第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
合集下载
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类 局麻药物的分析
主讲人 肖国君
一、结构、性质与分析方法
O
（一）对氨基苯甲酸酯类
H R 1N
C OR2
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride)
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2010年版：检查对氨基苯甲酸，离子对色谱法 盐酸普鲁卡因注射液 均检查对氨基苯甲酸 ChP 2005年版：TLC法 2010年版：离子对色谱法
2005年版盐酸普鲁卡因注射液中检查“对氨基苯甲酸”
方法：——杂质对照品法
硅胶H薄层板
TLC法
展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 对二甲氨基苯甲醛显黄色
3 指示终点的方法
（1）永停滴定法： ChP、BP多采用
主要原理：
NaNO2滴定时，达终点前， NaNO2产
生的HNO2用于重氮化反应，不与电极作
用，检流计无电流通过不偏转；达到终点
时，溶液中微量HNO2即会使电极起氧化 还原反应，检流计指针突然偏转，且不再 回复。
阳极：NO + H2O
HNO2 + H+ + e
乳白色
（二）与重金属离子反应
1、 与CuSO4反应 盐酸利多卡因 Na CO 蓝紫色
2 3
CuSO4
CHCl3
CHCl3层黄色
盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因，同样条件下不发生此反应。
2、 与CoCl2反应
盐酸利多卡因
CoCl2 H+
亮绿色细小
3、与Hg2+反应
主讲人 肖国君
一、结构、性质与分析方法
O
（一）对氨基苯甲酸酯类
H R 1N
C OR2
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride)
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2010年版：检查对氨基苯甲酸，离子对色谱法 盐酸普鲁卡因注射液 均检查对氨基苯甲酸 ChP 2005年版：TLC法 2010年版：离子对色谱法
2005年版盐酸普鲁卡因注射液中检查“对氨基苯甲酸”
方法：——杂质对照品法
硅胶H薄层板
TLC法
展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 对二甲氨基苯甲醛显黄色
3 指示终点的方法
（1）永停滴定法： ChP、BP多采用
主要原理：
NaNO2滴定时，达终点前， NaNO2产
生的HNO2用于重氮化反应，不与电极作
用，检流计无电流通过不偏转；达到终点
时，溶液中微量HNO2即会使电极起氧化 还原反应，检流计指针突然偏转，且不再 回复。
阳极：NO + H2O
HNO2 + H+ + e
乳白色
（二）与重金属离子反应
1、 与CuSO4反应 盐酸利多卡因 Na CO 蓝紫色
2 3
CuSO4
CHCl3
CHCl3层黄色
盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因，同样条件下不发生此反应。
2、 与CoCl2反应
盐酸利多卡因
CoCl2 H+
亮绿色细小
3、与Hg2+反应
8第八章对氨基苯甲酸和酰苯胺类局麻药的分析
三、UV
注射用盐酸丁卡因的含量
【含量测定】 取本品10瓶，分别加水溶解，并分别定量转移至 250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取 盐酸丁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL 中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与 对照品溶液各3mL，分别置于100mL量瓶中，加盐酸溶液（1200）5mL与磷酸盐缓冲液（pH 6.0）10mL，用水稀释至刻度， 摇匀，照紫外-可见分光光度法，在310nm的波长处分别测定吸 光度，计算每瓶的含量，求出平均含量，即得。
Fe + 3HCl
CO NCH2CH2N(C2H5)2 3 O
酯键的水解，可以区 分下述两种药物
五、吸收光谱特征 1、UV：结构中均含有苯环
盐酸布比卡因的鉴别：在263nm与271nm的波长处有最大 吸收；其吸光度分别为0.53~0.58与0.43~0.48. 盐酸普鲁卡因胺片的鉴别：在280nm的波长处有最大吸收。
盐酸利多卡因与对氨基苯 甲酸酯类药物的区别
二、与重金属离子反应
2、盐酸普鲁卡因胺
2
NH2
+ H 2O 2
+ H 2O
在过氧化氢的存在 下能被氧化成羟肟 酸，再与铁配位
CO NHCH2CH2N(C2H5)2 NH2
3
+ FeCl3
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH NH2
CH3
CH3
高氯酸非水滴定
2
NHCOCH2N(C2H5)2· HCl+Hg(Ac)2 2
NHCOCH2N(C2H5)2· HAc+HgCl2
CH3 CH3
注射用盐酸丁卡因的含量
【含量测定】 取本品10瓶，分别加水溶解，并分别定量转移至 250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取 盐酸丁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL 中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与 对照品溶液各3mL，分别置于100mL量瓶中，加盐酸溶液（1200）5mL与磷酸盐缓冲液（pH 6.0）10mL，用水稀释至刻度， 摇匀，照紫外-可见分光光度法，在310nm的波长处分别测定吸 光度，计算每瓶的含量，求出平均含量，即得。
Fe + 3HCl
CO NCH2CH2N(C2H5)2 3 O
酯键的水解，可以区 分下述两种药物
五、吸收光谱特征 1、UV：结构中均含有苯环
盐酸布比卡因的鉴别：在263nm与271nm的波长处有最大 吸收；其吸光度分别为0.53~0.58与0.43~0.48. 盐酸普鲁卡因胺片的鉴别：在280nm的波长处有最大吸收。
盐酸利多卡因与对氨基苯 甲酸酯类药物的区别
二、与重金属离子反应
2、盐酸普鲁卡因胺
2
NH2
+ H 2O 2
+ H 2O
在过氧化氢的存在 下能被氧化成羟肟 酸，再与铁配位
CO NHCH2CH2N(C2H5)2 NH2
3
+ FeCl3
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH NH2
CH3
CH3
高氯酸非水滴定
2
NHCOCH2N(C2H5)2· HCl+Hg(Ac)2 2
NHCOCH2N(C2H5)2· HAc+HgCl2
CH3 CH3
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析汇编
对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析（一）基本结构局麻药的化学结构通常包括三部分：1. 亲脂性芳香环2. 中间连接功能基3.亲水性胺基 NH 2中间连接功能基 药物类别 典型药物 酯键 对氨基苯甲酸酯 盐酸普鲁卡因 酰胺键酰苯胺盐酸利多卡因药物类别 基本结构 典型药物及结构 对氨基苯甲酸酯盐酸普鲁卡因酰苯胺类盐酸利多卡因（二）性质+ 中间连接功能基+ NH 21. 吸收光谱特性+脂肪胺侧链（UV+IR ）2. 弱碱性 NH 2（成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀）3. 芳伯胺基特性 NH 2（重氮化-偶合反应，与芳醛缩合成Schiff 碱反应，易氧化变形）4. 水解特性 酯键及酰胺键5. 与重金属离子反应特性 酰胺键 （与铜离子或钴离子络合，生成有色的配合物沉淀，该沉淀可溶于有机溶剂而呈色。
（三）鉴别试验1. 化学鉴别法① 重氮化-偶合反应原理：分子结构中具有芳伯胺基或潜在芳伯胺基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。
直接： 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺（在酸性溶液中与亚硝酸钠作用，生成重氮盐；再与碱性β-萘酚偶合，产生红色偶氮化合物。
）间接： 盐酸丁卡因（分子中的芳仲胺基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠作用，生成乳白色的N-亚硝基化合物沉淀。
） ② 水解反应盐酸普鲁卡因 Ch.P （2010）【鉴别】取本品约0.1g ，加水2ml 溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml ，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
苯佐卡因 ChP （2010）【鉴别】取本品约0.1g ，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成； 加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
③ 与重金属反应a. 盐酸利多卡因 1）与铜离子反应 盐酸利多卡因+硫酸铜 →→→蓝紫色→→→黄色2）与钴离子反应在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。
南医大药物分析第08章 对氨基苯甲酸酯类药物的分析
对氨基苯甲酸钠 二乙氨基乙醇
（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）
对氨基苯甲酸钠 HCl 对氨基苯甲酸（白色 ）
2. 苯佐卡因
ChP（2010）
[鉴别] （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠 试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试 液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿 的臭气。
∵
NOCl H 2 O
（2）K2
K1 ≈ 300 K2
加入 KBr ，可增大溶液中 NO+ 亚硝酰离子 的浓度，加快重氮化反应速度
（2）酸的种类及其浓度
在不同酸中重氮化反应的速度为：
HBr＞HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3
盐酸 1:2.5～6；
加入盐酸： ① 重氮化反应速度加快；
② 重氮盐在酸性溶液中稳定；
直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普
鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺
间接：对乙酰氨基酚
盐酸普鲁卡因 反应（附录Ⅲ）
ChP（2010）
[鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，
必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加
0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-
萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙
（三）紫外分光光度法
对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于 257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特
征，可用于其原料及其制剂的含量测定。
对乙酰氨基酚 ChP（2005）
取本品约 40mg ，精密称定，臵 25ml 量瓶中， 加 0.4 ％氢氧化钠溶液 5.0ml 溶解后，加水至刻 度，摇匀，精密量取5m1，臵100ml量瓶中，加 0.4 ％氢氧化钠溶液 10m1 ，加水至刻度，摇匀， 在 257nm 的波长处测定吸收度，按 C8H9NO2 的 1% 吸收系数 为715 计算，即得。 E1cm
（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）
对氨基苯甲酸钠 HCl 对氨基苯甲酸（白色 ）
2. 苯佐卡因
ChP（2010）
[鉴别] （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠 试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试 液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿 的臭气。
∵
NOCl H 2 O
（2）K2
K1 ≈ 300 K2
加入 KBr ，可增大溶液中 NO+ 亚硝酰离子 的浓度，加快重氮化反应速度
（2）酸的种类及其浓度
在不同酸中重氮化反应的速度为：
HBr＞HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3
盐酸 1:2.5～6；
加入盐酸： ① 重氮化反应速度加快；
② 重氮盐在酸性溶液中稳定；
直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普
鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺
间接：对乙酰氨基酚
盐酸普鲁卡因 反应（附录Ⅲ）
ChP（2010）
[鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，
必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加
0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-
萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙
（三）紫外分光光度法
对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于 257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特
征，可用于其原料及其制剂的含量测定。
对乙酰氨基酚 ChP（2005）
取本品约 40mg ，精密称定，臵 25ml 量瓶中， 加 0.4 ％氢氧化钠溶液 5.0ml 溶解后，加水至刻 度，摇匀，精密量取5m1，臵100ml量瓶中，加 0.4 ％氢氧化钠溶液 10m1 ，加水至刻度，摇匀， 在 257nm 的波长处测定吸收度，按 C8H9NO2 的 1% 吸收系数 为715 计算，即得。 E1cm
医学课件第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
1、盐酸利多卡因 三硝基苯酚 盐酸布比卡因
三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 三硝基苯酚布比卡因
（mp. 194℃）
25％硫氰酸铵溶液
2、盐酸丁卡
丁卡因硫氰酸盐
因
5％醋酸钠溶液 （ mp. 131℃ ）
(六)UV
药物 对乙酰氨基酚
苯佐卡因 盐酸丁卡因
溶剂
浓度 (μg/ml)
稀HCl-甲醇(1:99) 10
在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：
NaNO2+HCl→HNO2+NaCl
HNO2+HCl→NOCl（亚硝酰氯）+H2O
Ar NH2 NO Ar NH NO Ar N N OH Ar N2Cl
慢
快
快
加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重 氮化反应速度。
（2）酸的种类及其浓度
4. 弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀
5. 酰胺氮原子与金属离子络合显色
第二节 鉴别试验
(一)重氮化-偶合反应
分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可 与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚 偶合生成有色的偶氮染料。
NH2
+ NaNO2
R
N2+Cl-
+
R
H+
N2+Cl-
1.原理
Ar NH2 + NaNO2+ 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯
氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，
芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
相关练习题
95：75．中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点 的方法为（ ）
A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法
相关练习题
96：127．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有 （）
A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法 E. 电位法
CH3 O
NH C
C3H7 N
. HCl 盐酸罗哌卡因
CH3
NH2 NH
O
. HCl
盐酸妥卡尼
三、主要理化性质
1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
2. 水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。
H N NO
快
N N OH
快
N N+Cl-
重氮化的反应历程为：
KBr + HCl
HBr + KCl
HNO2 + HBr
NOBr + H2O
∵ KHBr 比KHCl大300倍
∴生成NOBr量大得多
∴加快反应速度
(2) 加过量HCl加速反应： ①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl
Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O
2. 测定主要条件：
(1) 加KBr增加反应速度
重氮化的反应历程为：
NaNO2 + HCl
HNO2 + NaCl
HNO2 + HCl
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
药物分析
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
NHCOR + H2O
H △
+
NH2 + RCOOH
还原
NO2 + 6[H]
NH2 + 2H2O
药物分析
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法
1. 原理：
Ar-NHCOR + H2O Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl
3
Cu
CH
3
CH 3 2 NHCOCH CH 3
2 N(C 2 H 5 ) 2
(C 2 H 5 ) 2 NCH 2 CON CH 蓝紫色
3
+Co
2+
CH
3 2 N(C 2 H 5 ) 2
CH (C 2 H 5 ) 2 NCH 2 CON CH Co 亮绿色
3
NCOCH CH
3
3
药物分析
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
对氨基水杨酸钠 等
间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯
但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻 效应，很难发生重氮化-偶合反应。
药物分析
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）重氮化-偶合反应
1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2000）
[鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）
熔 点 为 228℃ ～ 232℃ C 4H 9 CH 3 O 2N N NHCO
OH
NO
2
.
CH
3
NO
2
药物分析08对氨基苯甲酸和酰苯胺类局麻药的分析-文档资料
医学课件医学课件pptppt77wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom对氨基苯甲酸酯和酰苯胺的结构与性质一对氨基苯甲酸酯类代表药物hcl盐酸普鲁卡因胺procainamidehydrochloride盐酸普鲁卡因胺与盐酸普鲁卡因的化学结构仅存在羧酸酯与酰胺的差异化学性质与本类药物很相似因此一并讨论酰胺类酰胺类医学课件医学课件pptppt88wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom二酰苯胺类对乙酰氨基酚paracetemol醋氨苯砜acedapsone盐酸利多卡因lidocainehydrochloride盐酸布比卡因bupivacainehydrochloride对氨基苯甲酸酯和酰苯胺的结构与性质酰胺和酰苯胺的区别酰胺和酰苯胺的区别医学课件医学课件pptppt99wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1010wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1111wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1212wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom还有sciff碱反应易氧化变色等芳酰胺水解反应医学课件医学课件pptppt1313wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom水解受光热和碱性条件的影响含有氮原子含有氮原子医学课件医学课件pptppt1414wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1515wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1616wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1717wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom不具有芳伯氨基但含有芳仲氨基在酸性溶液中同样能与亚硝酸钠反应医学课件医学课件pptppt1818wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课件医学课件pptppt1919wwwthemegallerycomwwwthemegallerycom医学课
药物分析第(8)章
H2N
COO(C2H5)2 + NaOH
H2N
COONa + CH3CH2OH
CH3CH2OH+ 4I2 + 6NaOH
22
CHI3 + 5NaI + HCOONa + 5H2O
四、 制备衍生物测熔点 1. 三硝基苯酚衍生物的制备： 利多卡因和布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2 O N 2 CH3
醋氨苯砜
CH3 NHCO CH3 C4H9 N
.
HCl
盐酸布比卡因
5
三、主要理化性质
1. 芳伯氨基特性: 显重氮化-偶合反应; 与芳醛缩合 成Schiff碱的反应；易氧化变色 。(盐酸丁卡因， 无) 2. 水解性：因分子结构中有酯键。 3. 弱碱性：能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应；在 非水溶剂中能滴定。
28
注射用盐酸丁卡因
(2)
取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光 A)测定，在227nm与310nm
光度法(附录Ⅳ
的波长处有最大吸收。
29
盐酸普鲁卡因胺注射液
【鉴别】
(1)
取本品适量，加水制成每1ml
中含盐酸普鲁卡因胺5μg的溶液，照紫外-可见 分光光度法(附录Ⅳ 长处有最大吸收。 A)测定，在280nm的波
【鉴别】 (1) 取本品0.2g，加水20ml
溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳 酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml， 振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。
15
盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液作用， 生成亮绿色钴盐沉淀。
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + CoCl2 CH3
第八章对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类局麻药物的分析
+ NaNO2 + 2HCl
N
N Cl
COOCH2CH2N(C2H2)2 + NaCl + 2H2O
N
N Cl
COOCH2CH2N(C2H2)2 +
OH + NaOH
OH N= N
COOCH2CH2N(C2H2)2
+ NaCl +H2O
橙红色沉淀
8
盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与 NaNO2 作用生成乳白色 N亚硝基化合物沉淀，可与芳伯胺基的同类药物区别。
31
（4）滴定速度 重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定 速度不能过快。 尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时， 游离芳伯胺浓度非常低，反应速度更慢。所以， 每加一滴滴定液，要搅拌15分钟后再判断终点。
32
中国药典规定：在 30 C 以下，把滴定管 尖端插入液面下2/3处进行滴定。在滴定 时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。
离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因 素，通常对离子的浓度为320mmol/L。 流动相pH的选择：调解流动相的pH值可在较大范围内，改变 弱酸或弱碱样品的保留值和分离选择性。通常测定酸性物质
时调至pH77.5；测定碱性药物时调至pH33.5。
二、盐酸普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查：LC-
处理后亚硝酸钠滴定测定含量一般较少采用
25
2. 操作中的主要条件
滴定反应特点：
重氮化反应属于分子反应
滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定
反应速度受多种因素影响：温度、速度等
26
（1）加入溴化钾加快反应速度 重氮化反应机制：
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的分析
H2O2，氧化
盐酸普鲁卡因胺
羟肟酸
缓缓加热至沸，溶液 先显紫红色，随即呈
暗棕色至棕黑色
FeCl3试液
羟肟酸铁
三、水解产物的反应
1、盐酸普鲁卡因 ChP [鉴别] （2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后， 加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热， 变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润 的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后， 放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
五、吸收光谱特征 1、紫外特征吸收光谱 ☆具有的苯环结构，具有紫外吸收光谱
☆针对不同的药物、不同的溶剂、不同的浓度、 它们的吸收波长不同，吸收系数也不同
盐酸布比卡因
ChP
[鉴别] （2）取本品，精密称定，按干燥品计算，
加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，
照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm
MS LC LC-MS LC-MS/MS LC-ESI-MS/MS LC-APCI-MS/MS LC-ESI-TOF-MS/MS LC-MALDI-TOF-MS/MS
LC-MS分析： 1、色谱条件 Zobax SB-C18 (150 mm×4.6 mm, i.d., 5 μm) Column temperature: 25 ℃
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯 胺类局麻药物的分析
局麻药物：一类能在用药部位局部可逆性地 阻断感觉神经冲动发生与传导的药物
亲酯性芳香环
酯键 对氨基苯甲酸酯类
结构组成 中间连接功能基
酰胺键
亲水性胺基
酰苯胺类
第一节 结构与性质 一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与典型药物
具有对氨基苯甲酸
酯的母体
第8章对氨基苯甲酸酯类药物分析(2012)
加入溴化钾（ChP2010规定加入2g）
KBr + HCl
HNO2 + HBr HNO2 + HCl
HBr + KCl
NOBr + H2O NOCl + H2O
KHBr KHCl
∵ KHBr 比KHCl大300倍 ∴生成NOBr量大得多 ∴加快重氮化反应速度
(2)加过量盐酸加速反应： 因胺类药物盐酸盐溶解度﹥硫酸盐 ①重氮化反应速度加快 ②重氮盐在酸性溶液中稳定 ③防止生成偶氮氨基化合物
密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水 40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，置电磁搅拌器 上，搅拌使溶液，再加溴化钾2g，插入铂-铂电 极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用 亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速 滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的 尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入 溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏 转，并不再回复，即为滴定终点。
H2N
CONCH2CH2N(C 2H5)2 + H2O OH
FeCl3
H 2N
CONCH 2CH 2N(C 2H 5)2 O
Fe + 3 HCl
3
紫红色
暗棕色
棕黑色
三、水解产物反应 1.盐酸普鲁卡因的鉴别
盐酸普鲁卡因+NaOH→白色↓（普鲁卡因）
H2N COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
NaOH
N2+Cl
_
+ NaCl + 2H2O COOCH2CH2N(C2H5)2
HO
_ + N2 Cl
N N OH + + NaOH
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 (2) 加过量HCl加速反应：
①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
Ar-N2+Cl- + H2N-Ar
Ar-N=N-NH-Ar + HCl
一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.5~6 。
Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸 普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜 及注射液水解后用本法。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
NHCOR + H2O
H+ △
还原
NO2 + 6[H]
NH2 + RCOOH
NH2 + 2H2O
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
药物分析
第八章
对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
游奎一
湘潭大学化工学院
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
本章主要内容
第一节 结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质与检查 第四节 含量测定
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
学习要求
一、掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药 物的结构和性质，代表性药物的鉴别、检查和 含量测定的基本原理与方法。
Ar-NH2
HCl NaNO2
重氮盐 OH-
-萘酚
橙黄~猩红色
生成偶氮染料
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）重氮化-偶合反应 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、
对氨基水杨酸钠 等
间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯
但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻 效应，很难发生重氮化-偶合反应。
3. 弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具 有弱碱性。
4.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
5.吸收光谱特性：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物分子结构中 均含有苯环及相应的取代基与脂肪胺侧链，具有特征的紫外吸 收光谱和红外光谱行为。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）重氮化-偶合反应
1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2000） [鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸 使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加 碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到 猩红色沉淀。
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
（一）基本结构与典型药物
NH R1
酰化 O
NH C
R3
R1
NH C R2
O R4
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
CH3 NHCO
C4H9 N
CH3
HCl
盐酸布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2
CH3
CH3
四、含量测定
3. 指示终点的方法(实验装置见书P250)
(1) 永停滴定法 溶液 检流计 V 终点前： 无过量 无电流 V
HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零
HNO2 (2) 外指示剂法
用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理：
NH2
H2O2
CONHCH2CH2N(C2H5)2
芳 酰 胺
NH2
NH2
FeCl3
Fe
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2
羟 肟 酸
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2 3 紫红，暗棕色，棕黑色
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（二）与重金属离子反应
3. 与汞离子反应
为什么要检查？
杂质来源： 水解产生、脱羧、氧化
H2N
COOH -CO2 H2N
[O]
O=
=O
怎样检查？ 采用HPLC进行检查。
黄色
流动相：磷酸二氢钾-甲醇=68:32 检测波长：279nm
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
三、特殊杂质检查
(二)盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺的检查
HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
CH3CONH
O S O
醋氨苯砜
NHCOCH3
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（二）主要理化性质
1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
2. 水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。
CH 3
+Co2+
CH3
NCOCH2N(C2H5)2
CH3
Cu CH3
(C2H5)2NCH2CON
CH3 蓝紫色
CH3
NCOCH2N(C2H5)2 (C2H5)2NCH2CON
CH3
Co
CH3
亮绿色
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（二）与重金属离子反应
2. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。
采用HPLC进行检查。
(三)盐酸罗哌卡因光学纯度的检查
盐酸罗哌卡因有两种对映体，一个是R构型，一个是S构型。 其中R-盐酸罗哌卡因对心脏毒性大，要限制其含量，其限量 是0.5%。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法。 即：具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具 潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨 基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉 素）经还原，也可用本法测定。
CH3(CH2)3NH
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液
中可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。
NHC4H9
C4H9N-NO
+ HNO2 COOCH2CH2(C2H5)2
+ H2O
COOCH2CH2(C2H5)2 乳白色
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
(五) 紫外特征吸收光谱法
1. 在λmax 处测定供试液的吸光度。
例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于λmax =263nm
和λmax =271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.53～0.58与0.43～0.48
2. 在规定的浓度测定λmax
例如：醋氨苯砜5μg/ml; 最大吸收。
在λmax
H2N
COOC2H5
苯佐卡因
H2N
. COOCH2CH2N C2H5 2 HCl
盐酸普鲁卡因
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
H3C (H2C)3 HN
COOCH2CH2N(CH3)2 . HCl
盐酸丁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 HCl
盐酸普鲁卡因胺
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
黄色沉淀 黄色沉淀
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
(五) 制备衍生物测熔点
2. 硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因
NHC4H9
NH4SCN
COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl
NHC4H9
COOCH2CH2N(C2H5)2 .HSCN 熔点为131℃ 白色结晶
强酸制弱酸
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）重氮化-偶合反应
NH2
COOCH2CH2N(C2H5)2
OH [H2O]
NHCOCH3
NaNO2+HCl
Ar-NH2
Ar-N2+Cl -
OH
OH-
Ar-N=N OH
猩红或红色
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
特例： 盐酸丁卡因：
NH2
NH2
HCl
HCl
NH2 + HOCH2CH2N(C2H5)2
COONa NH2. HCl
COONa
COOH
COOH
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
(三) 水解产物反应
2. 苯佐卡因的鉴别 苯佐卡因 + NaOH 乙醇 乙醇 + I2 + NaOH CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
(四) 制备衍生物测熔点
1. 三硝基苯酚衍生物的制备：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因
H3C
. NHCOCH2N(C2H5)2 O2N CH3
OH NO2
熔点为228℃～232℃
. CH3
C4H9 O2N
N
NHCO
NO2
OH NO2
CH3
NO2
熔点为194℃
盐酸利多卡因 + H2NO3 + H2NO3 + Hg(NO3)2 红色或橙黄色
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析