分子生物学

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操纵子:原核生物中由一个或多个相关基因以及转录、翻译、调控原件组成的基因表达单元。内含子:一个基因中非编码DNA片段,它分开相邻的外显子,内含子是阻断基因线性表达的序列。

外显子:是真核生物基因的一部分,它在剪接后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。

弱化子:原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列,该区域能形成不同的二级结构,利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。

顺式作用元件:是指与结构基因串联的特定DNA序列,是转录因子的结合位点,它们通过与转录因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率,顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等,它们的作用是参与基因表达的调控。

顺式作用:顺式作用元件对基因表达起调控作用的过程。

增强子:增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列,因为它能强化转录的起始,又称强化子。

反义RNA:为大肠杆菌编码许多小分子mRNA,它们能也不同的mRNA结合,从而在翻译水平上正调控和负调控,可能关闭SD序列和释放SD序列,由于这些小分子通过与反义RNA 进行碱基配对结合来行使功能。

重叠基因:是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分;重叠基因有多种重叠方式。常见于细菌和噬菌体的基因组中。核糖开关:mRNA一些非编码区的序列折叠成一定的构象,这些构象的改变应答于体内的一些代谢分子,从而通过这些构象的改变达到调节mRNA转录的目的

回文序列:双链DNA中的一段倒置重复序列;两条链从5 ‘到3 ‘方向阅读序列一致,从3 ‘到5 ‘方向的序列一致

转座子:插入序列,复合型转座子。效应:引起突变,产生新的基因,产生染色体畸变,引起生物进化

魔斑核苷酸:细菌生长过程中在缺乏氨基酸供应时产生的一个应急产物。主要是三磷酸鸟苷合成的四磷酸鸟苷和五磷酸鸟苷。主要功能是干扰RNA聚合酶与启动子结合的专一性,诱发细菌的应急反应,帮助细菌在不良环境条件下得以存活。

反式作用因子:是指能结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控基因转录效率的蛋白质或RNA。RNA聚合酶是催化基因转录最主要的酶。

基因沉默:真核生物中由双链RNA诱导的识别和清除细胞中非正常RNA的一种机制;分为转录水平基因沉默和转录后基因沉默。

RNA干扰:是指双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解技术,而使相应基因表达沉默。

单顺反子mRNA:只编码一种蛋白质的mRNA。

原核生物染色体的特征:结构简单,存在转录单元,有重叠基因。

DNA的修复:错配修复,切除修复,重组修复,DNA的直接修复,SOS反应。

玉米中的转座子:自主性,具有自主剪接和转座的功能;非自主性,单独存在时是稳定的,当基因组中存在与非自主性转座子同家族的自主性转座子时,才具备转座功能。

RNA的转录:是按5'→3'方向合成的,以DNA双链中的反义链为模板,根据碱基配对原则,合成的RNA带有与DNA编码链相同的序列。包括模板识别、转录起始、转录延伸、转录终止。真核生物mRNA的特征:1.5'端存在帽子结构,常常被甲基化,使mRNA免遭核酸酶的破坏2.具有多(A)尾巴。

蛋白质的生物学合成:氨基酸活化、肽链的起始、伸长、终止,新合成多肽链的折叠和加工。

内含子的剪接:内含子特点:长度和序列没有共同性,一般有16-46个核苷酸;位于反密码子下游;内含子和外显子没有保守序列。tRNA核酸内切酶切割前体分子中的内含子,RNA 连接酶将外显子部分连接在一起

真核生物染色体的组成:明显核结构,组蛋白和非组蛋白,染色质和核小体。

特征:1分子结构相对稳定

2,能够自我复制,使亲子代之间保持连续性

3能够指导蛋白质的合成,控制整个生命过程

4,能够产生可遗传的变异。

重叠基因的重叠方式:1,一个基因完全在另一个基因里面,如基因a在基因b中

2.部分重叠,如基因k和基因c部分重叠

3.两个基因只有一个碱基对的重叠

DNA的二级结构:指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成双螺旋结构。1.DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的。2.DNA分子中的核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧。碱基通过氢键相结合,形成碱基对,A和T配对,G和C 配对,A-U。

真核生物三种RNA聚合酶的特点

RNA聚合酶Ⅰ位于核仁里,转录产物是45SrRNA,经剪接修饰后生成除5SrRNA外的各种rRNA。rRNA与蛋白质组成的核糖体是蛋白质合成的场所。

RNA聚合酶Ⅱ位于核质上,在核内转录生成hnRNA,经剪接加工后生成的mRNA被运送到胞质中作为蛋白质合成的模板。

RNA聚合酶Ⅲ位于核质上,转录产物是tRNA,5SrRNA,snRNA,其中snRNA参与RNA的剪接双螺旋模型的意义:改模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征;确认了碱基配对的原则,这是DNA复制,转录和反转录的分子基础,亦是遗传信息的传递和表达的分子基础。

●细菌的应急反应:

1.细菌有时会碰到紧急状况,比如氨基酸饥饿时,不是缺少一两种氨基酸,而是氨基

酸的全面匮乏。为了紧缩开支,渡过难关;细菌会产生一个应急反应;包括生产各种RNA、糖、脂肪和蛋白质在内几乎全部生化反应过程均被停止。实施这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(PPGPP)和鸟苷五磷酸(PPPGPPP),产生这两种物质的诱导物是空载RNA.

2.当氨基酸饥饿时,细胞中便存在大量的不带氨基酸的tRNA,这种空载的tRNA会激

活焦磷酸转移酶,使鸟苷四磷酸(PPGPP)大量合成,其浓度可增加10倍以上,鸟苷四磷酸(PPGPP)的出现会关闭许多基因,当然也会打开一些合成氨基酸的基因,以应付这种紧急状况。一般认为RNA聚合酶有不同的构型。这些构象可以识别不同的启动子区,鸟苷四磷酸(PPGPP)与RNA聚合酶结合会使它的某些构象稳定下来,从而改变基因转录的效率。同时基因转录起始点附近有一些保守序列,它们可能是鸟苷四磷酸(PPGPP)有关调节蛋白的结合位点。当这些序列与鸟苷四磷酸(PPGPP)结合后,就不能与RNA聚合酶相结合,使基因被关闭。鸟苷四磷酸(PPGPP)和鸟苷五磷酸(PPPGPPP)的作用范围十分广泛;它们不是只影响一个或几个操纵子,而是影响一大批;所以它们是超级调控因子。

●PCR技术:

PCR :又称多聚酶链式反应,如果设计一对寡聚核苷酸引物与目的DNA互补,以至于能被DNA聚合酶相向延伸,那么该引物结合的模板区就可以通过变性,引物退火和聚合的循环来大量扩增,这反应称为PCR,是分子生物学中一种克隆及基因分析的必要工具

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