血清脂类测定
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。
然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。
因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。
本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。
b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。
c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。
d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。
e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。
实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。
根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。
根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。
他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。
2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。
他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。
此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。
3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。
他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。
此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。
实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。
然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。
对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。
《生物化学试验》实验四：血清甘油三酯含量测定
A standard
0.2
M standard = C standard× V standard
正常参考值为10-150 mg/dl。
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液； 选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干
组成与含量 总 脂 400~700mg/dl (5 mmol/L) 甘油三酯 10~150mg/dl (0.11 ~ 1.69 mmol/L) 总 磷 脂 150~250mg/dl (48.44 ~ 80.73 mmol/L) 总胆固醇 100~250mg/dl (2.59 ~ 6.47 mmol/L) 游离脂酸 5~20mg/dl (0.195 ~ 0.805 mmol/L)
实验四
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
一、目的与要求
1、了解血清(serum)甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原 理及主要技术方法
BACKGROUND
血浆所含脂类统称血脂， 包括：甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。
PRINCIPLE
甘 FA 油 FA
FA
1、血清脂蛋白中的甘油三酯经正庚烷-异丙醇混合 溶剂抽提(isolated )后，脂蛋白变性，结合的甘 油三酯分离。
2、用氢氧化钾皂化(saponified)，使甘油三酯水解 成脂肪酸和甘油。
3、游离的甘油被过碘酸氧化(oxided)成甲醛，甲 醛与乙酰丙酮在铵离子存在下，缩合成黄色的3, 5-二乙酰-1, 4-二氧二甲基吡啶，
生化基础物质检测—脂类检测
主 要 试 TG试剂盒 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
分光光度计
实验步骤
第一步
制备合格样本
第二步
反应液制备
第三步
混匀水浴测定
第四步
计算
第一步
用真空负压管采血，离心，待 用
第二步
取试管3支试管编号，按下表依次加样。
加入物 (μl) 蒸馏水 标准液 血清 工作液
空白管
20 － － 2000
第二步
洗板，阴性对照孔每孔加入PBS 50μl， 样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔 抗人AIF抗体工作液50μl。
第二步
每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀 10s，置37℃暗处反应15-20min。每孔 加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
第二步
分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光 值W2，最终测得的OD值为两者之差 （W1-W2），以减少由容器上的划痕或 指印等造成的光干扰。
误差分析
实验原理
空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性 沉淀载脂蛋白为 apoB 的脂蛋白 LDL，则上清液为 HDL，HDL 以 HDL-C 表示含量。
胆固醇酯酶
胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH
胆固醇氧化酶
胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2
试剂和器材
主 要 apoa试剂盒 试 校准液 剂 蒸馏水
主
采血器材
要
微量加样器
器
吸量管
材
恒温水浴箱
EH患者检测血清脂类和内皮素与尿微量蛋白结果的临床分析
与血压正常组 比较 △ Ｐ＜００ ，＊Ｐ＜ ．１ ．５ Ｏ ０
３ 讨 论
力学 改变 ， 肾小 管 病变 则 是 由 于 肾缺血 所 致［ 。研 究发 现 ， 应用 竞争 性 ＲＡ技术 检测 患者尿 内微 量 Ｉ Ｉ ｎ — Ａ Ｂ ｐ． Ｇ、ｌＭ ＩＧ的含量 是诊 断 Ｅ Ｌ 、２Ｍ ａ— Ｇ、 ｇ Ｈ早 期 。 肾损
－－－－—
—
７ ８ ・— ６ － － － —
Ｃ ｉ ａ ａ ， ｖ ２ １ Ｖ １ Ｎ ． ｈｎ ＪＬ ｂ Ｄｉｔ Ｍａ ， ０ Ｏ， ４， ｏ ５ ｌ ｏ
文章 编号 ： ０ ４ ８（０００ — ７８— ２ １ ７— ２７ ２ １）５ ０６ ０ ０
Ｅ Ｈ患者 检测 血 清脂 类 和 内皮 素 与尿微 量 蛋 白结 果 的临床 分 析
岁， 均 ４． 平 ８ ６岁 ， 程 ５个 月 一５年 ， 病 平均 ２ ８年 。 ． Ｅ Ｈ诊断按 １９ 年 ＷＨ ／Ｓ ９９ Ｏ ＩＨ及 我 国 １９ ９９年 １ ０月颁
布标 准进行 。被 观察 患 者 常规 法检 测 尿蛋 白 、 糖 尿
和血 Ｂ Ｎ、 ｒ 果 均 为 阴性 和在 正 常 参 考 范 围 内。 Ｕ Ｃ结 并通 过辅助检 查排 除继发性 高血 压无肝 、 、 和 内 肾 心
能的早期损害。我们应用竞争性放射免疫技术测定 尿系列微 蛋 白（ｌ Ｌ 、２ＭＧ ａ． Ｇ、 Ｇ） ＩＡ Ｂ Ｊ． 、１Ｍ Ｉ 和血 清 内 ｌ — ３ ｇ
皮 素 （ｒ及 生化 自动分 析仪测定 血 清 Ｔ 、Ｇ Ｂ Ｎ、 Ｅ） ｒ Ｃ Ｔ 、Ｕ Ｃ 含量 ， ｒ 探讨 检澳 结 果 的变 化 对 Ｅ 肾病 早期 损 害 ０ Ｈ 的影响 和临床 意义 ， 现报 道如下 。
Ｅ Ｈ的存 在与缓 慢发展 ， 引起局 部 和全 身动 脉粥 样硬 化 ； 害着心脏 和 肾脏 ， 损 直接影 响着 肾 内血 流动
肾移植患者血清脂类水平测定的意义
肾移植患者血清脂类水平测定的意义
朱丽华;李迪华;徐林萍
【期刊名称】《中国医师进修杂志：综合版》
【年(卷),期】1999(000)005
【摘要】目的：为了探讨肾移植后病人脂类代谢紊乱和并发心血管疾病的因素。
方法：分析了４９例肾移植（ＲＴ）病人血清中的脂类各组分水平，并与慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）透析病人、正常健康人群作比较。
结果：ＲＴ病人血清
总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）均明显高于ＣＲＦ和健康组，而高密度脂蛋
白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）则无显著性差异。
同时通过年龄分组统计发现，ＲＴ病人＞３０岁组的ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、
ａｐｏＢ三项指标已明显改变。
结论：提示肾移植治疗会提前和加速脂类代谢的紊乱，ＣｓＡ等可能是导致上述后果的主要原因。
【总页数】2页(P35-36)
【作者】朱丽华;李迪华;徐林萍
【作者单位】浙江省江山市人民医院检验科!324100;宁波卫生学校
【正文语种】中文
【中图分类】R692
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血清总脂含量的测定实验报告
血清总脂含量的测定实验报告一、实验目的1.掌握香草醛法测定总脂的原理和方法；2.了解正常动物正常的血清总脂含量。
二、实验原理1.血清总脂指血清中各种脂类的总和。
测定方法有称量法，比色法等。
本实验采用的香草醛法，属于常用的比色法。
2.血清中的脂类，尤其是不饱和脂类与浓硫酸共热作用，经水解后生成碳正离子。
试剂中的香草醛与浓磷酸的羟基作用生成芳香族的磷酸脂，由于改变了香草醛分子中的电子分配，使醛基变成活泼的羰基。
此羰基可与碳正离子起反应，生成红色的醌化合物，其强度与碳正离子成正比。
反应式略三、实验仪器与试剂6mg/ml胆固醇标准液，显色剂，浓硫酸，浓磷酸四、实验步骤取4支洁净试管编号空白管标准管测定管1 测定管2血清－－0.02 0.02标准液－0.02 －－浓硫酸 1.0 1.0 1.0 1.0充分混匀，放置沸水浴中10min，使脂类水解，冷水冷却向各管中均加入显色剂4.0ml，搅匀放置20min后，在525nm波长处比色，以空白管调节“0”点，分别读取各管吸光度。
五、实验结果玌分析血清总脂含量（mg/ml）=（测定管吸光度/标准管吸光度）*胆固醇标准液空白管标准管测定管1 测定管2测定读数：0.000 0.994 0.479 0.449血清总脂含量（mg/ml）＝（0.479+0.449）/(2*0.994)*6（mg/ml）=2.8（mg/ml）分析：正常的动物血清总脂含量约在5~8（mg/ml）。
本实验所求得的血清总脂含量为2.8（mg/ml），在正常值范围外，造成误差的原因可能是：①取0.02ml血清样品时，没有摇匀，导致血清中的总脂含量不均匀，就在提取前摇匀；②本实验中采用胆固醇作标准的测定方法本身存在误差，导致最后测量存在误差；③加入浓硫酸时，每组把握滴定的速度不同，可能有些组放置过快，导致试剂过多附着于管壁而造成误差，所以实验时就缓慢滴加浓硫酸；④不同仪器存在误差，同时把样品放入比色皿时，也要摇匀，减少误差。
临床生化检验：5-血清甘油三酯和总胆固醇的测定
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇含 量为100～200毫克的食物称为 中度胆固醇食物
如草鱼、鲫鱼、鲢鱼、黄 鳝、河鳗、甲鱼、蟹肉、猪排、 鸡肉等；
生活小知识
将每100克食物中胆固醇含 量为200～300毫克的食物称高 胆固醇食物
如猪肾、猪肝、猪肚、蚌 肉、蛀肉、蛋黄、蟹黄等。
吃什么可以降低胆固醇？
血清甘油三酯和总胆固醇的测定
实验目的
• 1.掌握甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本 原理。
• 2.熟悉甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇操作方 法。
• 3.了解血清甘油三酯和总胆固醇 测定的临床意义。
实验原理
甘油三酯+H2O CEH 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 甘油-3-磷酸+ADP
生活小知识
• 人体中的脂类大部分从食物中 来，所以甘油三酯高的人饮食 应有节制，主食之中应搭配部 分粗粮，副食品以鱼类、瘦肉、 豆及豆制品、各种新鲜蔬菜、 水果为主。
生活小知识
• 有助降甘油三酯的食物，如： 沙丁鱼、大马哈鱼、甜杏仁、 马齿苋，还有豆类，大蒜等。
• 还有一些利于降低血脂防治动 脉硬化的食物：海带、紫菜、 木耳、金针菇、香菇、洋葱等 可常吃。
生活小知识
• 饮牛奶宜去奶油，不加糖。蛋 类原则上每日不超过1个，烹 调食物用素油，少吃油煎食物。 少吃花生，因其中含油甚多， 但可以食用核桃肉、瓜子仁、 果仁等。
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇 含量低于100毫克的食物 称为低胆固醇食物
如鳗鱼、娼鱼、鲤鱼、 猪瘦肉、牛瘦肉、羊瘦肉、 鸭肉等；
甘油-3-磷酸+O2 甘油磷酸氧化酶 磷酸二羟酮+H2O2 H2O2+酚+4-氨基安替吡啉 POD 红色醌亚胺+H2O
血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定及临床意义
血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定及临床意义
【正常参考值】
LDL-C水平随年龄上升,中、老年人平均约2.7~3.1 mmol/L(105~120 mg/dL)我国《血脂异常防治建议》提出的判断标准
理想范围:<3.12 mmol/L(<120 mg/dL)
边缘水平:3.15~3.61mmol/L(121~139 mg/dL)
升高:>3.64 mmol/L(>140 mg/dL)
NCEP,ATPⅢ提出的医学决定水平:
理想水平:<2.58 mmol/L(<100 mg/dL)
接近理想:2.58~3.33mmol/L(100~129 mg/dL)
边缘增高:3.64~4.11mmol/L(130~159 mg/dL)
增高:4.13~4.88 mmol/L(160~189 mg/dL)
很高:≥4.91 mmol/L(≥190 mg/dL)
【临床意义】
LDL升高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。
过去只检测TCH估计LDL-C水平,但TC水平也受HDL-C水平的影响,故最好采用LDL-C代替TCH作为动脉粥样硬化性疾病的危险因素指标。
血清脂质和脂蛋白检测以及方法
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（三）血清载脂蛋白检测
载脂蛋白分为： ApoA、ApoB、ApoC、ApoE、Apo（a） ApoA是HDL的主要蛋白结构，间接反映 HDL水平。 ApoB是LDL的主要蛋白结构，间接反映 LDL水平。
• 原理 测定HDL-C含量来反映HDL水平
• 参考范围 0.91 ~ 1.56mmol/L
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
高密度脂蛋白胆固醇测定
临床意义 判断发生冠心病的危险性 其 水平与动脉管腔狭窄程度、冠心病发病率呈负相关
。 临床血清总胆固醇正常而HDL-C降低是冠心病的先兆
； 在估计心血管病的危险因子中，HDL-C比TC和TG的意
（一）总胆固醇测定
降低
严重肝脏疾病：急性肝坏死或肝硬化 严重的贫血：再障、溶贫、缺铁贫 营养不良 甲亢
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（二）甘油三酯测定
原理：由肝、脂肪组织及小肠合成 主要存在于前β-脂蛋白和乳糜颗粒中 参与胆固醇及胆固醇酯的合成 为细胞提供能量和贮存能量 是动脉粥样硬化的重要因素之一
血清脂质与脂蛋白 检测和方法
血清脂质与脂蛋白检测和方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
血脂：血浆脂类物质的总称 ：胆固醇（TC）、甘油三酯 (TG）
磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA） 脂蛋白：脂质与蛋白质结合的复合物 载脂蛋白：脂蛋白中的蛋白部分
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
脂蛋白分类
女 0.8～1.55g/L 临床意义 升高水平与动脉粥样硬化、冠心病发病呈正相关
Apo-B100上升较LDL和CHO的上升对冠心病风险度 的预测更有意义
磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯
磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯(Triglyceride,TG)一、实验目的测定血清中的甘油三酯含量，为临床诊断疾病提供依据。
二、实验原理血清中甘油三酯经脂蛋白脂酶（LPL）作用，可水解为甘油和游离脂肪酸(FFA)，甘油在ATP和甘油激酶(GK)的作用下生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶作用生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与4-氨基安替比林（4-APP）和4-氯酚在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色醌类化合物，其显色程度与TG的浓度成正比。
三、试剂1.甘油三酯液体稳定酶试剂GOODs缓冲液（PH=7.2） 50 mmol/L脂蛋白脂酶≥4000 U/L甘油激酶≥40 U/L磷酸甘油氧化酶≥500 U/L过氧化物酶≥2000 U/LATP 2.0 mmol/L硫酸镁 15 mmol/L4-AAP 0.4 mmol/L4-氯酚 4.0 mmol/L2.三油酸甘油酯标准液 2.26 mmol/L（200mg/dl）准确称取三油酸甘油酯（平均分子量：885.4）200mg加Triton X-100 5ml，用蒸馏水定容至100ml，分装后，4℃保存。
四、实验步骤1.取三支试管按下表操作加入物空白管（B）标准管(S)测定管(U)血清（μl）——10标准液（μl）— 10 —蒸馏水（μl）10 ——酶试剂（μl） 1000 1000 1000混匀置37度水浴保温5分钟，以空白管调零，在波长500nm处测各管的吸光度。
五、计算血清TG(mmol/L)=A测定管/A标准管×标准液浓度六、参考范围正常成人血清TG为0.55~1.70 mmol/L；临界阈值：2.30 mmol/L；危险阈值：4.50 mmol/L。
七、临床意义1.血清TG增高常见于家族性脂类代谢紊乱、肾病综合征、糖尿病、甲状腺功能减退、急性胰腺炎、糖原积累病、胆道梗阻、原发性甘油三酯增高症、动脉粥样硬化等。
血清脂类测定
血清脂类测定血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。
有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1．胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。
化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。
另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。
2．甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。
有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07～0.13mmol/L，相当于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[0.98×总甘油（mmol/L）]-0.07（mmol/L）。
血清胆固醇测定实验报告
血清胆固醇测定实验报告引言胆固醇是一种脂类物质，它在我们的身体中起着重要的生理功能。
然而，高胆固醇水平与心血管疾病等许多健康问题相关联。
因此，准确测定血清中的胆固醇水平对我们的健康至关重要。
本实验旨在介绍一种常用的方法来测定血清中的胆固醇浓度。
实验目的本实验的目的是测定血清中的胆固醇浓度。
通过使用一种简单而又可靠的实验方法，我们将能够获得准确的结果。
实验原理血清中的胆固醇可以通过一种酶法测定。
在这种方法中，我们使用一种叫做胆固醇酸酯酶的酶来催化胆固醇的水解反应。
在反应中，胆固醇酸酯被水解成为胆固醇和脂肪酸。
通过测定产生的脂肪酸的浓度，我们可以间接地确定血清中胆固醇的浓度。
实验步骤1.首先，准备实验所需的材料和试剂，包括血清样本、胆固醇酸酯酶、试剂盒中提供的标准溶液等。
2.将试剂盒中提供的标准溶液分别加入试管中，每个标准溶液加入不同浓度。
3.分别取一定量的血清样本加入试管中。
4.加入一定量的胆固醇酸酯酶。
5.将试管放置在恒温水浴中，在37摄氏度下反应一定时间。
6.反应结束后，用甲醛试剂停止反应，并加入硫酸试剂。
7.将试管摇匀，使反应液混合均匀。
8.使用分光光度计测定吸光度。
根据吸光度和标准曲线，计算出血清样本中胆固醇的浓度。
实验结果通过实验测定，我们得到了血清样本中胆固醇的浓度。
根据不同样本的吸光度和标准曲线，我们可以得出血清样本中胆固醇的浓度范围。
实验讨论本实验使用了一种常用的酶法来测定血清中的胆固醇浓度。
该方法简单而又可靠，可以在临床实验室中广泛应用。
然而，该方法也存在一些局限性。
例如，反应时间和温度对结果的影响可能会导致一定的误差。
此外，该方法对于某些特殊样本可能不适用，需要进一步研究和改进。
结论通过本实验，我们成功地测定了血清样本中胆固醇的浓度。
准确地测定血清中的胆固醇水平对于评估健康状况和预防心血管疾病非常重要。
本实验提供了一种简单而又可靠的方法来测定血清中的胆固醇浓度，为临床实验室提供了有益的参考。
【doc】血清甘油三酯测定的推荐方法——二步酶法：（讨论稿）
血清甘油三酯测定的推荐方法——二步酶法：（讨论稿）38?5.4血标本应在静置的试管中自行凝固,室温约45rain.血清或血浆应在3小时内离心与血细胞分离,吸出后保存.5.5血清或血浆可在4℃密闭保存.一周内TC稳定.一20U至少可存放半年6操作步骤6.1终点法测定标本(血清或血浆)l0l,标准液【Ol,酶试剂1.00ml}设试;}lf空白管}温度与时间:37'C5min,或20一25℃l0min}比色波长:500nm(或520nm).颜色稳定至少60rain.故在达终点后60min内比色.结果计算:"rCrnmot/L=韭×定标血清浓度(retool~L)6.2速率法根据不同仪器及试剂(需增加酶用量)制定测定条件.7方法特性7.1精密度终点法批内CV<』.5.批间CV≤2.57.2准确性以参考方法(ALBK法)的血清为标准液时,本法测定结果与ALBK法基本一致.以Chol水溶液为标准时,结果往往比ALBK法低.故不宜采用Chol水溶液7.3灵敏度显色剂用酚时,TC5.2retool/L (200mg/d1)时的吸光度A约0.30～0.35,故A;0=0.005时的TC浓度约0.08mmol/L (3mg/d1).牡库鞋验信息导撮】994年革1毒革2期7.4测定范围血清与酶试剂用量之比为l:100时(见6.1],测定上界为】3mmol/L(500mg/d1).过高地提高血清用量的比例.会使测定上界降低.7.5特异性血清中多种非胆固醇甾醇会不同程度地与本试剂显色正常人血清中非胆固醇甾醇约占TC的1,故在常规测定中这种影响可以不计.7.B干扰因素终点法中血红蛋白高于2g/L会引起正干扰,胆红素>0.1g/L时有明显负干扰.抗坏血酸与甲基多巴血中浓度高于治疗水平时也使结果偏低.上述干扰物在速率法中影响较小.高甘油三酯血症(血清混浊)在本法中(血清与试剂量l:J00时)一般会明显影响.8参考值TC水平因生活条件(饮食,运动等)而异,随年龄上升.中青年男性略高于女性(北京城区居民平均在4.1～4.7mmol/L.160—180rag/d1).老年女性高于男性(男性平均d.9～5.2retool/L,i90—200mg/dl,女性平均5.4retool/L2】0rag/dl左右).中,老年人合适水平为5.2retool/L以下,5.2--6.5retool/L为临界水平(或轻度升高).≥6.5mmol/L(250mg/dI)为高胆固醇血症.≥7.8retool/L(300reIg/d1)可视为严重的高胆固醇血症.9参考文献(略)(李健斋执笔)《血液流变学基础及临床检测》征订启事由江西科学技术出版社出版.南京市建邶医院戴荣锦主任编着的《血{谩流变学基础及临床检测》一书将于95年初发行全书共28万余字,内容涉及流体力学概念,血液流变学基础理论,国内流行的血液流变学仪器和检测方法.全书理论联系实际,是血液流变学检测工作者的工具书.初,中级检验人员自学资料.中等检验专业学校的补充教材,也是参与血液流变学实践的基层临床医务工作者的参考书.欢迎订阅.请直接与作者联系(邮编210004).临庠栓驻信息导报199]牛幕-毒苇2期,?39?忸血看断,廿.;抽湾④～血清甘油三酯测定的推荐方法——二步酶法.,(讨论稿)堑墨垦兰三兰V许叶吕邦泰(宁波市临床检验中心,淅江宁波3I5.0.)牛,//[缩写名词]To甘油三酯FG游离甘油LpL脂蛋白酯酵GK甘油檄酶GPO甘油磷酸氧化酶POD辣根过氧化物酶ATP三磷酸腺苷ADP二磷酸腺苷4--CP4一氰酚4一AAP4一氪基安替比林PAPPOD,4--AAP,4一cP三者的简称AKP碱性磷酸酶1引言酶法测定TG方法很多,其中GPO—PAP法比其它方法具有更多的优越性而被推荐.综观其优点:具有方法简便,易于自动化I线性范围宽以及灵敏,精密和相对特异等,适合常规测定,但由于不经抽提,血清中存在的多种物质会引起干扰,其中FG的干扰最引人注目, 能引起血浆中FG增高的原因很多,诸如某些疾病,代谢紊乱,紧张,静脉营养,接受含甘油的药物治疗以及注射肝素后均可增高.目前,排除FG干扰的方法有二种,一是用不含脂酶的TG试剂作一FG空白减去(称外空白法)此法可同时测定FG值,但试剂成本和工作量均增加一倍.且脂血标本会产生负干扰,除非用不含脂酶和GK的酶试剂作标本空反应过程如下:白,但又增加工作量和费用,另一有效的方法是试剂分二步加入的预孵育法(称内空白法), 此法不增加费用,手工操作多加一步试剂,井能输入绝大部分牌号的自动分析仪,操作简便, 由于此法排除了酶法测定TG的主要干扰,且精密度和准确性均较好,为了配合脂类测定标准化工作的开展,本学会推荐此法作为TG测定的常规方法,对方法的细节规定如下.2原理将GPO—PAP法的试剂分成二部分,其中LPL(或/和脂酶)和双色原中的d--AAP组成试剂Ⅱ,其余部分成为试剂1,血清加试剂1,37℃孵育,因无LPL,TG不能水解,FG在GK和GPO作用下反应,生成HO.但因体系中不含d—AAP,Trinder反应不能完成.甘油——_=;==_.一磷酸甘油—_竺I:—磷酸二羟丙酮ATPADPH0+02H,0+0P0D然后加入试剂Ⅱ(LPL和4AAP),TG反应,最后生成红色苯醌亚胺,见下式TG+3H2OILPL+甘油+3FA0K3一磷酸甘油磷酸二羟丙酮AT/PA,DP2H2(02022H2O"{-Hc,一/,d—CP+4一AAP苯醌亚胺d0苯醌亚胺吸收峰波长为500nm,由于吸收峰较平坦,波长在480—520nm范围内均可测定.3仪器3.1手工操作光度计,分光光度计(普及型)和半自动分析仪均适用,微量加样器,吸管以及稀释仪均应校准3.2自动分析能完成二步反应程序的自动分析仪均适用.4试剂4.1原料试剂的纯度要求脂酶(EC3.1.1.3)来源于酒曲菌属或假单胞菌属, 杂酶中ATP酶应≤0.001%,无葡萄糖氧化酶和尿酸酶}比活性≥2400U/mg冻干物(25"C, 橄榄油)LPL(EC3.t.1.34)来源于假单胞菌属.杂酶中葡萄糖氧化酶≤0.001-尿酸酶≤0.05%,ATP酶40.00.5.比活性100U/mg冻干物(25'C.胆固醇油酸盐).GK(EC2.7.1.30)来源于芽胞杆菌属或念珠菌属,杂酶中测不出氧化酶,古甘油应<5.g/l00U,比活性≥5U/mg冻干物(25"C,甘油,ATP),芽胞杆属GK的三级结构和热稳定性均比念珠菌属GK要好.GPO(EC1.1.3.一)来源于小球菌属或纤维单胞菌属.杂酶中乳酸氧化酶≤0.002,尿酸酶≤0.001,不古过氧化氢酶,比活性≥60U/rag冻干物(37℃,L—a一磷酸甘油) POD(EC1.11.1.7)来源于辣根.杂酶中过氧化氢酶≤0.7,ATP酶0.001.纯度值(Ad03nm/A2)≥3.0,比活性≥250U/ms冻干物.(25℃,愈刨木酚,H2Oz).ATP含量≥98Tritonx一100不含过氧化物.Tris,一cP.4--AAP和胆酸钠等均为分析纯试剂.4.2试剂配制Tris—HC]缓冲液:0.15mol/L,pH7.6,4--CP2.5retool/L,硫酸镁10retool/L.胆酸钠3.5retool/L,Tritonx一1000.1g/L.ATPi.0mmol/I..临库检验信息导植1994牛第1春第2期酶溶液I:GK500U,GPO3000U,POD1000U,溶于50mlTris—Hcl缓冲液中.酶溶液Ⅱ:脂酶或LPL30000U,4一AAPlmmol溶于50mlTrist—Hcl缓冲液中. 4.3应用试剂配制4.3.1手工操作用应用试剂I:酶溶液I5ml加Trjs—HCd5ml混匀.应用试剂I:酶溶液Ⅱ5ml加Tris--HCI45ml混匀.4.3.2自动分析用应根据各分析仪试剂I和I的用量调整缓冲液与酶的比例(但缓冲液与酶I和酶I的最终比例9t0.5t0.5不变).一般分析仪试剂I和I的用量为3:I,但Monarchl000或2000,试剂I最多只能加8Ol,而试剂I可以多加,试剂I和I的用量以l,3较合适,分析仪应用试剂的配制见下表.附表分析仪应用试剂的配翩应用试剂配制比例析蓑兰一l00o程序特殊的分析仪可根据上述原则配制应用试剂.4.dTG测定参考物人血清中的TG,含有不同链长的脂肪酸和不同数量的不饱和键,以及TG的疏水性并被包裹在脂蛋白颗粒核心, 因此要制备与血清中TG完全相同的一级标准似乎是不可能的.TG反应的终产物是甘油.故常用甘油作参考物,但甘油本身不是分析物.不参加反应的全过程,只能认为是一种指示反应的参考物,且不能作为二步酶法的参考物.三油酸甘油酯.虽然不能完全代表血清中TG的脂肪酸组成,但与血清中TG的脂肪酸平均链长相似,可用高纯度的产品配成水溶液作TG 测定的参考物.2mmol/L三油酸甘油酯水溶液的配制精密称取三油酸甘油酯l77mg(可直接称入l00ml容量瓶中),加Tritonx一1005ml,摇动,使成乳浊状,置56℃水溶约l0分钟.澄清临庳挂驻信息导掖1994年苹1卷羊2期后加蒸馏水90ml,冷却至室温,再加蒸馏水至刻度线,2ml安培分装置4℃至少稳定二年,注意:切勿冰冻,冰冻后溶液变混(加热后会澄清),久冻后值会降低.5标本采集,处理和贮存5.1受检者在抽血前一周应保持平时的饮食习惯,停用影响血脂的药物(如降脂药和避孕药等),禁食12小时后清晨空腹取坐位(除卧床不起者外)至步5分钟后来血,用止血带时间不超过一分钟,静脉穿刺成功后立即松开止血带抽血.5.2血标本静置室温自行凝固,及时分离血清,取出备甩,血凝固后如不及时分离血清,红细胞中的磷酸酶会选出,水解血清中的甘油酯, 干扰测定.EDTA或肝素抗凝血浆亦可用作测定,注意在分离浆时要有足够的离心力和离心时间使血小板完全沉淀,否则测定体系中的表面活性剂能使务血小板破碎,释放出AKP干扰测定,用血浆测定结果比血清低3.5.3如不能及时测定,血清或血浆应贮于密闭的窖器内,置4℃一周内TG稳定,--20℃数月内稳定.B操作步骤6.1手工操作分别加10gl标本,标准溶液和蒸馏水于测定管,标准管和空白管中,各管均加0.5ml试剂I,混匀,37℃水浴5分钟}然后各管再加入0.5ml试剂I,混匀后37℃水浴10分钟,波长500rim,空白管校零,读取标准管与测定管A值,按下式计算结果:器善号×标准管含量;TOmmot/6.2自动分析参数波长:50Onm,反应温度: 37℃,标准:2.0mmol/L,空白:试剂,标本:3pl}试剂I:240l,反应时间:d分钟试剂I:80gl,反应时间j8分钟.注:1.如用双波长,次波长为620nm2.如标本增加,试剂I和I亦相应增加,标本试剂比以ll00左右为宜.3.按本法配制的试剂6分钟到达终点,某些仪器反应时间限制得较短,如Techni—con为9分钟,Ciba--Corning为10分钟,第一步反应4分钟,第二步反应只能5或6分钟,但对测定结果影响不大.d.Monarch程序中第二试剂先和标本混合反应,试剂I应放在第二试剂的位置,试剂I则放在第一试剂位置.7本法的技术指示7.1排除Ft3能力预孵育4分钟能完全排除2mmol/L的FG7.2试剂空白吸光度A500rim≤0.05.7.a反应到达终点时间指TG反应,不包括预孵育37℃≤8分钟.7.4显色后的稳定性≥30分钟.7.5灵敏度2mmol/L(177mg/d1)的TG,A50Onm应>/0.2.7.6特异性脂酶或LPL除能水解TG外还能水解甘油一酯和甘油二醋(血清中二者约占TG的3),亦被计算在TG中,实际上测定的是总甘油酯.7.7线性范围11.3mmol/L(1O00mg/d1).7.8精密度批内CV≤3.0'批间CV≤5.0.7.9准确度本法结果和V anHandeI法及减FG空白的GPO—PAP法一致.7.10干扰本法显色(Trinder)反应中存在干扰,干扰因素与胆固酵测定类同.胆红素≥100vmol/L或抗坏血酸≥170pmol/L时出现负干扰,血红蛋白的干扰是复杂的,它本身的红色会引起正干扰,溶血后,红细胞中的磷酸酶可水解磷酸甘油产生负干扰,当Hb~Ig/L时反映为负干扰I≥1g/L时出正干扰,但Hb≤2g/L时干扰不显着,明显溶血标本不宜作TG 测定.5种常用抗凝剂在规定的抗凝浓度内不影响结果.34种常用药物(不包括降脂药,避孕药或注射肝素)在治疗浓度时不影响测定结果.脂血标本(TG浓度在本法线性范围内)无明显干扰.8对试剂盒的质量要求a.1技术指标试剂盒的各项技术指标均应达到上述水准.8.2稳定性未开封的试剂至少在6个月内稳定(上述指标不变),这就需要加入稳定剂,并要求加入的稳定剂对反应无干扰,应用试剂贮4℃至少稳定三天,此期间不应出现可见的红色,技术指标不应降低.8.3橙明度液态试剂配成应用液后,以及冻干,干粉或片剂复溶后应无微细的颗粒和肉眼眼可见的红色,A500nm≤0.05.8.4试剂盒应标明出厂日期及有效期,说明书应列出试剂配方和技术指标.9参考值TG水平与种族,年龄,性别以及生活习惯(如饮食,运动等)有关.我国人的TG水平显着低于欧美白人,国内李健斋等根据北京市人群的调查提出成年人的合适TG水平<2.26mmo[/L(<200mg/d1)I>11.3mmol/L (1000mg/d[)为严重的高TG血症.临康世齄信息导报1994牛苇l毫蓦2期lo参考文献(略)附注:鉴于目前TG测定的二步酶法试剂盒只有十别厂家生产,使用该法的实验室亦只局限在少数地区t因此,现阶段在推荐二步酵法的同时允许一步酵法并存, 然后逐步过渡到统一采用去FG的二步酶法,但一步酵法亦应按照标准化的要求,即除配成单一试荆(试剂中ATP可低至05mmol/L)和一步反应外,其它要求例如原料试剂的纯度要求,参考物.标本的采集,处理和贮存,方法的技术指标(不包括排除FG的能力)以及对试剂的质量要求均同二步酶法.要求生产TG测定试剂盘的厂家尽快发展二步酶法试剂盘的生产.并要求研究实验室和参加脂类测定标准化的实验室率先采用去FG的二步酶法.其它实验室应创造条件逐步统一采用二步酵法.在未统一方法前,实验室报告TG 测定结果时应注明"去FG的值或.未去FG的值.这将有助于临床医生对结果的正确解释.丽珠试剂厂申检试剂全部合格7月22日,由卫生部中国药品生物制品检定所主持的生物制品"贴签"在珠海丽珠集团丽球试剂厂进行.在检定所,市药政部门的专家监督下,贴有"中国药品生物制品检定所生物制品封整"的3批乙肝表面抗原试剂(HB—sAg)和5批丙肝试剂(HCV)被逐一启封,接着,工作人员将特制的"检定合格"的全息防伪标签一一贴在丁试剂盒上.据在场的中国药品生物制品检定所专家说,自卫生都确定"对用于供血员血样检验的体外免疫诊断试剂实行批批国家检定"这一建国后最严格的检定程序及合格标准以来,丽珠试剂厂是国内目前少数申报检验并唯一两个产品,三个以上批号均合格的厂家.为了保障输血安全及控制乙肝,丙肝,艾滋病,梅毒等严重传染性疾病的传播,卫生部于2月向全国颁发文件,要求自今年起对所有用于供血员血样检验的HBsAg,HCV等体外诊断试剂实行批批国家检定,并相应制订了极其严格的抽检程序及合格标准.凡按抽检程序检定合格的产品,由检定所下发特制的全息防伪标签并即时监督贴签,方可出厂销售,进入临床.若不合格,将在中央及地方检定人员监督下销毁报废.据悉,这是迄今为止我国对用于供血员血样检验的体外免疫诊断试剂实行的最严格的抽检程序和最严厉的检定标准.丽珠试剂厂自去年全面推行GMP以来,从增强市场经济条件下全员质量意识人手,一是进一步健全完善了质量保证体系和质量控制系统I二是建立了质量审计制度I三是对生产, 质量管理的每一个部门,每一道工序,每一个岗位都制订了标准操作规程(soP),并严格执行,从而保证了产品质量稳步提高.此次检定合格的乙肝HBsAg达到灵敏度<Ing(adf亚型)等标准,丙肝HCV达到】98份临床Panol, 阴性阳性符合率及总符合率95.转载自《健康报》J994年8月5日第三版。
血清甘油三酯测定标准操作规程
血清甘油三酯测定标准操作规程1.检验原理（酶法）甘油三酯经脂蛋白酯酶（LPL）作用，可以水解为甘油和游离脂肪酸，甘油在ATP和甘油激酶（GK）的作用下，生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与4-氨基安替比咻（4-AA）及和3,5-二氯-2-羟笨磺酸钠（DHBS）在过氧化物酶（PoD）作用下，生成红色酶类化合物，其显色程度与甘油三酯的浓度成正比。
甘油三酯+。
2上J甘油+游离脂肪酸甘油+ATP—二→3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O2磷酸二羟丙酮+乩。
22”2°2+4-AA+DHBS您.>红色醒类物质+4H2O-20°C可保存1年。
样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603∕DI-600标准操作规程）5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用O.9%(W∕V)的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释不超过5倍。
7. 2.单位换算:mg∕dl=mmol∕L×88.58.检验方法的局限性8.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在510nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：Rl和R2均为无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在51Onm处，光径ICm时，空白吸光度AWO.2008.4线性区间：试剂的线性区间为[1.13-9.04]mmol∕L,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[1.13-2.03]mmol∕L区间内，线性绝对偏差不超过0.20mmol∕L;[2.03-9.04]umol∕L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：相对偏差应不大于±15%。
8.6分析灵敏度:在51Onm处,光径IenI时,测量已知浓度样品换算成ImmoI/L 的甘油三酯时，吸光度变化4A三ol∕L20.0058.7精密度8.7.1批内精密度：CV≤5%8.7.2批间精密度:R≤10%8.8稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7.1的要求。
血清脂类测定在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病中的意义
血清脂类测定在诊断老年动脉粥样硬化及冠心病中的意义【摘要】目的探讨血清中血脂、脂蛋白及载脂蛋白与老年动脉粥样硬化及冠心病的相关性。
方法嘱受检者禁食肉类3 d，空腹12 h以上，清晨采静脉血液2 ml左右置于试管内，待血液凝固后，经离心沉淀分离血清，用日立牌7600型全自动生物化学分析仪进行检测。
结果老年动脉粥样硬化及冠心病患者组与老年健康对照组在性别上，血清脂类测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）；老年动脉粥样硬化及冠心病患者组的HDL-C及ApoA1/ApoB的比值显著低于老年健康对照组，结果经统计学处理，两者差异有统计学意义（P＜0.05），而HDL-C/TC 的比值明显低于老年健康对照组，结果经统计学处理，两者差异有统计学意义（P ＜0.01）；老年动脉粥样硬化及冠心病患者组的LDL-C、ApoB的测得值明显高于老年健康对照组，结果经统计学处理，两者差异有统计学意义（P＜0.05），而Lp(a)的测得值却非常明显地高于老年健康对照组，结果经统计学处理，两者差异有统计学意义（P＜0.01）。
虽然老年动脉粥样硬化及冠心病患者组的ApoA1的测定值也普遍低于老年健康对照组，TC、TG的测得值普遍高于老年健康对照组，但是，结果经统计学处理，两者无统计学意义（P＞0.05）。
结论HDL-C、LDL-C、ApoB 、Lp(a)、及HDL-C/TC、ApoA1/ApoB的异常统称为老年动脉粥样硬化及冠心病的危险因子，临床对老年人的血清脂类的检测，尤其是对HDL-C、LDL-C、ApoB 、Lp(a)、及HDL-C/TC、ApoA1/ApoB的检测结果异常时，可以作为临床诊断老年动脉粥样硬化及冠心病的重要参考指标之一。
【关键词】血脂；脂蛋白；载脂蛋白；老年冠心病；动脉粥样硬化临床上所谓的高脂血症（hyperlipidemia）是由于脂肪代谢或运转异常使血清中一种或几种脂质高于正常，可以表现为高胆固醇血症（hypercholesterolemia）、高甘油三酯血症（hypertriglyceridemia）或两者兼有（混合性高脂血症）。
血清脂蛋白测定
主 编 刘俊香 刘亚莉
副主编 赵菊芬 郭大英 曹红丹
编 委（以姓氏笔画为序）
丁洪琼
权苑
刘亚莉
刘俊香 吴华平 杨 杰
杨 健 赵菊芬
郭大英
黄 艳 曹红丹
廖林梅
目录
第一章 第二章 第三章 第四章 第五章 第六章 第七章 第八章 第九章 第十章
绪论 健康史评估 资料分析与护理诊断 常见症状评估 身体评估 心理与社会评估 临床实验检查 心电图检查 影像学检查 护理病历书写
2．临床意义 （1）血清钾＞5.5mmol/L为高钾血症。见于①钾排泄减少
，如急性肾衰竭、慢性肾衰竭、肾上腺皮质功能减退、远端 肾小管上皮细胞泌钾障碍、长期使用潴钾利尿剂、长期低钠 饮食等。②摄入过多，如输入大量库存血、补钾过多过快、
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过度使用含钾药物。③过多细胞内钾外移，如创伤、大面积 烧伤、挤压综合征、休克以及家族性高血钾麻痹等。
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一、血清电解质检查
（二）血清钾测定
2．临床意义 （2）血清钾＜3.5mmol/L为低钾血症。见于：①钾丢失过
多，如严重呕吐、长期腹泻、大剂量应用排钾利尿剂、肾衰 竭多尿期、肾上腺皮质功能亢进症、醛固酮增多症等。②钾 摄入不足，如长期低钾或无钾饮食、禁食、营养不良或吸收
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障碍、大手术后，不能进食又未补钾。③钾向细胞内转移， 如代谢性碱中毒、大量应用胰岛素、甲亢等。
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5、自学：脑脊液检查、浆膜腔积液检查
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目录
第七节 常用血液生化检查
一、血清电解质检查
血清钠、钾、钙、磷、氯的测定
二、血清脂类检查
（一）血清总胆固醇测定
（二）血清甘油三酯测定
（三）血清高密度脂蛋白和血清低密度脂蛋白测定
实验四 血清甘油三脂的测定
高胆固醇血症：血清TC水平增高
TC> 5.72mmol/L , TG <1.70mmol/L
混合型高脂血症：血清TC与TG水平均增高
临
TC > 5.72mmol/L ,TG >1.70mmol/L
床
上
高甘油三酯血症：血清TG水平增高,>1.70mmol/L
而TC含量正常，即TC < 5.72mmol/L
11.0mmol/L • ——（用生理盐水稀释后重新测定，测定结果乘于稀释
倍数）
六、【临床意义】
TG升高：
1、随年龄增长有上升趋势，体重超标者。 2、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、
甲状腺功能减退等。 3、先天性脂蛋白脂酶缺陷，脂肪肝及其他肝病。
4、妊娠后期，糖原累积病。
TG降低：
甲亢、肾上腺皮质功能降低、肝功能严重低下等。
载脂蛋白
载脂蛋白 非极性 脂内核
胆固醇酯
甘油三酯
大致为球形颗粒，由两大部分组成，即疏水性的内核和亲水性的外壳。内核
由不同量的CE与TG组成，表层由载脂蛋白、PL及FC组成，FC及PL的极性基团向外
露在血浆中，载脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而亲水部
分突出于脂蛋白颗粒的表面
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高脂血症的分类？
五、【操作步骤】
（3）计算：
TG (mmol/L)
测定管吸光度（Au）
=
× 标准液浓度
标准管吸光度（As）
参考值：
1.13mmol/L
0.56~1.70mmol/L
六、【注意事项】
• 1.标本要求是餐后12-14h的空腹血液 • ——（血清TG易受饮食影响）。 • 2、标本存放4℃不宜超过3天 • ——（避免TG水解而释放出甘油）。 • 3、本法的线性关系上限为11.4mmol/L，若所测TG值超过
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血清脂类测定血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。
有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1．胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。
化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。
另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。
2．甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。
有报道血清样品中的游离甘油实际量是～L，相当于甘油三酯的～L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[×总甘油（mmol/L）]（mmol/L）。
这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。
据报道，血清样品的游离甘油一直是个未知数，无法测准。
为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其含量很少，暂且忽略不记。
甘油三酯测定的参考物，推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W），此参考物适用于化学法。
在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。
3．磷脂测定血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。
如需要分别检测各种磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。
目前，临床仅测定血清磷脂总量。
血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。
化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根，故将磷脂的磷称为脂性磷。
由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中磷约占4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数，一般为25。
由于化学法均需要抽提，再测抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。
酶法是利用磷脂酶进行定量测定。
生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。
磷脂酶D特异性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的95%，临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。
4．游离脂肪酸测定游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪酸，故又称为非酯化脂肪酸，其量很少，采用方法必须是灵敏的方法，还需要避免脂肪水解产生脂肪酸的干扰。
测定方法有：①滴定法需要微量滴定装置，因为要通过肉眼观察颜色，难免会有主观因素的影响，所以难以测定准确，很难用于常规；②光度法，以铜皂法常用；③酶法，主要采用特异性不强的脂肪酶D进行检测，方法特异，快速准确，已常规应用于临床。
第一节胆固醇测定血清中胆固醇包括CE和FC，酯型的CE占70%，FC占30%。
CE中的C3的-OH在LCAT作用下，可分别结合亚油酸（43%）、油酸（24%）、软脂酸（10%）、亚麻油酸（6%）、花生四烯酸（6%）、硬脂酸（3%）等脂肪酸结合而成。
血清中胆固醇在LDL中最多，其次是HDL和VLDL、CM最少。
血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。
1．化学法化学法一般包括：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。
代表性的方法有Sperry-Webb法，通过①～④步骤操作过程。
常规操作中多采用省去了②、③。
或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法，现将此法作为标准参考方法予以引用。
2．酵法测定CE在胆固醇酯酶（cholesterolesterase）作用下水解成FC和NFFA，TC再经胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase,COD）氧化成△4胆甾烯酮和H2O2。
再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4胆甾烯酮生成量,以作为TC的定量依据。
该法是目前常规的应用方法，快速准确，标本用量少，便于自动生化分析仪作批量测定。
一、Abell-Kendall改良法1．原理血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提，使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再进行Liebermann-Burchard 显色反应，620nm比色定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。
2．试剂组成*：在三角烧瓶内，加入无水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入浓硫酸，混合，静置10min，又加冰醋酸混匀，备用。
3．操作图15-1 血清胆固醇（Abell法）测定操作图按图15-1操作。
4．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×(mmol/L)二、酶法（CEH、COD-POD法）首先将血清中胆固醇酯在胆固醇酯酶（CEH）水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶（COD）作用下，生成△4-胆甾烯酮和H2O2，再H2O2经过氧化物酶（POD）作用在4-氨基安替比林（4-AA-P）及N-乙基-N-（3-磺基醋酸）-3甲氧基苯胺（N-ethyl-N-(3-sulfopropyl)-manisidine,ESPAS）参与下，生成红色醌亚胺色素。
H2O2+ESPAS+4-氨基安替比林→红色醌亚胺色素（一）手工测定法1．试剂组成代号种类浓度组成贮2～8℃有效时间Na2HPO450mmol/LNa2H2PO450mmol/L胆酸钠3mmol/L4-氨基安替比林LR1*ESPAS14mmol/L24hCarbowax-6000LCEH33U/LCOD117U/LPOD6700U/LR2标准液L用异丙醇溶解胆固醇*混匀，调pH至±(25℃)，或购买试剂盒。
酶以活性单位表示。
2．操作按图15-2操作。
3．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×(mmol/L)（二）自动化分析仪测定以CL-7200型全自动生化分析仪检测为例。
1．试剂组成A液：CEH、POD、抗坏血酸氧化酶等。
B液：COD、4-氨基安替比林等。
图15-2 血清胆固醇测定（酶法）操作图2．上机参数项目参数方法终点法波长双波长（540nm，700nm）反应温度37℃试剂A反应时间2～3min试剂B反应时间5～6min样本用量3μl试剂A用量250μl试剂B用量120μl单位mmol/L3．操作过程4．计算以△A=A2-A1，根据同样处理之标准或质控物计算，打印结果。
5．注意事项（1）试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
（2）试剂在有效内2～8℃避光食保存。
（3）胆固醇含量超过200mmol/L，需用生理盐水稀释再测。
第二节甘油三酯测定甘油三酯又称中性脂肪，由于其甘油骨架上分别结合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，相应称为甘油三酯（TG）、甘油二酯（DG）和甘油一酯（MG）。
血清中90%～95%是TG，TG 中结合的脂肪酸分别为油酸（44%）、软脂酸（26%）、亚油酸（16%）和棕榈油酸（7%）。
血清TG测定方法一般分为物理化学法、化学法及酶法三大类。
血清中TG的化学组成并不单一，准确求其分子较为困难。
因标准不同，测定结果存在差异。
化学法多采用三棕榈精（软脂精）（分子量）、三油精（分子量）为标准，按摩尔浓度计算。
酶法测定以三油精为标准物进行换算。
1．化学法化学测定法包括：①TG的抽提分离；②皂化；③甘油糖的氧化；④氧化生成甲掌显色定量等四个阶段。
操作较为繁杂，影响测定因素太多，本法准确性差，一般很少用。
2．酶法测定酶法测定包括：①TG的抽提与皂化；②加水分解生成甘油糖定量等二个阶段。
目前常规检测应用的方法有甘油激酶（glycerolkinase,GK）法和甘油氧化酶（glycerol Oxidase,GOD）法。
操作简便，快速准确，并能在自动化生化分析仪上进行批量测定。
一、乙酰丙酮法1．原理血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯，经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸，甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3，5二乙酰，1，4二氢甲基吡啶，其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比，420nm测定定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞TG的提取测定。
2．试剂组成代号种类浓度组成贮2-8℃有效时间3．操作按图15-3操作。
图15-3 血清甘油三酯（乙酯丙酮法）测定操作图4．计算血清TG浓度=E SA/E ST×(mmol/L)二、酶法（GK-GPO-POD比色法）血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2，H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。
（一）手工测定法1．试剂组成代号种类浓度贮存2～8℃R1磷酸甘油氧化酶≥L冷藏（A液）抗坏血酸氧化酶≥L甘油激酶≥L4-氨基安替比林80mg/LR2脂蛋白脂酶≥L冷藏过氧化物酶≥10KU/LESPAS300mg/LR3（参考液）甘油酸三脂200mg/dl（L）冷藏*：一般采用商品试剂盒图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图2．操作按图15-4操作。
3．计算血清TG浓度=E SA/E ST×(mmol/L)（二）生化分析仪检测全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。
1．试剂A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。