临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法

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13!检验科PCR实验室标本采集、运送、接收、拒收及保存程序

标本采集、运送、接收、拒收及保存程序第一部分 HPV检测标本1 目的：保证HPV标本的质量。

2 范围：临床采集、运送、接收及实验操作人员。

3 内容：3.1 HPV标本采集标准操作流程3.1.1由经过宫颈脱落细胞标本采集专业培训的妇科医生用窥阴器或阴道张开器暴露宫颈（取样前先用棉签擦去宫颈分泌物）。

3.1.2将专用宫颈刷以适中力度接触于宫颈口，轻轻转动宫颈刷使其顺时针旋转3-5圈，并停留数秒钟。

3.1.3慢慢取出宫颈刷，将其放入标有病人编号的专用标本管中，折断其刷柄，拧紧瓶盖。

3.2 HPV标本采集注意事项3.2.1月经期不可采集标本（减少给受检者的损伤）。

3.2.2月经正常妇女，在月经来潮后10～18天为最佳检查时间。

3.2.3不可在碘试验和醋酸试验之后采集样本（可能会抑制PCR反应）。

3.2.4取标本前48小时内不要作阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物（可能会抑制PCR反应）。

3.2.5取标本前48小时最好不要行性生活（可能出现一过性假阳性）。

3.2.6样本采集后，注意避免交叉污染。

3.3 HPV标本运送的标准操作流程所有临床标本在采集后立即送至实验室放在2~8℃保存。

3.4 HPV标本接收的标准操作流程3.4.1 HPV标本由实验室标本室进行接收，查对是否贴有标签、标本是否有洒落、破损，查对标本、申请单信息、刷卡信息是否相符，有异常情况的标本，视为拒收标本，应填写《标本拒收登记表》并根据情况处理。

3.4.2标本室实验人员对接收的标本进行编号，（此编号为样本唯一编号），然后与PCR实验室人员进行交接并实行严格登记制度。

3.4.3 PCR实验室人员对已接收的标本按正常标本、血性标本、粘液标本进行分类登记。

3.4.4 由指定人员对接收的标本进行常规涂片用显微镜查看是否有上皮细胞，细胞数量在每视野≥3个为可进行HPV检测的标本。

3.4.5对于特殊的样本（包括危重病人或急出报告的标本等），实行“首接”负责制，及时处理，并进行登记。

PCR实验操作流程

1 PCR 实验操作流程（TB/LP/MPCP ）一、标本的核酸提取（痰标本）1、痰液液化：痰液加入四倍体积的4%NaOH ，摇匀静置30min ；（样本编号，离心管编号）2、将液化后的液体0.5ml 转至1.5ml 离心管中，再加入0.5ml 4%NaOH ，混匀静置10min 继续液化，13000rpm 离心5min ，去上清；3、加入1ml 生理盐水洗一次，振荡器震荡混匀，13000rpm 离心5min ，上清去除干净；4、沉淀直接加入100μl 核酸提取液（提取液使用之前混匀），混匀数秒，干热仪100℃加热10min ，然后13,000rpm 离心5min ，取上清4μl 作为PCR 反应模板。

二、试剂配制、加样三、PCR 扩增设置扩增循环参数设置：37℃×2min ，94℃×2min ，循环一次；93℃×15s ，60℃×60s ，循环40次，荧光检测在60℃×60s ，荧光通道FAM 和VIC 通道。

反应体系40μl 。

四、结果判断MPCP ：FAM 通道Ct ≤38，报告MP 为阳性；VIC 通道Ct ≤38，报告CP 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，则判断为低于检测线，判为阴性LP ：FAM 通道Ct ≤38，报告LP 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，则判断为低于检测线，判为阴性TB ：FAM 通道Ct ≤38，报告TB 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，且扩增曲线呈典型的S 型，则判断为阳性；若非典型S 型曲线，则判断为低于检测线，判为阴性。

PCR实验室临床标本的采集、运送、接收程序

PCR实验室临床标本的采集、运送、接收程序1．目的：规范临床待检标本的正确采集、送检和处理。

2．适用范围：分子诊断室的所有临床检测标本。

3．负责人：操作人：4．程序：4．1 标本的采集4．1．1 标本由临床各科室接受过临床基因扩增检测有关标本采集、保存、运输知识培训的医护人员采集并送至实验室。

4．1．2标本采集要求a）血液标本：用2ml真空采集管或1.5ml高压灭菌离心管采集血液标本，血标本采集后在2小时内送达实验室（HCV采用EDTA 抗凝的血浆）。

离心（检验单与标本一道）后用一次性吸管吸取血清或血浆加入经消毒的1.5ml的离心管中，编号。

b）痰标本：用带盖的无菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰标本送检。

（对于无痰或少痰的患者，可用45℃加温的100g/L NaCl 水溶液雾化吸入或改变体位以使痰液易于咳出；对于小儿可以轻压胸骨柄上方以诱导咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集标本。

）标本在室温下保存不能超过24小时。

c）生殖道拭子：尿道或阴道分泌物由医生用专用取样拭子（灭菌，一次性）采集样本，及时送检。

采集生殖道拭子标本，要求男性病人在采样前2小时内不能排尿，采样时，将棉拭子伸入男性尿道及女性宫颈口2～3cm，转动一周以获得上皮细胞。

d）尿液：由病人自留尿液于无菌封闭的杯中送检。

e）脑脊液和胸腹水：由临床医生采集后放入消毒的试管中及时送检。

注意：所有上述用于临床标本采集的容器如试管或离心管，均应使用前高压灭菌和密封。

4．2 标本的运送标本采集后，密闭、标（贴）姓名，应尽可能快的送至检测实验室，如运送时间需2小时以上，必须用冰盒送至实验室。

标本中如加入了适当的稳定剂，如用于RNA测定加入4mol/L异硫氰酸胍盐（GITC）的血清（浆）标本和用于DNA测定的EDTA抗凝血等，则可在室温下运送或邮寄。

4．5 接收4．5．1严格对各类样本的查对和双签制度，对病房各样本及时进行验收，查对，不符合要求的样本一律退回，并有书面记录。

PCR实验室临床标本的保存程序

PCR实验室临床标本的保存程序
1. 目的：为保持标本的状态，防止因外界条件改变对标本产生影响，保证检验结果的准确性。

2．范围：PCR实验室接收的标本。

3．职责：工作人员负责标本的贮存，保证标本状态的稳定。

4．程序：
4.1 工作人员应认真核对所接收的标本，按检测项目将送检标本分类。

4.2 血清/血浆样品：将样品离心，吸出血清/血浆，作好标记，按编号排列，置-20℃贮存。

4.3 用于DNA检测的核酸样本如需要保存时应在10mmol/Ltris、1mmol/LEDTA缓冲液（pH7.5-8.0）中，放置在标本处理区冰箱中4℃保存。

用于RNA检测的核酸要本应在缓冲液中-80℃保存。

4.4 样品出现问题的处理：样品在保管期内，一旦出现变质丢失等问题，有关人员应如实向科主任或技术负责人报告，并通知送样科室。

必要时，重新送样品。

4.5 所有样品均留有备用样品，供复检时使用。

4.6 样品移交：当样品在室之间或者虽在同一室内但在不同组间移交时应有移交记录和签字。

4.7 安全处理：自生物体的任何样品都应认定具有传染性，应按《实验室生物污染物处理程序》由专人进行处理。

4.8 样品保留时间：样品应在报告发出后，至少保留一月。

由专人处理，并记录。

4.9 诚实性、保密性：科室有义务为委托方保密，保证检验公正性和保密性。

5 引用的记录本附表003 标本超低温保存及处置记
录表。

临床基因扩增检验标本的处理、保存和核酸提取方法及质量控制3讲述

RNA 检测：及时分离血浆，置于无RNase 的离心管中送检 EBV-DNA检测（小心使用）：小心分离LC，避免混入RBC
标本采集
其他体液（TB/EBV-DNA等病原）
痰：深部痰液，不是唾液胸腹水：无菌抽取，加抗凝剂尿液：尿道口消毒，中段尿鼻咽部：咽后壁分泌物EBV-DNA
分泌物（CT/UU/HPV-DNA等病原）
的整个提取操作过程中,都应戴一次性手套。在RNA提取实验中，应勤换手套。
RNA提取的常用方法
表面活性剂加蛋白酶K，氯仿-酚抽提法。胍盐提取结合氯仿-酚抽提法。胍盐提取结合玻璃粉、二氧化硅等颗粒悬浮吸附法等。
核酸提取的改良方法
旋转离心柱（SPIN COLUMN）方法玻璃粉吸附法二氧化硅（Se）或硅藻吸附法微量全血核酸提取法：NaI 方法其它方法：疏水性Immobilon-P膜、全自动核酸纯
去除或减轻抑制的一些方法
加入0.6% (wt/vol)牛血清白蛋白（BSA）可降低血液对Taq DNA聚合酶的抑制效应，既使在2%（vol/vol）血液存在下亦可成功扩增，而通常血液含量只能是0.2%。
BSA也可增加rTth或Taq DNA聚合酶的扩增能力，使其对粪便和肉类标本中抑制物的抵抗能力分别提高10和20倍。
血红蛋白
1%(V/V)血液可完全抑制Taq酶活性，与Mg2+浓度无关。Tth聚合酶在含4%（V/V）血液的PCR反应混合液中可以进行扩增，加入1U单链 DNA结合蛋白——T4基因32蛋白(gp32)，Tth聚合酶在含8%（V/V）血液情况下，仍可扩增。因此，使用Tth聚合酶和gp32蛋白，可实现从临床标本不提取纯化核酸直接扩增靶DNA。
单链DNA结合T4基因32蛋白（gp32）有类似BSA的增强效应。

临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法共66页

临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法
11、获得的成功越大，就越令人高兴。野心是使人勤奋的原因，节制使人枯萎。 12、不问收获，只问耕耘。如同种树，先有根茎，再有枝叶，尔后花实，好好劳动，不要想太多，那样只会使人胆孝懒惰，因为不实践，甚至不接触社会，难道你是野人。(名言网) 13、不怕，不悔(虽然只有四个字，但常看常新。 14、我在心里默默地为每一个人祝福。我爱自己，我用清洁与节制来珍惜我的身体，我用智慧和知识充实我的头脑。 15、这世上的一切都借希望而完成。农夫不会播下一粒玉米，如果他不曾希望它长成种籽；单身汉不会娶妻，如果他不曾希望有小孩；商人或手艺人不会工作，如果他不曾希望因此而有收益。在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子

PCR实验室检验标本采集、接收及管理程序

1.目的对标本采集前患者的准备、标本采集、接收、保存进行规范，以控制各环节可能出现的误差，确保检验结果准确可靠。

2.范围核酸检测的所有标本。

3.职责由PCR实验室负责制定程序文件，由专业技术人员负责执行。

4.内容4.1标本采集4.1.1血液标本：4.1.1.1原始标本采集的标本类型是静脉血，根据不同检测项目选用不同类型的一次性真空采集管。

全血或血浆标本采用EDTA抗凝的紫色真空采血管，不可使用肝素或肝素盐抗凝，此类抗凝剂能强烈抑制Taq酶的活性。

血清标本采用不含抗凝剂的真空采血管。

4.1.1.2用于RNA检测的标本，应用核酸专用管或无RNase的采集管，应尽快送检，以立即分离血清为好，将血清转移至1.5ml无RNA酶的无菌离心管中，冷藏或冷冻保存，以避免RNA的降解。

标本若不能及时检测，应保存于-20℃，并避免标本的反复冻融。

4.1.2分泌物标本：4.1.2.1尿道：对男性患者，先用生理盐水清洗尿道口，将男用取材拭子插入尿道内2cm-4cm，旋转10-20秒再取出，以采集到粘膜上皮细胞。

对女性患者，可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似的方法取材。

如有明显溃疡或疣状物，可取溃疡或挑破疣体取分泌物。

男性尿道样本采集前24小时内禁止尿道用药，2小时内不能小便。

4.1.2.2女性生殖道：取用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内约2-6cm，旋转10-20秒采集宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌专用管，密闭送检。

女性生殖道样本采集需选择在非月经期，采样前24小时内应禁止阴道冲洗、阴道用药。

4.1.2.3样本的处理：将取样后的拭子放入1.0ml的无菌生理盐水中漂洗片刻。

吸取液体转移至1.5ml 离心管中用于检测。

待测样本在2-8℃保存2周，-20℃保存不超过3个月，-70℃以下长期保存，应避免反复冻融。

4.1.3痰液标本的采集:4.1.3.1患者清晨清水漱口后，深咳出气管深处第一口痰于清洁干燥无菌带盖的容器内。

临床基因扩增检验标本的处理保存及核酸提取方法

DEPC是RNase的强烈抑制剂。灌满DEPC的器皿于37℃下放置2小时，然后用灭菌水淋洗数次，并于100℃干烤15分钟，最后高压蒸汽下15分钟。上述处理可除去器皿上痕量的DEPC,以防DEPC通过羧甲基化作用对RNA的嘌呤碱基进行修饰。
棉拭子
在使用PCR方法检测性病病原体时,临床标本一般为棉拭子,可将棉拭子置于适量生理盐水中,充分震荡洗涤后,室温静置5～10分钟,待大块状物下沉后,取上清立即离心,其后的沉淀即可用于 DNA提取。
如不立即用于核酸提取,则需保存于定,如用于分枝杆菌(如结核杆菌)核酸测定的标本,粘稠的脓液可采用痰标本的处理模式，先进行液化，再离心取沉淀提取 DNA；水样的脓液则直接离心,沉淀用生理盐水洗2～3次后,即可用于DNA提取。
RNA提取所用器皿的处理
经高压灭菌的一次性使用的塑料制品如试管,离心管等基本上无RNase,可以不经预处理直接用于制备和贮存RNA.
实验室用的普通玻璃器皿经常有RNase污染,使用前必须于 180℃干烤8小时以上,或用0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)的水溶液浸泡用于制备RNA的烧杯,试管和其它用品。
临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法
江西省肿瘤医院陈文学
检验误差的发生率
1997年，一位意大利著名检验专家对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前期，而来自检验中期和检验后期的误差率分别为 13.3%和18.5%。
2007年，这位专家又进行了类似的统计，结果显示，检验前期的误差发生率仍高达61.9%
每μg核酸标本中加入0.1U的肝素,即可100%的抑制酶活性。
在标本中加入肝素酶I 或Ⅱ1~3 U/μg核酸(于5 mM Tris pH7.5, 1 mM CaCl2, 40 U RNase 25 ℃2小时) 可去除肝素的抑制作用。

5-临床标本采集、保存及核酸的提取-唐翠燕

• 总之，标本的收集及适当的预处理，对用于PCR测定的核酸模板的成功提取，具有
决定作用。
二、核酸的提取
• 待检样品中的核酸是PCR反应的模板，由于PCR具有高度的特异性和敏感性，一些样品甚至简单到不需要任何处理便可用于 PCR。但是在大多数的情况下，还是需要对样品作适当的处理才能用于PCR。
• 下列试剂是制备RNA的常规试剂:
• 裂解液：4mol/L GuSCN，25mmol/L柠檬酸钠pH7.0，0.5%Sarkosyl， 100mmol/Lβ-巯基乙醇（用前加入）
• 饱和酚：氯仿：异戊醇（50：49：1）
• 3mol/L NaAc pH5.2 • 无水乙醇 • 75%乙醇 • DEPC处理的无菌去离子水 • RNAasin(RNA酶抑制剂)
钟，待大块状物下沉后，取上清立即离心，其后的沉淀即可用于DNA提取。如不立即用于核酸提取，则需保存于-20℃下。
• 2.4 脓液
• 脓液的处理依情况而定，如用于分枝杆菌（如结核杆菌）核酸测定的标本，粘稠的脓液同痰标本的处理模式，先进行液化，再离心取沉淀提取DNA；水样的脓液则直接离心，沉淀用生理盐水洗2～3次后，即可用于DNA提取。
• 2.2 痰
• 痰属于分泌物，临床上常用作结核杆菌 DNA测定样本，由于痰中含有大量粘蛋白和杂质，故在核酸提取时，需对样本进行初步处理，用4%NaOH液化，需注意的是，液化时不能加热，液化时间不能过长。
• 液化标本如不立即用于核酸提取，可保存于-20℃下。此外，对用于非结核杆菌如肺炎支原体的PCR检测，痰标本只能室温悬浮于生理盐水中，充分振荡混匀，促使大块粘状物下沉，取上清离心，所得到的沉
5
• 2.3 75%乙醇漂洗DNA，是为了去除残余的盐类，去除过量SDS和酚等杂物，因为 SDS在75%的乙醇中保持溶解状态，不与 DNA共沉淀，从而通过弃上清液去除这种去污剂,避免对以后PCR反应的影响。

临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法

过晚都可能会出现假阴性结果）
标本采集部位的准备（适度消毒）标本的类型和采集量（衣原体上皮细胞）采样质量的评价（评价方法：肉眼观察、显微镜下观察和化
学分析）

采样及运输容器（一次性无菌器材,防腐剂,抗凝剂）标本采集中的防污染（一次性无菌容器，防止混入操作
者头发，表皮等，如玻璃容器要高压灭菌）
临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法
江西省肿瘤医院陈文学
检验误差的发生率

1997年，一位意大利著名检验专家对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前期，而来自检验中期和检验后期的误差率分别为 13.3%和18.5%。 2007年，这位专家又进行了类似的统计，结果显示，检验前期的误差发生率仍高达61.9%

试剂准备 ①裂解液：50 mmol/L Tris-HCl， 10 mmol/L EDTA, 2% Triton X-100, 4 mol/L 异硫氰酸胍盐（GITC）, 0.3 mol/L 醋酸钠。 ②玻璃珠：（直径：425-600um）
乳汁标本离心6000rpm，5min，弃上清脂质和沉淀用750ul裂解液重悬重悬液移入含100mg玻璃珠离心管搅拌煮沸5min，离心14000rpm，3min 650ul上清转移到另一离心管中，等体积异丙醇沉淀
IgG
IgG的抑制作用是由于其与单链DNA
的相互作用，使得靶DNA不能与DNA 聚合酶相互作用
使用煮沸作为标本处理方法或使用
PCR前的热启动,将增强IgG对PCR反应的抑制
去除或减轻抑制的一些方法
NaOH处理可中和临床标本中的Taq
DNA聚合酶抑制剂，但这种方法不适用于DNA含量低的标本，因为NaOH处理可使DNA大量丢失。

临床基因扩增检验标本的采集、处理、保存和核酸提取方法

体液
• 体液标本包括胸水、腹水、脑脊液、
尿液等，可按水样标本的方式离心处理。 • 沉淀标本的保存-70 ̊C 。
组织
• 组织有新鲜组织块和石蜡切片。 • 新鲜组织块的处理，首先用生理盐水
洗2次，将组织研碎，加入生理盐水震荡混匀，离心，取沉淀，用蛋白酶K消化后，提取核酸。新鲜组织可保存于 50% 50 %乙醇中。 • 石蜡组织切片，需先用辛烷或二甲苯脱蜡，蛋白酶K消化后，提取核酸。
标本的运送
• 原则原则：标本采集后必须尽快送至实验室。：标本采集后必须尽快送至实验室。 • 需要转送的标本需要转送的标本：：用于RNA检测的标本，如果未
经稳定化处理，则必须速冻后，放在干冰中运送。 • 经过适当稳定化处理的标本可在常温下通过邮寄运送。如用于DNA扩增检测的EDTA抗凝全血标本及用于RNA扩增检测的经GITC稳定化处理的标本，通常在运送时，应采用不易破碎的容器装载标本。
二、标本的前处理
• 标本处理即核酸提取纯化是决定扩增检测
成败的关键性步骤。 • 通常，核酸制备质量不高是由于抑制物去除不完全所致，抑制物可能来源于标本本身（如血红素及其前体或降解产物）或核酸提取过程中残留的有机溶剂（如酚、氯仿等），这些物质对其后的Taq酶扩增反应步骤具有强烈的抑制作用，从而影响靶核酸的扩增测定。
RNA提取常用方法
• 经典方法：胍盐提取结合酚-氯仿
抽提。 • 商品化试剂盒。
三、靶核酸提取质量
• 纯化靶核酸的完整性：使用凝胶
电泳将样品的核酸提取物与核酸 marker比较
三、靶核酸提取质量
• 靶核酸的浓度：可在A260读数测定, • DNA浓度可按以下公式计算：
[DNA]=(A260 [DNA]=(A 260)*( )*(0 0.05μg/μl) *稀释倍数

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临床PCBiblioteka 检验标本的采集处理保存及核酸提取方法
16、自己选择的路、跪着也要把它走完。 17、一般情况下)不想三年以后的事，只想现在的事。现在有成就，以后才能更辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须充满光明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的人只能引为烧身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克

pcr实验室核酸提取流程

pcr实验室核酸提取流程PCR实验室核酸提取流程。

PCR实验室核酸提取是分子生物学实验中的重要步骤，它是从生物样本中提取DNA或RNA的过程。

本文将介绍PCR实验室核酸提取的流程及注意事项，希望能为实验人员提供一些帮助。

首先，准备样本。

样本可以是血液、组织、细胞培养物等，根据实验需要选择合适的样本。

样本的质量和纯度对提取的核酸质量有重要影响，因此在实验前要确保样本的质量良好。

其次，裂解细胞膜。

裂解细胞膜是核酸提取的关键步骤，可以选择化学法、物理法或酶法进行裂解。

常用的方法包括加入裂解缓冲液、冻融法和酶消化法等，根据不同的样本选择合适的裂解方法。

接着，使用载体吸附核酸。

在裂解后，核酸会以游离态存在于溶液中，需要使用载体将核酸吸附并固定。

常用的载体包括硅胶膜、硅胶柱或磁珠等，选择合适的载体可以提高核酸的纯度和回收率。

然后，洗脱核酸。

经过载体吸附后，核酸需要进行洗脱步骤，去除杂质和提高核酸的纯度。

洗脱液的选择和洗脱条件的控制对核酸提取的效果有重要影响，需要严格按照实验步骤进行操作。

最后，进行核酸定量和保存。

提取得到的核酸需要进行定量检测，可以使用紫外分光光度计或荧光定量仪进行测量，确保核酸的浓度和纯度符合实验要求。

另外，在保存核酸时，要避免冻融循环和长时间暴露在光线下，以保证核酸的稳定性和完整性。

在进行PCR实验室核酸提取时，需要注意以下几点，首先，严格控制实验条件，避免外源DNA或RNA的污染；其次，避免核酸降解，尽快进行提取和保存；最后，遵循实验步骤，避免操作失误导致实验失败。

总之，PCR实验室核酸提取是一项关键的实验步骤，正确的操作可以保证提取得到高质量的核酸样品，为后续实验提供可靠的基础。

希望本文的介绍能够帮助实验人员更好地进行核酸提取实验，提高实验效率和结果的可靠性。

临床标本的采集、验收、保存及核酸的提取

石蜡切片用于核酸提取，需先用辛烷或二甲苯脱蜡，再用蛋白酶K消化后即可进行DNA提取。
三、核酸的提取方法
待测标本中的核酸是PCR反应的模板，由于PCR具有高度的特异性和敏感性,一些样本简单到不需要任何处理即可用于PCR。但大多数情况下还需对样本进行适当的处理，其目的为： 1）纯化样本中的核酸，除去杂质，2）使待扩增的靶序列暴露及核酸模板得到浓缩3）有利于评价扩增体系的灵感度。
3、RNA的提取
异硫氰胍（GuSCN）结合氯仿-酚提取RNA方法。
（1）试剂 1) 裂解液：4mol /L GuSCN,25mmol /L柠檬酸钠 pH7.0,0.5% Sarkosyl,100mmol /Lβ-巯基乙醇 2) 饱和酚：氯仿：异戊醇（50：49：1） 3mol /LNaAc pH5.2 3) 无水乙醇 4) 75%乙醇 5) DEPC处理的无菌去离子水 6) RNasin（RNA酶抑制剂）
经高压灭菌的一次性使用的塑料制品如试管，离心管等基本上无RNase，可以不经预处理直接用于制备和储存RNA。实验室用的普通玻璃器皿经常有RNase污染，使用前必须于180℃干烤8小时以上，或用1%焦碳酸二乙酯（DEPC）的水溶液浸泡用于制备RNA的烧杯，试管和其他用品。 DEPC是RNase的强烈抑制剂。灌满DEPC的器皿于 37℃下放置2小时，然后用灭菌水淋洗数次，并于100℃干烤15分钟，最后高压蒸汽下15分钟。上述处理可除去器皿上痕量的DEPC以防DEPC通过羧甲基化作用对RNA的嘌呤碱基进行修饰。
对于全血标本制备单个核细胞主要有两个途径：1）使用淋巴细胞分离液分离。2）使用红细胞裂解液,裂解红细胞后经生理盐水洗涤可得单个核细胞,单个核细胞如不提取核酸可保存于70℃以下。

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51、天下之事常成于困约，而败于奢靡。——陆游 52、生命不等于是呼吸，生命是活动。——卢梭
文家。汉族，东晋浔阳柴桑人（今江西九江）。曾做过几年小官，后辞官回家，从此隐居，田园生活是陶渊明诗的主要题材，相关作品有《饮酒》、《归园田居》、《桃花源记》、《五柳先生传》、《归去来兮辞》等。
53、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。 ——易卜生 54、唯书籍不朽。——乔特
55、为中华之崛起而读书。 ——周恩来
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6
、
露
凝
无
游
氛
，
天
高
风
景
澈
。
7、翩翩新来燕，双双入我庐，先巢故尚在，相将还旧居。
8
、
，
于
我
若
浮
烟
。
9、陶渊明（约 365年 —427年），字元亮，（又一说名潜，字渊明）号五柳先生，私谥“靖节”，东晋末期南朝宋初期诗人、文学家、辞赋家、散