食品中硼酸的测定 标准文本(食品安全国家标准)

食品安全国家标准
食品中硼酸的测定
1范围
本标准规定了食品中硼酸的测定方法。

本标准适用于水产品、肉制品(如肉丸、鱼丸)、豆类、面食类、腐竹、粽子、糕点、酱油、凉粉、凉皮等食品中硼酸的测定。

第一法乙基己二醇-氯仿萃取姜黄比色法
2 原理
通过乙基己二醇-氯仿溶液对样品中的硼酸进行快速的富集、萃取，除去共存盐类的影响，利用浓硫酸与姜黄混合生成的质子化姜黄与硼酸反应生成红色产物。

溶液颜色的深浅与样品中硼酸含量成正比，通过比色可以测定样品中硼酸的含量。

在酸性条件下硼砂以硼酸形式存在，所以该方法也可以反映食品中添加硼砂的含量。

3 试剂和材料
注：所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。

3.1 试剂
3.1.1 浓硫酸（H2SO4）。

3.1.2 无水乙醇（CH3CH2OH）。

3.1.3 亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O）。

3.1.4 乙酸锌(Zn（CH3COO)2·2H2O）。

3.1.5 姜黄色素。

3.1.6 冰醋酸（CH3COOH）。

3.1.7 乙基己二醇（CH3CH2CH2CH(OH)CH(C2H5)CH2OH）。

3.1.8 氯仿（CHCl3）。

3.1.9 硼酸（H3BO3）。

3.2 试剂配制
3.2.1硫酸（1+1）：取等体积的浓硫酸和水，将浓硫酸沿烧杯壁缓慢注入水中，并用玻璃棒不断搅拌，使热量及时散失。

3.2.2 亚铁氰化钾溶液：称取106.0 g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000 ml。

3.2.3 乙酸锌溶液：称取220.0 g乙酸锌（Zn(CH3COO)2·2H2O），加30 mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000 mL。

3.2.4 姜黄-冰醋酸溶液：称取姜黄色素0.10 g溶于100 mL冰醋酸中，此溶液保存于塑料容器中。

3.2.5 乙基己二醇-氯仿溶液（EHD-CHCl3）：取2-乙基-1，3-己二醇10 mL，加氯仿（CHCl3）稀释至100 mL，此溶液保存于塑料容器中。

3.3 标准溶液配制
3.3.1 硼酸标准储备液：准确称取在硫酸干燥器中干燥5h后的硼酸0.5000g，溶于水并定容至1000 mL，保存于塑料容器中。

此硼酸标准储备液的浓度为500 μg/mL。

3.3.2 硼酸标准溶液：取硼酸标准储备液10.00 mL，加水定容至1000 mL，此液保存于塑料容器中。

此硼酸标准使用溶液的浓度为5 μg/mL。

所配置溶液于0～4°C冰箱中可储存3个月。

4 仪器和设备
注：试验中使用的容器均为塑料容器。

4.1电子天平：感量为0.01ｇ。

4.2分光光度计。

4.3高速捣碎机。

4.4 100 mL塑料容量瓶。

4.5 150 mL塑料烧杯。

4.6 25 mL、50 mL带盖塑料试管。

4.7涡流振荡器。

5 分析步骤
5.1标准曲线制备
准确吸取硼酸标准溶液0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL于25 mL塑料试管中，各加水至5 mL。

加硫酸（1+1）溶液1 mL，振荡混匀。

然后加EHD-CHCl3溶液5.00 mL，盖上盖子，旋涡振荡器震摇约2 min，静置分层，吸取下层的EHD-CHCl3溶液并通过φ7cm干燥快速滤纸过滤。

各取1.00 mL过滤液于50 mL塑料试管中，依次加入姜黄-冰醋酸溶液1.0 mL，浓硫酸0.5 mL，摇匀，静置30 min，加无水乙醇25 mL，静置10 min后，于550 nm处1cm比色皿测定吸光度。

以标准系列的硼酸含量（μg）为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

5.2 测定
5.2.1 样品处理
固体样品：称取经高速捣碎机捣碎的样品2.00 g ~10.00 g（精确至0.01 g），加40 mL~60 mL水混匀，缓慢滴加2 mL浓硫酸，超声10 min促进溶解混合。

加乙酸锌溶液5 mL，亚铁氰化钾溶液5 mL，加水定容至100 mL，过滤后作为样品溶液。

根据样品含量取1.00~3.00 mL样品溶液于25 mL塑料试管中，加水至5 mL。

加硫酸（1+1）溶液1 mL，振荡混匀。

接着加EHD-CHCl3溶液5.00 mL，盖上盖子，旋涡振荡器震摇约2 min，静置分层，吸取下层的EHD-CHCl3溶液并通过φ7cm干燥快速滤纸过滤。

过滤液作为样品测试液。

液体样品：称取样品2.00 g ~10.00 g（精确至0.01 g），加水定容至100 mL，作为样品溶液。

蛋白质或脂肪含量高的液体样品可加乙酸锌溶液5 mL，亚铁氰化钾溶液5 mL，加水定容至100 mL过滤后作为样品溶液。

根据样品含量取1.00 mL ~3.00 mL样品溶液于25 mL塑料试管中，加水至5 mL，加硫酸（1+1）溶液1 mL，振荡混匀。

接着加EHD-CHCl3溶液5.00 mL，盖上盖子，旋涡振荡器震摇约2 min，静置分层，吸取下层的EHD-CHCl3溶液并通过φ7cm干燥快速滤纸过滤。

过滤液作为样品测试液。

注：如果萃取过程出现乳化现象，可将萃取液3 000 rpm离心3 min或在测定体系中加入1 mL无水甲醇以避免乳化或沉淀现象（加水定容总体积为5 mL）。

5.2.2 样品测定
准确吸取样品测试液1.00 mL于50 mL塑料试管中，以下操作同标准曲线中显色、比色步骤（5.1）。

以测出的吸光度在标准曲线上查得试样液中的硼酸含量。

5.3 结果计算：
试样中硼酸的含量按下式（1）进行计算：
2
110001000V m V C X ⨯⨯⨯⨯=
……………………………(1) 式中： X ―样品中硼酸的含量，单位为毫克每千克（mg/kg ）；
C ―试样测定液中硼酸含量，单位为微克（μg ）；
V 1―试样定容体积，单位为毫升（mL ）；
V 2―测定用试样体积，单位为毫升（mL ）；
m ―样品量，单位为克（g ）；
1000——换算系数。

计算结果保留三位有效数字；
6 精密度
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

7 其他
本方法的检出限为2.50 mg/kg ，定量限为7.50 mg/kg 。

第二法 电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法
8 原理
实验样品经酸解消化后，将样品溶液导入电感耦合等离子体原子发射光谱仪（ICP-OES ）或电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS ）中，ICP-OES 采集谱线为249.772 nm 或249.677 nm ，ICP-MS 采集质量数为B 11，与标准系列比较定量。

9 试剂和材料
注1：除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T 6682规定的二级水。

注2：所用器皿均需以硝酸溶液（1+4）浸泡24h 以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。

9.1 试剂
9.1.1 硝酸（HNO 3）。

9.1.2 高氯酸（HClO 4）。

9.1.3 过氧化氢（H 2O 2）(30 %)。

9.2 试剂配制
9.2.1 硝酸（5％，体积比）：取5 mL 硝酸置于适量水中，再稀释至100 mL 。

9.2.2 混合酸：硝酸＋高氯酸（10＋1）。

取10份硝酸与1份高氯酸混合。

9.3 标准品
9.3.1 钇元素标准溶液（100 mg/L ），经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

9.3.2 钪元素标准溶液（100 mg/L ），经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

9.3.3硼酸标准品，纯度为99.9％或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质
9.4 标准溶液配制
9.4.1硼（B）标准储备溶液（1000 mg/L）
称取在硫酸干燥器中干燥5小时后的0.5720 g硼酸（质量分数不小于99.9%），用30 mL水溶解，转移至100 mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。

此标准溶液保存于塑料瓶中。

9.4.2 硼（B）标准工作液（10 mg/L）
准确吸取1.0 mL硼标准储备液（9.4.1）到100 mL的容量瓶中，用5％硝酸溶液稀释定容至刻度，此标准储备溶液浓度相当于每毫升10 μg硼。

所配置溶液应及时转移至塑料瓶中，于0～4℃冰箱中可储存3个月。

9.4.3系列标准溶液的配制
分别吸取硼标准工作液（9.4.2）0.0 mL、0.5 mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、20.0mL于100 mL 容量瓶中，再准确加入1.00 mL钇元素或者0.20 mL钪元素标准溶液作为内标，用5％硝酸溶液定容至刻度，容量瓶中溶液浓度相当于每毫升0.00 µg、0.05 µg、0.20 µg、0.50 µg、1.00 µg、2.00 µg 硼。

所配制溶液应及时移入塑料瓶中，于0～4°C冰箱中可储存1个月。

注1：标准溶液和标准系列也可采用重量法配制。

注2：当采用ICP-MS进行测定时，也可采用钪标准溶液进行在线内标加入。

钇元素用于ICP-OES法的内标校正，钪元素用于ICP-MS法的内标校正。

10 仪器与设备
注：试验中使用的容器均为塑料容器。

10.1电子天平：感量为0.1mg和1mg。

10.2超纯水制备系统。

10.3样品粉碎装置。

10.4微波消解系统。

10.5可调温式电热板。

10.6电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）和电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）。

11 分析步骤
11.1 样品的制备
微量元素的分析试样制备过程中应特别注意防止各种污染。

所用设备如电磨、绞肉机、匀浆机、粉碎机等须为不锈钢制品。

固体样品应采用粉碎机、匀浆机等设备进行粉碎、混匀，液体样品可均匀取样。

12 样品的消解
12.1 微波消解
准确称取制备均匀的固体样品1.0 g或液体样品2.0g（精确到0.001g）于微波消解罐中，加入4 mL浓硝酸和2 mL 30%过氧化氢。

设定合适的微波消解条件（参见附录A）进行消解。

消解完毕后，用水少量多次洗入50 mL塑料容量瓶中，准确加入0.50 mL钇元素或或0.10 mL钪元素标准溶液作。