实验二--糖类的颜色反应
生物化学实验
⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。
2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮糖的特异反应。
因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。
糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。
本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。
它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。
实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。
碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。
脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。
常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。
脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。
故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。
I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。
⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。
加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。
实验二 检测生物组织中的糖类
实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P 18)一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。
如:葡萄糖+ Cu ( OH ) 2葡萄糖酸 + Cu 2O ↓(砖红色)+ H 2O ,即Cu ( OH ) 2被还原成 2O ,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸 (该反应式了解) 注意反应条件,水浴加热。
2.非还原糖:淀粉遇碘变蓝色。
另外蔗糖也不是还原糖,所以不能用甘蔗、甜菜什么的来做还原糖的实验。
因为它们富含的糖是蔗糖。
3.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
4.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用,产生紫色络合物。
) 三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因目中实在要用菜叶子了,记得有一个步骤叫做“脱色”)2.做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
我们用的蛋清液。
四、实验试剂1.斐林试剂(检测还原糖)甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液: 乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO 4溶液 2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液(检测脂肪) 3.双缩脲试剂(检测蛋白质)A 液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液B 液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO 4溶液4.其他试剂:体积分数为50%的酒精溶液(检测脂肪实验中用来洗去浮色);碘液(检测淀粉液);蒸馏水(制作标本时使用)五、方法步骤。
生物化学实验
生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。
然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。
思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
实验二--糖类的颜色反应
实验二--糖类的颜色反应
实验目的:
通过观察糖类与不同试剂发生的反应,探究不同糖类的颜色反应特点。
实验材料:
- 试剂:
- 苏丹红溶液
- 亚硝酸银溶液
- 比色皿
- 样品:
- 葡萄糖溶液
- 果糖溶液
- 蔗糖溶液
实验步骤:
1. 准备好比色皿和标注好的糖类溶液,每种糖类的溶液取适量放入不同的比色皿中。
2. 分别向不同的比色皿中滴加一滴苏丹红溶液。
3. 观察每个比色皿中的溶液变化,并记录下来。
若出现颜色变化或沉淀的形成,进行详细描述。
实验结果:
- 葡萄糖溶液:
- 添加苏丹红溶液后,溶液呈现橙红色,并出现一些悬浮物。
- 果糖溶液:
- 添加苏丹红溶液后,溶液呈现橙红色,有微弱的变化,但
没有悬浮物的形成。
- 蔗糖溶液:
- 添加苏丹红溶液后,溶液变为淡黄色,并没有悬浮物的形成。
实验结论:
- 葡萄糖溶液反应最显著,产生了橙红色的颜色变化和悬浮物
的形成。
- 果糖溶液反应较葡萄糖溶液弱,呈现微弱的橙红色变化,但
没有悬浮物的形成。
- 蔗糖溶液反应最弱,只有溶液的颜色变浅而没有悬浮物的形成。
实验原理解释:
苏丹红溶液在酸性条件下呈现橙红色。
不同的糖类与苏丹红的反应程度不同,可以通过颜色变化的观察来判断其反应性。
葡萄糖是单糖,具有还原性,与苏丹红溶液发生剧烈的反应,表现为明显的橙红色和悬浮物的形成。
果糖也是单糖,但其还原性较弱,所以反应较葡萄糖溶液弱。
蔗糖是双糖,不具有还原性,所以与苏丹红溶液的反应最弱,只有溶液颜色变浅的情况。
1糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)
糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)本次实验目的是了解鉴定糖和还原糖的原理以及方法,并通过实验操作予以验证。
2人一组,前1-18组1个实验室。
二、实验原理。
糖的鉴定:糖经浓无机酸处理,脱水产生糠醛或糠醛衍生物。
戊糖形成糠醛,己糖则形成羟甲基糠醛。
这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下,能与酚类化合物缩合生成有色物质。
与一元酚如α-萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。
与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质。
通常使用的无机酸为硫酸。
如用盐酸,则必须加热。
常用的酚类为α-萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等,有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。
还原糖和非还原糖的鉴别:含有自由醛基(-CHO)或酮基(>C=O)的单糖和二糖为还原糖。
在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸类化合物,此性质常用于检验糖的还原性,并且常成为测定还原糖含量的各种方法的依据。
三、实验内容本次实验一共采用了6种糖液作为测试糖液,2%葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖,1%淀粉溶液和1种未知糖液,每种糖液均有专门的移液管移取(贴有标签,有些实验可能只需加几滴,可以在移液管头部套上胶头滴加),不要弄混,所有试剂都有相应的移液管移取(大概4个组公用1套),用后请放回原位,方便别的同学使用。
实验包括2个部分,共7个实验。
(一)糖的呈色反应1.Molish反应(α-萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。
糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α-萘酚作用,形成红紫色复合物。
在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。
自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。
此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。
因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。
步骤:取6支已标号的试管,分别加入各种测试糖液lmL(约15滴),再各加入Molish 试剂2滴,摇匀。
生物化学实验
生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的精品文档,你值得期待掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。
然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。
思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
实验二糖类的颜色反应
实验二--糖类的颜色反应实验二--糖类的颜色反应一、实验目的1.学习和掌握糖类颜色反应的原理和实验操作方法。
2.通过实验观察不同糖类的颜色反应特点,加深对糖类性质的理解。
二、实验原理糖类物质分子结构中含有的羰基(C=O)和羟基(-OH)等官能团,在一定条件下可以与某些试剂发生化学反应,产生特定的颜色。
常见的糖类颜色反应有醛基的银镜反应、羟基的费林反应以及羧基的酸碱指示剂反应等。
三、实验步骤1.准备试剂和样品:本实验选用葡萄糖、果糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等常见糖类物质作为样品,同时准备硝酸银溶液、氢氧化钠溶液、硫酸铜溶液、费林试剂等试剂。
2.银镜反应:取5滴硝酸银溶液和5滴氢氧化钠溶液,混合均匀后,分别取少量不同糖类样品加入试管中,再滴加混合好的硝酸银-氢氧化钠溶液,观察各样品是否产生银镜。
记录实验结果。
3.费林反应:取5滴费林试剂A和5滴费林试剂B,混合均匀后,分别取少量不同糖类样品加入试管中,再滴加混合好的费林试剂,观察各样品是否发生颜色变化。
记录实验结果。
4.酸碱指示剂反应:取少量不同糖类样品分别加入试管中,再滴加硫酸铜溶液,观察各样品颜色变化。
记录实验结果。
四、实验结果与分析1.银镜反应:实验结果显示,葡萄糖、果糖和麦芽糖在银镜反应中表现出明显的银镜现象,说明这些糖类具有醛基;而淀粉和纤维素未观察到银镜现象,说明它们不含醛基。
2.费林反应:实验结果显示,果糖和麦芽糖在费林反应中呈现阳性反应,颜色发生变化;而葡萄糖、淀粉和纤维素在费林反应中未观察到颜色变化。
这说明果糖和麦芽糖属于还原糖,而其他三种糖属于非还原糖。
3.酸碱指示剂反应:实验结果显示,葡萄糖、果糖和麦芽糖在酸碱指示剂反应中呈现出不同的颜色变化;而淀粉和纤维素未观察到明显的颜色变化。
这说明前三种糖具有酸性或碱性基团,而其他两种糖则不具有。
综合以上实验结果,我们可以得出以下结论:1.葡萄糖、果糖和麦芽糖具有醛基,属于还原糖;淀粉和纤维素不具有醛基,属于非还原糖。
生物化学实验ppt-new全
淀粉在酸催化下加热,逐渐水解成分子较小的糖,最后水解 成葡萄糖,其过程如下:淀粉--各种糊精—麦芽糖—葡萄糖。淀 粉完全水解后,失去与碘的作用,同时出现单糖的还原性。
五、操作
1、RNA的提取 称取5g干酵母粉于100ml烧杯中,加入0.2%NaOH溶
液30ml,沸水浴加热30min,经常搅拌。冷却,加入乙酸 数滴,使提取液呈酸性(PH5-6,用试纸试之),离心1015min(1000r/min),取上清液,加入两倍体积的95%乙醇, 边加边搅拌。加毕,静置,待完全沉淀,离心5min (1000r/min),取沉淀物,沉淀物即为粗RNA,可作鉴 定和测定含量用。 2、鉴定
试剂
管号 0 1
2
4
6
2mg/ml卵清蛋白质/ml
0.0 0.3 0.6 1.2
1.8
蒸馏水/ml
3.0 2.7 2.4 1.8
1.2
双缩脲试剂/ml
2.0 2.0 2.0 2.0
2.0
充分混合,在540nm比色
蛋白质浓度/(mg/ml)
0.0 0.2 0.4 0.8
1.2
A540nm
需于显色后30min比色测定,30min后可能有雾状沉淀产生。各管由显色到比色的时间应尽 可能一致。
一、目的 掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
二、原理 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使 其沉淀,由此即可得到粗RNA制品。
用碱液提取的RNA有不同程度的降解。
实验二--糖类的颜色反应
实验⼆--糖类的颜⾊反应实验⼆糖类的颜⾊反应⼀、实验⽬的1.了解糖类某些颜⾊反应的原理。
2.学习应⽤糖的颜⾊反应鉴别糖类的⽅法。
⼆、实验原理1.α-萘酚反应(Molisch反应)原理糖在浓⽆机酸(硫酸、盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
因为糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2.间苯⼆酚反应(Seliwanoff反应)原理在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮糖的特异反应。
醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
在实验条件下蔗糖有可能⽔解⽽呈阳性反应。
三.材料与⽅法1.α-萘酚反应(Molisch反应)取5⽀试管,分别加⼊1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1mL。
再向5⽀试管中各加⼊2滴莫⽒试剂,充分混合。
斜执试管,沿管壁慢慢加⼊浓硫酸1mL,慢慢⽴起试管,切勿摇动。
浓硫酸在试液下形成两层。
在⼆液分界处有紫红⾊环出现。
观察、记录各管颜⾊。
2.间苯⼆酚反应(Seliwanoff反应)取3⽀试管,分别加⼊1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5ml。
再向各管分别加⼊塞⽒试剂5mL,混匀。
将3⽀试管同时放⼊沸⽔浴中,注意观察、记录各管颜⾊的变化及变化时间。
四.结果与分析表1表21.由表1可知,葡萄糖,果糖,蔗糖,淀粉,糠醛均可发⽣Molisch反应,但产⽣的紫环颜⾊不同,反应后试样的颜⾊也不同,其中糠醛的紫环颜⾊最深,且试样颜⾊为深棕接近⿊⾊。
加⼊浓硫酸后,糠醛溶液⽴刻发⽣变化,淀粉和蔗糖产⽣现象时间相当。
发⽣以上现象是因为糖类在浓硫酸作⽤下脱⽔形成糠醛及其衍⽣物,才能与α-萘酚反应,这需要⼀定的时间,不同种类的糖需要的时间不同,因此产⽣紫环现象的时间不同,⽽糠醛溶液可直接与α-萘酚反应,所以产⽣紫环现象的时间最短。
实验二糖类的颜色反应
实验二糖类的颜色反应一、实验目的:1、学习糖类的颜色反应原理;2、掌握几种糖类的颜色反应方法。
二、实验原理:糖类的颜色反应是糖类分析化学中最基本的方法之一,是通过一系列化学反应观察颜色的变化来定性、定量糖类的方法。
实验中常用的糖类的颜色反应有:Fehling试剂法、Benedict试剂法、Tollens试剂法、硫酸-菲林试剂法等方法。
Fehling试剂法:将Fehling试剂加热后,可以还原还原性物质,在加热试管中的葡萄糖等还原性物质可以被Fehling试剂氧化,使Fehling试剂生成红色沉淀。
这是一种定性反应。
Benedict试剂法:将Benedict试剂与鎏金菜籽酸或者其他还原物质加热混合,可以产生红色沉淀,这是一种定性反应。
Benedict试剂法可以进行定量测试饮料、药丸和血液中的葡萄糖含量。
Tollens试剂法:Tollens试剂是硝酸银(AgNO3)加氨水(NH4OH)混合物,在酒精碱中,沉淀可以被还原成银金属样层,可以用于定性还原性物质。
硫酸-菲林试剂法:将硫酸与菲林混合,加热后可以在试管里生成红色的糖类化合物。
硫酸-菲林试剂法只能用于检测存在羰基的且有一个可还原基的物质。
三、实验步骤:1、Fehling试剂法(1)、取两个Fehling试剂A和B,各取5ml到试管中。
(2)、将两瓶试剂放在沸水中加热至完全溶解。
(3)、加入15-20滴50g/L的葡萄糖溶液(5g/L的郎柿紫溶液可以增强色度)。
(4)、加热试管,用沸水浴将试管加热约1-2分钟。
(5)、观察试管中是否产生红色沉淀,红色沉淀表示存在还原性物质。
2、Benedict试剂法3、Tollens试剂法(3)、将试管摇匀。
4、硫酸-菲林试剂法(1)、取1ml的硫酸和1ml的菲林到试管中。
四、实验注意事项:1、实验过程中,试剂和试管须洁净,并防止污染。
2、加热过程中,应注意安全,不要让试管破裂,以免引起意外。
3、加热的时间要控制好,过久易使红色沉淀再溶解,过短不充分。
实验一 糖类的颜色反应
第十六章实验技术实验一糖类的颜色反应一、实验目的1.了解糖类某些颜色反应的原理。
2.学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、实验原理1.α-萘酚反应(Molisch反应)原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2.间苯二酚反应(Seliwanoff反应)原理在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮糖的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
三、器材1.试管及试管架2.滴管3.水浴锅四、试剂1.莫氏(Molisch)试剂:5% α-萘酚的酒精溶液,称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,并用此酒精使总体积达100mL,贮于棕色瓶内。
此试剂需新鲜配制。
2.塞氏(Seliwanoff)试剂:称取间苯二酚0.05g溶于30 mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100 mL,此试剂需新鲜配制。
3.1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于100mL蒸馏水中。
4.1%果糖溶液:称取果糖1g,溶于100mL蒸馏水中。
5.1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于100mL蒸馏水中。
6.1%淀粉溶液:称取可溶性淀粉1g与少量冷蒸馏水混合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅,最后以沸蒸馏水稀释至100mL。
7.0.1%糠醛溶液:称取糠醛0.1g,溶于100mL蒸馏水中。
8.浓硫酸500mL五、操作1.α-萘酚反应(Molisch反应)取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1.5mL。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
浓硫酸在试液下形成两层。
在二液分界处有紫红色环出现。
实验一-糖类的性质实验
实验一糖类的性质实验(一) 糖类的颜色反应一、目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应(一)Molisch反应1、原理糖在浓无机酸(硫酸,盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2、器材试管及试管架滴管3、试剂莫氏试剂1%葡萄糖溶液1%果糖溶液1%淀粉溶液0.1%糠醛溶液浓硫酸4、操作取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液内各1ML。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸1ML,慢慢立起试管,切勿摇动。
浓硫酸在试液下形成两层。
在二液分界处有紫红色环出现。
观察,记录各管颜色。
实验二糖的还原作用一、目的学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及其原理。
二、原理许多糖类由于分子中含有自由的醛基及酮基,故在碱性溶液中能将铜、铁等金属离子还原,同时糖类本身被氧化成糖酸及其他衍生物。
糖类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。
本实验进行糖类的还原作用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。
他们是含铜离子的碱性溶液,能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的氧化亚铜沉淀。
生成氧化亚铜沉淀的颜色之所以不同是由于在不同条件下产生的沉淀颗粒大小不同引起的,颗粒越小呈黄色,越大则呈红色。
三、器材试管及试管架竹试管架水浴锅电炉四试剂斐林试剂本尼迪克特试剂1%葡萄糖溶液1%果糖溶液1%蔗糖溶液1%麦芽糖溶液1%淀粉溶液五操作取5支试管,分别加入2ML斐林试剂,再向各试管分别加入1%葡萄糖、1%果糖、1%蔗糖溶液、1%麦芽糖溶液、1%淀粉溶液各1ML。
置水浴中加热数分钟,取出,冷却。
观察各管溶液的变化。
另取6支试管,用本尼迪克特试剂重复上述实验。
实验三氨基酸的分离鉴定----纸层析法一、目的通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法。
生物化学实验报告
实验一糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应一、实验目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应(一)α-萘酚反应1、原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100 mL,贮于棕色瓶内。
用前配制。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL1%淀粉溶液100 mL0.1%糠醛溶液100 mL浓硫酸 500 mL4、实验操作取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1 mL。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
倾斜试管,小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
观察记录各管颜色。
(二)间苯二酚反应1、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮醣的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:0.05%间苯二酚-盐酸溶液1000 mL,称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000 mL。
1%葡萄糖溶液100 mL1%果糖溶液100 mL1%蔗糖溶液100 mL4、实验操作取3试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 mL。
再向3支试管中各加入塞氏试剂5 mL,充分混合。
将试管同时放入沸水浴中,。
观察记录各管颜色。
(二)糖类的还原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的还原性质;2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。
糖类焰色反应总结
糖类焰色反应总结一、引言糖类是生命体内最重要的能量来源之一,也是生化反应的重要参与者。
为了研究糖类的性质和结构,科学家们经过长时间的研究和探索,发展出了多种方法和技术。
糖类焰色反应是其中的一种常用方法,通过该方法可以简单、快速地确定糖类的存在及其结构。
本文将对糖类焰色反应进行总结,包括反应原理、实验操作步骤、结果判断以及相关应用。
二、反应原理糖类焰色反应的原理是基于存在于糖类分子中的氧、氮、硫等元素,能够在高温下产生特定颜色的光谱吸收。
当糖类溶解于适当的试剂中并放置在热源上加热时,糖类中的元素被激发形成激发态,在返回基态时释放出光子。
这些光子的频率和波长与各种元素的能级结构有关,从而呈现出不同的颜色。
三、实验操作步骤1.准备样品:将待测试的糖类样品溶解于适当的溶剂中,制备成一定浓度的溶液。
2.准备试剂:根据不同的实验目的,选择适当的试剂。
常用的试剂包括硫酸、稀盐酸等。
3.加热反应:将糖类溶液与试剂混合后,取一部分溶液倒入焰色反应管中。
将焰色反应管缓缓加热,直至产生明显的焰色。
4.观察结果:观察焰色的颜色、亮度和持续时间,并做好记录。
5.结果判断:根据不同糖类的焰色反应特征,对结果进行判断。
6.清洗实验器材:实验结束后,及时清洗实验器材,防止残留物污染下一个实验。
四、结果判断不同的糖类在焰色反应中呈现出不同的特征,通过对焰色的观察和对比,可以初步判断出糖类的存在及其结构。
1.葡萄糖:在焰色反应中产生明亮的黄色火焰。
2.果糖:在焰色反应中产生黄棕色火焰,较葡萄糖的颜色偏暗。
3.麦芽糖:在焰色反应中产生暗红色火焰。
4.蔗糖:在焰色反应中不产生明显的颜色变化。
五、相关应用糖类焰色反应是一种快速、简便的实验方法,被广泛应用于以下领域:1.食品工业:用于检测食品中的糖类成分,判断其质量和纯度。
2.化妆品工业:用于鉴定化妆品中的糖类添加剂,确保产品的合法和安全。
3.药物研发:用于辅助药物研发过程中的结构分析和质量控制。
糖类的性质实验报告实验现象
糖类的性质实验报告实验现象糖类的性质实验报告实验现象引言:糖类是一类重要的有机化合物,广泛存在于自然界中。
它们不仅是人体能量的重要来源,也在食品工业中扮演着重要角色。
糖类的性质对于我们理解其结构和功能具有重要意义。
本实验旨在通过一系列实验,探究糖类的性质和反应现象。
实验一:糖的溶解性实验实验步骤:1. 取一小量蔗糖和葡萄糖分别加入两个试管中。
2. 向每个试管中加入相等体积的水。
3. 用搅拌棒充分搅拌,观察糖的溶解情况。
实验结果:蔗糖和葡萄糖都能够在水中溶解,形成透明溶液。
实验分析:糖类是极性物质,而水是一种极性溶剂,所以糖类能够在水中溶解。
溶解过程中,糖分子与水分子之间发生氢键相互作用,使糖分子逐渐分散在溶液中。
蔗糖和葡萄糖的溶解度都很高,说明它们与水之间的相互作用力较强。
实验二:糖的还原性实验实验步骤:1. 取一小量蔗糖和葡萄糖分别加入两个试管中。
2. 向每个试管中加入少量硫酸铜溶液。
3. 加热试管,观察溶液的变化。
实验结果:蔗糖溶液变为深蓝色,葡萄糖溶液变为红色。
实验分析:蔗糖和葡萄糖都具有还原性,能够将氧化态较高的金属离子还原为较低的氧化态。
在实验中,硫酸铜溶液中的Cu2+被蔗糖和葡萄糖还原为Cu+,导致溶液颜色的变化。
蔗糖的还原性较弱,所以溶液呈现深蓝色;而葡萄糖的还原性较强,所以溶液呈现红色。
实验三:糖的酸水解实验实验步骤:1. 取一小量蔗糖和葡萄糖分别加入两个试管中。
2. 向每个试管中加入少量稀硫酸。
3. 将试管放入沸水中加热,持续加热一段时间。
4. 加入适量氢氧化钠溶液,观察溶液的变化。
实验结果:蔗糖溶液变为棕色,葡萄糖溶液变为深棕色。
实验分析:蔗糖和葡萄糖在酸性条件下发生水解反应。
稀硫酸能够催化糖类分子中的羟基与酸中的氢离子反应,形成糖酸。
加热过程中,糖酸进一步分解,产生碳烟和有机酸。
最后,加入氢氧化钠溶液将酸中的氢离子中和,使溶液呈现棕色或深棕色。
结论:通过以上实验,我们可以得出以下结论:1. 糖类能够在水中溶解,形成透明溶液。
莫氏试剂实验报告
一、实验目的1. 理解莫氏试剂检测糖类的原理。
2. 学习莫氏试剂在糖类检测中的应用。
3. 掌握莫氏试剂检测糖类的操作方法。
二、实验原理莫氏试剂检测糖类的原理基于糖类在浓无机酸(如硫酸、盐酸)作用下,可以脱水生成糠醛及其衍生物。
这些糠醛衍生物能够与莫氏试剂中的-萘酚发生反应,生成紫红色物质。
由于糠醛及其衍生物对莫氏试剂反应均呈阳性,因此莫氏试剂可用于检测糖类,但该反应并非糖类的特异反应。
三、实验器材1. 试管及试管架2. 滴管3. 莫氏试剂:5% -萘酚的酒精溶液4. 1%葡萄糖溶液5. 1%果糖溶液6. 1%蔗糖溶液7. 1%淀粉溶液8. 0.1%糠醛溶液9. 浓硫酸四、实验步骤1. 准备实验材料,将1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各取1mL分别加入5支试管中。
2. 向每支试管中滴加2滴莫氏试剂,充分混合。
3. 沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
浓硫酸在试液下形成两层。
4. 观察并记录各试管中的颜色变化。
五、实验结果与分析1. 葡萄糖溶液:加入莫氏试剂和浓硫酸后,在二液分界处出现紫红色环。
2. 果糖溶液:加入莫氏试剂和浓硫酸后,在二液分界处出现紫红色环。
3. 蔗糖溶液:加入莫氏试剂和浓硫酸后,在二液分界处出现紫红色环。
4. 淀粉溶液:加入莫氏试剂和浓硫酸后,在二液分界处未出现紫红色环。
5. 糠醛溶液:加入莫氏试剂和浓硫酸后,在二液分界处出现紫红色环。
由实验结果可知,莫氏试剂可以检测出葡萄糖、果糖、蔗糖和糠醛,而对淀粉没有检测到颜色变化。
这表明莫氏试剂可以用于检测糖类,但并非所有糖类都能通过此方法检测出来。
六、实验结论1. 莫氏试剂可以用于检测糖类,但并非所有糖类都能通过此方法检测出来。
2. 莫氏试剂检测糖类的原理是糖类在浓无机酸作用下脱水生成糠醛及其衍生物,与莫氏试剂中的-萘酚反应生成紫红色物质。
3. 莫氏试剂检测糖类的操作简单,但需要注意安全,避免浓硫酸等腐蚀性试剂对人体造成伤害。
糖的呈色反应和还原糖的检验
实验1 糖的呈色反应和还原糖的检验一、实验目的1.学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。
2.了解鉴定还原糖的方法及其原理。
二、实验原理糖经浓无机酸处理,脱水产生糠醛或糠醛衍生物。
戊糖形成糠醛,己糖则形成羟甲基糠醛。
这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下,能与酚类化合物缩合生成有色物质。
与一元酚如α一萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。
与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质,反应式如下:通常使用的无机酸为硫酸。
如用盐酸,则必须加热。
常用的酚类为α一萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等,有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。
有人认为,用浓硫酸作为脱水剂时,形成有颜色的产物与酚核的磺化有关,见如下反应式;(一)糖的呈色反应1.Molish反应(α~萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。
糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α一萘酚作用,形成红紫色复合物。
在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。
自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。
此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。
因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。
2.蒽酮反应糖经浓酸水解,脱水生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10一酮一9,10一二氢蒽)反应生成蓝一绿色复合物。
3. Seliwanoff反应(间苯二酚反应)该反应是鉴定酮糖的特殊反应。
在酸作用下,己酮糖脱水生成羟甲基糠醛。
后者与间苯二酚结合生成鲜红色的化合物,反应迅速,仅需20—30s。
在同样条件下,醛糖形成羟甲基糠醛较慢。
只有糖浓度较高时或需要较长时间的煮沸,才给出微弱的阳性反应。
蔗糖被盐酸水解生成的果糖也能给出阳性反应。
4.Bial反应(甲基间苯二酚反应)戊糖与浓盐酸加热形成糠醛,在有Fe3+存在下,它与甲基间苯二酚(地衣酚)缩合,形成深蓝色的沉淀物。
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实验二糖类的颜色反应
一、实验目的
1.了解糖类某些颜色反应的原理。
2.学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、实验原理
1.α-萘酚反应(Molisch反应)原理
糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2.间苯二酚反应(Seliwanoff反应)原理
在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮糖的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
三.材料与方法
1.α-萘酚反应(Molisch反应)
取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
浓硫酸在试液下形成两层。
在二液分界处有紫红色环出现。
观察、记录各管颜色。
2.间苯二酚反应(Seliwanoff反应)
取3支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5ml。
再向各管分别加入塞氏试剂5mL,混匀。
将3支试管同时放入沸水浴中,注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。
四.结果与分析
表1
表2
1.由表1可知,葡萄糖,果糖,蔗糖,淀粉,糠醛均可发生Molisch
反应,但产生的紫环颜色不同,反应后试样的颜色也不同,其中糠醛的紫环颜色最深,且试样颜色为深棕接近黑色。
加入浓硫酸后,糠醛溶液立刻发生变化,淀粉和蔗糖产生现象时间相当。
发生以上现象是因为糖类在浓硫酸作用下脱水形成糠醛及其衍生物,才能与α-萘酚反应,这需要一定的时间,不同种类的糖需要的时间不同,因此产生紫环现象的时间不同,而糠醛溶液可直接与α-萘酚反应,所以产生紫环现象的时间最短。
且不同的糖性质不同,导致紫环的颜色也不同。
2.由表2可知,果糖溶液最先变红,蔗糖溶液出现红色的时间与果糖几乎相同,葡萄糖溶液变红时间最晚,且颜色最淡。
果糖是酮糖,在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质,因此果糖反应最快。
而蔗糖是二糖,可水解为酮糖。
葡萄糖是醛糖,醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
五.讨论与结论
Seliwanoff反应试验中,1%的果糖和蔗糖均在2分40秒左右出现红色,葡萄糖在4分钟左右变色。
前人所做试验中1%的果糖和蔗糖有在2分钟时开始变色,有在3分钟时开始变色,1%的葡萄糖有在3分时变色,有在4分钟时变色。
因此我所做的试验结果与前人相似。
但有些试验中加热时间延长到20分钟,分别记录2分钟,5分钟,10分钟,20分钟时溶液的颜色,发现在2分钟时果糖有黑色沉淀生成,其他溶液均无沉淀。
加热至10分钟后,溶液均变为棕色或黑色。
加
热时间应在1~5分钟为宜,试样浓度在0.5%~1%最适宜。
本次实验我做的基本正确,通过实验验证了α-萘酚反应和间苯二酚反应,了解了糖类颜色反应的原理,操作和现象。
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