毒理学大蒜根尖染色体观察.
大蒜根尖细胞多倍体观察与制片
大蒜根尖细胞多倍体观察与制片一．实验目的1.通过实验掌握人工诱导多倍体植物的方法和技术,观察多倍体的特点2.利用染色体分析的方法对多倍体细胞做出准确判断。
二.实验原理物种的基本特征之一:生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这些染色体组成染色体组，或称基因组。
三.实验步骤1.取材:取大蒜(洋葱，蚕豆，小麦等)发根至0.5-1cm然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶液的培养皿中继续培养24小时，待观察到根部有膨大时取出固定，与在水中培养的材料做对照2.固定:在卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中保存或备用3.解离：植物的分生组织如根尖、茎尖等需要经过处理以便除去细胞之间的果胶层并使细胞壁软化，经解离的组织才能使压片步骤顺利进行。
解离常用酸解法和酶解法。
①酸解法:固定后的材料用清水洗漆后用1MHCl在60°C水浴中恒温处理5-10min.在酸解过程中一定要掌握好温度和时间，若解离不够，则压片不是分散。
若解离太过，在下一步处理材料的由于材料过软而易丢失。
然后水洗3次。
②酶解法：用10-20g/L的果胶酶，或与10-50g/L的纤维素酶混合使用4.染色：切取根尖分生组织区，用改良苯酚品红染色15min5.压片:将染色后的材料盖上盖玻片,在盖玻片上盖上两层吸水纸，用一个双面刀片,插到盖片与载片之间的一角，用左手食指压紧盖片,防止滑动，用右手持解剖针，用针柄轻敲盖片，使材料均匀分散开。
然后将刀片轻轻撤出，再用针柄重敲盖片，使细胞分散压平。
一张制片好的细胞染色体制片至少符合如下条件:①在一张制片中应有较多的中期分裂相。
②染色体分散而不重叠。
③染色体不断裂、扭曲、有溢痕，随体清晰④染色体着色较深而细胞质不着色或着色很浅，背景清晰无过多杂质。
选择中期分裂相好的细胞观察,通过观察和计数中期染色体数目,确定细胞类型。
五.实验结果六．结果分析所制的片子好多细胞未破裂，有的染色体溢出，应该是压片不好所致，这样就导致所观察的染色体条数不对。
大蒜核型分析
实验二植物染色体组型分析一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化，了解有丝分裂全过程。
3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的方法。
二、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。
每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。
染色体组型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征，如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测，从而描述和阐明该生物的染色体组成，为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。
染色体组型分析大都采用植物根尖等分生组织的有丝分裂中期细胞，染色体制片要求分裂相为染色体分散，互不重叠，能清楚显示着丝点位置。
然后通过显微摄影，测量放大照片上的每个染色体的长度和其它形态特征，依次配对排列，编号，并对各对染色体的形态特征作出描述。
三、实验材料1.材料：大蒜2.用具：载玻片，盖玻片，50ml烧杯，温度计，恒温水浴锅，试剂瓶，镊子，解剖针，吸水纸，剪刀，绘图，纸胶水等。
3.药品：Carnoy固定液，无水酒精，70％酒精，1mol/L HCL解离液，苯酚品红染液四、方法与步骤（一）植物有丝分裂1、材料处理1）、大蒜发根将大蒜鳞茎置于盛有清水的小烧杯口上发根，待根长到1.5-2.0 cm左右时备用（在此过程注意换水）。
2）、根尖预处理在分裂高峰期前（大蒜根尖分裂高峰期为早上八点以及下午两点左右），剪下根尖，置于盛有少量蒸馏水的烧杯并放入冰箱(0—4 ℃)中预处理24h。
预处理的作用，主要是阻碍纺锤丝的形成，使染色体缩短，改变细胞质的粘度，在压片时，有利于染色体的分散。
2、材料固定经过预处理的根尖，再放到Carnoy液中固定24h以内。
毒理学大蒜根尖染色体观察.
微核试验一、研究的目的与意义：1：知道微核产生的原理。
2：学会识别微核以及计算微核率。
3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。
4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。
真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。
利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。
检测已存在或潜在的危害。
二、研究内容与技术路线2.1 研究内容：通过观察不同浓度的1,2,4-三氯苯和铬以及它们的交互作用对大蒜根尖细胞微核率以及不同分裂期细胞的比例的影响，来判断其遗传毒性。
2.2 技术路线：冷冻保存24h孚尔根染液配制三、实验方法3.1实验材料大蒜、甲醇、冰乙酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、比重 1.18 的浓盐酸、蒸馏水、酒精、重铬酸钾、氯苯、丙酮、显微镜、载玻片、盖玻片、定性滤纸、烧杯、100毫升容量瓶、200 毫升容量瓶、镊子、刀片、纱布、青霉素小瓶、移液管、试管3.2试剂准备：1、1mol/LHCl ：用10mL 移液管量取8.69mL 浓盐酸加入100mL 容量瓶，用在蒸馏水定容至100mL 。
2、50mg/L、100mg/L、：称取170mg重铬酸钾，加水溶解，在200mL容量瓶中定容，配制300mg/L的Gr 6+母液，然后稀释到50mg/L、100mg/L。
3、卡诺式固定液：将甲醇：冰乙酸按3:1 比例混合配制5、Schiff 氏试剂：称取0.5g 碱性品红加入到100mL 煮沸的蒸馏水中，时时振荡，继续煮5min，使碱性品红充分溶解。
冷却致50C，用滤纸过滤，滤液中加入10ml1mol/LHCI，冷却致25C，加入1.5g偏重亚硫酸钠，充分振荡，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24h ，用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑纸。
微核实验-毒理学-洋葱根尖染色体观察
微核试验摘要：利用大蒜根尖细胞微核染色与计数技术测定不同浓度6价铬和1.2,4-三氯苯以及它们的不同浓度混合液对大蒜根尖分生区细胞微核率和细胞分裂各期的影响。
以蒸馏水为对照组，设置的实验组为3组不同浓度的6价铬和三氯苯以及它们的混合液。
用孚尔根染液法对不同试剂及各浓度的处理的根尖进行染色。
在显微镜下观察各试剂各浓度处理下的微核率以及不同分裂期细胞的比例。
关键字：孚尔根染色法、微核、微核率、分裂期细胞Abstract:Use of garlic root tip cell micronucleus dyeing and counting technology . Different concentrations of chromium 6 and 1,2, 4 - t hree hlorobenzene as well as their different concentration mixture to garlic root tip meristematic cells in the areas of micronucleus rate and the influence of each stage of cell division.With distilled water as control group, the group set up for the three groups of different concentrations of chromium 6 and 3 chlorobenzene and their efu's root dye solution for different reagent and the concentration of the treatment of root tip for dyeing. Under the microscope to observe the reagent concentration under the treatment of micronucleus rate and different proportion of split phase cellsKey Words：Fu's root staining method、micronucleus、Micronucleus rate、Split phase cells一、研究的目的与意义：1：知道微核产生的原理。
大蒜根尖诱导多倍体观察实验报告
大蒜根尖染色体观察实验报告高熹168615140001实验目的：1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握大蒜根尖制片的方法。
3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。
4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。
实验背景：在自然条件下，机械损伤，射线辐射，温度骤变，及其它一些化学因素刺激，都可以使植物材料的染色体加倍，形成多倍体种群。
近几十年来，随着人们对多倍体诱导机制研究的深入，由人工模拟自然条件来诱导多倍体植物获得了长足进展，形成了不少由价值的人工多倍体种群。
实验原理：用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗，是常用的人工诱导多倍体的有效方法。
秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种，秋水仙的种子及器官中提取出来的一种生物碱，其分子式为C22H25NO6，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。
当药剂的作用消除后，由于多倍体细胞继续分裂，便得到多倍体组织，以后则产生新的多倍体植株。
实验器材：刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。
实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。
（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g（先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。
将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。
待根尖长到1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。
）实验试剂：1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。
实验步骤：1、取2-4根大蒜根放入烧杯中，加入1mol/L的HCl浸没，60℃水域水解5min。
2、弃掉HCl，自来水冲洗大蒜根三次，冲洗干净表面的HCl。
3、在载玻片上切下2-3mm的根尖，用纸吸去多余的水分，在载玻片上用刀片切碎根尖，滴加1滴改良苯酚品红溶液，染色15min。
实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
再用高倍镜观察
依次观察分裂中期、前期、 后期、末期、的细胞间期、
思考： ⑴为何只截取根尖2—3mm？ 原本细胞都是叠加在一起 有利于找到分生区细胞 ⑵解离的目的： 细胞小，排列密而整齐，细 的，在显微镜下很难观察清楚， 使组织中的细胞相互分离开。 胞壁薄，细胞核大，细胞质浓， ⑶漂洗的目的： 酒精和盐酸就是使细胞分散分 无液泡。具有很强的分裂能力， 洗去药液，防止解离过度。 离并杀死细胞，显微镜观察的 ⑷用碱性染料染色目的： 能够不断的分裂产生新细胞， 是死亡的细胞那时处于的状态， 使染色质和染色体着色，便于观察。 再由这些细胞分化形成其他组 ⑸制片的目的： 所以，有的细胞正处于中期， 使细胞分散开（成一层细胞），利于观察。 织。 有的处于间期。 （6 ）分生区的特点是什么？ （7）本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗？
二、材料用具：
1、洋葱（或大蒜）根尖，
2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等， 3、解离固定液 ：盐酸和酒精混合液(1:1） 4、染色：龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）
三、实验步骤
1.生根培养：将切除老根的洋葱或 大蒜的磷基置于盛水
的小烧杯上， 于22－25℃下进行生根培养。
磷 基
培养根尖：应每天换水 (防止水中缺氧烂根)
2.有1位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜中观察到 的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是
C
①取材位置不合适 ⑤视野选择不合适 ②取材时间不合适
③制片时压片力量不合适 ④解离时间不合适 A.②③
C.①②⑤
B.②⑤
D.①③④
⑤染色：染液（0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋 红）;时间为3－5分钟；目的是使染色体或染色质被碱性 染料染成深色，便于观察。
新疆大蒜染色体核型分析
8
8
年
2 月
浙江 农 村技 术 师 专 学 报
自然 科 学版 )
第 期
新疆 大 蒜 染 色 体 核 型 分 析
张 忠 新
浙 江 农 村技术师 专 )
季
青
(
新 疆农 科 院 )
摘
木文 根 据新疆 大蒜体 细 胞染色体 的 观 察 与核 型 分析 的 结果 其染色体核 型 为
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表 明 大蒜染色体 数 为 乞 n
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据悉
大蒜根尖染色体观察实验
大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。
3、实验原理(1)洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2)多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。
各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。
解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。
漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。
(3)有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。
如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温培养箱中2~3天，催化大蒜生根。
大蒜根尖在植物染色体压片法实验教学中的应用
作者： 郑燕丹
作者机构： 广东揭阳职业技术学院应用生物工程系,522000
出版物刊名： 实验教学与仪器
页码： 31-31页
主题词： 染色体组;实验教学;植物;应用;大蒜;细胞周期;教学要求;实验材料
摘要：植物染色体压片技术是遗传学实验要求掌握的基本技术之一，常用于观察植物染色体，另外，它也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色体单体变换的基础。
植物染色体压片法实验教学要求所制作的装片能观察细胞周期各个时期的主要特征，尤其是染色体的行为变化。
由于种种原因，实验中所制作的装片往往存在实验材料处于分裂期的细胞少，染色效果差，。
大蒜根尖培养微核--洗衣粉
利用大蒜根尖培养微核一、实验目的1.学习化学因素诱发植物染色体变异及产生微核的实验技术；2.检验诱变剂量与诱变效应的相关性3.检测洗衣粉、洗发水对大蒜的遗传毒理效应二、实验原理植物细胞微核技术是根据遗传学上染色体畸变的原理而建立的一种环境污染的生物监测方法。
植物细胞在有丝分裂或减数分裂的早前期,如受到有害因子的攻击,可能发生染色体断裂,产生染色体片断,这些片断就游离在细胞质中,形成大小不同的小核,即微核。
环境中的诱变物越多,形成的微核就越多,因此可以根据微核的多少,说明诱变物强弱。
【1】微核是真核生物细胞中的一种异常结构，在间期呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核的1/3以下。
微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生，一整条或好几条染色体也能形成。
这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥，便形成了第三个核块。
微核率大小同用药剂量或辐射积累效应呈正相关，因此可用简易的间期微核技术来代替繁杂的中期染色体畸变计数。
三、实验材料大蒜根尖四、仪器、药品、用具显微镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、电子天平、量筒、冰箱、恒温箱或水浴锅、培养皿、青霉素小瓶、镊子、洗瓶等卡诺氏固定液、95%酒精、1N盐酸、改良苯酚品红染液五、实验内容和方法1、大蒜培养大蒜浸水催根将剥皮的大蒜放入培养皿中，倒入清水使大蒜根部没入水中，置于25℃下培养 48 小时，待初生根长出 1-2cm 左右，根毛发育良好，即可用来检测。
【2】在材料剪取前将大蒜移入4 ℃冰箱内处理24 h，经低温处理后再移出室温下恢复培养，待根尖长至1.5～2.0 cm后即可进行观察。
其原因是经过接近0 ℃的低温处理后，可抑制纺锤体的形成，因此，在4 ℃时，不仅大蒜根尖积累了很多前、中、后、末期的细胞，而且染色体比较粗短，典型的分裂相大大增多。
（这步可省略）【3】2、待测液处理（1天）取材最好在上午10点3、恢复培养将处理过2 d的洋葱再次移入蒸馏水中继续培养1 d。
生物大蒜根尖实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程。
2. 理解细胞周期中各阶段的特点。
3. 掌握制作临时装片和显微镜观察的基本技能。
二、实验原理细胞有丝分裂是生物体细胞增殖的重要方式，分为间期、前期、中期、后期和末期五个阶段。
本实验通过观察大蒜根尖细胞的有丝分裂，了解细胞周期的变化和各个阶段的特点。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜大蒜头、盐酸、酒精、碘液、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、显微镜、酒精灯、滴管等。
2. 仪器：光学显微镜、显微镜载物台、显微镜镜筒、显微镜目镜、显微镜物镜等。
四、实验步骤1. 准备根尖：取新鲜大蒜头，用解剖针切下根尖约2-3毫米，放入盛有盐酸的试管中，在室温下浸泡10-15分钟。
2. 漂洗：将浸泡后的根尖用蒸馏水冲洗干净，去除盐酸。
3. 解离：将冲洗干净的根尖放入盛有盐酸和酒精混合液（1：1）的试管中，在室温下解离10-15分钟。
4. 漂洗：将解离后的根尖用蒸馏水冲洗干净。
5. 压片：将冲洗干净的根尖放在载玻片上，用解剖针轻轻压扁，盖上盖玻片。
6. 染色：在盖玻片边缘滴加碘液，用吸水纸吸取多余的碘液。
7. 观察：将载玻片置于显微镜下，观察大蒜根尖细胞有丝分裂的不同阶段。
五、实验结果与分析1. 间期：细胞核内染色质细长，呈丝状，细胞质均匀，无明显变化。
2. 前期：细胞核内染色质逐渐凝缩成染色体，染色体呈细长条状，细胞质无明显变化。
3. 中期：染色体排列在细胞中央，呈放射状，细胞质无明显变化。
4. 后期：染色体逐渐缩短变粗，向细胞两端移动，细胞质开始分裂。
5. 末期：染色体到达细胞两端，细胞质分裂成两个子细胞。
六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的不同阶段，我们可以了解到细胞周期中各阶段的特点。
本实验成功观察到了大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段，为后续生物学研究提供了基础。
七、实验讨论1. 实验过程中，根尖浸泡在盐酸中，有助于软化细胞壁，便于观察。
2. 解离过程中，盐酸和酒精混合液的作用是使细胞分离，便于观察。
大蒜实验报告观察根尖
一、实验目的1. 学习和掌握制作临时装片的技能。
2. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程，了解细胞分裂的各个阶段。
3. 熟悉显微镜的使用方法。
二、实验原理细胞有丝分裂是细胞生命周期中的一个重要过程，通过观察细胞有丝分裂，可以了解细胞分裂的各个阶段及其特点。
大蒜根尖细胞具有分裂能力，可以用来观察细胞有丝分裂过程。
三、实验材料1. 大蒜根尖2. 显微镜3. 龙胆紫溶液4. 盐酸酒精混合液5. 生理盐水6. 刮刀7. 玻片8. 载玻片9. 吸水纸四、实验步骤1. 准备根尖：将大蒜根尖用刮刀刮取2-3mm，放入盛有生理盐水的玻璃皿中。
2. 解离：将根尖放入盛有盐酸酒精混合液的玻璃皿中，室温下解离3-5分钟。
3. 漂洗：将解离后的根尖用生理盐水漂洗2-3次。
4. 染色：将漂洗后的根尖放入盛有龙胆紫溶液的玻璃皿中，染色3-5分钟。
5. 制片：将染色后的根尖用吸水纸吸去多余的水分，将根尖放在载玻片上，用刮刀轻轻刮取根尖细胞，制成临时装片。
6. 观察：将临时装片放在显微镜下，先用低倍镜观察，找到合适的细胞，再换用高倍镜观察细胞有丝分裂的各个阶段。
五、实验结果与分析1. 解离：盐酸酒精混合液可以杀死细胞，并使细胞散开，便于观察。
2. 漂洗：漂洗可以去除细胞中的杂质，提高观察效果。
3. 染色：龙胆紫溶液属于碱性染料，可以将染色体着色，便于观察。
4. 制片：临时装片的制作要均匀、薄，避免影响观察。
5. 观察：通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段，可以了解到细胞分裂的过程，包括前期、中期、后期和末期。
（1）前期：细胞核开始缩小，染色体逐渐凝聚，成为染色体。
（2）中期：染色体排列在细胞中央，形成赤道板。
（3）后期：染色体分离，向细胞两极移动。
（4）末期：染色体到达细胞两极，细胞开始分裂。
六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂，我们了解了细胞分裂的各个阶段及其特点。
实验结果表明，盐酸酒精混合液、漂洗、染色和制片等步骤对观察效果有重要影响。
11.30遗传—大蒜根尖诱导微核实验
姓名系年级学号科目遗传学实验题目大蒜根尖诱导微核实验组别周三诱变物质的微核检测技术摘要微核体检测是一种对环境中诱变物质进行评估的快速而简便的方法，被广泛应用于很多行业。
此次实验，利用自主选定的化学制剂培养大蒜根尖，后通过观察根尖中的微核体来检测此试剂的诱变能力，了解了微核检测的方法和意义，掌握了一项评价环境中常见物质诱变情况的技术。
1.引言微核是细胞在间期时，染色体发生断裂，在进入下一次分裂时，染色体片段不能随有丝分裂进入子细胞，而在细胞浆中形成直径小于主核的、与主核分开的微小核，主要由外界损害因素（生物、物理、化学因素）对细胞的作用形成的。
19世纪末，Howell与Jolly分别在猫和大鼠外周血中发现一种小体，命名为Howell-Jolly小体，并且发现这种小体也存在于恶性贫血患者外周血中。
这一小体便是今日被称之为微核的小体。
1959年，Evans等将蚕豆根端细胞暴露在电离辐射下，观察到辐射诱导微核形成效应，并据此间接推断微核来源于辐射诱导的染色体异常。
这篇文献便是以微核发生率反映染色体异常来评价遗传毒性的第一篇报道。
作者认为约60%染色体断片与微核形成直接相关。
1970，年Boiler和Sehmid以中国金黄地鼠为材料，观察了抗肿瘤药三亚胺给予后，骨髓与外周血细胞学的变化，并且提出用本来无核的外周血嗜多染红细胞中的微核发生率来作为微核试验的基本指标，并正式命名为微核实验。
70年代初，Matter和Schmid首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率来测定疑似有诱变活力的化合物，建立了微核测定法。
此后至70年代中期，Sehmid以及Heddle研究小组的工作，全面奠定了微核实验的理论及应用基础。
近年来，由于大量新的化合物的合成，原子能的应用，各种各样工业废物的排出，日常生活中人类接触到的有潜在遗传毒性的物质越来越多，微核实验的重要性也就随之突显出来。
微核实验技术简单易行且灵敏，目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面2.实验材料及方法2.1实验材料2.1.1试验材料大蒜。
遗传学实验报告——微核的诱导和观察
遗传学实验报告
诱变物质的微核测试
实验材料：
大蒜
诱变物质：
４０ ｍＭｏｌ／Ｌ ＮａＮ３，ＥＢ染料稀释液，洗洁精，少量二甲苯乙醇溶液
实验器具和药品：
卡诺固定液，改良苯酚品红液，培养皿，剪子，镊子，载玻片，盖玻片等。
实验步骤：
１．大蒜泡于水中２５℃或室温发根，约２４ｈ后根长０．５～１ｃｍ。
２．各培养皿中加入各种处理药物。
３．根尖浸入药物皿中，２５℃或室温培养２４～３０小时。
并留一部分发根大蒜，培养于水中作对照。
４．分皿固定。
从根部切下大蒜根，在３甲醇：１冰醋酸的卡诺固定液中，约２４小时后转移到７０％酒精中，室温１ｈ后换至新的７０％酒精，可长期冰箱保存。
５．取大蒜根，在载玻片上用生理盐水洗两次以除去酒精。
１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ室温水解１０ｍｉｎ，生理盐水洗３次。
６．切适当大小（２～３ｍｍ）根尖，改良碱性品红染液中切成或用镊子夹成小块，染色１０ｍｉｎ，压片观察。
实验结果：
除了４０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＮ３处理的大蒜根尖产生大量微核细胞外，其它诱变物质和水的阴性对照均未产生微核。
上图：４０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＮ３处理后多种形态的微核
上图：４０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＮ３处理后产生微核和畸形核 上图：４０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＮ３处理后视野中成片的微核细胞 畸形核
微核。
各种药品试剂对大蒜根尖的微核实验
一、背景介绍微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。
微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。
微核试验在对外来化合物(如药品、食品添加剂、农药、化妆品、环境污染物等)遗传毒性和职业暴露人群遗传损害监测和现场生态环境检测方面，在诊断和预防肝癌、食管癌、肺癌等恶性肿瘤方面得到了大量的应用。
微核试验最大的优点是经济、简单、快速，而国内外大量的对试验研究，比较一致的看法是该方法在敏感性、特异性和准确性方面，与经典的染色体畸变分析方法基本相当川。
因而，特别适合作为大量化合物和现场人群初筛的实验方法。
微核试验创建于20世纪70年代中期，目前许多国家和国际组织，已将其规定为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理安全性评价的必做实验。
二、实验目的1、了解微核测定的方法与意义。
2、寻找新的测试系统或测定更多的环境因素。
三、实验用具培养皿，剪子，镊子，解剖刀片，载玻片，盖玻片，大蒜，双筒体视显微镜，滤纸条，移液枪，Eppendorf管等。
四、实验试剂实验室药品：改良苯酚品红，1mol/LHCl，蒸馏水，卡诺固定液，70%酒精，叠氮化钠，生理盐水。
自备的药品：阿奇霉素，甘草片，可乐。
五、实验步骤1）大蒜泡于水中25℃或室温发根，约24小时后根长0.5～1cm。
溶液处理作为阳性对2）各培养皿中加入各种浓度的处理药物。
一皿中加入 NaN3照。
一皿中只加水作为阴性对照。
3）根尖浸入各药物皿中，25℃或室温培养24～48小时。
4）根尖浸入水中恢复培养24小时。
5）分皿固定。
从根部切下大蒜根，在3甲醇：1冰醋酸的卡诺固定液中，约24小时后转移到70%酒精中，室温0.5小时后换至新的70%酒精，可长期冰箱保存。
大蒜根尖诱导微核实验
一、实验目的1．了解细胞微核形成的机理及其形态特点。
2．学习植物根尖细胞的微核检测技术。
二、实验原理微核是间期细胞的细胞质中一个或多个圆形或杏仁状结构，是有丝分裂后期丧失着丝粒的落后的染色体片段形成。
微核是染色体畸变的一种表现方式。
许多能引起染色体断裂的理化因素，如辐射、化学诱变剂等，均可作用于分裂细胞而产生微核。
目前研究表明，微核发生率同作用因子的剂量呈正相关，微核发生率来反映诱变物质对生物的遗传危害程度。
微核微核试验是一种建立在细胞水平上分析DNA损伤的技术。
该技术以其经济、简便、快速、敏感、特异、准确等特点，成为检测致突变剂和环境污染物等经典的短期试验方法。
目前许多国家和国际组织将其规定为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理性安全性评价的必做试验并用于染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。
本试验采用大蒜作为试验材料，具有许多优点：①用鳞茎进行无性增殖，避免了有性生殖过程中的遗传性变异，具有遗传背景稳定的优势；②分布广、材料易得，不受地区和季节的限制；③培养方便，操作简单，蒜瓣去皮后将基部浸入净水中即可萌生新根，无需其他条件，且蒜瓣体积较小，萌生新根的数目较多；④价格低廉，对诱变剂敏感，是一种理想的试验材料。
本次实验中采用叠氮化钠和水处理的大蒜作为对照组，以四种常用的洗护用品作为实验组。
目前在大学生群体，尤其是女生群体中，各种洗护化妆品已经成为必备品，那么经常使用的这些洗护化妆物质是否会对人体造成危害呢？本次实验目的即在于鉴定洗护化妆品的毒理安全性。
三、实验用品实验器具：显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、培养皿实验试剂：改良苯酚品红染液、1M盐酸、叠氮化钠、水、花露水、海昌护理液、黄瓜水、卸甲水实验材料：大蒜根尖四、实验步骤1、将大蒜去皮，在培养板上每个孔中放入2~3瓣，25℃培养24h。
2、在培养板的六个孔中分别加入叠氮化钠、水、六神驱蚊花露水、海昌、黄瓜水、卸甲水，没过大蒜根部为宜，25℃继续培养24h。
(完整版)观察根尖分生组织细胞有丝分裂
显微镜中观察到的图像如图所示。造成这种情况的
原因可能是
( C)
①取材位置不合适 ②取材时间不合适
③制片时压片力量不合适 ④解离时间不合适
⑤视野选择不合适
A.②③
B.②⑤
C.①②⑤
D.①③④
解析 此实验需找到呈正方形、排列紧密的分生区细
胞，该视野中细胞多呈长方形，可能原因是取材位
置不合适、取材时间不恰当或没有找到分生区。
2、碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能将染色 体（或染色质）染成深色。
3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处 理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此容易分离。
三、实验步骤
1.生根培养：将切除老根的洋葱或
大蒜的磷基置于盛水的小烧杯上， 于22－25℃下进行生根培养。
磷ห้องสมุดไป่ตู้基
2.取材：
待根长到
5cm左右
• C.持续观察，视野中的K细胞 将分裂成两个子细胞
• D.视野中，N细胞的染色体数 目是M细胞的一半
7、实验材料的选择 （1）洋葱的根尖可用于观察植物细胞有丝分的裂实验， 这是因为其根尖分生区细胞进行有丝分裂；而 洋葱鳞片叶的外表皮 细胞可用于观察植物细胞的质壁 分离和复原的实验，这是因为其具有紫色大液泡 ，同时 还可以利用洋葱鳞片叶内表皮观察 DNA和RNA 在细胞中
③一定时间后加盖玻片，___压__片_______。
（1）请改正“资料一”中的3处错误。__________
将“5cm”改成“2～3mm”；实验操作步骤应改为先漂洗后染色；将 “盖上载玻片”改成“盖上盖玻片后，再加一片载玻片”
4．在下列实验中，实验材料必须始终保持生活
状态的是
BD
A.在光学显微镜下观察植物细胞有丝分裂 B.在光学显微镜下观察植物细胞质的流动 C.在光学显微镜下观察马蛔虫受精卵的有丝分裂 固定装片
不同洗发水对大蒜根部细胞染色体的毒害作用
不同洗发水对大蒜根部细胞染色体的毒害作用1．概述微核（micronuclei）简称（MCN）是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞竟辐射或化学药物的作用产生的。
微核产生的最主要的原因是断裂作用与非整倍体化作用。
一般认为，前者产生的微核由无着丝粒断片构成，后者产生的微核由整条染色体构成。
但几乎所有诱发微核的因素都兼有两种作用。
如经典断裂剂X射线同时具有微弱的非整倍体化作用，一些明确非整倍体剂也有断裂作用。
研究表明，微核的形成有两条途径:一是细胞G1期产生的染色体断片因没有着丝粒在细胞有丝分裂后期不能被纺锤体牵引到细胞两极，故在细胞进入间期时，它们被排斥在细胞的主核之外，形成微核:二是一些染色体因种种原因不能按时达到细胞的中央赤道板，或到达了细胞中央赤道板，但不能很好分离，或纺锤体的功能受到损伤，致使染色体不能被纺锤体牵引到细胞两极。
也有人认为，细胞凋亡能引起细胞内C a2十浓度升高进而激活DNA内切酶，使其活性增加，产生较多的DNA断片。
细胞组分不正常(如缺乏叶酸)也可在细胞中形成微核。
微核试验最大的优点是经济、简单、快速。
微核实验已经发展到了第四阶段(19 97年后)，而第三阶段（1992一199 6年）已经到了微核试验的成熟期。
经过10余年的应用和发展，微核试验已在我国预防医学、卫生检验、毒理学、环境科学等多个领域得到广泛普及，研究进入一个高潮。
2．实验目的1掌握植物根尖微核技术2检测、比较洗发水对遗传物质的毒害并分析植物根尖检测洗发水的安全性状况3．实验原理微核是染色体畸变的一种表现形式，为有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片段，在间期细胞的细胞质中形成的一个或多个圆形或杏仁状结构，通过一定制备方法，可以在间期细胞中进行观察计数。
4．实验材料、器具、试剂材料:大蒜（根部）器具：显微镜、手动计数器、镊子、载玻片、烧杯、瓷盘试剂：6mol/L盐酸，甲醇，冰醋酸，改良苯酚品红，飘柔，海飞丝，五．实验步骤1、浸种催芽：25oC水浸泡24小时，25oC催芽2-3天。
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微核试验
一、研究的目的与意义：
1：知道微核产生的原理。
2：学会识别微核以及计算微核率。
3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。
4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。
真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。
利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。
检测已存在或潜在的危害。
二、研究内容与技术路线
2.1 研究内容：
通过观察不同浓度的1,2,4-三氯苯和铬以及它们的交互作用对大蒜根尖细胞微核率以及不同分裂期细胞的比例的影响，来判断其遗传毒性。
2.2 技术路线：
冷冻保存
24h
孚尔根染液配制
三、实验方法
3.1实验材料
大蒜、甲醇、冰乙酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、比重1.18的浓盐酸、蒸馏水、酒精、重铬酸钾、氯苯、丙酮、显微镜、载玻片、盖玻片、定性滤纸、烧杯、100毫升容量瓶、200毫升容量瓶、镊子、刀片、纱布、青霉素小瓶、移液管、试管
3.2试剂准备：
1、1mol/LHCl：用10mL 移液管量取8.69mL 浓盐酸加入100mL 容量瓶，用在蒸馏水定容至100mL 。
2、50mg/L、100mg/L、：称取170mg 重铬酸钾，加水溶解，在200mL 容量瓶中定容，配制300mg/L的Gr 6+母液，然后稀释到50mg/L、100mg/L。
3、卡诺式固定液：将甲醇：冰乙酸按3:1比例混合配制
5、Schiff 氏试剂：称取0.5g 碱性品红加入到100mL 煮沸的蒸馏水中，时时振荡，继续煮5min ，使碱性品红充分溶解。
冷却致50℃，用滤纸过滤，滤液中加入10ml1mol/LHCl，冷却致25℃，加入1.5g 偏重亚硫酸钠，充分振荡，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24h ，用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑纸。
贮存于冷暗处（4℃冰箱中）备用。
3.3实验过程：
3.3.1、材料准备：
将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温培养箱中2~3天，催化大蒜生根。
选择根长0.5~1cm且不定根生长情况差不多的大蒜分为10组
3.3.2、Schiff 氏试剂检验：
在大蒜生根之后，先选取一些根尖放进卡诺式固定液中固定3个小时，用Schiff 氏试剂染色，镜检，观察染色体是否能染上色以及染色效果。
若染色效果不行，则重新配制Schiff 氏试剂，直至染色效果良好，然后将其贮存于4℃
冰箱中准备使用。
3.3.3、大蒜根尖处理：
将分好组的大蒜分别用清水、50mg/L Gr 6+、100mg/L Gr 6+、浓度分别为
50mg/L Gr6+和秋水仙素的混合液、100mg/L Gr6+和秋水仙素的混合液培养24小时。
清水组为对照组。
3.3.4、固定：
在早上有丝分裂旺盛的时候，将处理过的大蒜根尖剪下，分别放入青霉素小瓶中，加入卡诺氏固定液固定3个小时，然后放入4℃冰箱内保存，以备使用。
3.3.5、解离：
取出部分经过固定的根尖先用酒精和清水洗涤，加入1mol/LHCl覆盖根尖，放入60摄氏度水浴锅内水浴加热7~10分钟，取出用清水洗涤3次，每次5分钟。
3.3.6、染色制片：
取出解离后的根尖，放在载玻片上，用刀片切下根尖乳白色的分生区部分，滴加1滴Schiff 氏试剂染色10分钟，然后盖上盖玻片，吸干染液，并用镊子钝的一端在盖玻片上轻轻敲击，将细胞打散。
3.3.7、镜检:
将制备好的根尖放在显微镜下观察，统计微核数目、以及有丝分裂间期、前期、中期、后期、末期细胞数目并计算有丝分裂指数以及微核率。
每组浓度细胞计数400个。
微核识别标准：
（1）在主核大小的1/3以下，并与主核分离的小核。
（2）小核着色与主核相当或稍浅。
（3）小核形态为圆形、椭圆形或不规则型。
4实验结果与分析
有丝分裂前期有丝分裂中期
有丝分裂后期有丝分裂末期
微核双倍体
5实验结果：
1、初步观察结果
经过初步观察统计，经过Cr 6+溶液处理过的根尖细胞有一定的机率发生变异，与清水培养的相比，经过六价铬处理过的根尖细胞，出现前期、中期、末期这三个时期机率较小，而有丝分裂中期的出现机率明显增大。
并且经过六价铬处理的根尖细胞发生变异，出现微核，可能六价铬对大蒜根尖细胞有抑制分裂的作用，并且对大蒜根尖细胞的分裂有致畸作用，因为实验数据过少，不能说明问题。
6小结：
实验的每一个小步骤都不容忽视，这些都是关乎实验成败的关键点。
因为我们对这个实验不熟悉，在染色制片这个步骤中，不能很好的掌握力度及实验技巧，导致重做了几次，浪费了很多时间。