钩藤中总生物碱的提取分离研究

以 上 薄 层 层 析 的 定 性 分 析 时， 喷改良碘化铋钾
显色不持久， 可 再 喷 -& , 的 硫 酸 增 强 显 色， 因为在酸 性条件下生物碱才能与碘化铋钾反应完全。 $’! 生 物 碱 的 提 取 溶 剂 有 多 种， 但非极性溶剂如氯 仿、 乙醚作为 提 取 溶 剂 其 毒 性 大 且 不 安 全， 因此采用 就能提取 & ’ % , 盐酸作 为 钩 藤 总 生 物 碱 的 提 取 溶 剂， 由表 大部分的生物碱， 而且乙醇也较容易回收、 经济等。 参考文献：
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讨论 钩藤总生物碱 不 仅 在 强 酸 性 阳 离 子 树 脂 上 吸 附
［(］ 力大， 而且在 弱 酸 性 阳 离 子 树 脂 上 也 是 如 此 ， 本专
题中的洗脱方式洗脱都 比 较 慢， 因此需要改变一种洗 脱方法。 结果 $’( 在 从 树 脂 中 洗 脱 杂 质 时， 最初只用蒸馏水洗脱 并未能把杂质完全洗脱 下 来， 在水洗完后再用乙醇浸 泡洗脱， 就能 把 大 部 分 杂 质 除 去， 或者把树脂从柱上 拿下， 放在烧 杯 中 乙 醇 清 洗， 更易除去杂质而不损失 生物碱。 $’$
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钩藤总生物碱 不 同 分 离 条 件 选 择 的 结 果
吸 $ 可 见 *$+ 型 强 酸 性 阳 离 子 树 脂 吸 附 生 物 碱 量 少， 附不稳定， 洗脱出来时 杂 质 多， 不 是 理 想 的 分 离 材 料。 &&% 0 * 型强酸 性 阳 离 子 树 脂 也 能 吸 附 分 离 大 部 分 的 原料药中的生物碱， 杂质 也能洗脱掉。所 以， 用 &’%, 盐酸 /& , 乙醇 作 为 提 取 溶 剂， 以 &&% 0 * 型 强 酸 性 阳 离子树脂提 取、 分 离 总 生 物 碱 是 一 种 经 济 简 便、 效率
表! 组 别 样品 % 样品 ( 样品 $ 样品 ! 不同展开剂对 "# 值的影响 "# 值 & ’ (( & ’ (& & ’ !) & ’ *)
较高的方法。
表% 不同型号阳离子树脂对生物碱的吸附分离 组 别 *$+ 型强酸性阳离子树脂 &&% 0 * 型强酸性阳离子树脂 总生物碱 % ’ )&!(. ( ’ !$**.
! " # $ 盐酸乙醇作为提取溶剂提取总生物碱量最多，!!# % & 型 强 酸 性 阳 离 子 树 脂 分 离 效 果 最 好。 取、 强酸性阳离子树脂提取、 分离总生物碱是一种经济简便、 效率较高的方法。 关键词： 钩藤； 总生物碱； 强酸性阳离子树脂； 薄层层析 中图分类号： ’()* 文献标识码： + 文章编号： （.!!(） #!!, - ,&.& !# - #/) - !.
中国热带医学 .!!( 年第 ( 卷第 # 期
J?132 NM’C1J20 X:^1J13: _6I " ( 36 " # ‘@7GDB .!!(
#/) ［检验技术］
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钩藤中总生物碱的提取分离研究
梁勇， 温碧珍
摘要： 目的 探讨钩藤中的总生物碱的提取分离方法。 方法 醇类溶剂提取法、 离子交换树脂分离法。 结论 结果
［ %］王瑞俭， 孙广仁， 孙宝 民， 等 1 钩藤碱提取工艺研究 1 吉林林学院学 报： %++/ ， (： !+ 2 )% ’ ［(］周文华， 杨辉荣， 岳庆磊 1 生物碱提 取 和 分 离 方 法 的 研 究 新 进 展 1 当 代化工， (&&$ ， (： )! 2 )* ’ 收稿日期： (&&) 3 %( 3 &(
2IF6=6I @7K OHD678 @F;K F@H;67 >RF=@78> D>O;7 W>D> GO>K ;7 H=> >RHD@FH;67 @7K O>S@D@H;67"
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（上接第 %(/ 页）
的。而近年来在大肠埃 希 菌、 肺炎克雷伯菌中又发现 质粒介导的 4567 酶。 往 往 处 于 持 续 高 水 平 状 态， 而 且常规 的 青 霉 素 类、 三代头孢菌素和头霉素类为耐 药。由于对检测质 粒 介 导 的 4567 ! 3 内 酰 胺 酶 没 有
表$ 组别 方法 % 方法 ( 同提取溶剂温度对提取效果的影响 溶剂 +) , 乙醇 /& , 乙醇 总生物碱量 & ’ -&!*. & ’ ))$%.
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钩藤总生物碱 不 同 提 取 条 件 选 择 的 结 果
显示两种实验 方 法 并 无 明 显 性 差 异， 见 表 (。 第 % 种 方法虽然在总生物碱 提 取 率 方 面 高 于 第 ( 种， 但其因 是加热提取就可能提 取 出 更 多 的 杂 质 或 破 坏 生 物 碱， 而第 ( 种方 法 提 取 温 度 低， 不 破 坏 生 物 碱 结 构， 杂质 少。
［#］
物碱的提取 如 选 用 氯 仿、 乙 醚 等 非 极 性 溶 剂， 存在易 燃、 毒性等问题 。 如 选 用 酸 水 作 为 提 取 溶 剂， 虽然 经济简便， 但回收困 难、 易 腐 蚀。 因 此， 综合考虑以上 因素， 并结合 生 物 碱 的 物 理 化 学 性 质， 本实验主要选 择 ,) $ 乙醇 ! " # $ 盐酸热回流 提 取 和 *! $ 乙 醇 ! " # $ 盐酸温浴的 提 取 条 件 考 察 对 钩 藤 总 生 物 碱 提 取 的 影 响。 #".". 方法 # 钩 藤 药 材 粉 末 #!!8 " （ ,) $ 乙 醇、 热回流提取 " 过 滤 " 提 取 液 （减 压 (! \ 回 ! " # $ 盐酸） 收乙 醇 ） （浓 缩） " !"#$ 酸 水 溶 解 "过滤"浓滤液 （ S?. ] /） #!!EI " 至分液漏斗中 " 浓 氨水 碱 化 S?#! ] ## " 氯仿萃取 )!!EI " 回收氯仿 " 总生物碱 #"."/ 方法 . 钩藤药材粉末 #!!8" *! $ 乙醇 ! " # $ 盐酸 （ .) \ 浸 泡 #.= ） （ &!!EI ） " *! $ 乙 醇 ! " # $ 盐 酸 （ (! \ 减 压 回 收 乙 醇 ） (! \ 温浴 /= " 抽 滤 " 合 并 滤 液
! #"#
材料与方法 材料 试剂 乙 醇、 氯 仿、 氢 氧 化 钠、 盐 酸、 丙 酮； 吸
（! " # $ 盐 酸） 浓 缩 " 浓 缩 液 #!!EI （ S?. ] / ） " 酸水 " 至分液 漏 斗 中 （ 浓 氨 水 碱 化 S?#! ] ## ） 氯 仿 萃 取 " )!!EI " 回收氯仿 " 总生物碱 #"/ 钩藤总生物碱 分 离 条 件 的 选 择 通过对各种方 法的比较， 本实验主要 以 阳 离 子 树 脂 作 为 主 要 分 离 材 料， 研究不同 型 号 阳 离 子 树 脂 对 生 物 碱 的 吸 附 量、 吸 附力强弱以及洗脱条 件 的 摸 索， 选择最佳分离总生物 碱的工艺。样品液 制 备： 根据提取方法 . 提取钩藤粉 末 .!!8 得 *!!EI 酸溶液 对钩藤总生 #"/"# &/, 型强酸 性阳离 子树脂 柱直 径： 树脂 )FE； 用量： 约 )!!8。过 程： 树脂预处理"上样"蒸馏水洗 至中性 " ,) $ 乙醇 ! " .) $ 氨 水 洗 脱 约 ) !!!EI " 回 收 乙醇 " 生物碱 ! " )[!&8。 #"/". !!# % & 型 强 酸 性 阳 离 子 树 脂 柱 直 径： )FE； 树脂用量： 约 )!!8。 过 程： 树脂预处理"上样"蒸馏 水洗至中性 " ,) $ 乙 醇 ! " .) $ 氨 水 洗 脱 ) !!!EI " 回 收乙醇 " 生物碱 ! " )).&8。 #"[ 展开 剂 样品 # ： 无水 乙醇溶 解； 环己烷 - 乙醚
wk.baidu.com
乙醇提
!"#$%&$ ’( ")& &*"+,-"%’( ,($ .&/,+,"%’( ’0 "’",1 ,12,1’%$. 0+’3 +,3#1#. 4(-,+%,& -#3 4(-%. " 01234 5678，9:3 +; <=>7 "（ ?@;7@7 A@7B@78 C=@DE@F>GH;F@I J6 " 0HK " ，?@;L6G )&!/#. ，?@;7@7，C" M" J=;7@） 56."+,-" ： 768&-"%4& F;O V 9&")’$. N6 >OH@PI;O= @ E>H=6K Q6D H=> >RHD@FH;67，O>S@D@H;67 6Q H=> H6H@I @IL@I6K;O QD6E D@EGIGO T7F@D;@> FGE T7U :&.#1". X@R;EGE @IU
［$］ 相应标准 ， 如果是只 靠 表 型 的 方 法 是 不 能 够 确 认 是
参考文献：
［ %］89:5;:< =>，>?<@AB; 77 1 CADAEDF:< :# AGDA<@A@ 3 ;6AEDBH5 !3 I?ED?5?;A; F< 5A5JAB; :# D9A #?5FIK L<DAB:J?EDABF?EA?A：E:56?BF;:< :# D9A @:HJIA 3 ［ N ］’ 4<DF5FEB:J 4.A<D; 79A5:D9AB， @F;M ?<@ D9BAA 3 @F5A<;F:<?I DA;D; %++( ， $- ： %/** 2 %//( ’ ［(］罗兰， 廖康 ’ 肠杆菌科菌持续高产 4567 酶 的 检 出 及 耐 药 分 析 ［ N］ ’ 临床检验杂志， （ %） ： (&&! ， (( !% ’ ［ $］管希周， 罗燕萍 ’ 高产 4567 酶肺炎克雷伯菌的临床报道 ［ N］ ’ 中华 （ !） ： 医院感染学杂志， (&&! ， %! !-% 2 !-! ’ ［ !］管希周， 刘又宁 ’ 质粒介导的 4567 酶研究进展 ［ N］ ’ 中华医院感染 学杂志， （ -） ： (&&! ， %! *%$ 2 *%) ’ ［)］章清， 魏 丽， 魏 光 美， 等 ’ 大 肠 埃 希 菌、 肺 炎 克 雷 伯 菌 质 粒 !3 内 酰 胺酶检测 ［ N］ ’ 中华医院感染学杂志， (&&! ， %! ： $(/ 2 $$& ’ ［ -］罗兰， 廖康， 栩建美， 等 ’ 肠杆菌科菌持续高产 4567 酶的 检 出 及 耐 药分析 ［ N］ ’ 临床检验杂志， (&&! ， (( ： !% 2 !( ’ 收稿日期： (&&) 3 &/ 3 $%
海南通用三洋药业有限公司， 海南 海口 ! 作者单位：
样 品 .： 无 水 乙 醇 溶 解； 氯仿 - 乙酸乙脂： *： #： #： ! " #； 样 品 /： 氯 仿 溶 解； 氯仿 - 醋酸乙脂 - 甲醇： #! ： [： #； 丙酮： 样 品 [： 氯 仿 溶 解； 氯仿 - 丙酮 - 二乙 )： [ 展开； 胺： 展开距离： )： [： #； #.FE。 " ."# 结果 层析 （ N0J） 检测中不同的展开 剂对 MQ 值 的影响 从表 # 结果可以 看 出 对 于 第 # 、 第 . 种 展 开 剂 的 MQ
#"#"#
附剂： 现 色 剂： 改良碘化铋 # - # " )8 硅 胶 Y JXJ! " . $ ； 钾试剂；对照品： 总生物碱。 #"#". 仪器 层析柱 （内径 )FE） ； /( Z #!! 型 旋转 带 蒸 馏仪； A## - [ - ! Z 电热恒温水浴锅。 # " # " / 茜草科植物钩藤的干燥带钩茎枝。 #". #"."# 方法 钩藤总生物 碱 提 取 条 件 的 选 择
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中国热带医学 (&&- 年第 - 卷第 % 期
较小， 并不能 把 总 生 物 碱 中 的 各 种 生 物 碱 完 全 分 开， 而第 ! 种展开系统的 "# 太大， 各类生物碱也未完全分 离， 而第 $ 种展开剂系统较为理想。