实验动物基本知识及基本实验操作 实验方法 ppt课件

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小鼠实验的基本技术和方法ppt课件

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重。
小鼠皮下注射
小鼠尾静脉注射
• (4)腹腔注射给药法:小鼠的注射量为 0.1-0.2毫升/10克 。
• (5)肌肉注射给药法: • (6)脑内注射给药法:
小鼠腹腔注射
• (四)麻醉法 • 1、吸入麻醉法:常用麻醉剂为乙醚。 • 2、腹腔麻醉法:常用麻醉剂是戊巴比妥钠,
用生理盐水配成浓度为2%的溶液,用量为 0.023毫升/10克体重。
• (五)采血法 • 1、剪尾尖法: • 2、切割尾静脉采血法:
小鼠剪尾采血
• 3、眼部采血: • (1)眼眶后静脉窦采血 • (2)摘除眼球采血法:
小鼠内眦采血
• 4、心脏采血法 • (1)穿刺法:每次采血量为0.5-0.6ml。 • (2)开胸法 : • 5、断头采血法 :可采血0.8-1ml。
• 三、实验材料及标本 18-22克小鼠(每人一只)。
• 四、实验内容及方法 • (一)小鼠抓取固定方法
பைடு நூலகம்
小鼠保定技术
• (二)标记法 • 1、永久标记法: • 2、短期标记法:也称染色标记法 。
• (三)给药法 • (1)口服法: • (2)强制灌胃法:
小鼠灌胃
• 2、注射给药法 • (1)皮下注射给药法: • (2)皮内注射给药法: • (3)静脉注射给药法:剂量为0.05-0.1mg/10g体
• 一、实验目的 • (一)掌握小鼠抓、取、固定的基本方法。 • (二)熟悉鼠类的染色、标记的基本方法。 • (三)掌握鼠类的给药、麻醉的基本操作技术和
方法。 • (四)熟练掌握小鼠基本采血技术和方法。
• 二、实验用品 • 1ml注射器、5毫升注射器、针头、500毫升
烧杯、手术剪、镊子、止血钳、灌胃针头、 棉球、生理盐水、75%酒精等。

动物实验的基本技术操作方法幻灯片PPT

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一、动物实验的常用方法
6.移植法
一般是将动物的器官、组织或细胞进展相 互移植的一种方法。如骨髓移植时,将小 鼠A〔供体〕的骨髓注入到小鼠B的血液中 〔受体〕,很快可见脾结节化〔脾造血〕。 脾结节的数量反响了造血干细胞的多少, 由此可以观察干细胞的变化。动物各种组 织、器官的移植也是实验研究中常用的方 法。

物 编
1
234源自5678
9
10 11 12 13 14


机 数
16
22
77
94
39
49
54
43
54
82
17
37
93
23

归 组
B
B
A
B
A
A
B
A
B
B
A
A
A
A
四、实验动物的随机分组方法
结果列入A组的动物有8只,列入B组的动物 有6只。如要使两组相等,须将A组减少一只, 划入B组。应把哪一只小鼠划入B组,仍可用 随机数字表,在上述抄录的14个数后面再抄 录一个数字为78,此数以8除之,因为归入A 组的小鼠有8只,故以8除,得余数6。于是把 第6个A〔即编写为第12号的小鼠〕划给B组。
一、动物实验的常用方法
动物实验方法是多种多样的,在医学的各 个领域内都有其不同的应用,其中一些根 本方法都是共同性的,如动物的选择、抓 取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采 尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何 种课题的医学研究都要用这套根本方法, 因此,动物实验根本方法,已成为医学科 技工作者必须掌握的一项根本功。
经过这样调整,两组小鼠的分配如下:
A组 3 5 6 8 11 13 14 B组 1 2 4 12 7 9 10

试验动物操作技术 ppt课件

试验动物操作技术  ppt课件
试管,大剪刀,脱脂消毒棉球,帆
布手套,代谢笼,大鼠小鼠固定盒。
实验试剂
• 苦味酸饱和酒精溶液,3%戊比 妥钠(30mg/ml)。
实验动物
• 小鼠,家兔
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实验内容和方法
一、实验动物的捉拿与固定 二 、实验动物的标记与性别鉴定 三 、实验动物的给药方法 四、实验动物的取血方法 五、实验动物的处死方法
c) 右手持毛细管(0.5~1.0mm),与鼠面呈450夹角, 从内眦部正中稍下方刺入沿内下眼眶壁,向眼球后 推进2~3mm,旋转毛细管,切开静脉丛,血液自 动进入毛细管;
d)拔出毛细管,放松手压力, 出血可自然停止。小鼠每次采 血量约为0.2-0.3mL。
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家兔
心脏取血:
1)将动物仰卧在兔板上,剪去心前区毛; 2)用碘酒、酒精消毒皮肤。用左手触摸胸骨左缘第3~4肋间隙, 选择心脏跳动最明显处作穿刺点; 3)右手持注射器,将针头插入胸腔,通过针头感到心脏跳动时, 再将针头刺进心脏,然后抽出血液。
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实验动物的性别鉴别
药理学实验常用的动物中,较大的动物(如家兔、 猫、犬等)可以从生殖器分辨其性别,而较小的动 物(如小白鼠、大白鼠、豚鼠等)的性别鉴别,通 常以肛门与生殖孔之间的距离来判断,距离近者 为雌性,距离远者为雄性。
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二 、实验动物的给药方法
小鼠
(1)灌胃:
用左手固定鼠,右手持灌胃器(安好灌胃针并已吸好 药物)。 将灌胃针从鼠的嘴角插入口腔,压迫鼠的头部,使口 腔和食管成一直线。
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家兔的捉拿
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11Βιβλιοθήκη 家兔的固定需要进行手术时,可将家兔固定在兔实验台上,四肢 固定,门齿用细绳栓住,固定在实验台的铁柱上。

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六、实验动物的给药方法
• 经口给药法 • 注射法 • 其它途径给药方法 1. 呼吸道给药 2. 皮肤给药 3. 脊髓腔内给药 4. 脑内给药 5. 直肠内给药 6. 关节腔内给药
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• 经口给药 1. 拌入饲料、饮水中自由摄取
优点:省人力 缺点:因个体差异,摄入量不等 2. 灌胃 优点:能准确定量 缺点:给动物造成一定的痛苦,需 熟练掌握技术
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大小鼠灌胃注意点
1. 用灌胃针。
2. 从嘴角处插入,到达咽部后 改变灌胃针的方向,使其与 食管的走向一致,然后顺利 插入。
3. 成年大鼠由于体型较大,不 易保定。办法:
1)一人保定,一人灌胃
2)操作者抓取后,将大鼠尾部按 在自己的胸部,达到固定尾 部的目的,然后灌胃。
灌胃量:小鼠0.2-0.4ml/10克,
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按体重分层随机区组分组
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三、动物编号常用的标记方法
适用需要个体识别的实验 1. 染料标记法:适合白色被毛的动物,如小鼠
、大鼠、豚鼠、兔等。 黄色:常用3~5%苦味酸溶液 红色:常用0.5%中性红溶液 咖啡色: 2%硝酸银溶液 黑色:煤焦油酒精溶液
优点:简单、易识别 缺点:长期易退色;不能编大号码。
停止吸入后很快苏醒
• 缺点:
需要一定的仪器设备,
注意自身防护。
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大小鼠麻醉法
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(2)注射麻醉法 注射麻醉法是使用非挥发性麻醉药进行全麻
的方法。在动物实验中比较常用。 常用麻醉药: 戊巴比妥钠 硫喷妥钠 氯氨酮 乌拉坦 大动物:静脉注射或肌肉注射 啮齿类动物:腹腔注射

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注意点: 抓取小鼠时动作要 迅速,要轻 防止被小鼠转过头 咬,抓其颈后皮肤要 多 如果被பைடு நூலகம்,应立即 挤出血液,清水冲洗
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2、性别的判定
未成熟鼠:生殖器发 育不明显,肛门与生 殖器之间的距离来区 分。远——♂、近— —♀。
成年鼠:雄性卧位可 见睾丸,雌性可见腹 部有5对乳头。
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1
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3、小鼠的给药操作
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1、抓取和固定: 抓取:习惯用右手者,
首先用右手从笼盒内将 小鼠尾中部或基部抓住 (不可抓尾尖),并提起或 放在左手上。
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固定
先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉。 7
在鼠向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳 和颈部皮肤。
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将小鼠置于左手掌心,无名指和小指夹其背部皮
肤和尾部,即可将小鼠完全固定。
(1)灌胃
左手固定小鼠使其头部向上,右 手持灌胃器。头后仰使口腔与食 道成一直线,将灌胃针沿一侧口 角进针,紧贴咽后壁慢慢插入食 道滑入动物的胃内,进针2/3后灌 生理盐水0.5ml。
注意事项:
抓取老鼠时应是鼠成竖直线
灌胃成功时,所遇阻力较小。若感到阻 力或动物挣扎时,应立即停止进针或将 针拔出,以免损伤或穿破食道以及误入 气管。
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穿刺前,碘伏消毒眼周皮毛,左手固定小鼠,右手穿刺。固 定小鼠的方式如照片所示:应让眼球凸出,这样才能保证在 穿刺时不会使小鼠致盲,同时达到压迫阻止静脉回流的目的。
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事先准备好毛细玻璃管(用手折断,我个人习惯用4厘米长左右的),玻璃管 平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内,此时左手微微顺时针旋 转,使小鼠头部相对位置微向右下偏转,即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方 向的,这样做可进一步避免小鼠失明。如上操作时,右手及毛细管保持不动。 当小鼠头部位置调整妥当时,毛细玻璃管刺入,这个动作应稳且迅速。一般情 况下,即会有血液流出,此时可快速拧搓毛细管,进一步破坏内眦静脉丛,加 26

动物实验基本操作方法课件

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(五)静脉注射 ⒈大、小鼠静脉注射 常用尾静脉注射。
大、小鼠尾静脉共有3根(左、中、右),一般常选用两侧的静脉。注射前, 先把动物固定在暴露尾部的鼠尾固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等 物代替),拔去尾部静脉走向的毛,置鼠尾于45~50℃的温水中浸泡几分 钟或用75%酒精棉球反复擦拭,以达到消毒、血管扩张及软化表皮角质 的目的。开始注药时宜少量且缓慢,仔细观察,如无阻力,表示针头已 进入静脉,同时可见静脉血液被注射进去的药液向前推进。如出现白色 皮丘说明未刺人血管,应拔出针头重新穿刺。注射完,取一棉球或纱布 用力按住注射部位并轻轻揉动。如需反复注射,应尽量从尾的末端开始, 另外,左右两根血管可交换选择使用。
4.局部浸润麻醉:沿手术切口逐层注射局部麻醉药,阻滞组 织中的神经末梢。常用药为普鲁卡因。
5.椎管内麻醉:在椎管内注射麻醉药,阻滞脊神经的传导, 使其支配的区域无疼痛。常适用于大型动物(如猪、马、牛、羊 等),常用药为普鲁卡因、可卡因等。
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三、动物麻醉的注意事项
1.有些麻醉药物,如乙醚,是挥发性很强的液体,易燃易 爆,使用时应远离火源。平时应装在棕色玻璃瓶中,储存阴 凉处,不宜放在冰箱中,以免遇电火花而引起爆炸。
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五、犬、猫等的抓取与固定
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六、实验动物的编号与标记方法
在动物实验中,必须对实验动物进行编号、标记以示区别。 标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、易认和适用的要 求,现介绍几种常用的标记方法。 1.染色法:染色法是用毛笔或棉签蘸取有色化学染料, 在实验动物体表不同部位涂上斑点,以示不同编号。 编号的一般原则是:“先左后右,先上后下。”
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(一)实验动物的种类。
大鼠(Rat )
大鼠应用于生理学、药理学、免疫学,内分泌学、神经 生理、营养学、传染病、肿瘤和肝外科等的研究。
(一)实验动物的种类。
豚鼠(Guinea pig )
常用于免疫学、微生物学、传染病学、听觉生理、实验性 坏血症等研究。
(一)实验动物的种类。
家兔(Rabbit )
敏感性:幼年>老年>成年
氯丙嗪 麦角新碱 降压药
10~28周龄小鼠 老年小鼠
血糖升高 血糖降低
5~6周龄的雄性大鼠 5~6周龄的雌性大鼠
有镇痛效果 无镇痛效果
动物血压高 动物血压低
降压 不降压
有些犬因饥饿、创伤等原因尚未正式做休克实验时, 即已进入休克
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 动物的捉拿、固定
• 动物性别的辨别
• 实验动物的编号
• 常用给药方法
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 蟾蜍
A 图3-2-1 青蛙(或蟾蜍)捉拿法
B 图3-2-2 青蛙(或蟾蜍)固定法
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 小鼠
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 大鼠、豚鼠
• 家兔
A
无特殊病原体动物(Specific pathogens free animal, SPF动物) SPF动物又称三级动物,除不带有普通动 物、清洁动物应排除的病原体外,还应排除有潜在感 染或条件性致病的病原体,以及对实验干扰大的病原。
无 菌 动 物 ( Germfree animals,GF) 和 悉 生 动 物 (Gnotobiotic animals,GN) 四级动物。无菌动物是 指采用当前的技术手段无法在动物体表、体内检出一 切其他生物体。
两种极端的个体。
(二)实验动物的分类
2.按微生物学分类
普通动物(Conventional animals ,CV) 又称一级动 物,是微生物控制要求中最低的一个级别的动物, 要求不带有动物烈性传染病和人畜共患病原体 。
清洁动物(Clean animals ,CL) 又称二级动物,除 不带有普通动物应排除的病原体外,还不应携带对动 物危害大和对科学实验干扰大的病原体。
实验动物品系的选择 同一种属动物的不同品系,对 同一刺激的反应也有很大差异。
例如:DBA/2小鼠100%的可发生听源性癫痫发作; 而C57BL小鼠根本不出现这种反应
实验动个体的选择 同一品系的实验动物,对同一刺 激物反应存在着个体差异。年龄、体重、性别、生理 状态和健康情况不同,往往导致对同一刺激的不同结 果。
实验动物基本知识及基本实验 操作 实验方法
— 熟练的技术是实验成功的基础
一、 实验动物(experimental animal)
实验动物基本知识及基本实验操作 实验方法
实验动物是生命科学研究最重要的和 不可替代的实验材料。实验动物和动物实 验是研究包括人类在内的生命活动及其疾 病防治规律的基本手段。
常用于基础医学、药理、毒理学、实验外科学、行为学、 肿瘤学等方面研究
(一)实验动物的种类。
猪(Pig)
常应用于皮肤烧伤、肿瘤学、免疫学、心血管及糖尿病、遗 传性和营养性疾病、移植、外科手术等方面的研究
(一)实验动物的种类。
猴(Monkey)
主要用于传染病学、 药理学和毒理学、 生殖生理、口腔医 学)营养、代谢、 行为学和高级神经 活动研究及老年病、 器官移植、眼科、 内分泌病和畸胎学、 肿瘤学
突变品系 在育种过程中,由于单个基因的突变, 或将某个基因导入,或通过多次回交“留种”,而建 立一 个同类突变品系,此类个体中有具同样遗传缺 陷或病态。
非纯系 即一般任意交配繁殖的杂种动物。杂种动 物具有旺盛的生命力,适应性强,繁殖率高,生长快, 易于饲养管理。个体差异大,反应性不规则,实验结
果的重复性差。但其中包含有最敏感的与最不敏感 的
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
经消化道给药法
自动摄取法 喂药法
图3-2-9 小鼠灌胃法
灌胃给药法 经直肠给药
胃管 开口器
常用于免疫学、肿瘤、实验生理学、生殖生理、遗传 性疾病等的方面的研究,制造生物制品。
(一)实验动物的种类。
猫(Cat)
猫的神经系统和循环系统较发达,与人很相似。常用于神 经、循环和呼吸方面的实验。
(一)实验动物的种类。
犬(Dog )
在以犬为 实验动物 的研究成 果中,只 有应用 Beagle 才 能被国际 公认。
(三)实验动物的种、系选择。
实验动物的种属选择 应注意影响动物实验效果的 各种因素。尽可能选择其结构、功能和代谢特点接近 于人类的动物,不同种属的动物对于同一刺激的反应 也不同。
例如,过敏反应或变态反应的研究宜选用豚鼠,因 为豚鼠易于致敏。因家兔体温变化灵敏,故常用于 发热、热原检定、解热药和过热的实验。狗、大鼠、 家兔常用于高血压的研究。
(一)实验动物的种类。
蟾蜍(Toad)
雄蟾
婚垫
雄蟾
雌蟾
蟾蜍属两栖动物,其一些基本生命活动与哺乳动物近似,其 离体组织和器官所需的生理环境比较简单 (无须供氧和恒温)。
蟾蜍常用于神经生理、肌肉生理、心脏生理,微循环、水肿等 实验。
(一)实验动物的种类。
小鼠(Mouse )
小鼠被广泛的用于生物学、医学、兽医学、生理学、遗传学、药理、 毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学。
B
图3-2-4 大鼠和豚鼠的捉拿和固定
图3-2-5 兔捉拿方法
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 蟾蜍
• 小白鼠 • 家兔


图3-2-7 小鼠性别的特征
实验动物基本知识及基本实验操作 实 验方法
• 染色法 • 挂牌法
4
1
7
2
5
8
3
9 6
40

60
90
图3-2-8小鼠背部的编号方法
(二)实验动物的分类
1.按遗传学特征分类
近交系 近交系一般是指采用20代以上全同胞兄 弟妹妹或亲子(子女与年青的父母)进行交配,而 培养出来的遗传基因纯化的品系。(F=98.6% )
杂交一代 由两个近交系杂交产生的子一代称为杂 交一代。它既有近交系动物的特点,又获得了杂交优 势。
封闭群 在同一血缘品系内,不以近交方式,而进 行随机交配繁衍,经五年以上育成的相对维持同一血 缘关系的种群。
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