实验一 显微镜构造 临时玻片制作

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实验一、显微镜的使用及临时玻片的制作
实验内容
• (一)显微镜的构造与使用方法
• (二)显微镜临时玻片的制作
• (三)植物细胞的绘图法
一、实验目的要求
1. 掌握显微镜的构造及原理,熟练使用光学显微镜。 2. 了解显微镜使用的基本要求、注意事项及一般维 护方法。 3. 学习临时玻片制作及掌握生物绘图的基本要求及
用扫描电镜与光镜观察比较植物叶表面的形态
扫描电镜下的形态 光学显微镜下的形态
1、光学显微镜的构造
• 光学系统
– – – – – 物镜 目镜 聚光器 虹彩光圈 光源(或 反光镜)
机械装置
• • • • • • • 镜座 镜柱 镜臂 载物台 镜筒 物镜转换器 调焦装置 • 粗调焦螺旋 • 微焦调螺旋
一、光学显微镜的构造
• (一)机械部分:
• 1、镜筒:镜筒的作用是保护成像配合保持一定的距离,一 般 160mm。 • 2、物镜转换器:安装低倍和高倍物镜 • 3、 粗调焦螺旋:位于镜柱两侧的一对大螺旋,用于调节 焦距,旋转一周可使载物台上升或下降 10 mm • 4、细调焦螺旋:与粗调焦螺旋同轴的一对小螺旋,旋转 一周可使载物台上升或下降0.1mm • 5、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。 • 6、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。 • 7、镜臂:亦称执手,连接镜筒与镜柱,是用于执镜的部 位。 • 8、载物台:放置玻片的平台,中央有一通光孔、有固定 制片的压片夹和推进器
推进器向前后左右,显 微镜下,物象移动方 向如何?
二、光学显微镜的使用
拿取显微镜 放置显微镜 请使用 台面上的 玻片标本 进行练习 显微镜使用后 的整理
对光
使用低倍物镜
(1)放置玻片标本;
使用高倍物镜
(1)选好目标;
(2)调节焦距;
(3)调节视野反差 (4)认真观察
(2)使用微调螺旋调整焦点;
(3)调节光亮度和反差 (4)认真观察
光学显微镜的使用
• 高倍镜的使用方法 : • (1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部 位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高 倍镜的观察。 (2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速 度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高 倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 (3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察, 此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器(在外、 小螺旋)的螺旋移动(向后)约0.5-1圈,即可获得清晰的 物象(切勿用粗调节器!) 果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节, 更换玻片标本或取玻片时,必须向前转动粗调节器(切勿转 错方向)使载物台下降,方可取下玻片标本。
三、显微镜的保护
• 2、光学系统的擦拭 光学部分用用擦镜纸擦拭干净即行 。 • 方法:先用干净的毛笔或吹风球除去镜片表 面的灰尘。用擦镜纸从镜片中心开始向边缘 作螺旋形单向运动。直至擦净为止。如果镜 片上有油渍、污物或指印等擦不掉时,可用 柳枝条裹上脱脂棉,蘸少量酒精和乙醚混合 液(酒精80%,乙醚20%)擦拭。 • 3、机械部分的擦拭 :可用软布擦拭。但不 能使用酒精、乙醚等有机溶剂
方法。
(一)显微镜的构造和使用方法
• 分辨率: 能分辨清楚的物体的最小的两点中心的距 离,称为分辨率。
– 人肉眼的分辨率最高可达:0.1~0.2mm – 光学显微镜的分辨率最高可达:0.2µm – 电子显微镜的分辨率最高可达:0.2nm – 1mm=1000 µm=1000 000nm • 显微镜放大倍数=物镜放大倍数 x 目镜放大倍数
植物学实验
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植物学实验的有关注意事项
• • • • • • 座位及显微镜使用安排 课程的学时安排 考核、考察要求 实验报告的上交要求 值日安排 发放实验用工具盒(登记编号)
镊子(1) 解剖针(2) 双面刀片(1) 放大镜(1) 小手巾(1) 载玻片(4) 盖玻片(4)
注意:
1、每位同学领取 一套工具盒。
三、显微镜的维护
• 1、经常性的维护 • (1)防潮如果室内潮湿,光学镜片就容易生霉、 生雾。 • (2)防尘光学元件表面落入灰尘,不仅影响光线 通过,而且经光学系统放大后,会生成很大的污斑, 影响观察。 • (3)防腐蚀 显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂 放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。
• (4)防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引 起镜片的开胶与脱落。
– 光镜的有效放大倍数可达1250倍
透射电子显微 镜
• 用途:
– 观察细胞内部的超微结 构
• 放大倍数:300万倍
• 分辨率:约为0.3纳

透射电子显微镜---观察植物细胞的超微结构
电 镜 下 的 线 粒 体
扫描电子显微镜
• 用途:
– 观察器官、组织 表面的形态和结 构
• 放大倍数 • 分辨率
一、光学显微镜的构造
• (二)光学部分: 由成像系统和照明系统组成。成像系
• • 统包括物镜和目镜,照明系统包括反光镜和聚光器 1、目镜: 2、物镜:装在物镜转换器和上,短者为低倍镜( 4× 、 10× ),长者为高倍镜( 40× ),其上刻有N.A 0.25 0.5等,为数值孔径(光线经过盖玻片引起折射后成光锥 底面的口径数值,数值越大,吸收光线量越多,越清楚), 3、聚光器: 4、光圈: 5、照明器或反光镜:
• • •
目镜 镜筒 物镜转换器 物镜 镜臂 镜柱 载物台
聚光器 虹彩光圈
粗调焦螺旋 微调焦螺旋
光源 镜座
二、光学显微镜的使用
• 1、低倍镜的使用方法 (1)取镜和放置: • (2)对光:打开电光源,用拇指和中指移动旋转器(切忌手 持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔 。左眼在目镜上 观察 (右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线 均匀明亮为止。 ( 3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有 盖玻片的一面朝上,将所要观察的部位调到通光孔的正中。 (4)调节焦距:双手转动(向后,载物台上升 )粗调节器 (在内,大调解螺旋),使镜台缓慢地上升至物镜距标本片 约5毫米处 ,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上 升 ,然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,向前缓 慢转动粗调节器,使载物台缓慢下降,直到视野中出现清晰 的物象为止。 如果物象不在视野中心可调节推片器将其调到中心 。
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