小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验

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巨噬细胞功能实验报告

巨噬细胞功能实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

2. 掌握巨噬细胞的分离、培养和鉴定方法。

3. 学习巨噬细胞吞噬功能的检测方法。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有强大吞噬功能的免疫细胞,在免疫过程中起着重要作用。

巨噬细胞能够识别、吞噬和消化病原微生物、凋亡细胞等异物,并参与抗原呈递、免疫调节等过程。

本实验通过分离、培养和鉴定小鼠腹腔巨噬细胞,并检测其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:6-8周龄小鼠2. 试剂:胎牛血清、RPMI-1640培养基、无菌生理盐水、鸡红细胞、冷亚甲蓝染液等3. 仪器:超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、移液器、培养皿、离心机等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离与培养(1)小鼠处死后,打开腹腔,取出肠系膜,剪成1cm×1cm的小块。

(2)将小块组织放入装有生理盐水的培养皿中,用剪刀剪碎,制成组织悬液。

(3)将组织悬液移入离心管,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(4)加入适量RPMI-1640培养基,重悬细胞,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(5)加入适量胎牛血清的RPMI-1640培养基,重悬细胞,调整细胞浓度至1×10^6个/mL。

(6)将细胞悬液接种于培养皿中,放入CO2培养箱中培养24h。

2. 巨噬细胞的鉴定(1)取少量细胞悬液,加入适量台盼蓝染液,混匀,室温放置5min。

(2)用血细胞计数板计数,计算细胞死亡率。

(3)收集培养24h的细胞,用倒置显微镜观察细胞形态,判断细胞类型。

3. 巨噬细胞吞噬功能的检测(1)取适量鸡红细胞,用生理盐水洗涤3次,调整红细胞浓度为2×10^9个/mL。

(2)将鸡红细胞加入巨噬细胞培养液中,37℃、5%CO2条件下孵育30min。

(3)取出细胞,用生理盐水洗涤3次,弃去上清液。

(4)加入适量冷亚甲蓝染液,混匀,室温放置5min。

巨噬细胞小鼠实验报告

巨噬细胞小鼠实验报告

一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

2. 研究巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的作用。

3. 探讨不同刺激条件下巨噬细胞吞噬功能的变化。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要组成部分,具有强大的吞噬和清除病原微生物、衰老细胞和坏死组织的能力。

吞噬作用是巨噬细胞识别、结合并摄取病原微生物或异物的重要机制。

本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,评估其吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:6-8周龄健康小白鼠。

2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、无菌生理盐水、冷亚甲蓝染色液、甲醇、橄榄油等。

3. 实验仪器:显微镜、离心机、恒温水浴箱、计时器等。

四、实验方法1. 实验分组:将小白鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。

2. 实验操作:(1)实验组:每只小鼠腹腔注射1ml鸡红细胞悬液,对照组腹腔注射1ml无菌生理盐水。

(2)注射后30分钟,将小鼠处死,无菌操作取出腹腔液。

(3)将腹腔液离心,弃去上清液,加入适量冷亚甲蓝染色液,混匀后制片。

(4)显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。

3. 数据统计:计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞百分比和吞噬指数。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数均显著高于对照组(P<0.05)。

2. 在不同刺激条件下,巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数存在差异,其中以脂多糖(LPS)刺激组的吞噬功能最强(P<0.05)。

六、实验分析1. 实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,且吞噬功能受到LPS等刺激因素的影响。

2. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中发挥重要作用,其吞噬功能与机体抵抗力密切相关。

3. 本实验为研究巨噬细胞在免疫调节中的作用提供了实验依据。

七、实验讨论1. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的重要作用:巨噬细胞具有广泛的免疫调节功能,不仅能吞噬和清除病原微生物,还能分泌多种细胞因子,参与免疫应答和免疫调节。

巨噬细胞的实验报告

巨噬细胞的实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本生物学特性;2. 掌握巨噬细胞吞噬功能实验的操作方法;3. 分析巨噬细胞吞噬功能的影响因素。

二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞,具有吞噬、清除病原体、分泌细胞因子等生物学功能。

本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,评估巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠;2. 实验试剂:鸡红细胞、生理盐水、冷亚甲蓝染色液、培养皿、显微镜、移液器等。

四、实验方法1. 实验动物处理:取健康小鼠,腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。

2. 巨噬细胞收获:实验前3小时,将小鼠处死,无菌操作下取出腹腔液,加入等体积生理盐水,混匀后离心(1000r/min,10min),弃上清,用生理盐水洗涤2次,沉淀即为巨噬细胞。

3. 巨噬细胞吞噬实验:将收获的巨噬细胞加入培养皿中,加入适量鸡红细胞,37℃培养1小时。

4. 巨噬细胞染色:将培养好的巨噬细胞加入冷亚甲蓝染色液,染色5分钟。

5. 巨噬细胞观察:用显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,计算吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果与分析1. 实验结果:显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞被吞噬细胞包裹。

2. 实验分析:(1)吞噬百分率:吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%;(2)吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数。

六、实验结论本实验成功观察到了巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,说明巨噬细胞具有吞噬功能。

吞噬百分率和吞噬指数可以作为评估巨噬细胞吞噬功能的重要指标。

七、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫系统中具有重要作用,吞噬功能是其重要生物学特性之一。

2. 本实验采用腹腔巨噬细胞,操作简便,结果可靠。

3. 影响巨噬细胞吞噬功能的主要因素包括:巨噬细胞的来源、成熟度、环境因素等。

4. 本实验为后续研究巨噬细胞吞噬功能的影响因素提供了基础。

八、实验总结本实验通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,成功评估了巨噬细胞的吞噬功能。

小鼠墨汁吞噬实验报告

小鼠墨汁吞噬实验报告

一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。

2. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫反应中的作用。

3. 掌握小鼠腹腔巨噬细胞的采集和制片方法。

二、实验原理吞噬作用是巨噬细胞等免疫细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。

巨噬细胞在非特异性免疫中起着重要作用,能够识别、结合并吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级小鼠(体重20-25g)。

2. 实验材料:墨汁颗粒、生理盐水、载玻片、盖玻片、显微镜、注射器、无菌手术器械等。

3. 实验试剂:台盼蓝染色液、0.1%结晶紫染色液、5%戊二醛固定液、0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)等。

四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞的采集:- 将小鼠用颈椎脱臼法处死,打开腹腔,取出肝脏。

- 将肝脏剪成小块,放入装有生理盐水的培养皿中,用无菌手术器械轻轻研磨,制成细胞悬液。

- 将细胞悬液离心(1000r/min,5min),弃去上清液,加入适量的生理盐水重悬细胞。

- 用血细胞计数板计数细胞浓度,调整细胞浓度至1×10^6 cells/ml。

2. 墨汁吞噬实验:- 将细胞悬液加入装有盖玻片的载玻片中,滴加适量墨汁颗粒,使其均匀分布在细胞表面。

- 将载玻片放入37℃温箱中孵育30min。

- 取出载玻片,用生理盐水冲洗3次,去除未吞噬的墨汁颗粒。

- 用0.1%结晶紫染色液染色3min,用蒸馏水冲洗,晾干。

- 在显微镜下观察巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。

3. 结果分析:- 观察巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬百分率和吞噬指数。

- 吞噬百分率 = 吞噬墨汁颗粒的巨噬细胞数 / 总巨噬细胞数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的墨汁颗粒总数 / 吞噬墨汁颗粒的巨噬细胞数五、实验结果1. 在显微镜下观察到巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。

2. 吞噬百分率为15.3%,吞噬指数为18.9%。

六、实验分析本实验结果显示,小鼠腹腔巨噬细胞对墨汁颗粒具有较强的吞噬能力。

吞噬现象观察实验报告

吞噬现象观察实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。

2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,加深对吞噬作用机制的理解。

二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞,能够识别、吞噬并消化各种抗原物质,如细菌、病毒、细胞碎片等。

在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解吞噬作用的过程和机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级雄性小鼠(体重20-25g)。

2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。

3. 实验仪器:超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。

四、实验步骤1. 麻醉小鼠,打开腹腔,收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次,制成细胞悬液。

3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,置于37℃水浴中温育30分钟。

4. 取出混合液,用台盼蓝染色液染色,置于显微镜下观察。

5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。

五、实验结果在显微镜下观察到,巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。

具体表现为:1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞,表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。

2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变。

3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。

六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,这与巨噬细胞的免疫功能相一致。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞表面出现鸡红细胞,说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。

3. 吞噬后,巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变,说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。

4. 吞噬鸡红细胞过程中,部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化,说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。

七、实验结论通过本实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,加深了对吞噬作用机制的理解。

实验结果表明,巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用,具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min,如果在 37C 条件下作用时间过长,被吞噬的菌很快会被裂解, 也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定,如果使用的 吞噬细胞是细胞系,细胞体积较大,那么加入的细胞 数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成,其中央有 两个计数室。每个计数室划分出9个大方格(见下图), 每格面积1mm2,加盖玻片后的深度为0.1mm。因此, 每大方格容积为0.1mm3。
计数时,若细胞位于小方格的线上,应遵循“数上 线不数下线,数左线不数右线”的原则,以减少误差。 计数应重复3次,取其平均值。
数完毕后,依下式计算: 每1mL白细胞悬液细胞数=(4个中方格细胞总数 /4) ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数=(80个小方格细胞总数 /80) ×400×104× 稀释倍数
(2)白色念珠菌制备 将白色念珠菌接种于沙氏平皿 培养基中,培养48小时,收集菌,用适量生理盐水 配成悬液,100℃,煮沸30 min灭活,离心去掉上清, 再用1%美兰染色30 min,用生理盐水洗涤二次,用 生理盐水配成1×108/ml菌悬液,4℃冰箱保存备用。
(3)吞噬细胞与菌混合培养 取巨噬细胞0.5ml加白色念珠菌悬液0.5ml,置37℃
实验时眼球放血、断椎处死小鼠,新洁尔灭浸泡5分钟。 剪开腹部皮肤,暴露腹膜,用镊子夹起腹膜剪开一
小口(注意避开血管),用1640灌注腹腔,收集腹腔液于 试管中(约4 ml),1500 r/min,离心10 min,去上清, 沉积细胞用1640离洗一次。最后沉积细胞用含10%小 牛血清1640配成适当浓度备用(1-2×106/ml)。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验

目的要求
1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3.了解细胞吞噬实验的研究意义
基本原理
? 吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式,也是高等动 物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞 、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,当病原微生物 或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,会向 异物处聚集,将其内吞入细胞质,形成吞噬泡,然后吞噬 泡与溶酶体融合,将异物消化分解。
0.85%生理盐水;阿氏( Alsever)血液保存液; 蛋白胨 2.0g 加水 100ml 灭菌备用。 3.材料:小白鼠; 1%鸡红细胞悬液
方法与步骤
? 鸡翼下静脉取血后,加生理盐水离心两次,然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水, 调至鸡红细胞浓度为 1%。
实验前三天,每天向小鼠腹腔注射 2%的蛋白胨溶液1ml, 实验前1小时,向腹腔内注射 1%鸡红细胞1ml。
吸取腹腔液
脱椎致死
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水,向其中滴加一滴 腹腔液,静置 10分钟,使腹水细胞贴壁,弃去生理盐水, 待其稍干后,进行瑞氏染色。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
实验报告
? 镜检时,你能在视野中看到几种类型的细胞? ? 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
吞噬百分数 =
? 吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助,如果用降 解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞,则可阻断吞噬泡的形 成;免疫抑制剂环磷酰胺( CYP)对巨噬细胞的吞噬作用也 有影响。
? 通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬,计算吞噬百 分数和吞噬指数,可以分析判断机体的免疫水平。
实验用品
1.器材:显微镜、解剖:

小鼠腹腔吞噬实验报告

小鼠腹腔吞噬实验报告

小鼠腹腔吞噬实验报告小鼠腹腔吞噬实验报告一、引言吞噬作为一种重要的细胞功能,在免疫系统中起着重要的作用。

腹腔巨噬细胞是一类在腹腔内胚胎发育过程中产生的巨噬细胞,它们能够吞噬和消化异物、细菌和坏死细胞等。

本实验旨在观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。

二、材料与方法1. 材料:BALB/c小鼠(8周龄,雄性和雌性各5只)、PBS、0.1%苏木精溶液、0.1%酚溶液、尼龙网、离心管、移液管、顶针、显微镜和实验台。

2. 方法:(1)将BALB/c小鼠以适当的麻醉方式麻醉后置于实验台上;(2)在小鼠腹部剃毛,用70%酒精消毒;(3)用显微镊子将小鼠腹部皮肤拉开,插入15号顶针穿透腹腔;(4)慢慢抽取腹腔中积聚的液体;(5)将抽取的液体均匀滴在一块尼龙网上,用PBS洗涤;(6)将尼龙网取出,放入一滴0.1%苏木精溶液中染色10分钟,洗净;(7)将尼龙网摆到显微镜下,观察包括吞噬细胞数量和吞噬效果等。

三、结果与分析经过腹腔巨噬细胞吞噬实验后,我们观察了吞噬细胞的数量和吞噬效果。

在5只雌性小鼠中,吞噬细胞的数量平均为10个,吞噬效果良好,吞噬颗粒清晰可见。

在5只雄性小鼠中,吞噬细胞的数量平均为12个,吞噬效果也良好,吞噬颗粒清晰可见。

通过统计分析发现,雄性小鼠相较于雌性小鼠具有更高的吞噬细胞数量,但两者之间差异不显著。

四、讨论1. 从实验结果来看,小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的吞噬能力,能够有效地清除异物和消化坏死细胞等。

2. 在我们的实验中,我们观察到雄性小鼠的吞噬细胞数量略高于雌性小鼠,这可能与性别激素的差异有关,但仅仅依靠本实验无法确定性别激素对吞噬能力的具体影响,需要进一步的研究来证实。

3. 本实验中使用的苏木精和酚溶液可以染色吞噬细胞,便于观察。

但这种方法相对于其他荧光染色方法来说更为繁琐,同时也可能对细胞造成一定的伤害。

4. 本实验中只是通过观察吞噬细胞数量和吞噬效果来判断腹腔巨噬细胞的吞噬能力,后续的实验可以考虑使用其他细胞学和分子生物学技术来进一步验证腹腔巨噬细胞的功能和机制。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验
四角的大方格,又分为16个中方格,适用于白细 胞计数。中央大方格以双线等分为25个中方格。每个 中方格又分16个小方格,通常我们取四角的4个中方格 和中间的1个中方格来计数红细胞。
首先用吸管吸取少许稀释后的单细胞悬液,从盖片 端滴一小滴(不宜过多),液体自行向内渗入,静置数 分钟后,再放在微镜下观察计数。
温育30min。
取1滴混合液置玻片上加盖玻片,在高倍镜下观察 计数。
高倍镜下观察计算: 吞噬率%=(吞噬白色念珠菌的巨噬细胞数/100个巨噬
细胞)×100%
吞噬指数%=100个巨噬细胞中吞噬白色念珠菌总数 /100个巨噬细胞
**(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
注意事项
1、菌与细胞混合后充分混匀非常重要。对于此实验,菌 与吞噬细胞之比10:1时吞噬作用容易观察和计数。但 是吞噬效果好,能真正反映实际情况又可被检测的比 例为1:1。
计数时,若细胞位于小方格的线上,应遵循“数上 线不数下线,数左线不数右线”的原则,以减少误差。 计数应重复3次,取其平均值。
数完毕后,依下式计算: 每1mL白细胞悬液细胞数=(4个中方格细胞总数 /4) ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数=(80个小方格细胞总数 /80) ×400×104× 稀释倍数
2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min,如果在 37C 条件下作用时间过长,被吞噬的菌很快会被裂解, 也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定,如果使用的 吞噬细胞是细胞系,细胞体积较大,那么加入的细胞 数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成,其中央有 两个计数室。每个计数室划分出9个大方格(见下图), 每格面积1mm2,加盖玻片后的深度为0.1mm。因此, 每大方格容积为0.1mm3。

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名:李思露学号:131140040一、 实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程;2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、 实验原理吞噬作用也称为胞吞作用(cellular eating ),指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质(直径一般大于250mm )的过程。

许多原生动物通过吞噬作用摄取营养;高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。

不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同,个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。

吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体,可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物,引起受体胞内区活化,进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。

巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞,原因是,凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。

吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。

吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐三、实验材料、试剂及器材(一)材料:1.健康小白鼠:6-8周龄健康小白鼠,实验前1~2天,每只腹腔注射4%淀粉肉汤1mL。

2.抗凝鸡血(二)试剂:1.4%淀粉肉汤2.D-Hanks液3.0.85%生理盐水4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液(三)用品普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱(37℃)、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1.巨噬细胞收集:脱颈处死小鼠;腹腔注入2mL生理盐水,揉匀;剪开腹部皮肤,暴露腹膜;用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
实验目的:
本实验的主要目的是观察小鼠腹腔巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬作用并初步探究巨噬细胞的吞噬过程及机制。

实验材料:
1. 胶体金溶液;
2. 无菌生理盐水;
3. 酶消化试剂;
5. 显微镜和激光共聚焦显微镜。

实验步骤:
1. 将腹腔巨噬细胞准备好,收集细胞的方法可以在Gibco™血清教育中心找到。

2. 将100微升的胶体金颗粒溶液加入小鼠巨噬细胞的培养基中。

3. 将培养基加入培养箱中,并调节适当的条件,使细胞生长。

4. 观察并拍摄巨噬细胞吞噬胶体金颗粒的过程。

5. 经过一段时间后,将巨噬细胞用生理盐水洗涤几次,以去除吞噬的颗粒和其他杂质。

6. 对巨噬细胞进行显微镜观察,并用激光共聚焦显微镜观察细胞的粒饱和度,探究吞噬过程中的机制。

实验结果:
通过实验,我们发现在溶液中加入胶体金颗粒后,小鼠腹腔巨噬细胞会对颗粒进行吞噬,而且吞噬的过程会随着时间的延长而增加。

在观察吞噬过程时,我们发现颗粒先进入到巨噬细胞的液泡内,液泡随后与溶质相合并,颗粒进入到细胞内部。

通过激光共聚焦显微镜的观察,我们还发现,巨噬细胞吞噬颗粒时,会出现粒饱和现象,说明在吞噬的过程中,细胞表面的可吞噬物质已经被消耗殆尽,而吞噬速度由于细胞的活动而缓慢下降。

结论:
细胞吞噬是一种重要的细胞生理过程,对于身体的免疫防御系统具有重要意义。

而小鼠腹腔巨噬细胞具有良好的吞噬能力,对于异物、死亡细胞和各种病原体的清除起到了重要作用。

此次实验成功观察了巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬过程,并初步探究了其机制,这对于深入了解细胞免疫机制具有重要意义。

小鼠小吞噬实验报告

小鼠小吞噬实验报告

一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬过程,加深对细胞吞噬作用机制的理解。

2. 测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,评估其非特异性免疫功能。

二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。

在高等动物体内,巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。

巨噬细胞能够识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物,通过胞吞作用将其吞噬并消化。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:健康小鼠若干。

2. 仪器:显微镜、离心机、无菌操作台等。

3. 试剂:大肠杆菌悬液、生理盐水、甲醛固定液、姬姆萨染液等。

四、实验步骤1. 制备腹腔巨噬细胞悬液:- 将小鼠麻醉后,无菌操作下取其腹腔液。

- 将腹腔液离心,弃去上清液,沉淀即为腹腔巨噬细胞。

- 用生理盐水洗涤腹腔巨噬细胞,重复洗涤2次,弃去上清液,沉淀即为纯化的腹腔巨噬细胞悬液。

2. 制备大肠杆菌悬液:- 将大肠杆菌接种于生理盐水中,37℃培养过夜。

- 将过夜培养的大肠杆菌用生理盐水洗涤,重复洗涤2次,弃去上清液,沉淀即为大肠杆菌悬液。

3. 实验分组:- 将纯化的腹腔巨噬细胞悬液分为实验组和对照组。

- 实验组:将腹腔巨噬细胞悬液与大肠杆菌悬液混合,37℃孵育30分钟。

- 对照组:将腹腔巨噬细胞悬液与生理盐水混合,37℃孵育30分钟。

4. 制片与染色:- 将实验组和对照组的细胞悬液分别制片。

- 用姬姆萨染液染色,显微镜下观察细胞形态和吞噬现象。

5. 结果分析:- 计算吞噬百分率和吞噬指数。

- 吞噬百分率 = 吞噬有细菌的巨噬细胞数 / 巨噬细胞总数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的细菌总数 / 吞噬有细菌的巨噬细胞数五、实验结果实验结果显示,实验组巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组,表明小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能。

六、讨论1. 本实验成功制备了小鼠腹腔巨噬细胞悬液,并观察了其吞噬大肠杆菌的过程,验证了巨噬细胞的吞噬功能。

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞是一类重要的免疫细胞,它们在机体内起着清除病原体和细胞垃圾的重要作用。

巨噬细胞通过吞噬和消化来清除这些有害物质,从而维护机体的健康。

本次实验旨在探究巨噬细胞的吞噬能力,并观察不同条件下巨噬细胞的吞噬效果。

实验材料和方法:1. 巨噬细胞:从小鼠腹腔摘取巨噬细胞,经过离心、洗涤后制备成细胞悬液。

2. 有害物质:使用荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞吞噬的目标。

3. 细胞培养基:提供适宜的营养和环境条件供巨噬细胞生长。

4. 显微镜:观察和记录巨噬细胞的吞噬情况。

实验步骤:1. 将巨噬细胞悬液均匀分配到培养皿中,加入适量的细胞培养基,使巨噬细胞处于良好的生长状态。

2. 在巨噬细胞培养基中加入荧光染料标记的细菌和细胞碎片,使其与巨噬细胞悬液充分接触。

3. 将培养皿置于恒温培养箱中,以37摄氏度、5%二氧化碳的条件下培养巨噬细胞。

4. 在培养的不同时间点,取出培养皿进行显微镜观察,并记录巨噬细胞吞噬的数量和程度。

5. 对实验结果进行统计和分析,得出结论。

实验结果:在观察巨噬细胞吞噬的过程中,我们发现了一些有趣的现象。

首先,在实验开始的早期,巨噬细胞对细菌和细胞碎片的吞噬速度较快,数量也相对较多。

然而,随着时间的推移,巨噬细胞的吞噬速度逐渐减慢,吞噬的数量也逐渐减少。

这表明巨噬细胞在一段时间内能够高效地吞噬有害物质,但随着吞噬的进行,巨噬细胞的饱和度逐渐增加,导致吞噬速度下降。

此外,我们还发现了巨噬细胞对不同类型有害物质的吞噬能力存在差异。

在实验中,我们使用了荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞的吞噬目标。

观察结果显示,巨噬细胞对细菌的吞噬效果较好,吞噬数量较多,而对细胞碎片的吞噬效果相对较差。

这可能是因为细菌具有较小的体积和较强的运动能力,更容易被巨噬细胞捕获和吞噬。

而细胞碎片可能较大且较为静态,巨噬细胞需要更多的时间和能量来吞噬。

结论:通过本次实验,我们对巨噬细胞的吞噬能力有了更深入的了解。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告一、实验目的本实验旨在研究小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,通过观察巨噬细胞对特定颗粒物质的吞噬过程,了解巨噬细胞在免疫防御中的作用机制,为进一步研究免疫系统的功能和相关疾病的发生发展提供实验依据。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要细胞成分,具有强大的吞噬能力。

在本实验中,将鸡红细胞作为被吞噬的靶物质注入小鼠腹腔,一段时间后,巨噬细胞会对鸡红细胞进行吞噬。

通过涂片、染色等处理,可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并计算吞噬百分率和吞噬指数,以评估巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与方法(一)实验材料1、实验动物:健康昆明小鼠,体重 18 22 g。

2、试剂:生理盐水、6%淀粉肉汤、鸡红细胞悬液、瑞氏染液等。

3、器材:注射器、显微镜、载玻片、盖玻片、离心机等。

(二)实验方法1、小鼠腹腔注射 6%淀粉肉汤 1 ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。

2、三天后,给小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液 1 ml。

3、注射 30 分钟后,将小鼠断颈处死,腹腔注入生理盐水 2 ml,轻揉腹部,然后抽取腹腔液。

4、抽取的腹腔液以 1000 rpm 离心 5 分钟,弃上清,留沉淀。

5、沉淀用生理盐水重悬,制成细胞涂片。

6、涂片自然干燥后,用瑞氏染液染色。

7、油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,并计数。

四、实验结果(一)巨噬细胞形态观察在油镜下,巨噬细胞体积较大,形态不规则,胞浆丰富,常含有吞噬的颗粒物质。

未吞噬鸡红细胞的巨噬细胞胞浆呈淡蓝色,细胞核呈紫红色,形状多样。

(二)吞噬现象观察可以观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同阶段,有的巨噬细胞胞浆内含有 1 2 个鸡红细胞,有的则含有多个。

被吞噬的鸡红细胞形态完整,部分已被消化。

(三)吞噬百分率和吞噬指数计算随机观察 200 个巨噬细胞,计算其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数,得出吞噬百分率。

同时,计算每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数,即为吞噬指数。

本次实验中,吞噬百分率为____%,吞噬指数为____。

小鼠吞噬能力实验报告

小鼠吞噬能力实验报告

一、实验目的本实验旨在观察和评估小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,以了解其非特异性免疫功能。

通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验,加深对细胞吞噬作用过程的理解,并分析不同条件下吞噬能力的变化。

二、实验原理吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。

巨噬细胞是动物体内重要的免疫细胞,具有吞噬和消化病原体、凋亡细胞等异物的功能。

在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,评估其吞噬能力。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:昆明种小鼠2. 仪器:解剖显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、移液枪等3. 试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、甲醛固定液、苏木素染液、伊红染液等四、实验方法1. 实验分组:将实验小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。

2. 诱导腹腔巨噬细胞:实验组小鼠腹腔注射生理盐水1ml,对照组小鼠腹腔注射生理盐水2ml。

3. 制备鸡红细胞悬液:将鸡红细胞用生理盐水洗涤3次,配成2%的红细胞悬液。

4. 吞噬实验:实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml,对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。

5. 观察与计数:30分钟后,取小鼠腹腔液,用生理盐水稀释,涂片,固定,染色,显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并计数吞噬细胞数和吞噬指数。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象明显,对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象不明显。

2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组。

六、分析与讨论1. 实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力,能够有效地吞噬鸡红细胞。

2. 诱导腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力可能与其非特异性免疫功能有关。

3. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组,可能与注射鸡红细胞悬液刺激有关。

七、结论本实验成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,并分析了不同条件下吞噬能力的变化。

实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力,其非特异性免疫功能可能与其吞噬能力有关。

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本特性及其在免疫反应中的作用。

2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。

3. 掌握显微镜下观察细胞吞噬作用的实验技术。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞类型,具有强大的吞噬能力。

当巨噬细胞遇到抗原时,会通过吞噬作用将其捕获、消化并清除。

本实验以鸡红细胞作为抗原,观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,从而了解巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:健康小鼠(体重20-25g)2. 实验器材:解剖显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、剪刀、镊子、吸管等3. 实验试剂:生理盐水、鸡红细胞悬液、冷亚甲蓝染色液、无菌淀粉液四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞诱导:实验前3小时,将小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞渗出。

2. 鸡红细胞悬液制备:将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次,制成红细胞悬液,浓度为1×10^9/L。

3. 腹腔巨噬细胞收集:将小鼠处死,打开腹腔,用生理盐水冲洗腹腔,收集腹腔液。

4. 巨噬细胞染色:取腹腔液1ml,加入1ml冷亚甲蓝染色液,混匀,染色5分钟。

5. 制片观察:取载玻片,滴加1滴腹腔液,盖上盖玻片,用解剖显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形态学变化。

五、实验结果1. 在显微镜下观察到,巨噬细胞呈圆形或椭圆形,细胞质丰富,细胞核较大,呈蓝色。

2. 鸡红细胞呈圆形,直径约为7-8μm,呈红色。

3. 观察到部分巨噬细胞周围有红细胞聚集,说明巨噬细胞已经吞噬了鸡红细胞。

4. 部分巨噬细胞内部可见吞噬的红细胞,且红细胞被巨噬细胞质包围,说明巨噬细胞已经将鸡红细胞包裹在内。

六、实验分析1. 本实验观察到巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,说明巨噬细胞具有吞噬能力。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞通过质膜内陷形成吞噬泡,将鸡红细胞包裹在内,然后将其消化。

3. 吞噬作用是机体免疫系统的重要组成部分,有助于清除体内的病原体和衰老细胞。

大小吞噬实验报告

大小吞噬实验报告

一、实验目的1. 了解吞噬细胞的功能和特点;2. 掌握吞噬细胞吞噬细菌的实验方法;3. 分析吞噬细胞吞噬细菌的过程和结果。

二、实验原理吞噬细胞是一类具有吞噬功能的细胞,如巨噬细胞、中性粒细胞等。

它们能够吞噬和消化各种病原体、细胞碎片等异物。

本实验通过观察吞噬细胞吞噬细菌的过程,了解吞噬细胞的功能和特点。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠;2. 实验试剂:生理盐水、肝素钠、细菌悬液、姬姆萨染色液;3. 实验仪器:显微镜、离心机、移液器、培养皿、试管等。

四、实验方法1. 选取健康小鼠,无菌操作下取小鼠腹腔巨噬细胞;2. 将巨噬细胞悬液用生理盐水洗涤2次,离心后弃上清液;3. 加入肝素钠溶液,使细胞悬液稀释至适当浓度;4. 将细菌悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,37℃孵育30分钟;5. 将混合液离心,弃上清液;6. 加入姬姆萨染色液,染色5分钟;7. 用显微镜观察吞噬细胞吞噬细菌的情况。

五、实验结果1. 巨噬细胞在显微镜下呈圆形或椭圆形,细胞质丰富,细胞核呈蓝色;2. 部分巨噬细胞表面附着有细菌,细菌呈紫色;3. 部分巨噬细胞内部出现细菌,细菌呈紫色;4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌。

六、实验分析1. 巨噬细胞在实验过程中表现出较强的吞噬功能,能够吞噬细菌;2. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后,细菌存在于细胞表面,说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生粘连;3. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后,细菌存在于细胞内部,说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生吞入;4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌,可能是因为吞噬细胞未能成功吞噬细菌或细菌未被染色。

七、实验结论1. 巨噬细胞具有较强的吞噬功能,能够吞噬细菌;2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中可能发生粘连和吞入;3. 本实验成功观察了吞噬细胞吞噬细菌的过程,为研究吞噬细胞的功能和特点提供了实验依据。

八、实验讨论1. 本实验中,吞噬细胞吞噬细菌的过程可能受到多种因素的影响,如细菌种类、巨噬细胞活性等;2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中,可能存在吞噬、消化、排泄等多个阶段;3. 吞噬细胞吞噬细菌的能力与人体免疫力密切相关,研究吞噬细胞的功能有助于提高人体免疫力。

小鼠腹腔吞噬实验报告

小鼠腹腔吞噬实验报告

实验目的:1. 观察并理解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的全过程。

2. 深入了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。

3. 学习巨噬细胞吞噬功能的测定方法。

实验原理:吞噬作用,也称为胞吞作用,是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。

在高等动物体内,巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。

巨噬细胞表面有识别病原体、凋亡细胞及其它异物的受体,可以识别并结合这些物质,进而引发吞噬作用。

实验材料与试剂:1. 实验动物:清洁级小鼠2. 仪器设备:显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、生理盐水、鸡红细胞悬液、台盼蓝染色液等实验步骤:1. 选取健康清洁级小鼠,将其麻醉后进行腹部手术,收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的腹腔巨噬细胞与鸡红细胞悬液混合,在显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。

3. 使用台盼蓝染色液对吞噬细胞进行染色,观察吞噬细胞内台盼蓝颗粒的分布情况。

4. 对吞噬细胞进行计数,计算吞噬百分率和吞噬指数。

实验结果:1. 在显微镜下观察到,巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞,形成吞噬体。

2. 使用台盼蓝染色后,吞噬细胞内台盼蓝颗粒主要分布在溶酶体中。

3. 通过计数,得到吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。

结果分析:1. 巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用,能够吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物,从而清除体内的有害物质。

2. 吞噬百分率和吞噬指数可以反映巨噬细胞的吞噬功能,吞噬百分率越高,吞噬指数越大,说明巨噬细胞的吞噬功能越强。

实验讨论:1. 巨噬细胞的吞噬功能受到多种因素的影响,如细胞表面受体的种类和数量、吞噬细胞的活化状态等。

2. 本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程,加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解。

3. 吞噬功能的测定方法在免疫学研究中具有重要意义,可以用于评估机体免疫功能的变化。

实验结论:通过本次实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活动,加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解,并掌握了巨噬细胞吞噬功能的测定方法。

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巨噬细胞吞噬酵母菌
在干净的载玻片上用记号笔画一个直径约2cm的圆圈,在 圆圈内滴加50μL细胞悬液,再向其中加50μL酵母液,混
匀后放入湿盒内并于37℃温箱孵育30分钟。
细胞染色
用生理盐水轻轻冲洗并甩干,加1-3滴试剂一固定1.5min; 加3-6滴试剂二,轻摇玻片使其充分混匀,染色5-8min; 自来水轻轻冲洗; 待干燥后加显微镜油于100倍目镜下观察。
本实验是通过小鼠巨噬细胞对酵母菌的吞噬来检测 巨噬细胞的功能
实验用品
1.器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、 载玻片 、吸管等 2.试剂: 生理盐水;PBS;快速姬姆萨染液。 3.材料:小白鼠;酵母菌(浓度为8*106/ml)
方法与步骤
将菌液置于70℃水浴锅中加热20min以灭活酵母菌, 置4 ℃冰箱备用。
吞噬细胞发育普




腹腔巨噬细胞
主 要 存 在 部 位
主要功能:对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬
以及消化),并激活淋巴球或其他免胞吞噬过程
巨噬细胞功能是衡量机体免疫能力的一个很重要指标
测定方法:主要是巨噬细胞的吞噬功能实验,其他的有 溶酶体酶活性检测和表面受体检测。
实验六-吞噬细胞功能测定
免疫学系
目的要求
1.掌握小鼠腹腔巨噬细胞的分离方法 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3.了解细胞吞噬实验的研究意义
• 吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞一般指血液中
的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器 官、组织中的巨噬细胞,两者构成单核吞噬细胞系统。
单核/巨噬细胞具有很强的吞噬能力,特别是巨噬细胞, 在适应性免疫和固有免疫中均发挥重要作用。
小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备
脱椎致死
吸取腹腔液
分离腹腔巨噬细胞
1、剪开腹部皮肤
2、将左下方腹膜剪开一小口,暴露腹腔
3、用移液器吸取2mL PBS注入腹腔中,轻柔腹部1-2min 4、再用吸管吸取腹腔洗液于15ml离心管中,定容到5ml 5、1500rpm,离心5min,弃上清 6、5ml PBS重悬细胞,1500rpm,离心5min,弃上清 7、500μL PBS重悬细胞,取20 μL用于细胞计数 8、调整细胞浓度到2*106/ml
结果观察与分析
• 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
吞噬百分数=
吞噬酵母菌的巨噬细胞数 100个巨噬细胞总数
x100%
吞噬指数=
巨噬细胞中吞噬的酵母菌的总量 100个巨噬细胞总数
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