特殊染色法
组织学技术特殊染色
组织学技术特殊染色组织学技术是研究生物学和医学中的一门重要学科，它主要研究各种生物组织的结构、形态和功能。
组织学技术中的特殊染色技术是一种重要的方法，可以帮助科学家们更好地观察和分析组织中的微细结构。
本文将介绍几种常见的组织学技术特殊染色方法。
PAS染色PAS（Periodic Acid-Schiff）染色是一种广泛应用的组织学技术特殊染色方法。
通过对组织样本进行一系列处理，使得组织中的多糖物质、甘油脂和一些蛋白质能够被染色剂染色。
PAS染色对于检测肝细胞内糖原、胆囊内黏液和肾小管内基底膜等有重要意义。
Silver染色Silver染色是一种用于染色神经元轴突和树突的特殊染色方法。
Silver染色通过将组织中的银离子还原为固态银，使得神经元的轴突和树突得以显现。
这种染色方法在神经科学研究中有广泛的应用，可以帮助科学家们观察神经元的形态和连接方式。
Giemsa染色Giemsa染色是一种用于染色细胞核和染色体的特殊染色方法。
Giemsa染色可以使得染色体在显微镜下呈现出黑色、灰色和蓝色的带状条纹，有助于研究染色体的形态和结构。
这种染色方法也常用于检测血液细胞的形态和数量，是临床血液学和病理学中常用的染色方法之一。
Masson染色Masson染色是一种用于染色胶原纤维的特殊染色方法。
Masson染色通过在组织中染色三种颜色的染料，将组织中的胶原纤维、细胞核和细胞质进行区分染色。
这种染色方法在研究纤维组织中的胶原纤维含量和排列方式时，特别有用。
以上介绍了几种常见的组织学技术特殊染色方法，它们在生物学和医学研究中起着重要的作用。
通过这些特殊染色方法，科学家们可以更全面地了解组织结构和功能，为疾病诊断和治疗提供有力的支持。
特殊染色
结缔组织染色法Mallory三色染色法：胶原和网状纤维蓝色，软骨、淀粉样变物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。
鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法：胶原纤维红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。
与胶原纤维染色相比的缺点是：易褪色和对比度差。
2.天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。
在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色：包括：Gomori和James。
Gomori银氨染色法：网状纤维黑色，胶原纤维红色。
鉴别诊断中的应用：1）癌和肉瘤的鉴别。
2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。
3）血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。
4）黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色：效果最好的固定液是：甲醛生理盐水。
Gomori醛复红染色法：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景不同程度的黄色。
1）配制后需在室温静置1-2日。
2）是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。
3）醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。
3)可使胃主细胞着色。
5）应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法：维多利亚蓝+丽春红S：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色；胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。
1）要在室温下成熟。
2）可使用高锰酸钾促使PATH成熟。
3）乙醇分化时要保存一定的红色。
4）染色后用无水乙醇快速脱水，冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色：过碘酸的作用是氧化。
过碘酸-Schiff（PAS）染色法：糖原及其他PAS反应阳性物质红色，细胞核蓝色。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
病理学技术——特殊染色最全总结
病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。
特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。
一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。
常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。
二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。
通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。
PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。
常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。
三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。
Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。
该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。
四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。
其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。
五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。
Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。
六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。
细菌特殊的染色方法
细菌特殊的染色方法摘要：一、细菌染色的基本原理二、常见细菌染色方法1.单染色法2.双染色法3.荧光染色法4.免疫染色法三、特殊染色方法的应用1.染色对细菌的识别和分类2.染色在疾病诊断中的应用3.染色在科学研究中的作用四、染色方法的优缺点对比五、未来细菌染色技术的发展趋势正文：细菌在生物学、医学和微生物学等领域具有重要的研究价值。
为了更好地观察和研究细菌，染色技术在细菌检测、识别和分类中起到了关键作用。
本文将介绍细菌的特殊染色方法，包括基本原理、常见染色方法、应用领域、优缺点对比以及未来发展趋势。
一、细菌染色的基本原理细菌染色是通过染色剂与细菌细胞成分发生特定的化学反应，使细菌呈现出不同颜色，从而便于观察和识别。
染色的基本原理包括吸附、渗透、吸附与渗透相结合等。
染色过程中，染料与细菌细胞成分结合，使细菌具有特定的颜色。
二、常见细菌染色方法1.单染色法：使用一种染料对细菌进行染色，如革兰氏染色、鞭毛染色等。
这种方法简单、快速，但对细菌的形态和结构观察不够详细。
2.双染色法：使用两种染料对细菌进行染色，如荧光染色法、相差染色法等。
这种方法可以同时显示细菌的两种不同属性，如形态和生理功能。
3.荧光染色法：利用荧光染料对细菌进行染色，通过荧光显微镜观察细菌的形态和分布。
这种方法具有高灵敏度和特异性，适用于活细胞染色。
4.免疫染色法：利用特异性抗体与细菌表面抗原结合，再通过染色剂显色。
这种方法可对细菌进行准确识别和分类，适用于病原菌检测和研究。
三、特殊染色方法的应用1.染色对细菌的识别和分类：染色方法有助于鉴别不同种类的细菌，如革兰氏阳性菌和阴性菌，以及观察细菌的形态和结构。
2.染色在疾病诊断中的应用：免疫染色法可用于检测病原菌，有助于临床诊断和治疗感染性疾病。
3.染色在科学研究中的作用：特殊染色方法可应用于细菌的生理、生化和分子生物学研究，揭示细菌的生长、繁殖和代谢等机制。
四、染色方法的优缺点对比1.优点：染色方法操作简便，结果直观，适用于各类细菌的观察和研究。
特殊染色
高碘酸-无色品红法
蒸馏水 偏重亚硫酸钠 170ml 3.96g
活性炭 2.0g(第二天称) 碱性品红(用研钵磨细更佳)加入蒸馏水中溶 解后依次加入盐酸及偏亚硫酸钠，塞住瓶口(锥 形瓶、小口瓶比较好)摇动容器以充分混和(此时 颜色会有明显变化)放置过夜后加入活性炭摇动 数分钟静止1小时后过滤，呈无色或淡稻草黄色 为佳。（不用时冰箱4℃左右保存）
应用：
明确含铁血黄素的存在。如长期的肺郁 血、出血；陈旧性出血灶；肝硬化时慢性脾 郁血的含铁结节；硬化性血管瘤；动脉瘤性 骨囊肿；绒毛色素性滑膜炎等。
胆色素
三氯醋酸三氯化铁（Hall）法：
试剂配制： ㈠Fouchet 液： 甲液：三氯醋酸 25 克 蒸馏水 100 毫升， 乙液：三氯化铁 1克 蒸馏水 10 毫升 两者均宜少量新鲜配制，棕色瓶贮存。 临用时取甲液 30ml 乙液 3ml 等份混合。
Masson 法
•1 切片脱蜡至水.
•2 苏木素染核（可略）
•3 丽春红酸性品红5分钟
•4 快速水洗.蒸馏水洗
•5 1%磷钼酸滴染1-3分钟 •6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟 •7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固 •结果：胶原纤维绿色 肌纤维红色
胶原纤维染色的应用 1. 区别胶原纤维与肌纤维。 2. 观察某些病变组织的纤维化及 程度等。
染色方法： 1 常规切片 、脱蜡至蒸馏水 2 0.5%高碘酸氧化5-10分钟 3 流水冲洗数分钟，蒸馏水洗一次 4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核 6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固 结果：糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色，核蓝色。
注意事项
•1 配制过程中玻璃器皿要干净，试剂要纯。
病理学技术特殊染色总结
病理学技术特殊染色总结一、结缔组织染色法Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维蓝褐色：胞核三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞二、胶原纤维染色法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他三、网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（伊红复染）四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳紫红色：弹性纤维橘黄色：背景五、弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维淡黄色：背景六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或玫红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌△早期心肌病变组织染色Nagar-Olsen染色法（HBFP）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核Poley显示缺氧心肌染色法红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织1七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核八、黏液物质（黏多糖）染色Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（AB-PAS）染色法红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质阿尔辛蓝（爱先蓝，PH 2.5）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色或淡然：强硫酸化黏液物质红色：胞核阿尔辛蓝（爱先蓝，PH 1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：胞核（如复染）九、黑色素染色Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景Lillie硫酸亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色亚铁氰化钾法（Perls blue普鲁士蓝显示三价铁）蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织十一、胆色素染色三氯醋酸染色法绿色：胆色素红色和黄色：其他（复染）十二、脂褐素染色三氯化铁-铁氰化钾法（非特异性）暗蓝色：脂褐素醛品红法（现配现用）深紫色：脂褐素浅黄色：背景十三、脱色素染色通常用来鉴定是否有黑色素存在，3张连续石蜡切片，1张HE，1黑色素染色，1张氧化漂白脱色素十四、纤维蛋白染色Lendrum等MSB染色法*本法的MSB指马休黄猩红蓝法红色：纤维蛋白紫色：陈旧性纤维蛋白蓝色：细胞核黄色：红细胞Gram甲紫染色法蓝黑色：纤维蛋白红色：背景十五、淀粉样物质染色刚果红染色法红色：淀粉样物质蓝色：细胞核Jurgens甲紫染色法红色或紫红色：淀粉样物质蓝色：细胞核十六、真菌染色2Grocott六胺银染色法*真菌均被着色黑褐色：菌丝和孢子红色：细胞核淡绿色：背景高碘酸复红染色法紫红色：真菌浅黄色：红细胞十七、细菌染色一般细菌革兰氏染色（Gram碱性复红结晶紫染色法）蓝色：革兰阳性菌红色：革兰阴性菌红色：细胞核抗酸杆菌Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法红色：抗酸杆菌灰蓝色：背景胃幽门螺杆菌Warthin-Starry胃幽门螺杆菌染色法棕黑色或黑色：胃幽门螺杆菌淡黄色：背景十八、螺旋体染色硝酸银染色法黑色或棕黑色：梅毒螺旋体、钩端螺旋体淡黄至淡棕色：背景Ryu碳酸钠碱性复红法红色：螺旋体十九、病毒包涵体染色荧光桃红-酒石黄法亮红色：病毒包涵体蓝褐色：细胞核黄色：背景二十、乙型肝炎表面抗原染色Shikata地衣红染色法（现配现用）棕色：HBsAg阳性醛复红改良染色法紫色：HBsAg阳性红色：结缔组织黄色：红细胞及基质维多利亚蓝染色法蓝绿色：乙型肝炎表面抗原物质红色：细胞核二十一、神经组织染色△神经细胞尼氏体染色方法缓冲亚甲蓝法蓝色：尼氏小体及核仁△神经纤维的染色方法Holmes神经纤维染色黑色：神经纤维灰紫色：背景Bielschowsky神经纤维染色黑色：神经纤维紫色：背景Von Braunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色黑色：神经纤维、扣结、老年斑浅灰色：背景Eager退变神经纤维染色黑色：退变神经纤维浅棕色：背景△神经髓鞘的染色方法Weigert-Pal髓鞘染色蓝黑色：髓鞘淡灰色：背景Weil髓鞘染色（石蜡切片理想）蓝黑色：髓鞘淡灰色：背景Kultshitzky髓鞘染色蓝黑色：髓鞘淡黄色：背景3Luxol fast blue髓鞘染色蓝色：髓鞘紫色：核仁、尼氏体变色酸2R—亮绿髓鞘染色深红色：神经髓鞘绿色：轴索、间质不着色：脱髓鞘纤维Marchi退变髓鞘染色方法黑色：退变髓鞘浅棕色：背景△神经胶质细胞染色方法Cajal星形细胞染色紫黑色：原浆性及纤维性星形胶质细胞Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞黑色：神经胶质细胞、少突胶质细胞黄棕色：背景二十二、神经内分泌细胞染色△亲银反应Lillie-Masson二胺银反应法黑色：亲银颗粒细胞红色：细胞核淡灰黄色：背景Gomori-Burtner六胺银法黑色：亲银细胞浅红色：背景△嗜银反应De Grandi改良硝酸银反应法棕黑色：嗜银细胞颗粒红色：细胞核碱性重氮反应法橘红色至红色：嗜银细胞颗粒蓝色：细胞核黄色：胞质二十三、嗜铬细胞染色Giemsa改良染色法红色至紫红色：嗜铬细胞蓝色：皮质细胞粉红色：红细胞Wiesel染色法黄绿色：嗜铬细胞质红色：细胞核蓝色：其他二十四、肥大细胞染色甲苯胺蓝改良染色法紫红色：肥大细胞颗粒蓝色：细胞核醛复红法深紫色：肥大细胞颗粒橘黄色：红细胞黄色：其他组织二十五、DNA染色酸水解—无色品红法紫红色：DNA绿色：细胞质、其他成分甲基绿—派洛宁法紫红色：细胞质和核仁内RNA 绿色或绿蓝色：核内DNA二十六、脂肪染色苏丹法橘红色：中性脂肪蓝色：细胞核油红O染色法深橙红色：中性脂肪蓝色：细胞核4。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
细菌特殊的染色方法
细菌特殊的染色方法细菌的染色方法是微生物学中常用的一种技术，用于检测和分析细菌的形态、结构和生理特性。
细菌染色的目的是使细菌可见，并帮助科学家更好地研究和了解细菌的性质。
除了常规的革兰氏染色和抗酸染色外，还有一些特殊的染色方法被用于研究细菌的不同特性。
以下将介绍几种常用的特殊细菌染色方法。
1.阴离子染色法：阴离子染色法是利用带负电荷的染色试剂与细菌细胞外层的阳离子反应而形成染色产物色素。
该方法不仅可检测细菌的形态和结构，还能对细菌的细胞壁和胞外结构进行观察。
常用的阴离子染色试剂包括果胶酸(Alcian blue)和煤青子酸(Azure A)等。
2.荧光染色法：荧光染色法是利用特定荧光染料与细菌发生特异性反应，通过荧光显微镜观察染色产物。
这种染色方法灵敏性高、分辨率好，对细菌的检测和观察非常有帮助。
常用的荧光染色试剂包括荧光素及其衍生物、丙烯蓝等。
3.金属盐染色法：金属盐染色法是利用一些特定金属盐与细菌细胞壁中的阴离子反应，生成颜色变化的染色产物。
常用的金属盐染色试剂包括久青锉盐(Cuprocin)、伊红及其衍生物和伊绿等。
这些金属盐染色试剂的染色效果较好，并且对不同细菌表现出不同的染色特性，可用于鉴别和分类细菌。
4.钙染色法：钙染色法是利用钙离子对细菌细胞的染色效果。
细菌通过吸收染色试剂中的钙离子，形成钙合物而染色。
常用的钙染色试剂包括蓝天冠蓝(Solochrome cyanin R)和木蓝等。
5.抗体染色法：抗体染色法是利用抗体与细菌其中一种特定抗原发生特异性反应，将染色产物与细菌细胞结合而形成染色。
该方法对细菌进行检测和鉴别非常有帮助，尤其在免疫学研究和临床领域中得到广泛应用。
总体而言，特殊的细菌染色方法为科学家提供了较好的工具，以观察和研究细菌的特异性特征和形态结构。
通过这些特殊染色方法，科学家能更全面地了解和研究细菌的性质，进而推动微生物学研究和应用的发展。
细菌特殊的染色方法
细菌特殊的染色方法摘要：一、细菌染色的基本原理二、常规细菌染色方法1.单染色法2.复染色法三、特殊细菌染色方法1.荧光染色法2.免疫染色法3.金属离子染色法四、染色过程中的注意事项五、染色结果的判定与分析正文：细菌特殊的染色方法细菌染色是微生物学实验中的一项基本技术，通过染色可以清晰地观察到细菌的形态、结构和数量，为细菌的分类、鉴定和研究提供重要依据。
本文将对细菌特殊的染色方法进行介绍，以期为大家在实际工作中提供参考。
一、细菌染色的基本原理细菌染色是基于细胞成分的化学性质和物理性质差异，使染料选择性地吸附于细菌细胞表面，从而使细菌着色。
染色过程中，染料与细菌的结合力强弱决定了染色效果。
染料可分为碱性、中性、酸性染料，可根据实验需求选择合适染料。
二、常规细菌染色方法1.单染色法：使用一种染料对细菌进行染色，如革兰氏染色、奈瑟染色等。
染色过程中，染料与细菌结合，使细菌呈现出特定的颜色。
2.复染色法：使用两种或多种染料对细菌进行染色，如瑞氏染色、姬姆萨染色等。
复染色法可以使细菌呈现出多种颜色，有利于观察细菌的形态和结构。
三、特殊细菌染色方法1.荧光染色法：利用荧光染料对细菌进行染色，通过荧光显微镜观察细菌的形态和分布。
荧光染色法具有高灵敏度、高分辨率、无损性等优点，适用于活细胞染色。
2.免疫染色法：利用特异性抗体与细菌表面抗原结合，再通过荧光标记的二抗或金属离子标记的抗体进行染色。
免疫染色法可用于细菌的分类和鉴定，具有高度的特异性和准确性。
3.金属离子染色法：利用金属离子与细菌细胞内特定成分的结合，使细菌呈现出特定的颜色。
金属离子染色法适用于研究细菌的生理功能和代谢活性。
四、染色过程中的注意事项1.严格遵循染色操作规程，避免实验误差。
2.选择合适的染料和染色时间，根据实验需求进行调整。
3.染色过程中避免剧烈振荡和长时间暴露于高温环境，以免影响染色效果。
4.保持实验器材和试剂的干净，防止污染。
五、染色结果的判定与分析1.观察细菌的形态和颜色，判断染色效果。
特殊染色法
特殊染色法一，抗酸杆菌染色1，试剂配制：（1）碱性品红乙醇液：碱性品红5g，无水乙醇100ml（2）5%苯酚水溶液：苯酚（稍加温使共溶解）5ml，蒸馏水95ml（3）苯酚碱性品红液：碱性品红乙醇液1ml，5%苯酚水溶液9ml（4）20%硫酸水溶液：浓硫酸20ml，蒸馏水80ml（5）汽油松节油液：航空汽油（也可为普通汽油）1份，松节油1份2，染色程序：（1）切片用汽油松节油脱蜡2次，每次5-10min。
（2）不经乙醇洗，只用纱布将切片周围余液擦干。
（3）流水稍洗。
（4）滴入苯酚碱性品红液，于室温下染15—30min。
（5）流水去多余液体。
（6）用20%硫酸水溶液分化至适当为止（一般需1—5min）（7）流水充分冲洗。
（8）用Mayer苏木精液浅染细胞核。
（9）洗流水冲洗10—15min。
（10）用风扇把切片吹干，随即二甲苯透明，中性树胶封固。
3，结果：抗酸杆菌（包括麻风杆菌和结核杆菌）呈鲜红色，胞核呈蓝色。
二，奥新兰过碘酸雪夫代染色简称（AB—PAS染色）（溶液配制）1，0.3%的奥辛兰醋酸液：奥新兰0.3g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml2，1%过碘酸水溶液，schitf代试剂及亚硫酸冲洗液配发同。
（染色方法）1，切片按常规脱蜡水洗，再入蒸馏水洗。
2，染于0.3%或1%奥新兰醋酸液中10—30分钟。
3，用蒸馏水充分洗，至少洗4次。
4，1%过碘酸水溶液氧化5—10分钟。
5，用蒸馏水从分洗，至少3—4次。
6，Schiff代试剂染10—30分钟。
7，直接用亚硫酸冲洗3次，每次2分钟。
（有固定的作用，把多余的schiff试液洗净）8，流动自来水洗5分钟后蒸馏水洗。
9，苏木素染核。
必要时盐酸究竟稍分化后充分用自来水洗。
10，95%酒精，无水酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。
（结果）酸性粘多糖呈靛兰色，中性粘旦白呈鲜紫红色或品红色，中性及酸性粘蛋白混合物呈紫兰色。
软骨紫蓝核呈蓝色。
三，改良Hale胶状铁染色液的配制和应用（溶液配制）29%氯化铁4.4ml，蒸馏水250ml将蒸馏水置于烧杯内煮沸，然后滴加氯化铁不断搅动直至溶液变成暗红色。
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2、抗酸染色方法
• 染液组成： 石碳酸复红、3％盐酸酒精、碱性美兰 • 染色方法：
石碳酸 复 红 初染
染5分钟 冷却后水洗
3％盐酸酒精 脱 色
0.5-1min
水洗
碱性美兰 复 染
1~3min
水洗
影响抗酸染色的关键步骤是脱色
干燥
注意事项
• 1、加温染色时：在火焰上方保持一定高度， 加热至出现蒸气（注意不能使染液沸腾）， 如此反复2~3次（约5min）。在加热过程 中要防止将染液烘干，应及时添加染液。 • 2、脱色时：用3%盐酸酒精脱色，直到流 下的液体无色为止，进行水洗。
3、鞭毛染色结果及意义
• 结果：
菌体－－红色 鞭毛－－红色
• 意义：
观察鞭毛的形态特征以及可鉴定细菌。
四、荚膜染色法
1.实验原理：
某些细菌生长到一定阶段，在一定条件下会 向细胞壁外分泌一层粘性的多糖类物质—— 荚膜。由于荚膜与染料间的亲和力弱，不易 着色，通常采用负染色法染荚膜，即设法使 菌体和背景着色而荚膜不着色，从而使荚膜 在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量 在90%以上，故染色时一般不加热固定，以 免荚膜皱缩变形。
2、芽胞染色方法
染液组成： 5％孔雀绿水溶液、 0.5％番红水溶液 染色方法：
加数滴 微火加热至染 孔雀绿 料冒蒸汽 染液于 维持5分钟 涂片上 待玻片冷却后 水 洗
用缓流自流水冲洗
至流出水无色
番红染 液复染
2min
水洗
干燥
注意事项
• 1、加温染色时应及时添加染液，防止染液 干涸。 • 2、进行水洗时，用细水流冲洗菌膜上方， 让水流淌过菌膜，避免将菌膜冲掉。
• 结果：
3、抗酸染色结果及意义
红色－－抗酸染色阳性菌 兰色－－抗酸染色阴性菌
• 意义：
用于鉴定分枝杆菌属细菌以及某些放线菌
结核分枝杆菌（抗酸染色）
结核分枝杆菌（抗酸染色）
（二）芽胞染色法(P70)
1、原理
★芽胞是细菌在不良的环境条件下形成的休眠体。细 菌能否形成芽胞以及芽胞的形状、芽胞的位置、是 否膨大等特征是鉴定细菌的重要依据之一。 由于芽胞壁厚，通透性差，不易着色。为了能使芽胞 着色便于观察，特用芽胞染色法。 其基本原理是：用着色性强的染色剂孔雀绿或石炭酸 复红，在加热条件下染色，使染料不仅可以进入菌 体也可进入芽胞内，进入菌体的染料经水洗后被脱 色，而芽胞一经着色难以被水洗脱，当用对比度大 的复染剂染色后，芽胞仍保留初染剂的颜色，而菌 体和芽胞囊被染成复染剂的颜色，使芽胞和菌体更 易区别。
（一）抗酸染色法(P67)
1、原理
★抗酸性细菌如结核杆菌等分枝杆菌属细菌， 细菌细胞壁有很多脂类物质，石碳酸复红加 温染色后，其中的分枝菌酸与石碳酸复红结 合成牢固的复合物，能够抵抗盐酸酒精的脱 色，使菌体保留红色，故称抗酸染色法。
★其他非抗酸菌和组织细胞因不能抵抗盐酸酒 精的脱色，被脱成无色，后经碱性美兰染色 后染成兰。
实验四
特殊染色法
实验目的要求
• 了解抗酸染色法、芽胞染色法、荚膜染色 法、鞭毛染色法的原理 • 熟悉抗酸染色法、芽胞染色法、荚膜染色 法、鞭毛染色法的方法以及意义
实验材料与方法
• 材料: 菌种：卡介苗、蜡样芽孢杆菌培养物 染液：抗酸染色液、芽胞染色液 其他：玻片、接种环、酒精灯 无菌生理盐水、显微镜等 • 方法： 细菌涂片的制作：涂片、干燥、固定 染色：抗酸染色法、芽胞染色法 油镜使用：观察染色结果并记录
2、鞭毛染色方法
• 染色方法： Leifsion氏染色法 • 染色液： Leifsion氏染色液
• 制片：用记号笔在载玻片的反面将玻片分 成3~4个等分区，在每个小区的一端滴一 小滴菌液，将玻片倾斜，让菌液流到另一 端，用滤纸吸去多余的菌液。室温或37℃ 温室自然干燥。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
鞭毛染色过程
加Leifsion 染数分钟 氏染色液于 第一区 加Leifsion 染数分钟 加Leifsion 氏染色液于 氏染色液于 第二区 第三、四区 10 分 钟 干 燥 镜 检 直接用水轻 轻冲洗（不 要先倾去染 液再冲洗） 整个玻片表面 都出现铁诱色 沉淀、染料表 面现出金色膜
3、芽胞染色结果及意义
• 结果：
芽胞－－绿色 菌体及芽胞囊－－红色
• 意义：
用于观察芽胞的形态特征以及鉴定细菌。
破伤风芽胞梭菌
（三）鞭毛染色法
1、原理
★鞭毛是细菌的运动器官，细菌是否具有鞭毛 以及鞭毛着生的位置和数量是细菌的一项重要 形态特征。由于细菌鞭毛很纤细，一般不能用 光镜直接观察，须用电镜。要用普通光学显微 镜观察鞭毛，必须用鞭毛染色法。 鞭毛染色的原理是在染色前先用媒染剂处理， 使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后进 行染色。
2、荚膜
产气荚膜杆菌
肺炎链球菌
肺炎链球菌（荚膜）
实验安排
• 每人制备芽孢染色和抗酸染色各一张，油 镜观察，记录结果。 • 完成实验报告一份，可以写在一起。 • 清理自己桌面。 • 值日生打扫卫生。