植物原花青素(OPC)含量检测试剂盒说明书 微量法
花青素检测内容和方法
花青素检测内容和方法花青素（Anthocyanins）是一类广泛存在于植物中的天然色素，具有丰富的抗氧化和抗炎特性。
以下是关于花青素检测的50条内容和方法：1. 花青素的检测可以通过分光光度法进行，该方法通过测量样品吸收特定波长的光来确定花青素的含量。
2. 除了分光光度法，高效液相色谱法（HPLC）也是一种常用的花青素检测方法，可以准确测量不同类型的花青素。
3. 在花青素检测中，常用的溶剂包括甲醇、乙腈和水，这些溶剂可以帮助提取样品中的花青素。
4. 还可以使用质谱法（MS）结合色谱法进行花青素的鉴定和定量分析，能够提高检测的精准度和准确性。
5. 花青素的含量可以通过比色法进行测定，该方法通过添加试剂产生有色产物来测量花青素的浓度。
6. 采用高性能液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）可以对花青素进行定性和定量分析，具有高灵敏度和选择性。
7. 使用紫外-可见分光光度法（UV-Vis）可测定花青素的吸光度，从而推算花青素的浓度。
8. 考虑到植物样品中可能存在其他干扰物质，需要对样品进行预处理，如蛋白质去除和净化，以提高花青素的检测灵敏度和准确性。
9. 对于不同环境下的花青素含量变化调查，可以通过原子吸收光谱分析（AAS）确定植物中金属离子对花青素生成的影响。
10. 考虑到花青素的稳定性，检测前样品处理和存储条件至关重要，如低温保存、光照避免、氧气隔离等。
11. 比较两个或多个样品中花青素的含量，可以通过内标法（Internal standard method）进行定量，以减小实验误差。
12. 回收率试验可以通过添加已知浓度的花青素作为标准品，验证提取方法的效果和准确性。
13. 花青素的结构分析可以使用质谱联用色谱技术（LC-MS）进行，以确定不同花青素的分子结构和质量。
14. 对于不同类型的花青素，还可以使用凝胶层析法（Gel Filtration Chromatography）进行分离和检测。
15. 非离子表面活性剂（Non-ionic surfactants）可以在样品制备中用来改善花青素的提取率和稳定性。
原花色素的提取及测定
原花色素的提取及测定一、实验原理原花色素，也称原花青素，是一类从植物中分离得到的在热酸条件下能产生花色素的多酚化合物，它既存在于多种水果的皮，核和果肉中，如葡萄，苹果，山楂等。
也存在于如黒荆树，马尾松，思茅松，落叶松等的皮和叶中。
原花色素属于生物类黄酮,它们是由不同数量的儿茶素或表儿茶素聚合而成，最简单的原花色素是儿茶素的二聚体，此外还有三聚体，四聚体等。
依据聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体，而五聚体以上的称为高聚体。
从植物中提取原花色素的方法一般有两种，分别是用水抽提或用乙醇抽提。
其抽提物为低聚物，称之为低聚原花色素（OPC）。
原花色素具有很强的抗氧化作用，能清除人体内过剩的自由基，提高人体的免疫力，可作为新型的抗氧化剂用于医药、保健、食品等领域。
利用低聚原花色素溶于水的特点，用热水煮沸抽提原花色素，再用大孔吸附树脂吸附、洗脱得到原花色素。
D101树脂是一种球状、非极性交联聚合物吸附剂，具有相当大的比表面和适当的孔径，对皂甙类、黄酮类、生物碱等物质有特殊的选择性，适用于从水溶液中提取类似性质的有机物质。
原花色素（I）的4~8连接键很不稳定，易在酸作用下打开。
反应过程（以二聚原花色素为例）是：在质子进攻下单元C8（D）生成碳正离子（II），4~8键裂开，下部单元形成（-）-表儿茶素（III），上部单元成为碳正离子（IV），失去一个质子成为黄-3-烯-醇（V），在有氧条件下失去C2上的氢，被氧化成花色素（VI），反应还生成相应的醚（VII）。
若采用正丁醇溶剂可防止醚的形成。
（如下图所示）在一定浓度范围内，原花色素的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的原花色素含量。
但盐酸-正丁醇法受原花色素的结构影响较大，对于低聚度原花色素及儿茶素等单体反应不灵敏。
二、实验器材新鲜山楂，烧杯，玻璃层析柱，大孔吸附树脂D-101，具塞试管*9，移液枪，紫外分光光度计，水浴锅；三、实验试剂60%乙醇，95%乙醇，原花色素标准品(1.0mg/mL)，HCl-正丁醇，2%硫酸铁铵，2.0mol/L HCl；四、实验步骤Ⅰ原花色素的制备1、称取新鲜山楂10.0g，剪成块状，置入锥形瓶中，加入40.0mL蒸馏水，沸水浴30min，间期混匀。
花青素检测内容和方法
花青素检测内容和方法花青素检测是一项重要的化学分析技术，用于测定植物和食品中的花青素含量。
花青素是一类常见的天然色素，具有抗氧化和抗炎作用，因此对其含量进行快速和准确的测定具有重要的科学和应用意义。
以下为50条关于花青素检测内容和方法的详细描述：1. 花青素是一类具有紫、蓝、红等颜色的天然色素，主要存在于植物的花朵、果实和叶子中。
2. 花青素的主要类型包括花色素苷、原花青素和异花青素等，它们在植物中起着色素和抗氧化作用。
3. 花青素检测的方法包括分光光度法、高效液相色谱法、质谱法等，常用的是分光光度法和高效液相色谱法。
4. 分光光度法是利用物质吸收特定波长的光线进行测定，通过比色法或比浊法来测定花青素的含量。
5. 高效液相色谱法是利用高效液相色谱仪进行测定，通过分离和检测样品中的花青素成分来计算含量。
6. 质谱法是利用质谱仪进行测定，通过记录花青素分子的质荷比来确定其含量。
7. 花青素检测常用的标准曲线方法是通过不同浓度的标准品制备标准曲线，再根据待测样品吸光度的测定值来计算含量。
8. 花青素的提取方法包括有机溶剂提取、酸碱水提取、超声波提取等，不同样品可选择合适的提取方法。
9. 有机溶剂提取是利用乙醇、丙酮等有机溶剂将花青素从植物组织中提取出来，然后通过浓缩和干燥得到提取物。
10. 酸碱水提取是利用酸性或碱性水溶液将花青素从植物组织中提取出来，可以有效保留花青素的天然结构。
11. 超声波提取是利用超声波功率促使样品中的花青素溶解在有机溶剂或水中，提高了提取效率。
12. 花青素的测定结果可根据测定方法的不同而有所差异，因此需要在同一实验条件下进行多次重复测定来确保结果的准确性。
13. 在花青素检测过程中，可能会受到样品中其他化合物的干扰，因此需要进行干扰检查和修正。
14. 花青素检测结果可以用于评价植物的品质、食品的营养价值和天然色素的应用价值。
15. 花青素检测在食品工业中具有重要的应用，如在果汁、酒类、饮料等产品中进行质量控制。
原花青素的含量测定方法
原花青素的含量测定方法原花青素含量思路：主要采用紫外分光光度法测定火棘果提取液中原花青素含量。
通过在特定的波长或某一范围的波长下，测定待测物品的吸光度，近而对原花青素进行定量分析。
原花青素(procyanidins，简称PC)是植物中广泛存在的一类属于双黄酮衍生物的天然多化合物，原花青素具有极强的抗氧化特性，一般存在于植物的果实、种子、花和皮中，在葡萄、山楂、花生、银杏、白桦树、松树等植物中的含量都很丰富。
在原花青素各种不同聚合体中以二聚体的抗氧化能力最强．原花青素具有多种生物活性，能防治多种疾病，具有高效、低毒、高生物利用率等特点，在植物中的主要作用是保护植物中易被氧化的成分，在人体内的抗氧化和清除自由基的能力是V-E50 倍，并且还具有保护心血管、预防高血压、抗肿瘤、抗辐射、抗突变及美容等作用．1.实验原理朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时，溶液的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸收介质厚度l(吸收光程)的函数。
比耳的结论是，当用适当波长的单色光照射一固定液层厚度的均匀溶液时，A与C成正比，其数学表达式为:(此即称为比耳定律，k称为比例系数）当C采用摩尔浓度mol/L时，吸收定律表达为:(ε称摩尔吸光系数，单位为)2.材料和仪器主要试剂：火棘果提取液，原花青素标样，盐酸正丁醇溶液（量取95mL 正丁醇，加入5mL 浓盐酸，混匀）、NH4Fe(SO4)2、95%乙醇。
主要仪器：UV2100 型紫外分光光度计、恒温水浴锅。
3.实验步骤a.标准曲线的制备:准确称取原花青素标准样品0.0504g，用95% 乙醇溶解并定容于100mL 容量瓶中，所得浓度为5.04mg/mL 作标样。
吸取标样溶液0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3mL 分别于25mL 具塞试管中，加95%乙醇定容为3mL, 然后分别加入0.2mL 2％NH4Fe(SO4)2 溶液和6mL盐酸正丁醇溶液，盖塞，摇匀，于95℃的水浴中加热反应40min 取出，于冷水中迅速冷却，溶液显红色，以0mL 溶液作为空白对照，于546nm 处测定其吸光度。
原花青素功效成分及卫生指标检验规范
功效成分及卫生指标检验规范功效成分及卫生指标检验规范1 主题内容和适用范围1.1 本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指标的检验项目和方法。
1.2 本规范适用于保健食品的检验受理、项目的确定和方法的选择。
2 基本要求2.1 凡保健食品，必须符合"保健食品通用卫生要求"，该"要求"所列的各项目必须按规定执行。
附表1所列检测项目是对"保健食品通用卫生要求"补充规定。
2.2 保健食品中使用的添加剂必须符合＂GB2760食品添加剂使用卫生标准＂规定的品种名单。
检测机构根据产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。
2.3 凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用的有机溶剂要符合GB2760附录D食品工业用加工助剂推荐名单要求。
2.4 保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。
附表2所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。
2.5 保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。
2.6 功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择国家标准、卫生部部颁标准、行业标准以及国际上权威分析方法进行测定。
2.7 在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效成分或特征成分的检测方法及检测所需的标准品对照品及特殊试剂均由申报单位提供，并说明其产品中功效成分或特征成分分析方法的来源。
如属自主开发研究的分析方法，需提供方法学研究的相关资料，同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组（中国疾病预防控制中心营养与食品安全所）备案，必要时卫生部将组织方法学验证，其费用由申报单位承担。
2.8 检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。
植物花色苷含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
植物花色苷含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1380规格：50T/24S产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：花色苷是一类可食用的易溶于水等溶剂的天然色素。
花色苷使植物呈现多彩的颜色，本身更具有多种保健作用，因而在天然食用色素、保健品和医药行业都有着广阔的应用前景。
根据花色苷在不同pH下的结构性质测定花色苷含量，在pH为1时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当pH 为4.5时，花色苷转变为无色查尔酮形式在530nm处无吸收峰，通过测定不同pH下的530nm和700nm处的吸光度值计算样本中花色苷的含量。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理：按照样品质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g样品，加入1mL提取液），充分匀浆后转移到EP管中，封口膜封口防止挥发，60℃浸提30min，期间可震荡数次，提取后提取液定容至1mL。
12000rpm，常温离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤：（1）可见分光光度计预热30min，蒸馏水调零。
（2）加样表：试剂名称（μL）测定管1测定管2样品100100试剂一900-试剂二-900充分混匀后测定测定管1和测定管2分别在530nm和700nm处的吸光度，测定管1在530nm和700nm处的吸光值记为A1、A1’，测定管2在530nm和700nm处的吸光值记为A2、A2’，计算ΔA=（A1-A1’）-（A2-A2’）。
三、花色苷含量计算：1、按样本鲜重计算：花色苷含量（μmol/g鲜重）=[ΔA÷(ε×d)×103×F]×V提取÷W=0.037×ΔA×F÷W。
原花青素(OPC)含量检测试剂盒说明书 (NM-W-0118 微量法100T48S)
一、产品简介：原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
在酸性条件下，植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值可计算原花青素的含量。
二、试剂盒组分与配制：三、需自备的仪器和用品：酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、甲醇和蒸馏水。
四、操作步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、预实验样本制备①组织样本：称取0.1g样本，加入1mL提取液进行匀浆，用超声法进行提取（功率300W，温度25℃，时间30min），12000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1：5~10的比例进行提取。
②细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10）：提取液（mL）为500~1000：1的比例进行提取。
③液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
2、标准溶液的配制：把10mg/mL标准品母液用提取液稀释成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL 的标准溶液备用。
3、预实验上机操作：①酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm。
②操作表：4、正式实验：①若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将待测样本适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的W和D 代入公式计算；②确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；③正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。
测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1
香草醛法测定原花青素的含量说明：原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响，以乙酸为溶剂，香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物，由红色产物吸光度测定原花青素含量。
通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件，比色条件为硫酸浓度30%，香草醛浓度1%，反应T为30℃，反应时间为30分钟。
以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。
一、器材/试剂紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平儿茶素标准品（浓度＞＝98%）；香草醛 ( 分析纯) ；硫酸 ( 分析纯) ；冰乙酸 ( 分析纯) ；实验用水为二级反渗透去离子水。
二、实验步骤1.配制试剂( 1 )配制儿茶素标准品溶液：称取一定量的儿茶素标准品，分别用去离子水定容至一定体积，配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液；( 2 )配制香草醛乙酸溶液：称取一定量的香草醛，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为1 ％；( 3 )配制硫酸乙酸溶液：量取一定体积的浓硫酸，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为3 0 ％的硫酸乙酸溶液。
（4）样品溶液：原花青素溶液以火棘果为原料，按液固比 6：1加入 4 0 ％乙醇溶液，4 5 ℃下浸提 1.5 h，问歇搅拌，连提3次，过滤，滤液旋蒸，回收溶剂。
浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附，用去离子水洗涤、6 0％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，6 0％乙醇洗脱液即为样品溶液。
2、扫描最大吸收波长取0．5mL儿茶素标准品溶液，加入2．5mL30％的硫酸乙酸溶液，2.5mL 1％的香草醛乙酸溶液，混合均匀，30℃水浴中避光反应15min。
以无水乙酸做参比，在可见光区(400～800nm)进行光谱扫描。
确定最大吸收波长，以后在此波长下测定样品的含量。
3、绘制标准曲线（在最大波长吸收处测得吸光度）浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095A（儿茶素）0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175A（儿茶素）0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245A（儿茶素）测原花青素样品的吸光度，通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。
花青素的测定
花青素的测定方法1:原花色素的测定方法（分光光度法）本方法适用于各种植物组织、器官及其制剂（如葡萄子与松树皮提取物）中原花色素含量的测定。
1. 方法提要原花色素（也称缩合单宁）是黄烷-3-醇的寡聚体与多聚体，属多酚类化合物。
与其他酚类化合物不同，黄烷醇（缩合单宁，单体，双体等）在酸性介质中可与香草醛反应，生成在500nm处有最大吸收的有色物质，可通过比色测其含量。
2. 仪器分光光度计。
3. 试剂所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
（1）香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。
（2）提纯的原花色素或儿茶素。
（3）4%香草醛甲醇液。
（4）标准使用液：将提纯的原花色素溶于蒸馏水，制成1mg/mL 储备液，将储备液稀至浓度为1×10-2mg/mL至1mg/mL的标准使用液。
标准使用液应于测定当天配制。
如无提纯的原花色素，可用儿茶素代替，配制方法同上。
4. 测定步骤（1）样品中原花色素的制备：植物材料经4倍体积丙酮+水（7+3，体积比）或者经60%甲醇提取，40℃以下减压蒸馏去除有机溶剂，水相再经乙醚洗涤后定容。
冰冻干燥的固体原花色素制剂，直接溶于水中（先加少量甲醇助溶）制成原花色素液。
原花色素液于5℃下暗环境中保存备用。
（2）样品测定：用锡箔将试管（14mm×20mm）包裹严，仅留管口用于加样。
向管内加入试样0.5mL，再加3.0mL 4%香草醛甲醇液混合，然后加入1.5mL浓盐酸，彻底混匀，室温下显色15min。
也可在暗环境下进行以上操作。
最后在500nm处比色。
可按以上操作步骤制得标准曲线（即0.1mg原花色素在500nm 处的吸收值为0.55）。
5. 结果计算计算原花色素量的公式，原花色素（1×10-3mg）=A500nm÷0.55×100×V式中V——试样稀释体积（倍数）。
6. 注释（1）本方法的检测范围为（5~500）×10-3mg/0.5mL样液。
PicoGreen dsDNA 定量检测试剂盒说明书
PicoGreen dsDNA 定量检测试剂盒说明书货号：P9740规格：2000T保存：4℃避光保存，有效期1年。
产品内容：名称规格保存PicoGreen component-A(200×in DMSO)1mL 4℃避光保存PicoGreen component-B(TE buffer)200mL 4℃避光保存PicoGreen component-C(Calf ThymusDNA)1mL 4℃避光保存产品说明：在分子生物学的试验过程中，PicoGreen dsDNA 定量试剂盒是荧光检测双链DNA 并进行定量的一种产品，这种方法非常灵敏。
常用于分子生物学技术中的：cDNA 文库的构建；用于亚克隆的DNA 片段纯化及应用，比如进行DNA 定量、产物扩增和引物的进一步检测。
疫苗是现代疾病预防中常用的控制方式。
如今许多疫苗是细胞培养疫苗，比如重组乙肝疫苗、狂犬病疫苗等大多数疫苗都采用细胞培养的方法生产。
其中，疫苗的纯化是关键问题，我们需要尽可能的去除宿主细胞DNA 和宿主蛋白。
假若宿主细胞的DNA 和蛋白同疫苗一起注入人体将会产生不可预料的后果。
常规的DNA 含量的检测方法是在260nm （A260）处测其吸光值。
这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰，无法区分DNA 和RNA ，而且这种方法不灵敏（5µg/mLdsDNA 溶液A260=0.1）。
PicoGreen 定量检测方法简单、方便，被多家生物制品厂所选择，成为生物制品残留DNA 检测的标准。
PicoGreen 与DNA 双链结合后才发出的荧光，无DNA 不发荧光；所发荧光与DNA 浓度成正比。
在2010年《中国药典》中提出，PicoGreen 定量DNA 的方法检出限约0.3ng/mL ，DNA 含量在1.25-80ng/mL 范围时线性较好(R 2>0.99).优点：1、该方法可以测定来源于任何表达宿主样品中的双链DNA 。
测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1
香草醛法测定原花青素的含量说明：原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响，以乙酸为溶剂，香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物，由红色产物吸光度测定原花青素含量。
通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件，比色条件为硫酸浓度30%，香草醛浓度1%，反应T为30℃，反应时间为30分钟。
以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。
一、器材/试剂紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平儿茶素标准品（浓度＞＝98%）；香草醛 ( 分析纯) ；硫酸 ( 分析纯) ；冰乙酸 ( 分析纯) ；实验用水为二级反渗透去离子水。
二、实验步骤1.配制试剂( 1 )配制儿茶素标准品溶液：称取一定量的儿茶素标准品，分别用去离子水定容至一定体积，配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液；( 2 )配制香草醛乙酸溶液：称取一定量的香草醛，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为1 ％；( 3 )配制硫酸乙酸溶液：量取一定体积的浓硫酸，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为3 0 ％的硫酸乙酸溶液。
（4）样品溶液：原花青素溶液以火棘果为原料，按液固比 6：1加入 4 0 ％乙醇溶液，4 5 ℃下浸提 1.5 h，问歇搅拌，连提3次，过滤，滤液旋蒸，回收溶剂。
浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附，用去离子水洗涤、6 0％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，6 0％乙醇洗脱液即为样品溶液。
2、扫描最大吸收波长取0．5mL儿茶素标准品溶液，加入2．5mL30％的硫酸乙酸溶液，2.5mL 1％的香草醛乙酸溶液，混合均匀，30℃水浴中避光反应15min。
以无水乙酸做参比，在可见光区(400～800nm)进行光谱扫描。
确定最大吸收波长，以后在此波长下测定样品的含量。
3、绘制标准曲线（在最大波长吸收处测得吸光度）浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095A（儿茶素）0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175A（儿茶素）0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245A（儿茶素）测原花青素样品的吸光度，通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。
原花青素检测方法注意细则
原花青素（20150518）1、原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。
原花青素本身无色，但经过用热酸处理后，可以生成深红色的花青素离子。
本方法用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子。
计算试样中原花青素含量。
2、试剂2.1 甲醇分析纯2.2 正丁醇分析纯2.3 盐酸分析纯2.4 硫酸铁铵NH4Fe(SO4)2•12H2O溶液：用浓度2mmol/l盐酸配成2%（w/v）的溶液。
（1.67ml盐酸，加水至10ml）2.5 原花青素标准品葡萄籽提取物，纯度95%2.6 正丁醇盐酸混合液：正丁醇：盐酸=95：5（v：v）3、仪器3.1 分光光度计4、分析步骤4.1试样的制备4.1.1 片剂取20片试样，研磨成粉状。
4.1.2 胶囊挤出20粒胶囊内容物，研磨或搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤出。
4.1.3 口服液摇匀后取样。
4.2 提取4.2.1 粉状试样称取70mg试样置于50ml容量瓶中，加入30ml甲醇，超声处理30min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，静置30min，取上清液过滤备用。
4.2.2 含油试样称取50mg试样置于小烧杯中，用20ml甲醇分数次搅拌，将原花青素洗入50ml容量瓶中，直至甲醇提取液无色，加甲醇至刻度，摇匀。
5.2.3 口服液吸取适量试样（取样量不超过1ml）置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
4.3 测定4.3.1 标准曲线称取原花青素标准品10.0mg溶于10ml甲醇中，吸取该溶液0、0.1、0.3、0.5、1.0、1.5ml（用2ml刻度吸管量取）置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
各取1ml 测定。
与试样测定方法相同。
4.3.2 试样测定取1ml试样溶液于10mL比色管中，加入6ml正丁醇盐酸混合液，再加入0.2ml 硫酸铁铵溶液，混匀，用封口膜封紧比色管口，置沸水浴精确加热40min后（氺浴锅调至100度，将装有比色管的烧杯放入氺浴锅中），立即置冰水中冷却3—5min后，取出放置约15min使供试液至室温，于546nm波长处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。
索莱宝 BC0345 糖原含量检测试剂盒 微量法说明书
糖原含量检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0345规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1支2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存溶液的配制：1.试剂一：10 mg葡萄糖。
临用前加1 mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存两周。
2.工作液的配制：临用前取1瓶试剂二倒入3 mL蒸馏水，缓慢倒入12 mL浓硫酸，充分溶解混匀后使用。
用不完的的试剂2-8℃保存一周。
产品说明：糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖，是糖的主要的储存形式之一，主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量，分别称为肝糖原和肌糖原。
肝糖原可调节血糖浓度，当血糖升高时可在肝脏合成糖原，血糖降低时，肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。
因此，肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。
肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时，肌糖原不能直接分解成血糖，必须先分解产生乳酸，随血液循环到肝脏，通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理：蒽酮法。
利用强碱性提取液提取糖原，在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
Furfural Derivatives（620nm）Glycogen+ H2SO4 Array技术指标：最低检出限：0.002 mg/mL线性范围：0.003125-0.25 mg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机，可调式移液器、微量比色皿/96孔板、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1﹑细胞或细菌：收集500~1000 万细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；加入0.75mL提取液超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；转移至10mL试管中，置于沸水浴中煮沸20min（盖紧，防止水分散失），隔5min振摇试管1次，使充分混匀；取出试管冷却后，用蒸馏水定容到5mL，混匀，8000g 25℃离心10min，取上清液待测。
果胶含量检测试剂盒说明书 微量法
果胶含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1405规格：100T/48S产品内容：试剂一：标准液1mL×1支，4℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明果胶是一种植物胶体，分布于果蔬类植物中，存在于植物的细胞壁和细胞内层。
果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，主要成分是半乳糖醛酸，其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。
采用咔唑比色法测定果胶含量。
果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂缩合生成紫红色化合物，在530nm处有最大吸收峰。
测定样品中半乳糖醛酸的含量，即可确定果胶的含量。
需自备的仪器和用品研钵、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤：一、样品处理将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比列（建议取约0.1g样品，加入1mL蒸馏水），充分匀浆，8000g、4℃离心10min，取上清液待测。
二、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm处，蒸馏水调零，试剂一和试剂二37℃预热10min以上。
三、测定操作表（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（μL）空白管标准管对照管测定管待测样本5050试剂一50蒸馏水5050试剂二505050混匀浓硫酸400400400400充分混匀，95℃水浴5min后，冷却至室温，取200μL置微量石英比色皿或96孔板中，测定530nm 处吸光值，空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为A1、A2、A3和A4。
若A大于1，需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释10倍或20倍）注意：空白管和标准管只要做一管，每个测定管需设一个对照管。
四、计算公式果胶含量(mg/mg prot)=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr×稀释倍数果胶含量（mg/g鲜重）=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数C标准：标准管浓度，0.05mg/mL；V1：加入样本体积，0.05mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。
原花青素（OPC）与花青素（Anthocyanidin）
原花青素（OPC）与花青素（Anthocyanidin）原花青素是葡茶多酚胶囊中的主要成分之⼀，是⼀种强效抗氧化剂，不过对于原花青素的认识，不少⼈会将其与花青素混淆，事实上，花青素与原花青素并不是同⼀种物质，⼆者存在多⽅⾯的差异。
原花青素也叫前花青素，英⽂名是Oligomeric Proantho Cyanidins简称OPC，是⼀种在热酸处理下能产⽣花⾊素的多酚化合物，是⽬前国际上公认的清除⼈体内⾃由基有效的天然抗氧化剂。
⼀般为红棕⾊粉末，⽓微、味涩，溶于⽔和⼤多有机溶剂。
原花青素属于植物多酚类物质，分⼦由⼉茶素，表⼉茶素(没⾷⼦酸)分⼦相互缩合⽽成，根据缩合数量及连接的位置⽽构成不同类型的聚合物，如⼆聚体、三聚体、四聚体……⼗聚体等，其中⼆到四聚体称为低聚体原花青素(Oligomeric Proanthocyanidins，缩写为OPC)，五以上聚体称为⾼聚体。
在各聚合体原花青素中，功能活性最强的部分是低聚体原花青素(OPC)。
部分⼆聚体、三聚体、四聚体的结构式。
通常把聚合度⼩于6的组分称为低聚原花青素,如⼉茶素、表⼉茶素、原花青素B1和B2等,⽽把聚合度⼤于6的组分称为多聚体.⼀般认为,药⽤植物提取物中存在的低聚原花青素是有效成分,它们具有抗氧化、捕捉⾃由基等多种⽣物活性。
△原花青素分⼦式花青素(Anthocyanidin)，⼜称花⾊素，是⾃然界⼀类⼴泛存在于植物中的⽔溶性天然⾊素，属黄酮类化合物。
也是植物花瓣中的主要呈⾊物质，⽔果、蔬菜、花卉等颜⾊⼤部分与之有关。
在植物细胞液泡不同的pH 值条件下，使花瓣呈现五彩缤纷的颜⾊。
在酸性条件下呈红⾊，其颜⾊的深浅与花青素的含量呈正相关性，可⽤分光光度计快速测定，在碱性条件下呈蓝⾊。
花青素的基本结构单元是2⼀苯基苯并吡喃型阳离⼦，即花⾊基元。
现已知的花青素有20多种，主要存在于植物中的有：天竺葵⾊素(Pelargonidin)、⽮车菊⾊素或芙蓉花⾊素(Cyanidin)、翠雀素或飞燕草⾊(Delphindin)、芍药⾊素(Peonidin)、牵⽜花⾊素(Petunidin)及锦葵⾊素(Malvidin)。
原花青素(OPC)介绍 .doc
原花青素(OPC)介绍原花青素(OPC)——一个流传五百年的传奇故事原花青素(OPC)——一个流传五百年的传奇故事1534年—1535年的冬天，有一队法国人在加拿大魁北克地区的圣劳伦斯河中航行探险，时值寒冬，船队被困，船员们依靠船上储藏的粮食维生，吃不到任何新鲜蔬菜，没多久，船员们就发现他们的身体莫名奇妙的变得虚弱，其中有些人关节剧疼，皮肤出现大块的红褐色斑点，牙龈肿胀溃烂，不久，一些体质较弱的人就在绝望中死去。
当时还没有人知道这就是被后人称为的坏血病，也没有人知道只要人体摄入的维生素C量不足就会导致这种病。
事实上，十六世纪的远洋探险队员们有许多人中因患坏血病而客死他乡。
然而这队法国人是幸运的，他们遇到一个印地安土著人并从此人处获得治疗这种病的方法，那就是将当地一种松树的树皮和松针捣碎熬汤，然后将汤喝下，剩余的残渣涂敷在患病的关节等处，法国人终于幸免于难，心有余悸的探险队长将这段可怕的经历详细地记录在他的探险日志里，船长的本意是要告诉他国内的同胞探险美洲的艰辛，然而他万没想到，他的日志启发了许多后来的科学家。
维生素Ｃ的发现(二十世纪20年代由匈牙利科学家发现)就与此有关。
而最为重要的是到了二十世纪40年代，法国科学家马斯魁勒Masqulier博士受之启发，在花生的皮中发现了原花青素(OPC)，并找到了第一个可用于商业生产提取OPC的资源----松树皮。
原花青素是OligomericProanthoCyanidins（OPC）的中文学名，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，尤其是其在体内的活性，它的抗氧化能力是维生素C的20倍，维生素E的50倍。
原花青素能消除自由基对人体的伤害，我们人体自身无法产生原花青素，植物是我们获得原花青素的唯一来源，二十世纪90年代，科学家又发现了获得OPC另一个更好的资源----莲科植物。
莲菁华牌原花青素胶囊源自洪湖野生莲科植物，采用了绿色环保提取工艺，纯度高于95%以上，具有高活性、强抗氧化的特点，尤其是在延缓衰老、调节血脂方面具有显著功效。
原花青素测定方法
原花青素测定方法1. 电化学法原理:原花青素易以氢供体的形式捕获其它活泼的自由基形成多酚自由基。
邻苯三酚在碱性水溶液中迅速发生自氧化链式反应，产生中间产物超氧阴离子自由基- ( O 2 ・)。
分子量大的多酚所形成的自由基较为稳定，可以发生偶合，形成聚合的多酚分子，同时发生竟争反应，使继续引发邻苯三酚自由基链式反应的趋势减弱或消失，表现为具有较强的清除自由基能力，且清除能力在一定的条件下与原花青素的加入量有线性关系，并随体系碱度的增大，羟基氢离子电离而增大。
超氧阴离子自由基 ( O 2- )被清除，自氧化链式反应被阻断，反应终止，使邻苯三酚在 - 0. 96V( vs. SCE)的自氧化峰电流减小，故可以做为原花青素的定量测定方法。
试验方法：于5 mL比色管中，加入适量浓度的原花青素贮备液，0. 5 ml 0. 5 mol /L的 Tris- HCI( pH= 8. 33)缓冲溶液，1. 0 mL5. 00 mmol /L邻苯三酚，定容刻度，摇匀。
在 1 min-6 min内，记录扫描电位在(- 0.8)―(- 1. 2V)范围内 - 0. 96± 0. 02V处的二阶导数极谱波。
2. 定量核磁共振法原理:定量核磁共振法以被测成分的特征氢核的共振吸收信号为目标进行分析，分析结果直观且准确性好。
原花青素通常是由表儿茶素及儿茶素通过4→8 位或4→6 位的碳-碳键连接，生成聚合度不同、空间结构十分复杂的混合物。
但每个原花青素分子中只有一个末端单元，并且它的H-4位移变化不明显，因此可以用它来表征样品中原花青素分子的数量。
试验方法：用微量天平精密称取内标物邻苯二甲酸氢钾约10 mg、样品约 40 mg，加入 DMSO-d 6为溶剂 1 mL 使其充分溶解，转移到核磁管中进行1 H谱NMR 分析。
检测条件：5 mm BBO 探头，600.192MHz，谱宽为 12335.5 Hz，脉冲宽度为13 μs，采样时间为17 s，延迟时间为6 s，采样次数为16 次。
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植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1355
规格：100T/48S
产品内容：
提取液：60%乙醇，自备，4℃保存。
试剂一：11%盐酸8mL，自备,4℃保存。
即2.4mL盐酸溶于5.6mL蒸馏水
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加8mL提取液溶解。
工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照1:1混合。
标准品：粉剂×1支，10mg原花青素。
产品说明：
原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
在酸性条件下，植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值，可计算植物中原花青素的含量。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、11%盐酸和60%乙醇。
操作步骤：
一、OPC提取:
将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入1mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5s，间歇8s，提取，30min，12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至1mL，待测。
二、测定操作表:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。
2、用提取液将原花青素配制成10mg/mL标准液，用提取液梯度稀释为5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.156、
0.078、0.039、0.02、0.01mg/mL的标准溶液。
3、操作表
对照管测定管标准管空白管样本（μL）4040
标准溶液（mg/mL）40
工作液（μL）160160160
H
O（μL）16040
2
混匀，30℃水浴30min，立即于微量石英比色皿/96孔板中检测500nm处吸光值，计算∆A测定=A测定管-A对照管，∆A标准=A标准管-A空白管。
空白管只需做一管
三、OPC计算公式:
1、标准曲线的绘制
以∆A标准为y轴，标准溶液浓度为x轴，绘制标准曲线，得到方程y=kx+b。
2、OPC的计算
将∆A测定带入方程，得到x（mg/mL）
（1）按样本鲜重计算
OPC含量（mg/g鲜重）=x×V提取÷W=x÷W。
（2）按样本蛋白浓度计算
OPC含量（mg/mg prot）=x×V提取÷（Cpr×V提取）=x÷Cpr
V提取：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。
注意事项：
1、配制好的试剂二应尽快使用，4℃保存时间不超过一个月。
2、吸光度变化应该控制在0.006-1.2之间。
否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释
倍数要相应改变。