干细胞的临床应用

硬化近两年进展迅速。开展的较多的有沈 阳军区总医院郭晓钟教授，济南军区江学 良教授，济南千佛山医院徐昌青教授，还 有湖南省医院等等。 下面是沈阳军区总医院郭晓钟教授做的102 例病例总结。
郭晓钟教授（沈阳军区总医院） 小结
（一）、102例肝硬化患者，术后复查显示：血浆蛋 白改善在各项指标中最显著；其次为凝血功能的 改善。提示自体骨髓干细胞移植入肝内后，第2周 即出现生化指标改变，至第4周达到峰值，可改善 肝脏合成蛋白功能。对目前肝硬化腹水的患者具 有积极意义。 （二）、第2个明显改善的指标为纤维蛋白原和凝血 酶原时间，同样代表肝脏的合成功能提高。上述2 项指标的改善证明自体骨髓干细胞移植是治疗肝 硬化的有效临床手段。
2、如何治病？--------（1）



应用 应用关心的是疗效 什么途径给细胞 用什么方法给细胞 给细胞的部位 什么时间段给细胞 关心细胞数量存活率 细胞治疗适应那些病种



研究 那一类细胞在起作用 干细胞是如何修复受损的 组织 如何在体外模拟环境实验 用动物实验证明 用荧光物质标记证明 实验有没有重复性
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干细胞能有效治疗各种细胞损伤性疾病是全世界主流医学不争的 事实，但是细胞是如何修复受损组织的，可塑性是如何实现的等等，有 待于基础医学家去研究。对临床医生来讲，疗效肯定的、治疗技术成熟的 方法就应该开展，先解决病人的需求，用新的医疗技术占领医疗市场。如 果等到像青霉素一样普及时再用那将落伍于时代。1928年英国科学家弗 莱明。发现了青霉素，1935年产品问世，其抗菌机理争论了半个世纪。直 到上世纪末国际药理学会才统一了观点。临床医生应该 更关心安全性、 有效性、治疗剂量、治疗方法、适应症等。
1、长期存活
1、干细胞长期存活不
断地自我繁殖的特性 干细胞不论在体内还 是体外培养都能表现 为长期存活，不断地 自我繁殖。只有长期 存活，才能用于临床 治疗。
成体干细胞的生物学特性-为什么能治病
2、可塑性
成体干细胞的可以 跨系跨胚层分化为所 有的组织细胞类型的 特性，称为可塑性。 这是成体干细胞能够 治疗各种细胞损伤性 疾病的理论基础。
骨髓中的干细胞比外周血的干细胞原始。 脐带血比骨髓更为原始。 脐带血的干细胞自我繁殖能力最强。繁殖
速度最快。骨髓次之。 脐带血中干细胞的比率最大，骨髓次之。 外周血中的干细胞更接近终端细胞或叫祖 细胞或前体细胞 。
1、成体干细胞的生物学特性-为什么能治病
成体干细胞的生物学特性-为什么能治病
2、如何治病？-----（2）（医生的关心）
安全性 细胞收集率高，细胞数量大。 保留所有的干细胞/祖细胞，干细胞种类全
干细胞表面没有任何标记物，细胞活性好
细胞体积小
2、如何治病？-----（3）细胞治疗与组织器官移植区别
＊器官移植是结构、功 能的取代。 器官移植（除皮肤移 植以外）器官的来源 基本上全是异体。 ☆器官移植的器官来源 有限 ◇器官移植仅限于器官 功能衰竭
成体干细胞的生物学特性-为什么能治病
3、化学趋向性
由于成体干细胞具有特殊的
生物学多样性，特别是多相 分化潜能，而且成体干细胞 的转分化常发生在病理情况 下，干细胞是向病理部位迁 移，成为病理部位的前体细 胞，并分化为终末成熟细胞 ，因此不仅可以利用干细胞 来修复组织的损伤，而且可 以把它作为多种疾病细胞替 代治疗和基因治疗的理想载 体”。干细胞可以作为细胞 治疗理想的选择，这是大家 公认的事实。关键在于“干 细胞向病理部位迁移”，称 为化学趋向性
组织工程--生产器官 诱导分化成单能干细胞 扩增后直接使用 克隆性研究
应用热点干细胞: 骨髓干细胞 脐带血干细胞 外周血干细胞
直接治疗 诱导分化 组织工程
骨髓、脐带血、外周血来源的干细胞比较
脐带血
粒单系集落生成细胞 集落数量( CFV-GM )
骨髓 112±4 4-6天
粒单混合
外周血 12±2 7天以上
＊细胞治疗是修复受损的 组织器官。 细胞治疗的供体可以是 自体、异体。
☆细胞治疗的细胞来源丰 富。 ◇细胞治疗适用于所有细 胞损伤性疾病。
如何治病？-----（4）途径
①、血管介入治疗 ②、病变部位直接注射 ③、静脉输入治疗 ④、体腔输入治疗（如：中央脑 室，珠网膜下腔注射）
①、血管介入治疗
三种来源的干细胞在临床应用的比较
胚胎干细胞 胚胎干细胞的担忧 1、来源（宗教、法律、文化背景） 2、扩增的变异（培养基、模拟环境） 3、技术普及的困难和质量控制问题 4、他的出路是工业化供应干细胞
源自文库
成体干细胞 细胞治疗的细胞种类
是指存在于人体所有组 织中的原始细胞。 这里只讨论骨髓、脐带 来源的干细胞
来自美国的一组科学家发明了一种新技术，使得以上四种转录因子可以通过强力霉素诱导的 慢病毒载体表达。利用这些可诱导构造，研究小组从鼠胚胎纤维原细胞（MEF）中得到了诱导多能 干细胞（iPS），并且科学家发现，转基因沉默是正常的细胞分化的先决条件。 在研究中，科学家分析了小鼠诱导多能干细胞产生过程中，已知的多能标记物激活的时间，结 果发现，碱性磷酸酶（AP）首先被激活，接着是阶段性特异胚胎抗原1（SEA1）。而作为完全再分 化细胞标志的Nanog和内生Oct4基因的表达则只在整个过程的后期被观察到。更重要的是，病毒逆 转录的cDNA需要至少被表达12天，以产生iPS细胞。研究小组表示，他们的结果对于了解表观遗传 修饰的某些分子过程很重要。

分为三类： ①第一类是全能干细胞 （totipotent stem cells） ②第二类是多能干细胞 （pluripotent stem cells） ③第三类是单能干细胞 （unipotent stem cells） 按其来源分类 ①胚胎干细胞 (embryonic stem cell) ②成体干细胞 (somatic stem cell) ③诱导多能干细胞 ips (Induced pluripotent stem cells)
能的取代。 器官移植（除皮肤移 植以外）器官的来源 基本上全是异体。 器官移植的器官来源 有限 器官移植仅限于器官 功能衰竭
干细胞的热点（Stem cells in the hottest scientific eyes）
研究热点干细胞：胚胎干细胞 造血干细胞 神经干细胞 间充质干细胞
糖尿病足、闭塞性脉管炎的肢体坏死
糖尿病足、闭塞性脉管炎的肢体坏死是干
细胞治疗运用于临床较早的疾病，国内有 数百家医院开展这项工作。技术成熟，疗 效肯定，安全有效的方法。
冯凯博士（解放军309医院）
解放军309医院冯凯博士近几年做了三百多例这
类病人，取得了良好的效果。
糖尿病足、闭塞性脉管炎的肢体坏死
对细胞治疗的认识
是指将功能和结构正常的细胞当作“ 药物”输入患者体内，用以修复受损的组 织细胞和器官，达到控制疾病和治愈的目 的。它与传统的治疗在方法有相似之处， 但具有传统治疗方法难以达到的效果。（ 细胞治疗从功能上、结构上不取代原有的 组织器官）
例如：
干细胞治疗心肌梗塞 干细胞治疗糖尿病、糖尿病足 干细胞治疗失代偿期肝硬化 干细胞治疗烧伤 干细胞治疗骨折、关节炎、骨质疏松 干细胞治疗脊柱损伤 干细胞治疗帕金森症、老年痴呆症 干细胞治疗肌营养失调 树突状（DC）细胞治疗肿瘤 巨噬细胞治疗肿瘤 CIK细胞、TIL细胞治疗
组织器官移植
是指将某一健康的组织器官移植到受 者体内，取代原有的组织器官，从结构上 、功能上代替了原有的组织器官，称为移 植。 例如： 肾移植 心脏移植 肝脏移植 骨髓移植
细胞治疗与组织器官移植区别
细胞治疗是修复受损 器官移植是结构、功
的组织器官。 细胞治疗的供体可以 是自体、异体。 细胞治疗的细胞来源 丰富。 细胞治疗适用于所有 细胞损伤性疾病。
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干细胞治疗的临床运用
摘要
干细胞能有效治疗各种细胞损伤性疾病是 全世界主流医学不争的事实！临床医生在开展 细胞治疗时，如何获得干细胞，选择哪一类干 细胞，所选择的干细胞是否具备生物安全性， 干细胞的有效数量，干细胞的存活率怎样；细 胞的体积是否能够满足治疗的要求，是临床医 生最关心的问题。
嗜酸性粒细胞为主
128±6 4-5天
粒单混合
培养集落出现时间
集落构成特点
对CSF的反应 CD34+ CD38-
敏感 5.7%±16% 2.4%±7.3%
中度敏感 1.6%±7.8% 1.6%±3.2%
中度敏感 0.9%±4.9% 0.9%±4%
CFV-GM粒单系集落生成细胞 CSF集落刺激因子
上表可以说明：
②、病变部位直接注射--1
② --2、立体定向颅脑病变部位注射
③、静脉输入治疗
④、体腔输入治疗
3、治疗的那些疾病
失代偿期肝硬化
糖尿病足、闭塞性脉管炎的肢体坏死
神经损伤
急性心肌梗塞
溃疡性结肠炎 股骨头坏死 糖尿病
失代偿期肝硬化
治疗终末期肝硬化
用自体骨髓和脐带血干细胞治疗终末期肝
胚胎干细胞、ips细胞、成体干细胞的比较
胚胎干细胞 来源 细胞的预先 处理 技术普及的 困扰 出路 争议核心 胚胎32-64个 细胞团 培养、扩增
ips细胞 成体细胞 诱导反祖，培养 扩增
成体干细胞 （骨髓） 骨髓、脐带、胎盘 分离、纯化
只能掌握在少数 只能掌握在少数 容易掌握，易普及 科学家手里 科学家手里 工业化 伦理问题 建立专业的 治疗中心 是癌变的问题 医生都能掌握 安全性
ips干细胞
ips干细胞的担忧 1、来源（宗教、法律、文化背景） 2、扩增的变异（培养基、模拟环境） 3、技术普及的困难和质量控制问题 4、他的出路是工业化供应干细胞
胚胎干细胞
诱导多能干细胞
ips
诱导多能干细胞Induced pluripotent stem cells ，通常缩写为iPS ，是一种来源于人成年体细胞，通过植 入了４个经过重新编码的基因诱导的“强迫”表达的某些 基因。使这些体细胞具备类似胚胎干细胞的功能的干细胞 ，这就是ｉＰＳ细胞。 （四种转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）。
谷涌铨教授近几年 做了数百例病人，取得 了很好 的疗效。
神经损伤 （解放军309医院）
(解放军309医院提供,患者田敏,女 22岁)
颅脑病变
溃疡性结肠炎
溃疡性结肠炎-1
溃疡性结肠炎-2
股骨头坏死
糖尿病
谢谢大家！
E-mail：whL215@163.com
干细胞治疗的临床运用
1 成体干细胞的生物学特性-为什么能治病 2
运用干细胞如何治病 运用干细胞治疗那些疾病
3
干细胞的概念和分类
按其分化潜能的大小，可以
干细胞是能够长期存活，具有 不断的自我繁殖能力和多向化 潜能，几乎存在于所有组织中 的原始细胞。干细胞是不均一 的细胞群体，缺乏直接的形态 学特征。 从功能上理解更重要： 干细胞不论在体内还是体外 培养都能表现为长期存活，不 断地自我繁殖。 在一定的微环境下可以诱导 分化为所需要的组织细胞，如 ：心肌细胞、肝细胞、神经细 胞等等，有很强的可塑性。