荧光和示差检测器
各种检测器比较
它有两个流通池，一个参比池，一个测量池。光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。
流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。
光电二极管阵列检测器(photodiode array detector，PDA )
检测分为三个步骤：
（1）用惰性气体雾化洗脱液
（2）流动相在加热管（漂移管）中蒸发
（3）样品颗粒散射光后得到检测。
HPLC中常见检测器的基本特性
检测器
应用范围
最小检
测量(g)
对温度
敏感度
溶剂使
用情况
检测下限
/(g/ml)
线性范围
选择性
梯度
淋洗
主要特点
紫外-可见光
选择性
10-9
低
受限制
10-10
10-3～10-4/105
对流速、温度敏感、干扰比较多
电化学检测器之安培检测器
高灵敏度、高选择性、应用很广，检测具有氧化还原活性（能发生电极反应）的物质。适于与反相色谱匹配。
当被分离的电活性物质流经电极表面时，由于溶液与电极间有电势差，电活性物质就要得到或失去电子，被还原或氧化，因此，溶液和电极间发生电荷转移，形成电流，该电流符合法拉第定律，即电流大小与待测物浓度成正比。记录电流随时间的变化，得到电泳谱图。
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种，有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。
当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
示差检测器检定规程-概念解析以及定义
示差检测器检定规程-概述说明以及解释1.引言1.1 概述示差检测器作为一种重要的测量仪器，在工业生产和科学研究领域中具有广泛的应用。
它能够精确地测量两个物体之间的微小位移差，因此在机械制造、材料测试、精密仪器以及航空航天等领域中起着至关重要的作用。
本文旨在介绍示差检测器的检定规程，通过对示差检测器的原理、应用以及检定方法进行详细的阐述和讨论，旨在帮助读者深入了解示差检测器的工作原理和检定过程，从而有效地应用和维护示差检测器。
通过本文的学习，读者将能够全面地了解示差检测器的重要性和使用方法，为相关领域的科研和生产提供可靠的技术支持。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：本文主要分为三个部分：引言、正文和结论。
引言部分将介绍本文写作的背景和目的，以及示差检测器检定规程的重要性。
正文部分将详细介绍示差检测器的原理、应用和检定方法。
结论部分将对本文进行总结，并展望示差检测器检定规程的未来应用前景。
容1.3 目的示差检测器是一种重要的测量设备，其准确性和稳定性直接影响到工业生产和科学研究的质量和效率。
因此，制定示差检测器检定规程的目的在于确保示差检测器的准确性和可靠性，为用户提供可信赖的测量数据。
同时，规范化的检定程序也有利于促进示差检测技术的发展和推广，推动相关领域的科学研究和工程应用。
通过本规程的制定和执行，旨在提高示差检测器的应用水平，推动相关行业的科学技术进步，为社会经济发展做出积极贡献。
2.正文2.1 示差检测器的原理示差检测器是一种用于测量两个物理量之间差异的仪器。
其原理基于能够检测两个互相作用的信号之间的差异，通常用于测量温度、压力、流量等物理量的差异。
在示差检测器中，常用的原理包括电气原理和机械原理。
在电气原理中，示差检测器利用电路中的差分放大器来检测输入信号与参考信号之间的差异，并输出相应的电压信号。
而在机械原理中，示差检测器则通过机械传感器或测量装置来测量物理量的差异，并将结果转换为电信号进行显示或记录。
气相色谱与液相色谱
.一、分别原理：1.气相：气相色谱是一种物理的分别方法。
利用被测物质各组分在不一样两相间分派系数（溶解度）的渺小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行频频多次的分派，使本来只有渺小的性质差异产生很大的成效，而使不一样组分获取分别。
2.液相：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达′107Pa）;色谱柱是以特别的方法用小粒径的填料填补而成，进而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高敏捷度的检测器，可对流出物进行连续检测。
二、应用范围：1.气相：气相色谱法拥有分别能力好，敏捷度高，剖析速度快，操作方便等优点，可是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳固性差的物质都难于应用气相色谱法进行剖析。
一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采纳衍生化法或裂解法。
2.液相：高效液相色谱法，只需求试样能制成溶液，而不需要气化，所以不受试样挥发性的限制。
关于高沸点、热稳固性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（些物质几乎据有机物总数的75%～80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分别、剖析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱剖析的约占20%，而能用液相色谱剖析的约占70～80%。
三、仪器结构：1.气相：由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据办理系统构成。
进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
柱箱：色谱柱是气相色谱仪的心脏，样品中的各个组份在色谱柱中经过频频多次分派后获取分别，进而达到剖析的目的，柱箱的作用就是安装色谱柱。
因为色谱柱的两头分别连结进样器和检测器，所以进样器和检测器的下端（接头）均插入柱箱。
柱箱能够安装各样填补柱和毛细管柱，并且操作方便。
色谱柱（样品）需要在必定的温度条件下工作，所以采纳微机对柱箱进行温度控制。
并且因为设计合理，柱箱内的梯度很小。
关于一些成份复杂、沸程较宽的样品，柱箱还可进行三阶程序升温控制。
液相色谱检测器的介绍-实验室
S
R
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示差折光（RI ）检测 的原理
原理：连续测定流通池中溶液折射率来测定试 样各组分浓度。 优点：通用型检测器
缺点：
1）对温度压力变化敏感
2）不能用于梯度检测
3）灵敏度低，ug级检测
4）平衡时间长
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示差检测器的应用
示差折光检测器是通用型检测器,如果选择合适的 溶剂，几乎所有的物质都可以检测 特别适用于检测没有紫外吸收的化合物,例如糖类, 醇类,酯类以及脂肪酸等 高分子化合物GPC,GFC分析以及复杂样品纯化
•使用目的基本相同。价格也差不多（30-40万RMB). •不太适合对天然物质和生物样品的分析（选择性不够）。 •适合对化学产品的纯度分析等，尤其是工业上的应用。
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新的通用型检测器
（Nano Quantity Analyte Detector）
纳克级（水凝粒子）激光计数检测器
一般来说，选泽性和灵敏度是检测器最重要的两个要素。NQAD是通用型、高灵 敏度检测器，适用于几乎所有物质（挥发性物质除外）的检测。
的检测原理
（Water-based Condensation Particle Counter） （水凝聚粒子计数器）
喷雾 汽化
使用空气（或氮气）通过雾化器进行喷雾。 流动相和其他挥发性成分在蒸发器中汽化 剩下的不挥发、难挥发物质颗粒进入到
凝縮
WCPC 。在水蒸气饱和环境下，以该颗粒 为核，水分凝聚体生成，并长大到微米水
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优点：灵敏度比紫外检测器高，噪音 低，线性范围宽，对流速和温度的 波动不灵敏，适用于梯度洗脱及制 备色谱 局限：对紫外吸收差的化合物灵敏度 很低，紫外吸收大的溶剂不能做流 动相
各种检测器比较
荧光检测器（fluorescence detector）
原理：许多有机化合物，特别是芳香族化合物、生化物质，如有机胺、维生素、激素、酶等，被一定强度和波长的紫外光照射后，发射出较激发光波长要长的荧光。荧光强度与激发光强度、量子效率和样品浓度成正比。有的有机化合物虽然本身不产生荧光，但可以与发荧光物质反应衍生化后检测。
1．对没有紫外/可见波长吸收的样品无法检测
2．流动相的选择受到流动相组分对紫外可见光的吸收影响，现有紫外可见检测器在常用的流动相下当波长低于210nm时检测效果较差；
3．不同物质在同一检测波长下的响应因子不相同
二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）
以光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的UV-VIS检测器。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通UV-VIS检测器不同的是，普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检
因为散射光强只与溶质颗粒大小和数量有关，而与溶质本身的物理和化学性质无关，所以ELSD属通用型和质量型检测器。适合于无紫外吸收、无电活性和不发荧光的样品的检测。其灵敏度与载气流速、汽化室温度和激光光源强度等参数有关。与示差折光检测器相比，它的基线漂移不受温度影响，信噪比高，也可用于梯度洗脱。检测任何不挥发样品，提供精确的样品组份和几乎相同的响应因子，灵敏度高于RI、低波长紫外检测器和其他ELSD，不需要日常维护，可和HPLC、GPC和SFC连用
液相基础知识
液相色谱的检测器
• 常规检测器
– 示差折光检测器（Refractive Index） – 紫外/可见光吸收检测器（UV-Vis） – 荧光检测器（Fluorescence） – 蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering） – 其他检测器（Other Detectors）
• 色谱法起源于20世纪初， 30年代开始广泛研究 和应用，1950年代之后飞速发展，高效液相色谱 法的广泛应用始于70年代。
• 色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法 是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植 物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。 此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱 带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入， 谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜 色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色 素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 • 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法 也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然 是一样的。我们仍然叫它色谱分析。
分离是一个物理的过程
流动相（ 流动相（Mobile Phase） ） 固定相（ 固定相（Stationary Phase） ） 样品（溶解于流动相中的溶质） 样品（溶解于流动相中的溶质）
什么是高效液相色谱
• High Performance Liquid Chromatography
– 高效液相色谱法，简称：HPLC
• 由于混合物中各组分在性质和结构上的差 异，与固定相之间产生的作用力的大小、 强弱不同，随着流动相的移动，混合物在 两相间经过反复多次的分配平衡，使得各 组分被固定相保留的时间不同，从而按一 定次序由固定相中先后流出。与适当的柱 后检测方法结合，实现混合物中各组分的 分离与检测。
设备配置及规格要求
设备的配置及规格要求一、凝胶液相色谱仪：1．配置要求：1.1 四元梯度泵系统带脱气机 1套1.2 示差检测器 1套1.3 二极管阵列检测器 1套1.4 荧光检测器 1套1.5 液体自动进样器 1套1.6 柱温箱 1套1.7 液相色谱柱 1支1.8 中英文色谱操作控制软件 1套1.9 原装品牌电脑及打印机 1套注：以上1.1-1.8项应为同一品牌2．技术规格：2.1 四元梯度泵2.1.1串联式双柱塞往复泵，20-100 uL自动连续可变冲程；用户自主溶剂压缩因子设置，保证在不同流速及不同流动相组成的最佳流速稳定性。
自动柱塞清洗装置，有效防止高盐浓度流动相对柱塞的磨损，实时维护泵的使用性能。
通过高速比例阀控制形成四元梯度混合。
2.1.2流量范围：0~10ml/min，递增率0.001ml/min2.1.3流量精度：<0.07%RSD2.1.4流速准确度：±1%2.1.5梯度精度：< 0.2 % RSD2.1.6操作压力：400bar2.1.7集成真空脱气机：四路独立脱气操作,每一通路最大流速：10mL/min。
每个通道内部体积：1.5 mL2.2示差检测器2.2.1短期噪音：±2.5×10-9RIU2.2.2漂移：<200×10-9RIU/h2.2.3示差折光范围：1.00-1.75，已校正2.2.4温度控制：室温以上5℃～55℃2.3二极管阵列检测器2.3.1检测器类型:≥1024 个二极管元件2.3.2光源:氘灯和钨灯2.3.3信号数量:82.3.4短期噪声:波长254/4 nm 处，< ± 0.6 x 10-5 AU2.3.5漂移:在254 nm 处，< 0.9 x 10-3AU/小时2.3.6线性:在265 nm 处，> 2.0 AU (5 %)2.3.7波长范围:190 – 950 nm2.3.8波长准确度:± 1 nm, 氘线灯的自动校准，用氧化钬滤光片验证2.3.9狭缝宽度可编程：1, 2, 4, 8, 16 nm2.3.10二极管宽度< 1 nm2.3.11采样频率：120Hz2.3.12按时间编程：波长、极性、峰宽、灯频带宽度、自动平衡、波长范围、阈值、光谱存储模式2.4荧光检测器2.4.1检测器类型：多信号荧光检测器，具有快速在线扫描能力和光谱数据分析功能性能O) > 3000 (在dark value 处测量的噪声参比)Ex 350 nm, Em2.4.2灵敏度Raman (H2397 nm, dark value 450 nm, 标准流通池2.4.3光源：氙闪灯，寿命长达4000 小时2.4.4波长重现性：± 0.2 nm2.4.5波长准确度：± 3 nm2.5液体自动进样器2.5.1进样范围：0.1 ~100 μL，增量为0.1 μL2.5.2进样精度：< 0.25 % RSD（进样体积5~100μL）2.5.3样品容量：1 个样品盘上100 x 2 ml 样品瓶2.5.4交叉污染：带外部针头清洗时< 0.05 %2.5.5操作压力范围：400bar2.5.6进样位数≥132位2.6柱温箱2.6.1柱温范围：从低于室温10至80˚C2.6.2温度稳定性：± 0.15˚C，温度准确度：≤± 0.5 °C。
各种色谱方法简单介绍
第一课色谱法概述色谱法是一种重要的分离分析方法，它是利用不同物质在两相中具有不同的分配系数(或吸附系数、渗透性)，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。
在色谱技术中，流动相为气体的叫气相色谱，流动相为液体的叫液相色谱。
固定相可以装在柱内，也可以做成薄层。
前者叫柱色谱，后者叫薄层色谱。
根据色谱法原理制成的仪器叫色谱仪，目前，主要有气相色谱仪和液相色谱仪。
色谱法的创始人是俄国的植物学家茨维特。
1905年，他将从植物色素提取的石油醚提取液倒人一根装有碳酸钙的玻璃管顶端，然后用石油醚淋洗，结果使不同色素得到分离，在管内显示出不同的色带，色谱一词也由此得名。
这就是最初的色谱法。
后来，用色谱法分析的物质已极少为有色物质，但色谱一词仍沿用至今，在50年代，色谱法有了很大的发展。
1952年，詹姆斯和马丁以气体作为流动相分析了脂肪酸同系物并提出了塔板理论。
1956年范第姆特总结了前人的经验，提出了反映载气流速和柱效关系的范笨姆特方程，建立了初步的色谱理论。
同年，高莱(Golay)发明了毛细管拄，以后又相继发明了各种检测器，使色谱技术更加完善。
50年代末期，出现了气相色谱和质谱联用的仪器，克服了气相色谱不适于定性的缺点。
则年代，由于检测技术的提高和高压泵的出现，高效液相色谱迅远发展，使得色谱法的应用范围大大扩展。
目前，由于高效能的色谱往、高灵敏的检测器及微处理机的使用，使得色谱法已成为一种分析速度快、灵敏度高、应用范围广的分析仪器。
在这里主要介绍气相色谱分析法。
同时也适当介绍液相色谱法。
气相色谱法的基本理论和定性定量方法也适用于液相色谱法。
其不同之处在液相色谱法中介绍。
第二课气相色谱仪典型的气相色谱仪具有稳定流量的载气，将汽化的样品由汽化室带入色谱柱，在色谱柱中不同组分得到分离，并先后从色谱柱中流出，经过检测器和记录器，这些被分开的组分成为一个一个的色谱峰。
色谱仪通常由下列五个部分组成：载气系统（包括气源和流量的调节与测量元件等）进样系统（包括进样装置和汽化室两部分）分离系统（主要是色谱柱）检测、记录系统（包括检测器和记录器）辅助系统（包括温控系统、数据处理系统等）第三课气相色谱仪－载气系统载气通常为氮、氢和氢气，由高压气瓶供给。
色谱题库
色谱组题库一名词解释1.基线：在正常操作条件下，仅有载体通过检测器系统时所产生的响应信号曲线。
2.色谱峰：当样品随载气进入检测器时，检测器的输出信号随样品的浓度而改变，此时得到的信号――时间曲线称为色谱峰。
3.峰高：色谱峰最大值至峰底的垂直距离。
4.峰宽：色谱峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离。
5.半峰宽：又叫半高峰宽，即通过峰高的中点作平行峰底的直线，此直线与峰两侧的交点之间的距离。
6.峰面积：峰与峰底之间所包围底面积，用A表示。
7.死时间：不被固定相吸附或溶解的惰性气体（空气）进入色谱柱，载柱后出项浓度极大点的时间称为死时间，用t表示。
m8.死体积：指色谱柱在填充后柱管内固定相颗粒间所剩留的空间，色谱仪中管路和连结头间的空间。
以及检测器空间的总和，用VM9.保留时间：进样后，组分流入检测器达到最大值的时间，即组分从进样到出现峰最大值所需要的时间，称为该组分的保留时间（Rt）。
表示10.调整保留时间：某组分的保留时间扣除死时间后，称该组分的调整保留时间。
用tR11.顶空分析法：是利用在一定温度下，在密闭的容器中，溶液中的挥发性溶质在气、液两相中的分配比例是一定的，当分配达到平衡时，通过测定气相中的浓度，即可得知溶液中原来的浓度。
12.重复性：同一分析人员在同一实验室，在较短的时间内，对同一样品，用同一方法所得一系列分析结果的离散程度。
13.再现性：不同实验室，不同分析人员用同一分析方法对同一样品所得一系列分析结果的离散程度。
14.灵敏度：一个方法的灵敏度是指该方法对单位浓度或单位量的待测物质的变化所引起的相应量变化程度。
15.检出限：指对某一特定的分析方法，在给出的可靠程度内，可以从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。
所谓“检出”是指定性检测，即断定样品中确实存有浓度高于空白的待测物质。
16.流动相：在气相色谱法中的流动相是在色谱柱中用以携带样品和洗脱其组分的气体。
常用的有氮气、氦气、氢气等，要求为高纯气体，一般达到99.999％。
HPLC中常用的检测器分有如下几种
HPLC中常用的检测器分有如下几种液相检验HPLC中常用的检测器分有如下几种，紫外吸收检测器（UVD）、二极管阵列检测器（PDAD）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）、蒸发光散射检测器（ELSD）、质谱检测器（MSD）等。
下面就分别介绍简单介绍一下。
光学类检测器1、紫外吸收检测器（UVD）是目前HPLC中应用最广泛的检测器。
它的主要特点是灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度变化不敏感，可用于梯度洗脱。
它要求被检测样品组分有紫外吸收，属于选择性检测器。
2、二极管阵列检测器（PDAD）是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器，它可以看作是UVD的一个分支。
在对每个洗脱组分进行光谱扫描，经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的三维图谱。
其中吸收光谱用于定性（确证是否是单一纯物质），色谱用于定量，常用于复杂样品（如生物样品、中草药）的定性定量分析。
3、荧光检测器（FLD）同样属于选择性检测器，其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中是最高的，应用也较多，仅次于UVD。
它适用于能激发荧光的化合物。
很多与生命科学有关的物质，如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。
荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用，尤其在用荧光衍生后，可以检测很微量的氨基酸和肽。
通用型检测器1、示差折光检测器（RID）是一种通用型检测器，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。
生命科学中常遇到各类糖类化合物，没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器。
它的通用性比UVD广，但灵敏度要低，对温度变化敏感，并与梯度洗脱不相容，因而限制了它的使用。
2、蒸发光散射检测器（ELSD）也是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。
ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
ELSD灵敏度比RID高，对温度变化不敏感，基线稳定，可用于梯度洗脱。
现在ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
示差检测器特点
示差检测器特点
示差检测器特点
第一、示差折光检测器属于总体性能检测器，其响应值取决于柱后流出液折射率的变化，采用含有样品的流出液与不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。
第二、该检测器属于浓度敏感型检测器，其响应信号与溶质的浓度成正比，具有浓度型检测器的特点。
第三、该检测器属于中等灵敏度的检测器，在优选的操作条件、样品及溶剂选择下，检出限可达10-6g/m L～10-7g/Ml。
与紫外可见检测器相比，示差折光检测器的灵敏度较低，一般不用于痕量分析。
第四、示差折光检测器对压力和温度的变化很敏感。
折光物质由于温度变化引起该物质密度变化，进而导致折射率的改变。
第五、示差折光检测器最常用的溶剂是水，但所有的透明溶剂原则上都可以使用，流动相的强度与溶剂的折射率无关。
选择合适的溶剂，检测器的响应可以加强。
示差检测器的最大优点是其通用性，但这同时也是它的缺点。
示差检测器一般不用于梯度洗脱。
第六、流动相流速的变化因示差折光检测器对温度和压力的敏感性而对检测器也有一定的影响。
该影响受多种因素的制约：流动相的几何形状、流通池的大小及材料、检测器的光路系统等。
液相色谱检测器的基本原理及应用
液相色谱检测器的基本原理及应用液相色谱检测器是液相色谱系统的核心部件，用于检测色谱柱流出物的构成和浓度更改，将分析结果转化为可直接察看的信号。
一、基本原理液相色谱检测器的基本原理是基于物质的物理或化学性质，将色谱柱流出物中的成分转化为可直接察看的信号。
依据检测原理的不同，可分为光学检测器、电化学检测器、质谱检测器等类型。
1、光学检测器光学检测器是常见的一种，紧要包含紫外—可见光检测器（UV—Vis）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）等。
这些检测器通过测量物质对光的吸取、发射或折射等性质，将分析结果转化为可直接察看的信号。
2、电化学检测器电化学检测器是基于物质的电化学性质进行检测的，紧要包含电导检测器、极谱检测器、安培检测器等。
这些检测器通过测量物质在电场作用下的电导、氧化还原反应等性质，将分析结果转化为可直接察看的信号。
3、质谱检测器质谱检测器是一种高灵敏度、高选择性的检测器，可以供应物质的结构信息。
质谱检测器通过测量物质的质荷比（m/z）和丰度，可以对物质进行定性和定量分析。
二、应用概述在化学、生物、药物等领域具有广泛的应用。
例如：1、药物分析在药物分析中发挥侧紧要作用，可以用于药物的定性定量分析、药物代谢研究、药物杂质检测等。
例如，利用紫外—可见光检测器可以检测药物中的有效成分和杂质。
2、食品安全分析在食品安全分析中具有紧要应用，可以用于食品添加剂、农药残留、重金属污染等的检测。
例如，利用荧光检测器可以检测食品中的荧光增白剂。
3、环境监测在环境监测中具有紧要应用，可以用于水质、土壤、大气等环境样品的分析。
例如，利用示差折光检测器可以检测水中的有机污染物。
液相色谱检测器是液相色谱系统的核心部件，其基本原理是基于物质的物理或化学性质，将色谱柱流出物中的成分转化为可直接察看的信号。
了解高效液相色谱仪的构造仪器各部分的功
二、高效液相色谱分析法的特点
高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的 差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和 高效微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、 不同极性的有机化合物。
高效液相色谱也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等。它与经典液相色谱法的区别是 填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力 ，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析 速度快而称为高速液相色谱。
4、凝胶色谱固定相
具有立体多孔网状结构的多聚体。分为软质、半硬质 、硬质三种。
软 质---葡聚糖凝胶、琼脂凝胶； 半硬质---交联聚苯乙烯凝胶； 硬 质---多孔硅胶、多孔玻璃球等。
二、液相色谱流动相（洗脱剂）
液相色谱流动相（洗脱剂）是指各种极性、非极性液 态溶剂。理想的溶剂应有下列特性： 1、所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固 定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱 过程的稳定性和重复性的要求。 2、溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配 ，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无 吸收的流动相。 3、在制备分离中, 溶剂应当易于除去, 不干扰对分离组分 的回收。 4、溶剂的粘度要小，保证合适的柱压降。
极性固定液→NLLC，非极性固定液→RLLC 正相色谱——固定液极性 > 流动相极性（NLLC），极性 小的组分先出柱，极性大的组分后出柱， 适于分离极性 组分。 反相色谱——固定液极性 < 流动相极性（RLLC）， 极 性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱，适于分离非极 性组分。
液相色谱检测器说明
紫外吸收检测器紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。
因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。
示差检测:是通用型检测器，凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。
目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统（当然现在糖类elsd很普遍）。
示差检测器示差检测器（RID）是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的，属偏转式类型。
光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像，并作为检测池的入射光，出射光照在反射镜上，光被反射，又入射到检测池上，出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。
双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂，当参比池和测量池流过相同的溶剂时，使照在双光敏电阻的光量相同，此时桥路平衡，输出为零。
当测量池中流过被测样品时，引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转，使双光敏电阻阻值发生变化，此时由电桥输出讯号，即反映了样品浓度的变化情况。
二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）：以光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的UV-VIS 检测器。
它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。
与普通UV-VIS检测器不同的是，普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入流动池。
而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测。
荧光检测器荧光检测器（FD）是高压液相色谱仪常用的一种检测器。
用紫外线照射色谱馏分，当试样组分具有荧光性能时，即可检出。
(完整)气相与液相的区别
气相色谱仪主要用来分析气相样品和易挥发的热稳定样品,如弱极性小分子有机物；而液相色谱主要用来分析高沸点或若不稳定样品，如核酸等.两种色谱方法，液相色谱仪用液体作流动相，气相色谱仪用气体作为流动相。
进样的话，液相色谱仪的液体样品直接进入色谱柱，气相色谱仪的液体样品必须气化才能进入.气相色谱仪现在所用色谱柱一般是空心的毛细管色谱柱,检测器也是破坏型的。
液相色谱仪的色谱柱一般是填充柱，检测器非破坏型.一、分离原理：1。
气相：气相色谱是一种物理的分离方法.利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度)的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。
2。
液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上,流动相改为高压输送（最高输送压力可达4。
9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
二、应用范围：1。
气相:气相色谱法具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点,但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析.一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。
2.液相：高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制.对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于 400 以上）的有机物( 些物质几乎占有机物总数的 75% ～ 80％）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计,在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70~80%。
三、仪器构造：1.气相:由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。
进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
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注意事项：
a: 洗脱液的组成一定要恒定，不能使用梯度洗脱。 b: 不能使检测池带压工作，在与其它检测器串联使用时应 放在最后。 c: 流速要恒定，泵的流速波动要小于0.5％，使用往复泵时 要用阻尼装置。 d: 温度要恒定，恒温控制要达±10-4℃,在使用时预热时间要 充足，否则基线漂移十分严重 。
示差折光检测器
原理：
示差折光检测器是通过连续测 定色谱柱流出液折射率的变化 而对样品浓度进行检测的。检 测器的灵敏度与溶剂和溶质的 性质都有关系，溶有样品的流 动相和流动相本身之间折射率 之差反映了样品在流动相中的 浓度。 即：R=Zci(ni-n0) 其中，R:响应信号 Z:仪器常 数 ci:溶质的浓度 ni:溶质的折射 率 n0:溶剂的折射率
优点: a: 灵敏度非常高，其检出限可达10-9g/ml，(比紫外检测 器高2—3个数量级，适合于痕量分析 ) b: 只要选做流动相的溶剂不会发射荧光，就可以用于梯 度洗脱 c: 对仪器的稳定性（如温度和压力的稳定性）依赖较小 d: 选择性好，优于紫外 e:线行范围较宽 f:受外界条件影响较小 缺点： 荧光检测器的高选择性优点在一些情况下，也是该检测器 的缺点。因为不是所有的化合物在选择的条件下都能发生 荧光，所以荧光检测器不属于通用型检测器，与紫外-可 见光检测器相比，应用范围较窄。
荧光检测器和示差折光检测器的 原理及适用的检测对象
荧光检测器
原理：
物质的分子或原子经光照射后，有些电子被激发至较高的能级， 这些电子从高能级跃至低能级时，物质会发出比入射光波长较长的光， 这种光称为荧光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的 强弱. 对于稀溶液，荧光强度与荧光物质溶液浓度、摩尔吸光系数、吸 收池厚度、入射光强度、荧光的量子效率及荧光的收集效率等成正相 关。在其它因素保持不变的条件下，物质的荧光强度与该物质溶液浓 度成正比。 荧光强度: F=2.303KQI0εbc 其中，F:荧光强度 K:荧光收集效率Q: 量子效率（即发射辐射的光子数通常都少于吸收辐射的光子数） I0:入射光强度 ε:摩尔吸光系数 b:吸收池厚度
适用对象：
荧光检测器（FLD）属于选择性检测器，它适合发荧光但经化学反应后可发荧光的物质。很 多与生命科学有关的物质，如氨基酸、胺类、维生 素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检 测。荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用，尤 其在用荧光衍生后，可以检测很微量的氨基酸和肽。
适用对象：
几乎每种物质都有各自不同的折射率，因此，凡是与流动 相折射指数有差别的样品都可以测定它的浓度，它是一种通用 型的浓度监测器，检测限可达10-6 ～10-7g/ml 。
优缺点：
优点：通用性强，操作简便；折射率范围宽，噪声小、运行稳定； 采用光定量自动调节器，能自动补偿由于池污染或其它原因引起 的灵敏度下降。 缺点：灵敏度低； 过于娇贵---室温的变化会影响基线的稳定性 , 即对温度变化很敏感，大的溶剂前沿峰可能会掩盖前期脱洗的色 谱峰 ；不能用于梯度洗涤