女贞子的成分分析及鉴定

女贞子的成分分析及鉴定

胡红

（阿坝师范高等专科学校08化教学号20082036）

【摘要】目的为女贞子药材的质量评价提供科学依据。方法：以固相萃取（SPE）进行样品供试液的前处理，采用RP HPLC法，分别测定齐墩果酸与熊果酸的含量，色谱柱：Kromasil KR100 5 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：［乙腈 甲醇（体积比1∶1）

水（体积比90∶10）］；流速：0.8 mL/min；检测波长：210 nm；柱温25 ℃；进样

量：2 μL。结果样品中齐墩果酸与熊果酸得到较好的分离；齐墩果酸在0.108～3.24 μ

g的范围内、熊果酸在0.060～1.800 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系；平均回

收率分别为100.50％、98.05％；11批次样品中齐墩果酸的含量为0.639～1.340 mg/g，熊果酸的含量为0.168～0.377 mg/g。结论采用SPE进行供试品溶液前处理，能够有

效消除女贞子药材中杂质成分对末段吸收波长的干扰，所建立的方法具有简便、稳定、

可重复的特点，可用于女贞子药材的质量控制。固相萃取（SPE）是一种新兴的样品前

处理技术，近年来已经应用于中药含量测定方法研究［6-10］，但还未见有将此方法应

用于女贞子的含量测定中。本文报道采用此技术进行女贞子药材样品的前处理，结合反

相高效液相色谱法，消除了样品中杂质对齐墩果酸、熊果酸在紫外末端测定的干扰，使

样品中齐墩果酸与熊果酸在同一色谱条件下较好地得到了分离，并进行了多批次样品的

含量比较，以期为女贞子药材的质量评价提供更稳定可靠的方法。

【关键词】女贞子；齐墩果酸；对羟基苯乙醇苷类和裂环环烯醚萜苷类；挥发油类；多糖；磷脂；

微量元素；其它；含量测定；固相萃取；HPLC

1概述

女贞子为常用中药，具有滋补肝肾、明目乌发的功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等证［1］724。女贞子中主要含有三萜类成分，其中齐墩果酸为主要的代表性成分，此外尚含有熊果酸等。有关女贞子药材及含女贞子中药复方制剂的质量多以齐墩果酸的含量作为评价指标［1］728。中国药典2005年版（一部）［3］收载女贞子的含量测定方法为薄层扫描法测定齐墩果酸的含量。近年来，亦有文献采用HPLC UV方法［4］以及HPLC ELSD方法［5］测定本品中两成分的含量，但由于HPLC UV测定波长在末端吸收，不能有效排除供试品中的杂质对测定结果准确度的影响；而ELSD检测器还未能普遍应用。因此上述方法都有一定的局限性。

2成分分析

2.1齐墩果酸

荣勇等用双波长扫描法对女贞子中有效成分齐墩果酸进行了含量测定，将女贞子粗粉加油醚回流提取、脱脂，再用氯仿提取。刘亚红等用薄层一比色测定法，用酸水解氯仿提取法，乙醇提取法，石油醚脱脂，氯仿提取法同等条件下测定齐墩果酸含量分别为1．76、1．63、1．钾，CV(％)为2．45、3．06、3．19。可见，采用酸水解氯仿萃取同步法提取女贞子中齐墩果酸的效果最佳。程晓芳等自女贞子醇提物的乙酸乙酯部分以低压硅胶柱层析的方法进行分离纯化，得到齐墩果酸。张兴辉等将女贞子醇提液用乙酸乙酯萃取，经反复硅胶柱层析分离和纯化，分离得到齐墩果酸(Oleanolic acid)。

2.2对羟基苯乙醇苷类和裂环环烯醚萜苷类

国外学者从女贞子及日本女贞的果实中分离得到女贞苷(nuezhenide)、10一羟基橄榄苦苷(10一hvdmxy． oleumpein)、橄榄苦苷(oleuropein)、Ligustroside，10一

hv— droxyligustroside、新女贞苷(neonuezhenide)、oleuropeinic acid、

ligustrosidic acid等裂环环烯醚萜苷类化合物。另有报道从日本女贞

(Ligustrum japonicum)的果实中分离鉴定了对羟基苯乙醇一口一D一葡萄糖苷

(p—hydrox— yphenethyl—β—D—glucoside)以及methyl glueoleside、8一

epikingis ide、ligustalosides A和ligustalosides B等裂环环烯醚萜苷类化合物。

石力夫等从女贞子水溶性部位分离得到对羟基苯乙醇一p—D一葡萄糖苷

(p—hydmxyphenethyl—β一D—ducoside)、对羟基苯乙醇一a—D一葡萄糖苷

(p—hy— droxyphenethyl—a—D—glucoside)，又分离得到2种新的裂环环烯醚萜苷、特女贞子苷(specnuezhenide)和女贞苦苷(neuzhengalaside)。

2.3挥发油类

李开辉等将成熟的女贞子洗净，晒干后进行水蒸气蒸馏，蒸馏液用乙醚萃取，回收得女贞子挥发油。应用GC—MS—DS对女贞子挥发油进行分析，初步鉴定有20种挥发性成分。分析结果表明：女贞子挥发油中含有大量酯类，醇类和醚类；其次是硫酮、烃类和少量胺类与醛，不含萜烃类，这一点与一般植物挥发油不同。吕金顺采用常规水蒸气蒸馏法对甘肃天水女贞子提取挥发油，用气相色谱一质谱联机进行分离鉴定，研究了甘肃天水女贞子挥发油的化学成分，从中分离出57种成分，鉴定出50种化合物，其峰面积相对含量约占挥发油总量的96．38％。研究结果表明，其药用成分主要是桉油精4．95％，苯甲醇2．50％，乙酸龙脑酯0．2％，三苯甲醇6．63％。

2.4多糖类

于鲁钢等将女贞子粉碎，浸泡，水煎煮提取，离心，浓缩，在搅拌下加乙醇至30％

离心去沉淀，稀醇液加乙醇至80％，离心，沉淀物透析，用Sevage法除去蛋白，用D

01阴离子大孔树脂脱色，DEAE-纤维素柱层析，收集洗脱液，冷冻干燥得棕色粉末，为

女贞子多糖。经纤维素板层析得知：其由鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖和岩藻糖4种单组

成红外光谱分析表明，女贞子多糖为13-糖苷链连接的多糖。