电泳过程中常见的问题及解决的方法

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电泳涂装常见问题汇总

电泳涂装常见问题汇总

电泳涂装常见问题及解决方法一现象可能产生的原因对策膜厚不足固体份低提高固体份溶剂量少补加溶剂电压低提高电压温度低提高温度水迹纯水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆溶剂含量高适量超滤降低溶剂量起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜基比过高减少颜料补加,增加树脂含量溶剂量少补加溶剂槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度固体份过高,槽液粘度太大降低固体份涂膜粗糙颜料份高减少色浆,增加树脂电导率高超滤,降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀,破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕基材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗凹孔,缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长烘烤时间烘烤温度低升高温度不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低??????? 电泳漆膜常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙电压过高降低电压溶液温度高降低温度固体分过高加水稀释槽液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用醋酸或乳酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压提高膜厚颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时,颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多,渗透能力差,膜层厚薄不均调整溶剂含量,使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗工件漆膜局部堆积PH太高用冰醋酸或乳酸调整然后超滤工件表面带碱性增加中和槽处理工件油污未除尽加强除油工艺漆膜附着力差工件表面带碱性增加中和槽处理工件油污未除尽加强除油工艺烘烤温度不够或时间太短提高烘烤温度,增加烘烤时间???????电泳槽液常规问题处理操作规范流程1.离子杂质处理测量电导率一般采用电导率仪进行测量,目前较为普遍采用的超滤处理法,在超滤以后,必须补加2-5%的溶剂(视槽液内溶剂量而定),否则会因为槽液内溶剂量缺失而造成电泳工件不良。

电泳返修方案

电泳返修方案

电泳返修方案一、引言电泳是一种常用的分离和纯化生物大分子的方法,广泛应用于生物化学、分子生物学等领域。

然而,在实际操作中,由于各种原因,电泳结果可能出现问题,需要进行返修。

本文将介绍电泳返修的方案。

二、常见问题及解决方案1. 样品未进入凝胶问题描述:在电泳结束后,没有观察到预期的条带。

解决方案:检查样品是否正确加载到凝胶孔中,可以通过观察载样时是否有样品溢出或通过添加示踪剂来确认。

若样品未正确加载,可重新进行电泳。

2. 条带模糊或扩散问题描述:在电泳结果中,预期的条带模糊或扩散。

解决方案:首先,检查电泳条件是否正确,包括电场强度、电泳时间和电泳缓冲液浓度等。

其次,检查凝胶浓度和染色方法是否适合所需分析的目标分子。

如果问题仍然存在,可能需要重新制备凝胶或更换电泳缓冲液。

3. 条带强度不均匀问题描述:在电泳结果中,条带强度不均匀,部分条带过弱或过强。

解决方案:检查样品加载量是否均匀,过多或过少的样品都可能导致条带强度不均匀。

另外,也要检查电泳条件是否均匀,如电场分布是否一致。

如果问题仍然存在,可以尝试调整电泳条件或更换电泳缓冲液。

4. 条带偏移或变形问题描述:在电泳过程中,条带出现偏移或变形。

解决方案:条带偏移或变形可能是由于电场不均匀或凝胶老化导致的。

首先,检查电泳缓冲液是否均匀,电场是否平衡。

如果问题仍然存在,可能需要重新制备凝胶或更换电泳缓冲液。

5. 条带未被染色或染色不均匀问题描述:在染色后,条带未被染色或染色不均匀。

解决方案:首先,检查染色方法是否正确,包括染色液的配制和染色时间的控制等。

其次,可以尝试增加染色液浓度或延长染色时间。

如果问题仍然存在,可能需要重新进行染色。

三、结语电泳返修方案是解决电泳结果问题的关键步骤,通过合理的分析和判断,可以快速准确地找到问题所在并采取相应的解决方案。

在实际操作中,操作人员应具备一定的电泳操作经验,并严格按照实验步骤进行操作,以避免出现问题。

通过不断的实践和总结,电泳技术会得到进一步的提升和完善,为科研工作和实验分析提供更可靠的结果。

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法1.缩孔这类缺陷在湿的漆膜上看不见,当烘干后漆膜表面出现直径通常为0.5-3.0mm漏底微孔、不漏底的火山口状的凹陷,称为陷穴、凹洼,露底者为缩孔,中间有颗粒但不刮手的称为“鱼眼”。

由于电泳漆湿膜中或表面有尘埃、油渍或与电泳涂料不相容的粒子,成为陷穴中心,因而产生涂膜缺陷。

很多情况下这类缺陷还与被涂物的材质有关,如金属底材上存在微裂纹和微孔等。

原因1:外来油污污染电泳漆膜,油污附着在工件表面,使电泳漆成膜受到影响。

这种原因引起缩孔的几率较大。

解决方法:可检查输送机构、挂具,防止油滴污染漆膜。

从电泳设备制造安装开始就要避免上述物质污染,每一种新零件投入电泳前最好进行相关检验,防止受油、硅油、蜡、脂性碳化物、胶水等污染物对工件,电泳设备及电泳槽液的污染。

原因2:前处理除油不干净,造成润湿性不良,使电泳漆烘干后漆膜有缩孔。

解决方法:加强前处理清洗。

原因3:槽液有油污、异物混入,影响电泳漆膜外观。

解决方法:用吸油纸吸去油污,清除槽液内异物,同时避免异物混入,保持电泳槽液清洁原因4:加漆时有电泳漆没搅拌均匀,使槽液无完全熟化,引起漆膜不良。

解决方法:确保加入的电泳漆搅拌均匀,加强槽液循环,使槽液完全熟化原因5:电泳后水洗中含油分或烘干室内不洁净,循环风含油分,使油分附著在漆膜上面烘干后有缩孔。

解决方法:水洗经常更换,烤箱经常清理.烤箱链轨用油可选用耐高温,不会高温挥发为最佳2.针孔工件上有露底针状小孔,称为针孔,它与缩孔的区别是孔径小,中心无异物,且四周无漆膜堆积凹起。

由漆膜再溶解而引起的针孔,称为再溶解针孔;由电泳过程中产生的气体、湿膜脱泡不良而产生的针孔,称为气体针孔;(1)湿膜针孔:工件未进行烘烤,在空气中凉干,可看到的针孔原因1: 电泳电压过高,电流冲击反应过剧,产生气泡过多,或升压速度过快。

解决方法:适当降低电压,加长软启动时间原因2:溶剂含量偏低。

解决方法:添加溶剂,每次添加不能超过1%原因3:槽液温度过低。

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳中的问题及其解决方法

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳中的问题及其解决方法

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种在两个方向上进行电泳分离的技术,通常用于核酸和蛋白质的分析。

在进行这种电泳过程中,可能会遇到一些问题。

以下是一些常见问题及其可能的解决方法:
1.电泳带模糊或不清晰:
-可能原因:
-样品质量不纯。

-缓冲液配制有问题。

-电场均匀性差。

-解决方法:
-使用纯净的、高质量的核酸或蛋白质样品。

-重新配置新鲜的缓冲液。

-检查电场均匀性,确保电场平均分布。

2.电泳速度过快或过慢:
-可能原因:
-电流设置不当。

-缓冲液浓度不正确。

-解决方法:
-调整电流,确保在设备规定的范围内。

-检查并重新配置适当浓度的缓冲液。

3.电泳带变形或扭曲:
-可能原因:
-样品加载不均匀。

-凝胶浓度选择不当。

-解决方法:
-确保样品加载均匀,使用适当的体积和加载方法。

-重新制备适当浓度的凝胶。

4.电泳凝胶干燥或开裂:
-可能原因:
-凝胶聚合物浓度太高。

-电泳室湿度不足。

-解决方法:
-降低凝胶聚合物的浓度。

-提高电泳室的湿度,可以考虑使用湿度控制设备。

5.样品负载量过多或过少:
-可能原因:
-样品量测量错误。

-样品浓度过低。

-解决方法:
-确保准确测量样品量。

-调整样品的浓度,确保在电泳中可以产生明显的带。

在实验过程中,及时记录实验条件和参数,有助于更容易地识别和解决问题。

如果问题持续存在,建议向实验室同事、导师或相关领域的专家寻求帮助。

电泳涂装常见问题汇总情况

电泳涂装常见问题汇总情况

电泳涂装常见问题与解决方法一电泳漆膜常见故障与其纠正方法电泳槽液常规问题处理操作规X流程测量电导率一般采用电导率仪进展测量,目前较为普遍采用的超滤处理法,在超滤以后,必须补加2-5%的溶剂〔视槽液内溶剂量而定〕,否如此会因为槽液内溶剂量缺失而造成电泳工件不良。

溶剂含量过高处理:正确判断是否溶剂含量偏高,溶剂含量偏高容易出现水痕、伴随上膜快、同样电压下电泳膜偏厚、湿膜粘性大、湿膜蓬松等现象;如果确定是溶剂含量高,可以采用超滤方式进展超滤处理,处理完后须测量电导率,要是电导率偏低的情况下需适量补加冰醋酸或乳酸调整〔一般电导率控制在400μs/cm以上即可,PH低于4.5以下的慎用〕溶剂含量过低处理方法:正确判断槽液溶剂含量是否过低,一般在长时间循环下新漆补加量少,槽液温度高,频繁超滤等情况下容易出现溶剂含量较低的情况,溶剂较低的现象表现为同样电压下漆膜较薄,湿膜枯燥粘性小,膜厚不均匀〔彩色电泳较为明显,工件颜色不均匀现象〕,工件烘烤后流平较差等现象;3.槽液PH值控制槽液PH偏高的处理:一般电泳槽液较难容忍PH偏高,PH值偏高容易带来很多负面影响,常见现象较为普遍的是漆膜容易出现局部漆膜堆积现象,电泳槽液发白,明显水溶性不好,如果长时间PH偏高将造成电泳槽液沉淀,严重影响槽液稳定性,出现颗粒等现象,直至无法调整;出现PH值偏高现象可以采用补加冰醋酸或乳酸调整。

槽液PH值偏低的处理:PH偏低的现象表现为漆膜上膜较薄,容易出现针孔现象,伴随湿膜附着力差,容易被水冲掉露底等现象,其是因为槽液内酸含量高造成的返泳现象所致。

电泳涂装常见问题与解决方法二1.颗粒〔疙瘩〕在烘干后的电泳漆膜外表上,存在有手感粗糙的〔或肉眼可见的〕较硬的粒子,称为颗粒。

〔1〕形成原因1〕电泳槽液有沉淀物,凝聚物或其他异物,槽液过滤不良。

2〕电泳后冲洗液脏或冲洗水中含漆浓度过高。

3〕烘干炉脏,落入颗粒状的污物。

4〕进入电泳槽的被涂物不洁净,磷化后的水洗不净。

电泳过程中的不正常现象和对策

电泳过程中的不正常现象和对策

辉骏生物电泳过程中的不正常现象和对策如果电源上没有显示电压,则说明电源没有输入电压,保险丝断了或电源故障。

如果没有电流或电流很小,则说明凝胶,缓冲液凝胶条(或缓冲液滤纸条)及电极三者之间有气泡,接触不好,甚至没有接触。

如果前沿指示剂向相反方向移动(如阳极电泳中溴酚蓝向阴极移动或阴极电泳中焦宁向阳极移动),则说明电源连接的正、负错置或缓冲液选择错误。

如果指示剂前沿呈现两边向上的曲线形,即常称的“微笑”现象。

则说明凝胶的不均匀冷却,中间部分冷却不好,所以导致凝胶中的分子有不同的迁移率所致。

这种情况在用较厚的凝胶以及垂直电泳时常常发生。

如果指示剂前沿呈现两边向下的曲线形,即常称的“皱眉”现象。

则常常是由于垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起的,特别是当凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全便会产生这种现象。

图示1,电泳时,前沿指示剂的(1)“微笑”现象和(2)“皱眉”现象如果电泳时间比正常要长,则可能是由于凝胶缓冲系统和电极缓冲系统的pH选择错误。

即缓冲系统的pH和被分离物质的等电点差别太小或缓冲系统的离子强度太高。

电泳时电流产生的热是大部分电泳方法的主要问题。

即使使用冷却装置,也仍然会正在凝胶中产生温度差异。

这种温度差异导致相同分子在凝胶的不同部位会有不同的迁移速度,而使蛋白带产生弯曲畸变。

特别在使用柱胶和较厚的凝胶时这种现象更为常见。

凝胶厚度、冷却温度、电参数和电泳时间4者之间在电泳时存在着依赖关系。

电压应根据加在凝胶上电极之间的距离(即凝胶宽度)而定。

电流则与凝胶的长度(加样数和加样量)有关。

一般来说,常规聚丙烯酰胺凝胶电泳不需要太高的电压,所以对薄层胶来说,温度要求也不高。

如果加双倍的电压,从理论上来说,电泳时间可缩短一倍。

但实际上由于高电压产生的副作用,并不能达到预期的目的。

所以有时采用伏/小时作为电泳时间参数可能更具有实际应用价值。

电泳过程中如果电泳盖上出现冷凝水,则表示加的电压和功率过高。

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法电泳是一种常用于分离生物分子的实验技术,但在实验过程中常常会遇到一些问题。

以下是电泳实验中常见问题及相应的处理方法:**1. ** 电流不稳定或电流为零:- **可能原因:** 电源故障、电极接触不良、电极泄露或电极材料老化。

- **处理方法:**-检查电源设备,确保其正常工作。

-检查电极接触情况,确保良好接触。

-替换老化的电极材料。

**2. ** 样品移动过快或过慢:- **可能原因:** 缓冲液浓度、电场强度、电泳时间等因素影响。

- **处理方法:**-调整缓冲液的浓度,确保适当的离子浓度。

-调整电场强度。

-控制电泳时间,确保合适的分离时间。

**3. ** 电泳带模糊或扩散:- **可能原因:** 样品浓度过高、电场强度过大、电极材料老化等。

- **处理方法:**-减少样品浓度。

-降低电场强度。

-更新电极材料。

**4. ** 电泳带畸变:- **可能原因:** 缓冲液PH值不合适、电极材料污染、样品准备不当等。

- **处理方法:**-调整缓冲液PH值。

-清理电极材料。

-重新准备样品。

**5. ** 电泳槽泄露:- **可能原因:** 电泳槽密封不良、槽体老化等。

- **处理方法:**-检查槽体密封情况。

-更换老化的槽体。

**6. ** 电泳带粘在电极上:- **可能原因:** 电极表面污染、电场强度过大等。

- **处理方法:**-清理电极表面。

-降低电场强度。

**7. ** 电泳结束后凝胶上有色斑:- **可能原因:** 染色不充分、凝胶中存在异物等。

- **处理方法:**-加强染色过程。

-小心操作,避免在凝胶中引入异物。

**8. ** 凝胶破裂:- **可能原因:** 凝胶制备不当、电场强度过大等。

- **处理方法:**-仔细制备凝胶,确保无气泡。

-降低电场强度。

电泳实验中出现问题时,及时采取正确的处理方法是确保实验成功的关键。

通过检查设备、调整实验条件和注意样品制备,可以有效避免或解决电泳过程中的常见问题。

电泳常见问题及解决方法

电泳常见问题及解决方法

3. 1 滑橇底部油泥污染导致电泳缩孔及其解决办法在车身经手工预清理完后,进行洪流冲洗前,需要将车身承载在滑橇上并锁紧,再装挂在自行葫芦系统的吊架上,然后依次通过电泳涂装各工艺槽。

当滑橇第一次通过电泳槽时,滑橇表面会泳涂上一层电泳漆膜,形成绝缘层。

而当滑橇承载车身再一次通过电泳槽时,滑橇表面因有绝缘层的存在而不会泳涂上新的电泳漆膜,但会一次次附上一层新的电泳浮漆。

由于电泳后的水洗工艺主要是针对车身,而位于车身底部的滑橇不可能被冲洗干净。

因此,当附有电泳浮漆的滑橇在电泳后工位(如电泳烤房、电泳烤后存放)的输送链上前行时,滑橇底部的电泳浮漆和已泳涂上的电泳漆膜与输送链上的滚子不断接触、摩擦,就会粘附滚子上的润滑油,形成油泥。

由于这些油泥位于滑橇底部,并且有很强的粘附性,即使在通过脱脂和水洗等工艺槽时,也不能完全被清除干净,从而污染磷化槽液、电泳槽液及电泳烤房。

油泥污染引起的直接后果就是造成电泳漆膜缩孔。

经观察发现,在每次对电泳滑橇通过的输送链加油润滑后,电泳漆膜缩孔明显增加。

电泳漆膜缩孔不仅加大了电泳底漆打磨的工作量,也明显影响整车涂膜的质量和抗腐蚀性能。

人工擦除滑橇底部油泥,以避免电泳漆膜缩孔是一种解决办法,但费时费力;在预脱脂槽里增加喷嘴,利用高压脱脂液对滑橇底部油泥进行冲洗也是一种办法,但这样做需要对预脱脂槽进行较大的改造,并且还会加快预脱脂槽液的更新周期,从而造成成本上升;第3 种办法是在车身吊装进槽前的滚床间安装油泥清洗机。

清洗机带有一对呈滚轮状的毛刷,通过电机减速驱动毛刷对滑橇底部油泥进行刷洗。

该方法简便可行。

为加强对油泥的清洗效果,利用该方法并采用3 套清洗机,通过其6 个呈滚轮状、用以粘附滚轮下面清洗液的毛刷对在清洗机上面通过的滑橇底部的油泥进行连续滚刷。

清洗机安装调试完毕,经过2 周的试运行后发现,清洗机工作稳定可靠,清洗效果明显提高。

滑橇底部油泥在经过3 次连续的滚刷后基本被清除,再经过后续的洪流冲洗、脱脂、水洗等流程,油泥被清除得更为彻底,不再对磷化槽液、电泳槽液形成污染,从而避免了因油泥而造成的车身电泳漆膜缩孔的问题。

电泳常见问题

电泳常见问题

4
电泳漆颗粒
2.进入电泳槽的被涂工件及挂具不干净 3.电泳槽由于过滤不良,使槽液杂质离子过 多,电导率偏高
5
微笑(两边翘起中间
凹下)
凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较 待其充分凝固再作后续实验 厚的凝胶中 出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间 可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡 的底部间隙气泡未排除干净 加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶 剂;电泳缓冲液时间过长,重新
6
皱眉(两边向下中间
鼓起)
7
拖尾现象
样品融解效果不佳或分离溶性颗粒引起的
加样前离心;加适量样品促溶剂
9
电泳的条带很粗 什么未浓缩好
适当增加浓缩胶的长度;保证浓缩胶贮液的pH正确 (6.7);适当降低电压
2
电泳漆层针孔
3.电泳液pH值太低 4.固体含量太低 5烘烤加温太快 1.前处理处理零件不干净
3
电泳气泡
2.阴极(被涂物)表面会放出氢气,当氢气不 2.调整工件的位置或者设计排气孔 能排除时 1.槽液颜基比过高 1.与供应商协商,提供低颜基比涂料,以便调整槽液 2.加强前处理液的过滤,降低磷化液的残渣含量,严格 控制磷化后冲洗的水质,以及浮在工件表面上的磷化残 渣;定时清洗挂具疏松污垢等 3.加强电泳槽液的过滤。定期清洗、更换过滤装置,严 格控制槽液的PH值和碱性物质的带入,防止树脂析出。
电泳的常见问题及处理方式
序号 现象描述
1.漆层太厚 2.漆料中溶剂含量太低 1
产生原因
1.减薄漆层 2.增加溶剂含量 3.降低电压和温度
排除方式
电泳漆层橘皮
3.电泳时电压和温度太高 4.电泳液中杂质含量太高 5.烘烤加热不均匀 1.零件表面脱脂不彻底 2.电泳液中杂质含量过高、电导率偏大

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法

电泳常见问题及处理方法1.缩孔这类缺陷在湿的漆膜上看不见,当烘干后漆膜表面出现直径通常为0.5-3.0mm漏底微孔、不漏底的火山口状的凹陷,称为陷穴、凹洼,露底者为缩孔,中间有颗粒但不刮手的称为“鱼眼”。

由于电泳漆湿膜中或表面有尘埃、油渍或与电泳涂料不相容的粒子,成为陷穴中心,因而产生涂膜缺陷。

很多情况下这类缺陷还与被涂物的材质有关,如金属底材上存在微裂纹和微孔等。

原因1:外来油污污染电泳漆膜,油污附着在工件表面,使电泳漆成膜受到影响。

这种原因引起缩孔的几率较大。

解决方法:可检查输送机构、挂具,防止油滴污染漆膜。

从电泳设备制造安装开始就要避免上述物质污染,每一种新零件投入电泳前最好进行相关检验,防止受油、硅油、蜡、脂性碳化物、胶水等污染物对工件,电泳设备及电泳槽液的污染。

原因2:前处理除油不干净,造成润湿性不良,使电泳漆烘干后漆膜有缩孔。

解决方法:加强前处理清洗。

原因3:槽液有油污、异物混入,影响电泳漆膜外观。

解决方法:用吸油纸吸去油污,清除槽液内异物,同时避免异物混入,保持电泳槽液清洁原因4:加漆时有电泳漆没搅拌均匀,使槽液无完全熟化,引起漆膜不良。

解决方法:确保加入的电泳漆搅拌均匀,加强槽液循环,使槽液完全熟化原因5:电泳后水洗中含油分或烘干室内不洁净,循环风含油分,使油分附著在漆膜上面烘干后有缩孔。

解决方法:水洗经常更换,烤箱经常清理.烤箱链轨用油可选用耐高温,不会高温挥发为最佳2.针孔工件上有露底针状小孔,称为针孔,它与缩孔的区别是孔径小,中心无异物,且四周无漆膜堆积凹起。

由漆膜再溶解而引起的针孔,称为再溶解针孔;由电泳过程中产生的气体、湿膜脱泡不良而产生的针孔,称为气体针孔;(1)湿膜针孔:工件未进行烘烤,在空气中凉干,可看到的针孔原因1: 电泳电压过高,电流冲击反应过剧,产生气泡过多,或升压速度过快。

解决方法:适当降低电压,加长软启动时间原因2:溶剂含量偏低。

解决方法:添加溶剂,每次添加不能超过1%原因3:槽液温度过低。

琼脂糖核酸电泳中的疑难问题及其解决方案

琼脂糖核酸电泳中的疑难问题及其解决方案

琼脂糖核酸电泳中的疑难问题及其解决方案一、分辨率问题问题描述:琼脂糖核酸电泳中,条带分辨不清,无法准确区分不同的DNA 片段。

解决方案:1.调整琼脂糖浓度:增加琼脂糖浓度可以提高分辨率。

2.调整缓冲液浓度:降低缓冲液浓度可以提高分辨率。

3.增加电压:适当增加电压可以提高迁移速率,从而提高分辨率。

二、迁移速率不均一问题描述:琼脂糖核酸电泳中,不同DNA片段的迁移速率不一致,导致条带不整齐。

解决方案:1.调整缓冲液浓度:适当增加缓冲液浓度可以提高迁移速率的一致性。

2.控制温度:保持恒温可以减少温度对迁移速率的影响。

3.更换电泳槽:电泳槽老化或污染可能导致迁移速率不均一,需要更换新的电泳槽。

三、拖尾现象问题描述:琼脂糖核酸电泳中,某些DNA片段出现拖尾现象,影响条带分析。

解决方案:1.调整琼脂糖浓度:适当增加琼脂糖浓度可以减少拖尾现象。

2.控制温度:保持恒温可以减少温度对DNA片段的影响,从而减少拖尾现象。

3.检查缓冲液:缓冲液不纯或被污染可能导致拖尾现象,需要更换新的缓冲液。

四、条带弥散问题描述:琼脂糖核酸电泳中,某些条带出现弥散现象,影响分辨率。

解决方案:1.调整琼脂糖浓度:适当增加琼脂糖浓度可以减少弥散现象。

2.控制温度:保持恒温可以减少温度对DNA片段的影响,从而减少弥散现象。

3.检查缓冲液:缓冲液不纯或被污染可能导致弥散现象,需要更换新的缓冲液。

五、背景问题问题描述:琼脂糖核酸电泳中,背景较深,影响条带分析。

解决方案:1.调整缓冲液浓度:适当降低缓冲液浓度可以减少背景问题。

2.控制温度:保持恒温可以减少温度对背景的影响。

3.检查电泳槽:电泳槽老化或污染可能导致背景问题,需要更换新的电泳槽。

六、染色不均一问题描述:琼脂糖核酸电泳后,某些条带染色不均一,影响分析结果。

解决方案:1.调整染色时间:适当延长染色时间可以提高染色效果。

2.更换染色剂:染色剂不纯或被污染可能导致染色不均一,需要更换新的染色剂。

电泳常见问题分析和解决方案

电泳常见问题分析和解决方案

电泳操作要点1 )纯水水质要求在电导率< 5μs/cm2 )槽液液温控制在 25 -30℃ (冷热循环控制)3 )进槽要清洗干净,不要将酸碱带入槽中4 )电泳漆要晾于然后进烘箱,烤温时不要升温太快电泳常见问题及解决方案问题原因解决对策膜厚不足固体份低提高固体份电压低提高电压温度低提高温度漆膜过厚工作周围循环不好通常因泵,过滤器及喷嘴阻塞所致固体份高降低固体份温度高降低温度电导率高提高超滤液排放量电压高降低电压水迹沌水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜色基比过高减少颜料补加,增加树脂含量槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度涂膜粗糙颜料份高减少色浆,增加树脂电导率高超滤,降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀,破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕底材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗凹孔,缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长,严格按工艺操作烘烤温度升温不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙电压过高降低电压溶液温度高降低温度固体分过高稀释溶液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用有机酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时,颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多,渗透能力差,膜层厚薄不均调整溶剂含量,使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗。

电泳常见问题及解决方法

电泳常见问题及解决方法

阳极电泳罕睹问题及办理要领之阳早格格创做一、颗粒(1)局里正在烘搞后的电泳涂膜表面上有脚感细糙的、较硬的粒子,大概肉眼可睹的细小痱子,往往被涂物的火仄里较笔曲里宽重,那种漆膜病态称为颗粒.(2)爆收本果①CED槽液PH值偏偏下,碱性物量混进,制成槽液没有宁静,树脂析出大概凝结.②槽内有重淀“死角”战裸露金属处.③电泳后荡涤液净、含漆量过下,过滤没有良.④加进的被涂物里及吊具没有净,磷化后火洗没有良.⑤正在烘搞历程中降上颗粒状污物.⑥涂拆环境净.⑦补给涂料大概树脂溶解没有良,有颗粒.(3)防治要领①将CED槽液的PH值统制正在下限,宽禁戴进碱性物量,加强过滤,加速槽液的革新.②与消易重淀的“死角”战爆收重积涂膜的裸露金属件.③加强过滤,推荐采与细度为25μm的过滤元件,养活泡沫.④保证被涂里浑净,没有该有磷化重渣,预防两次传染.⑤浑理烘搞室战气氛过滤器.⑥脆持涂拆环境浑净,查看并与消气氛的灰尘源.⑦保证新补涂料溶解劣良,色浆细度正在尺度范畴内. 两、缩孔(陷穴)(1)局里正在干的电泳涂膜上瞅没有睹,当烘搞后漆膜表面出现火山心状的凸坑,曲径常常为0.5~3.0mm,没有露底的称为陷穴、凸洼、露底的称为缩孔,中间有颗粒的称为“鱼眼”.爆收那一毛病的主要本果是电泳干涂膜中大概表面有灰尘,油污与电泳涂料没有相溶的粒子,成为陷穴核心,使烘搞初期的干漆膜流展本领没有均衡,而爆收涂膜缺陷.(2)爆收本果①被涂物前处理脱脂没有良大概荡涤后又降上油污、灰尘.②槽液中混进油污,漂浮正在液里大概乳化正在槽液中.③电泳后浑洗液混进油污.④烘搞室内没有净,循环风内含油分.⑤槽液的颜基比仄衡,颜料含量矮的易爆收缩孔.⑥涂拆环境净、气氛大概含有油雾、漆雾,含有机硅物量等传染被涂物大概干涂膜.⑦补给涂料有缩孔大概其中树脂溶解没有良,中战短好. (3)防治要领①加强被涂物的脱脂工序,保证磷化膜没有被两次传染.②正在槽液循环系统设除油过滤袋,共时查浑油污源,宽禁油污戴进槽中.③普及后荡涤火量,加强过滤.④脆持烘搞室战循环热风的浑净.⑤安排槽液的颜基比,适合加色浆普及颜料含量.⑥脆持涂拆环境净净,扫除对于涂拆有害物量源,更加是有机硅物量源.⑦加强补给涂料的管制,分歧格的没有克没有及增加进槽中,保证补给涂料溶解、中战、过滤好.三、针孔(1)局里电泳涂膜正在烘搞后爆收针尖状的小凸坑大概小孔,那种涂膜毛病称为针孔,它与缩孔(麻坑)的辨别是孔径小、核心无同物、四里无漆膜散集凸起.根据爆收的本果针孔有下列几种:①由干涂膜再溶解耐引起的针孔,称为再溶解针孔.②电泳历程中,由于电解反应猛烈,爆收气泡过多、脱泡没有良大概果槽液温度偏偏矮大概搅拌没有充分,制成被漆膜包裹,正在烘搞历程中气泡破裂而爆收的针孔,称为气泡针孔.③戴电进槽阶梯针孔:爆收正在戴电进槽阶梯毛病程度宽重的场合下,针孔是沿进槽斜线暴露底板,其余,由于槽液对于物体表面潮干没有良,使一些气泡被启关正在漆膜内大概是槽液表面的泡沫附着正在工件表面上产气愤泡针孔,普遍爆收正在被涂物的下部.(2)爆收本果①电泳涂拆后被涂物出槽荡涤没有即时,干涂膜爆收再溶解.②槽液中杂量离子含量过下,电解反应剧烈,被涂物表面爆收过多气体.③磷化膜孔隙率下,也易含量气泡.④槽液温度偏偏矮大概搅拌没有充分,使干膜脱泡没有良.⑤工件戴电进槽时输送链速度过缓.⑥被涂物进槽端槽液里流速矮,有泡沫散集.(3)防治要领①被涂物离启槽液应坐时用UF液大概杂火浑洗,时间没有超出1min.②排搁UF液、加杂火,降矮杂量离子的含量.③安排磷化配圆及工艺,使磷化膜结晶致稀化.④加强槽液搅拌,保证槽液温度正在28~30℃下运止.⑤正在链速过缓的场合,没有宜采用戴电进槽办法的电泳涂拆工艺,改用进槽后通电.⑥使槽液里流速大于0.2m/s,与消散集的泡沫.四、再溶解(1)局里泳涂重积正在被涂物上的干涂膜,被槽液大概UF荡涤液再次溶解,爆收涂膜变薄、得光、针孔、露底等局里. (2)爆收本果①电泳后的被涂件正在电泳槽液大概UF液中停顿(交触)时间过少.②槽液战UF液的PH值偏偏矮,溶剂含量偏偏下,后浑洗压力过下,荡涤时间过少.③设备障碍,制成停链.(3)防治要领①断电后工件坐时出槽,出槽后至后荡涤隔断时间战正在UF液中停顿时间没有宜超出1min.②将槽液战UF液的PH值战溶剂含量庄重统制正在工艺确定范畴内,屡屡UF液荡涤时间应统制正在20s安排,浑洗压力没有该超出0.12MPa.③应即时排除设备障碍.五、泳涂有膜薄偏偏薄(1)局里被涂物泳后表面的搞涂膜薄度缺累,矮于工艺确定的膜薄.主假如工艺参数实止没有宽,槽液老化、仄衡、导电没有良战再溶解制成的.(2)爆收本果①槽液固体分偏偏矮.②泳涂电压矮,泳涂时间缺累.③槽液温度矮于工艺确定的范畴.④槽液电导率矮.⑥槽液老化,革新期少,使干漆膜电阻过下,槽液电导变矮.⑦极板连交没有良战被腐蚀益坏,极液电导矮,极罩隔膜阻碍.⑧被涂物通电没有良.⑨UF液后浑洗时间过少,爆收再溶解.⑩阳极电泳槽液的PH值偏偏矮.(3)防治要领①普及槽液固体分,按工艺确定统制正在常常情况下±0.5%以内.②普及泳涂电压,延少泳涂时间.③将槽液温度统制正在工艺典型的上限.④缩小UF液的益坏.⑤补加UF液的益坏.⑥加速槽液革新,增加删薄安排剂.⑦查看极板、极罩战极液系统,定期浑理大概革新,使其导电劣良.⑧浑理挂具,使被涂物通电劣良.⑨收缩UF液浑洗时间.⑩加速阳极液的排搁,大概增加矮中战度涂料,使槽液的PH值降到工艺确定的央供.六、泳涂的漆膜过薄(1)局里被涂物表面的膜薄度超开工艺确定的膜薄,如果漆膜中瞅仍很好,普遍没有是毛病,主假如涂料消耗删大,成本删下.(2)爆收本果①泳透电压偏偏下.②槽液温度偏偏下.③槽液的固体分过下.④泳涂时间过少(如停链).⑤槽液中的有机溶剂含量过下,修槽初期死化时间短⑥槽液的电导率下.⑦被涂物周围循环短好.(3)防治要领①降矮泳涂电压②降矮槽液温度(千万于没有克没有及下开工艺确定温度).③降矮槽液的固体分.④统制泳涂时间,预防停链.⑤排搁UF液,增加来离子火,延少新配槽液的死化时间.⑥排搁UF液增加来离子火,降矮槽液中杂量离子的含量.⑦常常果泵、过滤器战喷嘴阻碍而致七、非常十分附着(1)局里由于被涂物表面大概磷化膜的导电性没有匀称,正在电泳涂拆时电流稀度集结于电阻小的部分,引起漆膜正在该部位集结收展,截止是正在那个部位呈散集附着.当泳涂电压偏偏下、交近益害电压时,制成漆膜局部益害,也呈散集状态附着.(2)爆收本果①磷化膜传染(有指印、斑印)②前处理工艺非常十分(脱脂没有良、火洗没有充分、磷化膜有收蓝、黄锈斑等)③被涂物表面有黄锈、焊药等终扫撤除.④槽液被杂量离子传染,电导过大,槽液中的有机溶剂含量过下,颜料分过矮.⑤泳涂电压过下,槽液温度下,制成涂膜被益害.(3)防治要领①预防两次传染,宽禁裸脚触摸磷化膜表面.②安排前处理工艺,保证脱脂劣良,火洗充分,磷化膜匀称,无黄锈,蓝斑.③黑件加进前处理工序之前设预荡涤工序,撤除黄锈、焊药等.④排搁UF液,加来离子火,增加色浆,普及灰分,预防杂量离子混进.⑤降矮泳涂电压,统制进槽初期电压,降矮槽液温度,宽防极间距太近.八、泳透力变好(1)局里正在仄常情况下被涂物的内腔、夹层结构内表面皆能涂上漆,但是正在死产中偶尔创制内腔泳涂没有上漆大概者涂得很薄,那种局里称为泳透力变好.正在汽车车身涂拆死产中应定期抽检,将车身解体,瞅察其内腔、焊缝各部位的涂拆情景,并丈量膜薄,以考核泳透力的变更. (2)爆收本果①泳透电压过矮②槽液的固体分偏偏矮③槽液的搅拌缺累④极罩隔膜阻碍、电阻大⑤新增加电泳涂料的泳透力好大概分歧格(3)防治要领①普及泳透电压.②保证槽液的固体分正在工艺确定的范畴③加强槽液搅拌④浑理极罩大概革新隔膜⑤加强进厂资料的抽检,采用泳透力好的电泳涂料.九、两次流痕(1)局里经后荡涤所得干电泳涂膜表面仄常,但是经烘搞,正在被涂物的夹缝结构处爆收漆液流痕.那种局里称为“两次流痕”漆膜毛病.其本果是被涂物夹缝正在荡涤中已洗净,正在慢遽降温时沸腾将槽液挤出,爆收流痕.(2)爆收本果①被涂物的结构制成②电泳后荡涤工艺采用没有当,火洗没有良③加进烘搞时降温过慢④槽液固体分战后荡涤UF液含漆量偏偏下(3)防治要领①正在大概条件下矫正结构②对于搀杂的被涂物,如汽车车身,应选浸喷分离式荡涤工艺,大概用火冲大概压缩气氛吹掉夹缝中的槽液,终尾杂火浸洗火温加热到30~40,有好处与消两次流痕③加强晾搞功能,正在烘搞前预加热④适合降矮槽液的固体分;降矮后荡涤UF液中的含漆量十、火滴迹(1)局里电泳涂膜正在烘搞后局部漆里上有坎坷没有服的火滴斑状,做用涂膜仄坦性,那种毛病称为火滴迹. (2)爆收本果①干涂膜表面的火滴、火珠正在烘搞前已挥收掉大概吹掉②从挂具战悬链上滴降的火滴③被涂物上有积火④干电泳涂膜的抗火滴性(电渗性)好⑤加进烘搞室后温降过慢⑥杂火火洗缺累.(3)防治要领①吹掉火滴、火珠,降矮晾搞区的干度,加强排风普及气温.②采与步伐预防火滴降正在被涂物上③应设法与消积火④矫正所用电泳涂料的电渗性.⑤预防降温过慢大概减少预加热(60~100℃,10min)⑥加强杂火洗十一、搞漆迹(1)局里正在电泳涂拆后附着正在干涂膜上的槽液终荡涤净,烘搞后涂膜表面爆收斑痕,称搞漆迹大概漆迹.(2)爆收本果①被涂物出槽到后荡涤区之间的时间太少.②电泳后荡涤没有良③槽液温度偏偏下,涂拆环境干度矮(3)防治要领①加强槽上的“0”次荡涤,至循环UF液洗的沥漆时间没有该大于1min .②查看喷嘴是可阻碍大概安插没有当,适合加大浑洗火量③适合降矮温度,普及环境干度十两、涂里斑印(1)局里由于底材表面大概磷化膜的传染,正在电泳涂拆后搞漆膜表面仍可睹到花纹大概天图状的斑痕.它与火滴迹战漆迹斑痕的分歧之处是涂里仍仄坦,但是对于涂膜的耐火性、耐腐蚀性有做用. (2)爆收本果①磷化后的火洗没有充分②磷化后的火洗火量没有良③磷化处理过的被涂里再次被传染.(3)防治要领①加强磷化后火洗,查看喷嘴是可阻碍②加强磷化后火洗的火量管制,杂火洗后的滴火电导没有该大于10μs/cm③预防已处理过的磷化膜被两次传染,脆持环境整净,预防挂具滴火十三、电泳涂膜中瞅没有良(1)局里劣量阳极电泳涂料正在最好的泳涂条件涂拆,所得电泳涂中瞅光润、仄坦、歉谦,应无颗粒、缩孔、针孔、斑痕、猪皮状等缺陷.阳极电泳底漆涂层险些可没有挨磨,曲交涂中涂大概里漆,赢得下档化妆性涂层.电泳涂膜中瞅没有良,除前述多种漆膜毛病中,另有阳阳里,光芒、光润度等没有匀,得光,中瞅没有歉谦,呈猪皮状,漆里细糙,脚感短好(用脚摸没有但是滑,有细糙的感觉)等. 电泳涂膜中瞅没有良普遍是由再溶解、电泳涂料的L效验战热展仄性短好、槽液的颜料含量过下、溶剂含量过矮、被涂物周围的槽液流速过矮、槽液有细小的凝结物、过滤没有良等本果制成的.(2)爆收本果①由于涂膜再溶解,使漆膜变薄、得光、露底②电泳涂料的L效验短好以致火仄里、笔曲里光芒战细糙度纷歧.③槽液的颜料含量过下④槽液的有机溶剂含量过矮⑤被涂物周围的槽液流速过矮大概没有震动⑥被涂物底材战磷化膜表面细糙度没有匀,做用涂膜中瞅⑦槽液固体分过矮⑧槽液温度矮⑨槽液过滤没有良⑩槽液中的杂量离子含量下,电导太下(3)防治要领①与消除膜被再溶解的条件,庄重统制槽液战荡涤液的PH 值及有机溶剂含量②矫正所采与电泳涂料的L效验,统制涂料正在15μm以下.③加树脂液,安排槽液的颜基比④适量增加相映的有机溶剂⑤加强槽液搅拌,查看喷嘴状态大概流背⑥矫正底材表面的细糙度及其匀称性,采用致稀薄膜型磷化膜,加强磷化后的荡涤⑦普及槽液的固体分⑧按工艺央供宽控槽液温度⑨加强槽液过滤,过滤细度没有该下于25μm⑩排搁UF液,增加来离子火十四、戴电进槽阶梯毛病(1)局里正在连绝式电泳涂拆场合,被涂物戴电加进电泳槽,涂里上易爆收多孔量的阶梯条纹漆膜毛病,普遍称那种毛病为戴电进槽阶梯毛病.(2)爆收本果①进槽部位液里有泡沫浮动,泡沫吸附正在被涂里上,被重积的漆膜包裹②被涂物表面搞干没有匀大概有火滴③进槽段电压过下,制成电解反应过烈④被涂物进槽速度太缓大概有脉动(3)防治要领①加大进槽部位液里流速,与消液里的泡沫.②吹掉被涂里的火滴,保证被涂物齐搞大概齐干状。

SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法

SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法

SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行,而所有条件总要确保蛋白质解离单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集,最常用的就是SDS-PAGE电泳技术。

1. SDS-PAGE电泳的基本原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合。

当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

2. 配胶缓冲液系统对电泳的影响在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。

在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。

由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。

当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。

所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况下,应首考虑该因素。

3. 样品如何处理根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS 处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。

凝胶电泳问题

凝胶电泳问题

凝胶电泳问题
凝胶电泳是一种常见的生物学实验技术,用于分离和检测DNA、RNA和蛋白质等生物大分子的方法。

在使用凝胶电泳时,可能会遇到以下一些常见问题:
1. 凝胶溶液凝固不均匀:可能是因为搅拌不均匀导致,解决方法是在配制凝胶溶液前彻底搅拌混合。

2. 凝胶电泳速度过快或过慢:速度过快可能是电压设置过高,速度过慢可能是电压设置过低。

解决方法是调整电压使其达到合适的电泳速度。

3. 凝胶溶液漏出:可能是凝胶支架或腔室密封不好,解决方法是检查密封性并进行修复。

4. 杂散电流影响结果:可能是电泳槽中存在污染物导致的,解决方法是彻底清洗电泳槽和电极。

5. 电泳结果模糊或不清晰:可能是取样量不足或带电物质浓度过高,解决方法是调整取样量或稀释样品。

6. 凝胶溶胀或收缩:可能是凝胶制备过程中的化学物质失衡导致的,解决方法是检查凝胶制备过程中的化学物质配方和试剂质量。

如果遇到以上问题可以根据具体情况逐一排查,寻找解决方法。

另外,凝胶电泳是一项常见的实验技术,也可以向实验室的同事或专家咨询,以获取更准确的解决方案。

电泳常见问题及解决方法

电泳常见问题及解决方法

阴极电泳常见问题及解决方法、颗粒(1)现象在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。

(2)产生原因①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。

②槽内有沉淀死角”和裸露金属处。

③电泳后清洗液脏、含漆量过高,过滤不良。

④进入的被涂物面及吊具不洁,磷化后水洗不良。

⑤在烘干过程中落上颗粒状污物。

⑥涂装环境脏。

⑦补给涂料或树脂溶解不良,有颗粒。

(3)防治方法①将CED槽液的PH值控制在下限,严禁带入碱性物质,加强过滤,加速槽液的更新。

②消除易沉淀的死角”和产生沉积涂膜的裸露金属件。

③加强过滤,推荐采用精度为25 am的过滤元件,养活泡沫。

④确保被涂面清洁,不应有磷化沉渣,防止二次污染。

⑤清理烘干室和空气过滤器。

⑥保持涂装环境清洁,检查并消除空气的尘埃源。

⑦确保新补涂料溶解良好,色浆细度在标准范围内。

(1)现象在湿的电泳涂膜上看不见,当烘干后漆膜表面出现火山口状的凹坑,直径通常为0.5~3.0mm,不露底的称为陷穴、凹洼、露底的称为缩孔,中间有颗粒的称为鱼眼”产生这一弊病的主要原因是电泳湿涂膜中或表面有尘埃,油污与电泳涂料不相溶的粒子,成为陷穴中心,使烘干初期的湿漆膜流展能力不均衡,而产生涂膜缺陷。

(2)产生原因①被涂物前处理脱脂不良或清洗后又落上油污、尘埃。

②槽液中混入油污,漂浮在液面或乳化在槽液中。

③电泳后冲洗液混入油污。

④烘干室内不净,循环风内含油分。

⑤槽液的颜基比失调,颜料含量低的易产生缩孔。

⑥涂装环境脏、空气可能含有油雾、漆雾,含有机硅物质等污染被涂物或湿涂膜。

⑦补给涂料有缩孔或其中树脂溶解不良,中和不好。

(3)防治方法①加强被涂物的脱脂工序,确保磷化膜不被二次污染。

②在槽液循环系统设除油过滤袋,同时查清油污源,严禁油污带入槽中。

③提高后清洗水质,加强过滤。

④保持烘干室和循环热风的清洁。

⑤调整槽液的颜基比,适当加色浆提高颜料含量。

电泳仪六大常见问题处理方案

电泳仪六大常见问题处理方案

电泳仪六大常见问题处理方案电泳仪是一种广泛应用于分离、纯化和分析生物大分子的仪器设备。

在实际应用中,电泳仪可能会遇到一些问题,影响到实验的准确性和可靠性。

本文将介绍电泳仪六大常见问题的处理方案。

1. Buffer 溶液异常Buffer 溶液是电泳过程中必不可少的一部分。

如果 Buffer 溶液出现问题,会直接影响电泳的结果。

Buffer 溶液的问题可能有以下几种:1.1 Buffer 溶液异常导致电迁移出现偏移解决方案:检查 Buffer 溶液配制是否正确,是否出现过期、变质等情况。

如有异常,应及时更换 Buffer 溶液并重新配制。

通常情况下,Buffer 溶液的 pH 值和离子浓度是导致电迁移偏移的主要原因。

因此,在实验过程中,应尽可能严格按照配制方法进行操作,并注意 Buffer 溶液的质量情况。

1.2 Buffer 溶液盐度过高或过低解决方案:检查 Buffer 溶液配制过程中是否有误,盐度是否超出了所需范围。

如果 Buffer 溶液盐度过高,可以适当减少溶液中的盐量或者改用更适合的 Buffer溶液。

如果 Buffer 溶液盐度过低,则可以适当增加盐量或者加入一些协同剂以提高 Buffer 溶液的离子浓度。

1.3 离子浓度变化过大解决方案:检查电泳过程中是否有电泳缸的漏电现象,避免 Buffer 溶液中溶解的离子浓度发生明显变化。

此外,也可以适当加大电场或增加Buffer 溶液的用量,以提高 Buffer 溶液中离子浓度的稳定性。

2. 电泳缸温度过高在电泳实验过程中,电泳缸的温度过高可能导致电泳结果不准确,需要及时解决。

解决方案:降低电泳缸的温度。

可以采用以下方法:•检查冷却水路线是否通畅,电泳缸的冷却水是否充足。

•提高冷却水流量,以降低电泳缸内的温度。

•检查电泳缸内的电泳盐离子是否过多,它们可能会影响电泳缸的冷却效果。

3. 电泳时间过长在电泳实验中,电泳时间过长可能会导致样本分离失效,需要及时解决。

电泳过程中常见的问题及解决的方法

电泳过程中常见的问题及解决的方法

电泳过程中常见的问题及解决的方法电泳施工中常见漆膜缺陷及防止办法虽然电泳涂装是大量操作变量的动态平衡,操作人员不时地对电泳涂装工艺的控制参数进行监控和调整,就可以获得良好的外观、膜厚和物理特性。

因此,当检测出漆膜缺陷时,就应对它进行一系列准确、可靠的分析,然后及时提出解决办法1 )纯水水质要求在电导率<5μs/cm2 )槽液液温控制在25 -30℃(冷热循环控制)3 )进槽要清洗干净,不要将酸碱带入槽中问题原因解决对策膜厚不足固体份低提高固体份电压低提高电压温度低提高温度漆膜过厚工作周围循环不好通常因泵,过滤器及喷嘴阻塞所致固体份高降低固体份温度高降低温度电导率高提高超滤液排放量电压高降低电压水迹沌水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜色基比过高减少颜料补加,增加树脂含量槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度涂膜粗糙颜料份高减少色浆,增加树脂电导率高超滤,降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀,破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕底材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗凹孔,缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长,严格按工艺操作烘烤温度升温不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙电压过高降低电压溶液温度高降低温度固体分过高稀释溶液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用有机酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时,颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多,渗透能力差,膜层厚薄不均调整溶剂含量,使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗。

凝胶电泳技术中的常见问题与故障排除

凝胶电泳技术中的常见问题与故障排除

凝胶电泳技术中的常见问题与故障排除凝胶电泳技术是一种常用的生物分离与分析技术,广泛应用于分子生物学、遗传学、病毒学、蛋白质研究等领域。

然而,在进行凝胶电泳实验时,常会遇到一些问题和故障,这可能会影响实验结果的准确性和可靠性。

本文将介绍凝胶电泳技术中的一些常见问题,并提供相应的故障排除方法,以帮助解决实验中的困惑和难题。

1. 样品未呈现预期的电泳结果当样品未呈现预期的电泳结果时,可能存在以下原因和解决方法:(1) 样品加载量不足或过多:检查加载体积是否符合实验方案中的要求;如果加载量过多,可能导致电泳带模糊或扩散;如果加载量不足,可能导致电泳带的强度过低。

(2) 样品处理不当:确保样品在电泳前已经完成相应的处理步骤,如DNA片段的酶切、RNA的逆转录等。

(3) 缺乏合适的分子量标记物:使用合适的分子量标记物可以更好地确定待测样品的大小。

(4) 凝胶浓度选择不当:根据待测分子大小选择合适的凝胶浓度,以保证分离效果。

(5) 电场强度设置不合适:根据待测分子大小和凝胶浓度设置合适的电场强度,以避免分子过快地跑出凝胶。

2. 凝胶溶液聚合不完全或聚合杂质过多凝胶溶液聚合不完全或聚合杂质过多可能导致凝胶电泳过程中的故障。

以下是一些常见原因和解决方法:(1) 预聚合剂过期或质量不好:确保使用新鲜且质量良好的预聚合剂。

(2) 常温下保存预聚合液:预聚合液需在4℃下保存,避免过热导致聚合不完全。

(3) 预聚合液pH不适宜:根据所需凝胶的pH要求,调整好预聚合液的pH并进行彻底混合。

(4) 预聚合液中存在气泡:在配制和混合预聚合液时,尽量避免气泡的产生。

(5) 预聚合液中存在杂质:用滤膜过滤预聚合液,去除杂质。

3. 凝胶电泳带模糊或扩散当凝胶电泳带出现模糊或扩散时,可能是以下原因导致的:(1) 电场不稳定:检查电源和电极,确保电场稳定和均匀。

(2) 凝胶浓度选择不当:根据待测分子大小选择合适的凝胶浓度,低浓度凝胶适用于分离长DNA分子,高浓度凝胶适用于分离短DNA片段。

电泳常见问题和解决方法

电泳常见问题和解决方法

阴极电泳常见问题及解决方法一、颗粒(1)现象在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。

(2)产生原因①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。

②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。

③电泳后清洗液脏、含漆量过高,过滤不良。

④进入的被涂物面及吊具不洁,磷化后水洗不良。

⑤在烘干过程中落上颗粒状污物。

⑥涂装环境脏。

⑦补给涂料或树脂溶解不良,有颗粒。

(3)防治方法①将CED槽液的PH值控制在下限,严禁带入碱性物质,加强过滤,加速槽液的更新。

②消除易沉淀的“死角”和产生沉积涂膜的裸露金属件。

③加强过滤,推荐采用精度为25μm的过滤元件,养活泡沫。

④确保被涂面清洁,不应有磷化沉渣,防止二次污染。

⑤清理烘干室和空气过滤器。

⑥保持涂装环境清洁,检查并消除空气的尘埃源。

⑦确保新补涂料溶解良好,色浆细度在标准范围内。

二、缩孔(陷穴)(1)现象在湿的电泳涂膜上看不见,当烘干后漆膜表面出现火山口状的凹坑,直径通常为0.5~3.0mm,不露底的称为陷穴、凹洼、露底的称为缩孔,中间有颗粒的称为“鱼眼”。

产生这一弊病的主要原因是电泳湿涂膜中或表面有尘埃,油污与电泳涂料不相溶的粒子,成为陷穴中心,使烘干初期的湿漆膜流展能力不均衡,而产生涂膜缺陷。

(2)产生原因①被涂物前处理脱脂不良或清洗后又落上油污、尘埃。

②槽液中混入油污,漂浮在液面或乳化在槽液中。

③电泳后冲洗液混入油污。

④烘干室内不净,循环风内含油分。

⑤槽液的颜基比失调,颜料含量低的易产生缩孔。

⑥涂装环境脏、空气可能含有油雾、漆雾,含有机硅物质等污染被涂物或湿涂膜。

⑦补给涂料有缩孔或其中树脂溶解不良,中和不好。

(3)防治方法①加强被涂物的脱脂工序,确保磷化膜不被二次污染。

②在槽液循环系统设除油过滤袋,同时查清油污源,严禁油污带入槽中。

③提高后清洗水质,加强过滤。

④保持烘干室和循环热风的清洁。

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电泳过程中常见的问题及解决的方法
电泳施工中常见漆膜缺陷及防止办法
虽然电泳涂装是大量操作变量的动态平衡,操作人员不时地对电泳涂装工艺的控制参数进行监控和调整,就可以获得良好的外观、膜厚和物理特性。

因此,当检测出漆膜缺陷时,就应对它进行一系列准确、可靠的分析,然后及时提出解决办法
1 )纯水水质要求在电导率<5μs/cm
2 )槽液液温控制在25 -30℃(冷热循环控制)
3 )进槽要清洗干净,不要将酸碱带入槽中
问题原因解决对策
膜厚不足固体份低提高固体份电压低提高电压温度低提高温度
漆膜过厚工作周围循环不好通常因泵,过滤器及喷嘴阻塞所致固体份高降低固体份
温度高降低温度
电导率高提高超滤液排放量
电压高降低电压
水迹沌水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆
起泡工作表所不洁净充分水洗
漆膜外观不丰满颜色基比过高减少颜料补加,增加树脂含量
槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度
涂膜粗糙颜料份高减少色浆,增加树脂电导率高超滤,降低电导率
针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率
漆膜不均匀,破裂槽液温度高降低温度
电压高降低电压
电导率高超滤降低电导率
斑纹地图斑痕底材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗
凹孔,缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆
硬度烘烤时间延长,严格按工艺操作烘烤温度升温
不够流平加溶剂
麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆
条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低
常见故障及其纠正方法
故障产生原因纠正方法
桔皮或表面粗糙电压过高降低电压
溶液温度高降低温度
固体分过高稀释溶液
极距太近加大极距
烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用有机酸调整
针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围
PH 值过低降低溶液酸度
清洗水不干净换清洗水
溶液电导率太高超滤去掉杂质离子
膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤
火山口或油点工件上附有油加强除油工序
槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间
彩虹膜层太薄增加电泳电压
颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间
调配涂料时,颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆
溶剂太多,渗透能力差,膜层厚薄不

调整溶剂含量,使其符合工艺规

不规则图形前处理不彻底加强前处理工序
硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行
涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌
表面有水液用压缩空气吹干
水滴未干即烘烤用压缩空气吹干
电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗。

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