美天旎细胞因子分泌型细胞检测试剂盒
miltenyi biotec(德国美天旎生物公司)CD133相关专利产品
CD133是近年在干细胞领域研究较为活跃的细胞膜糖蛋白之一,常表达于未成熟的造血干细胞或祖细胞,新近有报道认为它在脑肿瘤、前列腺癌、小鼠的Lewis肺癌、B16黑色素瘤的干细胞中均有表达,已被认为是这些肿瘤干细胞的标志之一。
miltenyi biotec（德国美天旎）拥有CD133全系列的全球专利。
美天旎部分CD133：一.CD133的分子结构人CD133抗原为5次跨膜糖蛋白，目前发现的同源性抗原有CD133_1和CD133_2，其基因分别定位在人类的4号和2号染色体上，分析CD133的基因结构发现，CD133_1基因至少含有27个外显子，CD133_2基因比CD133_1基因少1个27 bp的4号外显子。
CD133_1抗原cDNA全长为3 794 bp，其中5′端有37 bp的非翻译区，3′端有1 159 bp的UTR，中间为2 598 bp的开放阅读框，编码865个氨基酸的蛋白。
转录起始密码子ATG位于38bp 处，ATG之后还有一编码19个氨基酸的信号肽序列,终止密码子位于第2 763位,第3 906核苷酸处有一长20 bp的polyA序列。
CD133_1与CD133_2的相对分子质量分别为120 KD 和112 KD，CD133_2由含856个氨基酸的肽链组成，比CD133_1少9个位于E1区的氨基酸[2]。
在发现人CD133的同年，在小鼠中也发现了CD133_1的同源性抗原并命名为Prominin_1，二者具有60％的相似结构，之后，成功克隆出Prominin_2，与Prominin_1和人CD133分别有29％和26％的相似结构，认为是Prominin_1的同源性抗原。
CD133的功能目前尚不清楚，存在于C端的酪氨酸暗示它可能是通过酪氨酸残基磷酸化作用而发挥级联效应的生长因子受体。
二. CD133阳性的肿瘤干细胞利用某些干细胞标志物与肿瘤细胞标志物相结合的方法确定肿瘤干细胞特异性的标志物，是当前肿瘤干细胞筛选的主要手段。
德国美天妮磁珠分选
MACS® 细胞分选策略
• 阳性分选
• 去除分选 • 去除分选后再阳性分选
• 多重分选
MD0044.02
MACS细胞分选策略
1、阳性分选：
• 根据特异性标志分选细胞: 阳性分选是指目的细胞磁性标记
后，作为阳性的标记组分直接分选出来。
• 优点：
》高纯度，尤其是富集稀有的细胞 》高回收率 》操作简便、迅速
MD0044.02
识别DC和DC亚群 New
DC 亚群特异性标志: Blood Dendritic Cell Antigens
Lineage- (CD3, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56) HLA-DR+ CD11c+ CD123low/-
BDCA-2/4+ BDCA-1+ BDCA-3+
MD0044.02
MACS® 技术分选与分析功能性T细胞
T细胞分选
T细胞亚群
T细胞功能亚群
抗原特异性 T细胞
Th细胞（ CD4） Tc细胞（ CD8） 调节性 T细胞 (CD4+CD25+) TCRr/d 细胞 (TCRr/d微珠 ) NK/T细胞 (CD56多选微珠＋ CD3微珠 )
NaiveT细胞 (CD45RO阴选 ) 活化 T细胞（ CD69、 CD25、 CD30） 效应 T细胞（ CD27） 记忆 T细胞（ CD45RA阴选、 CD45RO阳选） Th2细胞 (anti-CRTH2)
IFN-r IL-2 IL-4 IL-10 TNF-a
MD0044.02
MACS® 细胞因子分泌细胞分析与分选 New
Catch Reagent
德国美天妮磁珠分选
New
CD11c
CD11c+ B220+ Gr-1 (Ly-6C/G)+ DC
Conventional DC
Plasmacytoid DC (PDC)
CD11c B220 Gr-1
CD8+ DC
(―lymphoid― DC)
CD4+ DC
(―myeloid― DC)
mPDCA-1
CD11c CD8a
Miltenyi Biotec: 免疫磁珠分选技术及应用
德国美天旎生物技术有限公司 北方区技术支持 王卉
1/1 MD0xxx.01
内容
• MACS技术原理 • MACS技术设备及分选策略 • 几种特殊的MACS分选
分选和分析DC细胞 分选各种T细胞 分选和分析细胞因子分泌细胞 分选造血干细胞 分选人类肿瘤细胞 分选和分析凋亡和死亡细胞 分选转染细胞 分子生物学和蛋白生化的分选
MD0044.02
主要卖点
干细胞产品：人类：CD133、CD34、MSC试剂盒（CD271） 小鼠：系别阴性试剂盒、CD117微珠 定向分化培养基 DC产品： 人类：BDCA-1、BDCA-2/4 小鼠：CD11c NK产品： 人类：NK细胞阴选试剂盒、CD3/CD56 T细胞产品： CD4+CD25+调节性T细胞（人和小鼠） CSA系列 CD4、CD8微珠及阴选试剂盒 B细胞产品： CD19微珠及阴选试剂盒 肿瘤细胞分选：癌细胞富集试剂盒、HEA微珠、CD45阴选 单核细胞分选：CD14微珠及阴选试剂盒 间标微珠 死细胞去除试剂盒 预选滤器、FCR阻断剂、T细胞活化与扩增试剂盒 流式细胞仪抗体（价廉、包装量大、优质）
MD0044.02
识别DC和DC亚群 New
美天旎临床产品解决方案
德国美天旎临床解决方案
美天旎的完整解决平台–细胞治疗的首选工具
MACS GMP Antibodies CliniMACS and Reagents MACS GMP Antigens MACS GMP Cytokines MACS GMP Media MACS culture bag
细胞治疗领域介绍 3
自身免疫病 - 自体干细胞移植
主要适应症-CD34分选
1. 严重系统性硬化 2. 系统性红斑狼疮 3. 克隆氏病
严重的自身免疫病疾病用SCT治疗是必须的。
重要的临床试验 - ASTIS和ASSIST
ASTIS（系统性硬化）
入选150例患者已经完成，2010年10月完成最后一例入选 2011年发表安全性检测报告 2012年发表有效性报告
肿瘤，感染和耐受包括下列产品
细胞因子捕获系统（IFN-r）用于分离AgT CD8用于富集TIL
CD56,CD3,CD19用于富集NK细胞
CD14用于富集MoDC细胞 CD1c,CD304用于富集BDC，分别为MDC和PDC
CD25用于富集Treg细胞，有时也用CD8,CD19
预防复发，减轻感染，帮助抑制，支持免疫重建，从GVT中分离GvHD
CD45R去除系统：去除naiveT细胞，预防GvHD Treg细胞：CD25，减轻免疫耐受，预防GvHD，也可结合TexMACS GMP Treg
medium和GMP ExpAct Treg kit扩增Treg细胞。
DC疫苗和CCS：CD14，预防移植后的感染
CliniMACS® 富集管道系统
临床用
科研用（临床前期）
美天旎公司磁珠分选产品
美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。
微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。
微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。
MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。
此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。
MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。
其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。
多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。
这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。
MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠）二、MACS分选柱（Separation Column）MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。
在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。
手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需2.5-10分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。
此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。
三、MACS分选器（MACS Separators）MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。
德国美天妮磁珠分选
MACS技术 技术
设备与试剂
• MACS分选器
autoMACS分选仪 分选仪
• 9种程序，一机完成所有细胞分选 种程序， 种程序 • 成本低，两个可重复使用的分选 成本低， 周内100次 柱（2周内 次） 周内 • 快速（3－10分钟） 快速（ － 分钟 分钟） •重复性好 重复性好 • 全自动分选，仪器操作简单 全自动分选， • 适用范围广：从少量标本（105） 适用范围广：从少量标本（ 到大量标本（ ），进样量 到大量标本（4X109），进样量 0.5ml-50ml • 8种全血微珠，可以做常见细胞的 种全血微珠， 种全血微珠 全血分选， 全血分选，省去了费时的提取单个 核细胞过程
• 去除分选是磁性标记非目的细胞，并将其从细胞混合物中去 去除分选是磁性标记非目的细胞，
除，即未磁性标记的细胞为目的细胞。 即未磁性标记的细胞为目的细胞。
• 去除分选策略适用范围： 去除分选策略适用范围：
》去除不需要的细胞 缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞） 》缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞） 》不需要抗体和目的细胞结合 》需进一步通过阳性选择分选细胞亚群
MD0347.01
MACS® 磁性分选
MACS微珠进行 微珠进行 磁性标记
洗脱阳性分 选的细胞
未标记的细胞 先行流出
MD0651.01
分选前标本制备： 分选前标本制备：过滤
.02
MACS 技术
设备与试剂
» MACS微珠 微珠 » MACS分选柱 MACS分选柱 » MACS 分选器 » 详细分选方案 详细分选方案*
MD0197.02
MACS技术 技术
设备与试剂
• MACS微珠： 微珠： 微珠
MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺 磁化微粒，可用于目的细胞的磁性标记。 磁化微粒，可用于目的细胞的磁性标记。
美天旎细胞治疗全线-130723
细胞特异性的免 疫磁性标记试剂
管道
Mo-DC culture
5~7 ds
2 ds
美天旎DC细胞治疗方案
GM-CSF 1000 IU/mL IL-4 1000 IU/mL
流式细胞检测CD11c， CD40 ，CD80，CD83，CD86
IL-6 1000 IU/mL TNFα 1100 IU/mL IL-1β 1900 IU/mL PGE2 1 µg/mL
某些不适合手术、不能耐受放化疗的中晚期癌症
非T细胞相关的白血病和淋巴瘤
乙型肝炎，丙型肝炎，慢性寄生虫感染等
对于手术、放化疗或造血干细胞移植后患者体内微小残留病灶的清除， 防止癌细胞扩散和复发
T细胞相关淋巴瘤和白血病；器官移植后，长期使用免疫抑制药物或正 在使用免疫抑制药物的患者；自身免疫病患者
美天旎产品在CIK细胞治疗中的应用
NK治疗简介 NK（Natural Killer）来源尚不清楚，体外实验
表明，胸腺细胞在体外IL-2、 IL-12、IL-15、 IFN-α、TNF-α等细胞因子存在条件下培养也可 诱导出NK细胞。
NK细胞表面标记物为：CD3- CD56+
NK 细胞杀死肿瘤细胞特点
广泛识别肿瘤细胞，自然杀伤活性无MHC限制 分泌穿孔素及肿瘤坏死因子 起效快、杀伤能力强
重悬NK细胞 ，调整 浓度2×10e6
过夜培养(1000 U/ml IL-2)。用 5% HSA溶液洗
涤两次，重悬浮 细胞
NK细胞终产品 ，调整 细胞浓度2×10e7，回输人 体, 注射Hi-Cy/Flu，连续14
天注射IL-21 （1.75*10e6 IU/m2）
流式鉴定表型（CD3,CD4,CD8,CD56，CD25）
美天旎7月新产品
美天旎7月新品细胞分选产品：1、Pan-DC 富集试剂盒，人：适用于阴性分选Pan-DC细胞，可获得高活性，高纯度，高得率的DC细胞，分选细胞与下游实验相兼容。
应用：•分选的细胞适用于免疫表型分析和功能检测，分子分析；•与其他细胞共培养检测其与其他细胞之间的相互作用；•适用于细胞迁移实验。
2、高纯度CD34 磁珠试剂盒，人：该试剂盒可以分选获得超高纯度的CD34+造血干祖细胞，并且能够确保细胞功能和活性不受影响，分选获得的细胞与下游实验相兼容。
应用：分选的细胞适用于细胞培养，分子分析，流式检测。
3、MACSxpress 分选器该分选器适用于MACSxpress大磁珠的分选，无需配合分选柱，分选更方便，更快捷。
4、抗TRA-1-60 磁珠，人：TRA- 1-60单克隆抗体可以特异性的和表达在未分化的ES细胞，包括iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞表面的抗原相结合。
伴随着细胞的分化TRA-1-60在人ES细胞表面的表达量会降低。
TRA-1-60磁珠可特异性的分选人未分化的ES和重编程后的iPS。
应用：•适用于阳性分选人未分化的ES细胞，iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞；•分选的细胞适用于下游细胞培养；•分选的细胞适用于下游分子分析等；细胞培养产品：1、CytoBox Mo-DC：该试剂盒包括用于刺激单核细胞向DC转换的细胞因子，该试剂盒所含的细胞因子为重组人的粒细胞巨噬细胞克隆刺激因子（GM-CSF）和重组人的IL-4（rIL-4）。
应用：在GM-CSF和IL-4 的共同作用下，可以将单核细胞诱导成未成熟的DC。
2、TLR9 检测试剂该试剂盒中包括4种不同刺激TLR9受体的CpG ODNs 以及相应的ODNs 对照. 该试剂盒包括A-级, B-级, C-级和P-级.。
世界著名抗体公司
世界著名抗体公司Santa公司是世界上最大的抗体生产厂家，目前可提供的抗体种类多达两万多种，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
Abcam公司是世界有名的抗体王国，以优质、齐全的产品、完善的网络支持功能和强大的技术支持队伍得到全球客户的认可和赞誉。
并在2004年获得了对于生物界公司不可多得的英女王奖，拥有很好的知名度和口碑。
AbMART全球抗体生产行业的新贵，在全球首推低价格“保证使用成功”的抗体定制服务，保证定制的抗体能在ELISA, Western, IP, IF/ICC等各种实验中成功使用。
建立抗体研发和生产流水线，实现低价格和高速度提供各种抗体，做抗体行业的沃尔玛。
AbMART（艾比玛特）致力于抗体的工业化，目标是设立抗体定制服务的行业标准，是目前全球最大的抗体制备公司之一。
R&D公司于1976年成立于美国，一直致力于各种细胞因子及其相关分子的生产研发，其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其卓越的品质赢得了世界各国科研及临床诊断机构的青睐。
是全世界最大的细胞因子公司。
该公司产品丰富涵盖了百余种细胞因子类ELISA试剂盒, 重组细胞因子类蛋白（209种之多）及相关的多达250余种单克隆、多克隆抗体；细胞凋亡、Caspase及胶原酶系列以及细胞因子类等热点领域。
Proteintech GroupProteintech Group, Inc(武汉三鹰生物技术有限公司)是一家由留学人员和专业管理人员组成的新型生物技术外资企业，成立于2000年11月，2002年5月被认定为高新技术企业，目前是中国大陆最大的抗体公司。
公司总部和实验室设在武汉东湖新技术开发区关东科技园内，在美国和英国拥有自己的销售网络和网站（w ）。
从人组织样本制备单细胞悬液文献美天旎官方网站客户反馈
h_tumor_01；
Demo 反馈：每个 C 管最多处理 4g 组织（解离前先剪成小块）； 运行程序 m_lung_01；胶原酶 II 消 化 45 分 钟 ； 运 行 程 序 m_lung_02。 Demo 反 馈 ： 运 行 程 序 m_spleen_02；0.1%胰酶消化 30 分钟。 Demo 反馈：5 ml 缓冲液；500 mg 组织；运行 2 次 program C
and without cystic fibrosis. (2011)
J.Cyst. Fibros.
美天旎官方网站：客户反馈方案
颈部组织
鼻息肉和鼻甲 胎盘 视网膜 唾液腺 皮肤
脾脏 滑膜 胸腺
颈部组织
鼻息肉和鼻甲 胎盘
Demo 反馈：采用“人肿瘤解离试 剂盒”的标准方案 2.2.3 部分-包 括 gentleMACS 程 序 及顺 序 ： h_tumor_01 ； h_tumor_01 ； h_tumor_01；
参考科学海报：分离与冻存人脐 带 Wharton’s Jelly 单个核细胞的 新方法，其中含有间充质干细胞 和脐带血管细胞，还包括内皮前 体细胞，用于细胞治疗 产品说明书：人肿瘤解离试剂盒
应用说明：从人乳腺肿瘤中分离 肿瘤干细胞
产品说明书：人肿瘤解离试剂盒
客户报告：从移植的结肠肿瘤组 织中分离肿瘤细胞
DC 细胞 白细胞，成纤维 细胞
Demo 反馈：1 个胸腺加入 3 ml 分 选 CD22+ 细
RPMI 1640 + 1% FCS ； 运 行 胞（EBV 诱导的
m_spleen_01 程序，胎盘蓝染色 B 淋巴瘤细胞
检测细胞活性。
白血病病人）
Demo 反馈：Program C；胶原酶 pTEC
MACS方法手动分选套装选择
美天旎手动分选设备
内包括：
这款分选套装只能配合MS柱子使用，最大的细胞上样量是2X10，捕获细胞量是107。
用于阳性分选。
2．美天旎4通道分选套装：可以同时进展4个样本的实验，比较快捷，而且各种分选策略都适用
试剂盒内包括：
这款分选套装可以配合LS柱子和LD柱子使用，最大的细胞上样量是2X10，捕获细胞量是108。
可用于阳性分选和去除分选。
这款分选套装可配合使用MS柱子和LS柱子或LD柱子，mini套装最大的细胞上样量是2X108 ，捕获细胞量是107；midi套装最大的细胞上样量是2X109 ，捕获细胞量是108。
可用于阳性分选和去除分选，不足的地方就是每次只能进展一次实验。
4 MidiMacs套装
一根LS分选柱上样量为10E9, 适合阳性分选和去除分选
5 MiniMacs套装
一根LS分选柱上样量为10E8, 适合阳性分选和去除分选.
五款分选套装的比较：。
世界著名生物制剂公司
Assay Designs位于美国的密歇根州，成立于1992年，为全世界生化、医药专业的科研工作者提供优质、快速、方 便的产品，"使您的科研更为简单"。公司目前可提供检测和定量细胞调节、信号转导、炎症、氧化过程和凋亡相 关的分子。公司最近开发了CORRELATE 和TITERZYME 免疫试剂盒，活性检测试剂盒、FLASHLIGHT and BIOLIG HT 发光混合物、抗体等。Assay Designs 提供各种eicosanoid试剂盒、人和小鼠的细胞因子试剂盒以及世界唯一 的非放射性COX活性检测试剂盒，其精确和重复性无与伦比。另外，公司大量提供抗原和抗体相关产品。
CliniMACS介绍
美天旎细胞治疗平台CliniMACS系统简介第一部分、德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍第二部分、CliniMACS系统在临床细胞治疗中的应用一、CliniMACS细胞分选仪及其配件介绍二、CliniMACS CD34系统的安全性德国美天旎生物技术有限公司上海市仙霞路319号远东国际广场A栋2301室200051电话：（86 21）62351005传真：（86 21）62350953服务热线：800 820 2606北京市东城区朝阳门内大街银河SOHO D座50723室100010电话：（86 10）64107101传真：（86 10）64100990第一部分德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。
开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为我公司专利产品。
我公司总部位于德国科隆，在科隆和德国北部罗斯托克均有cGMP生产机构。
我们的产品有免疫磁珠、特异性细胞及蛋白质或者DNA/RNA分选用的MACS分选设备、单克隆抗体、无菌溶液、基础和特殊培养基、血液/血浆治疗用的生物学吸附剂、LIFE18血浆分离机、流式细胞仪及相关耗材。
MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了可在每个实验室进行高品质细胞分选的方法。
MACS技术原理MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。
美天旎细胞因子分泌型细胞检测试剂盒
美天旎细胞因子分泌型细胞检测系列试剂盒采用独特的技术
设计，能检测分泌细胞因子的白细胞的比例，而且无需固定、破膜
的步骤，所以标记的细胞是活细胞，检测后的细胞仍可用于下游的
细胞分选和培养等实验。
原理及操作步骤示意图：
技术原理：
1、多克隆刺激剂刺激T细胞3-16h，T细胞活化后大量分泌细胞因子；
2、捕获试剂与细胞共孵育，捕获试剂的一端耦联CD45抗体，因此，所有白细胞均能被捕获试剂标记，而捕获试剂另一端耦联细胞因子特异性抗体；
3、抗原特异性T细胞分泌的细胞因子被捕获试剂结合并捕获；
4、加入细胞因子特异性检测试剂，耦联荧光素的细胞因子抗体即可与细胞因子、捕获试剂形成带荧光的三明治复合物，即可用于流式检测。
技术优势：
1、无需固定破膜步骤，检测后的细胞为活细胞，可以用于细胞因子分泌型细胞的分选和培养。
2、美天旎专利技术，操作简单，可重复性好。
目前，美天旎已有多种细胞因子分泌型细胞检测试剂盒，如：
另有更多细胞因子分泌型细胞分选、检测试剂盒，您可以通过以下方式了解：上海优宁维生物科技有限公司
Email：info@
我们会尽所能的帮助您。
提供最专业、最全面的抗体服务。
细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理
细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理细胞因子检测是研究生物体内细胞间相互作用以及免疫和炎症反应的重要工具。
试剂盒是细胞因子检测中常用的实验工具，通过检测细胞因子的表达水平，可以了解细胞因子在机体免疫调节、疾病发展以及治疗效果等方面的作用。
本文将介绍几种常用的细胞因子检测试剂盒及其原理。
1. ELISA试剂盒ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用酶标记的抗体与待测细胞因子结合，通过底物反应等方法来测定细胞因子的浓度。
ELISA试剂盒一般包括固相酶标板、抗体、酶标记抗体、底物等多个组分。
首先，在固相酶标板上固定特异性的抗体，然后加入待测样品和酶标记抗体，待测样品中的细胞因子与抗体结合形成免疫复合体。
随后，通过底物反应产生荧光或色素等信号，测定底物反应的光强度或吸光度，从而确定细胞因子的浓度。
2. PCR试剂盒PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于扩增DNA片段的技术，也常用于细胞因子的检测。
PCR试剂盒包括DNA聚合酶、引物、模板DNA等多个组分。
PCR试剂盒的原理是在适当的温度条件下，利用DNA聚合酶酶活性，引物定向结合至待扩增的DNA片段，然后进行反复的变温扩增，分别进行DNA的变性、引物的结合和DNA片段的合成等步骤，最终扩增得到相应数量的特定DNA片段。
通过测定PCR产物的数量，可以推断细胞因子的表达水平。
3. 流式细胞术试剂盒流式细胞术是一种广泛应用于细胞因子检测的方法，也称为流式细胞仪。
流式细胞术试剂盒包括荧光染色剂、抗体等。
流式细胞术试剂盒的原理是将待测样品进行细胞标记，通常使用荧光染色剂标记细胞表面的某些蛋白，或者使用特异性的抗体标记细胞表面的特定细胞因子。
然后，通过流式细胞仪检测细胞标记的荧光强度或颜色，以及细胞数量，通过对流式细胞仪所得数据的分析，可得出细胞因子的表达水平。
细胞因子检测试剂盒的原理与检测方法探析
细胞因子检测试剂盒的原理与检测方法探析细胞因子检测是一种常见的生物学研究方法，用于评估生物体内细胞因子的水平和活性。
细胞因子是一类由多种细胞合成的蛋白质或肽类分子，它们在机体的免疫反应、炎症反应、细胞增殖以及组织修复等过程中发挥重要的调节作用。
细胞因子检测试剂盒是一种常用于测量细胞因子浓度的试剂盒，其原理和检测方法对于细胞因子的研究和应用具有重要意义。
一、细胞因子检测方法的原理1.ELISA法ELISA法是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用特定的抗体与待测细胞因子发生特异性结合，然后通过酶标记二抗与抗体复合物反应发生颜色反应，最后通过读取吸光度来间接测定细胞因子浓度。
ELISA法具有高灵敏度、高特异性和高重现性的优点，广泛应用于细胞因子的检测。
2.免疫荧光法免疫荧光法是一种直接观察和定量细胞因子的检测方法。
该方法利用细胞因子与特异性荧光染料或标记有荧光物质的抗体特异性结合，形成对应的荧光复合物。
通过荧光显微镜等设备观察并测定细胞因子的分布和定量情况。
免疫荧光法具有高灵敏度和高分辨率的优势，适用于细胞因子的多点和多通道检测。
3.流式细胞术流式细胞术是一种通过携带特异荧光标记的抗体与细胞因子结合，然后通过流式细胞仪对细胞群体进行快速检测的方法。
在流式细胞术中，细胞因子与特定抗体结合后，可以通过流式细胞仪进行单细胞的分析和定量，同时还可以与其他细胞参数进行联合检测。
流式细胞术具有高通量、高灵敏度和高精准度的优点，被广泛应用于细胞因子的研究。
二、细胞因子检测方法的操作步骤1.样品处理细胞因子检测试剂盒需要对待测样品进行前处理，通常包括样品收集、加入稳定液或溶液进行稀释、离心等步骤。
样品的前处理能够提高细胞因子的测定灵敏度和可信度。
2.试剂准备细胞因子检测试剂盒需要根据说明书准备试剂，包括稀释缓冲液、标准品、酶联免疫试剂等。
3.标准曲线制备标准曲线是细胞因子浓度与检测结果之间的关系。
根据试剂盒提供的标准品，将其按一定浓度系列进行稀释，并配制出一系列细胞因子浓度不同的标准品。
德国美天旎
MACS® MACS® Cell Separation Columns
根据不同的分选策略、细胞的大小和多少等条件， 选择不同的柱柱子。 如适合Positive selection的有MS 如适合Positive selection的有MS Columns, LS Columns, and XS Columns ;MScapacity:2×108 ，LS的 ;MScapacity:2× LS的 capacity:2× capacity:2×109, XS的capacity:2×1010；sparate rare cells XS的capacity:2× by using two columns；Large Cell Columns were designed columns； for positive selection of large human or animal cells Depletion，根据你是用kits 还是用Microbeads，抗原 Depletion，根据你是用kits 还是用Microbeads，抗原 表达水平，细胞多少等选择。
MACS® MACS® Separators
MACS® Separators are designed for fast and easy cell separation in combination with MACS Columns and MACS MicroBeads. They contain strong permanent magnets to induce a highhighgradient magnetic field within the MACS Columns – strong enough to retain cells labeled with minimal amounts of MACS MicroBeads.
细胞因子检测试剂盒的性能评估及标准化方法
细胞因子检测试剂盒的性能评估及标准化方法细胞因子检测试剂盒是一种常用的生物学实验试剂，用于测定细胞因子在生物样本中的浓度。
准确评估细胞因子检测试剂盒的性能和标准化方法对于提高实验结果的可靠性至关重要。
本文将介绍细胞因子检测试剂盒的性能评估和标准化方法，以及常见的技术要点。
一、细胞因子检测试剂盒性能评估方法1. 准确性评估准确性是评估细胞因子检测试剂盒性能的重要指标，可以通过对已知浓度的标准样本进行测定来评估。
选择多个浓度的标准样本，分别进行实验测定，并与已知浓度进行比较。
计算测定值和已知值之间的差异，以评估检测试剂盒的准确性。
2. 精密度评估精密度是评估细胞因子检测试剂盒性能的另一个重要指标，用于评估同一样本的重复测定结果的一致性。
选择同一生物样本，重复进行多次实验测定，并计算测定值之间的变异系数。
较小的变异系数表示测定结果的一致性较好，检测试剂盒的精密度较高。
3. 灵敏度评估灵敏度是评估细胞因子检测试剂盒性能的关键指标，表示检测器对低浓度细胞因子的响应能力。
选择不同浓度的标准样本，测定其信号强度，并记录变化幅度。
计算最低检测浓度（LOD）和最低定量浓度（LOQ），以评估检测试剂盒的灵敏度。
4. 特异性评估特异性是指检测试剂盒能否准确测定目标细胞因子而不受其他成分的干扰。
进行对照实验，将目标细胞因子与其他相关分子进行交叉反应检测，并评估结果的差异。
较小的交叉反应说明检测试剂盒具有较好的特异性。
二、细胞因子检测试剂盒标准化方法1. 样本处理标准化样本处理是细胞因子检测的关键环节，影响到最终测定结果的准确性。
建立样本处理标准化方法，包括样本采集、储存和处理流程的规范化。
确保样本的一致性处理可以提高实验结果的可靠性。
2. 实验参数标准化实验参数标准化是指在细胞因子检测试剂盒的使用过程中，标准化实验条件和步骤，以减少操作的变异性。
重点关注涉及温度、pH值、反应时间等关键参数的标准化。
确保实验参数的一致性有助于提高测试结果的准确性和重复性。
细胞因子检测试剂盒在疾病研究中的作用和前景
细胞因子检测试剂盒在疾病研究中的作用和前景概述：细胞因子检测试剂盒是一种用于检测和测量细胞因子水平的工具。
细胞因子是一类分泌的蛋白质，广泛参与了细胞间的相互作用和通讯过程。
它们在调节和控制免疫系统、炎症反应、细胞增殖和死亡等生物学过程中发挥着重要的作用。
因此，细胞因子检测试剂盒在疾病研究中具有重要的作用和广阔的前景。
作用：1. 探索疾病机制：细胞因子检测试剂盒可帮助研究人员了解疾病发生发展的机制。
通过测量和分析细胞因子的水平和变化，可以探索疾病的发病机制、病理生理过程以及相关的细胞信号通路等。
例如，通过检测免疫系统相关的细胞因子水平，可以深入研究自身免疫性疾病的发病机制。
2. 评估疾病严重程度：细胞因子水平的变化与疾病的严重程度之间存在关联。
细胞因子检测试剂盒的使用可以帮助医生评估患者的病情严重程度，并辅助制定有效的治疗方案。
比如，在肿瘤研究中，检测恶性肿瘤细胞因子的水平可以帮助评估肿瘤的侵袭性和预测患者的预后。
3. 监测治疗效果：治疗后细胞因子水平的变化可以反映治疗效果。
细胞因子检测试剂盒的使用可以帮助医生监测治疗的效果，并及时调整治疗方案。
例如，在炎症性疾病的治疗中，通过检测炎症相关的细胞因子水平的变化，可以评估治疗的有效性和选择适当的药物。
前景：1. 个体化治疗：细胞因子检测试剂盒的发展将有助于实现个体化治疗的目标。
不同患者对药物治疗的反应存在差异，这与其细胞因子水平的差异有关。
通过检测和分析细胞因子水平，可以更准确地判断患者对治疗的反应，从而为个体化治疗提供重要依据。
2. 新药研发：细胞因子检测试剂盒的应用有助于加速新药的研发。
通过对疾病相关细胞因子的检测，可以筛选出潜在的治疗靶点，指导和优化新药的设计和研发过程。
同时，细胞因子检测试剂盒还可用于评估新药的疗效，并提供相关的药理学数据支持。
3. 预测预后和复发风险：细胞因子检测试剂盒的应用有助于预测患者的预后和复发风险。
通过检测和分析患者血液中的细胞因子水平，在治疗前就可以预测患者的预后情况，并制定个性化的治疗方案。
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验试剂盒。
细胞因子是一类具有调节和介导免疫、炎症和细胞增殖等生物学功能的蛋白质分子，它们在机体免疫应答、疾病发展以及药物研究等领域具有重要的意义。
细胞因子检测试剂盒通过特定的试剂和技术，可以快速、准确地检测细胞因子的水平，为科学研究和临床诊断提供有力的支持。
细胞因子检测试剂盒的原理主要包括两个方面：免疫学方法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
免疫学方法是通过免疫学反应原理来检测细胞因子的水平。
具体步骤包括：1. 样品收集和预处理：收集需要检测的样品，如血液、血清、血浆或细胞上清等。
对样品进行预处理，例如离心、稀释或加标等，以提高检测的灵敏度和准确性。
2. 抗体结合：将与目标细胞因子相关的抗体加入样品中，通过抗原-抗体结合的方式，形成特异性复合物。
这些抗体通常是特异性识别目标细胞因子的单克隆或多克隆抗体。
3. 洗涤：对于非特异性结合的物质，通过洗涤步骤将其除去，以减少干扰并提高检测的特异性。
4. 信号产生：添加特定的辅助试剂，如酶标记的二抗或荧光标记的二抗等，在免疫结合复合物中形成信号物质。
5. 信号检测：利用光谱设备或荧光显微镜等仪器对信号物质进行检测和定量分析。
检测的方法根据试剂盒的不同而有所差异，常见的包括酶标记法、荧光法、放射免疫法等。
ELISA法是目前最常用的细胞因子检测方法之一，其原理基于酶标记物介导的免疫反应。
ELISA法可以快速、准确地检测细胞因子的水平，并且具有灵敏度高、重复性好的特点。
具体步骤如下：1. 吸附：将经预处理的样品加入包被了特异性抗体的微孔板孔中，目标细胞因子会与抗体结合。
2. 洗涤：将非特异性结合的物质通过洗涤步骤除去，以减少背景干扰。
3. 检测：添加特异性酶标记的二抗，它会与目标细胞因子结合。
通过酶底物的作用，产生可定量测定的颜色反应。
4. 反应终止：通过反应终止剂停止酶反应，阻止进一步的颜色反应产生。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
美天旎细胞因子分泌型细胞检测系列试剂盒采用独特的技术
设计，能检测分泌细胞因子的白细胞的比例，而且无需固定、破膜
的步骤，所以标记的细胞是活细胞，检测后的细胞仍可用于下游的
细胞分选和培养等实验。
原理及操作步骤示意图：
技术原理：
1、多克隆刺激剂刺激T细胞3-16h，T细胞活化后大量分泌细胞因子；
2、捕获试剂与细胞共孵育，捕获试剂的一端耦联CD45抗体，因此，所有白细胞均能被捕获试剂标记，而捕获试剂另一端耦联细胞因子特异性抗体；
3、抗原特异性T细胞分泌的细胞因子被捕获试剂结合并捕获；
4、加入细胞因子特异性检测试剂，耦联荧光素的细胞因子抗体即可与细胞因子、捕获试剂形成带荧光的三明治复合物，即可用于流式检测。
技术优势：
1、无需固定破膜步骤，检测后的细胞为活细胞，可以用于细胞因子分泌型细胞的分选和培养。
2、美天旎专利技术，操作简单，可重复性好。
目前，美天旎已有多种细胞因子分泌型细胞检测试剂盒，如：
另有更多细胞因子分泌型细胞分选、检测试剂盒，您可以通过以下方式了解：上海优宁维生物科技有限公司
Email：info@
我们会尽所能的帮助您。
提供最专业、最全面的抗体服务。