薄层板制备和点样

薄层板制备和点样

主要内容：

◆一、薄层色谱原理和分类

◆二、薄层板制备和方法

◆三、点样

◆薄层色谱法是将固定相（吸附剂）均匀地涂在玻璃板上制成薄层板，试样中的各组分在固定相和流动相（展开剂）之间不断地发生溶解、吸附的分配过程。

◆不同物质上升的距离不同而形成彼此分开的斑点从而达到分离。

◆适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。

◆按涂层材料性质和物理化学原理的不同分为：

◆(1)吸附薄层色谱[硅胶、氧化铝]

◆(2)分配薄层色谱[硅胶、纤维素]

◆(3)离子交换薄层色谱。[交换活性基团的纤维素]◆(4)排阻薄层色谱。

◆(5)聚酰胺薄层色谱

选择吸附剂薄层板的制备点样

展开

显色

◆（1）硅胶：微酸性极性固定相，适用于酸性、中性物质分离。

◆（2）氧化铝：碱性极性固定相，适用于碱性、中性物质分离。

◆（3）纤维素：含有羟基的极性固定相，适用于分离亲水性物质。

◆（4）聚酰胺：含有酰胺基极性固定相，适用于酚类、醇类化合物的分离。

◆硅胶G（含有煅石膏作黏合剂）◆硅胶H（不含黏合剂或其他添加剂）

◆硅胶HF 254（含有荧光剂，可在254nm 紫外光下观察）

◆硅胶GF254（含有煅石膏和荧光剂）

◆1.载板：平板玻璃[常用尺寸为：20cm×20cm，20cm×10cm，5cmx20cm]

◆2.吸附剂：硅胶H F254[含荧光指示剂]

◆3.黏合剂：纤维素[羧甲基纤维素钠(CMC-Na)] 10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O）

A.糊浆的调制

羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配成0.5%溶液，将硅胶在搅拌下慢慢加入CMC-Na的水溶液中，调成糊状。B.铺板

将糊浆液倒在洁净的载玻片上，用手轻轻振动，使涂层均匀平整、无气泡。涂层厚度保持在0.15-0.25mm以内。

C.干燥活化

室温下晾干，或者在105-110℃烘箱内活化0.5h。

干法制板

湿法制板倾注法平铺法涂铺法

铺

板方法倒在玻璃板上，用玻璃棒铺平并用手轻轻振动，使表面均匀并除去气泡。玻璃板两边用玻璃框边，将糊浆倒在玻璃板上，用玻璃尺沿一个方向刮平，去掉两边玻璃框，再轻轻振动薄层板。

将玻璃板置于铺板器中间，在铺板槽中倒入糊浆，自左向右推，将糊状物均匀地涂在玻璃板上。

涂铺法见下图：

◆1、吸附剂薄层，◆2、涂布槽，

◆3、玻璃夹板，

◆4、玻璃板，

◆5、玻璃夹板

❖点样基线距底边1-2cm，样点直径在1-1.5mm之间,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，距边缘在5mm （以免边缘效应影响分离）。

◆点样一般有两种方式：点状和线状。

◆分析TLC多用点状，制备TLC多使用线状。

点状点样线状点样

毛细管点样微量注射器点样薄层色谱点样仪

应尽量控制各点样原点大小一致，

点样量较大时，为避免点样原点过

大，应分数次点样，为加快点样

速度，可边点样，边热风干燥。

点样原点小，直径可控制在1mm 左右；点样精确度高；重现性好；

可机械化甚至自动化操作，避免了冗

长烦人的点样手工操作。

1.铺板用的匀浆不宜过稠或过稀。

过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；

过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。

涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不明显。

2.尽量用小的点样管。点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。

点好样的薄层板用电吹风的热风吹干。