薄层板制备和点样
tlc薄层色谱法操作步骤
tlc薄层色谱法操作步骤
TLC薄层色谱法操作步骤如下：
1. 选取TLC板：选择一张标记编号的TLC板，并涂上一层固定相，常用的固定相包括硅胶和氧化铝等，这些材料通常被涂在玻璃板上，形成一个厚度为0.1-0.25mm的均匀层。
2. 制备样品：将待分析物质溶于合适的溶剂中，制备成适当浓度的溶液。
3. 点样：使用毛细管将样品“点”到左下角的板上。
该点应距离底部和边缘1cm。
4. 分离：将涂有样品的TLC板置于一个密闭的容器中，使其在室温下进行色谱分离。
分离过程中，待分析物质会随着移动液向上运动，并在固定相上留下一系列的斑点。
分离时间取决于待分离物质的性质和所使用的移动液。
5. 开发：取出分离完毕的TLC板，将其放入一个开发槽中，用适当的溶剂进行开发。
开发液的选择取决于待分析物质的性质和固定相的种类。
开发时间也取决于样品和开发液的性质。
6. 分析：开发完毕后，从开发槽中取出TLC板，将其放置在紫外灯下照射，观察样品斑点的颜色和形状。
薄层色谱基础知识及斑点异常-图文
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斑点异常与克服
边缘效应
3.预饱和
在薄层板上一般是边缘上的展开剂较容易挥发, 如果这几个有机溶剂的挥发性能差异比较大,那 么就会造成薄层板上边缘和中间展开剂比例的差
异而产生展开速度不一致的现象
克服方法：展开前要充分饱和
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斑点异常
❖S形及波形斑点
波形斑点
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薄层板的制备
黏合剂 cmc-na溶液的存放 注意放置时间太长的CMC-Na溶液可 能会发黄，而且可能有霉菌出现， 最好不要使用。
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薄层板的制备
制板 操作：除另有规定外，是指 将1份固定相和3份水溶液 ，研磨混合，置玻璃板上 使涂布均匀，平台上于室 温下晾干，活化后，置有 干燥器中备用。
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22
薄层色谱的点样
❖ 点样的距离
自制板
高效板
直径不大于 4mm
宽度5－10mm
>8mm
10－15mm
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直径不大于 2mm
宽度4－8mm
>5mm
8－10mm
薄层色谱的点样
❖ 点样的注意点
1.不要弄破薄层板 2.点样量大时，少量多次， 3.点好样的薄层板用电吹风吹干或 放入干燥器里晾干
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薄层色谱的展开
薄层色谱基础知识及斑点异常_图文.ppt
薄层色谱
操作的流程
薄层 点样 板
展开
显色
结果 判定
2
薄层板的制备
❖ 固定相 ❖ 什么是固定相？
3
薄层板的制备
❖ 常用固定相
1、聚酰胺 2、硅胶 3、硅澡土
4、氧化铝 5、纤维素
6、其他
4
薄层板,跑版注意事项
薄层色谱法---跑板之杨若古兰创作1.点样用微量进样器进行点样.点样前，先用铅笔在层析上距末端2cm 处轻轻画一横线，然后用毛细管汲取样液在横线上轻轻点样，点的黑点较小，睁开的色谱图分离度好，色彩分明.如果要从头点样，必定要等前一次点样残存的溶剂挥发后再点样（用电吹风的热风吹干再点），以避免点样黑点过大.普通黑点直径大于2mm，不宜超出5mm.点好样的薄层板用电吹风的热风吹干.底线距基线1～2．5cm，点间距离为lcm摆布，样点与玻璃边沿距离至多lcm，为防止边沿效应，2.睁开将点了样的薄层板放在盛在有睁开剂的睁开槽中，因为毛细管感化，睁开溶剂在薄层板上缓慢前进，前进至必定距离后，取出薄层板，样品组分固挪动速度分歧而彼此分离.①睁开室应预饱和.为达到饱和后果，可在室中加入足够量的睁开剂，密封室顶的盖.②睁开剂普通为两种以上互溶的无机溶剂，而且临用时新配为好.强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层，取用体积大的一层作为睁开剂.绝对不该该把各构成溶液倒入睁开缸，振摇睁开缸来配制睁开剂.混合不均匀和没有分液的睁开剂，会形成层析的完整失败.各构成溶剂的比例精确度对分歧的分析任务有分歧的请求，尽量达到实验室仪器的最高精确度，比方：取1ml的溶剂，应使用1ml的单标移液管，③薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人睁开室中睁开.④睁开应密闭，展距普通为8～15cm.薄层板放入睁开室时，睁开剂不克不及没过样点.普通情况下，睁开剂浸入薄层下端的高度不宜超出.⑤睁开剂每次睁开后，都须要更换，不克不及反复使用.（睁开缸中得睁开剂弃去，密封在容量瓶中得睁开剂可在当天使用）⑥睁开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完整，然后进行检视.⑦，当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例.3.黑点的检出睁开后的薄层板经过干燥后，经常使用紫外光灯照耀或用显色剂显色检出黑点.对于无色组分，在用显色剂时，显色剂喷洒要均匀，量要适度.紫外光灯的功率越大，暗室越暗，检出后果就越好.睁开分离后，化合物在薄层板上的地位用比移值(Rf值)来暗示.化合物黑点中间至原点的距离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的Rf值.留意事项：一．预饱和分为2部分：1、睁开缸的预饱和：在睁开之前，使睁开剂蒸汽在睁开缸内饱和，使睁开缸汽液形态达到必定的波动形态，此时尚未放薄层板.2、薄层板的预饱和：在睁开缸饱和后，放入曾经点样终了的薄层板，进行饱和，使薄层板全体差别性减小.具体做法是：在双槽层析玻璃缸内,将其中一个槽内倒入配好的睁开剂,另一个槽内放入薄层板,盖好上面的玻璃盖,这时候候就是在预饱和.关于饱和时间：根据睁开剂而定.1、睁开剂组分极性差别不大的且挥发性好的，时间可以短一些，普通15－20分钟即可；2、极性差别大的，且挥发性差别大的，时间要长一些，普通要30－60分钟；3、极性差别大的，且挥发性差别不大的，时间要长一些，普通要20－30分钟；4、极性差别不大，且挥发性差不大的，时间可以短一些，普通要10－15分钟；5、水饱和无机试剂或无机试剂饱和水的，时间普通都比较长，30－60分钟.6、另外，大家打开关闭睁开缸的速度要快，放板取板的速度也要快，否则预饱和的后果全被你后期的操纵给抹杀了！！二．睁开室应放在水平、波动的实验台上，不克不及有阳光直射，也不克不及在通风处放置，离开热源，防止温度动摇对分离晦气；光敏物资的分离应将睁开室置于暗处进行.三．点样时间不该超出三分钟.硅胶的硅醇基以氢键方式优先吸附水，物理吸附使硅胶的活度降低，影响了弱极性物资的吸附，化合物的Rf值响应地增大.硅胶薄层的吸水速度很快，当用事后经过活化的薄层板，在点样过程中干燥的薄层会立即吸附空气中的水蒸气，在数分钟内达到平衡，吸附水蒸气的量决定于点样速度即流露在空气中的时间和空气的绝对湿度.Dallas指出0.25mm 厚、20cm×20cm的硅胶薄层板在50%绝对湿度中放置约3min就失去活性的一半，而放置15min时吸附的水分已达到最大值.在用不异条件分离同一组化合物得到的结果不克不及重现时，必须考虑到绝对湿度对睁开的影响，特别是我国南北地区湿度相差很大；即使在同一实验室冬冬季节分歧湿度也有明显不同，如果不留意湿度的影响就得不到预期的结果.睁开时的最好绝对湿度范围决定于溶质和溶剂的极性，随溶质和溶剂极性的添加绝对湿度的范围也响应地增大，在用苯作睁开剂时，适宜的绝对湿度范围很窄，是以湿度对分离的影响十分明显；当用乙醚为睁开剂时，绝对湿度在20%-50%,时均可得到重现的结果；如用氯仿-异丙醇-25%氨水（45:45:10）为睁开剂时，则绝对湿度在20%-80%范围内可得到较好的重现性.这类不同来自睁开室中睁开剂蒸气有取代吸附在薄层上水分子的趋势，取代量决定于睁开剂蒸气的极性和量；苯为非极性溶剂，其取代感化小，因为苯与水极性相差很大，即使吸附水量有巨大的变更也能惹起Rf值的改变，甚至在薄层上构成“两个前沿”而使色谱畸形.而在用极性溶剂如乙醇、甲醇或氨水为睁开剂时，则吸附的水分子被大量取代，本来吸附的水分降低，这时候平衡次要决定于高浓度的溶剂蒸气.睁开剂极性越大，薄层上吸附水蒸气的影响越小，是以能在一较宽的湿度范围内得到重现性较好的结果.四．在点样前薄层板在110℃活化30min，然后用另一块玻璃板盖在活化后的薄层上，只要原点区露出以便点样.总之在绝对湿度50%-60%时，平衡后的硅胶含水量约13%，多数情况下，是适用的.。
薄层色谱法测定标准操作规程
薄层色谱法测定标准操作规程目的：建立薄层色谱法测定标准操作规程。
（《中华人民共和国药典》2010版附录）范围：适用于薄层色谱法的测定。
职责：检验员，QC主管。
内容：1 简述：薄层色谱法，是将适宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均匀薄层。
等点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药品的鉴别，杂质检查或含量测定的方法。
2 仪器与材料：2.1 薄层板：2.1.1市售薄层板市售薄层板分普通薄层板和高效薄层板，按固定相种类又可分为硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、微晶纤维素、硅藻土、氧化铝、聚酰胺薄膜等薄层板。
2.1.2 自制薄层板在保证色谱质量的前提下，如需对薄层板进行特别处理和化学改性，以适应供试品分离的要求时，也可用实验室自制的薄层板，自制薄层板系指手工（或借助涂布器）将固定相涂布于玻璃板或其他适宜载板上使成为有一定厚度的均匀薄层。
常用的固定相有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、微晶纤维素等，其粒径一般为10~40um。
2.2 点样器：采用手动、半自动或全自动点样器材，手动点样时一般采用微量毛细管。
2.3 展开容器：应使用适合薄层板大小的平底或双槽薄层色谱专用展开缸，并配有严密的盖子。
水平展时使用专用水平展开缸。
2.4 显色与显色装置按各品种项下规定。
可采用喷雾显色、浸渍显色或蒸气熏蒸显色，喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显色可用玻璃容器或适宜的展开缸代替；蒸气熏蒸显色可用双槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。
2.5 检视装置为装有可见光或紫外光（254nm及365nm）光源及相应的滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄色谱图用，暗箱内光源应有足够的光照度。
3 操作方法：3.1 薄层板制备：3.1.1 市售薄层板临用前一般应在110℃活化30min，聚酰胺薄膜不需活化。
铝基片薄层板或聚酰胺薄膜均可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的涂层不得有破损，如在储放期间被空气中杂质污染，使用前可用甲醇、二氯甲烷与甲醇的混合溶剂在展开容器中上行展开预洗，取出，晾干，活化后使用。
薄层板的制备、活度检测及应用
验一薄层板的制备、活度检测及应用一、实验目的与要求1．掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法。
2．掌握吸附剂活度测定的原理及方法。
3．应用薄层层析法检识中草药化学成分。
4. 了解薄层色谱的原理及应用范围。
二、实验原理薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。
把欲分离的样品点在薄层板的一端，然后将点样端浸入适宜的展开剂中, 在密闭的层析缸中展开，使混合物得以分离的方法。
由于层析在薄层上进行故而得名。
薄层层析是一种微量、快速的层析方法。
它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定，还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。
薄层层析根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素、硅胶、硅藻土)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。
薄层层析中以吸附薄层为多用，吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶（氧化铝的活化温度为150℃－160℃，硅胶的活化温度为105℃－110℃）。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。
分配薄层层析在展开过程中，各成分在固定相和流动相之间作连续不断的分配，由于各成分在两相间的分配系数不同，因而可以达到相互分离的目的。
薄层层析选择展开剂视被分离物的极性及支持剂的性质而定。
如果薄层层析所用的支持剂是吸附剂，在同一吸附剂上，不同化合物的吸附性质有如下规律：1.饱和碳氢化合物不易被吸附；2.不饱和碳氢化合物易被吸附，分子中双键愈多，则吸附得愈紧密；3.当碳氢化合物被一个功能基取代后，吸附性增大。
吸附性较大的化合物，一般需用极性较大的溶剂才能推动它。
选择展开剂的另一个依据是溶剂的极性大小。
极性大的化合物需用极性大的展开剂，极性小的化合物需用极性小的展开剂。
一般情况下，先选用单一展开剂如苯、氯仿、乙醇等，如发现样品个组分的R f值较大，可改用或加入适量极性小的展开剂如石油醚等。
薄层层析操作步骤
TLC操作步骤
1、配制展开剂
氯仿：甲醇：水=75: 35: 10
倒入层析缸≤1 cm，盖上盖子让层析缸饱和
2、准备薄层板
距离底边2 cm处用铅笔画线，间距1 cm标点，放烘箱30 min烘干
3、点样
拿出薄层板放到层析缸里没有展开剂的一侧，30 min，让板充分饱和；
用毛细管在铅笔标点处点一次样，用洗耳球迅速吹干，多次重复，样品直径不要超过3 mm 4、进行分离
放层析缸，盖盖子，分离约10 min，至顶端约4 cm处，拿出，用铅笔画出前沿线，吹干溶剂
5、显色
荧光板在试样展开后，在紫外灯下观察，背底发荧光，而试样组分点由于吸收了紫外光，就不发荧光或荧光较弱
6、计算Rf值
原点至斑点中心距离
原点至展开剂前沿距离。
简述采用硅胶板薄层色谱分离实验时具体的操作步骤和注意事项
简述采用硅胶板薄层色谱分离实验时具体的操作步骤和注意事项一、实验操作步骤采用硅胶板薄层色谱分离实验的操作步骤如下：1.硅胶板的制备：选择合适的硅胶板，如硅胶G板或硅胶H板。
将硅胶与适量的黏合剂混合，搅拌均匀后涂在玻璃板上，制成硅胶薄层板。
薄层板制成后需干燥，然后活化处理，以提高分离效果。
2.点样：将待分离的样品溶液点在硅胶板上，用毛细管或自动点样器进行点样操作。
点样时需注意控制点样量，过量的样品可能导致拖尾、边缘效应等。
3.展开：在密闭的容器中进行展开，选择合适的展开剂，确保待分离的组分能够得到较好的分离。
展开剂的选择应根据样品的性质进行优化。
4.显色：展开后的薄层板需进行显色处理，以便观察和检测组分的斑点。
根据待分离组分的性质选择合适的显色剂，如荧光剂、金属盐等。
5.检测与记录：通过合适的方法对薄层板上的组分进行检测，如紫外可见吸收光谱法、荧光法等。
记录各组分的斑点位置、大小及颜色等信息，以便后续的分析和处理。
6.薄层板的回收和处理：实验结束后，需对薄层板进行回收和处理。
对于有价值的组分，可进行进一步分离和纯化。
对于不再需要的薄层板，需按照实验室规定进行处理，避免对环境造成污染。
二、注意事项在进行硅胶板薄层色谱分离实验时，需要注意以下几点：1.硅胶板的选择与制备：根据实验需求选择合适的硅胶板类型（如硅胶G 板或硅胶H板）。
制备时需确保硅胶与黏合剂的比例合适，搅拌均匀，避免出现硅胶颗粒等杂质。
同时，制成的薄层板需干燥并活化处理，以提高分离效果。
2.点样操作：点样时需控制点样量，避免过量的样品导致拖尾、边缘效应等问题。
可以采用毛细管或自动点样器进行点样，提高点样精度和效率。
3.展开剂的选择与优化：展开剂的选择对于薄层色谱分离的效果至关重要。
应根据待分离组分的性质选择合适的展开剂，并进行优化实验，以提高分离效果。
同时，需注意展开剂的配比和组成，以获得最佳的分离效果。
4.显色处理：选择合适的显色剂对展开后的薄层板进行显色处理，以便观察和检测组分的斑点。
薄层色谱点样方法
薄层色谱点样方法薄层色谱（thin layer chromatography, TLC）是一种分离和分析混合物中化合物的常用方法。
它相对简单、快速、灵敏且经济实惠，因此在化学实验室中广泛应用。
薄层色谱的原理是根据物质在固定相（薄层）和流动相之间的相互作用不同而进行分离。
在进行薄层色谱时，首先需要准备一张薄层板，通常为玻璃、铝或硅胶薄片，上面涂有一层固定相，如硅胶或氧化铝。
然后，将待分离的化合物样品溶解在合适的溶剂中，称为样品溶液。
接下来，将薄层板浸入样品溶液中，使固定相完全湿润。
然后，将薄层板拿出并迅速放置到一个密封的盒子中，使其干燥形成薄层。
点样方法是薄层色谱中常用的一种方法。
它适用于待分析物质数量较少的情况。
在点样方法中，可以使用微量管、试管或取样针等工具，从样品溶液中取出一小部分待分析物质，然后将其点在薄层板上。
待薄层板上的样品点干燥后，可以将薄层板放入色谱槽中，加入流动相（溶剂），然后以恒定速度让流动相上升或水平流动。
流动相通过薄层板上的样品点时，不同成分根据它们与固定相之间的相互作用力的不同而被分离。
最终，通过观察色谱板上斑点的迁移距离和颜色可以推断化合物的性质和纯度。
点样方法的优点是快速简便，对样品消耗较少，适用于少量样品的分析。
但是，它的缺点是对于待分离物质的选取有一定的局限性，分离效果可能不如扩展点样法和连续点样法等方法好。
总结起来，薄层色谱点样方法是一种简单、快速和经济实惠的分析方法。
它适用于待分析物质数量较少的情况。
在点样方法中，通过将待分析物质点在薄层板上，并通过流动相的上升或水平流动将其分离。
这种方法在化学实验室中广泛应用，并为化学分析提供了有力的工具。
薄层色谱法制板
薄层色谱法制板是一种将固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，形成一层均匀的薄层，然后进行点样、展开和色谱分离的方法。
以下是薄层色谱法制板的详细步骤：
1. 准备薄层板：选择合适的固定相，如硅胶、氧化铝等，将其均匀涂布在玻璃板、塑料或铝基片上，形成一层薄层。
自然晾干后，将薄层板放入烘箱中，在一定的温度下活化，以提高固定相的活性。
2. 制备样品：将待分析的样品溶解在适当的溶剂中，制备成一定浓度的溶液。
确保样品中各组分在薄层色谱中能够得到有效的分离。
3. 点样：使用微量注射器或毛细管将样品溶液点涂在薄层板的适当位置上。
点的直径应适中，一般为2-5毫米。
点与点之间的距离应足够远，以避免相互干扰。
4. 展开：将薄层板放入展开槽中，用合适的展开剂进行展开。
展开剂的选择应根据样品的性质和固定相的类型来确定。
在展开过程中，样品中的各组分会在薄层板上移动，形成不同的斑点。
5. 斑点定位：将薄层板从展开槽中取出，放在适当的位置晾干。
晾干后，使用显色剂或紫外灯对薄层板进行观察，确定各组分的斑点位置。
6. 定量分析：根据各组分斑点的位置和颜色深浅，与标准品进行对比，确定各组分的含量。
也可以使用薄层扫描仪对斑点进行扫描，通过峰面积或峰高进行定量分析。
需要注意的是，薄层色谱法制板的效果受到多种因素的影响，如固定相的选择、涂布的均匀性、展开剂的配比等。
因此，在实际操作中，需要不断调整和优化实验条件，以提高薄层色谱法的分离效果和准确性。
简述薄层色谱操作步骤。
简述薄层色谱操作步骤
薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种常用的分离和鉴定化合物的方法。
以下是薄层色谱操作的简要步骤：
1. 制备薄层板：将硅胶、氧化铝等吸附剂与粘结剂混合均匀，涂布到玻璃、金属等基板上，制成薄层色谱板。
2. 点样：将待分离的混合物溶于适当的溶剂中，用微量移液器将样品溶液滴在薄层板上，吹干后，重复点样 2-3 次。
3. 展开：将点样后的薄层板放入密闭的层析槽中，下端浸入展开剂高度不超过 0.5cm。
展开距离一般为 10～15cm。
根据溶剂移动的方向，分为上行展开和下行展开。
4. 晾干：取出薄层板，晾干，使其易于显色。
5. 显色：用喷洒显色试剂或紫外光线照射的方法使被分离的化合物显色。
常见的显色试剂有碘蒸气、磷钼酸、紫外灯等。
6. 观察和分析：通过观察显色后的薄层板，可以分析化合物的分离情况。
根据 Rf 值（相对移动距离）比较各组分的相对含量。
7. 收集和鉴定：将分离后的化合物进行收集，可以通过复溶、浓缩等方法纯化化合物。
然后进行进一步的鉴定，如质谱、红外、核磁共振等。
需要注意的是，在操作过程中要严格控制实验条件，如温度、湿度、溶剂系统等，以获得较好的分离效果。
薄层色谱板的制备和使用
实验一薄层色谱板的制备和使用目的要求：通过实验进一步理解薄层色谱技术理论，熟悉掌握薄层色谱板的制备和使用方法。
一、薄层层析的基本原理把吸附剂（固定相）均匀地铺在一块玻璃板上，将待分离的样品溶液点加在一薄层板的一端，在密闭的容器中用适当的溶剂（流动相）展开，由于吸附剂对不同物质的吸附力大小不同及溶剂对不同物质溶解分配系数不同，当溶剂流过时，各物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附，解吸附，再吸附，再解吸附。
不易被吸附或易被溶剂溶解的物质相对移动得快一些。
经过一段时间的展开，不同的物质被彼此分开，最后形成相互分离的斑点。
将展开完毕的薄层板从密闭容器中取出后，应用特定的试药或方法将斑点显色，从而达到定性和定量的目的。
二、薄层板的制备1．玻璃板用一块玻璃板涂上很薄的吸附剂，如硅胶或氧化铝等，玻璃板要求薄厚一致，大小相同，表面光滑平整，一般玻璃只要合乎这些要求就可。
如果找不到平整均一的，将旧光学照像底片截成同样大小也可以。
用前先将玻璃用肥皂和水洗干净，必要时浸泡在清洗液中，然后水洗烤干，用纱布擦光。
玻璃板大小有各种规格，一般有20×20、20×10、20×5厘米，也有更小的，可根据需要自行设计。
宽度要求至少能点开两三个样品，每两点之间相隔至少1.5厘米，玻板长度一般要满足展开10厘米的距离。
点样的起点应距底边至少1.5厘米的距离。
2．吸附剂应用最广泛的为硅胶和氧化铝，市场上有专供薄层色谱用的吸附剂，规格分不含粘合剂的硅胶H，氧化铝H和含有粘合剂熟石膏的硅胶G，氧化铝G，如市售硅胶G含13％熟石膏，氧化铝分中性、酸性、碱性三种。
吸附剂的粒度范围最好在180－200目之间，太小了流速慢，太大则影响分离效果。
如不合要求，应过筛。
3．薄层板的涂布最简单的涂布方法是用两条比玻璃板厚0．25毫米的玻璃条或有机玻璃条（或在同样厚度的玻璃条下粘一层胶布），将玻璃板夹住，把调好的吸附剂浆液平铺在薄层板上，然后用一有机玻璃条或直尺，迅速均匀地向前推进，就象推血片一样，只要推进的速度均匀一致，即可得到薄厚均匀的薄层板，如在一块玻璃板末端再接一块相同的玻璃板，把剩余的装液接过去，可使涂层边缘整齐，厚度一致，吸附剂浆液的加水量和搅拌时间是涂布成败的关键，像12×8平方厘米的玻璃板需要2~3克硅胶G，加4~6毫升水即可，只要技术熟练即能涂成厚薄一致，光滑平整的一块薄层板。
薄层点板操作方法
薄层点板操作方法薄层点板是一种常用的实验设备，用于观察微生物、细胞、组织等样品的结构和活性。
在使用薄层点板进行操作时，需要注意以下几个步骤和要点：1. 材料准备：首先，准备好所需的材料，包括薄层点板、载玻片、样品溶液、显微镜等。
确保所有材料干净无尘。
2. 预处理：将薄层点板浸入适当的溶液中，如消毒液中，以去除表面的污垢和杂质。
然后用纯净水冲洗干净，并将其晾干或用吹风机吹干。
3. 样品制备：将待观察的样品制备成合适的溶液。
这可能需要通过离心、过滤、稀释等步骤来得到适当的浓度和纯度。
4. 滴样：将样品溶液滴在薄层点板的中心，然后轻轻放置载玻片覆盖在薄层点板上。
注意不要使薄层点板上的样品溢出或产生气泡。
5. 压平：使用显微镜调节目镜和物镜的焦距，观察载玻片下的样品位置和形态。
如果发现有大气泡或颗粒，可用毛细管或吸管轻轻压平。
6. 封口：将载玻片与薄层点板的接触边缘涂上一层封口剂，如液体胶或石蜡。
这样可以防止样品干燥和移动，同时也可以保护样品免受外界污染。
7. 观察：将封好的薄层点板放在显微镜上，用合适的放大倍率观察样品。
注意调节焦距和光线，以获取清晰的图像。
8. 记录：根据需要，可以用相机或手机拍摄样品图像，或用笔和纸记录观察到的结果。
同时也可以使用计算机软件进行图像分析和处理。
9. 清洗：使用工作完毕后，及时将薄层点板和载玻片清洗干净。
可以将其浸入适量的清洁剂中，然后用纯净水冲洗干净，并晾干或用吹风机吹干。
10. 存储：将干燥的薄层点板存放在防尘、防湿的容器中，避免阳光直射和高温环境。
注意标明样品信息和存放日期，以便后续查找和分析。
总之，薄层点板操作方法需要严格遵守实验室操作规范和安全要求。
在操作过程中要保持清洁、耐心和细心，以获得准确和可靠的实验结果。
薄层色谱法中点样的具体流程
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1. 准备样品：溶解样品于合适的溶剂中。
薄层色谱实验小结
薄层色谱实验小结
一、薄层板的制备
在薄层色谱实验中，薄层板的制备是关键步骤之一。
我们采用了优质硅胶G为基质，以10%的羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂，按照国标要求进行了制备。
制备过程中需要注意控制硅胶的粒度、粘合剂的浓度和涂布的均匀性，以确保薄层板的分离效果和重现性。
二、点样
点样是薄层色谱实验中的重要步骤，点样的位置、大小和深度都会影响分离效果。
我们采用了毛细管进行点样，确保点样量的准确性和均匀性。
点样过程中需要注意控制毛细管的直径和点样压力，以避免拖尾和扩散现象。
三、展开
展开是薄层色谱实验中的关键步骤，它决定了分离效果和分离时间。
我们采用了上行展开方式，以避免边缘效应和重现性差的问题。
展开过程中需要注意控制展开剂的种类、浓度和展开速度，以保证分离效果和分离时间的最优化。
四、显色
显色是薄层色谱实验中的重要步骤，它可以帮助我们判断各组分的性质和含量。
我们采用了多种显色方法，如紫外灯照射、碘熏、硫酸熏等，以获得最佳的显色效果。
显色过程中需要注意控制显色剂的种类、浓度和使用方法，以保证显色的准确性和重现性。
通过本次薄层色谱实验，我们成功制备了优质的薄层板，并掌握
了薄层色谱的基本操作技能。
在实验过程中，我们也发现了一些问题，如点样不均匀、展开不充分等，需要进一步改进和完善。
通过不断学习和实践，我们将进一步提高薄层色谱实验的技能和水平。
薄层板的制备实验报告
一、实验目的1. 掌握薄层板（薄层层析板）的制备方法及注意事项。
2. 了解不同制备方法对薄层板性能的影响。
3. 熟悉薄层板在色谱分析中的应用。
二、实验原理薄层板是一种用于色谱分析的平面载体，通常由吸附剂、粘合剂和溶剂混合而成。
制备薄层板的过程包括配制混合物、涂布、干燥和活化等步骤。
通过选择合适的吸附剂、粘合剂和溶剂，可以制备出具有良好分离性能和稳定性的薄层板。
三、实验仪器与材料1. 仪器：涂布器、烘箱、干燥器、天平、剪刀、玻璃板等。
2. 材料：硅胶、CMC-Na（羧甲基纤维素钠）、乙醇、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 配制混合物：称取30g硅胶，加入100g 1%的CMC-Na水溶液，搅拌均匀，得到硅胶糊状物。
2. 涂布：将涂布器清洗干净，将硅胶糊状物均匀涂布在玻璃板上，涂布厚度约为0.25mm。
涂布过程中，保持涂布器与玻璃板呈45°角，匀速移动，使硅胶均匀分布。
3. 干燥：将涂布好的玻璃板放入烘箱中，在60℃下干燥约1小时，直至硅胶糊状物固化。
4. 切割：将干燥后的玻璃板用剪刀切割成所需尺寸。
5. 活化：将切割好的薄层板放入烘箱中，在105℃下活化30分钟，取出后置于干燥器中冷却。
五、实验结果与分析1. 观察薄层板外观：制备的薄层板表面应平整、均匀，无气泡和裂纹。
2. 检测薄层板性能：通过点样实验，检测薄层板的分离性能。
将待分离的样品点在薄层板上，用合适的溶剂进行展开，观察分离效果。
3. 分析实验结果：实验结果显示，制备的薄层板具有较好的分离性能，能够有效分离待测样品中的组分。
六、实验讨论1. CMC-Na浓度的影响：CMC-Na作为粘合剂，其浓度对薄层板的制备性能有重要影响。
浓度过高，会导致硅胶黏附性差，易脱落；浓度过低，则难以与硅胶混合均匀。
本实验中，CMC-Na浓度为1%，效果较好。
2. 涂布厚度的影响：涂布厚度对薄层板的分离性能有显著影响。
过厚的薄层板分离速度慢，但点样量可增加；过薄的薄层板分离速度快，但点样量宜少。
薄层色谱板的制备实训报告
一、实验目的1. 掌握薄层色谱板的基本制备方法。
2. 了解薄层色谱板在分析中的应用。
3. 培养实验操作技能，提高实验安全意识。
二、实验原理薄层色谱法（TLC）是一种常用的分离和分析技术，其原理基于样品中各组分的极性差异，在固定相（薄层板）和流动相（展开剂）之间进行分配，从而达到分离的目的。
本实验中，我们使用硅胶作为固定相，通过涂布法制备薄层色谱板。
三、实验仪器与材料1. 仪器：涂布器、干燥箱、剪刀、玻璃棒、天平等。
2. 材料：硅胶、蒸馏水、乙醇、玻璃板、待分离样品等。
四、实验步骤1. 准备硅胶：称取适量的硅胶，置于研钵中，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀，制成硅胶浆。
2. 涂布：将玻璃板清洗干净，置于水平桌面上。
用剪刀将玻璃板裁剪成所需尺寸。
用玻璃棒将硅胶浆均匀涂布在玻璃板上，厚度约为0.2～0.3mm。
3. 干燥：将涂布好的玻璃板放入干燥箱中，105℃恒温干燥1小时，取出待用。
4. 切割：将干燥好的薄层板用剪刀沿对角线裁剪成所需尺寸。
5. 点样：用微量移液器将待分离样品点在薄层板的一端，点样量根据样品的浓度和分离要求确定。
6. 展开：将点样的薄层板放入展开缸中，加入适量的展开剂，使展开剂液面略高于薄层板上的样品点。
将展开缸密封，待展开剂上升至接近薄层板顶端时取出。
7. 观察与记录：将展开后的薄层板取出，晾干，观察分离效果，并记录各组分的位置。
五、实验结果与分析1. 观察到样品在薄层板上形成了清晰的色带，说明薄层色谱板制备成功。
2. 根据展开剂上升的高度和样品点的位置，可以初步判断样品中各组分的极性差异。
3. 通过比较实验结果与标准样品，可以鉴定样品中的组分。
六、实验总结1. 本实验成功制备了薄层色谱板，并掌握了薄层色谱法的基本操作。
2. 通过本实验，了解了薄层色谱板在分析中的应用，提高了实验操作技能。
3. 在实验过程中，注意安全操作，防止硅胶浆和展开剂对实验环境造成污染。
4. 实验结果与预期相符，达到了实验目的。
薄层TLC点板注意事项
薄层TLC点板注意事项1、点样是成功分离的关键，怎样提高点样效率？（1）点样圆点小而圆，直径尽量不要超过2mm；（2）在便于显色的前提下，点样量尽量少，同时就要注意点样液体的浓度，防止过载拖尾；（3）点样勿上薄层表面；（4）点样圆点尽量远离薄层边缘，至少相隔3mm，减少边缘效应；（5）所有点样点尽量保持在一条与底边平行的直线上，务必点交叉点；（6）点样完成后，溶剂用吹风机尽量吹干。
2、两个点离的太近怎么办？（1）在展开剂中多次展多次；（2）增加展开剂的极性；（3）选择不同体系的展开剂展开。
3、TLC显示一个点，是代表只有一个化合物吗？TLC点板显示一个点，有可能是只有一个化合物，但也有特殊情况，一个点里面包含大于1个的化合物，这种情况我们可以选择不同混合体系的展开剂看是否能分开，同时结合LCMS和核磁判断。
4、板展开后，溶剂前沿的点是一个点吗？原点上的点是一个点吗？前沿和原点的都不能确定是几个点，要靠变换展开剂的极性，让这些点爬到Rf=0.3-0.5左右来确定到底是几个点？5、TLC爬板为什么有时会爬歪?（1）可能是板子没有放平；（2）可能是板子一边贴到展缸壁，造成了虹吸现象，一边爬的快，一边慢，扩散后就变歪了。
6、如果化合物有酸碱基团我们需要如何处理？若样品酸性比较大，一般在展开剂中加酸（0.1%-0.5%甲酸，乙酸）；若样品碱性比较大，一般在展开剂中加碱（0.1%-0.5%氨水，三乙胺）。
7、TLC为什么会拖尾？拖尾现象如何处理？（1）样品溶度过大，TLC板过载，这种情况通过降低样品溶度或者上样量验证；（2）样品未完全溶解，TLC板上有未溶的固体样品，点板一定要是溶液形式；（3）TLC板吸潮，放烘箱110oC活化30分钟即可；（4）样品为强极性物质，含有氨基或者羧基等极性官能团，可以在展开剂中加入酸或者碱；（5）硅胶板在出厂是不合格，联系售后，及时退换货。
8、点板时，基点总有黑点的原因？（1）产物或者副产物极性太大，如盐类，这种情况，可以调pH后再点板；（2）可以将化合物预处理下，除去那些不溶性的无机物，这样可能会不一样，点板会变得清晰。
实验一薄层层析板制备
实验一薄层层析板制备一、目的要求1．掌握薄层层析制板方法2．了解吸附剂的活度测定法二、实验原理薄层板根据在制备过程中是否加入粘合剂分为粘合薄层和非粘合薄层二种，加入粘合剂的为硬板，不加粘合剂的多为软板（亦有为硬板，如纤维素板）。
粘合剂常用的有羧甲基纤维素钠（CMC-Na）或煅石膏（G）。
加羧甲基纤维素钠制备的板机械强度较好，但对一些需加热的腐蚀性显色剂不适用。
加石膏制备的板性能相反，机械强度较差，但适合于使用需加热的腐蚀性显色剂。
对层析用吸附剂活度的测定，主要是利用吸附剂自身对某些偶氮染料吸附力的大小和在薄层板上展开距离来确定，故用测量比移值的方法来确定吸附剂的极性大小和强度级数.三、实验材料1．材料：氧化铝（层析用，中性70~325目）、四氯化碳（重蒸馏）、偶氮苯（Ajobenjene）、对甲氧基偶氮苯（P-methoxyajobenjene）、苏丹黄（sudan I benjen-azo-β- naphthot）、苏丹红（SudanII tetra-ajobenjen-β--naphthot）、对氨基偶氮苯（P-aminoajobenene）、薄层层析用硅胶G、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）2．仪器：天平、研钵、药匙、玻璃板（大、中、小）、烘箱、干燥器、点样毛细管、小层析缸四、实验内容（一）薄层层析薄层板的制备1．氧化铝薄层取表面光滑，直径均一的玻璃棒一支，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端各包上橡皮胶，也可以套上塑料管或橡皮管，一般以0.25（用于分析分离）~1mm（用于制备分离）为宜。
在一端已包好的橡皮胶上，再多包5~6层橡皮胶或一段橡皮管，作为涂铺时的固定边，以防止滑动时边缘不整齐。
操作时，将氧化铝粉均匀地铺在玻璃板上，再用玻棒压在玻板上将吸附剂自一端推向另一端，推移时，不宜太快，也不应中途停顿，否则厚薄不均匀，影响层析效果。
2．硅胶G薄层取硅胶G1份，置研钵中加水3~4份，研磨均匀，放置片刻，随即用药匙取一定量，分别倒在一块大玻璃板上（或倒入涂布器中，推动涂布），均匀涂布成0.25~0.50mm厚度，轻轻振动玻璃板，使薄层面平整均匀。
薄层板的制备经验总结
薄层板的制备经验总结铺薄层板的经验总结薄层板的制备总结经验总结1.CMC-Na配置也比较重要,不能太稀了,不然硅胶的黏附性不好,铺好的硅胶容易脱落.太稠了也不行,不容易和硅胶混匀2.CMC-Na与硅胶混合时注意比例,一般为30克硅胶加入100克0.3-0.5%的CMC-Na水溶液.如果铺多了的话可以凭经验就能感觉到适合的程度.混合时最好朝一个方向研,这样也不容易有气泡3.铺板的均匀.这也是关系到板好坏的重要方面.为了使薄层板硅胶均匀,铺好后将玻璃板放在桌边小心上下颠动,保证薄层板所有地方都一样均匀.4.铺板的厚度,个人所好有所不同.有的铺得较厚,这种情况CMC-Na不能太稀,不然硅胶哗哗的掉.厚的板展开的时候慢些,但是点样量可以多一些不容易扩散.薄的板展开比较快,容易扩散点样量宜少5.薄层板的活化.活化一定要铺好板干了以后放到烘箱活化.干了是指看不到有水痕在上面.一般可以选择晚上铺板,早上的时候正好薄层板已干,可放进烘箱活化.为什么要完全干了才能活化? 如果未完全干会导致活化的时候薄层板硅胶开裂.一、手工铺板是非常考验你的耐力的事情，最好是找实验室的GGJJMMDD们一起，一来速度快，二来大家一起交流心得。
我认为，第一个关键的地方，你的CMC-Na溶液必须配制的好，放置的也要很好，完全分层之后只能取上清液。
上清液要澄清透明，时间太长的CMC-Na可能会发黄，如果有霉菌出现的话，绝对不能使用。
第二就是硅胶和CMC- Na溶液的比例可以适当的调节，根据你所需要薄层板的软硬来微调。
可以一个人研磨，一个人缓慢的倒CMC-Na溶液。
研磨时最能考验你的定力，我觉得你该找女生来磨，但是那种太文弱的不行。
研磨时要顺着一个方向，速度不宜快，要顺着研钵的边缘，观察仔细，一定要把气泡赶尽杀绝。
研磨好的因改是均匀的，没有气泡，没有固体的粉末类异物，溶液有一定的粘性。
最后，铺板，我觉得是各人各喜欢，可以顺着板中间倒，也可以顺着某个边缘倒，倒时也要注意不能引入小气泡。
薄层板的制备方式
薄层板的制备及应用中的问题（1）配制优质CMC 溶液。
取50g 缩甲基纤维素钠，在搅拌下加入到5000mL 水中，强力摇匀，放置备用。
使用时，用300 目丝网过滤，所得滤液即为铺制薄层板的优质CMC 溶液。
(由于CMC 在水中溶解速度很慢，放置两周或更长的时间，才可以溶解比较完全。
可以采用一次性配制较多的溶液，留待以后多次使用。
尽管放置较长时间，CMC 胶粒也无法完全溶解解，所以采用300 目丝网过滤除去胶团，而得到非常均匀澄清溶液。
由于GF254 硅胶为260~280 目，所以300 目丝网过滤后滤液中存在的较小的CMC 胶粒，对于所铺薄层板的平整度不会造成任何影响。
检测CMC 溶液是否均匀澄清，可以取一块干净的玻璃板，在其表面倾倒少许CMC 溶液，倾斜玻璃板使CMC 溶液流动展开。
从侧面观察溶液表面，如果液面平整光洁，则说明此CMC溶液中不含较大胶粒。
)（2）取适量 GF254 型硅胶（薄层色谱专用硅胶），与适量优质 CMC 混合均匀，不断搅拌，静置，再搅拌，反复进行此操作，使所有硅胶完全润湿，最后用超声波处理几分钟，充分排出溶液中的气泡，即可用于铺板。
（3）将制作薄层板的玻璃片清洗干净并烘干，排布于水平桌面上，桌面上事先涂布少量的水以固定玻璃片，再将适量已配好的硅胶与CMC 的混合液小心倾倒于玻璃片上，用玻璃棒使之尽量涂敷均匀，然后用玻璃棒按所需硅胶层的厚度将硅胶刮平，自然晾干。
（4）水分蒸发完毕后，即得表面非常平整光洁的薄层板，小心地将薄层板从桌面上取下，轻轻抹平边缘，然后在110℃下烘烤30min，置于干燥器中待用。
用本方法所铺制的薄层色谱板分离效果极佳，对于多组份系统的监测非常有效，与商品化的薄层板具有同样的分离效果。
尤其是铺制的制备薄层色谱板(PreparativeThin layer Chromatograph)对于制备少量样品非常有效。
第一条里面是5克CMC ! 一般是用%的CMC水溶液！硅胶与CMC水溶液的比例是1比3！关于配制CMC-Na：先将称好的CMC-Na加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,再加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短.溶液的浓度比较合适，实际操作中％～％最为实用，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，轻轻一碰就掉渣，不好保存，而且点样时会很紧张，容易出洞.%CMC-Na 与水溶涨至充分，搅拌溶涨，如果不好溶涨，可在溶涨前加几滴乙醇，比较好溶，但是尽量不加，因为加入乙醇后使CMC-Na 的粘合性降低。
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薄层板制备和点样
主要内容：
◆一、薄层色谱原理和分类
◆二、薄层板制备和方法
◆三、点样
◆薄层色谱法是将固定相（吸附剂）均匀地涂在玻璃板上制成薄层板，试样中的各组分在固定相和流动相（展开剂）之间不断地发生溶解、吸附的分配过程。
◆不同物质上升的距离不同而形成彼此分开的斑点从而达到分离。
◆适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
◆按涂层材料性质和物理化学原理的不同分为：
◆(1)吸附薄层色谱[硅胶、氧化铝]
◆(2)分配薄层色谱[硅胶、纤维素]
◆(3)离子交换薄层色谱。
[交换活性基团的纤维素]◆(4)排阻薄层色谱。
◆(5)聚酰胺薄层色谱
选择吸附剂薄层板的制备点样
展开
显色
◆（1）硅胶：微酸性极性固定相，适用于酸性、中性物质分离。
◆（2）氧化铝：碱性极性固定相，适用于碱性、中性物质分离。
◆（3）纤维素：含有羟基的极性固定相，适用于分离亲水性物质。
◆（4）聚酰胺：含有酰胺基极性固定相，适用于酚类、醇类化合物的分离。
◆硅胶G（含有煅石膏作黏合剂）◆硅胶H（不含黏合剂或其他添加剂）
◆硅胶HF 254（含有荧光剂，可在254nm 紫外光下观察）
◆硅胶GF254（含有煅石膏和荧光剂）
◆1.载板：平板玻璃[常用尺寸为：20cm×20cm，20cm×10cm，5cmx20cm]
◆2.吸附剂：硅胶H F254[含荧光指示剂]
◆3.黏合剂：纤维素[羧甲基纤维素钠(CMC-Na)] 10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O）
A.糊浆的调制
羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配成0.5%溶液，将硅胶在搅拌下慢慢加入CMC-Na的水溶液中，调成糊状。
B.铺板
将糊浆液倒在洁净的载玻片上，用手轻轻振动，使涂层均匀平整、无气泡。
涂层厚度保持在0.15-0.25mm以内。
C.干燥活化
室温下晾干，或者在105-110℃烘箱内活化0.5h。
干法制板
湿法制板倾注法平铺法涂铺法
铺
板方法倒在玻璃板上，用玻璃棒铺平并用手轻轻振动，使表面均匀并除去气泡。
玻璃板两边用玻璃框边，将糊浆倒在玻璃板上，用玻璃尺沿一个方向刮平，去掉两边玻璃框，再轻轻振动薄层板。
将玻璃板置于铺板器中间，在铺板槽中倒入糊浆，自左向右推，将糊状物均匀地涂在玻璃板上。
涂铺法见下图：
◆1、吸附剂薄层，◆2、涂布槽，
◆3、玻璃夹板，
◆4、玻璃板，
◆5、玻璃夹板
❖点样基线距底边1-2cm，样点直径在1-1.5mm之间,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，距边缘在5mm （以免边缘效应影响分离）。
◆点样一般有两种方式：点状和线状。
◆分析TLC多用点状，制备TLC多使用线状。
点状点样线状点样
毛细管点样微量注射器点样薄层色谱点样仪
应尽量控制各点样原点大小一致，
点样量较大时，为避免点样原点过
大，应分数次点样，为加快点样
速度，可边点样，边热风干燥。
点样原点小，直径可控制在1mm 左右；点样精确度高；重现性好；
可机械化甚至自动化操作，避免了冗
长烦人的点样手工操作。
1.铺板用的匀浆不宜过稠或过稀。
过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；
过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。
涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不明显。
2.尽量用小的点样管。
点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。
点好样的薄层板用电吹风的热风吹干。