饲料中基本营养成分测定标准

实际上，100多年来世界各国一直沿用的是由德国科学家Hennberg和Stohman所创立的Weende饲料分析体系。该分析体系是把饲料分成6种组分来分析测定：①水分(干物质)；

②粗灰分(矿物质)；②粗蛋白(N x 6．25)；④粗脂肪(乙醚浸出物)⑤粗纤维；⑧无氮浸出物(NFE，计算值)。这种饲料分析体系显然是饲料的概略分析(Feed Proximate Analysis) ，但也是最基本的饲料成分分析。按照GB10648-1999 饲料标签的规定：蛋白质饲料、配合饲料、浓缩饲料和复合顶混料等饲料都要把水分、粗蛋白、粗纤维和粗灰分做为保证值项目进行标注。

饲料组成成分的分析

对饲料组成成分的分析是研究营养物质的利用，评价饲料营养价值最基础的工作。

饲料中最重要的营养物质有碳水化合物、蛋白质、脂类、矿物质和维生素。概略养分分析法把饲料组成成分分为水分、粗灰分、粗蛋白质（CP）、粗脂肪或乙醚浸出物（EE）、粗纤维（CF）和无氮浸出物（NEF）。

(一)水分

饲料中的水分有两种存在形式，游离水和结合水。饲料分析中经常测定总水分，采用干燥失重的方法。对于不同饲料，干燥的方法应考虑其理化性质而有所区别。尽管饲料中的水分营养价值不大，但是测定饲料中的水分可得出饲料干物质的含量，这与饲料的能量含量密切相关，因此水分的测定意义重大。

本方法依据GB6435—86 饲料中水分的测定，它适用于配合饲料和单一饲料水分含量的测定，但不适用于做饲料的奶制品、动植物油中的水分测定。

1.方法原理

试样在(105±2)℃烘箱内和常压条件下烘干至恒重的质量为水分。

2.仪器设备

(1)植物样品粉碎机或研钵；

(2)试验筛：孔径0.42mm（40目）

(3)分析天平：分度值0．0001g；

(4)称量皿：玻璃或铝质，直径40mm、高25mm

(5)电热式恒温烘箱：控制±2℃；

(6)干燥器：变色硅胶干燥剂

3．样品的制备

(1)选取有代表性的原始样品不少于1000g。按四分法缩分到250g，风干或以60℃烘干，用植物样品粉碎机碾细，过0.42mm试验筛(注意一定要将样品全部过筛，并混合均匀)。封入样品袋，放在阴凉处保存，以备测定。

(2)如果饲料样品是含多汁的鲜样，如青贮、牧草等，无法直接粉碎，应进行预干燥处理：称取200-300g(准确至0.01g)鲜样，在105℃烘箱中烘杀15min，立即把温度降至65℃，烘6-8h，取出，在空气中冷却4h，称量。失重即初水分w0(H20)。将得到的烘干样，粉碎，过筛，装袋，以备测定。

4测定步骤

(1)将称量皿洗净，在(105±2) ℃烘箱内烘干1—2h，取出在干燥器内冷却30min，用分析天平称量。再放入烘箱烘干30min，冷却，称量，直至两次称量之差小于0．0005g为恒重。

(2)用分析天平称取2-5g样品，均匀平摊在已恒重的称量皿中，厚度小于0．5cm。不盖称量皿盖，在(105±2) ℃恒温烘箱内烘干2—4h。取出，盖上称量皿盖，放在干燥器内冷却30min，称量，同样再烘1h，冷却、称量。直至两次称量之差小于0．002g为恒重。

5．结果计算

(1)饲料中水分含量按公式(3—1)计算

式中：W(H2O)—饲料中水分的质量分数，％；

m1—105℃烘干前试样和称量皿总质量，

m2一105℃烘干后试样和称量皿总质量，

m0—105℃烘干的称量皿质量，g。

(2)每个试样应取两个平行样测定，以算术平均值为测定结果。两个平行样的相对误差应小于0.2％。

(二)粗灰分

粗灰分是饲料中有机物被全部氧化除去后剩余的残渣，主要为矿物质氧化物和盐类等无机物质。粗灰分的测定方法为高温灼烧法，即将饲料样品放入别550℃±5℃的高温电炉中灼烧，至灰白色，称残渣的重量。测定饲料中的粗灰分含量，对评定饲料矿物质营养价值意义不大。

(三)粗蛋白质

饲料中的一切合氮物质的总称为粗蛋白质，用饲料中的含氮量乘以6.25进行计算。粗蛋白质包括真蛋白质(TP)和非蛋白质性含氮化合物。饲料总氮中的非蛋白氮(NPN）部分对水产动物几乎无用，评定饲料蛋白质营养价值有时需要对饲料中真蛋白质进行分析，如虾粉中含有大量的几丁质氮。

本方法依据GB／T6432—94饲料中粗蛋白测定方法，适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中粗蛋白的测定。

1原理

凯氏法测定试样蛋白质含量，是在催化剂作用下用浓硫酸将含氮化合物转化为硫酸铵，将生成的硫酸铵在强碱性条件下馏出氨，经硼酸溶液吸收，再用标准酸溶液滴定，将测得的氮含量乘以换算系数6．25，即粗蛋白的含量。

2仪器设备

(1)植物样品粉碎机或研钵。

(2)试验筛：孔径0，42mm(40 目)。

(3)分析天平：分度值0．0001g

(4)专用消煮炉或可调电炉。

(5)酸式滴定管：10mL或25mL。

(6)专用消化管或250mL凯氏瓶。

(7)凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏也可采用专用定氮仪。

(8)三角烧瓶：150mL或250mL。

3试剂

(1)硫酸(AR，ρ=1.84)。

(2)混合催化剂：0.4硫酸铜(CuSO4·5H2O，AR )和6g硫酸钾(K2SO4，AR)，磨细混均。

(3)40％氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠(NaOH,CP)溶于1mL蒸馏水中。

(4)2％硼酸溶液：称取20g硼酸(H3BO3，AR)1000mL蒸馏水中。

(5)混合指示剂：将0.1％甲基红乙醇溶液与0.5％溴甲酚绿乙醇溶液，按1：1等体积混合。

(6)0.1000mol/L盐酸(HCl)标准溶液：取8．3mL盐酸(AR)注入1000ml蒸馏水。用无水碳酸钠(280℃烘干)法标定准确浓度。称取0．2000g，溶于50mL水，加混合指示剂，用0.1mol/L盐酸滴定至暗红色。同时滴定空白，加以校正。

(7)蔗糖(AR)

(8)硫酸铵(AR)

4操作步骤

(1)选取有代表性的样品用四分法缩分至200g，风干或以65℃烘干后粉碎，过0.42mm 试验筛，封入样品袋，在阴凉处保存，以备分析。

(2)用分析天平准确称取0.3—1.0g制好的试样，放入专用消化管或凯氏瓶中，加入混合催化剂2.0g和12mL硫酸，盖好专用消化管盖或凯氏瓶口盖一漏斗，置于专用消煮炉或可调电炉上消煮，开始用小火加热消煮，待泡沫消失后再加大火力保持微沸状态，直至溶液透明呈蓝绿色并继续消煮2h.

(3)将消化的试样放冷，加入50-60mL蒸馏水，摇匀，冷却。将蒸馏装置冷凝管末端浸入内装25mL 2％硼酸溶液的三角瓶底部，加入2滴混合指示剂。然后小心地向消化液内加入50mL40％氢氧化钠溶液，立即进行加热蒸馏，直至馏出液体体积为100mL为止。取下三角瓶使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1-2min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，停止蒸馏。

(4)滴定：用0.1mol/L 盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为红色为终点。

(5)空白测定：称取0．5g蔗糖代替试样，按上述操作步骤测定。

5．结果计算

(1)饲料中粗蛋白质的含量按公式计算

式中：w(CP) —饲料中粗蛋白的质量分数，％；

V—滴定试样时所消耗的标准盐酸溶液的体积，mL

V0—滴定空白时所消耗的标准盐酸溶液体积，mL

C B—标准溶液盐酸的量浓度，MryLI

0.0140 —氮的摩尔质量，kg/mol；

m—试样质量，g