生物制品学 复习题

生物制品：采用现代生物技术手段人为地创造一些条件，借用某些微生物、植物或动物体来生产某些初级代谢产物或次级代谢产物，或利用生物体的某一组成部分，制成作为诊断或治疗或预防疾病或达到某种特殊医学目的的医药用品

盐析：指在药物溶液中加入大量的无机盐，使某些高分子物质的溶解度降低从而作为沉淀析出，而与其他成分分离的方法

透析：通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术

微滤：是以多孔膜（微孔滤膜孔径为0.1~10μm）为过滤介质，在压力推动下，截留溶液中的淤泥、黏土等颗粒藻类和细菌等，而大量溶剂、小分子及少量大分子溶质都能透过膜的分离过程

超滤：超滤是采用中空纤维过滤新技术，配合三级预处理过滤清除自来水中杂质；超滤膜孔径在0.001~0.1μm，能彻底滤除水中的细菌、铁锈、胶体等有害物质，保留水中原有的微量元素和矿物质包含体：真核生物重组小分子目的蛋白，以不溶性形式产生并聚集形成蛋白质聚合物

亲和层析：利用待分离物质与其特异性配基之间特异性的亲和力进行分离的一类特殊的层析技术

离子交换：借助于固体离子交换剂中的离子与稀溶液中的离子进行交换，以达到提取或去除溶液中某些离子的目的

疏水层析：利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离

肝素：是一种黏多糖的硫酸酯，是由二种多糖交替连接而成的多聚体，在体内外都有抗凝血作用

内毒素：是存在于革兰氏阴性菌的细胞壁中的脂多糖，由菌体裂解后释出的毒素，又称之为“热原”外毒素：病原细菌在其生命活动过程中产生并分泌到菌体外周环境中的毒素

类毒素：细菌的外毒素经甲醛处理后，失去毒性而仍保留其免疫原性，能刺激机体产生保护性免疫的制剂

疫苗：用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制品，用于人工自动免疫，以使人或动物产生免疫力的制剂灭活疫苗：利用加热或甲醛等理化方法将人工大量裴炎过的完整的病原微生物杀死，使其丧失感染性和毒性而保持器免疫原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗

减毒活疫苗：将微生物的自然强毒株通过物理的、化学的和生物学的方法，连续传代，使其对原宿主丧失致病能力，或只引起亚临床感染，但仍保持良好的免疫原性、遗传特性，用此毒株制备的疫苗

亚单位疫苗：提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白质结构，即抗原决定簇制成的疫苗

基因工程亚单位疫苗：将基因工程表达的蛋白抗原纯化后制成的疫苗

基因工程载体疫苗：将病毒微生物的免疫原基因，通过分子生物学方法将其分离，然后与载体DNA 相连接，实现遗传性状的转移与重新结合，再经载体将目的基因带进受体进行正常复制与表达，从而获得增殖培养物供制疫苗

基因缺失疫苗：将病原微生物中与致病性有关的毒力基因序列除去或失活，使之成为无毒株或弱毒株，但仍保持有良好的免疫原性，从而制得的安全有效的疫苗

核酸疫苗：将一种病原微生物的免疫原基因，经质粒载体DNA通过肌肉注射等途径接种给人或动物，能在动物体细胞中经转录、翻译合成抗原物质，刺激被免疫动物产生保护性免疫应答

蛋白质工程疫苗：将抗原基因加以改造，使之发生突变、插入、缺失、构型改变，甚至进行不同基因或部分结构域的人工结合，以期达到增强其产物的免疫原性，扩大反应谱，去除有害作用或副反应的一类疫苗

遗传重组疫苗：经遗传重组方法获得的重组微生物制成的疫苗

合成肽疫苗：使用化学方法合成能够诱发机体产生免疫保护的多肽制成的疫苗

微胶囊疫苗：使用微胶囊技术将特定抗原包裹后制成的疫苗

1.原料的选择、预处理和保存方法：生物制品的原料具有生物活性，起始原料的质量是生物制品制备研究的基础，直接关系到终产品的质量和工艺的稳定。因此对于生物制品原料的选择、预处理和保存方法都有一定的要求、原则以及注意事项，以保证产品的活性

2.提取：提取包括生物组织与细胞破碎与提取目的产物，因为生物制品大部分都存在于生物组织或细胞中，要分离提取这些产物或提高提取率，进行生物组织与细胞破碎过程非常重要。破碎细胞是为了使细胞内容物有效地释放出了，获得有效的提取；而提取过程则是为了除去与产物性质差异较大的杂质，为后道精致工序创造有利条件。

3.分离纯化：分离纯化是极其重要的一环，这是由于工程菌经过大规模培养后，产生的有效成分含量很低，杂质含量却很高；另外由于基因工程药物是从转化细胞、不是从正常细胞生产的，对产品的纯度要求也高于传统产品。分离纯化要比传统产品困难得多。分离纯化一般不应超过4～5个步骤，包括细胞破碎、固液分离、浓缩与初步纯化、高度纯化直至得到纯品以及成品加工

蛋白质类制品的分离纯化方法

1.盐析和有机溶剂沉淀

盐析将硫酸铵或硫酸钠等中性盐加入到蛋白质溶液中破坏蛋白质的胶体颗粒在溶液中的稳定因素，使其沉淀。操作简便，不需要特殊设备，重复性好，但分辨率低，适合粗提

有机溶剂沉淀，如乙醇、丙酮，操作方便，但对蛋白质有变性作用，须低温操作，且蛋白质沉淀后要立即分离，选择性不高，适合粗提

2.按分子大小分离

微滤（0.1~10微米，用于浓缩蛋白）、超滤（0.001~0.1微米，用于不同大小蛋白质分子浓缩和分级分离）透析：用于取出蛋白质提取液中的盐类和其他小分子化合物，也可用于浓缩

超速离心：用于分离浓缩不同大小的蛋白质分子

3.选择性沉淀

等电点：pH＜pI蛋白质分子带正电pH＞pI蛋白质分子带负电pH=pI蛋白质分子最稳定，最易沉淀变性沉淀：根据个杂种蛋白质在不同理化因子作用下稳定性不同，用于除去提取液中杂蛋白，选择行强，方法简单，适用范围窄

4.各种色谱

离子交换：通过带电的溶质分子与离子交换剂中可交换的离子进行交换，从而达到分离目的。分辨能力强，分离量大，尤其对pI值处于极端（pI＜5或pI＞8）

凝胶过滤：基于分子筛和排阻效应，选用不同大小的凝胶，小分子物质可进入孔径，缓慢移动，大分子物质不能进入孔径则快速流出。用于分子量有明显差异的蛋白，不引起蛋白变性，也可以用于除盐

亲和色谱：用于蛋白质与配体分子之间特异的非共价结合的特性进行分离。专一性强（一种配体只能用于一种蛋白）分辨力强，操作简单

疏水与反相：对于疏水蛋白类产物，在实验室中使用

高效液相色谱：在实验室中使用

5.电泳法：根据蛋白质在电场中移动的速率与电场强度和蛋白质颗粒表面的静电荷成正比

脂类制品的分离纯化方法：

制备：1.直接抽提法：以游离形式存在，采用相应的溶剂系统从生物组织或反应体系中直接抽提出粗品

2.水解法：与其他物质形成复合物，经水解或适当处理后在水解，然后分离纯化

3.化学合成或半合成：源于生物的某些脂类，相应的有机化合物或生物体某些成分为原料，用此法制

4.生物转化法：通过微生物、动植物细胞以及酶工程技术转化生产

分离：1.水解法（溶解度法）：根据脂类产品在不同溶剂中的溶解度差异进行分离

2.吸附分离法（色谱分离）：根据吸附剂对各种成分吸附力的差异进行分离

3.蒸馏法：根据不同脂类制品的沸点不同进行分离

4.超临界萃取

精制：结晶法、重结晶法、有机溶剂沉淀法（饱和脂肪—低温边固体