HIV筛查实验室标本管理制度
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HIV筛查实验室标本管理制度
(一)、样品的采集和处理
艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下:
1、血清样品采集和处理
(1)、用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1 2h,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min,吸出血清备用。
(2)、如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。
2、抗凝血样品采集和处理
(1)、用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
(2)、应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
(3)、用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~
8h内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。
3、采集样品注意事项
(1)、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。
(2)、采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
(3)、所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品,均应视为有潜在传染性,都应以安全的方式进行操作。
(4)、应象操作未知传染风险样品一样,小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹应进行消毒。
(5)、采血时一定要注意安全,采血用一次性注射器,谨慎操作,防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。
(6)、离心机要使用密闭的罐和密封头,以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。
(二)样品的保存
1、用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。
2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
3、用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,
样品采集时间超过48h则不可检测。
(三)样品的运送
1、实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
2、应采用WHO提出的三级包装系统:
第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。
第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。
3、血清和血浆样品应在2~8℃条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18~23℃运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。
4、运送感染性材料必须有记录。
5、如分离血浆仍有困难,可直接将抗凝血-20℃以下冻存,采用冰壶冷藏运输,避免冻融。
6、特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快专递形式投寄,但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好,避免使用玻璃容器,以保证不会破碎和溢漏。
(四)。样本接收和拒收标准
1、签收:实行双签制度,送检者及实验室验收人员均需签名。
2、认真查对姓名,性别,年龄,住院号,病区/床号,检
测目的及项目等。对不符合要求者记入拒收标本记录
表中,并及时通知采样单位,正确及时地补采样本,
以免延误病人的检测报告。
3、对符合检测要求的标本及时进行唯一性编号(详见标本
唯一性编号标准操作程序)并记入可接收标本记录表
中。
4、含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实
验室内由经过培训、穿戴防护衣的工作人员打开,用
后的包裹应进行消毒。
4.1、核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如
发现溢漏应立即将尚存留的样品移出,对样品管和盛
器进行消毒,同时报告科主任等有关领导和专家。
4.2、检查样品的状况,记录有无溶血、污染、血脂高及黄
疸等情况。如果污染过重认为样品不能接受,则应将
样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。
4.3、打开标本容器时要小心,以防内容物泼溅。样品处
理时若内容物有可能溅出,则应在生物安全柜中戴手
套进行。同时应戴口罩、防护眼睛,以防皮肤或粘膜
污染。
4.4、接收样品时应填写样品接收单。
(五)标本检测
1、离心机要使用密闭的罐和密封头,以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。复核标本接收过程中的每一步骤,在检测过程中,应严格按照标准化操作规程。
2、在标本足够的情况下,不能浪费、随意丢弃或损坏标本。应象操作未知传染风险样品一样,小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹应进行消毒
(六)、标本处理
检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒剂浸泡半小时,再用高压锅高压消毒。然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃圾处统一焚化处理。