【PPT】显微镜及制片技术

目的与要求

1、了解显微镜的构造及维护。

2、初步掌握使用显微镜地方法。

3、了解光学显微镜的主要类型.

4、了解普通显微镜的成像原理及光路图

材料和仪器

生物显微镜，测微尺，“E”字玻片标本，香柏油等

1.显微镜的光学原理

被检物AB放在物镜(O1) 下方的一倍焦距之间，则在物镜(O1) 后方形成一个倒立得放大实像，这个实像正好位于目镜(O2) 的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛明视距处，即25cm ，使所看到的物体最清晰，也就是虚像A2B2 是在眼睛晶状体的两倍焦距之外，在眼球后的视网膜形成一个倒立的

A2B2 缩小像A3B3.

临界照明：光源经扣光镜后哦汇聚在被检物体，光束狭而强，这是它的优点，但是光源的灯丝像与被检物体的平面重合，这样就造成被检物体的照明呈现出不均匀性，在有灯丝的部分则明亮，无灯丝的部分则暗淡，不仅影响成像质量，更不适于显微照相。

单筒复式普通生物显微镜

暗视野显微镜特点是该显微镜具有暗视野聚光器，使光线不直接进人物镜，故呈暗视野。暗视野Dark field microscope 根据Tyndall 效应原理设计，在黑背景下观察物体的外部细节，分辨率高该显微镜适用于观察细胞内微小颗粒，例如线粒体、细菌运动等。

荧光显微镜是用以观察细胞及组织内荧光物质的分布。它是装有、能产生紫外线（短波长）的光源及系列滤片装置的显微镜。

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相差显微镜的特点①装有不同大小环状光阑的聚光器。②物镜内装有位相板。③中心望远镜装置。相差显微镜的基本原理是通过上述装置。把透过标本的可见光的相位差变成振幅差，从而提高了标本内各种结构之间的对比度，使标本中的结构清晰可辨。

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（一）、临时玻片标本的制作

临时玻片标本的制作是使用显微镜观察植物材料时最基本的技术，现以洋葱叶表皮为实验材料来介绍：

1、材料与仪器

（1）、双面刀片、镊子、毛笔、培养皿、滴

瓶、载玻片盖玻片、软布

（2）、洋葱鳞叶

2、实验过程

（二）、徒手切片法

徒手切片法是指用手拿刀片和材料，并将材料切成玻片标本的一种切片方法。

1、材料与器具

双面刀片、毛笔、培养皿滴瓶、

新鲜植物材料

2、实验过程

实验过程

1、取材

用刀片将材料切成2-3CM长，并使材料的上端截面平整

2、切片

徒手切片时最重要的是，切下一小片平而薄的组织结构

（1）、左手拇指食指及中指夹住材料，拇指要略低于食指并使材料稍稍突出于手指之上约3MM （2）、用右手拇指和食指横向平握刀片，置于左手食指之上，刀口向内，与材料的纵轴垂直。