冰冻切片免疫荧光步骤
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冰冻切片免疫荧光
1.将组织置于4%多聚甲醛6~8h,转至20%蔗糖至组织沉底,包埋冰冻组织块
2.冰冻切片机切片8~10um,室温放置30min以上防脱片,-20℃保存
3.从冰箱拿出的冰冻切片于室温放置30min以上,再进行免疫荧光
4.1XPBS洗3次,每次3~5min
5.免疫组化笔画圈,2%BSA室温或37℃封闭1h
6.一抗4℃孵育过夜
7.1XPBS洗3次,每次3~5min
8.二抗室温或37℃,避光孵育1h
9.1XPBS洗3次,每次3~5min
10.DAPI染色,
11.1XPBS洗3次,每次3~5min
12.滴加防淬灭剂,封片.