(完整word版)各种PH值的磷酸盐缓冲液配制
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
各种PH值的磷酸盐缓冲液配制
PH=PKa+lg([a]/[b]) K1=7.52X10-3, K2=6.23X10-8, K3=2.20X10-13.
设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1 磷酸氢二钾浓度为C2
pH=pK-lg（C1/C2）=7
这里的pK是7.2（这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对，公式是通用的）
解得C1：C2=1.585（mol比）磷酸的二级电离常数）Ka，求出PKa，然后根据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比C1：C2。
这时混合物中P的质量分数为（31/136×1.585+31/174×1）/（1.585+1）=20.87%
混合盐的质量比136×1.585：174×1=215.56：174
10mg/20.87%=47.916mg
（47.916/（215.56+174））×215.56=26.51mg
（47.916/2.575）×174=21.40mg
应取磷酸二氢钾26.51mg 磷酸氢二钾21.40mg 用蒸馏水稀释至1L
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。
乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。
取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L
氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。
取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）
试剂：NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
1）0.2mol/L的Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
2）0.2mol/L的Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或Na2HPO4·7H2O 53.6g或
Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的
Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。
若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5
6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 8
7.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0 7.6 13.0 87.0 7.7 10.5 89.5 7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7。