试验四尿肌酐的测定
尿液肌酐的2种测定方法及其在镉中毒诊断中的意义
尿液肌酐的2种测定方法及其在镉中毒诊断中的意义
庞新侠;刘庆;庞湘侠;韩玉芳
【期刊名称】《职业与健康》
【年(卷),期】2008(24)5
【总页数】1页(P415-415)
【关键词】尿液肌酐;测定方法;镉中毒;诊断
【作者】庞新侠;刘庆;庞湘侠;韩玉芳
【作者单位】河南省新乡市职业病防治研究所;新乡市中心医院;新乡市人民医院【正文语种】中文
【中图分类】R446.12
【相关文献】
1.尿液微量白蛋白肌酐比值（ACR）早期肾损害监测中的意义 [J], 袁开影;
2.糖尿病肾病早期诊断中尿液微量白蛋白于肌酐比值的临床价值分析 [J], 许云峰
3.尿液淀粉酶/肌酐比值在胰腺炎病程监测中的意义 [J], 张平华
4.尿液淀粉酶／肌酐比值在胰腺炎病程监测中的意义 [J], 张西凤; 张建敏
5.尿液低分子量蛋白测定在慢性职业性镉中毒诊断中的意义及方法评定 [J], 刘秋英;李森华;何康玟;谢国强;曾泽民
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肌酐的测定实验报告
一、实验目的1. 了解肌酐测定的原理和方法。
2. 掌握肌酐测定的操作步骤。
3. 学会使用肌酐测定试剂盒，并对其结果进行分析。
二、实验原理肌酐是人体肌肉代谢的终产物，主要由外源性和内源性两种组成。
外源性肌酐主要来源于食物中的肉类，内源性肌酐则是由人体肌肉代谢产生。
在正常情况下，肌酐主要通过肾脏滤过排出体外。
因此，通过测定血液或尿液中肌酐的浓度，可以评估肾脏的滤过功能。
本实验采用肌酐测定试剂盒，通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度。
三、实验材料1. 肌酐测定试剂盒2. 血清样品3. 移液器4. 一次性吸管5. 比色皿6. 移液器吸头7. 混匀器8. 水浴锅9. 移液器吸头10. 洗耳球11. 计时器四、实验步骤1. 标准曲线的制备（1）取6个比色皿，分别加入不同浓度的肌酐标准溶液。
（2）在每个比色皿中加入适量的肌酐测定试剂A和B，混匀。
（3）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（4）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（5）用移液器取标准溶液和样品，分别加入比色皿中，混匀。
（6）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
2. 样品测定（1）取3个比色皿，分别加入血清样品、试剂A和B，混匀。
（2）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（3）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（4）用移液器取样品，分别加入比色皿中，混匀。
（5）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
3. 结果计算根据标准曲线，将样品的吸光度对应到肌酐浓度，即可得到样品的肌酐浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制备根据实验数据，绘制标准曲线，得出线性方程：Y = 0.0162X - 0.0178（R² = 0.9989）2. 样品测定通过测定样品的吸光度，根据标准曲线计算得出样品的肌酐浓度为XX mg/dL。
六、实验结论本实验通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度，操作简便，结果准确。
尿肌酐 干化学法
尿肌酐干化学法
尿肌酐是指尿液中的肌酐含量，通常是通过干化学法来测定。
干化学法是一种简单、快速、准确的尿液分析方法，它可以在不需要使用化学试剂和设备的情况下，通过对尿液中的化学成分进行检测，来确定尿液中肌酐的含量。
干化学法的原理是，尿液中的肌酐可以与某些化学试剂发生反应，生成一些颜色变化明显的化合物。
这些化合物的颜色变化可以通过肉眼观察或使用比色计来测定。
常用的干化学法试剂包括：
1. 二苯胺：将尿液与二苯胺混合，如果尿液中含有肌酐，则会生成深紫色的化合物。
2. 甲基红：将尿液与甲基红混合，如果尿液中含有肌酐，则会生成红色的化合物。
3. 溴酚蓝：将尿液与溴酚蓝混合，如果尿液中含有肌酐，则会生成蓝色的化合物。
干化学法的优点是简单易行，不需要使用昂贵的化学试剂和设备，同时可以快速得到结果。
但是，它的准确性和精度相对较低，容易受到环境因素和操作误差的影响。
因此，在进行尿液分析时，需要结合其他分析方法来确定结果的准确性。
生物材料检验 实验一 尿肌酐和尿比重的测定
4.尿样比重范围1.010~1.035，超出范围认为尿样不合格，
应弃去重新采样。
管号 标准溶液/ml 水 /ml 肌酐浓度/（g/L） 0 0 3.0 0 1 0.20 2.8 0.20 2 0.40 2.6 0.40 3 0.60 2.4 0.60 4 0.80 2.2 0.80 5 1.0 2.0 1.0
Байду номын сангаас
向各管中加入2.0ml碱性苦味酸溶液，混匀，于室温 下反应20~30分钟。加5ml水混匀后，以零管做参比， 波长490nm下测吸光值，在0.5小时内比色完毕。每个 浓度测定3次，求平均吸光值。 测定：求标准曲线。 ρ（肌酐）=ρ1×f ρ（肌酐）--尿中肌酐的浓度。 ρ1--标准曲线上计算的肌酐浓度。 f--尿样稀释倍数，30. 注意事项：1.注意非特异的色素原干扰。 2.温度在15~20℃显色稳定，反应温度控制在30℃.
仪器与试剂
尿比重计 胶头滴管 尿杯 纯水 实验步骤 1.样品采集和保存 2.尿样的测定 尿比重折射仪的调零：用纯水洗净棱镜表面并用软纸 吸干。用胶头滴管滴2~3滴纯水在棱镜表面，按调零按 钮调零。 尿样测定：洗净棱镜并吸干，滴2~3滴尿样。 测定数值即为尿样的比重值。
注意事项
1.尿液不可冷冻。会导致沉淀。
实验仪器与试剂
1.仪器 分光光度计，比色杯 2.试剂 饱和苦味酸溶液（15g/L） 氢氧化钠溶液（100g/L） 碱性饱和苦味酸溶液 盐酸 肌酐标准溶液
实验步骤
1.样品的采集和保存 按所接触毒物或其代谢产物所规 定的采样时间，用50ml聚乙烯塑料瓶收集尿样，冷藏运 输，于4摄氏度下可保存2周。 2.标准曲线绘制及样品的测定 样品处理：取0.1ml尿样至于10ml比色管中，加水至 3ml 试剂空白：取3ml水置于10ml比色管中。 标准曲线的绘制：取6支10ml比色管，按下表配置标 准溶液
肌酐测定标准操作程序 (肌氨酸氧化酶法)
肌酐测定标准操作程序1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。
5. 原理上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素肌氨酸肌酸肌酸肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。
最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
肌酐的测定
丙酮酸 + ATP
乳酸脱氢酶
丙酮酸 + NADH +H+
乳酸 + NAD+
340nm比色
• 2.肌酐亚氨水解酶法：
肌酐酶水解
肌酐
N-甲基内酰 + NH3
溴酚蓝电极
或离子电极
测NH3
酶法优点：特异性高、准确性好
缺点：酶试剂昂贵、来源困难、不易保存
（三）高效液相色谱法：
准确性、特异性好，一般作为参考方法
• 3.速率法（动力学法）： 根据肌酐和碱性苦味酸形成复合物
的速度与非肌酐干扰物的不同，且肌酐 的反应速度与浓度成正比的原理。
干扰物质：
a.快反应物质 最初30s内反应 b.慢反应物质 120s以后反应 肌酐反应：31~60s 该法有助于解决反应的特异性，可消除 某些非化学反应的干扰且简单、快速
• 4.双pH法（二次读数法）：
肌酐的测定
• 血清非蛋白含氮化合物的一种，肌肉组 织中肌酸或磷酸肌酸代谢的最终产物。
• 肌酐的排出量相当恒定，不受食物蛋白 质含量及尿量的影响而与肌肉发达程度、 性别及年龄有关。
• 肌酐的测定是临床诊断的重要指标。
• 分类： （一）化学法：碱性苦味酸法
1.漂白土碱性苦味酸法 2.阳离子交换树脂法 3.速率法 4.双PH法（二次读数法） （二）酶法： 1.肌酐酰胺水解酶法 2.肌酐亚氨水解酶法 （三）高效液相色谱法
• 3. 0.75 mol/L 氢氧化钠溶液 • 提供碱性环境
• [操作步骤] 见书
• [注意事项] • 1.制备去蛋白血滤液时，钨酸溶液应缓慢
的滴入血清中，边加边摇，将试剂与血 清充分混匀以利蛋白质沉淀。
• 2.呈色后应在30分钟内比色为宜。过久会 使测定管吸光度增加，可能与标本中存 在的非特异性物质有关。
尿肌酐测定方法
尿肌酐测定方法
尿肌酐是一种常用的尿液指标，用于评估肾脏功能。
以下是常用的尿肌酐测定方法：
1. Jaffe法：这是目前最常用的尿肌酐测定方法。
该方法利用
酚与尿液中的肌酐在碱性条件下发生黄色酚酞反应，测量反应产生的黄色产物的吸光度。
由于该方法受到其他物质（如尿酸、葡萄糖等）的干扰，因此必须进行相应的校正。
2. 酶法：这种方法利用肌酸酐氨酸酶（creatinine amidohydrolase）催化反应，将尿液中的肌酐转化为肌酸和氨，通过测量反应中产生的氨量来确定肌酐浓度。
该方法对于尿液中的其他物质干扰较少，但在实验室条件下操作较为复杂。
3. 离子选择电极法：这是一种较为现代化的测定方法，利用离子选择电极对尿中的肌酐进行检测。
该方法操作简便，结果准确可靠。
以上是几种常用的尿肌酐测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。
选择合适的方法需根据实验室的设备和研究需求来确定。
在进行尿肌酐测定前，建议咨询专业医生或实验室技术人员的意见。
液相色谱法测定尿中肌酐含量
液相色谱法测定尿中肌酐含量标签：液相色谱；尿肌酐测定肌酐(C4H7N3O）是肌肉在人体内代谢的产物,主要从尿液中排出。
职业卫生对生物材料尿液的监测中，生物限值大都使用肌酐较正，因此，肌酐含量测定的准确性直接影响生物监测指标的准确性。
肌酐的检测方法多为临床检验方法，在职业卫生监测中，尿中肌酐的测定有两种方法，一种是分光光度法，一种是液相色谱法。
分光光度法要用到苦味酸，属易爆物品。
本实验室选用液相色谱法对尿中肌酐进行测定，操作简单，灵敏度高，影响因素少，结果准确。
1材料与方法1.1仪器美国DIONEX高效液相色谱仪（P680高效液相泵，UVD 170U紫外检测器，ASI-100自动进样器，TCC-100柱温箱）；变色龙色谱工作站；超声波清洗仪；旋涡混合器等。
1.2试剂肌酐纯度＞99.0%；甲醇（进口液相色谱纯）；乙酸钠（分析纯），配制成0.05 mol/L的溶液；0.45 μm滤膜等。
1.3色谱条件色谱柱：Agilent Zorbax Extend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)柱；流动相：甲醇-0.05 mol/L乙酸钠，比例（5+95），流速0.9 ml/min；柱温：30 ℃；检测器：紫外检测器，波长254 nm；进样量：10 μl。
1.4分析步骤1.4.1试样测定取0.05 ml尿样，用流动相稀释至10 ml，即200倍稀释，旋涡混合器上混合1 min，经0.45 μm滤膜过滤后进样10 μl，以峰面积从标准曲线中定量。
1.4.2标准曲线称取250 mg经110 ℃干燥2 h的肌酐，溶于甲醇并稀释至25 ml，配制成每毫升含10 mg肌酐的标准贮备液。
取标准贮备液，经逐步稀释成每毫升含0，2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg肌酐的标准系列，进样10 μl，以峰面积为纵坐标，以肌酐含量为横坐标，绘制标准曲线。
2结果2.1样品处理方法的选择取不同样品0.05 ml各三份，分別以200倍、300倍、500倍进行稀释，大部分样品200倍稀释均在标准曲线线性范围内，而且有较高的灵敏度，300倍和500倍稀释的灵敏度比200倍稀释低，故一般选用200倍稀释，当样品肌酐含量较高时，可适当增加稀释倍数。
尿肌酐的测定(精)
尿肌酐的测定
尿肌酐主要来自血液，经过肾小球过滤后随尿液排除体外，肾小管基本不吸收且排出很少。
对于肾功能不全或尿毒症患者而言，尿肌酐测定与血肌酐刚好相反，尿肌酐越高，一般说明肾脏的排除肌酐毒素功能越强，反之越差。
对于正在接受治疗的肾功能不全或尿毒症期患者
尿肌酐主要来自血液，经过肾小球过滤后随尿液排除体外，肾小管基本不吸收且排出很少。
对于肾功能不全或尿毒症患者而言，尿肌酐测定与血肌酐刚好相反，尿肌酐越高，一般说明肾脏的排除肌酐毒素功能越强，反之越差。
对于正在接受治疗的肾功能不全或尿毒症期患者，如果，尿肌酐排出增多，一般可说明，肾功能好转，病情在向好的方向发展，反之越
差。
正常值：8．4～13．25mmol／24h尿(0．7--1．5g／24小时
尿) 1．病理性增高：肢端肥大症、巨人症、消耗性疾病、伤寒和斑疹伤寒、破伤风等。
2．病理性降低：重度充血性心力衰竭、急慢性肾功能衰竭、老年患者及肌肉萎缩者。
注意：需留取24小时尿样。
肌酐测定标准操作规程
肌酐测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清肌酐测定(缩写CRE)，尿液肌酐测定；组合项目申请：肾功能测定，内生肌酐清除率测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一天，普通冰箱中（2～8℃）稳定3天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理肌酐酶肌酐 + H2O -------------- 肌酸肌酸酶肌酸 + H2O -------------- 肌氨酸 + urea肌氨酸氧化酶肌氨酸 + H2O + O2 ------------------氨基乙酸 + H2O2 + 甲醛过氧化物酶F-DAOS+H2O2 + 4-氨基安替比林------------------蓝色染料该染料在600nm波长下吸光度的变化与样品中肌酐浓度成正比4 试剂及其他用品4.1试剂：肌酐测定试剂盒（货号CR6113），由北京利德曼生化股份有限公司出品。
营养：实验四尿液还原性维生素C和肌酐测定
年级组姓名：学号：实验带教老师：尿液还原性维生素C和肌酐测定【实验目的】1.掌握还原性维生素C和肌酐测定的原理和基本方法。
2.了解尿液还原性维生素C和肌酐比值测定在评价人体维生素C营养状况过程中的意义。
【实验材料】1.实验仪器：微量滴定管，锥形烧瓶，移液管，100ml容量瓶，10mm比色杯，分光光度计。
2.实验试剂：1%草酸，碱性苦味酸，0.0010mol/L碘酸钾标准应用液，1%淀粉溶液，6%碘化钾溶液，0.02mg/ml维生素C溶液，2,6-二氯酚靛酚，0.1mg/ml 肌酐。
【实验原理】一．2,6-二氯酚靛酚法测定尿中还原性维生素C1.还原性维生素C与2,6-二氯酚靛酚染料（红色）在酸性条件下生成脱氢型维生素C和无色染料，利用这种颜色变化可对其进行标定。
二．尿肌酐测定1.肌酐与碱性苦味酸作用，生成橘红色苦味酸肌酐，可根据颜色进行比色测定。
【实验步骤】一．2,6-二氯酚靛酚法测定尿中还原性维生素C1. 维生素C溶液的标定：将维生素C溶液5ml、6% KI 0.5ml加入锥形瓶，再加入淀粉溶液3滴，然后用0.0010mol/L碘酸钾标准液标定，终点为淡蓝色。
（做三次取平均值）按以下计算式计算维生素C标准液浓度：维生素C标准液浓度（mg/ml）= VKIO3×0.088/V维生素C。
2. 2,6-二氯酚靛酚染料的标定：维生素C标准液5ml与1%草酸5ml加入到锥形瓶，然后用待定浓度的染料滴定至淡红色，15秒不褪色为止。
按以下计算式计算染料浓度：T染料=C维生素C×V维生素C/V染料。
3. 尿样滴定：尿样5ml与1%草酸5ml加入到锥形瓶，用2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，15秒不褪色为止，记录染料用量。
二．尿肌酐测定1. 制备尿样稀释液：取尿样5ml于100ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。
2. 制定标准曲线及尿样测定，见下表1表1 肌酐标准曲线标准管和样品管的配制（ml）管号0 1 2 3 4 5 尿样0.1mg/ml肌酐0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 —尿稀释液—————— 1.0蒸馏水 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 —苦味酸试剂 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.03. 依次加入以上试剂混匀，在水浴箱内加热20min，再用分光光度计比色测定，比色波长510nm，0号管调零，绘制标准曲线。
肌酐测定实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过肌酐测定，了解肌酐在人体内的代谢过程，评估肾功能状况，并探讨影响肌酐水平的相关因素。
二、实验原理肌酐是人体肌肉组织代谢过程中产生的一种非蛋白含氮物质，主要由外源性肌酸代谢而来。
正常情况下，肌酐在体内保持相对稳定水平，主要通过肾脏排泄。
因此，肌酐测定可以反映肾脏的滤过功能，是评估肾功能的重要指标。
三、实验材料1. 样本：新鲜尿液、血液2. 试剂：肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、尿素、甘氨酸、甲醛等3. 仪器：肌酐测定仪、离心机、水浴箱等四、实验方法1. 血清肌酐测定（1）取血清样本，按照试剂盒说明书进行肌酐酶催化反应，生成肌酸。
（2）加入肌酸酶，将肌酸水解产生肌氨酸和尿素。
（3）肌氨酸在肌氨酸氧化酶作用下氧化生成甘氨酸、甲醛等产物。
（4）通过测定产物浓度，计算血清肌酐含量。
2. 尿肌酐测定（1）取尿液样本，按照试剂盒说明书进行尿肌酐测定。
（2）通过测定尿液中肌酐浓度，评估肾功能状况。
五、实验结果1. 血清肌酐测定结果本次实验血清肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
2. 尿肌酐测定结果本次实验尿肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
六、讨论与分析1. 肌酐测定结果分析本次实验血清肌酐和尿肌酐测定结果均在正常范围内，说明受试者肾功能正常。
2. 影响肌酐水平的相关因素（1）蛋白质摄入：蛋白质摄入过多或过少均可影响肌酐水平。
高蛋白饮食可导致血清肌酐升高，低蛋白饮食则可能导致血清肌酐降低。
（2）肌肉含量：肌肉含量与肌酐生成密切相关。
肌肉含量增加，肌酐生成量也随之增加。
（3）肾功能：肾功能受损会导致肌酐排泄受阻，引起血清肌酐升高。
3. 肌酐测定的临床意义肌酐测定是评估肾功能的重要指标。
通过肌酐测定，可以早期发现肾功能异常，为临床诊断和治疗提供依据。
七、结论本次实验通过肌酐测定，成功评估了受试者的肾功能状况。
实验结果表明，受试者肾功能正常。
肌酐的测定(精)
肌酐的测定(速率法1:概述肌酐(creatinine,Cr是肌肉在人体内代谢的产物,每20g肌肉代谢可产生1mg 肌酐。
肌酐主要由肾小球滤过排出体外。
血中肌酐来自外源性和内源性两种,外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物;内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
在肉类食物摄入量稳定时.身体的肌肉代谢又没有大的变化,肌酐的生成就会比较恒定。
2 样本收集新鲜无溶血标本,血清或血浆样本均不溶血。
血浆样本只能采用肝素或EDTA 抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天。
采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。
3000r/min 离心5-10分钟,分离出血清备用。
不建议采用血浆标本。
3:方法原理样品中的肌酐与碱性苦味酸反应生成红色复合物,该反应为特异性反应,可与其他物质发生作用。
本试剂采用速率法,增强了反应的特性,反应过程中形成的红色复合物与杨品中肌酐的浓度成正比,可在波长500-520nm 处进行测定。
4剂来源,配置及储存试剂来源:试剂配置:试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。
启用后在2-8度可稳定30天。
若试剂混浊,或以蒸馏水为空白在510nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存:试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪6计算方法肌酐(=( A/min*Tv*1000(6.3*Sv*P式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在510nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径(cm7 线性范围:本实验的线性范围:0----2mmol/L8 参考范围:男性;62---115女性53--979 失控控理1:立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。
2:新开一瓶质控品,重测失控项目,如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质,如结果仍不再允许范围,则进行下一步。
尿肌酐的测定-word版
尿肌酐的测定-分光光度法
1、实验目的：掌握碱性苦味酸法测定尿肌酐的原理；熟悉实验操作步骤和分光光度计的使用；了解尿肌酐测定方法的注意事项。
2、实验原理：
肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味酸肌酐。
在波长
490nm处比色定量。
3、仪器与试剂：仪器：分光光度计、乙烯塑料瓶、10mL具塞比色管
试剂：饱和苦味酸溶液（15g/L）、NaOH（100g/L）、碱性饱和苦味酸溶液（V NaOH:V苦味酸=1:10）、HCl（0.1mol/L）、肌酐标准溶液（0.1mg/mL)
4、实验步骤：
4.1 样品采集：按所接触的毒物或其代谢产物所规定的采样时间，用50mL 聚乙烯塑料瓶收集尿样，冷藏运输，4℃下可保存2周。
4.2标准曲线绘制与样品测定
5、计算
ρ
=ρ1×f
肌酐
---尿中肌酐的质量浓度，g/L
ρ
肌酐
ρ1---标准曲线上查得的HA浓度，mg/L
f ---尿液稀释倍数，2
6、注意事项
6.1在0.5h内比色完毕，如时间过久，滤液内其他物质与苦味酸起非特异性反应而影响结果。
6.2温度在15～20℃显色稳定，反应温度应控制在小于30℃。
6.3如测定管显色过深，应稀释尿液后测定，其结果乘以稀释倍数。
6.4成人尿肌酐浓度值正常范围为0.4～1.3g/L。
肌酐测定标准操作规程
肌酐测定标准操作规程1.检验原理：（肌氨酸氧化酶法）血样中原有肌酸通过试剂除去后，肌酐在肌酐酶的作用下生产肌酸，肌酸又在肌酸酶作用下转化为肌氨酸。
肌氨酸氧化酶将生成的肌氨酸氧化，生成甘氨酸、甲醛和过氧化氢。
过氧化氢与4-氨基安替比林（4-AA ）、N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠（TOOS ）在过氧化物酶（POD ）作用下反应下生成红色醌类物质。
在546nm 处，其显色程度与血液中的肌酐成正比。
肌酐+O H 2−−→−肌酐酶肌酸 肌酸+O H 2−−→−肌酐酶肌氨酸 肌氨酸+2O +O H 2−−→−SOD甘氨酸+甲醛+过氧化氢 过氧化氢+TOOS+4+AA −−→−POD红色醌类物质+O H 2 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清、肝素或EDTA 抗凝血浆。
在18～25℃保存6小时，2～8℃保24小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。
通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数，建议最大稀释不超过10倍6.2.单位换算：mg/dL=umol/L ×0.01137.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在546nm处吸光度大于0.300时不能使用。
7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。
8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达0-5000umol/L。
线性相关系数r≥0.99008.2试剂空白吸光度：在546nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.300。
8.3准确度：相对偏差≤10%。
8.4精密度8.4.1重复性CV≤3%8.4.2批间差：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的肌酐对应的△A不低于2×4108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。
尿肌酐检测影响因素的探讨
检验医学与临床 ２ ， ０ １ ２ 年 １ 月第 ９ 卷第 １ 期 Ｌ ａ ｂＭ ｅ ｄＣ ｌ ｉ ｎ Ｊ ａ ｎ ｕ ａ ｒ ０ １ ２， Ｖ ｏ ｌ ． ９， Ｎ ｏ ． １ ｙ２
·论 著·
２ ４ｈ 尿肌酐检测响因素的探讨
倪丽丽 ， 陈 晋（ 上海市同济大学附属肺科医院 ２ ） ０ ０ ４ ３ ３
Ｓ ｈ ａ ｎ ｈ ａ ｉ２ ０ ０ ４ ３ ３， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ） Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｇ ｙ，
【 】 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｂ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｏａ ｎ ａ ｌ ｚ ｅｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅｏ ｆｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓａ ｎ ｄｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｔ ｅ ｓ ｔｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｏ Ｔ ｙ ｊ ） Ｕ ｃ ｒ ａ ｎ ｄｔ ｏｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ａ ｔ ｅｔ ｈ ｅａ ｒ ｏ ｒ ｉ ａ ｔ ｅｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｎ ｄｏ ｔ ｉ ｍ ａ ｌｔ ｅ ｓ ｔｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ． ｏ ｎ２ ４ｈｕ ｒ ｉ ｎ ｅｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅ（ ｇ ｐ ｐ ｐ ｐ ， Ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｈ ｅｕ ｒ ｉ ｎ ｅｓ ａ ｍ ｌ ｅ ｓｗ ｅ ｒ ｅｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄｓ ｉ ｍ ｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ ｌ ａ ｎ ｄｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｉ ｔ ｉ ａ ｌ ａ ｎ ｄｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｄＵ ｃ ｒｗ ａ ｓｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｄｕ ｎ ｄ ｅ ｒ Ｔ ｐ ｙ ， ｔ ｈ ｅｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓｏ ｆｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔｈ ｏ ｌ ｄ ｉ ｎ ｉ ｍ ｅ ｓ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓａ ｎ ｄｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｔ ｅ ｓ ｔｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓａ ｎ ｄｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｇｔ Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｎ ｄ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｒ ｏ ｏ ｍｔ ｅ ｍ ｅ ｒ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓｏ ｎＵ ｃ ｒｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎｗ ａ ｓｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｌ ｎ ａ ｌ ｚ ｅ ｄｂ ｎ ｅ ｗ ａ Ｕ ｐ ｙａ ｙ ｙｏ ｙＡＮＯＶＡ． ， Ｕ ｃ ｒｈ ａ ｄｎ ｏｓ ｉ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ｃ ｈ ａ ｎ ｅ ｓｄ ｕ ｒ ｉ ｎ ４ｈａ ｎ ｄｗ ａ ｓ ｓ ｔ ｅ ａ ｄ ｏ ｉ ｎ ｌ ｌ ｔ ｈ ｅ ｔ ｉ ｍ ｅ ． Ｗｈ ｅ ｎ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｌ ｄ ｅ ｈ ｄ ｅｗ ａ ｓ ａ ｄ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｇ ｇ ｇ２ ｙ ｇ ｇａ ｙ ， ， ／ ｔ ｈ ｅＵ ｃ ｒ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌｗ ａ ｓｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ（ Ｐ ＜０． ０ ５） ａ ｄ ｄ ｉ ｎ ２ ｍｍ ｏ ｌ Ｌ ＨＣ Ｌａ ｎ ｄａ ｄ ｕ ｓ ｔ ｉ ｎ ｏｐ Ｈ ４． ０ ８， ｔ ｈ ｅ ｔ ｈ ｅｕ ｒ ｉ ｎ ｅｓ ａ ｍ ｌ ｅ ｓ ｇ１ ｊ ｇｔ ｐ ） ， Ｕ ｃ ｒ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ａ ｌ ｓ ｏｗ ａ ｓｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ（ Ｐ＜０． ０ ５ ｂ ｕ ｔｄ ｉ ｍ ｅ ｔ ｈ ｌ ｂ ｅ ｎ ｚ ｅ ｎ ｅｄ ｉ ｄｎ ｏ ｔ ｉ ｎ ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｉ ｔ ． Ｔ ｈ ｅＵ ｃ ｒｖ ａ ｌ ｕ ｅｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｄｂ ｈ ｅ ｙ ｙｔ ） ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅｅ ｎ ｚ ｍ ｉ ｃｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄｗ ａ ｓ ｓ ｉ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ｌ ｌ ｏ ｗ ｅ ｒ ｔ ｈ ａ ｎ ｔ ｈ ａ ｔ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｄｂ ｔ ｈ ｅｐ ｉ ｃ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ（ Ｐ＜０． ０ １ ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｙ ｇ ｙ ｙ ｈ ｅ２ ４ｈｕ ｒ ｉ ｎ ｅ ｓ ａ ｍ ｌ ｅ ｃ ａ ｎｂ ｅｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｄａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｒ ｏ ｏ ｍｔ ｅ ｍ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅｗ ｉ ｔ ｈ ｏ ｕ ｔ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｖ ｅｂ ｔ ｈ ｅ ｅ ｎ ｚ ｍ ｉ ｃｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｓ ｉ ｏ ｎＴ ｐ ｐ ｐ ｙ ｙ ｔ ｈ ｅ２ ４ｈＵ ｃ ｒｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． 【 】 ； ； ； Ｋ ｅ ｏ ｒ ｄ ｓ ４ｈ ｏ ｕ ｒｕ ｒ ｉ ｎ ｅｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅｅ ｎ ｚ ｍ ｉ ｃｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｉ ｃ ｒ ｉ ｃａ ｃ ｉ ｄｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ２ ｐ ｃ ｐ ｙ ｙｗ ， ） 的测定在临 床 上 主 要 用 于 评 ｕ ｒ ｉ ｎ ｅｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｎ ｅ Ｕ ｃ ｒ 尿肌酐 （ 同时也可与血肌酐一同计算出内生肌酐 估肾小球的滤过功能 ， 可以更好地 评 估 肾 小 球 的 功 能 。 要 获 得 准 确 的 结 果 ， 清除率 ， 首先必须留取和保存好尿液 ， 由于 ２ 保存 ４ｈ 尿 液 留 取 时 间 长 ， 困难 ， 是否添加防腐剂和采用何种检测方法等多种因素都会导 致２ ４ｈＵ ｃ ｒ检测结果的误差 。 现在 我 们 统 一 了 留 取 方 法 的 前 提下 ， 就２ 逐一展开探讨 。 ４ｈＵ ｃ ｒ检测的影响因素 ， １ 资料与方法 １． １ 尿液标本 随 机 选 择 ２ ０ ０ ９年１ ０月至２ ０ １ ０年６月上海 市肺科医院住院患者留取 ２ ４ｈ 尿液 ３ ８份。 并 １． ２ 方法 在同一时 间 嘱 咐 患 者 排 尿 于 一 清 洁 塑 料 桶 中 ， 混匀放置 。 根据试验设计需要 采 用 以 下 ３ 种 方 法 ： （ 采集３ １） ８ 份尿液在桶中混匀后 ， 取出少 量 于 Ｅ 分别在室温（ Ｐ 管中， １ ７～ 放置 ２ 再进行检测 。（ ） 添加 防 腐 剂 。 采 集 好 ２ ２ ８ ℃） ４ｈ 后 ， ２ ４ 各自于桶中分为 ３ 组 ， 先取出少量置于 Ｅ ｈ 尿液后 ， Ｐ 管中放置 在室温下 ， ３ 组剩余尿液分别按 １∶５ ０ 比例加入 ９ ９％ 二甲 苯 溶 液， 按 １∶２ 用１ ／ ０ ０ 的比 例 加 入 ４ ０％ 甲 醛 溶 液 ， ２ ｍｍ ｏ ｌ Ｌ浓盐 酸调节 ｐ 有３ 有３ Ｈ 至 ４． ０ ８， ０份 尿 液 加 入 二 甲 苯 溶 液， ５份尿 液加入甲醛溶液 ， 有３ 加入防腐剂 后 ３ 份尿液加入浓盐酸溶液 ， 放置在室温下保 的尿液混 匀 后 再 分 别 取 出 少 量 置 于 Ｅ Ｐ 管中， 存２ ， 待全部尿液标本留取 完 毕 后 ， 将所有的尿液在同一时 ４ｈ ） 将未加防腐剂的３ 间内进行检测 。（ ３ ８份采用肌酐酶法和苦 对比两组检测结果 。 味酸法同时进行检测 ， 防 １． ３ 器材与试剂 容量为 ３０ ０ ０ｍ Ｌ 带盖的塑料桶 ， Ｅ Ｐ管， 腐剂 （ ／ 。将 ４ ０％ 甲 醛 、 ９ ９％ 二 甲 苯 溶 液 和 １ ２ ｍｍ ｏ ｌ Ｌ 浓盐酸） 所有的尿液标本同时取出 ， 充分混匀后进行 Ｕ 仪器为 ｃ ｒ检 测 ， 肌酐酶法试剂由德国罗 Ｈ Ｉ ＴＡ ＣＨ Ｉ ７ １ ７ ０ ｓ全自动生化 分 析 仪 ， 氏诊断有限公 司 提 供 ， 肌酐苦味酸法试剂盒由上海科华公司 提供 。 １． ４ 统计学处理 使用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ １． ５统计软件对测定结果进行 所 有 数 据 均 建 立 数 据 库， 计 量 资 料 以 ｘ±ｓ 表 示 ， 统计分析 ，
液相色谱法测定尿中肌酐含量
液相色谱法测定尿中肌酐含量作者：吴燕来源：《中外医学研究》2012年第03期【关键词】液相色谱；尿肌酐测定肌酐(C4H7N3O）是肌肉在人体内代谢的产物,主要从尿液中排出。
职业卫生对生物材料尿液的监测中，生物限值大都使用肌酐较正，因此，肌酐含量测定的准确性直接影响生物监测指标的准确性。
肌酐的检测方法多为临床检验方法，在职业卫生监测中，尿中肌酐的测定有两种方法，一种是分光光度法，一种是液相色谱法。
分光光度法要用到苦味酸，属易爆物品。
本实验室选用液相色谱法对尿中肌酐进行测定，操作简单，灵敏度高，影响因素少，结果准确。
1材料与方法1.1仪器美国DIONEX高效液相色谱仪（P680高效液相泵，UVD 170U紫外检测器，ASI-100自动进样器，TCC-100柱温箱）；变色龙色谱工作站；超声波清洗仪；旋涡混合器等。
1.2试剂肌酐纯度＞99.0%；甲醇（进口液相色谱纯）；乙酸钠（分析纯），配制成0.05 mol/L的溶液；0.45 μm滤膜等。
1.3色谱条件色谱柱：Agilent Zorbax Extend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)柱；流动相：甲醇-0.05 mol/L乙酸钠，比例（5+95），流速0.9 ml/min；柱温：30 ℃；检测器：紫外检测器，波长254 nm；进样量：10 μl。
1.4分析步骤1.4.1试样测定取0.05 ml尿样，用流动相稀释至10 ml，即200倍稀释，旋涡混合器上混合1 min，经0.45 μm滤膜过滤后进样10 μl，以峰面积从标准曲线中定量。
1.4.2标准曲线称取250 mg经110 ℃干燥2 h的肌酐，溶于甲醇并稀释至25 ml，配制成每毫升含10 mg肌酐的标准贮备液。
取标准贮备液，经逐步稀释成每毫升含0，2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg肌酐的标准系列，进样10 μl，以峰面积为纵坐标，以肌酐含量为横坐标，绘制标准曲线。
实验四尿肌酐的测定 - 陕西师范大学体育实验中心
酸溶解稀释至刻度。此溶液在4℃冰箱内可以长期保存。 ➢ 肌酐标准应用液（1ml=0.1mg）：准确量取贮存液10ml于100ml的容量瓶中，加
入10%盐酸10ml，再加蒸馏水至刻度。 此溶液可以在4℃冰箱内保存1周。
➢ 在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、 选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反 之，可能是肌肉机能下降的表现。
➢ 如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果 乘以稀释倍数。
七、指标应用
➢ 正常人尿肌酐日排出量：男子1.0~1.8g，女子0.7~1.0g。24h每千克 体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子 18~32mg/kg体重，女子10~ 25mg/kg体重
➢ 尿肌酐日排出量与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关，运动员尿肌酐 系数高于常人，一般为25~40mg/kg体重。不同项目的运动员其系数 也不同，力量、速度项目运动员尿肌酐系数可高达36~42mg/kg体重， 且尿肌酐的日排出量与运动成绩高度相关。
肌酐 + 碱性苦味酸
Jaffe氏反应
苦味酸肌酐（红色复合物） （520nm处有一吸收峰）
三、试剂
➢ 饱和苦味酸溶液：称取苦味酸15g置于大烧杯中，加蒸馏水至1000ml，加热助溶， 冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取上层清夜备用，储存在棕色瓶 中。
➢ 10%氢氧化钠溶液 ➢ 碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和10%氢氧化钠溶液按5:1体积比混合，临用时
五、实验结果
➢计算公式：
OD测 尿肌酐（mg%）== ------------------- × 200
【名称】尿肌酐【英文名】urinecreatinine
【名称】尿肌酐【英文名】urine creatinine【别名】UCr【概述】本试验测定血液经肾滤到排出的肌酐含量。
磷酸肌酐是肌肉收缩的能量来源和贮备形式，其放出能量后可形成肌酐。
大部分肌酐不断由肾滤过排出，不再被重吸收。
人体血液中的肌酐生成可分为内源性和外源性两种。
尿肌酐浓度和血肌酐浓度一起测定，是反映肾功能的一个特异性指标，并可作为内生肌酐清除率的必需指标。
【原理】去蛋白终点法：标本样中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，生成黄色的苦味酸肌酐复合物，在510nm波长比色测定。
【试剂】(1)0.04mol/L苦味酸溶液；苦味酸(AR)9.3g，溶于500ml 80℃蒸馏水中，冷却至室温。
加蒸馏水至1升，用0.1mol/L氢氧化钠滴定，以酚肽作指示剂。
根据滴定结果，用蒸馏水稀释至0.04mol/L，贮存于棕色瓶中。
(2)0.75mol/L氢氧化钠：氢氧化钠(AR)30g，加蒸馏水使其溶解，冷却后用蒸馏水稀释至1升。
(3)35mmol/L钨酸溶液：①取聚乙烯醇1g溶解于100ml蒸馏水中，加热助溶(不要煮沸)，冷却。
②取钨酸钠11.1g溶解于300ml蒸馏水中，使完全溶解。
③取300ml蒸馏水慢慢加入2.1ml浓硫酸，冷却。
将(1)液加入(2)液中于1升容量瓶中，再与(3)液混匀，再加蒸馏水至刻度，置室温中保存，至少稳定一年，(4)10mmol/L肌酐标准贮存液：肌酐(MW 113.12)113g用0.1mol/L盐酸溶解，并移入100ml容量瓶中，再以0.1mol/L盐酸稀释至刻度，保存于冰箱内，稳定一年。
(5)10μmol/L肌酐标准应用液：准确吸取10mmol/L肌酐标准贮存液1.0ml，加入1000ml容量瓶内，以0.1mol/L盐酸稀释至刻度，贮存于冰箱内。
【操作方法】于16mm×100mm试管中，置血清(体液)0.5ml加入35mmol/L钨酸溶液4.5ml，充分混匀；3000转/分离心10min，取上清液，按表1测定(尿液标本用蒸馏水作1∶200稀释)。
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在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、 选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反 之，可能是肌肉机能下降的表现。 陕西师范大学体育学院实验教学示范中心
计算公式：
OD测 尿肌酐（mg%）== ------------------- × 200
OD标（0.12） 24小时尿肌酐量（mg） 尿肌酐系数== ----------------------------------------
体重（Kg）
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肌酐 + 碱性苦味酸
Jaffe氏反应
苦味酸肌酐（红色复合物） （520nm处有一吸收峰）
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三、试剂
饱和苦味酸溶液：称取苦味酸15g置于大烧杯中，加蒸馏水至1000ml，加热助溶， 冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取上层清夜备用，储存在棕色瓶 中。
10%氢氧化钠溶液 碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和10%氢氧化钠溶液按5:1体积比混合，临用时
配制。 肌酐标准贮存液（1ml=1mg）：称取纯肌酐0.1g置于100ml容量瓶中，加10%盐
酸溶解稀释至刻度。此溶液在4℃冰箱内可以长期保存。 肌酐标准应用液（1ml=0.1mg）：准确量取贮存液10ml于100ml的容量瓶中，加
入10%盐酸10ml，再加蒸馏水至刻度。 此溶液可以在4℃冰箱内保存1周。
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四、实验操作
1、制备稀释尿液（1:100）
收集受试者24h尿液，混匀后取0.1ml置大试管中，加 9.9ml蒸馏水，摇匀。
2、尿肌酐浓度的测定
取3只大试管，编号，按表1操作：
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表1 尿肌酐的测定
空白管
标准管
测定管
肌酐标准应用液（ml）
—
0.5
—
—
—
5
0.2
0.2
0.2
5.0
4.5
—
1
1
ห้องสมุดไป่ตู้
1
充分混匀后，放置10min，以空白管调零，520nm波长比色
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五、实验结果
六、注意事项
显色反应10-15分钟内比色，如果时间过长，尿液中 其它物质能与碱性苦味酸起非特异性反应而影响结果。
如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果 乘以稀释倍数。
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七、指标应用
正常人尿肌酐日排出量：男子1.0~1.8g，女子0.7~1.0g。24h每千克 体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子 18~32mg/kg体重，女子10~ 25mg/kg体重
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一、 实验目的
复习和巩固尿肌酐的生成机理及其生化评定的意义 学习尿肌酐测定方法 掌握尿肌酐系数指标的计算及其在运动实践中的应用。
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二、实验原理
无蛋白尿液中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，经“Jaffe”氏 反应生成红色的苦味酸肌酐，其生成量与肌酐含量成正比， 用比色法即可求出尿中肌酐含量。