分析性能评估资料

5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）

分析性能评估资料-TBA120FR

一．概述

5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）（以下简称5’-NT试剂）分析性能内容包括空白吸光度、分析灵敏度、线性范围、精密度、准确度等项目的测试，本文参照《5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）》注册产品标准的要求以及试验方法在全自动生化分析仪上对5’-NT试剂相关技术性能指标进行相应的研究评估。

二.测试仪器及参数设置

2.1. 测试仪器：TBA-120FR

2.2. 参数设置：

东芝TBA-120FR参数

Assay Name 5’-NT

L-Reference-H 0-10

L-Linear Range-H 0-80

Reaction Mode RATE UP

Wavelength-Prim/sec 548

Read time-Main 25-32

Read time-Flex 0-0

Linearity -

Blank Read 14-16

Abs Limits 0.5-2.5

Standard S.V ol 6

Reagent 1 R.V ol 200

Reagent 2 R.V ol 100

Decimal Places 2

Units U/L

Calib Mode Linear

K 2766

Blank/Calib Replicates 3-3

BLK Abs Range -2.5-2.5

BLK Water 0.00

BLA Sample S.VOL. 6

C1 #.##

C1 Sample S.VOL. 6

C2-C5

C2-C5 Sample S.VOL.

三.性能测试结果

3.1空白吸光度

用指定空白样品（去离子水）测试试剂（盒），在测试主波长下，测试三次吸光度，取平均值即为试剂空白吸光度测定值。其结果应符合37℃环境下，波长546nm处、光径为1cm 时，A空白≤0.300。

3.2空白吸光度变化率

以蒸馏水调整分光光度计的零点，用指定空白样品（蒸馏水）测试试剂工作液，在波长546nm、37℃条件下稳定5min后测定一次试剂工作液吸光度A1，5min时再测定一次试剂工作液吸光度A2，计算试剂空白吸光度率，空白吸光度变化率△A/min≤0.015（温度37℃、波长546nm、光径1cm）

3.3分析灵敏度

用已知浓度的样本测试试剂盒，记录样本的吸光度值A1与样本经过T（min）后的吸光度值A2，换算为25.00U/L的吸光度变化率△A/min。计算公式为：

吸光度变化率△A/min =〔A2- A1〕/T×C0/C样本 (1)

其中：

A2 =（A2主波-B2副波）

A1 =（A1主波-B1副波）

A2主波——在规定参数下，主波长下反应T时间后的吸光度值；

B2副波——在规定参数下，副波长下反应T时间后的吸光度值；

A1主波——在规定参数下，主波长下的起始吸光度值；

B1副波——在规定参数下，副波长下的起始吸光度值；

T ——反应起始至终点的反应时间（min）；

C0——要求规定的浓度；

C（样本）——实际检测样本的浓度值。

3.4 线性范围

用去离子水（零值样本）稀释接近线性范围上限的高浓度样本，混合成至少5个不同梯度的样品（x i ），分别测试试剂（盒）。每个稀释浓度的样本测试3次，分别求出测定结果的均值（y i ）。以稀释浓度（x i ）为自变量，以测定结果均值（y i ）为因变量求出线性回归方程。按公式（2）计算线性回归的相关系数（r ）。

∑∑∑-=

2

i

2

i

i i

)

y -(y )x -(x )]y )(y x -[(x r (2)

相对偏差= 100%×

估计值

估计值Yi Yi Y -i (3)

|绝对偏差|=| Y i-- Y i 估计值| (4)

式中：

X i ──测定管溶液的理论浓度；

Y i ──与测定管溶液浓度相对应的实际测量值； i──1，2，3，……，n ；

将稀释浓度（x i ）代入线性回归方程，计算出Y i 的估计值，按公式（3）或（4）计算Y i 与估计值的相对偏差或绝对偏差。

3.5 测量精密度 3.5.1 重复性

在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复10次，按公式（5），公式（6）计算其变异系数（CV ）。

S =

(5)

%100(%)⨯=

S

CV ………………….（6） 式中：

X――系列测定值；

X ――测定均值；

n――测定次数； S――标准差。

3.5.2 批间差

用控制物质分别测试3个不同批号的试剂（盒），每个批号测试3次，分别计算每批3次检测的均值i x （i=1，2，3），按公式（7），公式（8）计算其相对偏差（R ）。计算公式为：

3

321x x x x T ++=

(7)

%100min

max ⨯-=

T

x x x R (8)

式中：

max x ――i x 中的最大值； min x ――i x 中的最小值； T x ――3批试剂检测均值。