多糖提取实验设计流程【复习准备】
多糖提取测定实验报告
一、实验目的1. 掌握多糖提取的基本原理和操作流程。
2. 了解不同植物多糖提取方法的优缺点。
3. 学习并掌握多糖含量的测定方法。
4. 通过实验,提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理多糖是一类由单糖通过糖苷键连接而成的生物大分子,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如免疫调节、抗炎、抗氧化、降血糖等。
本实验采用水提醇沉法提取植物多糖,并利用苯酚-硫酸法测定多糖含量。
三、实验材料1. 实验药品:苯酚、浓硫酸、95%乙醇、无水乙醇、NaOH、盐酸等。
2. 实验仪器:电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、烧杯、漏斗、玻璃棒等。
3. 实验材料:植物样品(如大蒜、枸杞、人参等)。
四、实验方法1. 植物样品处理:将植物样品干燥、研磨成粉末,过筛,备用。
2. 多糖提取:称取一定量的植物样品粉末,加入适量的水,在80℃水浴中提取2小时,过滤,收集滤液。
3. 醇沉:向滤液中加入等体积的95%乙醇,搅拌,静置过夜,使多糖沉淀。
4. 沉淀处理:将沉淀用无水乙醇洗涤三次,每次洗涤后静置,取上清液,浓缩至一定体积。
5. 多糖含量测定:准确吸取一定量的多糖溶液,加入苯酚试剂,混匀,于沸水中加热5分钟,冷却后,加入浓硫酸,混匀,在分光光度计下测定吸光度。
五、实验结果与分析1. 不同植物样品多糖提取率比较:通过比较不同植物样品多糖提取率,可以了解不同植物多糖的提取效果。
2. 不同提取方法对多糖提取率的影响:通过比较水提醇沉法与其他提取方法(如酸提法、碱提法等)对多糖提取率的影响,可以了解不同提取方法的优缺点。
3. 多糖含量测定结果:根据苯酚-硫酸法测定多糖含量的原理,可以计算出多糖的含量。
六、实验结论1. 水提醇沉法是一种简单、有效的植物多糖提取方法。
2. 不同植物样品多糖提取率存在差异,可能与植物种类、生长环境等因素有关。
3. 苯酚-硫酸法是一种准确、可靠的多糖含量测定方法。
七、实验注意事项1. 提取过程中,注意控制温度和时间,以避免多糖分解。
多糖提取_实验报告
一、实验目的1. 了解多糖的基本性质和提取方法。
2. 掌握水提法、醇沉法、离子交换法等多糖提取方法。
3. 通过实验,提高对多糖提取技术的实际操作能力。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如免疫调节、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等。
多糖的提取方法有水提法、醇沉法、离子交换法等。
本实验采用水提法、醇沉法、离子交换法三种方法提取多糖。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:胡萝卜、葡萄糖、淀粉、纤维素酶、DE-23、DE-41、Sepharose(2B、4B、6B)等。
2. 实验试剂:蒸馏水、95%乙醇、95%丙酮、NaCl、NaOH、HCl、氯化钙、蒽酮、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、葡萄糖、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
3. 仪器:组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、磁力搅拌器、抽滤瓶、烧杯、移液管、试管等。
四、实验步骤1. 水提法提取多糖(1)将胡萝卜洗净、去皮、切片,称取适量胡萝卜组织,用组织匀浆机匀浆。
(2)将匀浆液转移到烧杯中,加入适量的蒸馏水,搅拌溶解。
(3)将溶液转移到离心管中,离心分离,取上清液。
(4)将上清液转移到烧杯中,加入95%乙醇,静置过夜。
(5)次日,离心分离,取沉淀。
(6)将沉淀用95%丙酮洗涤,干燥,得到胡萝卜多糖。
2. 醇沉法提取多糖(1)将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中,加入适量的蒸馏水,搅拌溶解。
(2)将溶液转移到离心管中,离心分离,取上清液。
(3)将上清液转移到烧杯中,加入适量的95%乙醇,搅拌溶解。
(4)将溶液转移到离心管中,离心分离,取沉淀。
(5)将沉淀用95%丙酮洗涤,干燥,得到胡萝卜多糖。
3. 离子交换法提取多糖(1)将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中,加入适量的蒸馏水,搅拌溶解。
(2)将溶液转移到离心管中,离心分离,取上清液。
(3)将上清液转移到烧杯中,加入适量的NaCl,搅拌溶解。
(4)将溶液转移到离子交换柱中,用蒸馏水冲洗至流出液无Cl-。
正交设计多糖提取实验方案
多糖正交实验方案基本提取工艺流程:黄精、百合干燥粉碎——石油醚脱脂2次——加水热提——提取液过滤——水浴浓缩——离心取上清——加入Sevag试剂脱蛋白操作——取上层水层——加无水乙醇沉淀——收集沉淀——用水溶解——过滤除杂质——重复1次醇沉——收集沉淀——加水溶解定容——成为贮备液。
精密量取贮备液——加水稀释定容——供测多糖含量。
精密量取贮备液——置锥形瓶水浴蒸干——干燥3h——冷却后——称重,计算浸膏得率。
一、提取过程的正交方案:1、称取黄精、百合各10g干燥至恒重——粉碎成粗粉(过筛)——(置于圆底烧瓶中)加入5倍量(100ml)石油醚——水浴50℃加热回流1h,共2次,进行脱脂及除去小分子糖——弃液留渣,药渣晾干(置于培养皿中于通风处过夜晾干,或置于圆底烧瓶中水浴上加热至能轻松倒出)——(按照正交设计表的要求)加适量蒸馏水,于适宜温度,水浴加热回流提取规定次数——合并提取液—减压抽滤——水浴——浓缩(90℃)——至固定量30ml(浓缩过量时补足体积)——4000r/min离心10min——(注射器抽取)取上清液2、——置于锥形瓶中——加入Sevag试剂(氯仿:正丁醇=5:1)约等量——置于恒温水浴振荡器50℃振荡15min——改置于分液漏斗中静置20min以上——待其分层后,取最上层(从上口倒出)——重复操作2次——置于广口瓶,加醇处理,加入4倍量的无水乙醇(预冷过)——冰箱冷藏过夜使其沉淀——减压抽滤,收集沉淀——(连同滤纸一起)用20ml蒸馏水溶解——过滤除去水不溶物——重复1次加醇沉淀,减压抽滤——收集沉淀,加少量蒸馏水溶解,加水稀释——定容至50ml容量瓶中,成为贮备液。
3、精密量取1ml贮备液,加至100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,定容摇匀。
供测定多糖含量。
4、精密量取10ml贮备液,置于(已干燥并精密称重的)小锥形瓶中,水浴蒸干,于105℃烘箱干燥3h,取出迅速置于玻璃干燥器内冷却30min,迅速称重,计算浸膏得率。
大枣多糖的提取实验报告
大枣多糖的提取实验报告
一、实验材料
1.1实验药品
1.2实验仪器
二、试验方法
2.1大枣枣肉的成分分析
大枣枣肉的水分、总糖、蛋白质、脂肪、粗纤维、果胶、灰分按常规方法测定。
2.2多糖的得率
多糖得率(%)=M1×C×V
M2×M3×103
×100%
M 1——粗多糖质量g,C——多糖浓度ug/ml,V——样品溶液(500ml),M
2
——配置样品溶液称取的粗多糖质量(20mg),M
3
——大枣粉质量g。
2.3采用苯酚-硫酸法检测糖分
制作标准曲线,准确称取标准葡聚糖20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以水补至2.0ml于2~9号比色管,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,静置10min,摇匀,室温放置20min以后,于490nm处测光吸光度,以2.0ml水于1号比色管按同样显
色操作为空白,数据如下表。
根据上表,以糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线如下图
由上图可得线性回归方程y=0. 0586x+0. 0601,R2=0. 9992所以本检测方法中糖浓度和吸光度有良好的线性关系。
样品含量的测定:称取20mg粗多糖,配成500ml样品溶液,去1.0ml 样品液,按2.3的步骤操作,测出吸光度,以标准曲线方程计算出多糖浓度C,将浓度C代入2.2公式中,算出多糖得率。
多糖提取工艺流程
第一部分:野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养前言采集吉林长白山野生灵芝,经过菌种分离,鉴定为GANODERMA(英文名称)多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst.的菌种。
经过纯化扶壮培养,成为一支优良的灵芝菌种,为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。
实验室流程:(百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种(恒温培养箱)菌种培养扶壮(恒温恒湿冷藏柜)优良菌种保藏(百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种(摇床)发酵菌种摇瓶培养(用于接种菌种罐)第二部分:灵芝菌丝体液体发酵培养前言液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培,周期短,产量高,无污染,灵芝多糖含量高,节省木材和耕地。
是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。
经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐,待生长良好,在接种于扩大的发酵罐中,通过通气恒温培养,长成成年灵芝菌丝体,生长完全后,进行离心分离喷雾干燥,就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉,多糖含量达到15%左右。
进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。
灵芝菌丝体发酵工艺流程:(配料罐)培养液的配制(菌种罐)菌种的发酵培养(发酵罐)灵芝菌丝体发酵培养(离心机)灵芝菌丝体固液分离(浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液(喷雾干燥塔)浓缩液喷雾干燥,得到灵芝菌丝体粉第三部分:灵芝菌丝体多糖的提取分离前言灵芝菌丝体粉,是大部分不溶解于水,食用以后象灵芝子实体一样,只有少部分成分被吸收,通过现代提取手段,将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取,经过真空浓缩,在经过醇沉工艺,加工成可以全部被人体吸收,灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。
极大的提高了功效,减少了服用量。
灵芝多糖提取工艺流程:(提取罐)灵芝菌丝体粉水提取(外循环真空浓缩罐)提取液真空浓缩(醇沉罐)浓缩液乙醇沉淀多糖(离心机)沉淀多糖分离(浓缩液储罐)沉淀物配制成多糖浓缩液(喷雾干燥塔)灵芝多糖喷雾干燥(粉碎机)灵芝多糖粉碎到100目(混合机)灵芝多糖粉批量混合(真空包装机)食品塑袋真空包装。
提取植物多糖的实验报告
一、实验目的1. 掌握植物多糖提取的基本原理和操作方法。
2. 学习植物多糖的分离纯化技术。
3. 探讨植物多糖的生物活性。
二、实验原理植物多糖是一类具有生物活性的天然高分子化合物,广泛存在于植物中。
提取植物多糖的原理是利用植物多糖在特定溶剂中的溶解度差异,通过物理或化学方法将植物多糖从植物组织中分离出来。
三、实验材料1. 实验植物:绿豆2. 实验药品:乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、丙酮、苯酚、硫酸等3. 实验仪器:粉碎机、搅拌器、离心机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计、色谱柱等四、实验步骤1. 植物样品处理取绿豆种子,用粉碎机粉碎成粉末,过筛后备用。
2. 植物多糖提取将绿豆粉末加入一定量的蒸馏水中,搅拌均匀,加热至沸腾,保持沸腾状态30分钟。
然后加入氢氧化钠溶液,调节pH值为7.0,继续煮沸30分钟。
将煮沸后的溶液冷却至室温,加入适量的盐酸溶液,调节pH值为7.0,静置过夜。
3. 植物多糖分离纯化将静置后的溶液离心分离,取上清液。
将上清液加入无水乙醇,静置过夜,沉淀植物多糖。
将沉淀物用蒸馏水洗涤,然后用丙酮洗涤,干燥后得到植物多糖粗提物。
4. 植物多糖结构鉴定采用高效液相色谱(HPLC)法对植物多糖进行结构鉴定。
将植物多糖粗提物溶解于一定浓度的水溶液中,进行HPLC分析,根据保留时间和峰面积判断植物多糖的结构。
5. 植物多糖生物活性测定采用DPPH自由基清除法测定植物多糖的抗氧化活性。
将植物多糖溶解于一定浓度的水溶液中,与DPPH自由基溶液混合,在室温下反应30分钟,测定溶液的吸光度。
以Vc为对照,计算植物多糖的自由基清除率。
五、实验结果与分析1. 植物多糖提取率通过测定植物多糖粗提物的重量,计算植物多糖的提取率。
实验结果表明,绿豆植物多糖的提取率为2.5%。
2. 植物多糖结构鉴定HPLC分析结果表明,绿豆植物多糖主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,分子量为10万~20万。
3. 植物多糖抗氧化活性DPPH自由基清除法测定结果表明,绿豆植物多糖的自由基清除率为60.2%,具有较好的抗氧化活性。
多糖提取的相关操作
一、DEAE柱:1.准备柱子:(1)洗柱:洗涤剂、自来水、去离子水,洗至不挂水珠、水不成股下流。
(2)浸泡滤膜:95%酒精,浸泡柱上下滤膜(包括胶圈)至少30min,时间可延长(5h 左右),主要作用是脱去脂溶性杂质。
每次柱使用完毕后都要做此步骤。
(3)洗布氏漏斗:用10%HCL 抽滤,后用蒸馏水洗涤,去除滤膜板中可能灰尘。
(4)装柱:铁夹夹紧对齐,装完柱后要检查是否漏水。
2.准备填料:(再生步骤)(1)DM过酸过碱:0.2M/L HCL 和NaOH 浸泡填料,先碱后酸,从加入碱时开始计时,一般为30min,加入时用玻棒搅动,以防与碱作用不充分。
但若是新填料,浸泡20min后即可使用。
碱对填料有影响,忌浸泡时间超过30min,一般20min即可。
入碱后,用去离子水(﹥2L,充分去除OH根离子)在布氏漏斗上过滤。
脱水完全(洗2-3遍至中性)。
后浸泡酸。
重生方法同上。
(2)脱气:先溶解DM,再倒入抽滤瓶,真空抽滤,至无白沫,可时而摇晃,抽至无白沫无气泡。
重要,最好能延长脱气时间。
3.上柱:倾倒填料时浓度尽量稀,使填料贴壁下流。
静止。
待填料沉降,吸出上清液,统一收集,反复此操作,尽可能回收填料。
(尽量不起气泡)沉降一段时间后,待上清未完全沉降时倒入尚未倒完的胶,防止多次倾倒引起的分层现象。
此时,用夹子夹住软管,使其不漏液,待沉降完全,出现清水层,去除夹子,滴液。
4.平衡:若上柱平衡后暂时不上样,可隔一天平衡一次,防止长菌。
滴数:三秒1滴,20分钟收集一管约10ml,33小时过柱一体积。
水层不能滴干,防止胶出现干裂现象。
5.检验:用1M AgNO3 检验过柱水中Cl离子是否洗净,至无Cl离子后再过一柱体积。
皆用去离子水。
6.上样:上样前样品水溶,离心,先取上清,收集保留不溶物。
(1)粗柱子:DEAE量占柱体积80%高度(标记高度,要有足够的塔板数),上8克样。
上样步骤:先将螺旋拧开,用夹子夹紧软管,放在液面以上,使其液面不下降。
提取多糖的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握多糖提取的原理和操作流程;2. 了解不同提取方法对多糖提取率的影响;3. 学习多糖的鉴定方法;4. 熟悉实验仪器的使用。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如抗炎、抗氧化、免疫调节等。
多糖的提取方法主要有热水提取法、酸提取法、碱提取法等。
本实验采用热水提取法提取多糖,并利用苯酚-硫酸法对提取的多糖进行鉴定。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:干燥的植物原料(如香菇、大枣、紫菜等);2. 实验试剂:蒸馏水、NaOH、HCl、苯酚、硫酸、乙醇、DPPH、卡拉菲指示剂等;3. 实验仪器:组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、容量瓶、移液管、烧杯、漏斗等。
四、实验步骤1. 多糖提取(1)将干燥的植物原料粉碎,过筛,取适量粉末;(2)将粉末加入一定量的蒸馏水中,加热至80℃,保持2小时;(3)冷却后,过滤得到滤液;(4)将滤液加入适量的乙醇,静置过夜,离心,收集沉淀;(5)将沉淀用95%乙醇洗涤,干燥,得到多糖粗品。
2. 多糖鉴定(1)苯酚-硫酸法鉴定①取一定量的多糖粗品,加入苯酚溶液,振荡均匀;②加入硫酸溶液,观察溶液颜色的变化;③与标准溶液进行比较,确定多糖的存在。
(2)DPPH自由基清除法①配制一定浓度的DPPH溶液;②取一定量的多糖粗品,加入DPPH溶液,振荡均匀;③在一定时间后,测定溶液的吸光度;④计算DPPH自由基清除率,评估多糖的抗氧化活性。
五、实验结果与分析1. 多糖提取实验结果表明,热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖,提取率较高。
2. 多糖鉴定(1)苯酚-硫酸法鉴定实验结果显示,多糖粗品与苯酚-硫酸溶液反应后,溶液颜色变为深棕色,说明多糖的存在。
(2)DPPH自由基清除法实验结果显示,多糖粗品对DPPH自由基具有清除作用,清除率随着多糖浓度的增加而增加,表明多糖具有一定的抗氧化活性。
六、实验结论1. 热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖,提取率较高;2. 多糖具有抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂;3. 本实验为多糖的提取和鉴定提供了一种简单、实用的方法。
多糖提取实验报告
一、实验目的1. 了解多糖的基本概念、性质和分类;2. 掌握多糖提取的基本原理和实验方法;3. 学习利用水提法、醇沉法等方法提取多糖;4. 掌握多糖的纯化、鉴定和含量测定方法。
二、实验原理多糖是一类由单糖分子通过糖苷键连接而成的天然高分子化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗病毒等。
本实验主要采用水提法、醇沉法等方法提取多糖,并对其纯化、鉴定和含量进行测定。
三、实验材料1. 实验材料:植物样品(如玉米、小麦、胡萝卜等);2. 实验试剂:蒸馏水、乙醇、丙酮、苯酚、硫酸、蒽酮、葡萄糖标准品等;3. 实验仪器:组织捣碎机、离心机、分光光度计、磁力搅拌器、容量瓶、移液管、试管等。
四、实验方法1. 植物样品预处理:将植物样品洗净、晾干、磨碎,过筛,得到植物粉末。
2. 水提法提取多糖:(1)称取一定量的植物粉末,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(2)在80℃条件下加热提取2小时;(3)冷却后,用离心机分离溶液和沉淀;(4)取上清液,加入乙醇,使多糖沉淀;(5)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到粗多糖。
3. 醇沉法提取多糖:(1)称取一定量的植物粉末,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(2)在80℃条件下加热提取2小时;(3)冷却后,用离心机分离溶液和沉淀;(4)取上清液,加入丙酮,使多糖沉淀;(5)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到粗多糖。
4. 纯化多糖:(1)将粗多糖溶解于适量的蒸馏水中;(2)加入适量的苯酚,使多糖与苯酚形成复合物;(3)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到纯多糖。
5. 多糖鉴定:(1)采用苯酚-硫酸法鉴定多糖:取一定量的多糖样品,加入苯酚和硫酸,观察溶液颜色的变化;(2)采用蒽酮法鉴定多糖:取一定量的多糖样品,加入蒽酮,观察溶液颜色的变化。
6. 多糖含量测定:(1)采用硫酸蒽酮法测定多糖含量:取一定量的多糖样品,加入蒽酮,在特定波长下测定吸光度;(2)以葡萄糖标准品为对照,绘制标准曲线,根据样品吸光度计算多糖含量。
香菇多糖的提取工艺设计
香菇多糖的提取工艺设计一、原料选择香菇多糖的提取首先需要选择优质的原料。
在香菇的选择上,应优先选择新鲜、无病虫害、无腐烂的香菇,以保证多糖的提取质量。
同时,为了提高提取效率,建议选用香菇子实体,其多糖含量相对较高。
二、预处理在提取前,需要对香菇进行预处理。
预处理的目的是去除杂质和无效成分,提高多糖的纯度。
预处理主要包括清洗、去蒂、切块等步骤。
清洗是为了去除香菇表面的泥沙和污垢;去蒂则是为了去除香菇头部杂质;切块则可以将香菇切成适宜提取的小块。
三、提取提取是香菇多糖提取工艺的核心步骤。
常见的提取方法有热水提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。
这些方法均能有效地从香菇中提取出多糖,但具体的提取效果和提取效率会有所不同。
实验者可以根据实际情况选择适宜的提取方法。
四、浓缩提取出的香菇多糖溶液需要进行浓缩,以减少后续处理的难度。
浓缩的方法有自然蒸发浓缩、低温减压浓缩、薄膜浓缩等。
实验者可以根据实际情况选择适宜的浓缩方法。
五、除杂浓缩后的多糖溶液中仍含有一些杂质,需要进行除杂处理。
除杂的方法包括离心分离、过滤等。
通过这些方法,可以去除杂质,提高多糖的纯度。
六、纯化除杂后的多糖溶液需要进行纯化,以进一步去除杂质和提高多糖的纯度。
纯化的方法包括透析、凝胶柱层析等。
通过这些方法,可以去除小分子杂质和大分子蛋白质等物质,进一步提高多糖的纯度。
七、干燥纯化后的香菇多糖溶液需要进行干燥处理,以得到干燥的多糖粉末。
干燥的方法包括真空干燥、冷冻干燥等。
这些方法能够去除溶液中的水分,得到便于保存和运输的多糖粉末。
八、质量检测最后,需要对提取得到的香菇多糖进行质量检测,以评估其质量和纯度是否符合要求。
质量检测的内容包括多糖含量的测定、分子量测定、理化性质分析等。
通过这些检测,可以全面评估香菇多糖的质量和纯度,并确定其应用价值。
多糖的提取实验报告
多糖的提取实验报告多糖的提取实验报告引言:多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于植物、动物和微生物中。
它们在生命体内具有重要的生理功能和生物活性,因此对多糖的提取与研究具有重要意义。
本实验旨在通过提取多糖的方法,探究多糖在不同来源中的含量差异,并对提取方法进行优化。
实验材料与方法:材料:不同来源的植物样本、动物样本和微生物样本;乙醇、醋酸钠、酚酞指示剂、硫酸、硝酸、硫酸铜、硝酸银、酶解液等。
方法:1. 样本制备:将不同来源的样本洗净并切碎,分别置于研钵中。
2. 提取液制备:取适量乙醇与醋酸钠混合,制备乙醇醋酸提取液。
3. 提取过程:a. 将提取液倒入研钵中,与样本充分混合,放置一段时间以实现多糖的溶解和提取。
b. 过滤混合液,得到提取液。
4. 多糖含量测定:a. 取适量提取液,加入酚酞指示剂,进行酸碱滴定。
b. 记录滴定所需的硫酸体积,计算多糖的含量。
5. 提取方法优化:a. 改变提取液浓度、提取时间等条件,对提取效果进行优化。
结果与讨论:通过实验,我们成功提取到了不同来源的多糖,并测定了其含量。
实验结果表明,不同来源的样本中多糖的含量存在差异。
以植物样本为例,我们发现在相同条件下,不同植物的多糖含量差异较大。
这可能与植物的生长环境、种类以及生长阶段等因素有关。
同时,我们还对提取方法进行了优化。
通过改变提取液浓度、提取时间等条件,我们发现可以提高多糖的提取效率。
例如,增加提取液的浓度可以增加多糖的溶解度,从而提高提取效果。
此外,适当延长提取时间也有助于提高多糖的提取率。
然而,我们也发现在提取过程中存在一些问题。
首先,提取液的选择对多糖的提取效果有重要影响。
在本实验中,我们选择了乙醇醋酸提取液,但其提取效果可能不适用于所有样本。
因此,在实际应用中,需要根据样本的特性选择合适的提取液。
此外,多糖的提取方法还可以进一步优化。
在本实验中,我们只对提取液的浓度和提取时间进行了优化,但还有其他因素可以考虑,如提取温度、pH值等。
多糖的提取实验报告
一、实验目的1. 了解多糖的基本概念和生物学功能。
2. 掌握从植物材料中提取多糖的方法和步骤。
3. 学习使用化学和物理方法对多糖进行纯化和鉴定。
4. 通过实验,了解多糖的提取效率及其影响因素。
二、实验原理多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子碳水化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
它们在自然界中扮演着重要的角色,如植物细胞壁的组成成分、生物体的能量储存等。
本实验采用水提法从植物材料中提取多糖,通过一系列的化学和物理方法对多糖进行纯化和鉴定。
三、实验材料与仪器实验材料:- 植物材料(如大枣、紫菜、海带等)- 无水乙醇、丙酮、氯化钠、硫酸、蒽酮、苯酚等化学试剂- 纤维素酶、CTAB、DE-23、DE-41、Sepharose(2B、4B、6B)等试剂- 离心机、分光光度计、水浴锅、旋转蒸发仪、层析柱等仪器四、实验步骤1. 样品处理:- 将植物材料研磨成粉末,过筛后备用。
- 取一定量样品粉末,加入适量的水,搅拌溶解。
2. 多糖提取:- 将溶解后的样品过滤,收集滤液。
- 将滤液用无水乙醇沉淀,收集沉淀物。
- 将沉淀物用丙酮洗涤,干燥后得到粗多糖。
3. 多糖纯化:- 将粗多糖溶解于适量的水中,加入适量的氯化钠,搅拌溶解。
- 加入适量的CTAB,搅拌溶解。
- 用DE-23、DE-41、Sepharose(2B、4B、6B)等树脂进行层析分离。
- 收集目的峰,用水洗脱,收集洗脱液。
4. 多糖鉴定:- 取一定量的多糖样品,加入蒽酮试剂,观察颜色变化。
- 取一定量的多糖样品,加入苯酚试剂,观察颜色变化。
- 通过分光光度计测定样品的吸光度,计算多糖含量。
五、实验结果与分析1. 通过实验,成功从植物材料中提取了多糖。
2. 通过化学和物理方法对多糖进行了纯化,提高了多糖的纯度。
3. 通过蒽酮法和苯酚法对多糖进行了鉴定,证实了实验提取的物质为多糖。
4. 通过分光光度计测定,得到了多糖的含量。
六、实验讨论1. 实验结果表明,水提法是一种有效的多糖提取方法。
多糖提取实验报告
多糖提取实验报告多糖提取实验报告引言:多糖是一类具有重要生物学功能的高分子化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖在医药、食品、化妆品等领域具有广泛的应用价值。
本实验旨在通过提取多糖的方法,探究不同材料中多糖的含量及提取效果。
实验材料与方法:实验材料:- 植物材料:红枣、银耳、紫薯、莲子;- 动物材料:猪皮、鸡爪;- 实验仪器:电子天平、超声波清洗机、离心机、热风干燥箱。
实验方法:1. 样品准备:将不同材料的样品分别清洗干净,红枣去核,猪皮和鸡爪去毛,莲子去壳;2. 样品粉碎:将样品切成小块后,使用超声波清洗机进行清洗,然后将样品放入研钵中,用研钵与研杵研磨成粉末状;3. 提取多糖:将研磨后的样品加入适量的去离子水中,放入水浴中加热,保持温度在80℃左右,不断搅拌,提取2小时;4. 过滤离心:将提取液过滤,离心10分钟,将上清液收集;5. 浓缩:将上清液放入热风干燥箱中,以60℃的温度进行浓缩,直至样品变为粘稠状;6. 干燥:将浓缩后的样品放入热风干燥箱中,以60℃的温度干燥至恒重。
结果与讨论:通过实验,我们成功提取出了红枣、银耳、紫薯、莲子、猪皮和鸡爪中的多糖。
下面将对实验结果进行讨论。
首先,我们对不同材料中多糖的含量进行了比较。
实验结果显示,红枣中的多糖含量最高,其次是银耳、紫薯和莲子,猪皮和鸡爪中的多糖含量较低。
这与我们的预期相符,因为红枣、银耳、紫薯和莲子都是常见的富含多糖的食材,而猪皮和鸡爪中的多糖含量较低,这可能与其组织结构和生物学特性有关。
其次,我们对提取多糖的效果进行了评估。
实验结果显示,红枣、银耳、紫薯和莲子中的多糖提取效果较好,提取液中的多糖浓度较高,而猪皮和鸡爪中的多糖提取效果较差,提取液中的多糖浓度较低。
这可能与不同材料的结构特点和多糖的溶解性有关。
在实际应用中,我们可以根据不同的需求选择不同的提取方法和材料,以获得更高质量的多糖提取物。
此外,我们还注意到,在实验过程中,使用超声波清洗机进行清洗可以有效去除样品表面的杂质,提高提取效果。
多糖提取实验设计流程
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多糖的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握多糖的提取方法;2. 熟悉多糖的检测原理和操作步骤;3. 通过实验了解多糖在生物体中的分布和功能。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物,广泛存在于动植物体内,具有多种生物活性。
本实验采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,该方法利用苯酚与多糖在酸性条件下发生缩合反应,生成蓝紫色化合物,通过比色法测定其含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:玉米淀粉、葡萄糖、纤维素酶、苯酚、硫酸、蒸馏水等;2. 仪器:恒温水浴锅、分光光度计、电子天平、移液器、试管等。
四、实验步骤1. 多糖提取:称取5g玉米淀粉,加入50mL蒸馏水,搅拌均匀,用纤维素酶处理30min,过滤,滤液即为多糖溶液;2. 标准曲线绘制:分别配制0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg/mL的多糖标准溶液。
取5mL标准溶液,加入5mL苯酚溶液和5mL硫酸溶液,混匀,在沸水浴中反应5min,取出冷却,于波长620nm处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,多糖浓度为横坐标绘制标准曲线;3. 样品测定:取5mL多糖溶液,按照步骤2的操作进行测定,从标准曲线上查出多糖浓度;4. 计算多糖含量:根据样品中多糖浓度和样品质量,计算多糖含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以吸光度为纵坐标,多糖浓度为横坐标绘制标准曲线,得到线性方程:y = 0.0038x + 0.0178,R² = 0.9987;2. 样品测定:按照实验步骤,测定样品中多糖含量,得到样品多糖浓度为0.05mg/mL;3. 计算多糖含量:根据样品中多糖浓度和样品质量,计算多糖含量为2.5mg。
六、实验结论本实验采用苯酚-硫酸法测定了玉米淀粉中的多糖含量,结果显示样品中多糖含量为2.5mg。
该方法操作简便、准确度高,适用于多糖含量的测定。
七、实验讨论1. 在多糖提取过程中,纤维素酶的添加有助于提高多糖的提取效率;2. 实验过程中,苯酚与硫酸的比例对测定结果有一定影响,需严格控制;3. 实验结果与理论值存在一定差异,可能是由于实验操作过程中的误差或样品本身纯度等因素所致。
多糖提取分离实验报告
一、实验目的1. 掌握多糖提取分离的基本原理和方法。
2. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能。
3. 通过实验,了解不同多糖的提取分离效果。
二、实验原理多糖是一类天然高分子化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等。
本实验采用水提醇沉法提取分离多糖,利用多糖在水中的溶解度与醇溶液中的溶解度差异,实现多糖的分离纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:香菇粉末、蒸馏水、95%乙醇、NaOH、HCl、无水硫酸钠、苯酚、硫酸等。
2. 实验仪器:电热恒温水浴锅、电子天平、离心机、超声波清洗器、旋转蒸发仪、层析缸、薄层层析板、显色剂等。
四、实验步骤1. 香菇多糖提取(1)称取4g香菇粉末,加入200mL蒸馏水,加热至80℃,保持2h。
(2)冷却至室温,加入适量的95%乙醇,静置过夜。
(3)离心分离,取上清液。
(4)将上清液加入适量的无水硫酸钠,静置过夜。
(5)离心分离,取沉淀。
2. 香菇多糖分离纯化(1)将沉淀溶解于适量蒸馏水中,加入适量的NaOH溶液,调节pH至7.0。
(2)加入适量的HCl溶液,调节pH至4.5。
(3)静置过夜,离心分离,取沉淀。
(4)将沉淀溶解于适量蒸馏水中,加入适量的95%乙醇,静置过夜。
(5)离心分离,取沉淀。
(6)将沉淀溶解于适量蒸馏水中,加入适量的苯酚,显色后进行薄层层析。
3. 香菇多糖鉴定(1)根据薄层层析结果,鉴定香菇多糖的纯度。
(2)根据苯酚-硫酸法测定香菇多糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 香菇多糖提取实验中,香菇多糖的提取率为8.50%,表明水提醇沉法能够有效提取香菇中的多糖。
2. 香菇多糖分离纯化通过调节pH和醇沉,成功分离纯化了香菇多糖,纯度达到90%以上。
3. 香菇多糖鉴定根据薄层层析结果,香菇多糖主要成分为β-葡聚糖。
苯酚-硫酸法测定香菇多糖的浓度为1.20mg/mL。
六、实验结论1. 本实验采用水提醇沉法成功提取分离了香菇多糖,提取率为8.50%,纯度达到90%以上。
红豆杉多糖提取实验方案
红豆杉多糖提取工艺实验方案学生姓名:学号:专业班级:指导教师:1.材料和方法:1. 1 原料红豆杉叶,. 烘干、粉碎,过200~300 目的筛子.1. 2 实验方法1. 2 . 1 红豆杉多糖提取工艺总流程红豆杉叶粉末————石油醚脱脂————风干————乙醇脱除醇溶性物质————风干————热水浸提————过滤或离心————滤液浓缩————醇沉————过滤或离心————醇沉物加水复溶————透析————真空冻干————红豆杉多糖1. 2. 2 热水浸提方法称取适量红豆杉粉末置于圆底烧瓶中. 按一定料水比取水,将水加热到浸提温度后倒入圆底烧瓶中,用恒温搅拌器保温并搅拌,回流浸提数小时,定时取样分析多糖浓度.1. 2. 3 总糖浓度测定苯酚-硫酸法[原理]多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
[试剂]1.浓硫酸:分析纯,95.5%2. 80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。
3. 6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。
(每次测定均需现配)4.标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖。
5. 15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。
6. 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。
7. 6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8. 6mol/L 盐酸[操作]1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置2 0分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。
多糖提取实验设计流程
食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等,其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多糖释放出来,从而提高了多糖的得率。
本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解,研究香菇多糖的最佳提取工艺,并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。
可以同步做三组对比试验:⑴采用水提,不加酶;⑵采用酶法提取;⑶采用酶空白(只加酶,不加蘑菇粉)。
由于酶中也含有少量的糖类成分,其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。
因此,在计算酶法提取多糖的效果时,要减去酶本身所引入的糖。
在确定最佳酶浓度时更要考虑。
一、实验流程:蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率式中:n一提取液稀释倍数;C一提取液中多糖的浓度(mg/mL);V一提取液体积(mL);m一蘑菇的质量(mg)。
测定时取三个平行样,结果数据为平行样的平均数值。
二、具体实验步骤:1、多糖标准曲线的绘制精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。
以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,并计算其标准曲线回归方程。
(1)精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得RSD。
(2)重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g,按“供试液的配制”和“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得多糖的平均含量,及RSD值。
2、单因素实验(1)水提法称取蘑菇粉末2g,加入适量水(最佳固液比为1:20),在50℃水中浸泡1h。
热水浸提法提取多糖实验步骤
热水浸提法提取多糖实验步骤1. 前言嘿,朋友们!今天咱们聊聊一个有趣又实用的实验——热水浸提法提取多糖。
你知道吗?多糖就像是植物里的小宝藏,能给我们的身体带来不少好处,比如增强免疫力、调节血糖等等。
听起来是不是很神奇?别着急,我们一步一步来,看看这个过程到底是怎么回事。
2. 准备材料2.1 你需要的东西首先,咱们得准备好实验的材料。
你需要一些干燥的植物,比如海藻、蘑菇或者玉米,这些都是提取多糖的好选择。
别忘了,准备一把刀,切割的时候可别把手割了哦!然后,准备一个容器,最好是耐高温的,像玻璃瓶什么的,另外还需要热水、过滤器和一些量具,哦,对了,还有个好心情,这个可不能少!2.2 让我们动手吧一切准备就绪,咱们就可以开始了。
先把干燥的植物材料切成小块,切的时候就像在切西瓜,心里想着“哇,快要出好东西了!”切好后,把它们放进准备好的容器里。
接下来,准备热水,这时候一定要注意,水温要高,但别烧开到冒泡,太热了可不利于提取哦。
3. 热水浸提3.1 浸泡时间把热水倒入容器,水量要刚好覆盖住植物材料,别让它们“淹死”了。
然后,咱们需要静静等待,这个过程就像等待一杯好茶泡出来一样,心里想着“快点,快点!”一般浸泡的时间在30分钟到2小时之间,时间长短可以根据你想提取的多糖种类来调整。
3.2 过滤与收集浸泡完成后,接下来就是过滤了!拿出过滤器,把浸泡后的液体慢慢倒出来,记得别急,慢慢来,免得洒了一地。
过滤完后,你会看到一杯清澈的液体,那可是你的劳动成果呀!这个液体里就含有丰富的多糖呢。
然后,你可以将过滤后的液体放在一个干净的容器里,静置一会儿,等沉淀物沉下去,再小心翼翼地倒掉上层液体,留下底部的沉淀物,这也是一种多糖的表现哦。
4. 实验总结4.1 观察与记录实验结束后,咱们得好好观察一下提取出来的液体,颜色、粘稠度都要记录下来。
嘿,别忘了,这可是科研的精神啊!这时可以想象一下,未来的你可能会在实验室里,进行更多的研究,甚至搞出新的产品,谁知道呢?4.2 好好利用最后,你可以将提取的多糖用于食物、保健品或者化妆品中,真的是一举多得哦!不仅对自己好,也可以和朋友们分享,变身“多糖大使”。
多糖的提取
多糖的提取蒽酮比色法,具体步骤1.仪器:电子天平,超声波清洗器,电热恒温水浴锅,抽滤设备,分光光度计,容量瓶,刻度吸管等2.试剂:(1)葡萄糖标准液:l00 µg/mL(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂:0.2 g蒽酮溶于100 mL浓H2SO4中。
当日配制使用。
二.操作步骤1.葡萄糖标准曲线的制作取7支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:管号1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液(ml)0.10.20.30.40.60.8蒸馏水(mL)10.90.80.70.60.40.2葡萄糖含量(µg)102030406080在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0mL,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖,以防蒸发。
自水浴沸腾起计时,准确煮沸l0 min,取出,用冰浴冷却至室温,在620 nm波长下以第一管为空白,迅速测其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量(µg)为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
2.植物样品中可溶性糖的提取:将样品粉碎,105 ºC烘干至恒重,精确称取1~5 g,置于50mL三角瓶中,加沸水25mL,加盖,超声提取10 min,冷却后过滤(抽滤),残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤(抽滤),滤液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。
3.稀释:吸取提取液2mL,置于另一50mL容量瓶中,以蒸馏水定容,摇匀。
4.测定:吸取1 mL已稀释的提取液于试管中,加入4.0 mL蒽酮试剂,平行三份;空白管以等量蒸馏水替代提取液。
以下操作同标准曲线制作。
根据A620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量(µg)。
三、结果处理:C × V总× D样品含糖量(%)= ————————————— × 100%W × V测× 106其中:C——在标准曲线上查出的糖含量(µg),V总——提取液总体积(mL),V测——测定时取用体积(mL),D——稀释倍数,W——样品重量(g),106——样品重量单位由g换算成µg的倍数可溶性蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝法一、原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。
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食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等,其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多糖释放出来,从而提高了多糖的得率。
本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解,研究香菇多糖的最佳提取工艺,并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。
可以同步做三组对比试验:⑴采用水提,不加酶;⑵采用酶法提取;⑶采用酶空白(只加酶,不加蘑菇粉)。
由于酶中也含有少量的糖类成分,其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。
因此,在计算酶法提取多糖的效果时,要减去酶本身所引入的糖。
在确定最佳酶浓度时更要考虑。
一、实验流程:蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率
式中:n一提取液稀释倍数;
C一提取液中多糖的浓度(mg/mL);
V一提取液体积(mL);
m一蘑菇的质量(mg)。
测定时取三个平行样,结果数据为平行样的平均数值。
二、具体实验步骤:
1、多糖标准曲线的绘制
精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。
以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,并计算其标准曲线回归方程。
(1)精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得RSD。
(2)重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g,按“供试液
的配制”和“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得多糖的平均含量,及RSD值。
2、单因素实验
(1)水提法
称取蘑菇粉末2g,加入适量水(最佳固液比为1:20),在50℃水中浸泡1h。
升温至100℃,提取2.5h。
将混合物离心、浓缩、乙醇沉淀,计算多糖提取率和纯度。
单因素选择范围
提取温度(℃) 固液比(W/V) 提取时间(h)
70 1:16 1h
80 1:18 1.5h
90 1:20 2h
100 1:22 2.5h
1:24 3h
(2)酶法提取
称取蘑菇粉末2g,加入适量水(最佳固液比为1:20),在50℃水中浸泡1h。
升温至90℃,提取0.5h。
冷却至40℃,加入酶浓度1%,提取液总体积为100ml,PH值5.0,酶解提取1h。
然后升温至90℃提取1h灭酶。
将混合物离心、浓缩、乙醇沉淀,计算多糖提取率和纯度。
单因素选择范围
酶浓度% 酶解温度℃PH值酶解时间h
0.25 30 3.5 0.5
0.5 35 4.0 1
0.75 40 4.5 2
1.0 45 5.0 3
1.25 50 5.5 4
1.5 55 6.0
实验所需药品:纤维素酶,果胶酶,葡萄糖,苯酚,浓硫酸,乙醇器材:100ml容量瓶,50ml容量瓶。