实验诊断课件 实验诊断课件 临床常用免疫学检查7年制
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CD3 降低—自身免疫性疾病（SLE、类风湿关节炎） CD染4/ 、CD变8增态高反—应恶、性排肿异瘤反、应自身免疫性疾病、病毒感 CD4/ CD8减低—见于艾滋病 CD3 CD4 CD8均增高—T细胞型淋巴细胞恶性疾病
2020/11/19
临床常用免疫学检查
40
B细胞分化抗原测定：
应用CD19、CD20、CD22等单克隆抗体标记单个核 细胞—B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测， CD19是所有B细胞共有的表面标志，活化后不消失 参考值：CD19 11.74±3.73%
2020/11/19
临床常用免疫学检查
44
硝基四氮唑蓝还原试验（NBT）
参考值： 阳性细胞75%～95% 临床意义：
1.有助于鉴别细菌感染/病毒感染
NBT↑--细菌感染 NBT 不高--病毒感染
2. NBT↓为白细胞吞噬功能缺陷，见于先天性慢性肉牙 肿、中性粒细胞异常缺陷综合症、先天性丙种球蛋白缺乏 症等，及长期使用免疫抑制剂时。
IgG亚类异常增高主要见于变态反应疾病。
2020/11/19
临床常用免疫学检查
23
wk.baidu.com
IgE测定：
由呼吸道、消化道的黏膜固有层浆细胞分泌， IgE为亲细胞抗体，在Ⅰ型变态反应性疾病的发 病中起重要作用。
临床意义： IgE增高最多见于Ⅰ型变态反应 性疾病，如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮 炎、荨麻疹等；非过敏性疾病如寄生虫病、肝炎、 SLE、类风湿关节炎及多发性骨髓瘤（ IgE 型） 等。
病毒肝炎血清标志物 其它
循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应 性蛋白检测
2020/11/19
临床常用免疫学检查
13
临床常用免疫学检查
细胞因子检查
* I L-2、6、8、10 * TNF、IFN
2020/11/19
临床常用免疫学检查
14
一、免疫功能检查
• 免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）是一组
临床常用免疫学检查
2020/11/19
临床常用免疫学检查
1
传统定义:
• 免疫(immune): 指免除传染病 • 免疫性(immunity): 指抗感染能力 • 免疫学(immunology): 是阐明机体的抗病
机制和防止免疫应答不良后果的学科
2020/11/19
临床常用免疫学检查
2
近代免疫学定义
46
（一）甲种胎儿球蛋白 （alpha fetoprotein,AFP）
• 胎儿早期由肝脏合成的糖蛋白，当细胞或组织发 生恶变时，有关基因被激活使AFP重新开始合成
• RIA或ELISA法正常值低于25ug/L • 原发性肝癌AFP大于300ug/L • 生殖腺胚胎癌、病毒性肝炎、肝硬化、孕妇均有
临床常用免疫学检查
32
检 测 方 法：
致敏绵羊红细胞 + 待测血清 （CIC） （C1等）
50%红细胞溶解 （CH50）
2020/11/19
临床常用免疫学检查
33
总补体溶血活性检测 （total hemolytic complement activity , CH50）
正常值：50-100 ku/L 临床意义 ：反映传统途径的活化程度
2020/11/19
临床常用免疫学检查
26
免疫球蛋白增高的临床意义：
多克隆性增高—慢性感染（包括细菌、病毒、 结核感染等）、慢性肝病、自身免疫性疾病、肿瘤 （淋巴瘤）等
单克隆性增高—免疫增殖性疾病，如分泌型多 发性骨髓瘤；IgE的增高主要与各种过敏性疾病相 关
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临床常用免疫学检查
2020/11/19
临床常用免疫学检查
42
参考值：
NK细胞活性（自然杀伤）47.6%～76.8%
临床意义：
升高：常见于病毒感染早期，Down综合症，器 官移植后，使用免疫增强剂（如干扰素）治疗后。 减低：常见于恶性肿瘤，重症联合免疫缺陷病， AIDS和免疫抑制剂使用者等。 先减低后升高：检测肿瘤患者的治疗效果
IgG、IgA、IgM、 IgE 、 IgD
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临床常用免疫学检查
19
免疫球蛋白特点
IgG
机体含量最多、占70%-80%的抗体活性，是唯一能够通 过胎盘的Ig，是使新生儿获得被动免疫的抗体
IgA
分血清型和分泌型两种，分泌型主要与呼吸道、消化道、 泌尿生殖道的感染、肿瘤等病变密切相关
27
免疫球蛋白减低的临床意义
先天性—先天性无（低）丙种球蛋白 血症、重链病、轻链病
后天性—肾病综合征、病毒感染、免 疫抑制剂应用、肿瘤
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临床常用免疫学检查
28
关于M蛋白
M蛋白（Monocolonal protein）: 又称单克
隆免疫球蛋白，是由单克隆B细胞增殖产生的具 有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白及其分子 片段。血清中若能检测到M蛋白，提示单克隆免 疫球蛋白增殖病，最常见的是：
肿瘤标志物检测
*蛋白质类肿瘤标志物、糖脂类肿瘤标志物、酶类肿瘤 标志物
自身免疫检测
*类风湿因子测定、*抗核抗体检测 * 抗心磷脂抗体测 定 * 抗中性粒细胞胞浆抗体测定
器官与骨髓移植的检测
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
感染免疫检测
*细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它 （寄生虫感染、性病等）
血清AFP升高，一般低于300ug/L
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临床常用免疫学检查
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（二）癌胚抗原测定 （carcinoembryonic antigen, CEA）
• 富含多糖的蛋白复合物，胎儿早期的消化管有合 成CEA的能力
• 正常值：RIA法和ELISA法小于15ug/L • 90%的胰腺癌、74%的结肠癌、60%的乳腺癌出
C3在补体系统各成分中含量最多，是传统 途径和旁路途径被激活的关键物质
免疫比浊法正常值：0.85-1.70 g/L
补体C4检测：
C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、 防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用
单向免疫扩散法正常值：0.2-0.6g/L
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
43
中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测
硝基四氮唑蓝还原试验（NBT）
• 中性粒细胞在吞噬杀伤过程中氧耗量增加，导 致糖代谢活跃，6-磷酸葡萄糖脱氢氧化为戊糖， 所脱的氢可还原淡黄色的NBT成为蓝黑色的点 块状颗粒沉积在中性粒细胞的胞浆里，在油镜 下可被观察到。
• 计数100-200个中性粒细胞，计算其中NBT阳 性细胞的百分率。
临床常用免疫学检查
16
•
IgG最多、占70%～80%抗体活性 IgA血清型和分泌型两种 IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关
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临床常用免疫学检查
17
•
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临床常用免疫学检查
18
（一）免疫球蛋白
用超速离心、免疫 电泳方法可将免疫球蛋 白分为五类：
由浆细胞合成和分泌、具有抗体活性的球蛋白 • 存在机体的血液、体液、外分泌液及细胞膜上，
可分为分泌型（secreted Ig,sIg）和膜型 (membrane Ig,mIg) • 根据其功能和理化性质分为五种
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临床常用免疫学检查
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Immunoglobulin,Ig
2020/11/19
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
9
强直性脊柱炎患者的病情演变
2020/11/19
临床常用免疫学检查
10
结节性多动脉炎
2020/11/19
临床常用免疫学检查
11
临床常用免疫学检查
免疫功能检查
*血清免疫球蛋白检测 *血清补体检测 *细胞免疫检测
38
T细胞分化抗原测定
(免疫荧光法，IFA）
CD3—总T细胞
正常值：63.1%±10.8%
CD4—T辅助细胞（TH） 正常值： 42.8%±9.5%
CD8—T抑制细胞（TS） 正常值： 19.6%±5.9%
CD4 /CD8
正常值： 1 .66±0.33
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临床常用免疫学检查
39
临床意义：
35
临床意义：
参见CH50减低和增高的临床意义
C3增高在急性炎性反应更敏感(炎症性疾病) C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低 更有意义（自身免疫性疾病）
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临床常用免疫学检查
36
（三）细胞免疫检测
T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测 细胞因子检测 中性粒细胞吞噬杀菌功能检测
IgM
五聚体，是分子量最大的Ig，是有效凝聚和溶解细胞的因 子。在个体发育和抗原刺激后出现最早的抗体，在机体的 早期免疫防御中起主要作用。天然同族凝聚素、冷凝集素、 伤寒沙门菌抗体和RF均属此型
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临床常用免疫学检查
20
IgE
血清含量最少的Ig ，与变态反应、寄生虫感染、 皮肤过敏等有关
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临床常用免疫学检查
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关于T细胞
• T细胞表面有多种特异性抗原，统称为白细胞 分化抗原（clusterdifferentiation ,CD）
• 不同的CD分子可代表不同的T细胞亚群 • 用免疫荧光法和流式细胞术可检测T细胞表面
的CD分子的百分率
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临床常用免疫学检查
IgD
功能尚不完全清楚
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临床常用免疫学检查
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IgG亚类测定
临床意义
IgG1 60%~70% IgG2 14%~20% IgG3 4%~8% IgG4 2%~6%
成人IgG1缺陷常见 儿童中以IgG2缺陷 成人IgG3缺陷常见
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临床常用免疫学检查
22
IgG亚类缺陷患者常表现为反复感染, 如呼吸道感染、腹泻、中耳炎、鼻窦炎等。
临床意义：
升高—B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞 白血病、Burkitt淋巴瘤等
减低—无丙种球蛋白血症、免疫抑制剂应用
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临床常用免疫学检查
41
自然杀伤细胞免疫检测
自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答， 它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞
自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体 抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一
减低—肾小球肾炎、自身免疫性疾病（如系统性红斑狼 疮 Systemic lupus erythematosis,SLE）、感染性心 内膜炎（subacute infecitive endocarditis,SBE）、肝 病等
增高—急性炎症、组织损伤、肿瘤等
2020/11/19
临床常用免疫学检查
34
补体C3检测：
现CEA的明显增高，大于60ug/L • 动态监测CEA有助于肿瘤的诊断、预后和复发的
*通过传统途径和旁路途径激活，传统途径需免疫复合物 （CIC）激活，旁路途径不需要CIC激活而首先发挥作用
*参与灭活病原体的免疫反应 ，也可破坏自身组织或自身 细胞造成免疫损伤
*血清中含量稳定，属天然免疫，不耐热
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
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2020/11/19
多发性骨髓瘤 (multiple myeloma,MM)，可有IgG型、 IgA型、IgM型等 巨球蛋白血症（Waldenstrom症） 重链病、 轻链病 半分子病
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临床常用免疫学检查
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（二）血清补体（complement , C）
*是一组具有酶原活性的糖蛋白，由C1-C9及B、D等因子 及补体调节蛋白组成
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临床常用免疫学检查
45
三、肿瘤标志物（tumor marker） 检测
1、是由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤细 胞反应而产生的一类物质 2、可反映细胞恶变各阶段的表型及基因特征性 3、包括蛋白类（甲胎蛋白、癌胚抗原等）、糖类、 酶类肿瘤标志物
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
24
正常值： 单向免疫扩散法— IgG 7.0~16.6 g/L IgA 0.7~3.5g/L IgM 0.5~2.6 g/L ELISA法— IgE 0.1~0.9mg/L
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临床常用免疫学检查
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多克隆增高: IgG IgA IgM均增高 单克隆增高: 仅某一种Ig增高而其他种Ig不增高
• 已超越单纯抗感染范畴 • 定义为对抗原性异物的识别和清除 • 免疫学被抽象为”分辨自身和非己”,是研
究机体识别和清除非己成分的科学
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
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40
B细胞分化抗原测定：
应用CD19、CD20、CD22等单克隆抗体标记单个核 细胞—B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测， CD19是所有B细胞共有的表面标志，活化后不消失 参考值：CD19 11.74±3.73%
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44
硝基四氮唑蓝还原试验（NBT）
参考值： 阳性细胞75%～95% 临床意义：
1.有助于鉴别细菌感染/病毒感染
NBT↑--细菌感染 NBT 不高--病毒感染
2. NBT↓为白细胞吞噬功能缺陷，见于先天性慢性肉牙 肿、中性粒细胞异常缺陷综合症、先天性丙种球蛋白缺乏 症等，及长期使用免疫抑制剂时。
IgG亚类异常增高主要见于变态反应疾病。
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wk.baidu.com
IgE测定：
由呼吸道、消化道的黏膜固有层浆细胞分泌， IgE为亲细胞抗体，在Ⅰ型变态反应性疾病的发 病中起重要作用。
临床意义： IgE增高最多见于Ⅰ型变态反应 性疾病，如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮 炎、荨麻疹等；非过敏性疾病如寄生虫病、肝炎、 SLE、类风湿关节炎及多发性骨髓瘤（ IgE 型） 等。
病毒肝炎血清标志物 其它
循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应 性蛋白检测
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临床常用免疫学检查
细胞因子检查
* I L-2、6、8、10 * TNF、IFN
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14
一、免疫功能检查
• 免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）是一组
临床常用免疫学检查
2020/11/19
临床常用免疫学检查
1
传统定义:
• 免疫(immune): 指免除传染病 • 免疫性(immunity): 指抗感染能力 • 免疫学(immunology): 是阐明机体的抗病
机制和防止免疫应答不良后果的学科
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2
近代免疫学定义
46
（一）甲种胎儿球蛋白 （alpha fetoprotein,AFP）
• 胎儿早期由肝脏合成的糖蛋白，当细胞或组织发 生恶变时，有关基因被激活使AFP重新开始合成
• RIA或ELISA法正常值低于25ug/L • 原发性肝癌AFP大于300ug/L • 生殖腺胚胎癌、病毒性肝炎、肝硬化、孕妇均有
临床常用免疫学检查
32
检 测 方 法：
致敏绵羊红细胞 + 待测血清 （CIC） （C1等）
50%红细胞溶解 （CH50）
2020/11/19
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33
总补体溶血活性检测 （total hemolytic complement activity , CH50）
正常值：50-100 ku/L 临床意义 ：反映传统途径的活化程度
2020/11/19
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26
免疫球蛋白增高的临床意义：
多克隆性增高—慢性感染（包括细菌、病毒、 结核感染等）、慢性肝病、自身免疫性疾病、肿瘤 （淋巴瘤）等
单克隆性增高—免疫增殖性疾病，如分泌型多 发性骨髓瘤；IgE的增高主要与各种过敏性疾病相 关
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临床常用免疫学检查
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临床常用免疫学检查
42
参考值：
NK细胞活性（自然杀伤）47.6%～76.8%
临床意义：
升高：常见于病毒感染早期，Down综合症，器 官移植后，使用免疫增强剂（如干扰素）治疗后。 减低：常见于恶性肿瘤，重症联合免疫缺陷病， AIDS和免疫抑制剂使用者等。 先减低后升高：检测肿瘤患者的治疗效果
IgG、IgA、IgM、 IgE 、 IgD
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19
免疫球蛋白特点
IgG
机体含量最多、占70%-80%的抗体活性，是唯一能够通 过胎盘的Ig，是使新生儿获得被动免疫的抗体
IgA
分血清型和分泌型两种，分泌型主要与呼吸道、消化道、 泌尿生殖道的感染、肿瘤等病变密切相关
27
免疫球蛋白减低的临床意义
先天性—先天性无（低）丙种球蛋白 血症、重链病、轻链病
后天性—肾病综合征、病毒感染、免 疫抑制剂应用、肿瘤
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28
关于M蛋白
M蛋白（Monocolonal protein）: 又称单克
隆免疫球蛋白，是由单克隆B细胞增殖产生的具 有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白及其分子 片段。血清中若能检测到M蛋白，提示单克隆免 疫球蛋白增殖病，最常见的是：
肿瘤标志物检测
*蛋白质类肿瘤标志物、糖脂类肿瘤标志物、酶类肿瘤 标志物
自身免疫检测
*类风湿因子测定、*抗核抗体检测 * 抗心磷脂抗体测 定 * 抗中性粒细胞胞浆抗体测定
器官与骨髓移植的检测
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12
临床常用免疫学检查
感染免疫检测
*细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它 （寄生虫感染、性病等）
血清AFP升高，一般低于300ug/L
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47
（二）癌胚抗原测定 （carcinoembryonic antigen, CEA）
• 富含多糖的蛋白复合物，胎儿早期的消化管有合 成CEA的能力
• 正常值：RIA法和ELISA法小于15ug/L • 90%的胰腺癌、74%的结肠癌、60%的乳腺癌出
C3在补体系统各成分中含量最多，是传统 途径和旁路途径被激活的关键物质
免疫比浊法正常值：0.85-1.70 g/L
补体C4检测：
C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、 防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用
单向免疫扩散法正常值：0.2-0.6g/L
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临床常用免疫学检查
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中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测
硝基四氮唑蓝还原试验（NBT）
• 中性粒细胞在吞噬杀伤过程中氧耗量增加，导 致糖代谢活跃，6-磷酸葡萄糖脱氢氧化为戊糖， 所脱的氢可还原淡黄色的NBT成为蓝黑色的点 块状颗粒沉积在中性粒细胞的胞浆里，在油镜 下可被观察到。
• 计数100-200个中性粒细胞，计算其中NBT阳 性细胞的百分率。
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•
IgG最多、占70%～80%抗体活性 IgA血清型和分泌型两种 IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关
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•
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（一）免疫球蛋白
用超速离心、免疫 电泳方法可将免疫球蛋 白分为五类：
由浆细胞合成和分泌、具有抗体活性的球蛋白 • 存在机体的血液、体液、外分泌液及细胞膜上，
可分为分泌型（secreted Ig,sIg）和膜型 (membrane Ig,mIg) • 根据其功能和理化性质分为五种
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Immunoglobulin,Ig
2020/11/19
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强直性脊柱炎患者的病情演变
2020/11/19
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结节性多动脉炎
2020/11/19
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临床常用免疫学检查
免疫功能检查
*血清免疫球蛋白检测 *血清补体检测 *细胞免疫检测
38
T细胞分化抗原测定
(免疫荧光法，IFA）
CD3—总T细胞
正常值：63.1%±10.8%
CD4—T辅助细胞（TH） 正常值： 42.8%±9.5%
CD8—T抑制细胞（TS） 正常值： 19.6%±5.9%
CD4 /CD8
正常值： 1 .66±0.33
2020/11/19
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39
临床意义：
35
临床意义：
参见CH50减低和增高的临床意义
C3增高在急性炎性反应更敏感(炎症性疾病) C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低 更有意义（自身免疫性疾病）
2020/11/19
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（三）细胞免疫检测
T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测 细胞因子检测 中性粒细胞吞噬杀菌功能检测
IgM
五聚体，是分子量最大的Ig，是有效凝聚和溶解细胞的因 子。在个体发育和抗原刺激后出现最早的抗体，在机体的 早期免疫防御中起主要作用。天然同族凝聚素、冷凝集素、 伤寒沙门菌抗体和RF均属此型
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IgE
血清含量最少的Ig ，与变态反应、寄生虫感染、 皮肤过敏等有关
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关于T细胞
• T细胞表面有多种特异性抗原，统称为白细胞 分化抗原（clusterdifferentiation ,CD）
• 不同的CD分子可代表不同的T细胞亚群 • 用免疫荧光法和流式细胞术可检测T细胞表面
的CD分子的百分率
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IgD
功能尚不完全清楚
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21
IgG亚类测定
临床意义
IgG1 60%~70% IgG2 14%~20% IgG3 4%~8% IgG4 2%~6%
成人IgG1缺陷常见 儿童中以IgG2缺陷 成人IgG3缺陷常见
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22
IgG亚类缺陷患者常表现为反复感染, 如呼吸道感染、腹泻、中耳炎、鼻窦炎等。
临床意义：
升高—B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞 白血病、Burkitt淋巴瘤等
减低—无丙种球蛋白血症、免疫抑制剂应用
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41
自然杀伤细胞免疫检测
自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答， 它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞
自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体 抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一
减低—肾小球肾炎、自身免疫性疾病（如系统性红斑狼 疮 Systemic lupus erythematosis,SLE）、感染性心 内膜炎（subacute infecitive endocarditis,SBE）、肝 病等
增高—急性炎症、组织损伤、肿瘤等
2020/11/19
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34
补体C3检测：
现CEA的明显增高，大于60ug/L • 动态监测CEA有助于肿瘤的诊断、预后和复发的
*通过传统途径和旁路途径激活，传统途径需免疫复合物 （CIC）激活，旁路途径不需要CIC激活而首先发挥作用
*参与灭活病原体的免疫反应 ，也可破坏自身组织或自身 细胞造成免疫损伤
*血清中含量稳定，属天然免疫，不耐热
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31
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多发性骨髓瘤 (multiple myeloma,MM)，可有IgG型、 IgA型、IgM型等 巨球蛋白血症（Waldenstrom症） 重链病、 轻链病 半分子病
2020/11/19
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（二）血清补体（complement , C）
*是一组具有酶原活性的糖蛋白，由C1-C9及B、D等因子 及补体调节蛋白组成
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45
三、肿瘤标志物（tumor marker） 检测
1、是由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤细 胞反应而产生的一类物质 2、可反映细胞恶变各阶段的表型及基因特征性 3、包括蛋白类（甲胎蛋白、癌胚抗原等）、糖类、 酶类肿瘤标志物
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临床常用免疫学检查
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正常值： 单向免疫扩散法— IgG 7.0~16.6 g/L IgA 0.7~3.5g/L IgM 0.5~2.6 g/L ELISA法— IgE 0.1~0.9mg/L
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多克隆增高: IgG IgA IgM均增高 单克隆增高: 仅某一种Ig增高而其他种Ig不增高
• 已超越单纯抗感染范畴 • 定义为对抗原性异物的识别和清除 • 免疫学被抽象为”分辨自身和非己”,是研
究机体识别和清除非己成分的科学
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