综述分光光度法测食品中的硝酸盐
分光光度法测定市售肉罐头食品中亚硝酸盐含量
Ｋｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ ：ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｉ ｒ ｃ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ；ｃ ａ ｎ ｎ ｅ ｄ ｍｅ ａ ｔ ；ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｔ ｅ
有亚硝酸盐的食品后 ，会对人体有一定的致癌作用。 亚硝酸盐 的致癌机理是在 胃酸等环境下亚硝酸 亚硝 酸盐 在 肉罐 头 中的主要作 用有 护色作用 ， 盐与食物中的仲胺 、叔胺和酰胺等反应生成强致癌 将亚硝 酸盐 加入 肉罐 头 中使 肉色鲜 红 ；防腐作 用 ， 物Ｎ 一亚硝胺 。亚硝胺还 能够透过胎盘进入 胎儿体 尤其对梭状 芽孢杆菌 、产气夹膜梭菌 、金 黄色葡萄 内 ，对 胎儿有 致 畸作 用 。 球菌等起到抑制其生长繁殖的作用 ；赋香增味作用。 １ 材 料与 方 法 引 起亚 硝 酸盐 中毒 的 主要 原 因有食 用腌 制 品 （ 如泡菜 、酸菜 、 腌 肉及变质的蔬菜等）引起 的中毒 １ ． １ 肉罐头中亚硝酸盐的检测原理圜 现象 ；误食工业盐 （ 工业盐 中含有较多的亚硝酸盐） 罐头样 品经过沉淀后先分离其 中的蛋 白质 ，然 引起 的中毒 现象 。 后除去样品中脂肪 ；在弱酸环境下 ，罐头 中的亚硝 罐藏食品 中亚硝酸盐引起 中毒的机理 ：罐藏食 酸盐与对氨基 苯磺 酸起重氮化反应 ，生成重氮化合 品 中含有一定量 的亚硝酸盐 ，能使人体血 液 中的低 物 ；重氮化合 物与盐酸萘 乙二胺偶合 ，形成紫红色 铁血红蛋 白 （ 携 带氧气）氧化成高铁血红蛋 白，高 的络合物 ，紫色物质颜 色的深浅 与亚硝酸盐 的含量 铁 血 红 蛋 白的 性 质 比 较 稳 定 ，因 而 失 去 携 氧 能 力 ， 成正 比，可与标准 比较定量 。通过分光光度计 比色 引 起组 织缺 氧 的情况 。 测定 ， 计算出样品中亚硝酸盐的含量 。 罐头食 品中亚硝酸盐对健康 的影响ｆ １ ］ ： 通过动物 反 应式 见 图 １ 。 学实验表明，亚硝酸盐属于剧毒 ，当人体 （ 成年人） １ ． ２ 试 剂［ ３ １ 摄人 ０ ． ２ ～ ０ ． ５ ｇ 时能引起 中毒现象 ，摄入 ３ ｇ 可引起 除非另有规定 ，本方法 中所用试剂均为分析纯 ， 死亡 ；根据研究表 明 ，当人体长期小剂量 地摄人含 水为 Ｇ Ｂ ／ Ｔ ６ ６ ８ ２ 规定的三级水 。
食物中亚硝酸盐含量的测定
食物中亚硝酸盐含量的测定
亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠，为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。
以下是一些测定食物中亚硝酸盐含量的方法：
1. 分光光度法：这是一种常用的分析方法，基于亚硝酸盐在特定波长下的吸光度来定量。
将食物样品与化学试剂反应，形成一种有色化合物，然后通过分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线进行比较，从而确定亚硝酸盐的含量。
2. 离子色谱法：这是一种分离和分析离子的技术，可用于测定亚硝酸盐。
食物样品经过前处理后，通过离子色谱仪进行分离和检测，根据保留时间和峰面积来定量亚硝酸盐的含量。
3. 气相色谱法：该方法适用于分析挥发性化合物，如亚硝酸盐。
食物样品经过衍生化处理，将亚硝酸盐转化为易挥发的衍生物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
4. 酶联免疫吸附法：这是一种基于抗体-抗原相互作用的分析方法。
使用特异性的亚硝酸盐抗体与食物样品中的亚硝酸盐结合，然后通过酶标抗体或显色底物进行检测。
无论选择哪种方法，都需要根据具体的实验条件和要求进行适当的样品前处理，以去除干扰物质并提取出亚硝酸盐。
同时，应该使用标准物质进行校准和质量控制，确保测量结果的准确性和可靠性。
这些方法通常需要专业的实验室设备和技术，因此如果你需要测定食物中亚硝酸盐的含量，建议咨询专业实验室或相关机构。
分光光度法测定煮熟蔬菜中亚硝酸盐含量变化
仪器 ： ７ ２ １ 型 紫外一 可 见分光 光度计 。
２实验过 程
２ ． １亚硝 酸钠 系列标 准 溶液 配制 吸取０ ． ０ ０ ｍＬ 、 ０ ． ２ ０ ｍＬ 、 ０ ． ４ ０ ｍＬ 、 ０ ． ６ ０ ｍＬ、 ０ ． ８ Ｏ ｍＬ 、
１． ０ ０ ｍＬ、 １． ５ Ｑ ｍＬ、 ２． ０ ０ ｍＬ、 ２． ５ Ｏ ｍＬ、 ３． ０ ０ ｍＬ、 ３． ５ ０ ｍＬ、
４ ． ０ ｍＬ ５ ｕ ｇ ／ ｍＬ 亚硝 酸钠标准使 用液（ 相当于０ ． ０ ｕ ｇ 、
１ ． ０ ｕ ｇ、 ２． ０ ｕ ｇ 、 ３ ． ０ ｕ ｇ、 ４． ０ ｕ ｇ、 ５． ０ ｕ ｇ、 ７． ５ ｕ ｇ、 ｌ ０ ． ０ ｕ ｇ、
１ ２ ． ５ ｕ ｇ 、 １ ５ ． ０ ｕ ｇ 、 １ ７ ． ５ ｕ ｇ 、 ２ ０ ． ０ ｕ ｇ ） ， 分别置于５ ０ ｍＬ比色 管 中。 分别加入２ ｍＬ ４ ｇ ／ Ｌ 对氨基苯磺酸 溶液 ， 混匀 ， 静 置３ ａｉ ｒ ｎ ～５ ｍｉ ｎ 后， 各加入 ｌ ｍＬ ２ ｇ ／ Ｌ 盐酸萘 乙二 胺溶 液， 加水至刻度 ， 混匀 ， 静置 １ ５ ａｉ ｒ ｎ。
吸光度 为纵 坐 标 ， 标准 溶液 浓度 为横 坐标 ， 绘制 标准 曲线 。 （ 如 图１ ） ２ ． ４蔬 菜 中亚硝 酸 盐含 量 的测 定 将菠菜、 茄子 用 去 离子 水洗 净 ， 用 去离 子 水 煮 沸 １ ５ ａｉ ｒ ｎ， 用研 钵制 成匀浆 ， 分成 两份 ， 一份 处于 常温条 件下 ， 一份 处于 冰箱 冷藏 中。 分别 放置 Ｏ ｈ、 ４ ｈ、 １ Ｏ ｈ、 ２ ４ ｈ 、 ２ ８ ｈ 后测定其吸光度 。 称４ ｇ （ 精确至０ ． ０ ０ ０ １ ｇ ） 制成 匀 浆 的试样 ， 置于 ５ ０ ｍＬ的烧 杯 中 ， 加１ ０ ｍＬ饱和硼 砂溶 液， 搅拌均 匀 ， 以７ ０ 。 Ｃ左右 的水约５ ０ ｍＬ， 将试样洗 人 １ ０ ０ ｍＬ 容量瓶 ， 于７ ０ 。 Ｃ中加 热３ ０ ａｉ ｒ ｎ， 取出至冷水 浴 中 冷却 ， 并放 置至 室温 。 在震 荡上述提 取液时 ， 加人５ ｍＬ 亚铁 氰化钾溶 液 ， 摇匀 ， 再加入 ５ ｍＬ乙酸锌溶 液 ， 沉 淀蛋 白质 ， 再 加入 １ ｇ 活性 炭 ， 除去 抗坏 血酸 。 加水 定容 至 刻度 ， 摇匀 ， 放 置 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ， 除去上层 脂肪 ， 上层 清液 用滤纸 过滤 ， 并 弃去 ３ ０ ｍＬ 初滤液 ， 滤液备 用 。 吸取 ４ ０ ｍＬ 上述滤 液于５ ０ ｍＬ 带塞 比色管 中 ， 试样 管 中分 别 加入 ２ ｍＬ对 氨基 苯 磺 酸溶 液 ， 混匀 ， 放 置３— ５ ａｍ， ｒ 加入 ｌ ｍＬ 盐酸萘 乙二胺溶液 ， 加水至刻度 ， 混匀 ， 静置 １ ５ ｍｉ ｎ ｔ ， 用２ ｃ ｍ比色 皿 ， 以零管 调节零 点 ， 于波 长 ５ ３ ８ ￣ ｔ ， 】 处 测吸光度 。 若 吸光度 过大 ， 用稀释 方法 ， 直 至
食品中亚硝酸盐的测定
食品中亚硝酸盐的测定分光光度法1、提取：称取5g（精确至0.01g）制成匀浆的试样置于50ml烧杯中，加12.5饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300ml将试样洗入500 ml容量瓶中，于沸水浴加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。
2、提取液净化：在振荡上述提取液时加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5ml乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30ml，滤液备用。
3、测定：吸取上述40.0ml上述滤液于50ml带塞比色管中，另取0.00 ml，0.20 ml，O.40 ml，0.60 ml，0.80 ml，1.00 ml，1.50 ml，2.00 ml，2.50 ml亚硝酸钠标准使用液分别置于50 ml带塞比色管中。
于标准管与试样管中分别加入 2 ml对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5min后各加入 1 ml盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，摇匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。
同时做试剂空白。
4、计算：式中：X：—试样中亚硝酸钠的含量(mg/Kg)A：—测定用样液中亚硝酸钠的质量（μg）m：—试样质量（g）V2：—测定用样液体积（ml）V1：—试样处理液总体积（ml）结果保留两位有效数字。
此方法的最低检出限为1mg/kgx =A×1000m× V2/ V1×1000食品中亚硫酸盐盐酸副玫瑰苯胺法1试剂1.1 四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6.0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。
1.2 氨基磺酸铵溶液(12g/L)。
1.3 甲醛溶液(2g/L)：吸取0.55mL无聚合沉淀的甲醛(36%)，加水稀释至100mL，混匀。
1.4 淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。
蔬菜中硝酸盐含量的测定
NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。 测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
关键词：蔬菜; 硝酸盐; 紫外分光光度法 前言：蔬菜( 尤其叶菜类) 是一种容易累积硝酸盐的作物，硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用,而且有些蔬菜生产者采用工业废水和 生活污水浇地,造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高,已证明,硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐,它可与人体血红蛋白 作用, 使之失去载氧功能,造成高铁血红蛋白症, 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害[ 1]。因此,蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标[ 2]。 蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多，如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法, 但由于干扰因素多，操作步骤过于繁琐，很难满足批量 常规分析之需要，而其它几种方法则需要精密仪器， 测定条件较为 严格，不适宜作常规监测分析[3]。本实验采用操作简单、准确度高 的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
0.2664
0.8943
0.5871
1.9639
小瓜
0.3476
0.4843 1.1653
1.6211 354.91
0.5182
1.7342
0.2270
0.7631
土豆
0.1497
0.1495 0.5052
0.6546 68.43
实验七 蔬菜中硝酸盐含量的测定(紫外分光光度法)
实验七蔬菜中硝酸盐含量的测定（紫外分光光度法）1、实验目的掌握蔬菜中硝酸盐的测定原理，熟悉取样方法、样品的处理、测定和仪器的使用方法，了解各种试剂的配制方法。
2、实验原理用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质，利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总体，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从标准曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
3、仪器与试剂3.1 仪器（1）紫外分光光度计（2）分析天平：感量0.01g，0.0001g。
（3）研钵（4）可调式往返震荡机（5）pH计3.2 试剂（1）盐酸。
（2）氢氧化铵。
（3）氨缓冲溶液（pH9.6～9.7）：量取20ml盐酸，加到500nl水中，混合后加入50ml氢氧化铵，用水定容至1000ml。
用精密pH计调pH到9.6～9.7。
（4）活性炭（粉末）。
（5）正辛醇。
（6）亚铁氰化钾溶液{ω[K4Fe(CN)6.3H2O]=15%}：称取150g亚铁氰化钾溶于水，定容至1000ml。
（7）硫酸锌溶液[ω(ZnSO4)=30%]：称取300g硫酸锌溶于水，定容至1000ml。
（8）硝酸盐标准溶液：称取0.2039g经110±5℃烘干至恒重的硝酸钾（优级纯），用水溶解，定容至250ml。
此溶液硝酸根质量浓度为500mg/L，于冰箱内保存。
4、实验步骤4.1 取样选取一定数量的生菜，先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗干净，用吸水纸吸干表面水分，剪碎后充分混匀，称取5.0g于研钵中充分捣碎。
4.2 提取将匀成浆后的样品少量多次共20ml水洗净研钵，将样品全部转移到50ml容量瓶中，加1滴正辛醇消除泡沫，再加入3ml氨缓冲溶液，0.5g粉末状活性炭。
放置于可调式往返振荡机上（200次/min）振荡30min，加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各1ml，充分混合，加水定容至100ml，充分摇匀，放置5min，用定量滤纸过滤。
紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量的不确定度评定
（ Ｌ 液 ）００ ３√ ： ．０ ７ 移 管＝ ．０ ／ ３ Ｏ０ １ ，计算 得 出 ｌ
Ｕ ｅ （ ２ Ｌ ０． Ｉ ｏ ） ｍ ００８５ Ｕｒ （ ｍ ） Ｏ． ｅ ｏ Ｌ ｌ ４ ００４２ Ｕ ｅ （ ｍ ） ｒｌ ０ Ｌ ６ ００ ２ ｒ ㈣ ｍ ）＝０．０２１Ｕ （ｏ Ｌ ０ ０ ７ ．０ ８Ｕｅ ｌ Ｌ ０ Ｉ１ ｍ ）＝ ．０１ ；
的测定 紫外分光光度法》 对蔬菜样品进行清洗、 粉 碎与制备 ，并配制所需试剂。
１ ． 提 取 与 测 定 ．２ ３
笔者根据 Ｊ ５ — １９ 《 Ｊ １ ９ ９９（ Ｆ０ 测定不确定度评定与标 示 中的有 关规 定 ，以硝 酸盐 为例 。建立 紫外 分光
光 度 法 测定 硝 酸 盐 含 量 的 不确 定度 计 算 模 型 ，对
到 ５ ｍＬ容量 瓶 中，定容 ，得 到浓度为 ０ ．、４０ ０ 、２ ０ ．、
６ 、８ 、ａ． ｇ ｆ ． ． ０ ￣ ｉ ０ ０ ０ ｍ 酸钾工作液。查移液管、容量瓶 的检定证书 ，得 出以下 兀 ． 个不确定度 ：
将 上述 不确 定度 分量 合成 得 ：
ｕ ＝ （ｏ Ｃ ０ １７ ＋ ． ２３ ＋ ． ６ ００ ２ ￣ ， ＵＣ ／ｏ ． ０ ０ ０２ ０ ０１ ＝ ．１ ５ ￣ ） ＝４ ０ ０ ０
量轻 且基 质保 水保 肥能 力强 ，适 宜 长途运 输 ，成苗 率高 ，定植 后不 伤根 ，无缓 苗期 ，抗逆 性强 ，是近 几年 来 出现 的一项 先进 技术 ，具有 显著 的节 本增 效
室进行 了一系列设施改造 ， 并在改造温室 中进行常 规育苗试验 。 试验结果表 明， 改造后的温室增温、 保
体积 ； 为 吸取滤 液体 积；’为 待测 液定 容体 积； ／ ３ ｍ 为样 品质 量 。
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。
方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。
结果：检出限其检测限为 3.68x10-3g/ml。
结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。
标签：分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重功效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。
但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。
还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。
尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。
作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供安全食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一。
目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。
利用重氮化反应测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化还原光度法也因干扰因素较多不常被使用。
为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。
本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。
试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。
试验药品均为分析纯。
1.2方法1.2.1样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。
紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量
蔬 菜在 人们 日常 膳食 中必 不可 缺 。近 年来 ， 人 们 在注 重其 营养 的 同时 ， 越 来 越 关 注 其 安 全 性 。 也
由 于 当 前 我 国蔬 菜 在 种 植 过 程 中化 肥 过 量 施 用 ， 而
限公 司 ） Ｆ ２ ０ ； Ａ ０ ４电子 分析 天 平 （ 常州 市 万 得 天 平
２ １ 吸 收光谱 ．
吸 取 标 准 工 作 液 １ ． ０ ｍ 于 ５ Ｌ容 量 瓶 ０ ０ Ｌ ０ｍ
中 ， 去 离子 水定 容 ， 用 按照 实验 方法 ， 描结 果显 示 扫
Ｎ ３在 ２ ７ ３ ｍ 处 有 最 大 吸 收 ， 选 择 波 长 Ｏ ０ ．８ｎ 故 ２ ７ ３ ｍ 为 测 量 波 长 。 ０ ． ８ｎ ２ ２ 工 作 曲线 制 作 ．
磺 酸铵 溶液 。 硝 酸盐 标准 溶 液 的配制 ： 取 经 １０ ｏ 干 ４ 称 １ Ｃ烘
ｈ的 硝 酸 钾 ０ ５ ０ ， 于 去 离 子 水 中 ， 入 ５ ０ ．０６ｇ 溶 移 ０
ｍ Ｌ容 量 瓶 中 并 稀 释 至 刻 度 ， 溶 液 浓 度 为 １０ 此 ００
ｍｇ ／Ｌ。
１ ２ 实 验 方 法 ．
Ｎ ３ Ｏ 总量 ， 由总量 减 去原有 Ｎ 量来 计算 硝 酸盐 Ｏ 含
含 量 ， 作 步骤 繁多 ， 且 在 还原 时 吸取一 定 量 的 Ｎ ３ 准 工 作 液 于 ５ Ｌ Ｏ 标 ０ｍ 容 量瓶 中 ， 用去 离子 水定 容 ， 以去 离子 水为 参 比 ， 在
柱 还原 分光 光度 法 、 离子 色谱 法 。其 中镉柱 还 原分 光 光度 法 为检测 蔬 菜 中硝 酸 盐 含 量 的 国家 标 准 方
法 ， 方 法 以 金 属 镉 还 原 Ｎ ３ Ｎ ２测 得 样 品 中 此 Ｏ 为 Ｏ，
紫外分光光度法测硝酸盐
紫外分光光度法测硝酸盐
紫外分光光度法测定硝酸盐原理
紫外分光光度法是一种基于样品对特定波长光的吸收量和浓度之间的线性关系来测定物质浓度的分析方法。
对于硝酸盐的测定，其原理是基于硝酸盐在紫外光范围内（约220 nm）具有特征性吸收峰。
当紫外光照射到硝酸盐溶液时，硝酸盐分子会吸收特定波长的光，导致溶液对该波长光的透射率下降。
通过测量溶液在特定波长下的吸光度，可以定量测定硝酸盐的浓度。
试剂和仪器
待测硝酸盐溶液
硝酸盐标准溶液
紫外分光光度计
1 cm 石英比色皿
步骤
1. 绘制标准曲线：使用已知浓度的硝酸盐标准溶液，分别配制一系列浓度梯度的标准溶液。
将这些标准溶液依次装入比色皿中，在紫外分光光度计上扫描 190-250 nm 范围内的吸光度。
记录每个标准溶液在 220 nm 处的吸光度，并将吸光度值与相应的硝酸盐浓度绘制成标准曲线。
2. 样品测定：将待测硝酸盐溶液装入比色皿中，并在紫外分光光度计上扫描 190-250 nm 范围内的吸光度。
记录样品溶液在 220 nm 处的吸光度。
3. 浓度计算：将样品溶液在 220 nm 处的吸光度代入标准曲线方程，即可计算出样品中硝酸盐的浓度。
注意事项
紫外分光光度法测定硝酸盐时，样品溶液的 pH 值应控制在
2-3 之间。
比色皿和参比溶液需要匹配，以消除仪器的基线漂移。
标准溶液和样品溶液的温度应保持恒定，以避免吸光度随温度变化产生的误差。
紫外光对人体有害，实验操作时应佩戴防护手套和眼镜。
水质 硝酸盐氮紫外分光光度法
水质硝酸盐氮紫外分光光度法【原创实用版】目录一、引言二、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理三、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的步骤四、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的优缺点五、结论正文一、引言水质检测是环境保护的重要组成部分，其中硝酸盐氮是常见的水质检测指标之一。
紫外分光光度法是一种常用的硝酸盐氮检测方法，其原理是利用硝酸根离子在 220nm 波长处的吸收来定量测定硝酸盐氮。
本文将详细介绍紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理、步骤、优缺点等。
二、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理紫外分光光度法是利用物质对紫外光的吸收特性来定量测定物质浓度的方法。
在紫外分光光度法测定硝酸盐氮中，硝酸根离子在 220nm 波长处有吸收，而溶解的有机物在 220nm 处也会有吸收，但硝酸根离子在275nm 处没有吸收。
因此，通过测量 220nm 和 275nm 波长处的吸光度差值，可以消除有机物的干扰，从而准确测定硝酸盐氮的浓度。
三、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的步骤1.准备试样：采集水样，进行预处理，如过滤、消解等，以消除干扰物质。
2.配制标准溶液：按照一定比例配置硝酸盐氮标准溶液，用于校准仪器和比较样品。
3.测量吸光度：将试样和标准溶液分别倒入紫外分光光度计，测量220nm 和 275nm 波长处的吸光度。
4.计算浓度：根据比尔 - 朗伯定律，计算硝酸盐氮的浓度。
四、紫外分光光度法测定硝酸盐氮的优缺点优点：1.灵敏度高：紫外分光光度法可以检测到较低浓度的硝酸盐氮。
2.测量范围广：该方法可以测量不同浓度的硝酸盐氮。
3.操作简便：紫外分光光度法操作简单，便于普及。
缺点：1.受干扰因素影响较大：如水样中的有机物、悬浮物等可能对测定结果产生干扰。
2.精度相对较低：紫外分光光度法的测定精度相对较低，对于高精度要求的检测任务不适用。
五、结论紫外分光光度法是一种常用的硝酸盐氮检测方法，具有灵敏度高、测量范围广、操作简便等优点，但也存在受干扰因素影响较大、精度相对较低等缺点。
综述分光光度法测食品中的硝酸盐
分光光度法检测食品中的硝酸盐1.分光光度法：分光光度法主要有三种：可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法。
分光光度法设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观，在硝酸盐和亚硝酸盐的测定中一直占据有十分重要的地位。
但在复杂介质中测定时易受样品本身颜色影响，所以样品前处理十分重要。
1.1 可见光分光光度法.1.1.1镉柱法还原法.这是我国食品安全国家标准（GB 500933-2010）[1]中检测硝酸盐的方法，样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,使用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，于波长538nm出测定吸光度，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去不加锌粒测得的亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。
刘烨等【4】研究发现当镉柱高度为5cm，氨缓冲液PH9.15~9.78，水洗脱液是镉柱容积的2~3倍时，活化速度加快，还原效率及回收率都较高。
针对该检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题，项锦欣[2]等改用天然高分子絮凝剂W-3 取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌，不但节省试剂，且显著缩短处理时间。
陈秋生[3]等人实验比较后发现用超声提取蔬菜中的硝酸盐，具有简单、高效、回收率高的优点。
由于本法所用试剂为毒性很大的强致癌试剂，对环境和分析人员可能会造成危害，因此, 选择新的重氮化试剂和偶联试剂以降低试剂的毒性是许多环境工作者研究的课题。
1.1.2锌粒还原法.用锌粒做还原剂，在银离子催化下将食品中的硝酸盐还原成亚硝酸盐,再按国标格里斯试剂法进行检测。
之所以用锌粒不用锌粉，是因为用锌粉的还原液较浑浊，周峰[4]用20 目~ 30 目的金属锌粒代替锌粉, 还原液不产生混浊且易过滤，同时实验结果几近一致。
肖义夫[5]实验室应用锌粒还原法对各类食品样品(包括乳及乳制品,肉及肉制品等) 中的硝酸盐进行了测定,平均回收率为94.0 % , RSD 低于5 %。
紫外分光光度法测定硝酸盐关键技术(精)
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紫外光法测定硝酸盐关键技术
（1）预处理：取实验样品用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH至5～9从
而制得试样。
（2）定量取样：用无分度吸管取10.00 mL试样置于比色管中，如果总
氮含量超过100μg时，可减少取样量并加无氨水稀释至10.00 mL。 （3）空白试验：用10.00 mL无氨水代替试样，按与试样测定完全相同 的步骤进行平行操作。
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紫外光法测定硝酸盐关键技术
水中硝酸盐氮的质量浓度计算公式：
CN= m / V
式中： CN——水样硝酸盐含量，mg /L；
m ——试样测出含氮量，μg；
V ——测定用试样体积，mL。
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紫外光法测定硝酸盐关键技术
（1）开机器前的检查： ①检查主机各按钮是否处于关闭状态； ②各附件连接是否完好。
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水环境监测
紫外分光光度法测定硝酸盐关键技术
王 虎 副教授
国家职业教育技术
（1）水样采集后立即放入冰箱中，或在低于4℃条件下保存， 但保存期不得超过24h。 （2）水样采集后如需放置时间较长，可在1000 mL水样中加 入约0.5mL浓硫酸酸化，使水样pH小于2，并尽快测定。 （3）样品应贮存在玻璃瓶中。
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紫外光法测定硝酸盐关键技术
7. 思考题
（1）水质硝酸盐氮测定的方法有哪些？各有什么优缺点？ （2）紫外分光光度法测定水中硝酸盐含量的原理是什么？ 简述其测定的主要步骤。 （3）当水样中存在六价铬和三价铁时，应采取哪些处理措 施可消除其对紫外分光光度法测定硝酸盐的干扰？
分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量1
分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量引言：亚硝酸盐作为一种食品添加剂，能够保持眼肉制品等的色香味，并具有一定的防腐性。
但同时也具有较强的致癌作用，过量食用会对人体产生危害。
因此，食品加工中需严格控制亚硝酸盐的加入量。
实验原理：样品经沉淀蛋白质，除脂肪后，在弱酸性溶液中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成的重氮化合物与盐酸萘乙二胺偶联成紫色的偶氮染料，可用分光光度法测定，仪器：小型多用食品粉碎机，分析天平，烧杯，玻璃棒，250mL 容量瓶，50mL容量瓶（7只），漏斗，滤纸，滴管， 2.00mL移液管试剂：饱和硼砂溶液，，，150 亚铁氰化钾水溶液，，蒸馏水材料：火腿肠样品（双汇王中王骨香风味）实验步骤试样预处理1）取样，在分析天平上称取一定量火腿肠样品，样品质量为5.0984g，将称得的样品放入粉碎机中，加入一定量水后将样品绞碎。
2）将绞碎后的试样倒入烧杯中，加入12.5mL 硼砂饱和溶液搅拌均匀。
3) 将烧杯中的试样用玻璃棒全部转移到250mL 容量瓶中，并用少量水洗涤玻璃棒和烧杯1~2 次，并将容量瓶放在沸水浴中加热15min.4) 取出容量瓶，在轻轻摇动下慢慢滴加 2.5mLZnSO4 溶液沉淀出蛋白质，冷却至室温后，用蒸馏水稀释至刻度，定容，摇匀。
5 放置10min 中左右，撇去上层油脂，将清液在小漏斗上过滤，需去除最初的10mL 滤液，剩下的留测定用。
标准曲线的绘制1) 准确移取NaNO2溶液0，0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0mL分别置于50mL 的容量瓶中，再各加入30mL 水，然后分别加入2mL 对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置3min.2) 分别加入1mL 盐酸萘乙二胺溶液，加水稀释至刻度，摇匀。
3) 放置15min 分钟后用1cm 吸收池，以试剂空白为参比，于波长540nm 处测定各试液的吸光度。
4) 以NaNO2 溶液的加入量为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
紫外分光光度法测硝酸盐
紫外分光光度法测硝酸盐
原理
紫外分光光度法测定硝酸盐的原理是利用硝酸盐在220nm波长
附近具有特征性吸收峰。
当含有硝酸盐的溶液通过一定厚度的光池时，会吸收特定波长的紫外光，吸收量与硝酸盐浓度成正比。
通过
测量吸收值的变化，可以间接测定硝酸盐浓度。
试剂和仪器
试剂：硝酸盐标准溶液（已知浓度）、去离子水
仪器：紫外分光光度计、石英比色皿（1cm光程）
实验步骤
1. 校准曲线制备：
取一系列浓度已知的硝酸盐标准溶液（例如0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L），分别用去离子水稀释至定容。
用石英比色皿装样，将样品放入紫外分光光度计中，在
220nm波长下测量吸光度（A）。
绘制校准曲线：以硝酸盐浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，得到一条直线方程：y = mx + b。
2. 样品检测：
取待测样品，用去离子水稀释至适当浓度，使之处于校准
曲线的线性范围内。
用石英比色皿装样，在220nm波长下测量样品的吸光度（A）。
3. 硝酸盐浓度计算：
根据校准曲线方程，计算待测样品的硝酸盐浓度（mg/L）：[硝酸盐浓度] = (A - b) / m
注意事项
实验中所有器皿和试剂应洁净，避免引入杂质影响测量精度。
硝酸盐标准溶液的浓度应准确，且与样品浓度范围相匹配。
在测量吸光度时，应使用空白溶液（无硝酸盐的去离子水）进
行零点校准。
样品稀释倍数应适当，确保吸光度值在校准曲线的线性范围内。
如果样品中其他物质与硝酸盐具有重叠的吸收峰，可能需要采
用衍生反应或分离技术来消除干扰。
蔬菜中硝酸盐、亚硝酸盐测定方法
Ｎ ＯＮ Ｇ ＹＥ ＫＥ ｘＵ Ｅ
蔬菜 中硝酸盐 、亚硝酸盐测定方法
河南科技大学林业职业学院
摘
缺点。
刘 荣森
张泽根
要 ：综述 了蔬菜 中 酸盐及亚硝酸盐测定方法，常见的测定方法有分光光度法、离子 色 硝 谱法 电位分析法等。并且分析了各方法的优
关键词 ：蔬菜 ；硝酸盐 ；亚硝酸盐 ；测定
九 、杨扇 舟 蛾及 杨小 舟 蛾幼 虫期
调 查
释放 周 氏 啮小 蜂 防治 杨 扇 舟 蛾 、 杨小 舟蛾 第二代 幼 虫 ，待 第 三代 幼虫 发生 期对 虫 口密 度 调查 ，比较 释 放前 与释放后 虫 口密度是否下降 。 （ 见表 ２
和表 ３ 。 ） 十、试验结果分析
０９ ９ —０９ ９ ， Ｒ Ｄ 在 ０２ ％ ～ ． ０ ９ ． ９ Ｓ ９ ． ２
液直接 用盐 酸萘 乙二胺 比色法 测定 其
中的亚硝酸盐 ，另一份经 ｚ — ｎ ｃ柱将 硝
测 定要 求 。宋 莲军等 利用 硝酸 根离子 选 择 电极 和离 子分析 仪 ，采用 浓度直 读 的方 法 ， 同时 测 定 蔬 菜 中 Ｎ ｆ和 Ｏ
２ｍ ５ Ｌ范围内符 合 比耳定律 ， 尔吸收 摩
系 数 分 别 为 ０８×１ ／（ ｏ ・ｍ）、 ． ０ ｍ ｌｃ ４ ； Ｌ ｍ０・ｍ ． ×１３ ／（ １ｃ ），对上 述 试样 分 ０ ｏ 别 进 行 ７次测 定 ，得 到 Ｒ Ｄ分 别 为 Ｓ ３５ ． ％、４３ ％、３１％；其 回收率分别 ２ ．８ ．１
［子拥军， ３ 】 朱芝英， 张忠镇 ． 舟蛾在 济宁危 杨扇 害现状及综合 防控配套技 术［． 国森林 Ｊ中 】
病 虫， ｌ， ） ２ １ Ｏ１ ．
紫外分光光度法测硝酸盐含量
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结
语
我国亚硝酸盐事件频发，食品中亚硝酸盐是 否符合国家标准已经成为研究的热点，该项研究 对当今倡导食品安全，人们维护自身利益、提倡 健康饮食有深刻意义。通过本实验可以看出我们 日常使用的甜面酱、猪蹄、牛肉、豆腐干等熟食 亚硝酸盐含量均有超标，因此建议购买和会做视 频时，生产者和消费者都应警惕，更好的保证人 们的饮食健康，维护社会和谐。
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部分食品中亚硝酸盐的限量标准（以NaNO2计）
品 名 限量标准 mg/kg 品 名 限量标准mg/kg
食盐（精盐）、 ≤2 牛乳粉 鲜肉类、鲜鱼 类、粮食 蔬菜 ≤3
香肠（腊肠）香肚、 ≤20 酱腌菜、广式腊 肉 肉制品、火腿肠、 灌肠类 其他肉类罐头、其 他腌制罐头 西式蒸煮、烟熏火 腿及罐头、西式火 腿罐头 ≤30
1.样品处理
5. 样品分析
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绘制标准曲线
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分别准确吸取亚硝酸根标准溶液1.00、2.00、3.00、 4.00、5.00mL于1组50mL干燥的容量瓶中,再分别加入1.0mL 邻苯二胺和1.5mL浓盐酸溶液, 加水稀释至刻度，摇匀，紫 外吸光光谱在260nm处测定吸光度A。以吸光度A为横坐标， 亚硝酸根含量为纵坐标，并绘制工作曲线。
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2.2亚硝酸盐污染来源 其他污染
腌制蔬菜
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肉制品发色 剂/防腐剂
污染 来源
蔬菜变质腐败 蔬菜自然产生 硝酸盐转换
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2.3预防措施
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（1）蔬菜应妥善保存，防止腐烂，不吃腐烂的蔬菜。 （2）食剩的熟菜不可在高温下存放长时间后再食用。 （3）勿食大量刚腌的菜，腌菜时盐应多放，至少腌至 15天以上再食用；但现腌的菜，最好马上就吃，不能存放 过久，腌菜时选用新鲜菜。 （4）不要在短时间内吃大量叶菜类蔬菜，或先用开水 焊5分钟，弃汤后再烹调。 （5）肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐用量要严格按国家卫 生标准规定，不可多加。 （6）苦井水勿用于煮粥，尤其勿存放过夜。 （7）防止错把亚硝酸盐当食盐或碱面用。 >
实验十一分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量（精）
实验⼗⼀分光光度法测定⽕腿肠中亚硝酸盐的含量（精）实验⼗⼀分光光度法测定⽕腿肠中亚硝酸盐的含量⼀、实验原理样品经沉淀蛋⽩质，除脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与盐酸萘⼄⼆胺偶合形成红⾊染料，通过测定吸光度可与标准进⾏⽐较定量。
⼆、试剂与仪器（1）试剂亚铁氰化钾溶液：称取10.6gK4Fe(CN)6 .3H2O溶于⽔定容100mL.⼄酸锌溶液：称取11g Zn(CHCOO)2 .2H2O加1.5mL冰⼄酸，溶于⽔定容50mL。
饱和硼砂溶液：称取5g NaB4O7 . 10H2O溶于100mL热⽔中，冷却备⽤。
20%盐酸：取54mL浓盐酸加⽔45mL。
0.4%对氨基苯磺酸：称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100mL20%盐酸中。
200ug/mL亚硝酸钠标准液：精密称取0.1000g经硅胶⼲燥24⼩时的亚硝酸钠（GR），加⽔溶解后，定容500mL。
5.0ug/mL亚硝酸钠标准使⽤液：吸取亚硝酸钠标准液5.0mL于500mL容量瓶中⽤重蒸馏⽔定容。
（2）仪器电炉电热恒温⽔浴锅玻棒漏⽃铁架台烧杯（50mL、200mL、500mL 各2个）；容量瓶（250ml1个）；吸管（2mL,5mL,10mL,50mL各1⽀）；⽐⾊管（50mL10⽀）三、实验操作（1）样品处理称取3g左右⽕腿肠于50mL烧杯中，加⼊饱和硼砂溶液6.3mL，以玻棒搅匀，⽤70℃左右的重蒸馏⽔约100mL将其洗⼊250mL 的容量瓶中，置于沸⽔浴中加热15分钟，取出，⼀边转动⼀边加⼊5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加⼊5mL⼄酸锌溶液以沉淀蛋⽩质。
定容，混匀，静置半⼩时，除去上层脂肪，过滤，弃去初滤液30mL，收集滤液备⽤。
（2）绘制标准曲线吸取0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20mL 亚硝酸钠标准使⽤液，分别置⼊7⽀50mL ⽐⾊管中，各加⼊0.4%对氨基苯磺酸2mL,混匀，静置3-5分钟后各加⼊1.00mL 0.2%盐酸萘⼄⼆胺溶液，加⽔⾄刻度，混匀，静置15分钟，⽤2cm ⽐⾊⽫，以零管调零，于538nm 处测量吸光度，以亚硝酸钠含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
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分光光度法检测食品中的硝酸盐
1.分光光度法：
分光光度法主要有三种：可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法。
分光光度法设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观，在硝酸盐和亚硝酸盐的测定中一直占据有十分重要的地位。
但在复杂介质中测定时易受样品本身颜色影响，所以样品前处理十分重要。
1.1 可见光分光光度法.
1.1.1镉柱法还原法.
这是我国食品安全国家标准（GB 500933-2010）[1]中检测硝酸盐的方法，样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,使用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，于波长538nm出测定吸光度，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去不加锌粒测得的亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。
刘烨等【4】研究发现当镉柱高度为5cm，氨缓冲液PH9.15~9.78，水洗脱液是镉柱容积的2~3倍时，活化速度加快，还原效率及回收率都较高。
针对该检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题，项锦欣[2]等改用天然高分子絮凝剂W-3 取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌，不但节省试剂，且显著缩短处理时间。
陈秋生[3]等人实验比较后发现用超声提取蔬菜中的硝酸盐，具有简单、高效、回收率高的优点。
由于本法所用试剂为毒性很大的强致癌试剂，对环境和分析人员可能会造成危害，因此, 选择新的重氮化试剂和偶联试剂以降低试剂的毒性是许多环境工作者研究的课题。
1.1.2锌粒还原法.
用锌粒做还原剂，在银离子催化下将食品中的硝酸盐还原成亚硝酸盐,再按国标格里斯试剂法进行检测。
之所以用锌粒不用锌粉，是因为用锌粉的还原液较浑浊，周峰[4]用20 目~ 30 目的金属锌粒代替锌粉, 还原液不产生混浊且易过滤，同时实验结果几近一致。
肖义夫[5]实验室应用锌粒还原法对各类食品样品(包括乳及乳制品,肉及肉制品等) 中的硝酸盐进行了测定,平均回收率为94.0 % , RSD 低于5 %。
认为该法重现性好, 准确度高,利于环保,其突出优点还有省时,从取样到出结果不超过2 h。
1.1.3直接显色法.
硝酸盐也可以不经还原，直接与显色剂反应。
王亮等[6]利用酚二磺酸与硝酸根离子在无水的条件下生成黄色的硝基酚二磺酸，在403nm的波长下测定吸光度，获得了较满意的结果。
冯颖等[7]依据硝酸盐与二苯胺在浓硫酸介质中反应生成蓝色物质的原理，根据显色深浅与标准色卡进行比较，从而确定样品中硝酸盐的含量。
梁金平等[8]采用百里酚作显色剂测肉类食品中硝酸盐，此法最低检出限为1.25μg/25ml，在1.25-0.25μg/ml内线性关系良好（r=0.9999，P<0.001）,直线回归方程为y=0.048469X+0.000002，该方法的回收率良好。
显色法灵敏度高、准确度高，操作较为简便。
1.1.4流动注射-分光光度法.
将流动注射技术与分光光度法结合，使操作更加简便快捷，极大的提高了工作效率，尤其适合大批量的样品分析。
Andradea[9]等人在2003年利用此方法同时测定了蔬菜中的亚硝酸盐和硝酸盐。
其原理为：首先将NO3-还原成NO2-，NO2-在硫酸介质中还原成NO。
NO在酸性条件下与铁（Ⅱ）、硫氰酸盐生成FeSCNNO+复合物，在460nm处的吸光度值与NO3-和NO2-的浓度成正比。
该方法可以测定的硝酸盐浓度范围为1.00一10.00 mg／L,检测限为13mg/kg，精确性和准确性与AOAC方法相当。
当样品量为5 g时，每小时可分析30～40个样品。
国内对流动注射法的研究也越来越多，河海大学的孙西燕[10]等人设计了亚硝酸盐流动注射自动在线监测仪,并研究了仪器的最佳测量条件。
用此流动注射全自动在线检测仪测定天然水
中的NO2-含量, 测定结果与国标法手动测量结果基本一致，线性范围为10～1200μg/L,目前已成功用于环境水体中亚硝酸根的监测。
1.2 紫外光谱法
紫外法是我国农业行业中测定蔬菜水果中的硝酸盐含量的标准方法[11]，其原理是用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质,利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总和，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从工作曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
本方法检出限为1.2mg/kg,线性范围为2.00mg/kg～12.00mg/kg。
罗雪华[12]等改进了上述标准法，采用双波长紫外分光光度法，同时测定硝酸根离子在220nm 和275nm的吸光度，以两者之差作为NO3-的吸光度，排除了叶绿素等有机物质的干扰。
在样品液的制备时，冷家峰[13]等在弱碱性氯化铵缓冲溶液中用振荡法提取硝酸盐, 魏珂萍[14]对这两种提取方法比较后发现，震荡法和沸水浴法的精密度和准确度均符合试验要求。
紫外分光法分析成本较低、操作简单、精密度好、灵敏度高，但由于有机物在220nm也有吸收，对紫外法有一定干扰。
1.3 红外光谱法
王多加等利用Nicolet 670N FT-IR 傅里叶变换近红外光谱仪，带有I n G a A s监测器，用漫反射方法采集吸收光谱，波数范围 10000～4000cm-1。
以生菜[15]、小白菜[16]为实验样品，处理后采用漫反射的方法采集吸收光谱。
图谱的扫描条件为: 扫描次数32 次, 分辨率8 cm- 1。
原始光谱图用二阶导数预处理, 用最小偏二乘法进行统计分析。
多组实验表明近红外法的相关系数在0.98以上，相对误差多在4%以内, 个别样品超过6%。
虽然近红外光谱法较常规化学分析法( 3%以内) 的误差稍大，灵敏度较低，而且由于设备昂贵，目前应用范围较小。
但考虑到样品不需任何处理,不消耗任何材料和试剂, 操作快速简便，仅需1min 就能检测1 个样品, 其准确度也能够满足现场检测的实际需要, 仍有很好的应用前景。
参考文献：
[1]GB 5009.33—2010 食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
[2]胡凌宇，张晓姝，张晓凤，付钰洁，马练琼. 肉制品中亚硝酸盐国标检测法的改进研究[J].食品科学, 2009,30(4):254-256
[3]陈秋生，梁淑轩，李科，孙汉文. 蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的不同提取方法及含量测定[J]. 河北大学学报（自然科学版）,2007,27(2):174-178
[4]周峰. 用锌粒替代锌粉测定硝基苯类[J]. 环境监测管理与技术,2002,14(5)
[5]肖义夫、廖百森等.锌粒还原法快速测定食品中的硝酸盐[J].中国食品卫生.2003,15（04）:316-317.
[6]王亮，潘琇，刘恩玲，谢拾冰.酚二磺酸分光光度法测定叶菜类硝酸盐含量[J].浙江农学报，2007，19(3):245-247
[7]冯颖,纪淑娟,王建国.叶菜硝酸盐快速检测方法的研究[J].理化检验，2003，39(1):15~17
[8]梁金平，余军，徐幼林. 百里酚分光光度法测定肉类食品中硝酸盐的初步探讨[J].实用临床医学，2004，5（4）:6-7
[9]Raquel Andrader,Claudia O.Viana,Silvane G.Guadagninb,Felix G.R.Reyesb,Susanne Ratha. Alow-injection spectrophotometric method for nitrate and nitrite deternination through nitric oxide generation[J].Food Chemistry,2003(80):597-602.
[10]孙西艳,洪陵成,刘爱平,笪海文. 流动注射分光光度法测定亚硝酸盐仪器的研制[J].化
学研究，2009，20（3）：54-58
[11]NY/T 1279-2007 蔬菜、水果中硝酸盐的测定紫外分光光度法
[12]罗雪华、蔡秀娟. 紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量[J]. 华南热带农业大学学报,2004.10.（1）：13-16.
[13]冷家峰,刘仙娜,王泽俊. 紫外吸光光度法测定蔬菜鲜样中硝酸盐氮[ J ]. 理化检验化学分册, 2004, 40 (5) : 288 - 289.
[14]魏珂萍,刘宗云,刘敏等. 用2种紫外分光光度法测定新鲜蔬菜硝酸盐的比较[ J ]. 安徽农业科学, 2006, 34 (4) : 619, 638.
[15]王多加,钟娇娥,胡祥娜等. 用傅里叶变换近红外光谱和偏最小二乘法测定蔬菜中硝酸盐含量[ J ]. 分析化学, 2003, 31 ( 7) :892.
[16]王多加,林纯忠,钟娇娥. 近红外光谱法非破坏快速检测生菜中硝酸盐含量[ J ]. 食品科学, 2004, 25 (10) : 239 - 241.。