KRAS基因在胰腺疾病中突变的检测及其临床意义
胰腺肿瘤早期诊断方法

胰腺肿瘤早期诊断方法
早期诊断重要性
早期诊断重要性
▪ 早期诊断的重要性
1.提高治愈率:早期诊断能够及时发现胰腺肿瘤,提高治愈的 可能性,避免病情恶化。 2.减少治疗成本:早期诊断可以避免病情恶化,减少治疗难度 和费用,降低医疗成本。 3.提高生存率:早期诊断及时治疗,可以提高患者的生存率和 生活质量。
影像学诊断技术
影像学诊断技术
▪ CT扫描
1.CT扫描能提供高分辨率的胰腺图像,有助于发现小到2mm 的肿瘤。 2.通过增强CT,可以进一步鉴别肿瘤的血供情况,提高诊断准 确性。 3.CT扫描具有非侵入性、快速、准确等优点,是胰腺肿瘤诊断 的首选影像学方法。
▪ MRI检查
1.MRI检查可以提供更清晰的软组织对比度,有助于发现胰腺 肿瘤和评估周围组织受累情况。 2.MRI的多参数成像和扩散加权成像等技术,可以进一步提高 胰腺肿瘤的诊断准确性。 3.MRI检查对于不能接受辐射的患者,如孕妇和儿童,是更为 安全的选择。
影像学诊断技术
▪ 血管造影
1.血管造影可以清晰显示胰腺肿瘤的血管供应情况,为手术提供重要参考。 2.通过血管造影,可以评估肿瘤的切除可能性和手术风险,有助于制定手术方案。 3.血管造影是一种有创检查,需要在专业医生的指导下进行。
▪ 多模态影像诊断
1.多模态影像诊断综合应用多种影像学技术,提高胰腺肿瘤的诊断准确性和分期精 度。 2.通过多模态影像诊断,可以全面评估患者的病情和肿瘤特点,为制定个性化治疗 方案提供重要依据。 3.多模态影像诊断是未来胰腺肿瘤早期诊断的重要发展趋势,有助于提高患者的生 活质量和预后。
▪ 未来展望与发展趋势
1.结合当前研究热点和前沿技术,展望诊断准确率评估的未来 发展趋势。 2.探讨人工智能、机器学习等新兴技术在诊断准确率评估中的 应用前景。 3.强调多学科合作和交叉研究的重要性,推动诊断准确率评估 的进一步发展。
KRAS和BRAF基因检测的必要性

KRAS和BRAF基因检测的必要性KRAS基因位于12号染色体上,是表皮生长因子受体(EGFR)功能信号的下游分子,在膜受体到腺苷环化酶信号转导中起重要作用。
大约30%的人类肿瘤细胞中出现RAS基因突变,其中KRAS基因对人类癌症影响最大。
KRAS基因与一些肿瘤的发病机理和预后相关,主要以结直肠癌、肺癌和胰腺癌的突变率比较高。
KRAS基因突变发生在肿瘤恶变的早期,并且原发灶和转移灶的KRAS基因高度保持一致。
一般认为,KRAS基因状态不会因治疗而发生变化。
KRAS基因最常见的突变方式为点突变,研究表明,90%的KRAS基因突变位于2号外显子的第12和13密码子位点,结直肠癌患者突变率为27%-43%。
目前,结直肠癌和肺癌的治疗仍以手术治疗为主,辅助以化学药物治疗、放射治疗。
但是,随着肿瘤分子生物学、基因组学的不断发展,肿瘤靶向治疗预测指标及分子靶向治疗药物受到了越来越多的重视,并被逐渐应用到临床治疗当中。
BRAF基因位于人染色体7q34,长约190kb,是Ras-Raf-MEK-ERK信号转导通路重要的转导因子,主要通过有丝蛋白激酶通路中的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶来发挥作用,该酶将细胞表面的受体和RAS蛋白通过MEK和ERK与核内的转录因子相连接,启动多种因子参与调控细胞内多种生物学事件,如细胞生长、分化和凋亡等。
BRAF在结直肠癌的高、中、低分化中表达的阳性率差异明显,肿瘤分化程度越低,BRAF阳性表达率越高,可为结直肠癌的诊断、治疗提供新的依据。
近些年来,结直肠癌和肺癌的治疗领域中最大亮点是确定KRAS基因和BRAF基因状态与抗EGFR抗体疗效的相关性。
最新的研究显示,靶向治疗药物西妥昔单抗治疗的有效性受KRAS基因和BRAF 基因状态的影响,突变型的KRAS基因和BRAF基因无需EGFR接收信号能够自动活化该通路并启动下游信号的转导,因此只有野生型KRAS和BRAF基因的患者才能从抗EGFR的治疗中获益,而突变型的患者则不能。
KRAS基因突变影响化疗最终效果

KRAS基因突变影响化疗最终效果KRAS基因突变是一种在癌症中常见的突变。
特别是在结直肠癌等癌症中,KRAS基因突变是相当常见的。
KRAS基因突变对于化疗的最终效果有着重要的影响。
本文将探讨KRAS基因突变对化疗效果的影响,并介绍一些针对KRAS突变的新型治疗方法。
KRAS基因是一个编码RAS蛋白的基因,它在细胞信号传导途径中具有重要的作用。
当KRAS基因突变时,会导致RAS蛋白的功能异常。
RAS 蛋白负责细胞的增殖、分化和存活等过程,因此KRAS基因突变会导致细胞增殖无节制,从而形成肿瘤。
此外,KRAS基因突变也会导致肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性。
首先,KRAS基因突变会降低化疗的疗效。
研究表明,KRAS基因突变的肿瘤往往对于传统的化疗药物如氟尿嘧啶和奥沙利铂的敏感性较低。
这是因为KRAS突变会激活细胞内的信号传导途径,从而导致肿瘤细胞的增殖和生存能力增强。
此外,KRAS突变还会导致细胞线粒体功能减弱,从而降低细胞对化疗药物的灭活能力。
因此,KRAS基因突变的肿瘤往往对化疗药物产生抗药性,使治疗效果不佳。
其次,KRAS基因突变还会影响化疗的耐受性。
研究发现,KRAS基因突变的患者往往在化疗过程中出现更多的不良反应,例如恶心、呕吐、腹泻等。
这些不良反应不仅影响患者的生活质量,还会导致治疗计划的中断或减量,从而影响治疗的最终效果。
然而,近年来针对KRAS基因突变的新型治疗方法得到了广泛研究。
一种常见的治疗方法是针对KRAS突变的靶向药物。
例如,EGFR抑制剂可有效抑制KRAS突变肿瘤细胞的增殖和存活能力。
这些靶向药物与KRAS突变所激活的细胞内信号传导途径相互作用,从而抑制肿瘤细胞的发展。
虽然一些靶向药物已经在临床中得到应用,但是由于KRAS突变的复杂性和多样性,目前还没有找到完全有效的靶向治疗方法,临床应用效果还有待进一步研究。
此外,一些个体化治疗策略也显示出了潜在的治疗效果。
例如,一项研究发现,KRAS基因突变结直肠癌患者中,亚群中一些肿瘤细胞不依赖KRAS突变进行生长和生存。
分子病理结果

分子病理结果分子病理学是一种新兴的分析和诊断疾病的方法。
它基于分子水平上的细胞和组织学研究,通过研究特定的基因、蛋白质和其他分子标志物,来帮助医生确定某些疾病的诊断、预后和治疗。
以下是一些常见的分子病理结果以及其含义:1. EGFR基因突变:EGFR是一种受体酪氨酸激酶,它在肺癌、宫颈癌等癌症中扮演着关键作用。
EGFR基因突变会导致肿瘤细胞生长、增殖和侵袭的异常,从而增加癌症发生的风险。
针对EGFR基因突变的靶向治疗已成为一种重要的肿瘤治疗手段。
2. KRAS基因突变:KRAS是一种小G蛋白,它参与控制细胞增殖、分化和凋亡等过程。
KRAS基因突变是胰腺癌、结肠癌等肿瘤中最常见的突变,它会导致细胞无法及时受到调控,从而异形增殖,增加癌症发生的风险。
针对KRAS突变的治疗一直是一个难题。
3. HER-2基因扩增:HER-2是乳腺癌中的一个重要分子标志物,它在癌细胞表面过度表达,导致乳腺癌细胞恶化。
HER-2阳性患者的预后通常较差。
一些针对HER-2的靶向治疗已经被应用于乳腺癌患者的治疗中。
4. BCR-ABL基因融合:BCR-ABL是一种重要的融合基因,它在慢性髓性白血病中非常常见。
BCR-ABL融合后,它会导致骨髓细胞异常增殖,进而导致血液造血功能障碍和贫血。
靶向BCR-ABL的治疗已经取得了很好的效果。
在临床实践中,分子病理学已经广泛应用于多种疾病的诊断和治疗。
它不仅可以精确预测疾病的发展和转移,而且还可以作为个体化治疗的指南。
未来,我们相信随着技术的不断进步,分子病理学一定能够为更多的患者带来福音。
胰腺囊腺瘤和囊腺癌的鉴别诊断

胰腺囊腺瘤和囊腺癌的鉴别诊断胰腺囊腺瘤和囊腺癌是胰腺疾病中常见的两种类型,两者的鉴别诊断对于选择合适的治疗方案和预后评估非常重要。
本文将从临床表现、影像学特征、病理学特点和生物标志物等方面,对胰腺囊腺瘤和囊腺癌进行详细的鉴别诊断。
一、临床表现:1. 胰腺囊腺瘤:多数囊腺瘤为无症状或无特异性症状,少数患者可能有腹胀或上腹部不适等非特异性症状。
囊腺瘤一般生长缓慢,瘤体大小相对较小,不会出现黄疸或其他明显的外科表现。
2. 囊腺癌:囊腺癌常常表现为慢性胰腺炎的症状,如腹痛、腹部肿块、黄疸等。
此外,患者还可能有进行性消瘦、乏力、食欲减退等全身症状。
二、影像学特征:1. 胰腺囊腺瘤:在超声检查中,囊腺瘤呈现为单个或多个无回声囊肿,边界清晰,内部可见尖锐的分隔,无明显的增强或强化。
CT检查显示瘤体密度均匀,呈低密度或等密度。
MRI检查可以更好地显示囊腺瘤的内部结构,如分隔、壁结节等。
2. 囊腺癌:超声检查一般难以明确诊断囊腺癌。
CT检查显示囊腺癌呈现为边界欠清、不规则形态的囊实性肿块,内部可见壁结节、软组织结构,以及增强后的实性成分。
MRI检查同样可以显示囊腺癌的特征性改变,如肿块边界不清、强化不均匀等。
三、病理学特点:1. 胰腺囊腺瘤:囊腺瘤的组织学特点是囊腺性肿瘤,通常由增生的囊腺上皮细胞和纤维组织组成。
瘤细胞以柱状细胞为主,其中有的呈现粘液分泌,结构分化良好。
2. 囊腺癌:囊腺癌的组织学特点是囊腺癌细胞具有浸润性生长,细胞核呈现不均匀的大小和形状,胞质量较大,核分裂象明显。
肿瘤组织中常可见到炎性细胞浸润的反应。
四、生物标志物:1. 胰腺囊腺瘤:胰腺囊腺瘤往往不会导致明显的胰腺功能异常,血清淀粉酶水平一般正常,无明显的升高或降低。
2. 囊腺癌:囊腺癌常常伴随胰腺功能异常,血清淀粉酶和血清胰腺酶的水平可能升高,胆汁淀粉酶和尿淀粉酶测定亦可用于辅助诊断囊腺癌。
综上所述,通过临床表现、影像学特征、病理学特点和生物标志物的综合分析,可以对胰腺囊腺瘤和囊腺癌进行鉴别诊断。
KRAS和EGFR检测与临床应用

KRAS和EGFR检测与临床应用KRAS和EGFR检测与临床应用1、引言1.1 背景1.2 目的1.3 范围2、KRAS基因检测2.1 KRAS基因的作用2.2 KRAS突变与肿瘤发生2.3 KRAS突变的检测方法2.3.1 Sanger测序2.3.2 PCR-RFLP2.3.3 ARMS-PCR2.3.4 NGS2.4 KRAS突变的临床应用2.4.1 KRAS突变与癌症预后2.4.2 KRAS突变与抗癌药物治疗反应2.4.3 KRAS突变检测的指南和建议3、EGFR基因检测3.1 EGFR基因的作用3.2 EGFR突变与肿瘤发生3.3 EGFR突变的检测方法3.3.1 ARMS-PCR3.3.2 NGS3.3.3 FISH3.4 EGFR突变的临床应用3.4.1 EGFR突变与肺癌治疗3.4.2 EGFR突变与EGFR抑制剂治疗反应3.4.3 EGFR突变检测的指南和建议4、KRAS和EGFR检测比较和结合应用4.1 KRAS和EGFR突变的共现率4.2 KRAS和EGFR突变的相互影响4.3 KRAS和EGFR联合检测的临床应用5、附件在此文档的附录中,提供了相关研究和报告,包括检测方法的详细说明,相关数据的分析和文献引用。
6、法律名词及注释- KRAS:Kirsten rat sarcoma家族成员A基因,是一种常见的肿瘤相关基因,突变与肿瘤发生和预后相关。
- EGFR:表皮生长因子受体基因,参与调控细胞生长和分化,EGFR突变与多种癌症的发生和治疗反应相关。
- Sanger测序:一种常用的DNA测序方法,通过测定DNA序列来检测基因的突变状态。
- PCR-RFLP:聚合酶链反应-限制性片段长度多态性,通过PCR扩增后,利用限制性酶对靶基因进行切割,根据限制性酶切割位点的差异来检测突变。
- ARMS-PCR:引物特异性扩增-PCR,使用不同的引物来选择性扩增突变和野生型基因片段,根据扩增产物的差异来判断突变状态。
kras 基因突变位点

kras 基因突变位点Kras基因突变位点Kras基因是人类细胞中一种重要的信号传导蛋白,它参与了细胞生长、分化和存活等过程。
然而,当Kras基因发生突变时,就会导致细胞信号传导的异常,进而引发多种疾病,包括多种肿瘤的发生和发展。
Kras基因突变位点通常指的是Kras基因中的某个特定位点发生了突变。
这些突变位点一般位于Kras基因的编码区域,即决定蛋白质序列的部分。
Kras基因突变位点的研究对于了解肿瘤的发生机制、预测治疗效果以及指导个体化治疗具有重要意义。
在Kras基因中,最常见的突变位点发生在编码区域的第12、13和61位。
这些位点的突变通常导致了Kras蛋白的功能异常,使其在细胞信号传导中扮演错误的角色。
这些突变位点的研究已经广泛应用于肿瘤的分子诊断和治疗策略的制定中。
Kras基因突变位点的研究为肿瘤的分子诊断提供了重要依据。
通过检测肿瘤组织中Kras基因突变位点的存在与否,可以确定患者是否具有Kras突变。
这一信息对于判断治疗方案的选择和预后评估具有重要意义。
例如,在结直肠癌中,KRAS基因突变与抗EGFR抗体治疗的疗效密切相关。
因此,对于KRAS基因突变位点的准确检测可以帮助医生预测患者对抗EGFR抗体治疗的敏感性。
Kras基因突变位点的研究也为肿瘤的个体化治疗提供了重要依据。
一些药物,如EGFR抑制剂、KRAS抑制剂等,已经应用于临床治疗中。
然而,这些药物的疗效在不同个体中存在差异。
研究发现,Kras基因突变位点的不同可以影响药物的作用机制和疗效。
因此,通过检测患者具体的Kras基因突变位点,可以为个体化治疗方案的制定提供重要依据。
Kras基因突变位点的研究还有助于深入了解肿瘤的发生和发展机制。
Kras基因突变是许多肿瘤中常见的遗传变异之一。
通过对不同突变位点的研究,可以揭示Kras基因突变对细胞信号传导的影响机制,进而加深对肿瘤形成和发展的认识。
这对于寻找新的治疗靶点、开发更有效的抗肿瘤药物具有重要意义。
KRAS突变对胰腺癌的发生有重要作用

KRAS突变对胰腺癌的发生有重要作用胰腺癌可算得上是目前最难有效控制的恶性肿瘤,它不仅对许多治疗手段有局限性,而且疗效也不甚良好,以前诱发胰腺癌的病因尚未完全清楚,但是德州大学的癌症中心一项研究成果发现一种诱发胰腺癌的基因突变,这也许为胰腺癌的病因找到了证据,也为有效治疗提供了一种突破口。
近期在癌症研究领域,多名学者推荐了由德州大学MD Anderson癌症中心完成了的一项重要研究成果:发现一种诱发胰腺癌的遗传突变,在肿瘤生长和扩散的代谢途径中也扮演了重要角色。
这种突变基因就是KRAS,ras基因家族是一类与人类肿瘤密切相关的基因家族,其中包括HRAS、KRAS和NRAS,分别定位在11、12和1号染色体上。
在ras基因中,KRAS对人类癌症影响最大,它好像分子开关,当正常时能控制调控细胞生长的路径,发生异常时,则导致细胞持续生长,并阻止细胞自我毁灭。
这种基因还参与细胞内的信号传递,当KRAS基因突变时,这一基因永久活化,不能产生正常的ras蛋白,使细胞内信号传导紊乱,细胞增殖失控而癌变。
研究人员研发了一种新型诱导KRAS转基因:iKRAS(inducible KRAS),并培育带有这种基因的小鼠。
这样研究人员就能通过注入多西环素(doxycycline),观察小鼠胰腺中KRAS的表达启动,以及撤回着这种药物,来观察这一基因的关闭。
代谢研究表明KRAS中止将会导致葡萄糖代谢相互的中间物的减少,以及葡萄糖摄入降低,和乳糖生成,研究人员在转录分析中发现了这种与基因表达改变相关的代谢变化。
这些受影响的葡萄糖中间物也存在于其它葡萄糖途径中,因此研究人员又分析了己糖胺合成途径(hexosamine biosynthesis pathway,HBP),以及磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway,PPP)--这两个途径都参与了细胞构建,比如DNA和RNA的组装。
研究人员发现随着KRAS基因表达中止,一种在许多细胞进程中扮演重要信号作用的步骤:通过HBP的蛋白糖基化水平降低,这种糖基化水平能在葡萄糖饥饿状态下出现。
KRAS基因突变情况

KRAS基因突变情况KRAS基因位于人类基因组的第12号染色体上,编码K-Ras蛋白质,其是Ras家族蛋白质中的一员。
Ras蛋白质是一种信号传导分子,能够调控细胞增殖、分化和存活等生理过程。
KRAS基因突变是指KRAS基因的DNA序列发生变异,导致蛋白质的氨基酸序列发生改变。
KRAS基因突变常见于KRAS基因第12、13和61个密码子位置上,这些位置是KRAS蛋白质功能的关键区域。
在肿瘤中,KRAS基因突变是相当常见的。
研究发现,约30%的肿瘤中存在KRAS基因突变,其中结直肠癌是其中最常见的。
研究还发现,KRAS 基因突变在结直肠癌中的发病率可高达40-50%。
此外,KRAS基因突变还与其他癌症类型的发生相关,如肺癌、胰腺癌和卵巢癌等。
KRAS基因突变与肿瘤发生和发展密切相关。
正常的KRAS蛋白质能够将细胞内的生长因子信号传递至细胞核,以促进细胞增殖和存活。
当KRAS基因突变发生时,它会导致KRAS蛋白质的活性增强,使其在缺乏生长因子的情况下仍能维持活性状态。
这种异常的信号传导活性会导致细胞不受控制地增殖,促进癌细胞的形成和扩散。
由于KRAS基因突变与癌症的发生和发展关系紧密,因此它已成为肿瘤治疗中的一个重要治疗标靶。
然而,传统的放疗和化疗治疗方案对KRAS基因突变的癌症通常无效。
研究人员通过开发KRAS基因突变特异性的治疗方法来解决这个问题。
目前,针对KRAS基因突变的治疗策略主要包括小分子靶向药物和免疫治疗。
小分子靶向药物的作用是抑制KRAS蛋白质的活性,从而阻断异常的信号通路。
然而,由于KRAS蛋白质的特殊结构,开发针对KRAS基因突变的有效药物一直是一个巨大的挑战。
最近的研究表明,有一些新型的小分子抑制剂能够靶向KRAS基因突变,并取得了一定的治疗效果。
免疫治疗是另一种新兴的治疗策略,它利用激活免疫系统来攻击癌细胞。
免疫检查点抑制剂是最常见的免疫治疗药物之一,它能够阻断免疫抑制分子与癌细胞的结合,增强免疫细胞对肿瘤细胞的攻击能力。
研究揭示基因突变与胰腺癌的关系

研究揭示基因突变与胰腺癌的关系胰腺癌作为一种高度恶性的肿瘤疾病,其发病率逐年上升,而治疗效果不尽如人意。
近年来,研究人员通过对基因突变的深入研究,逐渐揭示了基因突变与胰腺癌之间的密切关系。
本文将通过综述现有的研究成果,探讨基因突变对胰腺癌发生发展的影响,为寻找新的预防和治疗策略提供科学依据。
一、基因突变与胰腺癌的关联基因突变是胰腺癌发生发展过程中的重要环节,与肿瘤的发生、转移以及对治疗的敏感性密切相关。
许多研究表明,胰腺癌患者体内存在多个突变的关键基因,这些突变的累积导致了胰腺细胞的恶性转变。
其中,KRAS、TP53和CDKN2A是最常见的三个相关基因。
1. KRAS基因突变KRAS基因突变在胰腺癌中非常常见,几乎多数患者都存在这一突变。
KRAS突变能够促使ERK和PI3K信号通路的激活,从而增加胰腺癌细胞的增殖和生存能力。
这也是胰腺癌对常规化疗药物耐药的重要机制之一。
2. TP53基因突变TP53基因是人体中最常见的肿瘤抑制基因之一,控制着细胞的凋亡、DNA修复和周期调控等重要过程。
然而,TP53基因突变会导致其功能丧失,从而使得恶性细胞逃避免疫监控和抗肿瘤药物的作用。
3. CDKN2A基因突变CDKN2A基因编码p16蛋白,是肿瘤抑制因子。
CDKN2A基因突变会导致p16蛋白的丧失或功能异常,使得细胞增殖的调控机制受到破坏。
研究发现,胰腺癌患者中CDKN2A的突变率较高,这与胰腺癌的发病和进展密切相关。
二、基因突变对胰腺癌的影响1. 促进细胞增殖和转移基因突变能够促进胰腺癌细胞的增殖和转移,使其不受正常细胞生长调控机制的限制。
这主要是通过调控细胞周期、细胞凋亡和细胞间相互作用等过程实现的。
研究发现,KRAS和TP53基因突变特别在这些过程中起到关键作用,从而导致胰腺癌细胞的异常增殖和扩散。
2. 耐药性的产生基因突变不仅影响胰腺癌的发病发展过程,还会对治疗产生重要影响。
许多患者在接受化疗药物治疗时会出现耐药性,这主要就是由于胰腺癌细胞内存在的基因突变所致。
胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍

成瘤能力(体内)
皮下注射有关研究 Ø Bxpc-3成瘤比PANC-1大,也有研究表白PANC-1成瘤较大; Ø Capan-1注射后14周即发展成为肿瘤,bxpc-1和panc-1则超出4个月成瘤; Ø bxpc-3注射后潜伏期40天才开始生长,capan-1则需10天潜伏期开始生长;panc-1成瘤潜伏期为4
几种常见胰腺癌细胞系旳起源
Ø Hs 766T细胞: 源自胰腺癌淋巴结转移灶 Ø MIA Paca-2细胞: ① 源自胰体尾癌原位肿瘤 ② 有侵犯,浸润至主动脉周围 ③ 无体现大量CEA且ALP阴性 Ø PANC-1细胞: ① 源自胰头癌原位肿瘤 ② 有转移,转移至胰周淋巴结 ③ 未检测到CEA Ø 细胞: ① 源自胰头癌肝脏转移灶 ② 有转移,广泛肝脏转移
细胞旳粘附性
细胞旳粘附性是经过细胞外基质和细胞表面分子接触介导旳: Ø 纤连蛋白,一种发觉于基底膜和结缔组织旳糖蛋白 Ø I型和IV型胶原蛋白,发觉于组织间质和基底膜 Ø 层粘连蛋白,基底膜中主要旳非胶原蛋白
有关研究: Ø Capan-1比Mia-paca-2更易连接到I型胶原蛋白 Ø Capan-1和Mia-paca-2对层粘连蛋白旳粘附性无明显差别,有研究也表白Capan-1稍逊 Ø Bxpc-3和panc-1对I型胶原蛋白粘连性近似 Ø Bxpc-3和panc-1对层粘连蛋白粘附性近似,有研究也表白,Bxpc-3更强
成瘤能力(体内)
原位移植肿瘤组织有关研究: Ø 不同细胞系成瘤概率均为100% Ø 研究表白移植瘤体积,mia-paca-2>capan-2,其他研究,HPAF-II>Mia-paca-2>panc-1>Aspc-
KRAS基因突变的检测及其临床意义

KRAS基因突变的检测及其临床意义KRAS基因位于人类染色体12上,编码一种重要的蛋白质参与细胞生长、分化和存活。
KRAS基因突变是其编码的K-Ras蛋白质的氨基酸序列中发生的改变,导致蛋白质功能上的异常。
在结直肠癌中,KRAS基因突变是最常见的基因突变,发生概率高达30%至50%。
基于KRAS基因突变的特性,可以通过多个检测方法进行检测。
常见的方法包括基因测序、聚合酶链式反应(PCR)和质谱法。
其中,基因测序是最常用的方法,可以对全基因进行测序,并鉴定其中的突变。
PCR方法则可以通过扩增目标片段,再通过限制性内切酶切割的方式来检测突变。
质谱法则利用质谱仪直接检测突变基因片段的质量。
KRAS基因突变的检测结果能够对患者的治疗方案选择提供有力的依据。
目前临床上已经证实,KRAS基因突变与抗EGFR(表皮生长因子受体)治疗的反应性密切相关。
使用EGFR抗体药物治疗的病人,如果KRAS基因突变阳性,则药物的疗效会大大降低甚至无效。
因此,进行KRAS基因突变的检测可以明确患者是否可以从EGFR抗体药物治疗中获益。
此外,KRAS基因突变的检测结果还可以用于判断患者的预后。
一些研究表明,KRAS基因突变阳性的结直肠癌患者较KRAS基因突变阴性的患者预后较差。
因此,在制定治疗方案和评估患者预后时,KRAS基因突变的检测是非常重要的。
虽然KRAS基因突变检测在肿瘤治疗中已经取得了重要的进展,但仍然存在一些挑战和不足之处。
首先,现有的检测方法尚不够高效和准确,可能会出现假阴性或假阳性的结果。
其次,KRAS基因突变的异质性也是一个问题,即肿瘤中不同区域的KRAS突变状态可能存在差异。
最后,KRAS基因突变只是肿瘤发生发展过程中的一个因素,还需要结合其他基因突变和肿瘤特征来进行综合评估。
综上所述,KRAS基因突变的检测在癌症治疗中具有重要的临床意义。
通过对KRAS基因突变的准确检测,可以明确患者是否适合接受EGFR抗体药物治疗,并对疗效和预后进行评估。
KRAS基因突变对胰腺癌的影响

KRAS基因突变对胰腺癌的影响根据美国密歇根大学综合癌症中心研究人员的一项新研究,几乎所有的胰腺癌中发现的突变蛋白不仅在癌症的形成中而且在癌症持续的生长中发挥着重要的作用。
这一发现为开发新的疗法治疗这种致命性疾病提供了可能的靶标。
在对36例胰腺癌组织及癌旁胰腺组织中BRAF基因15号外显子及KRAS基因12号密码子进行测序后。
结果36例胰腺癌组织中,25例出现KRAS基因12号密码子突变(69.4%,25/36),3例出现BRAF基因V600E突变(8.3%,3/36),且均同时存在KRAS突变。
11例KRAS野生型胰腺癌组织中未发现BRAF突变;癌旁胰腺组织中均未检出突变。
结论:胰腺癌组织中BRAF基因突变可能并非主要突变,且常与KRAS基因突变同时存在。
研究人员已经知道,在KRAS基因突变是导致胰腺癌的发展。
这些突变经常出现在癌前病变,意味着它在胰腺癌中发挥了早期作用。
这项新研究,发表于2月份的临床调查发现上。
研究发现,在小鼠中突变的KRAS也能保持肿瘤的生长及帮助癌前肿瘤转变成浸润性肿瘤。
当研究人员关闭KRAS后,肿瘤消失了并且没有复发的迹象。
研究人员能够在设计的小鼠模型中操纵KRAS基因,在癌症发展的各个时间点对KRAS进行研究。
在癌前病变中,关闭KRAS消除了小鼠中的肿瘤,胰腺组织恢复正常,没有复发的迹象。
在浸润性癌中,失活KRAS杀死了癌细胞,但在胰腺中留下了类似纤维的疤痕,肿瘤没有复发。
目前针对KRAS基因突变的靶向药物尚属于在研阶段,代表性药物为植物提取的天然化合物安卓健,临床试验效果都比较不错,该药物最大的优点是副作用小,没有其他靶向药物的严重毒副反应。
由于胰腺癌KRAS突变比例非常大,所以该药可能会成为治疗胰腺癌的一种重要药物。
综上所述,KRAS基因点突变与胰腺癌密切相关。
研究报道,KRAS在胰腺癌中的突变率约为90%,其密码子12是发生突变的热点位置,所以检测该点突变对胰腺癌的诊断、预后及监测等都具有重要的临床价值。
人类胰腺癌亚型的分子学研究

人类胰腺癌亚型的分子学研究胰腺癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,目前已成为影响人类健康的严重疾病之一。
胰腺癌属于异质性强的肿瘤,不同亚型的分子机制千差万别,临床表现也有所不同。
在基因、蛋白质和肿瘤微环境三个维度上,人类胰腺癌亚型的分子学研究取得了许多重要进展。
基因层面上,胰腺癌患者的基因突变情况极为复杂,这也导致了其基因表达模式的异质性。
目前,常见的基因突变激活了包括KRAS、CDKN2A和TP53在内的多个通路,这些通路会影响信号传导、凋亡、细胞周期等多种生物学过程。
研究发现,KRAS突变是人类胰腺癌最为常见的基因异常之一,近乎所有胰腺癌患者都具有此突变。
此外,与胰腺癌有关的基因还包括PTEN、SMAD4、NF1等,这些基因的功能缺失会引发DNA损伤修复、基因表达调控等方面的异常。
通过基因测序获取的分子学信息,为胰腺癌分型、个性化治疗提供了依据。
蛋白质层面上,人类胰腺癌的亚型分子学研究更是复杂。
目前已发现的标志性蛋白质包括CA19-9、CEA、CA125等,但这些标志蛋白在胰腺癌患者中的表达水平并不稳定,也不具备足够的敏感性。
近年来,拟南芥素酸钴浓缩筛法、质谱成像等新技术的应用让蛋白质组学方面取得了更多突破。
研究人员通过大规模的质谱分析,发现蛋白序列、修饰等方面的差异,进一步论证了胰腺癌不同亚型的分子方差性。
蛋白质组学的研究结果为胰腺癌早期筛查和个性化治疗提供了有力的工具。
肿瘤微环境层面上,胰腺癌生长的过程受到了微环境的调节。
现代医学认为,肿瘤微环境在许多方面影响着肿瘤的发生、发展和耐药。
在人类胰腺癌的微环境研究方面,细胞外基质、血管生成、免疫细胞等因素都是重要的研究内容。
研究发现,胰腺癌具有高度的纤维化,胰腺间质细胞的活化和胰腺间质的分泌是重要的细胞外基质调控过程。
肿瘤微环境中还存在着一些细胞类型,如肝星型细胞、脂肪细胞等,它们的存在会影响胰腺癌的浸润和转移。
最新的肿瘤微环境研究成果表明,通过调节微环境因素,如降低间质细胞的活化程度,可抑制胰腺癌的生长和转移,这为新药物研发和治疗方法提供了启示。
kras 基因突变位点

kras 基因突变位点Kras基因突变位点是指Kras基因中发生突变的特定位置。
Kras基因是一种常见的癌基因,在多种癌症中常发生突变,特别是在胰腺癌、结直肠癌和肺癌等恶性肿瘤中。
Kras基因突变位点的研究对于癌症的预防、诊断和治疗具有重要意义。
在研究中,科学家们发现了一些常见的Kras基因突变位点,如G12V、G12D、G13D等。
这些突变位点与肿瘤的发生和发展密切相关。
我们来看一下Kras基因突变位点在癌症中的作用。
Kras基因突变位点的突变会导致Kras蛋白的功能异常,从而促进肿瘤的生长和转移。
研究表明,Kras基因突变位点的突变会导致Kras蛋白的GTP 酶活性增强,使其持续激活,进而激活下游信号通路,促进细胞的增殖和转移。
因此,Kras基因突变位点的研究可以为癌症的治疗提供新的靶点。
我们来看一下Kras基因突变位点在不同癌症中的分布情况。
研究发现,Kras基因突变位点在不同类型的癌症中分布不均。
例如,在胰腺癌中,G12D和G12V是最常见的突变位点,而在结直肠癌中,G12D和G13D是最常见的突变位点。
这些不同的突变位点可能与不同癌症的发生机制和临床表现有关。
然后,我们来看一下Kras基因突变位点与癌症的预后和治疗效果的关系。
研究发现,Kras基因突变位点与患者的预后和治疗效果密切相关。
一些研究表明,Kras基因突变位点阳性的患者对传统化疗药物的治疗效果较差,预后也较差。
因此,Kras基因突变位点的检测可以帮助医生选择更合适的治疗方案,提高患者的治疗效果和生存率。
我们来看一下Kras基因突变位点的检测方法。
目前,常用的Kras 基因突变位点的检测方法包括聚合酶链反应(PCR)和基因测序等。
这些方法可以通过检测Kras基因突变位点的序列变化来确定突变的存在和类型。
随着技术的不断进步,新的检测方法也在不断涌现,为Kras基因突变位点的检测提供了更多选择。
Kras基因突变位点的研究对于癌症的预防、诊断和治疗具有重要意义。
Kras检测目的与判读

Kras基因是EGFR信号通路中的重要分子之一,位于染色体12p12.1上,编码21kD(p21)蛋白。
突变型Kras不依赖刺激信号的激活,即突变型Kras基因不受上游EGFR基因状态的影响,始终处于激活状态,只有野生型Kras基因受上游EGFR 信号刺激的影响,这也是具有突变型Kras基因患者对抗EGFR药物治疗无效的理论基础。
Kras基因的点突变主要集中在特定的氨基酸密码子(第12、13、61密码子)上,占所有突变的90%以上。
Kras基因突变可以导致细胞逃逸凋亡,这种异常在胰腺癌、大肠癌、肺癌等肿瘤中的发生率较高。
在胰腺癌中,Kras基因的点突变发生率高达90%以上。
检测Kras基因突变,对判断这些肿瘤的发生发展、预后以及了解肿瘤的治疗效果具有一定意义。
(1)正常人血中检出Kras基因异常,提示存在肿瘤易感性;(2)良性肿瘤患者若检出Kras基因突变,提示有恶变的可能;(3)大量研究表明,Kras基因突变阳性,即使病理组织学诊断淋巴结转移阴性,癌症复发的可能性也很高;(4)无Kras基因突变的肺癌、结直肠癌等肿瘤患者,经抗EGFR靶向药物治疗疗效明显,因此,通过检测Kras基因突变状态可以筛选用药人群,实现肿瘤患者的个体化治疗,延长患者生存期。
目前市面上存在几款抗癌新药如安卓健㈢,AZD6244,目前是针对RAS基因突变的治疗选择。
感兴趣的患者可以自行了解。
Kras基因突变检测已被写入最新版《NCCN结直肠癌临床实践指南》。
新指南传递给广大医生和患者两条重要的信息:一是所有转移性结直肠癌患者都应检测Kras基因状态;二是只对Kras基因野生型患者推荐接受EGFR抑制剂治疗,如西妥昔单抗和帕尼单抗(包括单药或与化疗联合)。
Kras基因突变检测是目前医生了解大肠癌患者癌基因状况最直接、最有效的方法,通过检测不仅可以深入了解癌基因的情况,更重要的是筛选出针对抗EGFR靶向药物治疗有效的结直肠癌患者,帮助临床医生选择制定对肿瘤患者最有效的治疗方法。
KRAS基因突变的检测及其临床意义

KRAS基因突变的检测及其临床意义KRAS基因突变是一种与肿瘤发生和发展密切相关的基因突变。
KRAS 基因是一种编码KRAS蛋白的基因,该蛋白在细胞信号传导通路中扮演着关键的角色,参与了细胞生长、分化和凋亡等重要生理过程。
KRAS基因突变导致KRAS蛋白的激活失控,进而引发多种恶性肿瘤的形成。
首先,KRAS基因突变检测对于肿瘤的诊断十分重要。
不同种类的肿瘤常常具有不同的突变基因谱,KRAS基因突变在一些特定类型的肿瘤中较为常见,例如肺癌和结直肠癌。
检测KRAS基因突变可以帮助医生对肿瘤的发生进行定性和定位,为肿瘤的进一步治疗提供重要依据。
其次,KRAS基因突变检测对于预测肿瘤转移倾向和预后也具有重要意义。
研究表明,KRAS基因突变与恶性肿瘤的发生和转移密切相关。
一些肿瘤患者在治疗过程中采用了靶向药物进行治疗,通过检测其KRAS基因突变状态,可以预测肿瘤对该药物的敏感性,从而指导临床用药方案的选择。
此外,KRAS基因突变还与肿瘤的预后密切相关。
一些研究发现,KRAS基因突变的患者通常具有较差的预后,而这一结论对于临床医生来说具有重要的指导意义。
最后,KRAS基因突变检测为个体化治疗提供了重要的决策依据。
随着精准医疗的发展,越来越多的药物已经或即将进入临床应用,这些药物常常是通过特定的分子靶点发挥治疗作用。
例如,EGFR靶向治疗药物对于KRAS基因突变阴性的肺癌患者来说疗效显著,而对于KRAS基因突变阳性的患者则几乎没有疗效。
因此,准确检测KRAS基因突变状态可以帮助医生制定个体化治疗方案,提高治疗的有效性和安全性。
总的来说,KRAS基因突变的检测对于肿瘤的诊断、预测转移倾向和预后以及个体化治疗具有重要临床意义。
随着基因检测技术的不断进步和应用价值的不断被发现,相信KRAS基因突变检测在临床中的应用将会越来越广泛,为肿瘤的诊断和治疗提供更准确、精确的指导。
胰腺癌肿瘤标志物的临床应用及进展-定稿

胰腺癌血清肿瘤标志物及基因类标志物的应用及进展(综述)沈宗义桐城市人民医院肝胆外科231400摘要:胰腺癌恶性程度高,进展快,预后差,已成为国内外医学界面临的一个重大治疗难题。
早期发现是改善预后的方法。
目前只有少数人可被早期诊断,得到根治性切除。
针对胰腺癌的血清肿瘤标志物及基因类标志物的研究有望成为新的筛选方法,从而早发现早,以提高治愈率。
本文就胰腺癌的血清肿瘤标志物及基因类标志物作一综述。
关键词:胰腺癌血清肿瘤标志物基因类标志物胰腺癌已经成为消化系统常见的恶性肿瘤之一,文献报道[1],其发病率不仅呈上升趋势,年平均发病率增加2%左右,而且发病率和死亡率非常接近。
胰头癌根治手术组中位生存时间为17.1个月,1年、3年和5年生存率分别为54.36%、13.47%、8.47%;胰体尾癌术后中位生存时间为7.2个月,1年、3年和5年生存率分别为37.2%、0、0。
由于其非特异性临床症状:体重减轻、食欲减退、上腹部不适等,常被病人或医生忽视而延误诊断,早期诊断极为困难。
1.血清肿瘤标志物1.1胰腺癌胚抗原(POA)和胰腺癌相关抗原(PCAA)胰腺癌胚抗原( pancreatic oncofetal antigen POA)POA是从胚胎期胰腺中提取的一种糖蛋白,1974年由Banwo首次报道。
Gelder等在胰腺癌患者血清中也提取出了这种糖蛋白,并提出POA可以作为胰腺癌较特异性的标志物。
近年来研究发现POA在胰腺癌患者中检测阳性率达87.5%,术后指标明显降低,对于诊断胰腺癌、观察胰腺癌疗效及判断预后有一定的意义[2]。
胰腺癌相关抗原(pancreas cancer-associated antigen PCAA)是由胰腺癌腹水中分离出来的一种糖蛋白。
胰腺癌、肺癌、乳腺癌都有一定的阳性率。
胰腺高分化腺癌内PCAA的阳性率高于低分化腺癌[3]。
1.2癌胚抗原(carcino-embryonic antigen CEA)CEA对胰腺癌检测的阳性率报道不一,一般在50%~70%。
粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9 CEA联合检测在胰腺癌早期诊断中的价值

粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9 CEA联合检测在胰腺癌早期诊断中的价值滕卫军;朱以军;陈燕萍;施昕;厉学民【期刊名称】《浙江临床医学》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】目的:评价粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9、CEA联合检测在胰腺癌早期诊断中的价值。
方法对2006年7月到2010年6月38例胰腺癌患者(早期8例、中晚期30例)和175例胰腺良性疾病患者的粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9、CEA的阳性率进行比较和分析。
结果胰腺癌组粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9、CEA的阳性率显著高于胰腺良性疾病组;早期胰腺癌组粪便K-ras12基因突变阳性率显著高于良性疾病组,而血清CA19-9、CEA的阳性率与良性疾病组比较无显著差异;中晚期胰腺癌组粪便K-ras12基因突变阳性率显著高于早期胰腺癌组,而血清CA19-9、CEA的阳性率与早期胰腺癌组比较无显著差异。
粪便K-ras12基因突变、血清CA19-9、CEA诊断早期胰腺癌的敏感性分别为50%、37.5%、37.5%,特异性分别为89.7%、77.1%81.1%。
用平行法联合检测粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9、CEA诊断早期胰腺癌的敏感性为87.5%、特异性74.2%;用系列法联合检测粪便K-ras基因突变和血清CA19-9、CEA诊断早期胰腺癌的敏感性为25%、特异性为94.9%。
结论粪便K-ras12基因突变和血清CA19-9、CEA的联合检测可显著提高诊断早期胰腺癌的敏感性和特异性。
【总页数】2页(P184-185)【作者】滕卫军;朱以军;陈燕萍;施昕;厉学民【作者单位】321000 浙江省金华市中心医院;321000 浙江省金华市中心医院;321000 浙江省金华市中心医院;321000 浙江省金华市中心医院;321000 浙江省金华市中心医院【正文语种】中文【相关文献】1.血清CEA、CA19-9及铁蛋白联合检测在胰腺癌诊断中的价值 [J], 何淑霞;杨娜;刘东红2.血清CEA、CA19-9及铁蛋白联合检测在胰腺癌诊断中的价值 [J], 芦翼飞3.血清CEA、CA19-9及铁蛋白联合检测在胰腺癌诊断中的价值 [J], 高迎4.ROC曲线评价血清CA19-9、CEA及粪便K-ras12基因突变在胰腺癌诊断中的价值 [J], 滕卫军;朱以军;陈燕萍;施昕;俞翁非;厉学民;许英;王群英5.血清CA19-9、CA50、CA242、CA125及CEA联合检测在Ⅰ~Ⅲ期可切除胰腺癌中的临床应用价值 [J], 诸静文;张洁;叶柳青;丁金旺;周国明;陆军;李克桑因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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【摘要】目的:探讨KRAS基因突变在胰腺疾病中的临床意义和在胰腺癌诊断中的价值。
方法:合酶链反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)方法分别检测胰腺癌、癌旁组织、手术切缘正常组织、慢性胰腺炎石蜡包埋组织的KRAS突变并进行DNA测序确认。
结果胰腺癌K RAS 12密码子突变率(79.2%)显着高于慢性胰腺炎(33.3%,P<0.01),且在切缘正常组织一癌周导管增生一癌周不典型增生一胰腺癌过程中,突变率有逐渐上升的趋势。
突变方式以12密码子GGT-GAT、GTT、CGT为主,同一例患者突变方式一致。
结论:KRAS基因突变在胰腺癌发生中起作用,但KRAS基因突变作为胰腺癌诊断的分子标志缺乏特异性。
【关键词】胰腺癌;慢性胰腺炎;KRAS基因;突变
胰腺癌临床确诊时大多已属晚期,其5年生存率仅为1%~5%。
提高其早期发现率可使更多患者获得手术切除的机会而提高其生存率。
众多研究表明,KRAS基因与胰腺癌高度相关,其第一外显子12密码子的点突变在胰腺导管腺癌组织中高达70%~100%,且是胰腺肿瘤发生的早期事件,可用于早期诊断胰腺癌。
而近来研究却表明,KRAS突变亦可见于良性胰腺疾病及正常胰腺,对它可作为胰腺癌早期诊断的分子标志提出了疑问。
本研究旨在探讨KRAS突变在胰腺疾病中的临床意义和在胰腺癌诊断中的价值。
材料和方法
1.对象选择:收集上海长海医院1996年1月至2000年2月良恶性胰腺疾病术后石蜡包埋组织标本,诊断由手术及病理证实,所有病例均有完整的手术记录资料及临床资料。
包括:胰腺导管腺癌患者的胰腺导管腺癌24例、癌旁胰腺导管增生58例、癌旁胰腺导管不典型增生19例和手术切缘正常胰腺16例;恶性胰腺黏液性囊腺瘤1例;慢性胰腺炎24例,选择胰腺导管增生组织蜡块,慢性胰腺炎患者经1~5年随访全部健在,且无一例发展为胰腺癌。
7例正常胰腺组织为非胰腺疾病患者尸检标本。
胰腺癌细胞株Patu一8988由德国Marbury市
Philips大学分子生物学和分子病理学研究所Elsasserl~t士
惠赠。
2.标本处理:每份标本一部分切成5 m薄片,HE染色光
镜下组织鉴定,另取10 m薄片3~5片(表面积约1.0 cm2)放入1.5 ml消毒塑料离心管中,经二甲苯脱蜡,乙醇漂洗,离心后干燥沉淀物。
3.DNA的提取:采用柱离心式小量组织基因组DNA抽提试剂盒(上海华舜生物工程公司),按说明书操作。
经纯度鉴定后一20℃备用。
4.半巢式聚合酶链反应(PCR):引物合成:由上海生工生物工程公司合成,其序列为R1=5 ACT GAATATA A ACTTGTGGTAGTTGGACCT 3 :R2
=5 TCAAAGAATGGTCCTGGACC 3 :R3=5
TAATATGTCGACTA A A ACAAGATTTACCTC 3 。
配对方式为R1一R2,R1.R3。
半巢式PCR需经2次PCR,1次酶切。
DNA扩增仪为Perkin-Elmer 9600型,PCR试剂盒购于Promega公司的PCR Core系统。
PCR反应总体积50 l,含4种dNTP,浓度各0.2 mmol/L,MgC12 1.5 mmol/L,PCR 缓冲液1×(不含MgC12),引物浓度各为1~mol/L,Taq酶1.25U/50 l。
每次PCR均设臵阴、阳性对照各1例,阳性对照所用模板及引物系Promega公司配给。
R1和R2为引物,PCR 参数为95℃、5 min预变性,加入Taq酶,94 12 1 min,52℃1 min,72℃I.5 min,循环25次,最后72℃5 min。
扩增片段为157 bp,酶切条件为50 l反应体系中含0.25 l BstN1(Bio-lab 公司)、0.5 l BSA、5 l缓冲液,60℃酶切2 h,煮沸灭活酶。
取2 l酶切产物用作第2次PCR模板,R1和R3为引物,PCR条件同前,惟循环次数为3O次。
扩增片段为135 bp,取8 l产物作2%琼脂糖凝胶电泳分析。
5.单链多态构象性分析(SSCP):为寻找基因变异,每一被检样本均在12%非变性聚丙烯酰胺凝胶下进行电泳,观察SSCP条带情况。
以正常人外周血白细胞DNA扩增产物为阴性对照、胰腺癌细胞株Pam-8988 DNA扩增产物为阳性对照,电泳前将PCR产物煮沸5 min热变性,立即臵冰浴,然后经4℃、35V电泳,电泳21 h左右,至二甲苯青距胶底部约0.5C1TI,结束电泳,以银染显示条带,照相分析。
对每个样本均经2~3次电泳以保证实验的准确性。
6.DNA测序:所有经PCR-SSCP筛选分析、显示条带异常的胰腺癌和慢性胰腺炎患者的PCR产物经胶回收式纯化、克
隆入pUCm-T载体中,并进行插入片段的序列分析。
测序用PE 公司测序试剂盒,在PE公司ABI PRISM 377 DNA测序仪上进行。
7.统计学分析:应用SAS统计软件,采用Y 检验、Fisher 精确检验和t检验。
结果
1.KRAS 12密码子突变检测结果:由表1可知,由切缘正常组织一癌周导管增生组织一癌周不典型增生组织一胰腺癌组织的过程中,KRAS 12密码子突变率有逐渐上升的趋势,且胰腺癌组突变率明显高于正常胰腺、慢性胰腺炎、切缘正常组织及癌周导管增生组(P<0.01)。
突变方式以12密码子GGT-GAT、GTT、CGT为主,未见13密码子突变(表2)。
2.胰腺癌组织KRAS 12密码子突变与临床病理指标的关系:由表3可知,胰腺癌组织KRAS 12密码子突变与各临床病理参数无明显相关性。
3.K.RAS 12密码子突变与慢性胰腺炎临床状况的关系:由表4可知,KRAS 12密码子突变与慢性胰腺炎各项临床参数无明显相关性。
转导了RAS基因的NIH/3T3细胞能发生转化,从而确定了其癌基因的地位。
RAS突变能导致保守区氨基酸序列改变,产生持续性刺激信号,导致细胞持续生长。
RAS为一基因家族,
文献报道胰腺癌KRAS突变率高达70%~100%,且几乎都集中于第1外显子的12密码子。
KRAS 12密码子的野生型为GGT,突变型常见为GAT、GTT、CGT,此三种类型占所有突变类型的60%~100%。
Cerny等…在亚硝胺诱发叙利亚仓鼠胰腺癌的模型中发现,在诱变剂作用下,胰腺导管腺癌发生之前存在小灶性增生、乳头状增生和原位癌的序列性导管损伤,其中均可检测到KRAS基因异常,因而认为K RAS突变是胰腺导管腺癌发生的早期事件。
因此,KRAS突变可能预示着潜在的早期胰腺癌,这也就是KRAS基因突变的早期诊断价值之所在。
而最近Rivera等在42例慢性胰腺炎患者中筛选出11例存在导管增生者为实验组,4例无导管增生者为对照组检测KRAS突变,应用显微切割法(microdissection)在组织切片上精确地切割胰腺导管上皮,经抽提DNA、PCR扩增、探针杂交、DNA直接测序,结果示实验组18%(2/11)患者存在KRAS突变,对照组均为阴性,因而得出:慢性胰腺炎有胰腺导管增生且存在KRAS突变是慢性胰腺炎向胰腺癌发展的潜在原因。
对774例慢性胰腺炎患者(1991~1999年)的回顾性分析表明,KRAS12密码子平均突变率为13%J。
而最近对2 015例慢性胰腺炎患者的流行病学研究发现,慢性胰腺炎患者发生胰腺癌的危险性较正常人群显着为高,而且胰腺癌的发生与慢性胰腺炎病程呈正相关,经10、20年的随访,分别有2%和4%的慢性胰腺炎发展为胰腺癌,从而提出,慢性胰腺炎倾向于向胰腺癌发展H J。
一个正常细胞转化为恶性表型之前必须经历多种变化,有研究发现,胰腺癌周组织发生胰腺导管增生显着高于非恶性对照组,与癌变模型极相似,提出可能由胰腺导管增生向胰腺癌发展。
Luttges等J 发现,KRAS突变阳性的胰腺导管腺癌,其癌旁组织胰腺导管增生亦存在KRAS突变。
因此,目前认为,慢性胰腺炎与胰腺导管腺癌的相关性本质上是由于慢性胰腺炎中存在胰腺导管增生,
其被认为是胰腺导管腺癌发生中的一个环节,KRAS突变是此种细胞演进过程中的分子事件。
目前KRAS突变存在在研新药安卓健,司美替尼。
本研究中胰腺癌KRAS基因突变率(79%)显着高于慢性胰腺炎(33.3%),表明以KRAS基因为分子标志诊断胰腺癌敏感性较高,但缺乏特异性。
进一步发现,在切缘正常组织一癌周导管增生组织一癌周不典型增生组织一胰腺癌组织的过程中,KRAS突变率有逐渐升高的趋势,且发现无KRAS突变的胰腺癌,其癌旁和手术切缘各种组织均无KRAS突变。
对突变者的PCR 产物测序发现,胰腺癌与慢性胰腺炎KRAS 12密码子突变方式均表现为GGpGAT、GTT、CGT,且同一例患者突变方式一致。
此虽与仓鼠胰腺癌模型中的结果相似,表明KRAS突变在胰腺癌发生中起作用,但KRAS突变与慢性胰腺炎病程、是否合并胰岛素依赖型糖尿病等各项临床指标无关,尚需长期随访慢性胰腺炎患者以明确KRAS突变是否提示潜在肿瘤发生、是否可作为胰腺癌的高危因素。
且因胰腺癌的发生、发展与其他肿瘤一样,是一个多种癌基因和(或抑癌基因的作用失衡而产生的细胞演进过程,也需探讨其他基因突变在胰腺癌发生中的作用,确定另外的分子靶,与敏感性较高的KRAS突变联合检测,才能提高诊断价值。