岛津液相色谱使用方法和注意事项

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岛津液相色谱操作规程

岛津液相色谱操作规程

岛津液相色谱操作规程
《岛津液相色谱操作规程》
一、实验目的
通过本实验,掌握岛津液相色谱仪的操作规程,掌握样品的制备和色谱分离技术,为进一步的实验研究提供基础。

二、实验原理
液相色谱是一种色谱分离技术,利用样品在流动液相中的分配作用,通过填料对组分进行分离,岛津液相色谱仪是一种现代化的色谱分析仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

三、实验步骤
1. 准备工作
①打开岛津液相色谱仪,并进行预热,等待仪器稳定后再进
行实验操作。

②准备样品及流动相溶液,确保样品浓度和pH值符合实验要求。

2. 样品制备
将待分析的样品进行适当的提取和制备,使其适合进行液相色谱分析。

3. 样品进样
将制备好的样品溶液通过进样装置,注入到液相色谱仪的进样室中。

4. 流动相设置
根据待分离的成分特性,设置合适的流动相溶液,并进行气泡排除。

5. 柱温及流速设置
根据实验要求,设置色谱柱的温度和流速参数,确保分离效果。

6. 启动分析
根据操作规程,启动液相色谱仪,对样品进行分析,记录分离曲线和峰面积。

四、实验注意事项
1. 操作仪器时需佩戴手套、护目镜等防护用具,避免对皮肤和眼睛造成损伤。

2. 样品制备需要在干净的实验室条件下进行,避免杂质的干扰。

3. 在操作过程中需严格按照操作规程进行,避免因操作失误导致高压系统受损或样品污染。

4. 实验结束后,对仪器进行彻底清洁和维护,保证下次使用时的准确性和稳定性。

通过学习和掌握《岛津液相色谱操作规程》,能够更加熟练的操作岛津液相色谱仪,提高实验效率和准确性,为科学研究提供有力的支持。

2024年岛津液相色谱仪操作规程

2024年岛津液相色谱仪操作规程

2024年岛津液相色谱仪操作规程第一章总则第一条为规范《岛津液相色谱仪操作规程》的使用,保证实验室工作的顺利开展,特制定本操作规程。

第二章设备要求第一条实验室应配备岛津牌液相色谱仪,确保设备的正常使用。

第二条液相色谱仪应在安全可靠的条件下运行,并定期进行维护与检修。

第三条液相色谱仪的操作人员应熟悉设备的使用方法,掌握设备的性能参数。

第四条实验室应按照设备的要求设置合适的环境条件,确保设备正常运行。

第三章操作流程第一条操作前准备1.操作人员应熟悉液相色谱仪的使用手册,了解仪器的基本原理和操作方法。

2.检查液相色谱仪的电源是否正常,仪器是否处于待机状态。

3.检查试剂和耗材的准备情况。

第二条样品的准备1.检查样品的标签是否正确,确保标本的完整性。

2.按照标准操作规程准备样品,并记录样品的相关信息。

第三条色谱柱的安装1.检查色谱柱是否干净、完好。

2.将色谱柱安装在液相色谱仪上,并检查连接是否牢固。

第四条操作步骤1.打开液相色谱仪电源,等待仪器自检完成。

2.按照样品的检测要求设置液相色谱仪的相关参数和程序。

3.根据需要进行样品的预处理,如稀释、过滤等。

4.将样品注入进样器中,并确保进样量的准确性。

5.启动液相色谱仪的运行程序,观察运行过程中的各指标,并记录相关数据。

6.运行结束后,关闭液相色谱仪电源,清洁仪器和周边环境。

第五章操作注意事项第一条操作人员应严格按照设备的操作规程进行操作,不得随意更改参数和程序。

第二条操作人员应熟悉液相色谱仪的常见故障排除方法,并能快速准确地进行处理。

第三条操作人员应定期检查液相色谱仪的性能,如流量、压力等参数的准确性。

第四条液相色谱仪的使用和维护应由专职人员负责,不得由未经培训的人员操作。

第六章紧急处理第一条在液相色谱仪操作过程中,如遇到紧急情况,应立即采取相应的应急措施,并及时报告设备负责人。

第二条操作人员在出现疑问时,应及时咨询设备负责人或专业人士,以保证实验的顺利进行。

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程一、前言岛津液相色谱仪LC-16是一种常用的分析仪器,广泛应用于医药、化工、环保、食品等领域。

有效的操作方法能够保证仪器的正常运行和分析结果的准确性。

本文将详细介绍LC-16的操作规程,以便操作人员正确、高效地使用该仪器。

二、仪器检查与准备1.打开仪器:首先确保电源插座连接良好,然后打开电源开关,待指示灯亮起后,操作主机面板上的“电源”按钮。

2.检查系统状态:等待3分钟左右,系统自检完毕后,确认仪器状态是否正常。

检查流量计、压力计等指示器是否指示正常。

3.检查溶剂:确认进样器中的溶剂是否充足,并检查进样器密封垫是否完好。

4.准备色谱柱:在试样进样前,应先连接色谱柱,并用适当的溶剂进行平衡。

5.初始设定:按照操作手册的要求进行初始设定,包括流速、波长、检测器灵敏度等。

三、样品准备与进样操作1.样品准备:将待测试的样品溶解于适当的溶剂中,进行滤过处理以去除杂质。

2.进样操作:将样品用微量注射器注入进样器中,确保不产生气泡或溢出,并注意不影响进样器密封。

四、色谱条件设置1.流动相设置:按照实验要求,调节流动相组成和流速,确保保持恒定。

2.色谱柱温度:根据样品的特性,设置色谱柱的温度。

3.检测器参数:根据所需检测方式,设置检测器的参数,包括波长、响应时间等。

五、色谱分离操作1.启动进样:按照操作手册的要求,启动进样器,并检查样品是否成功进入色谱柱。

2.开始分离:确认所有参数设置无误后,将仪器调至运行状态,开始进行分离操作。

3.监控分离进程:根据检测器输出的信号,监控分离进程,确保分离效果。

根据需要,可调整参数以优化分离。

六、数据处理与结果分析1.数据采集:监控检测器输出的信号,进行数据采集。

确保采集到准确、完整的数据。

2.数据处理:使用色谱软件对采集到的数据进行处理,包括峰识别、积分、定量计算等。

3.结果输出:将处理后的结果输出到打印机或计算机中,保存记录。

七、仪器关闭与维护1.关闭仪器:在操作结束后,按照操作手册要求,逆序关闭各个部件,包括检测器、色谱柱、进样器等。

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程
《岛津液相色谱仪操作规程》
一、安全操作
1. 操作前需穿戴实验室工作服和手套,避免直接接触化学品。

2. 注意色谱柱和连接管路是否紧密,防止发生漏液。

3. 操作过程中如有异常情况,应立即停机并通知相关人员进行处理。

二、仪器准备
1. 打开色谱仪设备,进行预热和系统平衡。

2. 检查色谱柱和连接管路是否清洁,并进行必要的清洗和更换。

3. 确认流动相和样品已配制好,无气泡和杂质。

三、样品装载与分离
1. 将已检测样品注入色谱柱,并根据分析要求设置好流速和梯度。

2. 监控色谱图谱和监测结果,确保分离效果良好。

四、数据记录与分析
1. 记录样品注入的时间、流速参数和梯度设置。

2. 对得到的色谱图进行分析,提取样品信息并保存数据。

五、仪器维护与清洗
1. 每次使用后对色谱柱和管路进行清洗和消毒,避免污染和交叉感染。

2. 定期对色谱仪进行维护保养,确保仪器的稳定性和准确性。

通过严格按照《岛津液相色谱仪操作规程》进行操作,可以保证实验结果的准确性和可靠性,保护人员和设备的安全,以及延长仪器的使用寿命。

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程一、安全操作规定1. 操作人员应穿戴实验室应有的防护装备,包括实验服、眼镜、手套等,确保个人安全。

2. 操作过程中应避免将试剂或溶液直接接触皮肤或眼睛,如有不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并寻求医疗帮助。

3. 操作完成后应关闭仪器电源,拔掉电源插头,保持仪器干燥,避免发生火灾或电击事故。

二、前期准备1. 检查岛津液相色谱仪的电源和电压,确保工作条件正常。

2. 检查进样器和色谱柱的安装是否正确,充分保证仪器的质量控制。

3. 检查管路连接是否牢固,消除任何泄漏问题。

4. 准备好所需的溶剂和标准物质,确保实验材料的质量。

三、仪器调试1. 开启电源,打开岛津液相色谱仪的电源开关,等待仪器启动。

2. 进入液相色谱仪的操作界面,进行仪器的初始设置,包括温度、流速、进样量等参数的设置。

3. 进行系统的漏液测试,确保仪器中不存在任何泄漏问题。

4. 检查色谱峰的基线和分辨率,调整仪器的参数,使分析结果达到最佳状态。

四、样品准备1. 根据实验要求准备样品溶液,确保样品完全溶解,避免出现颗粒或团聚现象。

2. 使用过滤器或离心机将样品处理,以去除杂质或固体颗粒。

3. 根据实验要求调整样品的浓度和pH值,以获得期望的分析结果。

五、进样操作1. 将待测样品经过一定的稀释后,使用微量注射器将样品注入进样器。

2. 调整进样器的参数,包括进样体积、进样速度等,确保样品能够被有效进样,并避免样品流失或堆积。

3. 确保进样器和色谱柱之间的连接无泄漏,避免样品漏出或污染仪器。

六、运行分析1. 确保液相色谱仪的运行条件和方法已经设定好。

2. 打开色谱柱的流动阀,使溶剂流动起来,开始分析过程。

3. 监控色谱图形展示的情况,观察峰形、基线和分辨率等参数,进行实时调整和纠正。

七、分析结果验证1. 分析过程中,定期检查色谱柱的状况,如有需要,及时更换色谱柱,以保证分析结果的准确性和可靠性。

2. 分析结束后,根据实验要求对结果进行统计和分析,进行数据处理,并绘制相关图表。

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程一、前言二、实验前准备1.确保岛津液相色谱仪处于正常工作状态,检查仪器的电源、进样器、柱室等部件是否正常。

2.检查移液枪和样品瓶是否干净,无杂质和残留液体,以免产生干扰。

3.准备好所需的溶剂和标准溶液,并进行必要的稀释和混合。

4.根据样品的特性和要求,选择合适的色谱柱和流动相。

三、仪器操作1.打开岛津液相色谱仪的电源,并进行系统自检。

在自检完成后,确保仪器处于待机状态。

2.确定所需的色谱方法和实验参数,如流量、波长等。

在仪器的控制面板上设置好这些参数。

3.录入样品信息,包括样品编号、浓度、体积等,并设置进样器的参数。

4.检查色谱柱是否已经安装到柱室中,并确保柱室的温度稳定。

5.打开进样器的盖子,并用移液枪吸取适量的样品溶液,将其注入进样器。

6.关闭进样器的盖子,并开始进行色谱分离。

根据实验方法的要求,调节流动相的流速和浓度梯度。

7.在色谱运行的过程中,观察柱前检测器和柱后检测器的信号,并进行记录。

8.当分离和峰形分析完成后,关闭色谱柱的流动相,并停止实验。

四、仪器维护1.实验结束后,及时清洗进样器和柱室,确保没有残留的样品和溶剂。

2.检查流量计和压力表的读数是否正常,如有异常应及时进行维修或更换。

3.定期对移液枪进行维护和校准,以确保样品的准确进样。

4.定期进行仪器的保养和检修,如清洗流道、校准波长等。

五、安全注意事项1.在操作液相色谱仪时,应佩戴实验手套和护目镜,以免化学品溅入眼睛或皮肤。

2.注意溶剂的选择和使用,避免挥发性溶剂的大量蒸发,以防止有害气体的产生。

3.在样品进样和仪器维护时,避免接触尖锐物品和高温的部件,以免造成意外伤害。

4.禁止在仪器上堆放杂物和其他实验器具,以免影响仪器的正常工作。

六、总结岛津液相色谱仪的操作规程是保证实验准确性和安全性的重要措施。

通过遵循操作规程,可以提高实验的成功率,减少实验误差,并确保仪器的正常使用和维护。

同时,在操作过程中要时刻注意安全事项,保护好自己和他人的人身安全。

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程一、仪器简介岛津液相色谱仪LC-16是一种用于分离和分析化合物的仪器,通过液相色谱技术实现。

它广泛应用于生物化学、药物分析、环境监测等领域。

本规程将详细介绍LC-16的操作方法,以保证准确、安全地使用该仪器。

二、仪器安全操作1.操作人员需在使用前仔细阅读并理解仪器的操作手册,确保熟悉仪器的功能和操作步骤。

2.操作人员在进行仪器操作前,需佩戴实验室防护装备,包括实验服、手套和护目镜。

3.确保工作台面干净整洁,防止溅洒试剂或样品造成污染。

4.对于高压部分,操作人员应特别注意不要用力过大,以免造成意外伤害。

三、仪器操作步骤1.打开仪器电源,待仪器初始化完成后,检查仪器工作状态是否正常。

如有异常情况,应停止操作,并联系维修人员进行处理。

2.将待测样品装入进样器中,并按照仪器说明书进行进样操作。

3.设置色谱条件,包括流动相、柱温、检测波长等参数,根据待测物质特性进行调整。

4.启动仪器进行分析,监测色谱曲线的变化,根据需要调整相关参数以获取满意的分离效果。

5.分析结束后,关闭仪器电源并对仪器及周围环境进行清洁和消毒处理。

四、操作注意事项1.严格按照实验操作规程进行操作,不得随意更改或省略操作步骤。

2.避免操作过程中产生静电,防止对仪器产生影响。

3.在使用仪器过程中,如发现任何异常情况,应及时停止操作,并及时向主管或维修人员报告。

4.在操作过程中,注意保持清洁,避免污染样品或试剂。

操作结束后,及时对仪器进行清洁和消毒处理。

五、仪器维护1.定期对仪器进行维护保养,如更换耗材或维修部件。

2.在使用过程中,注意保持仪器的清洁,并定期清洁主要部件,避免因污染而影响仪器的分析能力。

3.对于仪器性能出现异常情况,应及时联系专业维修人员进行处理,切不可私自拆卸或更改仪器部件。

岛津SPD-15C 高效液相色谱的使用

岛津SPD-15C 高效液相色谱的使用
3.4仪器参数设置
点【文件】项下【新建方法文 件】,单击“仪器参数视图” 下【正常】选项,可以在其中 输入分析条件,例如LC停止时 间、泵A流速、检测器A波长通 道 等。确保为每一检测器设置 了【LC停止时间】【结束时间 】。 【LC停止时间】是控制仪 器的持续时间。如果时间程序 或馏分收集时间程序都没有设 置,则将其保留为0.01min。
By 孙毅
三.操作过程
3.4.1进样设置
确保显示【就绪】,且【色谱 图视图】中的基线稳定后(一 般约需15~30分钟)。单击【 LC实时分析】窗口助手栏上的 “单次运行”图标,出现“单 次运行”屏幕,设置样品名、 样品ID、数据文件、数据描述 、进样体积等,然后单击【确 定】。
By 孙毅
三.操作过程
By 孙毅
三.操作过程
3.6 数据处理
方法2 除上述办法分析数据外,可 以直接找到存储数据文件的 文件夹,打开文件,单击【 数据】然后点击【峰表】, 在峰表中查看并记录所需的 保留时间,峰高,峰面积等 信息。
By 孙毅
三.操作过程
3.7打印报告
打印报告:在【LC数据分析】点击左下角的【报告 格式】出现“操作人”名,选 定“操作人”双击。然后点击左下角【数据】,从【 数据】中拖动【数据文件】进行打印报告。
By 孙毅
三.操作过程
3.8清洗和关机
分析完毕后,先关色谱工作站和检测器,再用适 当经滤过和脱气的溶剂清洗色谱系统,一般用先 用25~30%甲醇冲洗,然后用纯甲醇冲洗,25~ 30%甲醇一般冲洗 15~30分钟,纯甲醇冲洗不得 少于30分钟,特殊情况应延长冲洗时间。 关断电源,作好使用登记,内容包括日期,检品 ,仪器完好状态等。
By 孙毅
一.操作准备

岛津液相色谱操作规程

岛津液相色谱操作规程

岛津液相色谱操作规程1.实验室准备1.1确保工作台面清洁整洁,并保持周围环境安静;1.2校准和准备所需的仪器和设备,包括液相色谱仪、色谱柱、样品容器等;2.色谱柱选择与装置2.1根据实验需求,选择适合的色谱柱,并按照使用说明进行装置;2.2检查色谱柱是否正常运行,包括确保柱温稳定、调整流速和检查系统压力等;2.3确保色谱柱的亲疏水性能满足分离要求,必要时进行条件调试。

3.样品制备与处理3.1准备样品溶液,确保其质量和浓度符合分析要求;3.2过滤样品溶液,以去除杂质和颗粒;3.3如果需要,进行适当的样品前处理,如萃取、酸化、碱化等。

4.仪器调试与联机4.1检查液相色谱仪的所有连线和接头,确保其正确连接;4.2启动液相色谱仪,并进行系统自检和校准;4.3联机计算机,打开色谱软件,并进行相应参数的设置和校准;4.4将色谱柱连接到液相色谱仪,调整液流路径和系统流速;4.5运行空白样品,以评估仪器的基线和峰形。

5.样品进样与分离5.1调整进样器的进样量和进样速度,确保样品在色谱柱中均匀分布;5.2开始色谱运行,记录样品的进样时间和进样顺序;5.3在分离过程中,观察色谱峰的形状和分离程度,并记录有关数据;5.4如有需要,可以调整色谱条件,如流速、温度、移液器位置等。

6.数据处理与分析6.1根据实验要求,收集色谱图谱和有关数据;6.2使用色谱软件对数据进行处理和分析,包括峰面积计算、峰分离度评估、峰定性等;6.3根据数据分析结果,进行结果解释和讨论,并撰写实验报告;6.4在实验结束后,清洗和维护液相色谱仪和相关设备。

7.安全注意事项7.1操作前必须佩戴实验室个人防护用品,如手套、护目镜等;7.2确保实验室通风良好,以避免有害气体和溶剂蒸气的积聚;7.3注意溶剂的挥发性和易燃性,避免火源和静电;7.4操作过程中注意防护设备的正确使用,以及实验室的整洁和安全。

以上为岛津液相色谱操作规程的大致内容,具体操作细节和实验要求还需根据不同的实验室条件和实验目的来确定。

岛津LC-2030型高效液相色谱仪操作规程

岛津LC-2030型高效液相色谱仪操作规程

岛津LC-2030型高效液相色谱仪操作规程一、操作步骤1、开机a、首先打开计算机及LC-2030模块电源(不分先后),等待仪器自检通过并与计算机通讯成功后,进入联机工作站。

b、按purge键进行自动脱气,一般设置为3分钟;然后按自动进样器软键盘的purge键,对自动进样器上的进样针进行脱气,一般为10分钟。

双击Lab Solution图标。

输入用户名Admin,点击OK。

c、单击仪器开关按钮,将软件与仪器连接2、方法编辑a、打开【数据采集】窗口,在仪器参数视图中选择常规,然后根据需要依次改变其中的参数。

泵:根据选择等度或者低压梯度并设置流量、溶剂比例及名称检测器:设置检测器波长。

柱温箱:设置柱温箱的温度。

自动进样器:不需要重新设置。

自动排气:不需要重新设置。

方法设置完后,选择文件,另存为方法文件。

当仪器稳定,基线稳定后,可以下载方法,进行样品的分析。

3、运行a、单次分析打开【数据采集】窗口,打开【单次分析】子窗口,出现对话框,选择已经编辑的方法,输入文件名,输入样品瓶,样品架和样品的体积,单击确定可以进行样品的分析。

点击辅助栏停止或者停止的快捷键,可以将分析停止。

b、批处理分析打开【批处理分析】窗口,单击向导,可以新建,也可以附加一个批处理文件。

选择方法文件,输入开始样品瓶,样品架,进样体积。

下一步。

输入样品组数,选择标准品和未知。

下一步。

输入标准品名字,ID,校准级别,数据文件名。

下一步。

输入未知品名字,ID,数据文件名。

下一步。

下一步,完成。

出现批处理文件。

另存批处理文件。

单击批处理开始,开始分析样品。

4、关机样品分析完毕,按照色谱柱的冲洗要求进行冲洗。

冲洗完后,仪器参数视图,将总流速设为0,下载。

然后单击仪器开关,关闭软件,最后将电源关掉。

5、积分单击再解析,打开已经完成的数据,会看到数据、方法、报告格式、批处理、全部文件形式。

点击分析图标,选择所要波长下的峰。

在积分页面,选择通道,半峰宽,斜率,最小峰面积,一般选择面积选项。

岛津液相色谱仪操作规程范本

岛津液相色谱仪操作规程范本

岛津液相色谱仪操作规程范本一、实验前准备1. 检查仪器连接1.1 检查仪器的电源线、电压稳定器和数据线的连接是否牢固。

1.2 检查进样器和检测器的连接是否正确。

1.3 检查流动相槽和固定相槽的连接是否紧密。

1.4 检查进样器和柱温箱的连接是否松动。

2. 准备溶剂2.1 根据实验需求准备所需的溶剂,并保证其纯度。

2.2 根据仪器手册的要求,配置好流动相溶液。

3. 准备标准样品和待测样品3.1 准备标准样品,确保其纯度和浓度。

3.2 准备待测样品,并进行必要的预处理。

4. 检查色谱柱4.1 检查色谱柱的状态,确保其没有损坏或被污染。

4.2 检查柱前过滤器和柱后过滤器的连接是否正常。

4.3 如果发现柱前或柱后过滤器被污染,应及时更换。

5. 温度调节5.1 根据实验要求,调节柱温箱的温度,确保实验温度的稳定性。

5.2 注意避免柱温过高或过低,以防止影响实验结果的准确性。

二、操作步骤1. 开机准备1.1 打开岛津液相色谱仪电源开关,待仪器自检完成后进行下一步操作。

1.2 打开计算机,并运行液相色谱软件。

2. 样品进样2.1 将标准样品和待测样品分别注入进样器中,保证进样量的准确性。

2.2 确保进样口密封,以避免样品挥发或泄漏。

2.3 根据需要设置进样器的进样速度和进样模式。

3. 流动相条件设置3.1 在液相色谱软件中设置流动相的组成和流速。

3.2 注意设置好梯度洗脱的曲线和时间。

4. 柱温控制4.1 根据实验要求,在液相色谱软件中设置柱温的温度。

4.2 确保柱温的稳定性,避免影响柱效果。

5. 检测器设置5.1 在液相色谱软件中设置检测器的检测波长和灵敏度。

5.2 确保检测器的灯源正常工作,避免灯源老化或损坏。

6. 实验运行6.1 在液相色谱软件中点击运行按钮,开始进行色谱分离。

6.2 观察色谱图像,确保其质量良好。

6.3 如有需要,可根据实验结果进行进一步的优化操作。

7. 实验结束7.1 结束实验后,停止仪器的运行。

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程岛津液相色谱仪操作规程一、仪器使用前的准备1.检查电源和电线是否连接牢固。

2.检查所有传感器和探头是否完好无损。

3.检查恒温箱是否正确连接管道。

4.检查机械部件是否灵活。

二、开机前操作1.连接电源线并插入插头。

2.开启电源开关后,屏幕会自动显示出大多数参数。

这时,用户可以判断机器是否正常运行,以及是否有任何问题。

3.如果发现任何问题,请联系维修工程师或技术支持人员进行排查。

三、开机后操作1.首先要将梯度泵、流量调节阀、自动进样器、荧光检测器、二极管阵列检测器及恒温箱预先调试好,同时将所有的泵和检测器密封。

2.打开软件,启动机器。

3.在电脑端软件上通过“SET”键设置实验需求,调节参数,建立所需的方法。

例如,建立一个梯度稀释实验,先要选择某个浓度的混合物A和混合物B进行混合,然后梯度稀释,并通过检测器检测样品溶液。

在此过程中,用户可以为每种混合物设置参数,比如流量和时间等。

4.加载样品。

5.选择需要分析的离子或分子。

6.选择所需的检测器,并开始记录数据。

7.整个实验完成后,将机器关闭并断开电源。

四、注意事项1.在操作液相色谱仪时,要小心谨慎,不要让任何有害物质或化学物质进入内部。

在使用器具或清洁液体时,要确认它们完全适用于该仪器,否则有可能会损坏机器。

2.在关闭机器之前,请务必正确地存储数据,以便在需要时通过软件进行分析和比较。

3.对于新手,应在熟练掌握操作之前,进行实验室管理培训,以理解仪器的组成、操作方法、调试工具以及仪器保养等。

4.仪器的应用范围相当广泛,但是在操作液相色谱仪时,要小心,防止接触到任何可能造成损害的物质。

在灭菌试剂、酸等易反应的化学品在使用前要仔细读取说明书并掌握正确的操作方法。

5.在仪器使用过程中,如果发现有问题(如仪器不能正常运行),应立即停机,并立即和仪器维修工程师联络。

岛津(手动进样)液相色谱仪操作规程精选全文

岛津(手动进样)液相色谱仪操作规程精选全文

可编辑修改精选全文完整版岛津(手动进样)液相色谱仪操作规程一、使用条件:使用前检查仪器的所有管路内是否有气泡,仪器设置的参数是否正确,压力是否正常。

二、使用方法1.打开电源开关,打开泵和检测器、电脑。

待检测器自检正常后开始正确的操作。

2.启动分析仪器并登陆“LC实时分析”,配置并认证每一分析仪器。

3.准备分析仪器:a.请确保分析仪器的所有单元(泵、柱温箱和检测器)都已连至系统控制器。

b.打开每单元的电源,初始化每一个单元。

c.确保所有单元上都没有显示任何错误信息。

4.登陆“LC实时分析”:a. 双击“LC solution”或“LC solution Lite”。

b.单击屏幕左侧的【操作】标签。

c.单击仪器的【分析】界面。

5.设置分析仪器的系统设置a.单击【LC实时分析】窗口(初始设置)左侧助手栏中的(系统配置)图标。

b.在【用于分析的模块】列表中,双击【仪器】。

c.在【仪器】屏幕中,选择仪器类型和通信设置,然后单击【确定】。

d.检查【系统配置】屏幕中的仪器模块。

e.双击每一模块的图标以查看它的属性屏幕。

f.检查每一模块的属性之后,单击【确定】并退出【系统配置】屏幕。

6.检查分析仪器,以确保没有任何仪器故障。

7.设置仪器参数。

8.执行单次运行(适用于LC solution),执行批处理分析(适用于LC solution Lite)。

9.生成校准曲线。

10.创建数据分析参数。

11.查看校准曲线。

12.使用校准曲线计算数据浓度。

三.注意事项:1.每次开机前一定要确保仪器的各个管路没有气泡。

2.打开检测器后一定待检测器自检完毕后才能开始正常的操作。

3.每次更换清洗液或流动相时都要把泵Purge一次,把液体里的气泡排除,以免影响结果。

4.检查仪器系统配置是否正常,待一切正常后才能开始操作。

5.对于LC solution即手动进样器,每次进样不能少于60ul,而且动作要快;对于LC solution Lite即自动进样器,每次进样不能少于60ul,而且编制的批处理数据一定要正确,否则样品数据将错误。

岛津液相色谱仪操作规程

岛津液相色谱仪操作规程

编号:CZ-GC-07199岛津液相色谱仪操作规程Operating procedures for Shimadzu liquid chromatograph( 操作规程)单位:_____________________审批:_____________________日期:_____________________WORD文档/ A4打印/ 可编辑岛津液相色谱仪操作规程操作备注:安全操作规程是要求员工在日常工作中必须遵照执行的一种保证安全的规定程序。

忽视操作规程在生产工作中的重要作用,就有可能导致出现各类安全事故,给公司和员工带来经济损失和人身伤害,严重的会危及生命安全,造成终身无法弥补遗憾。

一、开机操作规程1.开机按Power键,按以下顺序依次开启HPLC系统各设备的电源:总电源→泵→柱温箱2.脱气将吸滤头分别放入流动相中,旋转排液阀至180度,启动键板上的Purge键,排液1~2min;再按一次Purge键停止冲洗操作,关紧排液阀。

3.设定参数按Func键依次设定仪器参数:流速(或压力)、压力最大限、压力最小限。

当屏幕显示区闪烁时,提示可以输入数值,按Enter 键确认。

在A泵面板上,按Conc键,根据流动相比例,设置B泵比例。

4.启动流速先按CE键显示初始屏幕,然后按一下Func键,屏幕显示区闪烁,提示可以输入数值,按Enter键确认。

以0.2ml/min的梯度逐步升至所需流速(一般为1.0ml/min)。

按Enter键之前,按CE键可以删除新设定的数值。

5.准备进样平衡10min后,开启检测器、计算机以及信号收集器。

待基线平衡后(约15~30min),进样,即可进行等度洗脱。

6.梯度洗脱先按照上述方法,设定好0时刻流动相比例,然后按edit键编辑梯度程序,然后按Enter键,按照规定流程进行设定。

6.1如有要删除的程序步骤,就按Enter键查找需要删除的程序,然后按del键即可。

6.2切记:最后设定好程序,按CE键返回原始状态,升至需要流速,等基线平衡后(约15~30min),进样,立即按run键,启动梯度程序。

简化岛津LC20A高效液相色谱仪操作规程

简化岛津LC20A高效液相色谱仪操作规程

简化岛津LC20A高效液相色谱仪操作规程一、引言岛津LC20A高效液相色谱仪是一种常用的仪器设备,广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。

本文档旨在简化岛津LC20A高效液相色谱仪的操作流程,提供操作规程,方便使用人员快速上手操作。

二、仪器准备在进行岛津LC20A高效液相色谱仪操作之前,应做好以下准备工作:1.检查仪器状态:确保仪器处于正常工作状态,检查电源、进样器、流动相泵等部件是否正常工作,若发现异常情况应及时处理。

2.准备标准样品和试剂:根据实验需求准备好所需的标准样品和试剂,务必按照要求进行储存和保管。

3.检查流动相液罐:检查流动相液罐是否有足够的液体,如液位过低应及时补充。

4.准备耗材:预先准备好所需的色谱柱、进样器垫片、注射器等耗材,并确保其与实验要求相符。

三、操作步骤根据实验的需要,岛津LC20A高效液相色谱仪的操作步骤主要包括样品进样、流动相泵操作、柱温箱设置等。

以下为基本操作规程:1. 样品进样1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的电源开关,待仪器自检完成后,确保进样器位于初始位置。

2.使用洗槽溶液洗净进样器。

将洗槽溶液注入洗槽中,将进样器连接到洗槽并执行洗涤步骤,直至进样器完全清洗干净。

3.准备好待测样品,使用注射器将样品注入进样器中,注意避免泡沫产生。

4.根据实验需求设置好进样器参数,包括进样体积、进样方式等。

5.执行进样操作,将样品进样到色谱柱中。

2. 流动相泵操作1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的流动相泵电源开关。

2.设置流动相泵的参数,包括流速、梯度程序等。

根据实验需求选择合适的流速和梯度程序。

3.检查流动相液罐液位,如不足应及时补充,确保流动相液罐中有足够的流动相液。

4.执行流动相泵操作,开始流动相的供液。

3. 柱温箱设置1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的柱温箱电源开关。

2.设置柱温箱的温度,根据实验要求选择合适的温度。

3.检查柱温箱温度传感器的连接情况,确保温度传感器与柱温箱连接正常。

岛津液相色谱使用方法和注意事项

岛津液相色谱使用方法和注意事项

【转帖】岛津液相色谱仪注意事项岛津液相色谱仪注意事项1.流动相必须用HP LC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。

2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。

3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。

对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。

5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。

6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。

8.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。

清洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;③用10%稀硝酸清洗。

9.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。

11.要注意柱子的P H值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。

12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。

更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

高效液相色谱常见故障的断定及解决可能的原因及解决方法(一)保留时间变化1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相P H值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四) 出现肩峰或分*1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TF A)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量,用HP LC级的水(六) 基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HP LC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相P H值,钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 5.同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。

岛津液相色谱仪操作规程(3篇)

岛津液相色谱仪操作规程(3篇)

岛津液相色谱仪操作规程一、检查设备准备工作1. 确保岛津液相色谱仪和相关附件处于正常工作状态,检查仪器的电源、电缆以及管道连接是否正常。

2. 检查色谱柱的状态,确保色谱柱为干净、无损坏的状态。

二、开机准备3. 打开仪器电源,待设备启动完成后,打开色谱软件。

4. 检查色谱软件的设置,包括流速、检测器波长、温度等参数是否符合实验要求。

5. 等待液相色谱仪进行自动校准,校准完成后,进行进一步操作。

三、样品准备6. 根据实验要求,准备好待测样品,并按照相关步骤进行前处理。

7. 将样品转移至进样器,并确保进样器处于关闭状态。

四、进样设置8. 打开色谱软件的进样界面,选择合适的进样模式(如定量进样、质量进样等)。

9. 根据实验要求设置好进样容量、进样速度等参数。

五、柱温控制10. 打开色谱软件的柱温界面,根据实验要求设置合适的柱温控制参数。

11. 等待柱温稳定后,进行下一步操作。

六、流速设置12. 打开色谱软件的流速控制界面,根据实验要求设置合适的流速参数。

13. 检查液相色谱仪的流路是否正常连接,并确保进样和进油阀处于关闭状态。

14. 打开进样阀和进油阀,根据实验要求设定进样时间和进油时间。

七、检测器设置15. 打开色谱软件的检测器界面,根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。

16. 设置检测器的波长、增益等参数。

八、开始分析17. 点击色谱软件界面上的“开始运行”按钮,液相色谱仪开始进行分析。

18. 观察色谱图的显示情况,检查峰形、峰高、峰面积等参数,确保分析结果准确可靠。

九、实验结束19. 分析结束后,关闭色谱软件和仪器电源。

20. 清洗色谱柱和相关流路,保证仪器的使用寿命和分析结果的准确性。

以上为岛津液相色谱仪的操作规程,按照以上步骤进行操作可以保证实验的准确性和稳定性。

在操作过程中要注意安全,并严格按照实验要求进行操作。

岛津液相色谱仪操作规程(2)一、安全操作规程1. 在操作前,应确保色谱仪的电源已经关闭,并且所有设备和仪器都处于正常工作状态。

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册

岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪:三、操作步骤:1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。

样品分析前首先要确定用什么检测器,然后把色谱柱连接到所需的检测器上。

2、开机a、首先打开UPS,然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元(泵)、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A,CTO-20A柱温箱电源打开。

(HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角)b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度,按purge键进行自动脱气,一般设置为3分钟;然后按自动进样器软键盘的purge键,对自动进样器上的样品进行脱气,一般为25分钟。

c、双击Lc solution图标。

输入用户名Admin,点击OK。

单击系统配置的图标,出现系统配置的对话框。

单击自动配置,仪器自动将能找到的仪器配置,也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。

需要注意的是,仪器优先选择自动进样器,如果需要手动进样,需将自动进样器去掉。

单击仪器(通讯设置),选择正确的仪器类型,然后单击自动获取IP地址。

单击系统控制器,出现系统控制器的对话框,继电器的四个选项需要设置为start。

d、单击仪器开关按钮,将软件与仪器连接e、仪器参数视图里面,简单设置里面,模式选择二元高压梯度,设置总流速,泵B浓度,时间,柱温箱温度,时间程序。

然后选择下载,跑基线。

单击绘图,可以看查看基线。

3、方法编辑a、下图中看到仪器参数视图,选择高级,然后依次改变其中的参数。

如果仪器为PDA检测器时,则按以下进行设置。

数据采集:LC停止时间为。

采集时间打勾,结束时间为分析样品的时间。

LC时间程序:如果等度洗脱,则设置如图中 controller stop。

进行梯度洗脱时需要如图所示进行设置。

岛津高效液相色谱仪的规范操作

岛津高效液相色谱仪的规范操作

岛津高效液相色谱仪的规范操作1.准备工作首先,检查仪器是否处于正常工作状态,包括电源连通、气压正常等。

确认荧光灯等部件是否工作正常,并预热柱箱至设定温度。

2.样品准备准备待测样品,并注意避免样品受到光、热、氧等因素的影响。

对于固态样品,需要将其溶解于适当的溶剂中使其达到所需浓度。

3.选择适当的柱和流动相根据待测物的性质选择合适的柱填料,并根据分析要求选择合适的流动相组成和浓度。

将柱连接好,检查密封情况是否良好。

4.样品进样将经过准备的样品注射进进样器中。

注意避免气泡进入进样器,以免影响分析结果。

5.设置分析条件设置合适的流速、温度、检测器方式等分析条件。

流速要根据待测物的性质和柱填料的要求来进行选择。

温度要根据样品的性质和柱温要求来设定。

检测器方式可以选择紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器等。

6.运行分析按下分析按钮,启动分析程序。

观察色谱图的形状和峰的分离情况,根据需要进行优化。

确保波峰的峰型符合要求,峰高和峰面积的测量误差在可接受范围内。

7.数据处理将分析得到的数据导出,进行后续的数据处理。

常见的数据处理包括峰面积计算、定量分析、峰识别等操作。

8.仪器维护使用完毕后,及时对仪器进行清洗和维护。

清洗方法可以根据样品的性质来选择合适的清洗液。

对于常规的清洗,可使用纯水或有机溶剂进行冲洗;对于特殊情况下的污染,可以使用相应的清洗剂进行清洗。

以上就是岛津高效液相色谱仪的规范操作流程。

通过正确的操作,可以提高测量的准确性和可重复性,保证分析结果的可靠性。

同时,定期对仪器进行维护和保养,延长其使用寿命,确保分析工作的顺利进行。

岛津LC-2030C高效液相色谱仪操作指南

岛津LC-2030C高效液相色谱仪操作指南

岛津LC-2030C高效液相色谱仪操作指南岛津LC-2030C高效液相色谱仪操作指南一、前言本文档是岛津LC-2030C高效液相色谱仪的操作指南,通过详细介绍该仪器的操作步骤和注意事项,帮助用户快速上手使用该设备。

二、设备概述1、设备结构和主要组成部分a) 主机:包括控制面板、显示屏和操作按钮等;b) 注射器:用于样品的注射;c) 色谱柱:用于分离样品中的化合物;d) 检测器:用于检测和测量样品的组分;e) 泵:用于提供流动相,并控制流速。

2、设备特点a) 高灵敏度:采用先进的检测器和优化的流动相系统,可获得高灵敏度的分析结果;b) 高分离效果:配备高品质的色谱柱和优化的分离条件,可实现高效分离;c) 操作简便:采用用户友好的界面设计,操作简单方便;d) 多功能:可进行多种分析和检测,适用于不同的应用领域。

三、安全操作指引1、禁止操作人员未经授权打开设备外壳;2、在操作前,请确认设备的电源已经接地,并确保用电环境符合规定;3、使用绝缘手套和护目镜等个人防护装备;4、确保样品和试剂符合安全操作规范,避免接触皮肤或吸入;5、在操作过程中保持仪器周围清洁,避免杂物进入设备;6、使用完毕后,及时关闭电源,并进行仪器和周围的清洁。

四、仪器操作步骤1、准备工作a) 检查设备和周围环境是否符合操作要求;b) 打开设备电源,等待设备初始化;c) 检查需要使用的色谱柱、流动相和样品等是否准备就绪。

2、设备连接a) 将色谱柱正确连接至设备;b) 连接进样器,并根据需要设置注射量;c) 连接检测器,并根据需要设置检测模式。

3、参数设置a) 打开控制面板,选择相应的仪器控制软件;b) 根据需要,设置流动相的组成和流速;c) 设置检测器的参数,如波长、增益等。

4、样品注入a) 将样品溶液吸取到注射器中;b) 设置注射器的体积和注射速度;c) 手动或自动注射样品进入色谱柱。

5、分离和检测a) 启动设备,开始流动相的送进;b) 监控检测器输出的信号,并记录数据;c) 根据需要,进行数据处理和结果分析。

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【转帖】岛津液相色谱仪注意事项岛津液相色谱仪注意事项1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。

2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。

3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。

对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。

5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。

6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。

8.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。

清洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;③用10%稀硝酸清洗。

9.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。

11.要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。

12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。

更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

高效液相色谱常见故障的断定及解决可能的原因及解决方法(一)保留时间变化1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四) 出现肩峰或分*1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水(六) 基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 5.同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。

但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。

1、样品的前处理:a、最好使用流动相溶解样品。

b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。

c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。

2、流动相的配制:液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。

c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。

如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。

f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。

除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

2、流动相流速的选择:因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。

对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。

对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml /min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。

当选用最佳流速时,分析时间可能延长。

可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。

注意:a.由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。

b.对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。

用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。

c.含水流动相最*在实验前配制,尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。

最好加入叠氮化钠,防止细菌生长。

d.流动相要求使用0.45 µm滤膜过滤,除去微粒杂质。

e.使用HPLC级溶剂配制流动相,使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命,提高柱性能液相色谱的常用术语1、色谱曲线romatogram):色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图,或者通色谱图(ch过适当的方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。

2、(色谱)峰(chromatographic peak):色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。

3、峰底(peak base):峰的起点与终点之间的连接的直线。

4、峰高(h ,peak height):色谱峰最大值点到峰底的距离。

5、峰宽(W ,peak width):在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点的距离。

6、半高峰宽(W h/2 ,peak withd at half height):通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1 中的HJ)。

7、峰面积(A ,peak area):峰与峰底之间的面积(图1中的CHEJDC)。

8、拖尾峰(tailing peak):后沿较前沿平缓的不对称的峰。

9、前伸峰(leading peak):前沿较后沿平缓的不对称的峰。

(又叫伸舌峰、前延峰)10、假峰(ghost peak):除组分正常产生的色谱峰外,由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰,即并非由试样所产生的峰。

这种色谱峰并不代表具体某一组分,容易给定性、定量带来误差。

(又叫鬼峰)11、畸峰(distrorted peak):形状不对称的色谱峰,前伸峰、拖尾峰都属于这类。

12、反峰(negative peak):也称倒峰、负峰,即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。

柱的使用和维护注意事项(推荐)色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。

①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。

②.应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然③一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会迅速降低柱效。

④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶"饱和",避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。

下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序,作为参考:硅胶柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次冲洗,然后再以相反顺序依次冲洗,所有溶剂都必须严格脱水。

甲醇能洗去残留的强极性杂质,已烷使硅胶表面重新活化。

反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷(或氯仿)依次冲洗,再以相反顺序依次冲洗。

如果下一步分析用的流动相不含缓冲液,那么可以省略最后用水冲洗这一步。

一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质,在甲醇(乙腈)冲洗时重复注射100~200µl四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。

四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。

有时也注射二甲亚砜数次。

此外,用乙腈、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脱能除去蛋白质污染。

阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有机物)、甲醇、水依次冲洗。

⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。

绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

⑧色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。

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