逆流色谱分配系数计算
色谱基础理论分配系数与分配比
•速率理论
将分配比与传质阻力系数联系了起来,进而评价柱效
10
4 分配系数、分配比的应用
2o 分离条件选择上的应用 1 1 k R n ( )( ) 4 k 1 式中 ：
•R：分离度； •n：理论塔板数； •α: 相对保留值； •k：分配比；
根据上述关系以及实验对分离度的要求，可以通过改变 柱温、相比等条件，得到合适的分配比，从而达到实验 要求的分离度
式中 ： •us ：组分在固定相中的线速度；
• u ：流动相的线速度；
滞留因子也可以用质量分数表示
mM 1 1 RS w ms mM 1 ms / mM 1 k
8
3 分配系数分配比之间关系
假设色谱柱长为L
则组分和流动相通过色谱柱所需要的时间分别为：
由以上各式可得
L tR us
分配系数、分配比及在色谱分析 中的应用
2019/3/2
朱倩倩 1000296
2
1 分配系数
• 分配过程
物质在固定相和流动相（气相）之间发生的吸
附、脱附和溶解 、挥发的过程
• 分配系数
在一定的温度和压力下，组分在两相之间达到 分配平衡时的浓度比
3
1 分配系数
式中 ： •cs ：组分在固定相中的浓度； •cM：组分在流动相中的浓度；
cs K cM
气相色谱分析原理： 不同物质在两相间具有不同的分配系数 分配系数是色谱分离的依据
4
2 分配比
• 分配比（容量因子或容量比）
在一定的温度和压力下，组分在两相之间达 到分配平衡时，组分在两相中的质量比
式中 ： •ms ：组分在固定相中的质量； •mM：组分在流动相中的质量；
5ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
逆流色谱
逆流色谱基础
• 逆流色谱仪器体系
1) 重力作用 2) 流体静力学平衡体系 (HSES) 特征：a) 由一系列腔体或小室组成 b) 一个旋转轴，离心力恒定 3) 流体动力学平衡体系 (HDSE) 特征：a) 缠绕的聚四氟乙烯管 b) 两个旋转轴，离心力可变
逆流色谱基础
• 逆流色谱的基本色谱理论
CCC是一种特殊的液相色谱技术，利用特殊的 色谱柱实现液态固定相的有效保留。作为一种 色谱技术，遵循基本的色谱塔板数理论和经典 的色谱公式。
甲醇，正丙醇 ，异丙醇 甲酸，乙酸
高速逆流色谱
• 洗脱方式 1) 等度洗脱 2) 梯度洗脱
a) 三元溶剂体系 b) 多元溶剂体系
3) 双向洗脱
高速逆流色谱
• 检测 1) 紫外-可见光检测器 2) 蒸发光散射检测器 3) 傅里叶红外光谱检测器 4) 薄层色谱检测器 5) 质谱检测器
高速逆流色谱
• 优点
高速逆流色谱
• 简介
高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography, HSCCC)是20世纪80年代，由Ito教授研究和发展起来的一 种现代色谱分离制备技术，HSCCC建立在一种特殊的流体 动力学平衡基础上，利用螺旋管的高速行星式运动产生的 不对称离心力场，实现两相溶剂体系的充分保留和有效混 合及分配，从而实现物质在两相溶剂中的高效分离。
1) 两相的界面张力 2) 比重差 3) 输液管的口径 4) 分离管的材料
液滴逆流层析
• 装置：三部分组成 1) 输液部分：微型泵、贮液槽、进样器 2) 分离管部分 3) 样品收集部分：检测器、自动收集仪 • 应用实例 柴胡皂苷a, d (C-16羟基端基异构体) 人参皂苷的分离 • 与逆流分配比较：优点
分配系数计算公式
分配系数计算公式好的，以下是为您生成的文章：咱今儿来聊聊分配系数计算公式这个事儿。
在化学的世界里，分配系数计算公式就像是一把神奇的钥匙，能帮咱打开很多神秘的大门。
这分配系数啊，简单说就是描述一种物质在两种不相溶的溶剂中分布情况的一个重要指标。
那分配系数的计算公式到底是啥呢？一般来说，它可以表示为：在一定温度下，一种溶质在两种互不相溶的溶剂中达到平衡时，溶质在两种溶剂中的浓度之比。
假设溶质在溶剂 A 中的浓度是 C₁，在溶剂 B 中的浓度是 C₂，那分配系数 K 就等于 C₁ / C₂。
就拿我曾经遇到的一件事儿来说吧。
当时我带着学生们在实验室做实验，研究碘在水和四氯化碳中的分配情况。
我们先把碘水和四氯化碳倒入分液漏斗，然后充分振荡，静置分层。
这时候，神奇的现象出现了，上层水层颜色变浅，下层四氯化碳层变成了紫红色。
我们分别测量了碘在水层和四氯化碳层中的浓度，通过计算分配系数，深入理解了碘在这两种溶剂中的分配规律。
在实际应用中，分配系数计算公式用处可大了。
比如说在萃取操作中，我们要想把某种溶质从一种溶剂中有效地提取到另一种溶剂里，就得先了解它的分配系数。
如果分配系数大，那就说明溶质在新溶剂中的溶解度大，萃取效果就会好。
再比如，在药物研发过程中，研究药物在不同组织和体液中的分配系数，能帮助科学家们预测药物在体内的分布和代谢情况，从而优化药物的设计和使用。
还有在环境科学领域，了解污染物在水和土壤、水和大气等不同介质中的分配系数，对于评估污染物的迁移、转化和生态风险也非常重要。
总之，分配系数计算公式虽然看起来只是一个简单的数学式子，但它背后蕴含着丰富的化学原理和实际应用价值。
通过它，我们能更好地理解物质在不同环境中的行为，为解决各种化学问题提供有力的工具。
希望通过我的讲解，能让您对分配系数计算公式有更清晰的认识和理解，在化学的学习和研究中能够更加得心应手！。
色谱基础理论 分配系数与分配比
RS
us u
式中 ：
•us ：组分在固定相中的线速度； • u ：流动相的线速度；
滞留因子也可以用质量分数表示
RS
w mM ms mM
1
1 ms / mM
1 1 k
8
3 分配系数分配比之间关系
假设色谱柱长为L
则组分和流动相通过色谱柱所需要的时间分别为：
tR
L us
由以上各式可得
tM
L u
tR tM (1 k)
k tR tM tR'
tM
tM
据上式可知：k可由实验测得
9
4 分配系数、分配比的应用
1o 色谱分离理论中的应用
色谱分离的基本理论的两个方面： •组分在两相间的分配情况 •组分在色谱柱中的运动情况
色谱分离的两个理论： •塔板理论
解释了色流出曲线的形状以及极大浓度的位置
•速率理论
将分配比与传质阻力系数联系了起来,进而评价柱效
气相色谱分析原理：
不同物质在两相间具有不同的分配系数 分配系数是色谱分离的依据
4
2 分配比
• 分配比（容量因子或容量比）
在一定的温度和压力下，组分在两相之间达 到分配平衡时，组分在两相中的质量比
k ms mM
式中 ： •ms ：组分在固定相中的质量； •mM：组分在流动相中的质量；
5
3 分配系数分配比之间关系
10
4 分配系数、分配比的应用
2o 分离条件选择上的应用
R1
n
(
1)
(
k
)
式中 ： 4
k 1
•R：分离度；
•n：理论塔板数；
•α: 相对保留值；
•k：分配比；
分配系数和分配比的关系
色谱仪分析中分配系数K与分配比k的关系：
K = CS/CM =（mS/VS）/（mM/VM）= k×（VM/ VS）= k×β
式中：VM为流动相体积，即色谱柱内固定相颗粒间的空隙体积。
VS为固定相体积。
对于不同类型色谱柱，VS的含义不同。
分配色谱柱：VS为固定液体积；吸附色谱柱：VS为固体吸附剂表面容量。
一、分配系数与分配比都是与组分和两相的热力学性质有关的常数，随分离柱温度和柱压的变化而变化。
二、分配系数只决定于组分和两相性质，与两相相比无关。
分配比不仅决定于组分和两相性质，还与两相相比有关。
三、分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数，数值越大，该组分的保留时间越长。
但是对于一给定色谱体系（分配体系），组分的分离最终决定于组分在两相中的相对量，而非相对浓度，因此，在实际工作中，分配比比分配系数更有意义。
四、分配比可以由实验测得。
高速逆流色谱操作
高速逆流色谱操作高效逆流色谱方法整理分离苯酚与间苯二酚（254nm）1、分体式溶剂：正己烷:乙酸乙酯:无水乙醇:超纯水=1:1:1.2:0.8（均为分析氢铵）所有试剂都不断扩大400倍体积，分液圆柱形：先搅拌、乙酸乙酯、正己烷、无水乙醇搅匀，换气，静置，分层，针对本实验，上层并作紧固二者，下层并作流动二者（水+乙醇做为下二者）中间部分弃置。
用瓶子坏掉后超音波平移变换5～10min，不必过长时间。
原理：萃取每1s17次，分配系数k=0.5～2之间为宜。
2、预演检测器30min以上（时长7-4h），选不好波长（6个，215～405nm），收集时间应当尽量短，流动适当尽量多分体式。
（压力max=2mpa、r=1000转回、流速max=40ml/min、入样量=30～300mg，max=500mg）样品预处理：只能用分离系统中的溶剂，一般用流动相溶）3、泵满上二者，并作紧固二者泵入固定相，白色接d打开，一端放入量筒中，调流速30～40ml/min，再按泵的power，再按run，当固定相流到白色接d处即泵满。
再按stop，上相不流入转轴部分。
4、均衡（40～50min）白色d接好，泵放入流动相，废液管放入量筒。
调所需波长、吸光值、流速。
（流速不高于3ml/min，一般1.5-2之间，否则固定相被冲出去。
）先上开转轴部分的power，阳入输出功率为900转回再按泵的run，看看废液的分层or喷光度变化or基线的均衡去推论与否已达至均衡。
总体积=285ml柱体积+20ml进样器+10ml柱外=315ml紧固二者留存率为=总体积-紧固二者流入的量100%（通常40%～50%即可）柱体积（285ml）手动调节吸光度为0，按load，再用针推进去气泡，进样管放入样品中，再用针拉以便进样。
再按inject，再按电脑图谱中的绿色图标，即可记录图谱。
测定完全后，再按红色按钮。
测量时存有气泡：则表示压力下降，化解用夹子卡住管，用湖南金证制止气泡步入拆分系统（压力可以下降，但不必大于0.3～0.5mpa）定量分析：>20ml即可，用30ml定容样品，全注入，进样圈容量为20ml，另外剩下的样品用针拉出，丢弃。
高速逆流色谱样品分配原理08-02-15
高速逆流色谱中样品分离原理：样品进入分离柱内，分离管柱内的轻相和重相是动态的。
随着逆流色谱仪的高速旋转产生的二维力场，轻相由于比重轻相对重相摔在分离管的内侧；而重相相对轻相摔在分离管的外侧。
样品进入分离管之后，随着流动相（重相）慢慢穿过轻相和重相。
在穿越过程中根据样品组分对轻相、重相的分配系数不同而保留时间发生变化；对轻相分配系数大的组分的保留时间长，而对重相分配系数大的组分的保留时间则短。
如图所示：————————————————————————————————————ooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo………………………………………………………………………………………………①②③④⑤⑥⑦…………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………图1. 样品进入分离管时的情况………………――――轻相oooooooooooo ――――重相 ①②③④⑤⑥⑦——样品（7组分）————————————————————————————————————ooooooooooooooooooooooooooo ②ooooooooooooooooooo ⑦oooooooooooooooooooooooo…………………④……………………………………………………………………………………………①…③……⑥…………………………………………………………… …………………⑤……………………………………………………………………………样品分离管内侧 分离管外侧 样品分离管内侧 分离管外侧———————————————————————————————————ooooooooooooooooooooo ooooooooooooooooo。
高速逆流色谱分离技术
生药
HPLC法测定分配系数
AUi 2 VL AUi 2 VL Ki Ki A A V Ui 1 Ui 2 U A A V
Ui1 Ui 2 U
生药
溶剂系统选择的基本步骤
(1)首先预测要分离物质的极性, 溶解性特点，粗 选几个溶剂体系。 (2)建立目标化合物的TLC、HPLC分析条件。 （3）利用HPLC测定K，并计算容量因子a，2>K>0.5, a>2，能够获得理想的分离。 （4）制备性分离。
利用一种特殊的流体动力学现象使互不混溶的两相溶剂(固定
相和流动相)在螺旋管中高效地接触、混合、分配和传递
其中固定相以一种相对均匀的方式分布在一根聚四氟乙烯管 绕成的螺旋管中 流动相以一定的速度通过固定相，并按照被分离物质分配系 数的不同依次洗脱而获得分离
特殊的流体动力学
生药
固定相的保留
缺点：流动相流速低，每小时只有十几毫升；分离过程 长，需要几十小时才能完成一次几个组分的分离．
生药
3.高速逆流色谱的原理
利用螺旋柱在行星运动时产生的离心力，使互不 相溶的两相不断混合，同时保留其中的一相，利用恒 流泵连续输入另一相，溶质在两相之间反复分配，按 分配系数的次序，被依次洗脱。
生药
液－液分配色谱
利用螺旋管的方向性和同步行星式运动产生的二维 离心力场形成的单向性流体动力学平衡（HDES） 从而实现流动相高速移动时固定相的保留
生药
混合区：在靠近离心轴
心大约有四分之一的区 域，两相的激烈混合
静置区：两相溶剂分成
两层，重相在外部，轻 相在内部来自以1000转/分的速率进行旋 转，在二维力场的作用下 分离管柱内混合和传递的 频率可达到17次/S，从而 实现高效的分离
逆流色谱法
7.4.1 DCCC (液滴逆流色谱)
DCCC (液滴逆流色谱): 是在逆流分溶法基础上创建的色谱
装置，可使流动相呈液滴形式在固定相间交换，促使溶质中各组 分在两相之间进行分配，达到分离效果。
7.4.1 DCCC (液滴逆流色谱)
缺点：流动相流速低，每小时只有十几毫升；分离过程 长，一般需要几十小时才能完成一次几个组分的分离．
7.4.2 旋转小室逆流色谱
7.4.3 离心逆流色谱法
离心逆流色谱法：仪器工作的时分离柱要绕 中心轴在设备中高速转动，因为高速旋转产 生的离心力可使两相剧烈地反复混合分层， 实现快速高效的分离。
7.4.3 离心逆流色谱法
7.4.3.1 非行星式逆流色谱仪：主要包括分离柱室 螺旋管式和非螺旋管式，主要是匣盒式离心逆 流色谱仪。
7.4.4 高速逆流色谱法
混合区：在靠近离心轴
心大约有四分之一的区 域，两相的激烈混合
静置区：两相溶剂分成
两层，重相在外部，轻 相在内部
以1000转/分的速率进行旋 转，在二维力场的作用下 分离管柱内混合和传递的 频率可达到17次/S，从而 实现高效的分离
7.4.4 高速逆流色谱法
K ＝ Cs/Cm
7.4.4.4 手性分离
手性分离：通过向固定相和流动相中 加入手性试剂，可以采用HSCCC实 现手性制备的目的，手性试剂的选择 至关重要，最好它溶解于固定相或流 动相中（报道非常有限）。
7.4.3.2 行星式逆流色谱仪：分离柱几乎全是利 用聚四氟乙烯管绕成的螺旋线圈。
7.4.4 高速逆流色谱法
高速逆流色谱技术(HSCCC) 是一种不用任何同态载体的 液．液色谱技术，其原理是 基于组分在旋转螺旋管内的 相对移动而互不混溶的两相 溶剂间分布不同而获得分离， 其分离效率和速度可以与 HPLC相媲美。
色谱法 分配系数
色谱法是一种常用的分离和分析技术，通过不同物质在固定相（固定在色谱柱上）和移动相（流经柱的溶剂）之间的相互作用，实现样品中化合物的分离。
而分配系数（Partition Coefficient）则是衡量化合物在两种相中分配程度的指标。
在色谱法中，分配系数通常用来描述样品中的化合物相对于固定相和移动相的亲和性。
分配系数K的定义为化合物在固定相和移动相之间的浓度比值，即K = [化合物在固定相中的浓度] / [化合物在移动相中的浓度]。
K值大于1表示化合物更亲和于固定相，K值小于1表示化合物更亲和于移动相。
分配系数的大小可以受到多种因素的影响，包括物质的极性、分子大小、溶剂选择等。
分配系数的测定对于分析化学和药物研究等领域是非常重要的，它可以用于定量分析、物质提取和分离等方面。
请注意，以上只是对于色谱法和分配系数的一般解释，具体的实验条件和应用领域可能会有所差异。
如果需要更加详细的信息，请参考相关的参考资料或者向科学专家咨询。
高效逆流色谱仪HPCCCC常见问题解答
高效逆流色谱仪HPCCC常见问题解答1.什么情况下需要使用高效逆流色谱H PCCC?HPCCC是一种独特的技术，可以在低压状况下实现高质量的色谱纯化分离，并且进样量大，溶剂使用量低。
在化学纯化技术方面存在着许多挑战；但是HPCCC特别适用于下列情况：z样品的溶解度不好，使用现有的其它纯化技术无法满足要求时z从未经加工的原料样品中直接提取目标组份时z产品开发过程中，涉及到多个制备级别时使用HPCCC的主要优势:z无样品损失——因为两相（流动相和固定相）都是液体，样品可以全部回收z高通量技术——液/液分配体系除了有助于增加样品的溶解度，还能加大样品负载量，实现高通量的效果z消耗溶剂少——处理相同数量的未加工原料样品，这种技术消耗溶剂量仅为（其它技术的）10%z工艺放大十分容易-——由于柱子填料容易再生，在任何条件和所有级别设备的操作中，分离条件非常容易复制。
2.高效逆流色谱HPCCC是如何发展起来的？HPCCC是从液—液萃取技术发展而来的。
通常在一个分液漏斗中，使样品溶解在两相溶剂体系中，激烈振荡，静置待两相发生分离。
由于组分在两相溶剂中的溶解度不同，目标组分就会在两相中进行分配。
待分配平衡后，从分液漏斗中移走重相，然后混合另一新的更轻相或者加入一些更重相到分液漏斗里，重复萃取过程。
目标组分将再次被分配，如此反复多次，被分离样品的纯度就会越来越高。
上述方式尽管有效，但很明显既费时又费力，因此需要对分液漏斗进行改进。
Craig发明了非连续逆流分溶装置（Craig Counter-Current Distribution Apparatus），该装置由一系列分液漏斗连接而成，两相不混溶液体在分液漏斗间有序地重复混合、倾析，最终使溶质以逆流分配的方式分离在不同的漏斗中（Droplet Counter-CurrentChromatography，DCCC），该装置由一系列通过毛细管连接的垂直管组成。
这种设计能够让其中一相，固定相(SP)保留在管中，另一相流动相 (MP)从管中流出，如果流动相相对密度大就从设备顶端泵入。
高速逆流色谱法分解
1.
2.
3.
减少了溶质分子与固体支撑体之间各种复杂的相互作 用； 不仅可以获得高纯度的分离组分； 同时具有较高的回收率和重现性。
逆流色谱的发展
20世纪50年代，逆流分溶法（CCD）被广泛用于天然产 物的分离。有设备庞大复杂、溶剂消耗大、分离时间太长 等缺陷。
20世纪70年代，液滴逆流色谱（DCCC）利用重力场将 固定相保留在管形柱中，使流动相以液滴形式通过固定相。 缺陷是分离时间长，溶剂体系有限。 改进后的离心分配色谱和螺旋管式逆流色谱，利用离心力 场来实现固定相的保留，缩短了分离时间。
庚烷-甲醇-水体系：庚烷（固定相）水相（流动相） 乙酸乙酯-正丁醇-水体系：水（固定相）乙酸乙酯（流动相） 用于糖苷混合物的分离 糖苷溶解度：正丁醇 > 水 > 乙酸乙酯
（2）多元溶剂体系：情况复杂
正庚（己）烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系 上相：正庚（己）烷-乙酸乙酯有机相 下相：水-甲醇 甲醇变化 上相溶解在水相中
参数
固定相
HSCCC
液体
HPLC
固体
机理
溶质与固定相作用 上样量 分离效率
液-液分配（简单）
分配、吸附、离子交换、 体积排阻等（复杂）
与液体固定相的整个体 在固定相与固体支撑体 积相接触 的界面相互作用 高 低 中等 高
操作
费用 危险性
容易
便宜 高速运转产生机械故障
复杂
昂贵 安全
HSCCC与HPLC是互补的分离技术
2、柱系统的准备
1. 2.
固定相注入螺旋管柱内 重相为固定相：尾头 轻相为固定相：头尾
仪器以选定转速转动 流动相以合适流速泵入柱内 检测器基线稳定时，柱系统准备就绪 进样分析
逆流色谱操作实验报告
一、实验目的1. 熟悉逆流色谱的基本原理和操作方法；2. 学会利用逆流色谱技术对混合物进行分离纯化；3. 了解逆流色谱在中药成分分离中的应用。
二、实验原理逆流色谱是一种液-液分配色谱技术，利用液体固定相和流动相之间的分配系数差异，实现混合物中各组分的有效分离。
实验中，将待分离的混合物加入固定相中，通过改变流动相的组成，使各组分在两相之间发生逆流分配，从而实现分离。
三、实验材料1. 仪器：逆流色谱仪、色谱柱、离心机、微量注射器、容量瓶、移液管等；2. 试剂：固定相、流动相、待分离混合物等；3. 药品：中药样品、分析纯试剂等。
四、实验步骤1. 调节逆流色谱仪，将色谱柱固定在离心机上进行操作；2. 准备固定相和流动相，根据实验要求配制不同浓度的流动相；3. 将待分离混合物加入固定相中，调整固定相的体积，使其充满色谱柱；4. 开启离心机，使色谱柱产生离心力，使固定相和流动相分离；5. 根据实验要求，逐渐改变流动相的组成，使各组分在两相之间发生逆流分配；6. 收集各组分，进行检测和分析。
五、实验结果与分析1. 实验过程中，观察色谱柱中固定相和流动相的分离情况，记录各组分分离时间；2. 根据分离时间，分析各组分在两相之间的分配系数差异，判断分离效果；3. 对分离得到的各组分进行检测和分析，确定其纯度和含量。
六、实验讨论1. 逆流色谱操作过程中，固定相和流动相的选择对分离效果有很大影响。
实验中，应根据待分离混合物的性质和实验要求，选择合适的固定相和流动相；2. 实验过程中，离心机的转速和温度对分离效果也有一定影响。
应根据实验要求调整离心机参数，以获得最佳分离效果；3. 逆流色谱在中药成分分离中具有广泛的应用前景。
实验结果表明，逆流色谱可以有效地对中药样品中的活性成分进行分离纯化，为中药现代化研究提供有力支持。
七、实验总结本次实验成功地将逆流色谱技术应用于混合物的分离纯化，掌握了逆流色谱的基本原理和操作方法。
实验结果表明，逆流色谱在中药成分分离中具有广泛的应用前景，为中药现代化研究提供了有力支持。
高速逆流色谱法
基本两相溶剂体系 正庚（己）烷-甲醇 正庚（己）烷-乙腈 正庚（己）烷-甲醇（或乙腈）-水 氯仿-水 乙酸乙酯-水 正丁醇-水
辅助溶剂 氯烷烃 氯烷烃
甲醇，正丙醇，异丙醇 正己烷，甲醇，正丁醇 甲醇，乙酸
几种常用的溶剂体系选择方法
分配系数测定法（K:0.5-2，用分析型HPLC确定） HPLC扫描法
逆流色谱的发展
20世纪50年代，逆流分溶法（CCD）被广泛用于天然产物 的分离。有设备庞大复杂、溶剂消耗大、分离时间太长等 缺陷。
20世纪70年代，液滴逆流色谱（DCCC）利用重力场将固 定相保留在管形柱中，使流动相以液滴形式通过固定相。 缺陷是分离时间长，溶剂体系有限。
改进后的离心分配色谱和螺旋管式逆流色谱，利用离心力 场来实现固定相的保留，缩短了分离时间。
梯度洗脱 （1）三元的溶剂体系
选择溶剂1和溶剂2为两种互溶溶剂（梯度溶剂）， 溶剂3不与前面任何一种互溶。
庚烷-甲醇-水体系：庚烷（固定相）水相（流动相） 乙酸乙酯-正丁醇-水体系：水（固定相）乙酸乙酯（流动相）
用于糖苷混合物的分离 糖苷溶解度：正丁醇 > 水 > 乙酸乙酯
（2）多元溶剂体系：情况复杂
2002年，螺线形圆盘柱式高速逆流色谱，改善保留。
高速逆流色谱（HSCCC）
High-speed countercurrent chromatography
建立在一种特殊的流体动力学平衡基础上，利用螺旋 管的高速行星式运动产生的不对称离心力场，实现两 相溶剂体系的充分保留和有效混合及分配，从而实现 物质在两相溶剂中高效分离。
分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相)， 然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋 管中无限次的分配。仪器转速越快，固定相保留越多， 分离效果越好，且大大地提高了分离速度，故称高速 逆流色谱。
色谱法原理及公式笔记
死体积VM: VM = tM.F0(流动相体积流速)
保留体积VR: VR= tR.F0(流动相体积流速)
调整保留体积VR’:VR’= VR- VM 相对保留值r21: r21= VR’(2)/ VR’(1) = tR’(2)/ tR’(1)
r21只与柱温,固定相性质有关,是色谱定性分析的重要参数,可用来表示固定 相的选择性
分配系数：K=CS/CM（浓度之比）
分配比k: 在一定温度,压力下,在两相间达到平衡时,组分在两相之中的质量比
k=nS/nM k=KVS/VM r21=k2/k1=K2/K1 k= tR’/ tM
根据塔板理论，待分离组分流出色谱柱时的浓度沿时间呈现二项式分布，当色谱 柱的塔板数很高的时候，二项式分布趋于正态分布。则流出曲线上组分浓度与时 间的关系可以表示为： c_t=c_0/(σ*√(2π))*e^(-(t-t_R)^2/(2*σ^2))
调整保留时间 adjusted retention time（tR’） ：保留时间减去死时间等于调整保 留时间。 色谱峰底宽W ：由色谱峰的两边拐点做切线， 与基线交点的距离。 半峰高宽度W ½ ：色谱峰高一半处的峰宽。也 称为色谱峰半高宽度。
理论塔板数:
N=16
R W1
一：基本公式
色谱图：若干物质的流出曲线，即在不同时间上 的浓度或者响应的大小。 保留时间 retention time（tR） ：样品注入到色 谱峰顶出现的时间。
保留体积retention volume（VR） ：从注射样品 到色谱峰值出现时，通过色谱 系统的流动相的体 积。一般可以用保留时间乘流动相线速度得到。 死时间 dead time（tM） ：不被保留的样品通过色谱柱的时间。
这一方程称作流出曲线方程，式中c_t为t时刻的组分浓度；c_0为组分总浓度， 即峰面积；σ 为半峰宽，即正态分布的标准差；t_R为组分的保留时间。
逆流色谱技术
操作复杂，需要高电压和特殊缓冲液。
03 逆流色谱技术的优势与局 限性
优势
分离条件温和
逆流色谱技术的分离条件相对温和，可以 避免一些对温度、压力敏感的化合物的分 解和变性。
高分离效率
逆流色谱技术采用连续分离的原理，可以 在一次分离过程中获得高纯度的产品，具 有较高的分离效率。
节约试剂
由于逆流色谱技术采用流动相作为分离介 质，不需要使用大量的固定相，因此可以 大大节约试剂成本。
工作原理
原理
基于液液分配平衡的原理，利用不同 组分在两相溶剂中的分配系数不同实 现分离。
过程
将两相溶剂在旋转的分离柱中连续流 动，样品注入其中，各组分因分配系 数差异在两相间进行反复分配，从而 实现分离。
应用领域
生物医药
用于分离和纯化生物活性物质 、药物中间体和药物成分等。
天然产物
用于分离和纯化植物、动物和 微生物中的次生代谢产物，如 色素、香精油、生物碱等。
食品中营养成分的分离
逆流色谱技术可用于分离食品中的营养成分，如脂肪酸、维生素、矿物质等，有 助于了解食品的营养价值和功能。
食品添加剂的检测
逆流色谱技术可以用于检测食品中的添加剂，如色素、防腐剂等，保障食品的安 全性和质量。
在其他领域的应用
环境样品的分析
逆流色谱技术可以用于分离环境样品 中的污染物和有害物质，如重金属、 农药残留等，有助于环境监测和污染 控制。
原理
利用物质在固定相上的吸附能力差异实现物质的分离。
应用
适用于分离具有不同吸附能力的物质，如黄酮类、皂苷类等。
优点
分离效果好，分离范围广。
缺点
固定相的制备较为困难，且重现性较差。
逆流电泳法
分配系数的计算公式化学
分配系数的计算公式化学嘿，咱今儿来聊聊化学里那个有点神秘但又挺重要的分配系数的计算公式。
你知道吗，这分配系数就像是化学世界里的一个“小裁判”，默默决定着物质在不同相之间的分配情况。
先来说说这分配系数的定义吧。
简单来讲，它就是在一定温度和压力下，某种溶质在两个互不相溶的溶剂中达到平衡时，在这两种溶剂中的浓度比值。
听起来有点绕？别担心，咱结合实际情况来理解。
就比如说，咱做个实验，把一种溶质放进两种不混溶的溶剂里，像油和水。
等它们达到平衡了，这溶质在油里的浓度除以在水里的浓度，得到的这个比值就是分配系数。
那分配系数的计算公式是啥呢？一般来说，用 C1 / C2 来表示，其中 C1 是溶质在溶剂 1 中的浓度，C2 是溶质在溶剂 2 中的浓度。
给您讲讲我之前的一次经历。
有一回在实验室里，我们研究碘在四氯化碳和水中的分配情况。
那碘一加到这俩溶剂里，就开始了它们的“分配之旅”。
我们小心翼翼地测量着碘在四氯化碳和水中的浓度，然后按照公式去计算分配系数。
这过程可真是得细致再细致，稍微有点偏差，结果就差老远啦。
这分配系数在实际应用中可重要着呢！比如说在萃取分离的过程中，我们就可以根据不同物质的分配系数差异，来把我们想要的东西从混合物里给“挑”出来。
再比如说，在环境科学里，研究污染物在土壤和水体之间的分配，也得靠这分配系数。
知道了它，就能更好地预测污染物的迁移和扩散，从而采取相应的措施来保护环境。
在化学工业生产中，分配系数更是大显身手。
通过了解物质的分配系数，优化工艺条件，提高产品的纯度和收率。
总之，这分配系数的计算公式虽然看起来简单，但其背后蕴含的意义和作用可不容小觑。
它就像一把神奇的钥匙，能帮助我们打开化学世界里的很多扇未知的门。
希望您通过我这一番不太专业但绝对真心的讲解，对分配系数的计算公式能有更清楚的认识！。
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分配系数的测定
1.确定实验所需要的溶剂体系，溶剂按比例配置于分液漏斗中，充分震荡后静置分层。
上
相为固定相，下相为流动相。
逆流色谱样品为白芷粗品。
2.称取5.0 mg的白芷样品溶于2.0 ml上相和2.0 ml下相，充分分配后，静置分层。
3.从上一步溶液中分别取出1.0 ml的上相和下相，分别转移至之前准备好的锥形瓶中，旋
蒸干。
4.分别用1.0 ml色谱纯甲醇进行超声溶解，确保样品全部溶解。
5.用HPLC法测定分配系数。
分别计算在上相溶解后测得的峰面积除以该物质在下相溶解
后测得的峰面积。