培养基的制备ppt课件
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细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件
20
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
19
第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
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第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
培养基的配制
• 加热灭菌
• 干热灭菌 • 湿热灭菌
• 过滤除菌 • 辐射灭菌
• 放射线辐照灭菌 • 紫外线灭菌
• 化学药品灭菌
Page 9
一般培养基用0.1Mpa，121.5℃,15～ 30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温 度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量 等具体情况而有所改变。
Page 10
过滤除菌
定无菌生长，方可使用。
Page 14
几种常用培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：
牛肉膏 3.0g 蛋白胨 10.0g
NaCl 水 pH
5.0g 1000ml 7.4～7.6。
Page 15
高氏Ⅰ号培养基配方如下：
可溶性淀粉
20g
NaCl
0.5g
KNO3 K2HPO4·3H2O MgSO4·7H2O FeSO4·7H2O
• 碳源：提供微生物繁殖所需碳元素的营养物质。用途：糖、 蛋白质、核酸合成。
• 氮源：提供微生物繁殖所需氮元素的营养物质。用途：蛋 白质、核酸合成。
• 能源：提供微生物生命活动最初能量来源的营养物或辐射 能。
• 生长素：微生物生长必需，但又不能自行合成的有机物。 • 无机盐：提供微生物繁殖所需各种重要元素。 • 水分：水是保证生命活动重要的介质。
• 称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。 • 溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 • 调pH值：用1MNaOH或1MHCl调pH，用pH试纸对照。 • 加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。 • 分装：注意不要污染棉塞。 • 包扎成捆，挂上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。 • 灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确
琼脂
• 干热灭菌 • 湿热灭菌
• 过滤除菌 • 辐射灭菌
• 放射线辐照灭菌 • 紫外线灭菌
• 化学药品灭菌
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一般培养基用0.1Mpa，121.5℃,15～ 30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温 度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量 等具体情况而有所改变。
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过滤除菌
定无菌生长，方可使用。
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几种常用培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：
牛肉膏 3.0g 蛋白胨 10.0g
NaCl 水 pH
5.0g 1000ml 7.4～7.6。
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高氏Ⅰ号培养基配方如下：
可溶性淀粉
20g
NaCl
0.5g
KNO3 K2HPO4·3H2O MgSO4·7H2O FeSO4·7H2O
• 碳源：提供微生物繁殖所需碳元素的营养物质。用途：糖、 蛋白质、核酸合成。
• 氮源：提供微生物繁殖所需氮元素的营养物质。用途：蛋 白质、核酸合成。
• 能源：提供微生物生命活动最初能量来源的营养物或辐射 能。
• 生长素：微生物生长必需，但又不能自行合成的有机物。 • 无机盐：提供微生物繁殖所需各种重要元素。 • 水分：水是保证生命活动重要的介质。
• 称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。 • 溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 • 调pH值：用1MNaOH或1MHCl调pH，用pH试纸对照。 • 加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。 • 分装：注意不要污染棉塞。 • 包扎成捆，挂上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。 • 灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确
琼脂
培养基的制备ppt课件
第2组:100ml （先分装7支）
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
3
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备一目的掌握培养基的制备方法二原理培养基是人工合成的一种混合营养料用以分离细菌
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
16
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
3
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备一目的掌握培养基的制备方法二原理培养基是人工合成的一种混合营养料用以分离细菌
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
16
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
玻璃器皿的清洗包扎,培养基的配制及灭菌(共13张PPT)
分离纯化方法很多，基本原理相似，即将待分离样品进行 一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存 在，然后使其长成一个个纯种单菌落。上述工作又离不开接种， 即将一种微生物移接到另一灭菌培养基上的过程。
第3页，共13页。
Hale Waihona Puke 分离纯化常用的方法有：（1）简易单细胞挑取法
（2）平板分离法
选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、 温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制
马丁、高氏培养基板于28 ℃倒置培养5d，肉汤 培养基于37 ℃倒置培养28h后观察
第11页，共13页。
第12页，共13页。
作业：
1.在三种不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物？
简述它们的菌落特征。
2 .如何确定平板上某个菌落是否为纯培养？请写出试验 的主要步骤。 3如果一项科学研究内容许从自然界中筛选到能产生 高温蛋白酶的菌株，你将如何完成？请写出简明的实 验方案。
培养后可观察有无孤立菌落生长，每一孤立菌落即为一纯种细菌。 一般病原菌的菌落数少于杂菌，故在分离培养时，应力求出现较多的 孤立菌落，以提高病原菌检出率。
第10页，共13页。
5.稀释混合倒平板
肉汤培养基融化备用；1ml无菌吸管加菌悬液于 空皿中；无菌操作将冷却至50℃左右的培养基倒入 上述平板内，旋转混合均匀。 6.恒温培养箱培养
第6页，共13页。
四.实验内容及方法
1.采集土样，制备土壤悬液：1g土稀释 到10-7；
倒平板→划线→培养→挑单菌落→接种移植→保存
第7页，共13页。
2.倒平板 : 右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻
轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在 火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15ml，加盖后轻轻摇动培养皿， 使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平 板。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。
第3页，共13页。
Hale Waihona Puke 分离纯化常用的方法有：（1）简易单细胞挑取法
（2）平板分离法
选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、 温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制
马丁、高氏培养基板于28 ℃倒置培养5d，肉汤 培养基于37 ℃倒置培养28h后观察
第11页，共13页。
第12页，共13页。
作业：
1.在三种不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物？
简述它们的菌落特征。
2 .如何确定平板上某个菌落是否为纯培养？请写出试验 的主要步骤。 3如果一项科学研究内容许从自然界中筛选到能产生 高温蛋白酶的菌株，你将如何完成？请写出简明的实 验方案。
培养后可观察有无孤立菌落生长，每一孤立菌落即为一纯种细菌。 一般病原菌的菌落数少于杂菌，故在分离培养时，应力求出现较多的 孤立菌落，以提高病原菌检出率。
第10页，共13页。
5.稀释混合倒平板
肉汤培养基融化备用；1ml无菌吸管加菌悬液于 空皿中；无菌操作将冷却至50℃左右的培养基倒入 上述平板内，旋转混合均匀。 6.恒温培养箱培养
第6页，共13页。
四.实验内容及方法
1.采集土样，制备土壤悬液：1g土稀释 到10-7；
倒平板→划线→培养→挑单菌落→接种移植→保存
第7页，共13页。
2.倒平板 : 右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻
轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在 火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15ml，加盖后轻轻摇动培养皿， 使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平 板。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。
实验二培养基的制备消毒与灭菌
实验二 培养基的制备 消毒与灭菌
编辑课件
培养基配制实验原理
❖培养基是人工配制的适合微生物生长繁 殖或积累代谢产物的营养基质。
❖人工制备培养基的目的，在于给微生物 创造一个良好的营养条件。
编辑课件
培养基配制要素
❖营养：碳源、氮源、能源、生长因子、 水分和无机盐；
❖适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力； ❖一定的氧化还原电位；
• 当含盐类的液体和含盐的琼脂中大量的盐类泼 洒在工作腔体，要立即换水，冲洗腔体，仔细 擦干锅盖垫圈上的水滴。否则它们会带来腐蚀 和变质。
• 要检查压力表上的指数为“0 Mpa”后才能打 开锅盖。
• 外来物质（金属、液体）不能堵塞通风孔，否 则会引起装置故障、起火、短路。 编辑课件
编辑课件
过滤除菌
❖ 因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要 高（160～170℃），时间要长（1～2h）， 但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器 皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。
编辑课件
高压蒸气灭菌
❖ 高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的灭菌锅 内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。 待水蒸气急剧将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气 阀，继续加热。由于水蒸气无法排出，增加了灭菌锅内 的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导 致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。
• 过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体
中细菌的方法。根据不同的需要选用不同 的滤器和滤板材料。
• 此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中
各种物质的化学成分，但由于滤量有限， 所以一般只适用于实验室中小量溶液的过 滤除菌。
编辑课件
编辑课件
紫外线灭菌
紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200~300 nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力 最强。
编辑课件
培养基配制实验原理
❖培养基是人工配制的适合微生物生长繁 殖或积累代谢产物的营养基质。
❖人工制备培养基的目的，在于给微生物 创造一个良好的营养条件。
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培养基配制要素
❖营养：碳源、氮源、能源、生长因子、 水分和无机盐；
❖适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力； ❖一定的氧化还原电位；
• 当含盐类的液体和含盐的琼脂中大量的盐类泼 洒在工作腔体，要立即换水，冲洗腔体，仔细 擦干锅盖垫圈上的水滴。否则它们会带来腐蚀 和变质。
• 要检查压力表上的指数为“0 Mpa”后才能打 开锅盖。
• 外来物质（金属、液体）不能堵塞通风孔，否 则会引起装置故障、起火、短路。 编辑课件
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过滤除菌
❖ 因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要 高（160～170℃），时间要长（1～2h）， 但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器 皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。
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高压蒸气灭菌
❖ 高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的灭菌锅 内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。 待水蒸气急剧将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气 阀，继续加热。由于水蒸气无法排出，增加了灭菌锅内 的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导 致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。
• 过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体
中细菌的方法。根据不同的需要选用不同 的滤器和滤板材料。
• 此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中
各种物质的化学成分，但由于滤量有限， 所以一般只适用于实验室中小量溶液的过 滤除菌。
编辑课件
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紫外线灭菌
紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200~300 nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力 最强。
培养基的制备及消毒与灭菌ppt实用资料
《基础生物学实验》精品课程
• 在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空 气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀 压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含 有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度 低于饱和蒸气的温度。
《基础生物学实验》精品课程
不能灭菌的物质：
• 硝化丙烷 、硝化甘油、硝化纤维，含氮硅酯。 • 三硝基苯、三硝基甲苯、苦味酸、和其它爆炸性
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牛肉膏蛋白胨培养基的制备
❖ 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普 通的细菌基础培养基；
❖ 牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维 生素；
❖ 蛋白胨主要提供氮源和维生素； ❖ NaCl提供无机盐； ❖ 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝
固剂； ❖ 用稀酸稀碱将其pH调至中性或微碱性。
• 要检查压力表上的指数为“0Mpa”后才能打开 锅盖。
• 外来物质（金属、液体）不能堵塞通风孔，否则 会引起装置故障、起火、短路。
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一般培养基用0.1Mpa，121.5℃,15～ 30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度 及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等 具体情况而有所改变。例如含糖培养基用 0.06Mpa,112.6℃灭菌，然后以无菌操作手 续加入灭菌的糖溶液。又如盛于试管内的 培养基以0.1Mpa,121.5℃灭菌20min即可， 而盛于大瓶内的培养基最好以0.1Mpa， 122℃灭菌30min。
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半合成培养基
❖ 在以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适 当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基 叫半合成培养基。大多数微生物都能在此种培养 基上生长，应用广泛。
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液体培养基的制备及杀菌设备PPT课件
粉 浆
3 5 5 5 5 56 6
蒸汽
蒸汽
4
1 2
图2-15 柱式连续蒸煮流程图 1-粉浆罐 2-泵 3-加热器 4-缓冲器 5-柱子 6-后熟器
粉 浆
图2-16 加热器
第10页/共36页
液体培养基的制备及杀菌设备
➢ 真空冷却器
真空冷却：物料在一定真空度下蒸发部分水，
需要汽化潜热，取自料液本身，因而料液很快被 冷却到真空相应的温度。
真空冷却器中真空度产生：一般要借助于水力 喷射泵或蒸汽喷射泵，连续地抽去真空冷却器中 的二次蒸汽。
第11页/共36页
液体培养基的制备及杀菌设备
➢ 真空冷却器
冷水
3
真空泵
4
2 冷凝器
醪液
5
1 真空冷却器
真空冷却装置图
为了更完全地从料液中分离蒸汽，真空冷却器中蒸 汽 上 升 速 度 不 应 超 过 1m ／ s ， 在 下 降 管 中 流 速 为 0.8～0.5m／s。
V ——二次蒸汽上升的速度，m/s，一般取0.8~1.0m/s 的范围。一般真空冷却器的直径与高之比为1：1.5~2.0
H (1.5 2.0)D ，m
第14页/共36页
液体培养基的制备及杀菌设备
➢ 糖化设备
• 连续糖化罐
把已将温至60～62℃的糊化醪，与糖化醪液或曲乳液混合，将60℃下 维持30～45min，保持流动状态，使淀粉在酶的作用下变成可发酵性糖。
第13页/共36页
液体培养基的制备及杀菌设备
（2）几何尺寸的计算： 真空冷却器的几何尺寸，是根据上升的二次蒸汽以小于1.0m/s的速度来确定 的。
D
Wv
3600 V
，m
微生物实验05培养基的制备和消毒灭菌资料.
实验五、培养基的制备和消毒灭菌
一、培养基的制备： （一）目的要求：
➢ 学习掌握配置培养基的一般方法、步骤和原理。
（二）原理：
培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢 产物所需的各种营养物质，用人工方法配制而 成的一种基质。它包括碳源、氮源、生长因子、 无机盐和水等营养要素。
由于不同微生物细胞组成不同，因而所需 营养基质不同，为了分离、培养和鉴定不同的 微生物，必须根据其需要，配制合适的培养基。
2.器材：
试管、烧杯、三角瓶、量筒、玻璃棒、铁架台、漏 斗、天平、牛角匙、高压锅、微波炉、 pH试纸 （5.5-9.0）、棉花、纱布、线绳、聚丙烯袋等。
（四）步骤：
斜面培养基制作：
➢ 计算 称量 过滤（可省略）
制作） 包扎
无菌检查
加热溶化 分装 灭菌
调PH 加塞（附棉塞 摆斜面
1.称量 按照培养基配方，准确称量各成份放于
培养基的制备原则：
1.根据不同微生物的营养需要配置不同的培养基。
细菌 牛肉膏蛋白胨 放线菌 高氏1号 真菌 查氏、马丁氏 各类M 土豆葡萄糖
2.调配好培养基营养成分的浓度和比例。 3.控制微生物的培养条件（渗透压、pH、氧化还原
电位等）
（三）器材：
1.药品和试剂：
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀粉、琼脂、 NaCl、K2HPO4、 KH2PO4、 KNO3、MgSO4、 FeSO4、孟加拉红、1mol/L NaOH、
二、消毒灭菌：
➢ 物理法：加热、过滤、照射
加热
灼烧 干热 湿热
高压 间歇 煮沸
➢ 化学法：化学药品
（一）目的要求：
1.了解干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌的 原理及应用范围。
2.掌握干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌的 技术。
一、培养基的制备： （一）目的要求：
➢ 学习掌握配置培养基的一般方法、步骤和原理。
（二）原理：
培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢 产物所需的各种营养物质，用人工方法配制而 成的一种基质。它包括碳源、氮源、生长因子、 无机盐和水等营养要素。
由于不同微生物细胞组成不同，因而所需 营养基质不同，为了分离、培养和鉴定不同的 微生物，必须根据其需要，配制合适的培养基。
2.器材：
试管、烧杯、三角瓶、量筒、玻璃棒、铁架台、漏 斗、天平、牛角匙、高压锅、微波炉、 pH试纸 （5.5-9.0）、棉花、纱布、线绳、聚丙烯袋等。
（四）步骤：
斜面培养基制作：
➢ 计算 称量 过滤（可省略）
制作） 包扎
无菌检查
加热溶化 分装 灭菌
调PH 加塞（附棉塞 摆斜面
1.称量 按照培养基配方，准确称量各成份放于
培养基的制备原则：
1.根据不同微生物的营养需要配置不同的培养基。
细菌 牛肉膏蛋白胨 放线菌 高氏1号 真菌 查氏、马丁氏 各类M 土豆葡萄糖
2.调配好培养基营养成分的浓度和比例。 3.控制微生物的培养条件（渗透压、pH、氧化还原
电位等）
（三）器材：
1.药品和试剂：
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀粉、琼脂、 NaCl、K2HPO4、 KH2PO4、 KNO3、MgSO4、 FeSO4、孟加拉红、1mol/L NaOH、
二、消毒灭菌：
➢ 物理法：加热、过滤、照射
加热
灼烧 干热 湿热
高压 间歇 煮沸
➢ 化学法：化学药品
（一）目的要求：
1.了解干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌的 原理及应用范围。
2.掌握干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌的 技术。
培养基及其设计、制备、优化36页PPT
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
1、不要轻言放弃，否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境ห้องสมุดไป่ตู้
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
培养基及其设计、制备、优化 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的轮 回里有你。
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
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3
三、材料
牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
第2组:100ml （先分装7支）
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各
100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样：1加0热0溶m化l蒸馏水
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6 (3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽
18
灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
7
四、方法
2.普通琼脂平板培养基配制：
于100ml肉膏汤培养基中加入2.5g琼脂， 高压蒸汽灭菌，待冷至50～60℃，倒制平板。
3.普通斜面培养基 于100ml肉膏汤培养基中加入1g琼脂， 分装于试管内（每管约3-4ml）置高压 蒸汽灭菌器内灭菌(121.3-20min) .
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制见瓶签说明
8
五、结果
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
16
六、实验报告要求
实验报告中描述本组所配制的培养基 。 七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
17
实验课小结
1.各实验小组分析报告本次实验收获体会 2.指导教师进行实验小结
三、材料
牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
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四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
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各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
第2组:100ml （先分装7支）
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各
100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
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四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样：1加0热0溶m化l蒸馏水
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6 (3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽
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灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
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四、方法
2.普通琼脂平板培养基配制：
于100ml肉膏汤培养基中加入2.5g琼脂， 高压蒸汽灭菌，待冷至50～60℃，倒制平板。
3.普通斜面培养基 于100ml肉膏汤培养基中加入1g琼脂， 分装于试管内（每管约3-4ml）置高压 蒸汽灭菌器内灭菌(121.3-20min) .
食品微生物学实验
实验四
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实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
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一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制见瓶签说明
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五、结果
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
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六、实验报告要求
实验报告中描述本组所配制的培养基 。 七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
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实验课小结
1.各实验小组分析报告本次实验收获体会 2.指导教师进行实验小结