应:通过测定细菌对特定底物的代谢产物、颜色变化等,判断细菌的生理生化特性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等标准菌株;土壤、水、食品等样品。

2. 仪器:显微镜、细菌培养箱、无菌操作台、酒精灯、接种环、培养皿、试管等。

四、实验方法与步骤1. 细菌分离与培养(1)将样品进行无菌处理,制成悬浊液。

(2)取适量悬浊液,分别接种于不同类型的培养基上,如营养琼脂培养基、伊红美蓝培养基等。

(3)将接种后的培养基放入细菌培养箱中,培养适宜时间。

2. 细菌形态观察(1)取适量培养好的细菌,制成悬浊液。

(2)在显微镜下观察细菌的形态、大小、排列等特征。

(3)记录观察结果。

3. 细菌生理生化反应(1)将培养好的细菌接种于不同类型的生理生化试剂中,如糖发酵试剂、吲哚试剂、甲基红试剂等。

(2)观察试剂颜色变化、沉淀形成等反应现象。

(3)记录观察结果。

五、实验结果与分析1. 细菌分离与培养实验结果显示,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等标准菌株在相应培养基上生长良好,形成典型的菌落。

2. 细菌形态观察显微镜下观察,金黄色葡萄球菌呈球形,单个或成对排列;大肠杆菌呈杆状,单个或成链排列;肺炎克雷伯菌呈球形,单个或成对排列。

3. 细菌生理生化反应金黄色葡萄球菌对葡萄糖发酵呈阳性,吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性;大肠杆菌对葡萄糖发酵呈阳性,吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性;肺炎克雷伯菌对葡萄糖发酵呈阳性,吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性。

细菌鉴定实习实验报告

细菌鉴定实习实验报告

一、实验目的1. 熟悉细菌培养与鉴定的一般原理和方法。

2. 掌握细菌的分离、纯化、染色、观察等基本技能。

3. 通过实际操作,提高对细菌形态、生理生化特性的认识。

二、实验原理细菌鉴定是指根据细菌的形态、生理生化特性等特征,确定其种类的过程。

细菌鉴定方法主要包括分离培养、染色观察、生理生化反应等。

三、实验材料与用具1. 实验材料:细菌样品、细菌培养基、生理盐水、接种环、无菌水、染色液等。

2. 实验用具:恒温培养箱、显微镜、酒精灯、接种针、培养皿、试管等。

四、实验步骤1. 细菌分离培养(1)取适量细菌样品,加入无菌生理盐水中,充分振荡,制成悬液。

(2)取少量悬液,涂布于细菌培养基表面,进行平板划线。

(3)将平板倒置放入恒温培养箱中,培养24-48小时。

2. 细菌染色观察(1)将培养好的细菌菌落用接种针挑取,制成涂片。

(2)用酒精灯火焰固定涂片。

(3)用革兰氏染色法对涂片进行染色。

(4)用显微镜观察细菌形态、染色特性。

3. 细菌生理生化反应(1)根据细菌的生理生化特性,选择合适的生理生化反应实验。

(2)将细菌接种于相应培养基中,进行培养。

(3)观察并记录细菌的生理生化反应结果。

五、实验结果与分析1. 细菌分离培养实验中成功分离出细菌,培养出的菌落呈白色,表面光滑。

2. 细菌染色观察通过革兰氏染色,观察到细菌的形态、染色特性。

实验结果显示,该细菌为革兰氏阳性菌。

3. 细菌生理生化反应实验结果显示,该细菌具有以下生理生化特性:(1)能发酵葡萄糖,产生酸和气体。

(2)不能发酵乳糖。

(3)吲哚反应阳性。

(4)甲基红反应阳性。

根据实验结果,结合细菌的形态、染色特性和生理生化特性,初步判断该细菌为葡萄球菌属。

六、实验总结通过本次细菌鉴定实习实验,我掌握了细菌分离、纯化、染色、观察等基本技能,提高了对细菌形态、生理生化特性的认识。

在实验过程中,我深刻体会到理论与实践相结合的重要性,为今后从事微生物学相关领域的研究奠定了基础。

细菌鉴定入门知识点总结

细菌鉴定入门知识点总结

细菌鉴定入门知识点总结细菌是一类微生物,它们存在于我们周围的环境中,有些对人类和动植物有益,有些则是病原体,可能引起疾病。

要了解细菌的种类、特性和功能,就需要对细菌进行鉴定。

细菌鉴定是一门复杂的科学,需要掌握一些基础知识和技术。

本文将从细菌的形态、生理特征、培养和鉴定技术等方面进行介绍和总结。

一、细菌的形态1. 细菌的形态包括细胞形态、细胞结构和细胞排列。

细胞形态有球形、杆状、螺旋形等。

细胞结构包括细胞壁、胞质、胞外结构等。

细胞排列包括单胞、链状、丁字形等。

2. 细菌的形态特征可以通过染色观察、显微镜观察和电镜观察来获得。

染色观察有革兰染色、折射染色等方法。

3. 了解细菌的形态有助于确定其种类和进一步的鉴定工作。

二、细菌的生理特征1. 细菌的生理特征包括代谢类型、营养需求、生长条件等。

2. 根据代谢类型,细菌可以分为厌氧细菌和需氧细菌;根据营养需求,细菌可以分为自养细菌和异养细菌;根据生长条件,细菌可以分为耐热菌、嗜冷菌、嗜碱菌、嗜酸菌等。

3. 了解细菌的生理特征有助于选择合适的培养条件和培养基。

三、细菌的培养1. 细菌的培养是将细菌放置在适宜的环境下,提供适当的营养物质和生长条件,使其进行增殖。

2. 细菌的培养条件包括温度、pH值、氧气浓度等。

不同的细菌对这些条件的要求不同。

3. 常用的培养基包括富养基、微量元素培养基、选择性培养基和不同功能培养基等。

根据不同的需要可以选择不同的培养基。

4. 细菌的培养过程需要严格控制条件,以避免外部环境的污染和混杂。

四、细菌的鉴定技术1. 细菌的鉴定技术包括生化试验、分子生物学方法、血清学检测和免疫学检测等。

2. 生化试验可以通过对细菌进行酶反应、氧化还原反应、代谢产物分析等方式进行鉴定。

3. 分子生物学方法包括PCR技术、基因测序技术等,可以通过对细菌的基因序列和基因组信息进行分析来进行鉴定。

4. 血清学检测和免疫学检测可以通过对细菌的抗原和抗体进行研究和检测来进行鉴定。

细菌鉴定的经典方法

细菌鉴定的经典方法

细菌鉴定的经典方法
1. 剖析方法:根据细菌的生物学特征进行分析,包括细胞形状、大小、染色性质、胞内结构等。

2. 培养方法:将细菌培养在适宜的培养基上,观察其生长速度、形态特征和其他生理特性。

常用的培养方法包括草瓶培养、琼脂平板培养等。

3. 染色方法:常用的染色方法有革兰氏染色、抗酸染色和尼氏染色等,用于观察细菌的细胞壁性质、胞内结构等。

4. 酶学方法:通过观察细菌在特定酶底物上的代谢反应,如氧化酶、脱氢酶等,来判断细菌的酶活性和代谢能力。

5. 免疫学方法:利用抗体与细菌抗原结合的特异性反应来对细菌进行鉴定,包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验等。

6. 生化方法:通过检测细菌的生物化学特性,如糖利用、氧耗量、产气等,来判断其代谢特征和生理特性。

7. 分子生物学方法:利用PCR、基因测序等技术,直接检测
细菌的基因组或特定基因片段,从而确定细菌的种属和亲缘关系。

这些经典方法可以单独或结合使用,以确定细菌的鉴定结果。

现代技术的快速发展,例如基因测序和质谱分析等,也为细菌鉴定提供了更准确和快速的手段。

细菌鉴定原理

细菌鉴定原理

细菌鉴定原理细菌鉴定是微生物学中非常重要的一部分,它通过对细菌的形态、生理生化特性、生长条件等方面的观察和分析,来确定细菌的种属和特性。

细菌鉴定的原理主要包括形态学鉴定、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定三个方面。

首先,形态学鉴定是通过对细菌的形态特征进行观察和描述来进行鉴定的。

细菌的形态特征包括细胞形态、大小、颜色、结构等。

通过显微镜观察细菌的形态特征,可以初步确定细菌的种属,比如球菌、杆菌、螺旋菌等。

此外,还可以通过染色方法,如革兰氏染色、折射染色等,来观察细菌的染色性质,进一步确定细菌的种属。

其次,生理生化特性鉴定是通过对细菌的生长条件、代谢特性等方面进行观察和分析来进行鉴定的。

细菌的生长条件包括温度、酸碱度、氧气需求等,通过在不同的培养基和培养条件下观察细菌的生长情况,可以初步确定细菌的生长特性。

而细菌的代谢特性包括碳源利用、氮源利用、氧化还原反应等,通过对细菌在不同代谢基质上的代谢情况进行观察和分析,可以进一步确定细菌的种属和特性。

最后,分子生物学鉴定是通过对细菌的基因组序列进行分析来进行鉴定的。

随着分子生物学技术的发展,PCR扩增、基因测序等技术的应用,可以通过对细菌的16S rRNA基因序列进行比对和分析,来确定细菌的亲缘关系和种属归属。

分子生物学鉴定不仅可以快速准确地确定细菌的种属,还可以揭示细菌的遗传特性和进化关系。

综上所述,细菌鉴定的原理主要包括形态学鉴定、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定三个方面。

这些鉴定方法相互结合,可以全面准确地确定细菌的种属和特性,为微生物学研究和临床诊断提供重要依据。

通过对细菌鉴定原理的深入了解和实践应用,可以更好地认识和利用细菌资源,推动微生物学领域的发展和应用。

细菌的培养及鉴定_2022年学习资料

细菌的培养及鉴定_2022年学习资料

抗酸染色步骤-2、染色包括初染、脱色、复染三步。-冲洗-石炭酸复红维持3-5-3%盐酸酒精30’’~1-美 复染1-冲洗干燥→油镜观察
抗酸染色结果-抗酸菌呈红色,-常堆积成团,-排列无序,-偶呈分枝状生长。-背景及非抗酸性细菌呈兰色
抗酸杆菌报告-300个视野仅见到1一8条抗酸杆菌填写条-数-1+:镜检查见3-9条抗酸杆菌/100高倍镜+:镜检查见1一9条抗酸杆菌10高倍镜-3+:-镜检查见1-9条抗酸杆菌/高倍镜视-。4+:镜检查见>9条 酸杆菌/高倍镜视野
清洁中段尿液-尽量取早晨第一次尿液-嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水-女性病人->}-收集标杏前用肥皂水冲 外阴,再以灭菌清水-冲洗尿道->排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿-男性病人-翻转包皮,清洗尿道口-采集 本后立即送检!
常用的培养基种类和用途-哥伦比亚血平板一营养要求高的细菌-巧克力平板一含V、X因子,主要培养嗜血杆菌、-脑 炎球菌和淋球菌用-党-中国蓝/麦康凯平板一G-杆菌用-安-SS平板一沙门氏菌和志贺氏菌用-M-H平板一细菌 敏用-TCBS平板一弧菌科细菌用-沙包氏平板一真菌培养用-真菌显色平板一真菌培养用-罗氏培养基一分枝杆菌用
【结果】-。细菌被染成紫色者,称为革兰阳性菌;-。而细菌染成红色者,称为革兰阴性菌;-紫色G+b-红色G-
G+球菌细菌的培养及鉴定PPT课件
G-杆菌-Figure 2-Gram stain of Gram -E.coli cells-、
痰标本涂片染色低倍镜下分类-分级-白细胞(个)-上皮细胞(个)->25-<10-A、B两种情况的痰适合做培 ,C不合格,-应重新留标
分区划线法3区-第一区划线-灭菌接种环-↓-第二区划线-第三区划线

《细菌鉴定》PPT课件

《细菌鉴定》PPT课件
特殊气味等
形态学观察
* 营养需求(血琼脂、巧克力、营养琼脂生长 情况)
* 胆盐耐受(麦康凯生长情况) * 万古霉素耐受(含万古霉素巧克力生长情况) * 液体培养基生长现象(菌膜、上半部生长、
均匀浑浊、下半部生长、沉淀) * 半固体动力现象(清晰、毛刷样、倒伞状)
生化反应
* OF试验 * 各种糖发酵试验、糖氧化试验 * 糖衍生物发酵(α/β-甲基葡萄糖、β-葡萄糖胺、
不同种群的细菌根据培养的难易以及实际操作 时的难度而采用不同的鉴定手段
* 目前技术能培养的细菌采用传统手段
* 难培养细菌采用分子生物学手段(如麻风分支杆菌、 肺炎支原体、肺炎衣原体等)
* 而传统手段难以进一步鉴定的细菌则采用抗原抗体 血清学分类(如军团菌、沙门菌、志贺菌等)、细 胞壁脂肪酸结构和组成分类(如棒状杆菌相关属)、 挥发性代谢产物(如厌氧菌挥发性脂肪酸)指纹分 析
血清学试验(不常用)
* 铜绿假单胞菌生物分型血清 * 脑膜炎奈瑟菌分型血清 * 隐球菌可溶血抗原血清 * 脑膜炎5种可溶性抗原复合乳胶
* b型流感嗜血杆菌乳胶 * 肺炎链球菌乳胶(含83个血清型的多价血清) * A群脑膜炎奈瑟菌乳胶 * B群脑膜炎奈瑟菌/大肠埃希菌K1乳胶 * C群脑膜炎奈瑟菌乳胶
然耐药反证法鉴定
形态学试验
G+菌 BA生长、Choc不生长、MecK不生长,——Gram染色: 分G+co(革兰阳性球菌) ,G+ b(革兰阳性杆菌)
G+co—依靠溶血特征,菌落形态、菌落颜色、菌体形 态区分:
▲葡萄球菌:淡黄色/白色,中等大小,较凸,规则 圆形,β/γ溶血,较湿润,除金黄色葡萄球菌外, 一般不具有临床意义;
血清学试验(不常用)

细菌的鉴定方法

细菌的鉴定方法

细菌的鉴定方法细菌是一类微小的单细胞生物,它们在自然界中广泛存在,并且在生物学研究和医学诊断中具有重要的意义。

为了准确鉴定细菌的种类,科学家们发展了多种方法。

本文将介绍几种常见的细菌鉴定方法。

一、形态学观察法形态学观察法是最早也是最基础的细菌鉴定方法之一。

通过使用显微镜观察细菌的形态特征,如形状、大小、颜色等,可以初步判断细菌的类别。

常见的形态学观察方法包括染色技术,如革兰氏染色和抗酸染色,以及电子显微镜观察技术。

这些方法可以帮助鉴定出细菌的基本形态特征,但并不能确定其种类。

二、生理生化试验法生理生化试验法是通过研究细菌在特定环境条件下的生理和生化特性来鉴定细菌。

这种方法通常包括对细菌的代谢能力、酶活性、氧气需求和产物等进行测试。

常用的生理生化试验包括碳源利用试验、氧气需求试验、酶活性试验等。

通过对细菌在这些试验中的反应结果进行分析,可以初步确定细菌的种类。

三、分子生物学方法分子生物学方法是近年来发展起来的一种高效、准确的细菌鉴定方法。

这种方法是通过分析细菌的基因组DNA序列和RNA序列来确定其种类。

常用的分子生物学方法包括PCR扩增技术、核酸杂交技术和基因测序技术等。

利用这些技术,科学家们可以比较细菌的基因序列与已知的细菌数据库中的序列进行比对,从而确定细菌的种类。

四、质谱法质谱法是一种基于质量-电荷比的分析技术,可以用于鉴定细菌。

这种方法通过将细菌样品离子化,然后将离子通过质谱仪进行分析,得到细菌样品的质谱图谱。

通过比对质谱图谱与数据库中已知细菌的质谱图谱,可以确定细菌的种类。

质谱法具有灵敏度高、分析速度快的优点,因此在微生物学研究和临床实验室中得到了广泛应用。

五、免疫学方法免疫学方法是利用细菌与免疫系统之间的相互作用来鉴定细菌。

常用的免疫学方法包括血清学试验和免疫染色技术。

在血清学试验中,科学家们通过观察细菌与特定抗体之间的反应来确定细菌的种类。

而免疫染色技术则是通过使用特定抗体标记细菌,然后观察染色结果来鉴定细菌。

细菌学检验知识点总结

细菌学检验知识点总结

细菌学检验知识点总结细菌学检验是临床微生物学中非常重要的一部分,它涉及到细菌的病原性、药敏试验等方面。

细菌学检验的结果对临床医生的诊断和治疗都有着非常重要的指导意义。

本文将对细菌学检验的相关知识点进行总结,以供参考。

一、病原细菌检测方法1. 细菌培养和鉴定细菌培养是检验的第一步,通过在适当的培养基上进行培养,可以让细菌生长,然后进行鉴定。

而鉴定通常包括对菌落形态、涂片染色、生理生化特性等进行分析。

2. 分子生物学方法PCR技术、16S rRNA测序等分子生物学方法可以快速准确地对病原细菌进行检测和鉴定,是细菌学检验中的一种重要手段。

3. 快速检测方法利用免疫学技术,如ELISA、免疫荧光等,可以对病原细菌进行快速检测,缩短检验时间,有利于早期诊断和治疗。

4. 药敏试验药敏试验是通过在不同培养基上进行不同抗生素的敏感性试验,来确定病原细菌对抗生素的敏感性,从而为临床治疗提供依据。

二、常见病原细菌及其特点1. 革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、链球菌等,它们的特点是在革兰氏染色中呈紫色,具有厚壁和无外膜。

2. 革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌包括大肠杆菌、沙门氏菌、变形杆菌等,它们的特点是在革兰氏染色中呈红色,具有薄壁和外膜。

3. 厌氧菌厌氧菌是一种在无氧环境中生长的细菌,如产气荚膜梭菌、肠道球菌等,它们的特点是无氧代谢,对氧敏感。

4. 耐酸菌耐酸菌是一种对酸性环境具有很强适应性的细菌,如结核菌等,它们的特点是能在酸性环境下生长。

5. 其他特殊细菌还有一些特殊的细菌,如立克次体、支原体等,它们的生长环境、生物学特性都与一般的细菌有所不同,需要采用特殊的检测方法。

三、细菌学检验质量控制1. 培养基的质量控制培养基是进行细菌培养的最基本的物质,其质量直接关系到检验结果的准确性,因此要定期对培养基的成分、质量进行检验和评价。

2. 设备的质量控制细菌学检验所需的设备如显微镜、高压灭菌器、生化培养柜等都要定期进行维护和校验,确保其稳定可靠。

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现有一株细菌宽度明显大于大肠杆菌的粗壮杆菌,请你鉴定其革兰氏染色反应.你怎样运传统的细菌革兰氏染色法操作繁琐,初学者不易掌握,寻找一种简便方法。

方法:玻璃片上将细菌与碱液混合,用接种环或接种针往上挑,观察有无丝状物出现,我们把它叫作“细菌拉丝实验”。

结果:用本法鉴别细菌革兰氏染色性质,G^-菌有丝状物出现,即拉丝实验阳性,G^+菌无丝状物,拉丝实验阴性经过对照使用,本法具有快速,准确,简便,结果易判断,成本低廉等优点,值得推广应用。

由于细菌细胞壁的结构不同,革兰氏染色法可使有的细菌染上初染的的紫色,为革兰氏阳性细菌,有的细菌染上复染的的红色,为革兰氏阴性细菌。

大肠杆菌是革兰氏阴性菌,染色后为红色,细菌形态为短小的杆状,单个存在。

枯草杆菌是革兰氏阳性菌,染色后为紫色,细菌形态为杆状,比大肠杆菌大,可排成链状的,有的菌体里有椭圆芽孢(无色)或在视野中有散在的芽孢。

实验十肠杆菌科肠杆菌科(Enterobacteriaceae)是一大群寄居于人和动物肠道中、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。

多数为肠道的正常菌群,但在机体免疫力低下或寄居部位发生改变时可引起感染。

根据其生化反应、血清学试验、DNA同源性等可将肠杆菌科分为120多个菌种,其中与医学密切相关的有埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属等。

一、大肠埃希菌大肠埃希菌(E. coli)俗称大肠杆菌,是寄居于人和动物肠道的正常菌群。

当机体抵抗力下降、该菌侵入肠外组织或器官,可引起急性炎症或继发感染;有些血清型可引起腹泻。

从水和食品中检出较多大肠杆菌时,可判断它们已被粪便污染。

因此,大肠杆菌常被作为饮水、牛乳及食品的卫生学检测指标。

(一)形态与培养特性【材料与方法】1.大肠杆菌革兰染色标本片。

2.大肠杆菌普通琼脂平板、SS平板、中国蓝平板、伊红美蓝(EMB)平板培养物。

【结果】1.大肠杆菌为革兰阴性、中等大小杆菌,两端钝圆或稍弯曲,呈分散排列。

2.菌落特征(表10-1)。

表10-1 大肠杆菌在普通琼脂平板及选择鉴别培养基上的菌落特征培养基菌落特征普通琼脂平板圆形,中等大小,灰白,整齐,光滑菌落SS平板呈红色中国蓝平板呈蓝色伊红美蓝平板呈紫黑色,有金属光泽(二)生化反应【材料与方法】1.取大肠杆菌、产气杆菌分别接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖发酵管,37℃培养24h,观察结果。

2.取大肠杆菌、产气杆菌分别接种于双糖铁培养基,37℃培养24h,观察结果。

3.靛基质产生、甲基红、VP、枸橼酸盐利用试验(IMViC试验),见实验四。

【结果】大肠杆菌生化反应结果(表10-2)。

表10-2 大肠杆菌及产气杆菌5种糖发酵、双糖铁、IMViC试验结果上层下层葡乳麦甘蔗吲哚甲基红VP 枸橼酸盐乳H2S 葡动力大肠杆菌⊕⊕⊕⊕ d + - ⊕ + + + - -产气杆菌⊕⊕⊕⊕ + + - ⊕ + - - + +二、沙门菌属沙门菌属(Salmonella)为一群生化反应、抗原结构相似的革兰阴性杆菌,血清型别繁多,对人致病的有伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌、肠炎沙门菌,鼠伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌等,可引起人致伤寒、副伤寒、胃肠炎和败血症等疾病。

(一)形态与培养特性【材料与方法】1.伤寒沙门菌革兰染色标本片、鞭毛染色标本片。

2.伤寒沙门菌,甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌在普通琼脂平板,中国蓝平板,SS平板,伊红美蓝平板18~24h培养物。

【结果】1.伤寒沙门菌为革兰阴性杆菌,分散排列,鞭毛呈粗大、大波浪形。

2.菌落特征:伤寒、副伤寒沙门菌菌落特征一致(表10-3)。

表10-3 伤寒、副伤寒沙门菌在普通琼脂平板、选择鉴别培养基上的菌落特征培养基菌落特征普通琼脂平板圆形,中等大小,灰白,半透明,边缘整齐光滑SS平板较小,淡黄色,半透明中国蓝平板较小,淡红色半透明伊红美蓝平板较小,无色,半透明(二)生化反应【材料与方法】1.取伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌分别接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖发酵管,37℃培养24h,观察结果。

2.取伤寒沙门菌,甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌分别接种于双糖铁培养基,37℃培养24h,观察结果。

3.吲哚试验、尿素分解试验见实验四。

【结果】生化反应结果(表10-4)。

表10-4 伤寒、副伤寒杆菌主要生化反应结果细菌葡乳麦甘蔗动力H2S 吲哚尿素伤寒杆菌+ - + + - + + - -甲型副伤寒杆菌⊕ - ⊕⊕ - + d - -肖氏沙门菌⊕ - ⊕⊕ - + + - -(三)肥达(Widal)试验【原理】用已知的伤寒沙门菌O、H抗原和甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与待检血清作定量凝集试验,以测定待检血清中有无相应抗体存在,作为伤寒、副伤寒诊断的参考,一般间隔5~7d重复采血检查,如抗体效价随病程进展而上升,即有诊断价值。

【材料】1.伤寒沙门菌O、H抗原菌液,甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌H抗原菌液,生理盐水,待检血清。

2.试管、1ml吸管、试管架、37℃水浴箱等。

【方法】1.取清洁试管32支,分成4排,每排8支,依次编号(表10-5)。

2.于试管内各加入生理盐水0.5ml。

3.在每排第1管各加1∶10的待检血清0.5ml,用1ml吸管吹吸数次,充分混匀,吸出0.5ml注入第1排第2管作对倍稀释,依次稀释至第7管,从第7管吸出0.5ml弃去,第8管为对照。

同法将第2、3、4排依次作对倍稀释。

表10-5 肥达氏反应操作程序(单位:ml) 管号 1 2 3 4 5 6 7 8生理盐水0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.51∶10待检血清0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃去0.5诊断抗原0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5血清稀释度1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 -结果4.从第8管开始,从后向前,于第1排各管内加入伤寒沙门菌H抗原菌液0.5ml;于第2排各管内加入伤寒沙门菌O抗原菌液0.5ml;第3排各管分别加入甲型副伤寒沙门菌H 抗原菌液0.5ml;第4排各管内分别加入肖氏沙门菌H抗原菌液0.5ml。

5.加完菌液,振荡试管架,混匀,置37℃水浴箱孵育16~18h后观察结果。

【结果】凝集程度,以“+”多少表示。

+ + + + 最强,上液澄清,细菌全部凝集于管底。

+ + + 强,上液轻度混浊,细菌大部分凝集于管底。

+ + 中强,上清半混浊,细菌部分凝集。

+ 弱,上液混浊,细菌少部分凝集。

-不凝集,液体呈乳状与对照管相同。

效价判定:对照管均不发生凝集时,依次观察试验管。

以使凝集呈“+ +”反应的血清最高稀释度为其凝集效价。

三、志贺菌属志贺菌属(Shigella)是细菌性痢疾的病原菌,俗称痢疾杆菌。

细菌由消化道侵人肠道,靠侵袭力和毒素致病,毒素入血可引起毒血症。

本菌属的形态特点为革兰阴性杆菌,无鞭毛,但菌体周围有菌毛。

除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖外,均不分解乳糖。

根据生化反应及抗原不同可分为四群:A群(痢疾志贺菌),B群(福氏志贺菌),C群(鲍氏志贺菌),D群(宋内志贺菌)。

目前,我国以福氏志贺菌最多见,宋内志贺菌逐年增多,其他较少见。

(一)形态与培养特性【材料与方法】1.痢疾杆菌革兰染色片。

2.痢疾杆菌普通琼脂平板,中国蓝平板,SS平板,EMB平板培养物。

【结果】1.为革兰阴性杆菌,分散排列。

2.菌落特征,同伤寒沙门菌。

注:宋内志贺菌个别菌株可迟缓发酵乳糖,培养2~10d,菌落特点可接近大肠杆菌菌落特点。

(二)生化反应特性【材料与方法】1.葡萄糖、乳糖、甘露醇发酵试验。

2.双糖铁培养试验。

3.吲哚试验。

【结果】生化反应结果(表10-6)。

表10-6 痢疾杆菌糖发酵、双糖铁、吲哚试验结果细菌葡乳麦甘蔗动力H2S 吲哚痢疾志贺菌+ - + - d - - d福氏志贺菌+ - + + d - - d宋内志贺菌+ ﹡ + + + - - -注: ﹡:迟缓发酵;+:产酸;-:不发酵;d:某些菌株阳性四、粪便标本中致病性肠道杆菌的分离与鉴定正常情况下肠道中有多种细菌寄生,包括大量的厌氧菌和大肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等。

本实验的目的主要是分离沙门菌属及志贺菌属中的某些致病菌。

【标本采集】粪便中细菌极多,为此,粪便的微生物学检查常根据检验目的菌的不同而选择不同培养基或用适当方法处理,尽可能地抑制杂菌,以利于病原菌的检出。

但并不是粪便标本的采集无须注意杂菌污染。

若便器或标本盛器不洁而污染了变形杆菌,就可能影响病原菌的分离检出,甚至把污染菌误报造成误诊。

1.自然排便采集自然排便后,挑取其脓血或粘液部分2~3g,液状粪便取絮状物2~3ml, 置于灭菌容器内送检。

2.直肠拭子采集如不易获得粪便时,或排泄困难患者及婴儿,可用直肠拭子采取。

即用灭菌棉拭经生理盐水或甘油缓冲盐水湿润后,插入肛门内4~5cm(幼儿2~3cm)处,轻轻转动一圈拿出,插入灭菌试管内送检。

3.标本如不能立即送检,可将其保存于30%甘油缓冲盐水或专门运送培养基内。

【分离培养程序】自粪便中分离培养细菌需连续4d进行试验(图10-1)。

粪便或直肠拭子分离培养(SS、MAC)37℃、18~24h可疑菌落初步鉴定(双糖铁/尿素培养基)系列生化反应最终鉴定——血清学鉴定图10-1 粪便标本细菌学检查程序第1日:取粪便标本用SS平板作分区划线接种,37℃培养18~24h,观察菌落特征。

肠道致病菌不分解乳糖,所以在SS平板上生长的菌落为无色透明的小菌落。

如能产生H2S,则菌落中心呈黑色。

大肠杆菌在SS平板上一般不生长,但如粪便标本接种得多,大肠杆菌量多所以仍有少数生长。

大肠杆菌能发酵乳糖产酸,菌落呈红色,或菌落中心显红色,很容易和致病菌区分。

第2日:观察SS平板上菌落,用接种针挑取可疑菌落分别接种于双糖铁—半固体培养基中、尿素培养基,37℃培养18~24h观察结果。

第3日:观察半固体-双糖铁培养基结果。

如果双糖铁培养基中乳糖不发酵,可能为肠道致病菌。

根据葡萄糖发酵结果、运动力的有无等可初步判定为哪一类细菌。

最后鉴定该菌尚需自双糖铁培养基上取材做以下试验。

1.革兰染色。

2.接种葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖单糖发酵管,蛋白胨水及其他培养基37℃培养18~24h。

3.选用已知抗血清作玻片凝集试验。

第4日:表10-7 粪便中常见肠杆菌主要生化反应简明鉴定表双糖铁葡乳麦甘蔗吲甲V 枸尿橼上下硫动萄芽露基酸化层层氢力糖糖糖醇糖哚红P 盐素大肠杆菌+⊕-+⊕⊕⊕⊕ d ++---产气杆菌+⊕-+⊕⊕⊕⊕+--++-普通变形杆菌-⊕++⊕-+-+++--+伤寒沙门菌-++++-++--+---甲型副伤寒沙门菌-⊕ d +⊕-⊕⊕--+---肖氏沙门菌-⊕++⊕-⊕⊕--+- d -希氏沙门菌-++++-++--+-+-痢疾志贺菌-+--+-+- d d +---福氏志贺菌-+--+-++ d d +---鲍氏志贺菌-+--+-++- d +---宋内志贺菌﹡+--+﹡+++-+---注:﹡:迟缓发酵;+:产酸;⊕:产酸产气;-:不发酵;d:某些菌株阳性1.观察单糖发酵及其他培养基试验结果。

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