实验四2 淀粉酶的激活剂与抑制剂.
唾液淀粉酶活性的测定
参考文献:
[1]]周锦兰,张开诚.实验化学[M].武汉:华中科技大学出版社,2006:310-311.
[3]许冰,原媛,赵文献.pH值对酶活性影响的实验观察[J].临床合理用药杂志,2010,3(10):35-35.
[4]冯攸科.唾液淀粉酶活性的最适温度质疑[J].《中等医学教育》1996(03了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉
酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有
高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多
种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象
2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
(三)器材及试剂
1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶
淀粉活性测定实验报告
一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性的测定原理和方法。
2. 了解不同条件对淀粉酶活性的影响。
3. 学会使用比色法测定淀粉酶活性。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解成葡萄糖、麦芽糖等小分子糖类。
在实验中,淀粉酶将淀粉水解成还原糖,还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)反应生成红色复合物。
通过测定该复合物的吸光度,可以计算出淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、硫酸铜、无水碳酸钠、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水、待测样品(如唾液、植物组织等)。
2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管、试管架、吸管、比色计、电子天平。
四、实验步骤1. 准备DNS试剂:称取DNS试剂0.1g,加入50ml蒸馏水溶解,再加入0.5g硫酸铜和0.5g无水碳酸钠,搅拌均匀。
2. 标准曲线制作:准确配制一系列浓度的麦芽糖标准溶液(如0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml),各取2ml加入试管中,加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度,以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
3. 待测样品处理:准确称取一定量的待测样品,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,离心取上清液。
4. 测定淀粉酶活性:取2ml待测样品和2ml淀粉溶液(浓度根据实际情况调整)加入试管中,置于恒温水浴锅中,保持一定温度(如37℃)反应一定时间(如30分钟),取出后立即加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度。
5. 计算淀粉酶活性:根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的浓度,再根据反应时间、温度、待测样品浓度等参数,计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,计算相关系数,验证标准曲线的线性关系。
酶特性检验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的通过本实验,了解酶的催化作用特性,包括酶的专一性、高效性、温度和pH值对酶活力的影响,以及酶的激活剂和抑制剂对酶活力的作用。
通过对酶特性的研究,进一步掌握酶在生物体内的作用及其调控机制。
二、实验材料1. 实验材料:- 酶提取液(如唾液淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等)- 底物溶液(如淀粉溶液、蛋白质溶液、脂肪溶液等)- pH缓冲液(不同pH值的缓冲液)- 温度控制装置(恒温水浴)- pH计- 显微镜- 试管、试管架、滴管、移液器等2. 试剂:- 碘液- 斐林试剂- 班氏试剂- 激活剂(如金属离子)- 抑制剂(如竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂)三、实验方法1. 酶的专一性检验:- 将酶提取液与底物溶液混合,观察酶催化底物反应的现象。
- 使用不同底物进行对比实验,验证酶的专一性。
2. 酶的高效性检验:- 将酶提取液与底物溶液混合,观察酶催化底物反应的现象。
- 使用相同底物,将酶提取液与无机催化剂(如FeCl3)进行对比实验,验证酶的高效性。
3. 温度对酶活力的影响:- 将酶提取液与底物溶液混合,在不同温度下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象,分析温度对酶活力的影响。
4. pH值对酶活力的影响:- 将酶提取液与底物溶液混合,在不同pH值下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象,分析pH值对酶活力的影响。
5. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响:- 在酶提取液和底物溶液中分别加入激活剂和抑制剂。
- 观察酶催化底物反应的现象,分析激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
四、实验结果与分析1. 酶的专一性检验:- 通过实验观察,酶提取液在特定底物存在下表现出催化作用,而在其他底物上无催化作用,证明酶具有专一性。
2. 酶的高效性检验:- 通过实验观察,酶提取液在催化底物反应时,反应速度明显快于无机催化剂,证明酶具有高效性。
3. 温度对酶活力的影响:- 通过实验观察,酶催化底物反应的速度随温度升高而加快,在一定温度范围内,酶活力达到最大值,超过此温度,酶活力逐渐降低。
生物化学实验4-2淀粉酶的激活剂与抑制剂
淀粉酶的激活剂与抑 制剂
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
二、原理
酶的活性受某些物质的影响,能使酶活 性增加的称为激活剂,能使酶活性降低的 称为抑制剂。很少量的激活剂和抑制剂就 会影响酶的活性,而且常具有特异性,但 激活剂和抑制剂不是绝对的,浓度的改变 可能使激活剂变成抑制剂。
三、试剂和器材
1. 试剂 1%淀粉溶液、新鲜唾液稀释液、5%氯化 钠溶液、0.1%硫酸铜溶液、KI-I2溶液 2. 器材 试管和试管架、恒温水浴锅 Nhomakorabea四、操作方法
取3只试管,照下表操作。
试管 编号 试剂处理 1% NaCl溶液 /mL 0.1%CuSO4溶液 /mL 蒸馏水 1%淀粉溶液/mL 稀释的唾液/mL
1
2
3
1 _ _ 3 1
_ 1 _ 3 1
_ _ 1 3 1
摇匀,放入37℃恒温水浴中保温10~15min,取出, 冷却 KI-I2溶液/mL 记录观察结果 2滴 2滴 2滴
五、思考题
1、试说明可逆抑制剂与不可逆抑制剂的作用特 点。 2、三种可逆抑制剂的抑制程度与底物浓度有何 关系?
激活剂与抑制剂对淀粉酶
加完摇匀,40℃水浴,同时保温。每隔2min,取1滴置在白瓷板上,用碘 液检验,观察那只试管内液体最先不呈蓝色反应,哪只次之,并解释原因。
六、思考题
1、试说明可逆抑制剂与不可逆抑制剂的作用特点。 2、三种可逆抑制剂的抑制程度与底物浓度有何关系?
1%淀粉溶液、新鲜唾液稀释液、5%氯化钠溶 液、0.1%硫酸铜溶液、稀碘溶液
四、器材
只试管, 取三只试管,按照下表操作 : 试剂 ml 0.1%淀粉 管号 1 2 3 2.0 2.0 2.0 1%NaCl 1.0 —— —— 1% CuSO4 蒸馏水 —— 1.0 —— —— —— 1.0 1:30唾液 1.0 1.0 1.0
激活剂与抑制剂对淀粉酶 活力的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
二、实验原理
酶的活性受某些物质的影响,能使酶活性增加的 称为激活剂,能使酶活性降低的称为抑制剂。很 少量的激活剂和抑制剂就会影响酶的活性,而且 常具有特异性。本实验中氯离子为唾液淀粉酶的 活化剂,铜离子为其抑制剂。
三、实验试剂
激活剂与抑制剂对酶的影响实验目的
KI-I2溶液(mL) 记录观察结果
2滴
2滴
2滴
从1号试管中用玻棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待 1号试管内的溶液遇碘不再变色后,立即取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶 液颜色的变化。
操作步骤
1. 取3支试管,各加2mL 含0.3%氯化钠的0.5% 淀粉溶液。 2. 另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。 3. 将此 6 支试管分为 3 组,每组中盛淀粉溶液与 淀粉酶液的试管各1支。 4. 三组试管分别置入 0℃ 、 37℃ 与 100℃ 的水浴 中。 5. 等 5min 后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶 液中,继续维持原温度条件5min后,立即滴加2 滴碘液,观察溶液颜色的变化。
操作步骤
1、唾液淀粉酶液的准备
实验者用蒸馏水嗽口,除去食物残渣。然后含一口蒸馏 水于口中,轻嗽一分钟,吐入小烧杯中。将其稀释一倍。
2、检查试剂
试剂处理
(取2只试管,按下表操作)
试管编号 #1 3 — 2 #2 - 3 2
含0.3%NaCl的淀粉溶液(mL) 2% 蔗糖溶液(mL) Benedict试剂(mL) 摇匀,沸水浴煮沸3min 记录观察结果
3. 淀粉酶的专一性实验
试管编号
(取2只试管,按下表操作)
#1 1 3
#2 1 -
试剂处理
已稀释的唾液溶液(mL) 含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液 (mL) 2%蔗糖溶液(mL) Benedict试剂(mL) 记录观察结果
—
2
3
2
摇匀,置37℃水浴保温15min 摇匀,沸水浴煮沸2min
二、pH对淀粉酶活性的影响
三、温度对淀粉酶活性的影响
实验目的 了解温度对酶活性的影响及最适温度的定义。 实验原理
酶的特性实验
酶的特性实验酶的特性实验一、目的酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。
通过本实验了解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验原理酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度特异(专一)性,即一种酶只能对一种底物或一类底物(此类底物在结构上通常具有相同的化学键)起催化作用,对其他底物无催化反应。
例如,淀粉酶和蔗糖酶虽然都是催化糖苷键的水解,但是淀粉酶只对淀粉起作用,蔗糖酶只水解蔗糖。
还原糖产物可用班乃德试剂鉴定。
通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异,说明这些环境因素与酶活性的关系。
唾液淀粉酶对淀粉的水解过程如下:淀粉蓝色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖与碘反应:蓝色蓝紫色红色无色无色三、试剂和器材(一)、试剂1、2%蔗糖溶液:用分析纯蔗糖新鲜配制。
2、0.5%淀粉溶液(二)、材料(1) 唾液淀粉酶溶液:先用蒸馏水漱口,再含10ml左右蒸馏水,轻轻漱动,2分钟后吐出收集在烧杯中,纱布过滤,即得清澈的唾液淀粉酶原液,根据酶活高低稀释50倍,即为唾液淀粉酶溶液。
(2) 蔗糖酶溶液:取1g鲜酵母或干酵母放入研钵中,取蒸馏水12ml,分次加入,边加边研磨约10钟,用漏斗加滤纸过滤,滤液加2倍蒸馏水稀释。
(三)、仪器恒温水浴(37℃)、沸水浴(100℃)、冰浴(0℃)、试管、吸管、2ml、5ml、量筒、比色板、胶头滴管等。
四、操作方法(一)、酶催化的专一性取6支干净试管,按下表操作:操作项目管号1234560.5%淀粉(ml) 1112%蔗糖(ml) 0111稀释唾液(ml)11蔗糖酶溶液(ml) 011蒸馏水(ml) 011酶促水解摇匀,37℃水浴中保温10-15min 班乃德试剂(ml)222222摇匀,沸水浴中加热5~10min结果(颜色)(二)、温度对酶活力的影响取3支试管,按下表操作:操作项目1230.5%淀粉溶液(ml) 222稀释唾液(ml)111温度预处理5min(℃)037沸水浴结果摇匀,保持各自温度继续反应,5分钟后每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于比色板上,用碘液检查反应进行情况,直至反应液不再变色(只有碘液的颜色),立即取出所有试管,流水冷却2min,向各管加入碘液2滴,混匀。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文篇一:唾液淀粉酶活性观察实验报告2 唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O 和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材篇二:唾液淀粉酶活性的测定影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性2影响唾液淀粉酶的活性的因素(一)实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
(二)实验原理人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
变化过程如下:淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。
酶_生化实验报告
实验名称:酶的活性测定与影响因素研究实验日期:2023年X月X日实验目的:1. 研究不同酶的活性及其影响因素。
2. 探讨温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
3. 分析酶的专一性。
实验原理:酶是生物体内一类具有催化功能的蛋白质,它们在生物体内发挥着至关重要的作用。
酶的活性受多种因素的影响,如温度、pH值、激活剂和抑制剂等。
本实验通过测定不同酶的活性,探讨这些因素对酶活性的影响。
实验材料与仪器:- 酶制剂:淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。
- 底物:淀粉、蛋白质、脂肪等。
- 指示剂:碘液、酚酞等。
- 试剂:盐酸、氢氧化钠、磷酸盐缓冲液等。
- 仪器:恒温水浴、pH计、分光光度计、移液器、试管等。
实验方法与步骤:1. 酶活性测定:- 将一定量的底物与酶制剂混合,置于恒温水浴中。
- 在一定时间间隔内,加入指示剂,观察颜色变化。
- 通过分光光度计测定吸光度,计算酶活性。
2. 温度对酶活性的影响:- 将酶制剂与底物混合,在不同温度下进行反应。
- 观察颜色变化,记录吸光度。
- 分析温度对酶活性的影响。
3. pH值对酶活性的影响:- 将酶制剂与底物混合,在不同pH值下进行反应。
- 观察颜色变化,记录吸光度。
- 分析pH值对酶活性的影响。
4. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响:- 在酶制剂与底物混合的反应体系中,加入适量的激活剂或抑制剂。
- 观察颜色变化,记录吸光度。
- 分析激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
5. 酶的专一性:- 将酶制剂与不同底物混合,观察颜色变化。
- 分析酶的专一性。
实验结果与分析:1. 酶活性测定:- 通过实验,发现不同酶的活性存在差异。
- 淀粉酶活性最高,蛋白酶次之,脂肪酶活性最低。
2. 温度对酶活性的影响:- 酶活性随温度升高而增加,在一定温度范围内达到最大值,然后随温度升高而降低。
- 本实验中,酶活性在40℃时达到最大值。
3. pH值对酶活性的影响:- 酶活性随pH值升高而增加,在一定pH值范围内达到最大值,然后随pH值升高而降低。
实验报告酶的特性
一、实验目的通过本实验,了解酶的特性和作用机理,掌握酶的催化活性、专一性、温度和pH 值对酶活性的影响,以及酶的激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效性、专一性和可调节性等特点。
酶的催化活性受多种因素影响,如温度、pH值、底物浓度、激活剂和抑制剂等。
本实验通过观察不同条件下酶的催化活性变化,探讨酶的特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:(1)淀粉溶液、蔗糖溶液、酵母浸膏、酶提取液(2)碘液、班氏试剂、氢氧化钠、盐酸、硫酸铵、氯化钠、硫酸铜(3)恒温水浴锅、试管、试管架、滴管、显微镜等2. 实验仪器:(1)恒温水浴锅:用于控制实验温度(2)试管、试管架:用于盛装实验试剂(3)滴管:用于移取试剂(4)显微镜:用于观察酶活性变化四、实验方法与步骤1. 酶的催化活性实验(1)取两只试管,分别加入0.5%淀粉溶液和0.5%蔗糖溶液(2)向两只试管中分别加入等量的酶提取液(3)将两只试管放入恒温水浴锅中,分别在37℃和50℃下反应30分钟(4)取出试管,加入碘液,观察颜色变化2. 酶的专一性实验(1)取两只试管,分别加入0.5%淀粉溶液和0.5%蔗糖溶液(2)向两只试管中分别加入等量的唾液淀粉酶(3)将两只试管放入恒温水浴锅中,分别在37℃下反应30分钟(4)取出试管,加入班氏试剂,观察颜色变化3. 温度对酶活性的影响实验(1)取三只试管,分别加入0.5%淀粉溶液(2)向三只试管中分别加入等量的酶提取液(3)将三只试管分别放入0℃、37℃和50℃的恒温水浴锅中,反应30分钟(4)取出试管,加入碘液,观察颜色变化4. pH值对酶活性的影响实验(1)取三只试管,分别加入0.5%淀粉溶液(2)向三只试管中分别加入等量的酶提取液(3)向三只试管中分别加入不同pH值的缓冲溶液(4)将三只试管放入恒温水浴锅中,分别在37℃下反应30分钟(5)取出试管,加入碘液,观察颜色变化5. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验(1)取两只试管,分别加入0.5%淀粉溶液(2)向两只试管中分别加入等量的酶提取液(3)向其中一只试管中加入适量的激活剂硫酸铵,另一只试管中加入适量的抑制剂氯化钠(4)将两只试管放入恒温水浴锅中,分别在37℃下反应30分钟(5)取出试管,加入碘液,观察颜色变化五、实验结果与分析1. 酶的催化活性实验在37℃下,淀粉溶液加入酶提取液后颜色变蓝,说明酶具有催化活性;在50℃下,淀粉溶液加入酶提取液后颜色变浅,说明高温抑制了酶的活性。
影响淀粉酶活性的因素的实验报告
影响淀粉酶活性的因素的实验报告实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1. 了解酶的专一性。
2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3. 学会排除干扰因素,设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
Na2CO3+ 2H2O2NaOH + H2CO3 CuSO4+2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O(砖红色或黄色) + 2H2与Benedict试剂无呈色反应。
淀粉酶活性测定
淀粉酶活力测定及性质研究佟玥姗(东北农业大学,生命科学学院,生物科学,黑龙江省,哈尔滨市,150030)摘要:本文以小麦为原料进行试验,分别采用凝胶扩散法,3,5—二硝基水杨酸比色法测定小麦α—淀粉酶活性和总酶活性。
首先,制作麦芽糖标准曲线,提取淀粉酶粗酶液,从温度、PH、激活剂及抑制剂对淀粉酶活性的影响。
然后,通过剩余淀粉的含量判断淀粉酶水解效果,淀粉遇碘变蓝,颜色越深,淀粉含量高,淀粉酶活性越低。
结果表明,40℃时酶活性最佳,PH=5.6是淀粉酶最适温度,氯离子是淀粉酶的激活剂,铜离子是淀粉酶的抑制剂。
Taking wheat as raw material to test and gel diffusion method were used respectively, 3, 5-2 nitro salicylic acid colorimetric method to determine the wheat a - amylase activity and total enzyme activity. First, the production of maltose standard curve, extracting amylase thick enzyme fluid, from temperature, PH, the influence of activator and inhibitor on the amylase activity. Then, by the content of residual starch amylase hydrolysis effect, starch iodine blue in color, high starch content, the lower the amylase activity. The results showed that the activity of 40 ℃ best, PH = 5.6 is the optimum temperature for amylase, chloride ion is the activator of amylase, copper ion is amylase inhibitors.关键词:淀粉酶活性;最适PH,最适温度;激活剂及抑制剂‘引言:小麦是我国乃至全世界的主要粮食作物之一,其种植历史长、范围广,因而对于小麦品质的研究具有广泛的意义。
影响酶活性的条件实验报告
一、实验目的本实验旨在探究影响酶活性的条件,包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂等因素,并通过实验验证这些因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂,其活性受多种因素影响。
温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都是影响酶活性的重要因素。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响,并通过观察实验现象,分析实验结果。
三、实验材料与仪器材料:1. 酶制剂(如淀粉酶、蛋白酶等)2. 底物(如淀粉、蛋白质等)3. 抑制剂(如重金属盐、酸、碱等)4. 激活剂(如某些金属离子等)5. pH试纸、pH计6. 温度计7. 移液器8. 试管9. 水浴锅仪器:1. 紫外可见分光光度计2. 热水浴锅3. 冷水浴锅4. pH计四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将酶制剂和底物分别置于不同温度的水浴锅中预热。
- 将预热好的酶制剂和底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
2. pH值对酶活性的影响- 使用pH试纸或pH计测定不同pH值下酶的活性。
- 将酶制剂和底物分别置于不同pH值的溶液中,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 将酶制剂和不同浓度的底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 将不同浓度的酶制剂与底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响- 将抑制剂和激活剂分别加入酶制剂和底物中,观察酶活性的变化。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响- 随着温度升高,酶活性逐渐增强,在一定温度范围内达到最大值,随后逐渐下降。
2. pH值对酶活性的影响- 酶活性在不同pH值下表现出不同的活性,存在一个最适pH值,酶活性在此pH值下达到最大值。
实验报告唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文_0862
2020实验报告唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文_0862EDUCATION WORD实验报告唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文_0862前言语料:温馨提醒,教育,就是实现上述社会功能的最重要的一个独立出来的过程。
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本文内容如下:【下载该文档后使用Word打开】1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入1%淀粉溶液5mL 与稀释的唾液0.5-2mL。
混匀后插入1支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。
不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。
此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。
记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。
将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。
5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
4、激活剂与抑制剂对酶活性的影响:取3支试管,按下表加入各种试剂。
混匀后,置于37°C水浴中的保温。
从1号试管中用玻璃棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。
实验酶促反应的影响因素
实验酶促反应的影响因素此实验可以根据酶的特性,设计影响酶促反应的各种因素,并进行实验检验。
(一)酶的激活剂和抑制剂一、实验目的1.了解酶促反应的激活与抑制。
2.学习鉴定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。
二、实验原理酶的活性常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂;有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。
例如,氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑制剂。
通常少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特异性。
但是,值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。
例如氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。
三、器材1.试管及试管架 2.烧杯、椎形瓶和量筒(100mL)3.玻璃漏斗 4.吸管 5.滤纸 6.恒温水浴锅四、试剂1. 1% 淀粉溶液2.稀释100~200倍的新鲜唾液3. 1%氯化钠溶液4.0.1 %硫酸铜溶液5.碘化钾-碘溶液:将碘化钾20g 和碘10g 溶于100 mL水中,使用前稀释10倍。
五、操作方法取3支试管,向第一支试管中加入1%氯化钠溶液1 mL,向第二支试管中加入 0.1%硫酸铜溶液1 mL,向第3支试管中加入蒸馏水1mL作对照。
再向每支试管各加入 0.1%淀粉溶液3 mL和稀释的唾液1 mL。
摇匀各管,充分混合,一起放入37℃恒温水浴中保温10~15分钟后取出。
冷却后,各滴入2-3滴碘化钾-碘溶液。
混匀。
观察比较3支试管颜色的深浅,并解释之。
如果激活剂或抑制剂的作用不明显,主要可能原因是唾液淀粉酶的活性不够高,可以适当延长反映时间或者降低唾液稀释的倍数。
思考题1.激活剂可以分为哪几类?本实验中氯化钠属于其中的哪一类?2.抑制剂和变性剂有什么不同?试举例说明。
3.酶反应的抑制作用有哪些类型?根据什么划分的?它们都有什么特点?(二)温度对酶活性的影响一、实验目的通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了解温度对酶活性的影响。
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三、试剂和器材
1. 试剂 1%淀粉溶液、新鲜唾液稀释液、5%氯化
钠溶液、0.1%硫酸铜溶液、KI-I2溶液 2. 器材
试管和试管架、恒温水浴锅
四、操作方法
取3只试管,照下表操作。
试管编号
1
2
3
试剂处理
1% NaCl溶液/mL
1
_
_
0.1%CuSO4溶液/mL
_
1
_
蒸馏水
_
_
1
1%淀粉溶液
3
3
3
稀释的唾液
1
1
1
摇匀,放入37℃恒温水浴中保温10~15min,取出,冷却
KI-I2溶液/mL
1
1
1
记录观察结果
五思考题
1、试说明可逆抑制剂与不可逆抑制剂的作用特 点。
2、三种可逆抑制剂的抑制程度与底物浓度有何 关系?
实验四-2 淀粉酶的激活剂与抑 制剂
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
二、原理
酶的活性受某些物质的影响,能使酶活 性增加的称为激活剂,能使酶活性降低的 称为抑制剂。很少量的激活剂和抑制剂就 会影响酶的活性,而且常具有特异性,但 激活剂和抑制剂不是绝对的,浓度的改变 可能使激活剂变成抑制剂。