细胞转染的各种方法比较

细胞转染的各种方法比较

梭华-Sofast TM基因转染试剂

（高效率和细胞毒性低的聚阳离子转染试剂）

梭华-Sofast TM是新一代的阳离子聚合物基因转染试剂，梭华-Sofast TM具有高效率转染所必备特征，如浓缩DNA，将DNA运送到细胞内，并使其在细胞核内释放等；梭华-Sofast TM 的细胞毒性很低，这是它的另一个重要特点；而且与其它转染试剂相比，梭华-Sofast TM很稳定，不被血清清除。以上优点使得基因转染的操作简便易行，重复性好。梭华-Sofast TM 已被成功应用于很多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染。

一. 特点

★转染效率高且稳定，比目前常用产品高10%。

★细胞培养基中的血清存在与否，均能获得高效率转染。

★细胞毒性低。

★转染程序简单，转染前后无需更换培养基转染实验可以在半小时内完成。

★价格比进口产品便宜60%。

★完善的技术支持，保证质量，无效退货。

二. 效果比较

将梭华转染试剂与其它公司的聚阳离子转染试剂和常用的脂质体转染试剂分别在常用

的报告基因如GFP、荧光素酶基因和LacZ基因的转染效率方面作了对比。

实验表明:

1. 梭华-Sofast TM具有很高和稳定的转染率，是一种很好的基因转染试剂。对某些常用的细胞株梭华-Sofast TM 转染率高于某常用阳离子脂质体，对其他多数细胞株的转染效率相近。

2. 需特别指出梭华-Sofast TM在原代培养细胞HUV-EC中有较高的转染效率，而大多数阳离子脂质体对此细胞的转染效率很低。

3. 通过检测转染细胞荧光素酶基因的活性，测定其转染效率。实验表明梭华转染试剂具有最高的转

染率。

4. 通过检测转染GFP基因的细胞所发出的荧光强度来测试转染效率，实验发现梭华转染试

剂的转染率比常用的脂质体转染试剂转染率高达5-10%。

三. 适用范围

☉适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染。

☉适用于瞬时转染和稳定转染。

☉适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染。

四. 各种转染方法的比较（在目前使用的方法中, 阳离子聚合物转染法是最好的转染试剂。）

转染方法原理主要应用特点主要的厂家

及产品

DEAE－葡聚糖法正电DEAE-葡聚糖与

核酸带负电的磷酸骨

架相互作用形成的

复合物被细胞内吞。

瞬时转染相对简便,但对细胞有一定的

毒副作用,转染时需除血清且

一般只用于BSC-1,CV-1,COS

细胞系。

Sigma

磷酸钙法磷酸钙DNA复合物吸

附细胞膜

被细胞内吞。稳定转染

染瞬转染

不适用于原代细胞（所需的

DNA浓度较高）,操作简便但

重复性差,有些细胞不适用。细

胞建议用CSCL梯度离心。

GIBCO BRL

Promega

阳离子脂质体法

带正电的脂质体与核

酸带负电的磷酸基团

形成复合物,然后脂质

体上剩余的电核与细

胞膜上的唾液酸残基

的负电核结合;另一种

解释是通过细胞是内

吞作用而被进入细胞。

(若DNA浓度过高,中

稳定转染

瞬时转染

所有细胞

使用方法简单,可携带大片段

DNA,通用于各种类型的裸露

DNA或RNA,能转染各种类型

的细胞,没有免疫原性。虽在体

外基因转染中有很高的效率,

但在体内,能被血清清除,并在

肺组织内累积,诱发强烈的抗

炎反应,导致高水平的毒性,这

在很大程度上限制了其应用。

Lipofectamine

2000Cellfectin

Roche

（Dosper

FuGENE 6）

Promeg

（Transfast

Transfectam）

和脂质体表面电核,而降低了与细胞的结合

能力)

阳离子聚合物法

带正电的聚合物与核

酸带负电的磷酸基团

形成带正电的复合物

后与细胞表面带负电

的蛋白多糖相互作用,

并通过内吞作用

进入细胞。

稳定转染

瞬时转染

所有细胞

除了具有阳离子脂质体的转

染效率高,操作简单,适用范围

广,重复性好等特点外,还具有

在体内,转染效率高,细胞毒性

低等特点,是新一代的转染试

剂。

梭华－Sofast

Qbiogene

Qiagen(Super

Fect Polyfect)

病毒介导

法

通过病毒中膜糖蛋白

和宿主细胞表面的受

体相互作用而进入宿

主细胞,之后反转入酶

启动合成DNA并随机

整合到宿主基因

组中。

稳定转染

特定宿主细

胞

可用于难转染的细胞、原代细

胞,体内细胞等,但携带基因不

能太大（<8kb）,细胞需处分裂

期,需考虑安全因素。

Biolistic 颗粒传法（基因枪粒子轰击法）将DNA用显微重金属

颗粒沉淀,再将包被好

的颗粒用弹道装置投

射入细胞,DNA在胞内

逐

步释放,表达。

瞬时转染

稳定转染

可用于：人的表皮细胞,纤维原

细胞,淋巴细胞系以及原代细

胞。

显微注射

法用显微操作将DNA直

接注入靶

细胞核。

稳定转染

瞬时转染

转染细胞数有限,多用于工程

改造或转基因动物的胚胎细

胞。