脂肪组织固定液
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formaldehyde)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbai wrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定的时间不宜太长,以24小时以内为宜,适用于免疫组织化学染色。
几种细胞固定方法选择最佳固定液标准是:(1)最好地保持细胞和组织的形态结构;(2)最大限度地保存抗原的免疫活性。
固定剂 (2)
1.甲醛:非沉淀,渗透强,固定均匀组织收缩小。
固高尔基线粒体,糖。
含粘液时间长。
去除甲醛色素;Schridde,Verocay.2.重铬酸钾:有毒橘红色,固高尔基线粒体穿透快,固定的组织几乎完全不收缩,乙醇脱水后明显收缩,流水12-24h。
常用于混合固定液:Zenker,Helly,Maximov,Regaud.3.苦味酸:黄色,易燃易爆,穿透慢,组织收缩明显,无硬化,对脂肪和类脂无作用,可软化火棉胶,可使皮肤软化,固定时间<24h,乙醇中加碳酸锂水或浓氨水去苦味酸产生的黄色。
4.升汞:穿透低,固蛋白质,临用加冰醋酸,用0.5%碘酒去汞,0.5%硫代硫酸钠脱碘。
5.醋酸:刺激气味无色液体,沉淀核蛋白,保存染色体6.铬酸:强氧化剂,固定的组织避光。
7.锇酸:强氧化剂,剧毒,电镜必须固定剂。
线粒体内质网固定,后流水洗12-24h8.丙酮:易挥发易燃,常用于酶的固定9.三氯醋酸:无色易潮解,易溶于醇和醚,良好的脱钙剂。
10.乙醇:固定兼脱水作用。
是还原剂,85-95%用于糖原,肝组织,阿米巴原虫尤文瘤染色。
渗透力差,组织收缩,易挥发和吸收水分。
11.B-5:醋酸钠升汞甲醛。
固定淋巴组织。
12.Bouin:外科标本良好固定液,结缔组织,对脂肪好,含脂肪的淋巴结核脂肪瘤,三色染色最好,胞核鲜明,胞质差,24h,有毒,乙醇洗,苦味酸:甲醛:冰醋酸15:5:113.Carnoy:染色体,DNA,RNA好,糖原尼氏体,糖原蓄积病,速度快,<4h,冰醋酸氯仿无水乙醇。
14.Muller:缓慢,用于媒染和硬化神经组织,固定时间可以很长,过程需常更换液体,重铬,硫酸钠,蒸馏水。
15.Orth:胚胎,神经脂肪组织,临时配制,暗处固定,24h,固定液黑色不能再用。
水洗12-24h,重铬,硫酸钠,蒸馏水,甲醛用时加16.PFG:多肽类抗原,免疫电镜研究,对细胞抗原性结构保存好,对苯醌,多聚甲醛,戊二醛二甲胂酸钠缓冲液17.PLP,PLPD:过碘酸钠,富含糖类固定,6-8h,过碘酸盐,赖氨酸,多聚甲醛,磷酸缓冲液,PLPD配方PLP液,重铬酸钾,4°C固定36-54h18.Rossman:糖原固定12-24h95%乙醇洗,无水乙醇,苦味酸饱和液,甲醛19.Zenker:形态学常用固定,胞核胞质染较清晰,常三色染,免疫球蛋白染最好,横纹肌肉瘤恶性畸胎瘤,病毒包涵体尼氏小体,对含血量多的脾脏肺梗不合适,12-36h,脱汞。
[精华]植物组织各类固定液及优弊病
动物组织各种固定液及优缺点编号类别名字配方优缺点或备注甲醛:从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,临床活检不用.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
1 10%缓冲福尔马林固定液甲醛100ml蒸馏水900mlNaH2PO44gNa2HPO4 6.5g该固定液是当今流行的固定液,因它对组织固定较好,损伤较少,因对其后的各方面研究都较好,尤其是对免疫组化的染色.2 10%福尔马林固定液甲醛100 ml自来水900ml 这是一种最简单的固定液,适合于边远地区携带的固定液,但由于它的单一性,因此,只要有条件的单位都不要求使用这种固定液。
3 10%福尔马林盐固定液甲醛100ml自来水900mlNacl 9克先将Nacl溶于水,再加入甲醛。
这也是一种较为简单的固定液,但由于加入Nacl,它是一种重金属盐物质,加入了它可促进和改善染色,增加染色的强度4 Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75ml甲醛 2 ml冰醋酸 5 ml 该固定液中的冰醋酸,对胶原纤维等组织有膨胀作用。
而甲醛对组织有收缩作用。
两种试剂的混合使用,用以抵消彼此间的副作用。
使组织固定达到优良的固定水平5 醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml 先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水,后加入甲醛。
固定液
1.经过固定的组织可保持在10%福尔马林或70%乙醇中。
2.染色前脱掉组织中的苦味酸①自来水冲洗②50%乙醇③或70%乙醇饱和碳酸锂
乙醇BOUIN’S液(DUBOSCQ-BRAZIL FLUID)
用途:用于固定肾活检,组织学制备固定液。
试剂:
乙醇Bouin’s贮存液:
80%乙醇750.0ml
甲醛300.0ml
步骤:
1.活检标本要立即放入Hollande’s固定剂中,标本容器上注明时间。
2.标本完成固定后保持在70%乙醇中。
3.不能让Hollande’s液固定的标本与磷酸缓冲福尔马林接触,否则会出现蓝色沉淀。
ORTH’S液
用途:用于证实肾上腺胞浆中嗜络微粒,这种证明可能对嗜络细胞瘤的诊断很重要。不是一种好的多用途的固定剂。
苦味酸5.0g
充分混合,液体稳定性2年,标明配制日期。
工作液:
贮存液70.0ml14.0ml
醋酸5.0ml10.0ml
使用前加醋酸。
固定时间:1~4小时。
步骤:
1.把新鲜组织标本放进乙醇Bouin’s工作液中。
2.充分固定后把组织移到70%的乙醇中。
HOLLANDE’S固定液
用途:作为胃肠和前列腺活检基本固定剂,这种固定剂让H.E染色更清晰,它“软化”组织避免切片脆裂。苦味酸会溶解掉红细胞。
ZENKER’S液
用途:Zenker’s液是一种核固定剂。该液是细胞学及病理学常用的固定剂,对细胞核固定最好,最适合于造血和网状内皮组织的固定。也常作为三色染色的组织固定剂,在三色染色中还作为媒染剂使用。但对于含血量较多的组织标本尽量不要选Zenker’s液固定。
试剂:
Zenker’s贮备液:
脂肪组织冰冻切片步骤
脂肪组织冰冻切片步骤
脂肪组织冰冻切片的步骤如下:
1. 取材:在合适的环境下获取脂肪组织,一般大小为1.5×1.5×0.5cm,注意应尽量剔除脂肪组织、钙化、骨质等影响切片质量的成分。
2. 速冻:使用液氮或干冰-丙酮(乙醇)法将组织速冻。
液氮法是将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内,然后将其放入盛有液氮的小杯内,注意小盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,10~20s组织即迅速冰结成块。
干冰-丙酮(乙醇)法是将150~200ml丙酮(乙醇)装入小保温杯内,逐渐加入干冰,直至饱和呈黏稠状,再加干冰不再冒泡时,温度可达-70℃,然后使用异戊烧进行速冻。
3. 切片:将速冻后的组织块固定在切片机上,调整切片的厚度为4~6μm,然后进行切片。
4. 贴片:将切好的组织切片立即放入冰冻固定液中固定10~20秒,然后取出贴片。
5. 染色:使用苏木精染液进行染色,室温下染色1分钟,如果室温较低,则需要适当延长染色时间。
6. 水洗:染色后进行水洗,洗去多余的染液。
7. 封片:将切片晾干后,使用合适的封片剂进行封片。
注意,在整个过程中,都需要保持组织的冷冻状态,以防止组织内的冰晶形成和细胞结构的破坏。
同时,切片和染色的过程中,也需
要注意避免切片过厚或过薄,以及染色过深或过浅,以保证切片的质量。
以上信息仅供参考,具体操作可能会因实际情况和设备的不同而有所差异。
常用固定液的性质、用途
常用固定液的性质、用途和配置1.单一固定液的性质和用途(1)乙醇(C2H5OH)(ethylalcohol):又名酒精,可沉淀白蛋白、球蛋白、核蛋白,后者易溶于水,所以经酒精固定的标本对细胞核染色不良。
酒精可溶解脂肪、类脂体,所以不能用酒精固定脂肪。
酒精可沉淀肝糖,但仍可溶解于水,因此肝糖经酒精固定后不能在低于70%酒精中保存。
单独固定使用酒精的浓度应为95—100%。
无水酒精渗透力较差,并且能使组织收缩,在与醋酸、氯仿混合使用时,可增强它们的穿透力。
酒精除固定作用外,还具有硬化和脱水的作用,固定后的组织可保存于70%酒精中,所以酒精在制片过程中用途很大。
无水乙醇容易挥发,又容易吸收空气中的水分,所以瓶盖必须塞紧,为了吸去其中水分,最好在无水乙醇瓶内放入少量无水硫酸铜粉末。
酒精是一种还原剂,不能与重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合使用。
(2)甲醛(HCHO)(formeldehyde):是一种气体,溶于水成为甲醛水溶液或称福尔马林,一般使用浓度为10%福尔马林(formalin)液,其配法是取市售的甲醛液10ml 与90ml 蒸馏水混合即可,实际上其含量只有4%甲醛。
这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
甲醛不能沉淀白蛋白及核蛋白,但能与蛋白质化合。
它是一种应用广泛,使用简单的固定液,具有穿透力强、固定均匀、组织收缩小、硬度适当,适用于一般器官组织的固定及保存。
尤其对脂肪、神经组织固定效果较好。
更适于病理组织的制片及大体积标本的保存,一般组织需固定24 小时以上,固定后的组织可移入50%酒精中逐步脱水。
甲醛是一种强还原剂,不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合,因极易被氧化为甲酸。
在配混合固定液时,如海利氏液等需临用前再加入,24 小时后失效。
甲醛由于长期贮存,特别是低温气候,容易产生多聚甲醛,即溶液中的白色沉淀,在高温下又成为甲醛。
不纯的甲醛易产生甲酸,使溶液变为酸性,影响核的染色。
所以在备用的福尔马林中加入小量的醋酸钙、碳酸镁或大理石作为中和剂。
组织固定原理
动物组织的固定原理及固定液在组织病理学中,不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的保存,都必须进行及时的适当的和有效的固定。
组织只有经过固定,才能完成随后的一系列的制作,直至切片的最后完成。
(一)、固定的作用组织经一系列的处理后,就必须进行固定,当然有的组织是先固定,再进行处理,然后再固定。
固定的作用,从组织学的角度其简单的定义是,保持细胞、组织的固有形态和结构,使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构,而从免疫组化技术的角度,固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固,尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应;防止细胞的自溶,以免使抗原扩散至组织间质;以保持组织的固有形态和结构;更重要的是保持组织或细胞的抗原性,不但要使抗原不导致失活,而且不使抗原发生弥散的现象,才能在免疫组化染色时,不产生过深的背景,影响对阳性物的判断。
(二)固定的目的1、能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。
细菌无处不存在,它们随时都可污染腐蚀未经处理的组织。
固定液可以固定任何蛋白质,凡有生命的东西,都由蛋白质组成,蛋白质被固定,生命就停止,细菌也就失去了活力。
另者,在日常生活中,人们常可碰到这样的问题,一块肉不经处理放了几天后就会变质,这是为什么呢?除了细菌参与外,其本身也是很重要的。
因为组织离体后,供应这此组织的血液随之消失,细胞缺氧,细胞内溶酶体膜的结构受到破坏,破坏后释放出溶酶体酶,日常生活中常碰到的肉变质,就是细菌污染加组织自溶的结果。
2、保存细胞固有的物质,能凝固或沉淀细胞内或组织液,糖元等,使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样。
细胞的固有物质,即细胞核、内质网、线粒体、高尔基器、溶酶体、过氧体,细胞骨架,组织液,抗原、糖元等。
这些物质,如果不将其及时固定,是很容易丧失的,尤其是溶酶体,很容易受到破坏,因此应特别小心。
3、使组织硬化,便于切块。
刚离体的组织,除了胃组织以外,都是柔软的组织,尤其是胃肠道的组织,如果在没有固定时就取材,效果就很差,不是取材不规整,就是厚薄不均,粘膜和肌层很容易分开,因此,要取得规整标致的材料,就必须将组织彻底固定,再行取材。
病理检验技术练习题库(附答案)
病理检验技术练习题库(附答案)一、单选题(共118题,每题1分,共118分)1.以下说法错误的是A、修复的细胞需与癌细胞鉴别B、修复的细胞核可见多个大的、不规则的核仁C、修复的细胞可见细胞核异常,体积大D、修复的新上皮细胞的胞质常呈嗜酸性E、修复的细胞核可见异常有死分裂正确答案:D2.石蜡切片时展片温度以( )为宜A、42-48℃B、大于75℃C、70℃-75℃D、56-58℃E、60-69℃正确答案:A3.一般情况下,医院病理科在收到送检申请单和标本后()个工作日内应签发病理学诊断报告书。
A、2-3B、5-7C、7-8D、8-10E、3-5正确答案:E4.关于分泌性腺上皮细胞,以下说法错误的是A、在细胞学涂片上常呈立方形或柱状B、分泌性腺上皮分布于消化道和相关腺体、男性和女性生殖道C、细胞质常呈嗜酸性D、核多位于细胞底部E、胞质呈透明状或浑浊,常含黏液正确答案:C5.Mallory磷钨酸苏木精(PTAH)染色法通常用于显示()A、横纹肌纤维B、平滑肌纤维C、网状纤维D、弹力纤维E、神经纤维正确答案:A6.Carnoy液除了常用于糖原和尼氏体的固定外,还有下面哪项特点()A、该固定方法适用于标本的长期保存B、对于染色体固定佳,显示DNA和RNA效果好C、用于保存脂类D、该固定液固定速度慢而温和E、该固定渗透力差正确答案:B7.住院患者查询病理学检查资料的期限是()A、送检后5年B、送检后10年C、送检后30年D、送检后25年E、送检后20年正确答案:C8.以下哪些疾病是可以通过细胞学作出诊断①各种白血病②乳腺癌③食管癌④甲状腺癌⑤前列腺癌A、①②④B、①②⑤C、①②③D、①③④E、①④⑤正确答案:C9.尸检准备室的基本设施应包括A、尸检专用器械和柜具B、参与尸检人员使用的隔离衣物和消毒器具C、办公设施D、消毒设施E、以上都是正确答案:E10.关于病理解剖室和器械的清洁、消毒,下面不正确的是()A、器械用后清水冲洗干净,浸泡在1:1000苯扎溴铵(新洁尔灭)内含0.5%亚硝酸钠溶液中4~6小时B、器械用后清水冲洗干净,也可以浸泡在10%的甲醛水溶液中消毒2~4小时C、病理解剖室只需定期用水冲洗地面和靠近地面的墙壁D、打开紫外线灯进行空气消毒,室温不低于20℃,相对湿度不超过50%,一般照射20~30分钟E、打开紫外线灯进行空气消毒,剂量不应低于900μW▪s/cm2正确答案:C11.关于急性炎症,以下说法错误的是A、起病急,病程短B、局部红肿热痛C、细胞学涂片上可见淋巴细胞多D、全身症状明显E、细胞学涂片上可见坏死物质正确答案:C12.计算机病理档案管理系统应具有的功能包括()A、信息输入B、分类统计C、按需检索D、资料备份及输出E、以上都是正确答案:E13.以下说法错误的是A、上皮细胞较少发生凋亡B、凋亡的染色质致密之后碎裂降解呈小颗粒状称为凋亡小体C、凋亡的细胞质无变化D、凋亡于坏死既有区别又有联系E、细胞膜多破裂正确答案:C14.对于重铬酸钾固定剂,对其描述下面错误的是()A、重铬酸钾固定的组织,酸性染料着色良好B、用于固定高尔基体和线粒体效果较好C、重铬酸钾为橙红色晶体,有毒D、组织穿透速度快E、重铬酸钾固定的组织明显收缩正确答案:E15.以下说法错误的是A、病理检验技术人员是基础研究或临床病理学诊断的得力助手B、病理检验技术人员是医疗、教学和科研机构中不可缺少的技术力量C、病理检验技术人员是医院病理科辅助管理者D、病理诊断的准确性和及时性与病理检验技术人员的工作质量和技术水平有关E、没有高质量的病理切片就难以做出正确的病理诊断正确答案:C16.石蜡包埋时应注意A、有无特殊包埋面B、石蜡中有杂物应过滤后使用C、包埋温度不宜过高D、A、B、C都对E、A、B、C都不对正确答案:D17.以下属于细胞病理学诊断的优点的是①易于学习掌握②患者易于接受③利用医院现有的设备可以获得较深处标本④局部无手术切口有利于放射等治疗进行⑤能充分显示组织学关系A、①③④⑤B、①②③④C、①②③④⑤D、②③④⑤E、①②④⑤正确答案:B18.病理检验室的面积要求一般要达到()m2。
脂肪组织固定液
Leagene 。
com 北京雷根生物技术有限公司
脂肪组织固定液
简介:
脂肪组织固定液由Bouin's 固定液和乙醇组成,实际上其成分为PA 、甲醛、乙酸、乙醇等。
PA 可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化, 其与甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,是一种良好的脂肪瘤和脂肪肉瘤的固定液。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般脂肪瘤和脂肪肉瘤需要固定48h 。
如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超
过36h 。
注意事项:
1、 脂肪组织固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作, 避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 6个月有效。
编号 名称 DF0190 Storage 脂肪组织固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。
病理检验技术复习题库含答案
病理检验技术复习题库含答案1、下列不是穿刺检查的并发症A、出血或血肿B、继发感染C、虚脱或晕厥D、普鲁卡因过敏E、穿刺部位疼痛答案:E2、对组织的固定过程,下面的描述不正确的是()A、组织取下后尽快冲洗干净放入适当的固定液中B、组织取下后尽快放入适当的固定液中C、固定时应注意组织块的大小,组织块切取适当D、需要做酶组织化学的组织固定应置于冰箱低温固定E、大多数组织固定可在温室,在低温固定时,固定时间应相应延长答案:A3、()分类法是较为满意的分级诊断方法,宜于推广使用A、四级级和二级B、二级和三级C、三级和四级D、四级和五级E、三级和五级答案:C4、以下说法错误的是A、患者查询病理学检查资料的期限是门诊患者为送检后15年B、患者查询病理学检查资料的期限是住院患者为送检后20年C、对无保留价值的大体标本一般在发出报告1个月后可弃去D、普通尸检标本应在发出报告3个月后再处理剩余组织E、有保存价值的典型病变标本应妥善保存,可以制成陈列标本答案:B5、以下说法错误的是A、细胞学是一门研究细胞结构和功能的科学B、胞病理学是对有症状或特征患者进行癌前病变的筛检C、细胞病理学是通过检查细胞的形态学特点进行健康和疾病的筛检、诊断和研究D、根据标本采集方法的不同,细胞学可分为脱落细胞学和细针吸取细胞学两部分E、细胞病理学检查首选的方法仍然是光学显微镜答案:B6、下列染色法特别适用于血细胞涂片染色的是A、苏木精-伊红染色B、瑞氏染色C、巴氏染色D、苏丹III染色E、迈-格-吉MGG染色答案:B7、以下属于细胞病理学诊断的优点的是A、穿刺检查简单易行B、诊断周期长C、细胞学检查可完全代替组织病理学活检D、穿刺在一定程度上为一抽样检查E、穿刺检查不会导致肿瘤播散答案:A8、下列关于糖原染色法的应用,错误的是()A、糖尿病器官组织细胞内的糖原颗粒沉着B、早期心肌梗塞区糖原的减少C、鉴别细胞内的空泡变性D、肝细胞癌组织中糖原的沉积E、动脉粥样硬化粥样斑块内糖原的沉积答案:E9、抗酸杆菌染色最基本的染料是()A、酸性复红B、亚甲蓝C、中性红D、结晶紫E、碱性复红答案:E10、组织化学染色中PAS染色主要阳性产物是:A、多糖类物质B、酶C、抗原D、DNAE、RNA答案:A11、以下属于细胞病理学检查的禁忌症的是①肿块直径在0.5cm以下②肿块直径在1.0cm以下③肿块部位过浅④患者严重出血性疾病病史⑤患者全身衰竭,不能耐受检查A、③④⑤B、①④⑤C、①②⑤D、①③⑤E、②④⑤答案:B12、一般细胞学标本在采集后必须()小时内送检A、2-4B、1-2C、2-3D、1-3E、3-4答案:B13、进行活检和细胞学检查的污染区是指()A、收发室检材的接受、登记等B、巨检和取材室C、标本放置室D、细胞学穿刺取材E、以上都是答案:E14、可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织的固定液是()A、Bouin液B、Carnoy液C、Orth液D、Müller液E、Rossman液答案:C15、以下说法错误的是A、凋亡的染色质致密之后碎裂降解呈小颗粒状称为凋亡小体B、细胞膜多破裂C、凋亡的细胞质无变化D、上皮细胞较少发生凋亡E、凋亡于坏死既有区别又有联系答案:C16、下列哪项是假阳性的表现:•A、取材没有取到瘤细胞B、镜检时漏检C、将瘤细胞当作炎症改变D、把退变的细胞当作肿瘤细胞E、以上都不是答案:D17、核仁组成区相关嗜银蛋白的显色技术所用试剂为:A、Shiff试剂B、Masson 试剂C、AgNO3试剂D、DAB试剂E、AgNOR试剂答案:C18、以下说法错误的是A、修复的新上皮细胞的胞质常呈嗜酸性B、修复的细胞可见细胞核异常,体积大C、修复的细胞核可见多个大的、不规则的核仁D、修复的细胞核可见异常有死分裂E、修复的细胞需与癌细胞鉴别答案:A19、以下属于病理技术员的工作职责的是①负责病理标本的取材②负责病理标本和病理诊断报告的收发③病理组织切片的制作④实验室的管理⑤做出病理诊断和报告A、①②③B、②③④C、③④⑤D、①③⑤E、①②⑤20、以下说法错误的是A、在细胞学涂片上常见红细胞、白细胞和血小板B、保存良好的红细胞提示新鲜出血C、出现中性粒细胞多为炎症D、嗜酸性粒细胞常见于过敏性疾病E、保存良好的红细胞提示生理性出血、病理性或医源性答案:A21、以下说法错误的是A、炎症是机体对致病因素积极防御性反应B、炎症时最常见最重要的病理变化C、中性粒细胞出现于炎症早期D、嗜碱性粒细胞是慢性炎症的主要细胞成分E、中性粒细胞是化脓性炎症的主要成分答案:D22、用于细针穿刺细胞学的针头内径A、0.1-0.3mmB、0.3-0.5mmC、0.5-0.7mmD、0.6-0.9mmE、1.0mm答案:C23、下列涂片涂好后应立即固定的是( )A、尿液B、宫颈涂片C、胸腔积液D、腹水E、清水样乳头溢液答案:B24、远程病理学的应用范围包括()A、远程病理质量评价B、远程诊断C、远程教育D、病理图像数据库E、以上都是25、对于铬酸固定液的描述错误的是()A、属于强氧化剂,不能与乙醇、甲醛等混合B、能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好C、对脂肪有良好的固定作用D、对组织穿透能力弱,一般组织需固定12~24小时E、经其固定的组织必须彻底流水冲洗24小时以上的时间答案:C26、关于包埋,以下说法错误的是A、用于包埋的石蜡应在温箱内多次熔化,充分沉淀后使用B、蜡温以高出石蜡熔点3℃-5℃为宜C、包埋一般使用56℃石蜡D、夏天用较硬石蜡包埋E、冬天用较软石蜡包埋答案:B27、细胞和组织化学方法的分类不包括:A、化学方法B、物理学方法C、显微烧炭法D、分子生物学方法E、以上都是答案:D28、对于组织固定所起的作用不正确的是()A、保持细胞于生活时的形态相似,防止自溶与腐败B、组织细胞内的物质经固定后对染料产生相同的亲和力,经染色后容易区别C、组织细胞内的物质经固定后对染料产生不同的亲和力,经染色后容易区别D、经过固定使细胞内的一些蛋白等凝固,使其定位于细胞内的原有部位E、组织固定后可产生不同的折光率答案:B29、以下说法错误的是A、根据细胞学特点将细胞分为上皮源性细胞和非上皮源性细胞B、在组织学上,细胞呈侧面观C、在细胞学上细胞呈正面观D、上皮细胞分为鳞状上皮、分泌性腺上皮、纤毛上皮和间皮E、多数鳞状上皮细胞呈扁平、多角形或柱状答案:E30、下列物质不能在蓝化作用中使用的是()A、弱碱性水B、弱酸性水C、自来水D、稀氨水E、温水答案:B31、尸体剖检时,剪开心包腔的正确方法是()A、在心包腔前面自基底部向下“人”字形剪开壁层心包,暴露心脏B、在心包腔前面自基底部向下“人”字形剪开脏层心包,暴露心脏C、在心包腔后面自基底部向下“人”字形剪开壁层心包,暴露心脏D、在心包腔后面自基底部向下“人”字形剪开脏层心包,暴露心脏E、自心包腔基底部环形剪开壁层心包,暴露心脏答案:A32、关于申请单和标本,以下说法错误的是A、标本严重自溶、腐败等不予接受B、标本过小不予接收C、申请单所写内容与送检标本不符可不予接收D、申请单重要内容漏填误填不予接收E、不予接收的申请单和标本可先予存放答案:E33、抽出的积液必须立即送检,一般不得超过:A、0.5~1hB、6hC、12hD、24hE、36h答案:A34、中性甲醛固定液的使用浓度:A、40%B、20%C、10%D、4%E、30%答案:D35、固定的目的下列哪项正确:A、增加组织硬度B、防止细胞自溶C、凝固细胞内物质D、所有选项都对E、所有选项都不对答案:D36、PAS染色的结果是()A、糖原呈紫色,细胞核呈蓝色B、糖原呈黄色,细胞核呈蓝色C、糖原呈紫红色,细胞核呈黑色D、糖原呈红色,细胞核呈蓝色E、糖原呈棕黄色,细胞核呈紫色答案:D37、以下说法错误的是A、反应性核变化多发生于炎症过程B、也可见于癌组织周围C、核高度增大D、核膜轻度不规则E、染色质颗粒增加答案:C38、不属于蓝化液的材料:A、稀氨水B、自来水C、温水D、蒸馏水E、以上都是答案:D39、以下是恶性细胞的特征的是①细胞大小和形态在生理性变化范围内②核质比增大③核大小不一④核仁大,形态不规则⑤多核是恶性细胞的特征A、①②③B、②③④C、②④⑤D、②③⑤E、③④⑤答案:B40、关于病理大体标本的制作,以下说法错误的是A、病理大体标本的制作是病理科的一项重要的基本建设B、病理大体标本是教学、医疗、科研工作中的重要档案材料之一C、收集的病理大体标本越新鲜越好D、病理大体标本只能从尸体剖验中收集E、病理大体标本的制作可保留那些过去常见,但现在已经少见的病例实物资料答案:D41、做病理解剖时的个人必要防护不包括()A、解剖时戴医用乳胶手套B、解剖时戴口罩、帽子,穿上手术衣C、手术衣外面戴上塑料围裙D、所用物品必须经过严格消毒处理后再使用E、解剖人员穿戴完毕,解剖前必须经过无菌室在无菌风下吹20~30分钟答案:E42、对于组织固定后的脱水,下面的描述不正确的是()A、脱水是借某些溶煤置换组织内水分的过程B、脱水剂必须能与水以任何比例混合C、根据固定剂的要求选择脱水剂D、根据被固定组织的要求选择脱水剂E、乙醇是最常用的脱水剂答案:D43、常用于阴道细胞学检查测定激素水平的染色方法是A、HE染色B、巴氏染色C、瑞氏染色D、瑞氏吉姆萨染色E、阿新兰染色答案:B44、宫颈癌筛查取材部位是A、阴道口B、宫颈阴道穹窿C、宫颈外口鳞状上皮与柱状上皮交界处D、宫颈内口E、子宫内膜答案:C45、以下不属于肿瘤坏死型的特点的是A、病程短,进展快B、肿块进行性增大C、肿块质硬,粘连明显D、吸物外观呈胶冻状脓血E、细胞学特点可见量脓细胞答案:E46、PFG固定液多用于()A、脂肪染色研究B、免疫电镜研究,因适用于多种肽类抗原的固定C、用于病毒包涵体的研究D、多用于含血量较多的标本E、对尼氏体的研究答案:B47、计算机病案管理系统离不开疾病编码,应使用的编码方式是()A、我国历史最悠久的医院的编码B、我们自己设计的编码C、计算机自动编码D、国际疾病肿瘤编码ICD9E、WHO编码答案:D48、以下属于异物巨细胞的特点的是①核型圆形、椭圆形②核排列呈花环状或马蹄铁状③核染色质浓集粗糙,粗颗粒状④核膜较厚清晰⑤胞浆着色深不均匀,有空泡和异物A、①②③④B、①②③⑤C、①②④⑤D、①③④⑤E、②③④⑤答案:D49、配制中性缓冲甲醛液最好用:•A、蒸馏水B、自来水C、磷酸盐D、醋酸E、丙酮答案:A50、病理解剖的意义下面描述不正确的是()A、病理解剖技术是病理学的基础之一B、大量病理资料的积累促进了医学的发展和进步C、发现临床诊断和治疗上存在的问题D、分子生物学技术的迅猛发展可代替传统的病理解剖技术E、可以通过临床病理讨论会的形式,实现病理和临床的交流和统一答案:D51、以下说法正确的是①癌细胞与相同起源的正常细胞大小不同②癌细胞体积大者超过多核巨细胞,小者极小③在一个癌细胞群体中大小不一很常见④在空气干燥固定涂片中,癌细胞大小不一不明显⑤在缺乏细胞核异常的情况下仅凭细胞大小就可诊断癌A、①③④B、①③⑤C、①④⑤D、①②⑤E、①②③答案:E52、下列不属于常规石蜡切片和HE染色的质量标准规定的是()A、形状规则,切片完整B、薄厚均匀,厚度4~6μmC、无褶无刀痕D、染色核质分明,红蓝适度E、透明洁净,封裱美观答案:A53、大体标本的取材要求,以下说法哪项错误A、标本的切面要平整B、要保持器官的完整性C、要突出显示病变的特征D、切去组织块应以不影响大体标本的观察为原则E、实质性器官固定前沿器官短轴切成两半答案:E54、下面的成分不属于组织处理和染色时透明剂的是()A、二甲苯和氯仿B、苦味酸和异丙醇C、松油醇D、香柏油和丁香油E、水杨酸甲酯和苯胺油答案:B55、关于苦味酸固定液的描述错误的是()A、能沉淀一切蛋白质B、穿透慢,组织收缩明显C、对脂肪和类脂无固定作用D、不能软化火棉胶E、固定组织时间不宜超过24小时答案:D56、以下说法正确的是①“床边”细胞学的广泛应用是细胞学发展成熟的标志之一②“床边”细胞学可以快速诊断③“床边”细胞学一般应用于甲状腺疾病、颅脑肿瘤④“床边”细胞学检查如果是阴性结果则对临床鉴别诊断无意义⑤“床边”细胞学结论应力求明确A、①④⑤B、②④⑤C、①②③D、①②⑤E、③④⑤答案:D57、用B-5固定的组织,在染色前应该进行的处理是()A、脱钙处理B、脱汞处理C、水化处理D、酸化处理E、脱脂处理答案:B58、可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织固定()A、B-5固定液B、Bouin固定液C、Rossman液D、Müller液E、Orth液答案:E59、对组织处理过程中,对二甲苯的描述不正确的是()A、二甲苯是常用的常规透明剂B、用二甲苯进行组织透明时间越长效果越好C、对组织的收缩性强D、容易使组织变硬变脆E、也常用于切片后的染色透明答案:B60、申请借用切片的医患人员,必须遵守的规定是()A、出示本人身份证等有效证件并由病理科保留其复印件B、填写借片申请单并签名C、支付规定的借片押金D、应按照医院制定的有关规定办理手续E、以上均是答案:E61、Bouin液A、多用于固定淋巴组织B、多用于硬化神经组织的固定C、适用于多种肽类抗氧的固定,多用于免疫电镜研究D、对糖原固定最好E、适用于含脂肪的淋巴结、乳腺组织和脂肪瘤的固定答案:E62、以下哪项为相对危险区()A、易燃易爆物品储藏室B、巨检和取材室C、标本放置室D、冷冻切片室E、常规制片室切片、染色、封片答案:A63、以下属于异物巨细胞的特点的是①核型多边形、棱形②核排列不规则,分布在细胞中央③核染色质疏松细致细颗粒状④核膜较厚清晰⑤胞浆着色深不均匀,有空泡和异物A、①②③B、②③⑤C、②④⑤D、①④⑤E、③④⑤答案:C64、单纯疱疹病毒感染不会出现A、胞质增多B、早期毛玻璃样核C、末期出现核内包涵体D、早期多核、核增大E、胞质含小卫星状包涵体答案:E65、Holmes神经纤维染色时,神经纤维呈现()A、黄色B、红色C、淡棕色D、紫色E、黑色答案:E66、以下说法正确的是①“床边”细胞学是指在重危病人床边或手术台上,获取细胞学标本进行快速诊断②“床边”细胞学可以明确诊断、决定治疗方案、手术方式及判断预后③“床边”细胞学具有简便准确的特点所以可以由初学者进行检查④“床边”细胞学的诊断时间最好不超过24小时⑤“床边”细胞学的操作应尽可能避免大的损伤A、①②③④B、①②④⑤C、①②⑤D、①④⑤E、③④⑤答案:C67、有关常规细胞培养箱气体比例的描述,下列正确的是A、1%CO2,99%空气的CO2培养箱B、2%CO2,98%空气的CO2培养箱C、3%CO2,97%空气的CO2培养箱D、4%CO2,96%空气的CO2培养箱E、5%CO2,95%空气的CO2培养箱答案:E68、进行活检和细胞学检查的相对清洁区不包括()A、常规制片预处理室B、常规制片室C、特殊染色和免疫组化室D、大体标本制作和陈列室E、组织病理学诊断室答案:E69、可不引起组织收缩和硬化,但其价格较高的脱水剂是()A、还氧己环B、环己酮C、异丙醇D、正丁醇E、乙醇答案:A70、以下哪些是细胞学诊断有待于进一步探讨的疾病①分化良好的恶性淋巴瘤②分化良好的甲状腺癌③纵膈肿瘤④宫颈癌⑤纤维瘤A、①④⑤B、①③④C、①②③D、①②⑤E、①③⑤答案:C71、以下说法错误的是A、黏附性差是癌细胞的主要形态学特征之一B、在细针吸取细胞学涂片上癌细胞多单个散在或疏松聚集C、分化差的恶性细胞比分化好的恶性细胞黏附性好D、恶性淋巴瘤倾向于单个散在E、肉瘤细胞倾向于单个散在答案:C72、下列关于迈-格-吉(MGG)染色法的描述,不正确的是( )A、染色方法简单、省事B、胞质、胞核染色效果好C、所染细胞体积比HE染色的细胞大D、不能用于鉴别淋巴瘤E、可保存十多年而不褪色答案:D73、B-5固定液A、多用于固定淋巴组织B、多用于硬化神经组织的固定C、适用于多种肽类抗氧的固定,多用于免疫电镜研究D、对糖原固定最好E、适用于含脂肪的淋巴结、乳腺组织和脂肪瘤的固定答案:A74、病理检验室的面积要求一般要达到()m2。
病理检验技术模拟考试题与参考答案
病理检验技术模拟考试题与参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.关于病理解剖室和器械的清洁、消毒,下面不正确的是A、病理解剖室只需定期用水冲洗地面和靠近地面的墙壁B、打开紫外线灯进行空气消毒,剂量不应低于9000uW.s/cm2C、打开紫外线灯进行空气消毒,室温不低于200℃,相对湿度不超过50%,一般照射20~30 分钟D、器械用后清水冲洗干净,浸泡在1:1000苯扎溴铵(新洁尔灭)内含0.5%亚硝酸钠溶液中4~6小时E、器械用后清水冲洗干净,也可以浸泡在10%的甲醛水溶液中消毒2~4小时正确答案:A答案解析:病理解剖室必须是在每次解剖后用水冲洗地面和靠近地面的墙壁,并进一步消毒,并非定期。
2.对于重铬酸钾固定剂,对其描述下面错误的是A、重铬酸钾为橙红色晶体,有毒B、用于固定高尔基体和线粒体效果较好C、组织穿透速度快D、重铬酸钾固定的组织明显收缩E、重铬酸钾固定的组织,酸性染料着色良好正确答案:D答案解析:重铬酸钾固定的组织几乎完全不收缩,但经乙醇脱水后明显收缩。
3.中性黏多糖染色阳性的细胞不包括A、甲状腺滤泡上皮细胞B、胃黏膜表面上皮细胞C、支气管上皮杯状细胞D、前列腺上皮细胞E、结肠的杯状细胞正确答案:C答案解析:中性黏多糖染色阳性的细胞有甲状腺滤泡上皮细胞、胃黏膜表面上皮细胞、结肠黏膜上皮细胞、十二指肠腺、颌下腺、前列腺上皮等。
支气管上皮杯状细胞含有酸性黏多糖。
4.弹性纤维A、James染色B、维多利亚蓝染色C、丽春红S染色D、PTAH染色E、MSB染色正确答案:B5.单纯固定液广泛用于酶组织化学方法中的各种酶固定的是A、锇酸B、醋酸C、苦味酸D、乙醇E、冷丙酮正确答案:E6.AFP为下列哪种肿瘤的标记物A、黑色素细胞瘤B、乳腺癌C、肝细胞癌D、宫内膜癌E、鼻咽癌正确答案:C答案解析:AFP为肝细胞癌和内胚妻瘤的标志物;HMB45和S 100为黑色素细胞的标志物;ER和PR为乳腺癌和子宫内膜癌的分化标志物。
脂肪组织石蜡切片技巧
脂肪组织石蜡切片技巧全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:脂肪组织石蜡切片技巧介绍:脂肪组织石蜡切片技术是一种重要的组织学技术,广泛应用于医学研究和临床诊断中。
通过脂肪组织石蜡切片技术,可以将组织样本制备成薄片,便于观察细胞结构和病变情况。
本文将详细介绍脂肪组织石蜡切片的步骤和技巧。
一、脂肪组织处理1. 组织固定:将新鲜组织标本进行固定,常用的固定剂有福尔马林、乙醇和甲醛等。
固定的目的是保持组织形态的完整性和结构的稳定性。
2. 组织脱水:将固定的组织样本逐渐浸入逐渐升级浓度的醇类溶剂中,以去除水分并增加组织样本的透明度。
4. 组织浸渍:将透明化的组织样本浸入熔化的石蜡中,使其充分浸渍,保持组织结构的完整性。
二、组织切片1. 切片机的调节:调节切片机的切片速度和厚度,确保切片的质量和一致性。
保持切片机的清洁和维护,减少工作中的干扰因素。
2. 开始切片:将浸渍好的组织块固定在切片机上,调节切片机的速度和厚度,开始进行切片。
切片应该在恒定的速度和角度下进行,以保证切面的平整和样本的连续性。
3. 切片收集:将切片沉浸在温水中,使其平展和去除切片上的石蜡残留。
然后用玻璃刀将切片捡起并移至预先涂有胶水的载玻片上。
4. 切片干燥:将载玻片放在干燥烘箱中,使其完全干燥,以便后续染色和观察。
三、组织染色和观察1. 组织染色:将切片浸入适当的染色溶液中,如血液学中的赫姆莱恩染色、肝脏组织的苏木素-伊红染色等,以增强细胞结构和病变的可见性。
2. 组织观察:使用显微镜观察染色后的组织切片,观察细胞结构和病变情况。
可以使用数字镜头连接相机,将组织图像转换成数字图像,便于保存和分享。
四、注意事项1. 操作规范:在进行切片前,应该对切片机和实验器具进行检查和清洁。
操作过程中注意安全,避免切伤和其他意外。
2. 组织标本处理:在固定、脱水、透明化和浸渍过程中,要避免组织样本的干燥和脱落,保证样本的完整性。
3. 切片质量:切片的厚度和平整度会影响样本的观察效果,因此要调节切片机的参数,保证切片质量。
大体标本常用的固定液
大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分,它可以帮助保存和稳定组织和细胞,使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。
一般来说,固定液包括多种化学成分,不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。
以下是最常用的固定液:
1. 10% 福尔马林(Formaldehyde)
福尔马林是最常用的固定液之一,它可以作为一种信标分子,标记细胞蛋白。
福尔马林具有良好的渗透性,能够迅速渗透到组织中,提供良好的固定效果。
2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液(SDS-EDTA Buffer)
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。
该固定液是一种离子池化学固定液,能够特异性地固定蛋白质,适用于研究细胞骨架和线粒体。
3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液,不过使用比较少。
该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸,可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。
4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液,由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。
该固定液可以用于稳定核质和细胞膜,适用于肝脏和小肠等组织。
5. 4%多聚甲醛(Paraformaldehyde)
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液,可以优先固定蛋白质和核酸。
多聚甲醛很便宜,但其固定效果不及福尔马林。
需要注意的是,不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。
因此,选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素,才能选择最合适的固定液。
同时,固定液使用时需要注意安全,防止吸入和接触固定液。
病理检验技术单选(专升本)模考试题与参考答案
病理检验技术单选模考试题与参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、对组织固定的定义,下面描述正确的是()A、将组织浸入某些化学试剂,使生活的细胞迅速死亡,这一过程称之为“固定”B、将组织浸入某些化学试剂,使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置,这一过程称之为“固定”C、将组织浸入某些化学试剂,使生活的细胞迅速死亡并分解,这一过程称之为“固定”D、将组织浸入某些化学试剂,使已经停止代谢的细胞快速分解,这一过程称之为“固定”E、将组织浸入某些化学试剂,使生活细胞的代谢迅速停止并分解,这一过程称之为“固定”正确答案:B2、病理解剖的意义下面描述不正确的是()A、病理解剖技术是病理学的基础之一B、发现临床诊断和治疗上存在的问题C、分子生物学技术的迅猛发展可代替传统的病理解剖技术D、大量病理资料的积累促进了医学的发展和进步E、可以通过临床病理讨论会的形式,实现病理和临床的交流和统一正确答案:C3、以下说法错误的是A、癌细胞的细胞核增大B、所有恶性细胞核质比增大C、核大小不一与染色体数量或肿瘤干细胞有关D、同一类型癌细胞有细胞核大小不一现象E、核异常是癌细胞的主要形态学特征之一正确答案:B4、下列哪一项不是液基细胞学技术的优点A、能够降低标本的不满意率;B、可直接涂片,细胞随机分布;C、涂片细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰;D、可以用于原位杂交和免疫细胞化学染色E、能够提高诊断的灵敏度和特异度;正确答案:B5、关于间皮细胞,以下说法正确的是A、间皮细胞分为角化型和非角化型B、可见于输卵管和子宫内膜C、发生异常情况时间皮层增厚D、源于穿刺和刷取法的标本常单个或呈片状或成团排列E、间皮细胞是分布于血管内膜表面的上皮细胞正确答案:C6、对组织处理过程中,对二甲苯的描述不正确的是()A、容易使组织变硬变脆B、也常用于切片后的染色透明C、对组织的收缩性强D、用二甲苯进行组织透明时间越长效果越好E、二甲苯是常用的常规透明剂正确答案:D7、既是组织处理过程中的透明剂,其精制品又常用作显微镜镜油的是()A、氯仿B、香柏油C、松油醇D、二甲苯E、水杨酸甲酯和苯胺油正确答案:B8、病理检验室的面积要求一般要达到()m2。
病理技术专业知识
(一)单纯固定液甲醛:1.浓度:40%,气体2.渗透力强,固定均匀,组织收缩小,3.不能使白蛋白和核蛋白沉淀4.保存脂类,必须用冷冻切片。
是糖的保护剂5.可固定高尔基体,线粒体重铬酸钾1.浓度:1%-3%水溶液,有毒,橘红色结晶2.穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,3.未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。
酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。
4.固定高尔基体和线粒体有良好效果。
5.酸性染料着色好,碱性染料着色差6.固定的组织需经流水冲洗12-24h,或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸1.黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏2.穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化。
3.能沉淀一切蛋白质4.对脂肪和类脂无固定作用。
5. 可软化皮肤和火棉胶,不宜用火棉胶包埋6. 固定时间不宜超过24h,7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦味酸固定产生的黄色。
升汞1. 浓度为5%-7%的水溶液,针状结晶2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显3, 对蛋白质有固定作用,4. 对类脂和糖类无固定作用5. 临用时加冰醋酸醋酸1. 刺激性气味的无色液体,低于15℃为冰醋酸5%的醋酸PH为2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。
2. 穿透力强3 不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白4 不能固定脂肪和内酯,不能保存糖5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白铬酸1.为三氧化铬的水溶液,浓度%-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合2 穿透力弱,一般组织需固定12-24h,固定的组织有收缩,3 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。
4 对脂肪无固定作用5 固定线粒体和高尔基复合体6. 宜避光保存,以防蛋白质溶解。
7. 必须彻底流水冲洗(≥24h)。
锇酸(四氧化锇)1.淡黄色结晶,剧毒,浓度1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合2. 渗透力极弱,易使组织变硬,延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formal dehyd e)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formal in)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
组织固定液与固定方法选择的探讨
“固定”是指将组织浸入适当的化学试剂中,使组织细胞内的物质尽量接近其取材时的形态结构和位置的过程[1]。
固定能使组织中的各种物质沉淀和凝固起来,终止或抑制外源性和内源性酶的活性,防止细胞自溶,保持细胞形态[2]。
固定是制作大体标本和显微镜切片标本的关键,良好的固定有利于切片标本的制作和染色,使组织产生不同的折射率,造成光学上的差异,以便观察、鉴别和硬化组织[3-4]。
固定液可以抑制组织自溶,保持离体组织细胞与生活时的形态相似,使细胞内一些蛋白质等沉淀或凝固,有利于固定后物质的确切定位,是保存组织器官用于病理诊断的必需过程[5-6]。
不同固定液对组织细胞的穿透力不同,可导致细胞内黏多糖、蛋白质、核酸、脂类和低分子质量物质等不同程度的丢失,由固定液因素导致组织细胞形态的改变,对病理诊断产生很大影响,比其他技术操作因素引起的组织细胞形态改变更难把握。
而选取良好的固定液可使组织固定均匀、收缩小、结构清晰,利于保存组织细胞的抗原性,为免疫组化、电镜观察等奠定坚实的基础[7-8]。
本研究就组织固定液和固定方法的选择作如下探讨。
1固定液1.1固定液成分甲醇:为沉淀类固定剂,对组织渗透性强,能迅速沉淀清蛋白、球蛋白和核蛋白[9]。
可以固定核染色质及其部分内容物、核膜、细胞质及胶质等[10],且固定后核浆对比鲜明,组织结构清晰,能基本保持细胞的正常形态[11]。
乙醇:是一种可溶解脂肪和类脂的脂溶剂,穿透力缓慢,长时间浸泡可使组织硬化,细胞核变形,细胞质收缩,蛋白质变性,糖原沉淀[12]。
乙醇对组织细胞既有固定作用又有脱水作用,一般固定组织以80%~95%浓度为好[13]。
丙酮:是一种易燃易挥发的无色液体,对组织渗透力强,能使蛋白质沉淀,但不能很好地保存糖原,且在部分组织中对核的固定效果欠佳[14-16]。
戊二醛:是一种具有双重作用的醛类。
对糖原、糖蛋白、微管内质网和细胞基质等有较好的固定作用可使组织保存良好,适合电镜和酶组织标本的固定,但其穿透力较弱[12,17]。
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北京雷根生物技术有限公司
脂肪组织固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 脂肪组织固定液由Bouin's 固定液和乙醇组成,实际上其成分为PA 、甲醛、乙酸、乙醇等。
PA 可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化, 其与甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,是一种良好的脂肪瘤和脂肪肉瘤的固定液。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般脂肪瘤和脂肪肉瘤需要固定48h 。
如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过36h 。
注意事项:
1、 脂肪组织固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作, 避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
编号 名称 DF0190 Storage 脂肪组织固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。