反相高效液相色谱法测定化妆品中的24种防腐剂
反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂
反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂谢华林;胡波年;苑世领;胡汉祥;李爱阳【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2004(34)6【摘要】采用反相高效液相色谱法测定化妆品中山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯等6种防腐剂,用Zorbax ODS(5μm,4.6 mmi.d.×150mm)柱,V(磷酸二氢钾):V(乙腈)为90:10作流动相,加入磷酸调pH值为2.0,检测波长为254 nm.样品用乙醇-水-冰乙酸(体积比为70:29.5:0.5)提取,回收率为90.8%～105.7%,相对标准偏差为3.1%～8.5%.【总页数】3页(P398-400)【作者】谢华林;胡波年;苑世领;胡汉祥;李爱阳【作者单位】中南大学,化学化工学院应用化学系,湖南,长沙,410083;湖南建材高等专科学校,化工系,湖南,衡阳,421008;湖南建材高等专科学校,化工系,湖南,衡阳,421008;山东大学,胶体与界面化学教育部重点实验室,山东,济南,250100;中南大学,化学化工学院应用化学系,湖南,长沙,410083;湖南建材高等专科学校,化工系,湖南,衡阳,421008【正文语种】中文【中图分类】TQ658【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定化妆品中的24种防腐剂 [J], 武婷;王超;王星;马强;张帆;刘柳2.反相高效液相色谱法同时测定防晒化妆品中的防腐剂和防晒剂 [J], 李洁;康君行;吴大南3.反相高效液相色谱法测定化妆品中几种防腐剂 [J], 王健辉;胡家庆;张欣荣;尹笋君;刘小宇;杨峰4.反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂探析 [J], 王棋棋5.反相高效液相色谱法联合测定食品中多种防腐剂、甜味剂及富马酸二甲酯 [J], 柏中波;王晶;张国莹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
反相高效液相色谱法测定化妆品中几种防腐剂
反相高效液相色谱法测定化妆品中几种防腐剂作者：王健辉， 胡家庆， 张欣荣， 尹笋君， 刘小宇， 杨峰， WANG Jian-hui， HU Jia-qing ， ZHANG Xin-rong， YIN Sun-jun， LIU Xiao-yu， YANG Feng作者单位：王健辉,张欣荣,尹笋君,杨峰,WANG Jian-hui,ZHANG Xin-rong,YIN Sun-jun,YANG Feng(第二军医大学药学院无机化学教研室,上海,200433)， 胡家庆,HU Jia-qing(海军医学研究所,上海,200433)， 刘小宇,LIU Xiao-yu(第二军医大学基碲部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433)刊名：日用化学工业英文刊名：CHINA SURFACTANT DETERGENT & COSMETICS年，卷(期)：2009，39(2)被引用次数：1次1.中华人民共和国卫生部化妆品卫生规范 20022.SIRICHAI S.HASAJTTO C Separation of preservatives in cosmetic products by micellar electrokinetic chromatography 2004(12)3.OZTEKIN N.ERIM F B Determination of cationic surfactants as the preservatives in an oral solution and a cosmetic product by capillary electrophoresis 2005(05)4.MEMON N.BHANGER MI.KHUHAWER MY Determination of preservatives in cosmetics and food samples by micellar liquid chromatography 2005(07)5.DE ROSSI A.DESIDERIO C Fast capillary electrochromatographic analysis of parabens and 4-hydroxybenzoic acid in drugs and cosmetios 2002(19)6.龙朝阳.许秀敏食物中4种常用尼泊金酯的高效液相色谱法测定[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(01)7.胡俊明.王骏反相离子对色谱法测定化妆品中溴硝丙醇等11种防腐剂[期刊论文]-色谱 1999(05)8.王萍.丁晓静胶束电动毛细管色谱快速测定化妆品中的防腐剂[期刊论文]-色谱 2005(03)9.谢华林.胡波年.苑世领反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂[期刊论文]-日用化学工业 2004(06)10.张晓霞.周卯星.张高勇高效液相色谱法测定蛇床子萃取物中的蛇床子素[期刊论文]-日用化学工业 2006(06)1.期刊论文王超.马强.王星.WANG Chao.MA Qiang.WANG Xing反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的16种激素-色谱2006,24(6)糖皮质激素对皮肤具有一定的嫩白作用,短时间使用含有糖皮质激素的化妆品可使皮肤光滑细腻、红润白嫩,有着较好的美容效果[1].但长期使用糖皮质激素,通过皮肤的吸收可引起全身的副作用,导致面部皮肤损害、骨质疏松、肌肉萎缩、生长发育迟缓、诱发或加重感染和消化性溃疡、情绪异常、代谢紊乱等各种不良反应.化妆品中添加雌激素、雄激素、孕激素等性激素能够在短时间内促进毛发生长,防止皮肤老化,有除皱、增加皮肤弹性等作用.但长久使用会导致色素沉积、产生黑斑、皮肤萎缩变薄,甚至具有致癌性,引发细胞癌、乳腺癌、卵巢癌等疾病.我国<化妆品卫生标准>[2]、<化妆品卫生规范>[3]和欧盟化妆品规程(Directive 76/768/EEC)[4]中均明确规定,糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素等激素为化妆品组分中禁用物质.化妆品中激素的检验对于严格控制化妆品的产品质量,确保化妆品的使用安全,保障人民身体健康具有重要的意义.2.期刊论文郑艳明.郭新东.冼燕萍.杜志峰.罗海英.吴玉銮.李慧勇.ZHENG Yan-ming.GUO Xin-dong.XIAN Yan-ping.DU Zhi-feng.LUO Hai-ying.WU Yu-luan.LI Hui-yong化妆品中7种氟喹诺酮类药物的反相高效液相色谱法测定-分析测试学报2009,28(2)建立了反相高效液相色谱同时测定膏霜类化妆品中7种氟喹诺酮类药物(诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星)的方法.样品先用乙腈-水(0.1%甲酸)(体积比5 ∶ 95)溶液提取,经正己烷脱脂净化后用反相高效液相色谱法测定.添加水平为1.0 ～10.0 mg/kg时,回收率为87% ～108%,相对标准偏差为2.3% ～5.8%.结果表明,该法操作简便、灵敏、准确,适用于膏霜类化妆品中氟喹诺酮类药物的测定.3.期刊论文王小芳.王菁.任韧.虞爱旭.杨忠乔.孙华.Wang Xiao-fang.Wang Jing.Ren Ren.Yu Ai-xu.Yang Zhong-qiao.Sun Hua反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的7种性激素-中国卫生检验杂志2008,18(11)目的:建立一种简单、准确、灵敏、同时测定化妆品中7种性激素(雌二醇、雌三醇、雌酮、睾酮、甲基睾酮、孕酮、己烯雌酚)的高效液相色谱检测方法.方法:样品经甲醇提取、净化后,在XTerra RP18色谱柱(5um,4.6 mm×150 mm)上,以水/甲醇/乙腈(50:30:20,v/v/v)为流动相,利用二极管阵列检测4.期刊论文武婷.王超.李楠.WU Ting.WANG Chao.LI Nan反相高效液相色谱法同时测定祛痘类化妆品中的禁用物质-色谱2006,24(6)建立了用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定祛痘类化妆品中禁用物质安体舒通、过氧化苯甲酰和维A酸的含量.采用甲醇超声提取,HPLC法分离测定.3种被测物在11 min内均得到良好的分离.在1～200 mg/L范围内其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 9);在添加质量浓度为1～10 mg/L时,回收率为88.2%～106.7%,相对标准偏差小于3.1%;最低检出限(S/N=3)为安体舒通0.101 μg,过氧化苯甲酰0.100 μg,维A酸0.107 μg.该法简便、快速、准确,可用于祛痘类化妆品中以上3种禁用物质的检测.5.期刊论文缪晓琴.金抒反相高效液相色谱法测定化妆品中的3-O-乙基维生素-日用化学工业2008,38(4)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中的3-O-乙基维生素C,色谱条件:SHIMADZU Shim-pack VP-C18ODS(150 mm×4.6/mm,5μm)色谱柱;C18ODS保护柱芯;流动相V(甲醇):V(0.025 mol/L KH2PO4)=20:80;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;紫外检测器检测,检测池温度:40℃,波长:254 nm.结果表明,在此条件下,3-O-乙基维生素C在0～100 mg/L与相应的峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 2),线性回归方程为A=31.170 3ρ,回收率在97.75%～100.60%,方法精密度RSD约为2.6%(n=5).6.期刊论文马杰.林雏宣.MA Jie.LIN Wei-xuan反相高效液相色谱法测定化妆品中的几种防晒剂-日用化学工业2010,40(3)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中的10种防晒剂,用色谱柱为Waters Symmetry shield C18柱(250mm ×4.6 mm i.d,5 μm),V(甲醇):V(水)=85:15为流动相,检测波长310 nm,回收率为98.1%～101.0%,相对标准偏差小于5%.7.期刊论文何瑞云.王超.李楠.王星.武婷.陈娟.HE Rui-yun.WANG Chao.LI Nan.WANG Xing.WU Ting.CHEN Juan反相高效液相色谱法测定化妆品中11种禁用和限用有机含氯化合物-日用化学工业2008,38(5)建立了反相高效液相色谱法同时测定化妆品中11种禁用和限用有机含氯化合物的方法.以甲醇和柠檬酸水溶液为流动相(pH=2.56)进行梯度洗脱,Kromasil反相C18柱为分离柱,柱温42℃,采用程序可变波长检测,11种含氯化合物在20 min内被检出.检出限0.052 mg/L～0.498 mg/L(S/N=3),低、中、高3种质量浓度水平的加标回收率88.0%～109.2%,线性相关系数均在0.999 8以上.8.期刊论文谢华林.胡波年.苑世领.胡汉祥.李爱阳反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂-日用化学工业2004,34(6)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯等6种防腐剂,用Zorbax ODS(5μm,4.6 mmi.d.×150mm)柱,V(磷酸二氢钾):V(乙腈)为90:10作流动相,加入磷酸调pH值为2.0,检测波长为254 nm.样品用乙醇-水-冰乙酸(体积比为70:29.5:0.5)提取,回收率为90.8%～105.7%,相对标准偏差为3.1%～8.5%.9.学位论文武婷化妆品中功能成分的检测技术研究2006本论文采用高效液相色谱法建立了三种化妆品检测方法，分别用于检测化妆品中芦荟蒽醌类、祛痘类禁用物质和四环素类抗生素三类物质的含量。
高效液相色谱法同时测定化妆品中12种防腐剂
［关键词 】高效 液相 色谱 法 ：化妆 品 ：防腐 剂
［中图 分类 号］ＴＱ
ｆ文献标 识码 １Ａ
［文章 编 号】１００７—１８６５（２０１８）０２—０１８１－０４
Ｓｉｍ ｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｄ ｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ １ ２ Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｃｏｓｍ ｅｔｉｃｓ ｂｙ Ｈ ＰＬＣ
Ｚｈａｎｇ Ｆｅｉ ，Ｈｕａ Ｘ ｉａ （１．Ｓｉｃｈｕａｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６ １ ００４ １：２．Ａｎｋａｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ａｎｋａｎｇ ７２５０００，Ｃｈｉｎａ）
Ｋ ｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒ ｍ ａｎｃｅ Ｉｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｐｈｙ： ｃｏｓｍ ｅｔｉｃｓ： ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ
防 腐剂 是化 妆 品中 为抑制 微生 物 生长 而加入 的物 质【 。化 妆 品 中富 含 多种 营养成 分 ，易滋 生微 生物 而 腐败 变质ｌ 】，部 分 商家 向 化妆 品 中添加 防腐 剂来 延长 产 品货 架期 【６＿ 。但 防腐 剂 的超剂 量 使 用会 使人 们使 用化 妆 品后 发生接 触 性皮 炎 、皮肤 过 敏等 不 良反 应 Ｉ９＿Ｉ 。 目前 ， 随着 人们 生 活 水平 的逐 步 提 高 ，化妆 品成 为不 町 缺 少的 日常 消 费品 ，超 剂量 防腐 剂 的添加 将给 消 费者 的 身心健 康 带来 巨大 的安全 隐患 ［１３－１４］。
ｌ 试 部 分
１．１仪 器 与试剂 Ｓｈｉｍａｚｕ ＬＣ一２０３０Ｃ ３Ｄ 型高 效液相 色谱 仪 ：ＡＵＷ２２０Ｄ 型 电
高效液相色谱法测定膏剂化妆品中的甲醛释放类防腐剂
高效液相色谱法测定膏剂化妆品中的甲醛释放类防腐剂李彦博;赵晓冬;陆军;郭春梅;陈晓辉【摘要】建立了同时测定膏剂化妆品中1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲(DMDMH)、1-羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲(1-MDMH)和5,5-二甲基乙内酰脲(DMH)的高效液相色谱法.采用Waters Atlantis T3 C18液相色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈+0.1％甲酸溶液,流速1.0 mL/min,梯度洗脱;二极管阵列检测器,检测波长210 nm;柱温35℃.结果表明,DMDMH,1-MDMH和DMH质量浓度分别在17.86 ～ 595.20,17.65 ～588.39和18.05～601.67 mg/L 范围内与相应的峰面积具有良好的线性关系,相关系数分别为0.999 5,0.999 7和0.999 8,空白样品加标回收率分别为82.6％～106.2％,98.4％～ 110.7％和98.6％～ 113.0％.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2015(045)005【总页数】4页(P294-297)【关键词】化妆品;高效液相色谱法;防腐剂【作者】李彦博;赵晓冬;陆军;郭春梅;陈晓辉【作者单位】沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016;辽宁省食品检验检测院理化所,辽宁沈阳110015;辽宁省药品检验检测院化妆品室,辽宁沈阳110023;辽宁省药品检验检测院化妆品室,辽宁沈阳110023;辽宁省药品检验检测院化妆品室,辽宁沈阳110023;沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016【正文语种】中文【中图分类】TQ658;TQ047.6化妆品中一般都含有丰富的营养物质，特别是近年来越来越多活性功效成分的加入使化妆品越来越容易受到微生物污染，从而破坏化妆品的感官和品质，危害消费者的健康。
甲醛缓释体防腐剂作为最早被广泛使用的防腐剂之一，已经有几十年的使用历史，其防腐效果已经获得了广泛的认同。
高效液相色谱法测定化妆品中7种4—羟基苯甲酸酯
高效液相色谱法测定化妆品中7种4—羟基苯甲酸酯作者：林晓佳何敏恒陈晓珍刘信嘉汪晨霞许丽珠吴钟玲来源：《当代化工》2017年第06期摘要：建立了对膏霜类、乳液类、水类、啫喱类和粉类化妆品产品4-羟基苯甲酸丙酯、4-羟基苯甲酸异丙酯、4-羟基苯甲酸丁酯、4-羟基苯甲酸异丁酯、4-羟基苯甲酸苯酯、4-羟基苯甲酸苄酯、4-羟基苯甲酸戊酯的高效液相色谱测定方法。
样品经Agilent Poroshell C18 （2.7 μm， 10 mm×4.6 mm）色谱柱，以乙腈/水为流动相进行检测。
在优化条件下，7种4-羟基苯甲酸酯的在0.10 ～ 50.0 mg/L范围内线性良好，相关系数（R2）均>0.999，方法回收率为85.1 %～106 %。
该方法检出限（波长252 nm， S/N=3）均为2 mg/kg，方法定量限（波长252 nm， S/N=10）均为6 mg/kg。
该方法操作简便，灵敏度高，可满足化妆品中7种4-羟基苯甲酸酯的测定。
关键词：化妆品；4-羟基苯甲酸酯；高效液相色谱法；防腐剂中图分类号：O 657 文献标识码： A 文章编号： 1671-0460（2017）06-1256-04Determination of Seven Parabens in Cosmetics by HighPerformance Liquid ChromatographyLIN Xiao-jia， HE Min-heng， CHEN Xiao-zhen， LIU Xin-jia， WANG Chen-xia， XV Li-zhu，WU Zhong-ling（Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute，Guangdong Guangzhou 511447，China）Abstract： A method was established for determination of seven parabens including propyl 4-hydroxybenzoate， isopropyl 4-hydroxybenzoate， butyl 4-hydroxybenzoate， isobutyl 4-hydroxybenzoate， phenyl 4-hydroxybenzoate， benzyl 4-hydroxybenzoate， n-pentyl 4-hydroxybenzoate in cosmetics by HPLC（high performance liquid chromatography）. The samples were separated by Agilent Poroshell C18 （2.7 μm， 10 mm×4.6 mm） column， and determined with the mobile phase of acetonitrile/water. Under optimized conditions， seven parabens had good linear relationships in the range of 0.10 ～ 50.0 mg/L with the correlation coefficients of greater than 0.999，the recoveries were 85.1% ～106%. The limits of determination（LOD）（wave length was 252 nm，S/N=3） were 2 mg/kg；The limits of quantification（LOQ）（wave length was 252 nm，S/N=10） were 6 mg/kg. The method is simple， accurate， sensitive， which can be suitable for determination of seven parabens in cosmetics.Key words： Cosmetics；Parabens； High Performance liquid chromatography；Preservatives在中国宏观经济快速发展的环境下，化妆品及美容行业在中国得到迅速发展，并且保持着快速增长。
反相离子对色谱法测定化妆品中溴硝丙醇等11种防腐剂.
卡松是 氯 甲基 异噻唑 噻唑
Η Η 酮的混合物 ∀
Η 酮和 甲基 异
所示质量浓度的标准储备液 再用标准
Η
流动相
尼泊金甲酯即对羟基苯甲酸甲酯 其余依此类推 ∀
ισ ο ισ ο
Ù 磷酸二氢钠 Β ς 甲醇 Β ς 乙腈
结果与讨论
精密度和回收率 取不同类型的样品作为本底 分别加入低质量
浓度和高质量浓度的防腐剂 测定其精密度及回收
图
Φιγ 卡松
标准色谱图
οφ στανδαρδ σα λ ε
率 结果见表 ∀
苯甲醇 尼泊 尼泊金乙 尼泊
Χηρο ατογ ρα
样品的实际分析 用此方法对部分化妆品产品进行分析 并与其
溴硝 丙 醇 苯氧基乙醇 苯甲酸 尼 泊 金 异 丙 脂 ισο 尼 泊 金 异 丁 脂 ισο
∀
配方进行比较 结果见表 ∀
金 甲酯 酯
讨论 利用本法测定化妆品中的防腐剂 样品预处理
金 丙酯
操作简便 回收率高 色谱重复性好 分离速度快 ∀在 实验中发现脱氢乙酸和山梨酸对苯甲酸的测定有干 扰 当干扰组分在未知试样中同时存在时 可通过改
值为
∀
检测波长为
∀ 样品用甲醇超声提取 回收率为
相对标准偏
关键词 反相离子对色谱法 化妆品 防腐剂 中图分类号 文献标识码 文章编号 表
Ταβλ ε
前言
化妆品中的防腐剂是为了防止细菌污染而加入 的一种添加剂 ∀由于防腐剂种类繁多 且均有一定毒 性 因此我国化妆品卫生标准规定了 建立了 种防腐剂 种防腐剂检 以上 有很强 的使用限量 ∀为了给化妆品的检验 监督工作提供科 学依据 我们参照文献 测的反相离子对色谱法 ∀这 种防腐剂可覆盖市售
反相高效液相色谱法测定化妆品中的24种防腐剂
通过全波长扫描可得到２４种物质各自的吸收图谱。综合各物质在不同波长下的响应值和不同波 长对基线的影响，最终确定采用程序可变波长进行扫描（见表２），即根据不同组分的出峰顺序，在不同 时间段，分别用各组分的最佳吸收波长进行检测，从而提高检测的灵敏度，达到最佳的扫描效果。 ３．３样品提取方法的选择 ３．３．１样品提取溶剂的选择在相同的色谱条件下，比较了甲醇、乙醇、四氢呋喃和流动相等４种溶 剂对不同种类化妆品（膏霜类、水类、同体类）的提取效果。结果表明，乙醇和四氢呋喃提取后的色谱图 在２．０～４．５ ｍｉｎ的色谱峰的峰形欠佳，无法准确计算溴硝丙醇和水杨酸的含量，而流动相提取口红时， 不能将口红完全溶解，且在２８．２６ ｍｉｎ时基线干扰较大，影响被钡４物质含量的测定。从提取结果可看 出，乙醇、四氢呋喃和流动相对某些物质的提取率偏低，而甲醇对各物质的提取率都较高，提取效果最 佳，因此选择甲醇作为样品超声提取的溶剂。 ３．３．２超声波提取时间的选择研究了ｌＯ一６０ ｍｉｎ不同时间段内，超声波的提取率。发现３０ ｍｉｎ以 上对提取率没有明显增大，且随着超声时间的延长，会使超声波仪器内的水温上升，导致某些易挥发的 成分挥发，反而降低了提取率。所以，综合考虑，选择３０ ｍｉｎ为超声提取时间。图ｌ是２４种防腐剂在 确定的色谱条件下的液相色谱图。 ３．４线性关系、检出限、回收率和精密度
在确定的最佳分离色谱条件下，配制一系列不同浓度的混合标准溶液进行色谱测定，以各组分的峰 面积（ｙ）对浓度ｘ（ｍｇ／Ｌ）绘制标准曲线。当信噪比（－ｓ／Ⅳ）为３时，测得各防腐剂组分的检出限。各组 分的线性方程、相关系数和检出限见表３。
90365-仪器分析-反相高效液相色谱法测定化妆品中的防腐剂 (2)
反相高效液相色谱法测定化妆品中的防腐剂一实验目的1 了解高效液相色谱结构及工作原理及评价色谱柱方法2掌握反相高效液相色谱法及键合固定相的原理3掌握反相高效液相色谱法流动相的优化方法4掌握反相高效液相色谱法测定化妆品中的防腐剂二实验原理根据键合固定相与流动相相对极性的强弱，可将键合液相色谱法分为正相和反相法。
在正相键合液相色谱法中，固定相的极性大于流动相的极性，适用于分离油性或水溶性的极性和强极性化合物；在反相键合液相色谱法中，固定相的极性小于流动相的极性，适用于分离非极性、极性或离子型化合物，其应用范围比正相键合液相色谱法更广泛。
根据统计在高效液相色谱法中，约70%--80%的分析任务皆由反相键合液相色谱法来完成的。
评价色谱柱方法有：柱效（理论塔板数n）、容量因子（k’）、相对保留值（选择因子α）、分离度（R）。
为达到好的分离，我们希望n、α和R s值尽可能大，一般的分离（如α=1.2，R s=1.5），需n达到2000。
柱压一般为104 kPa 或更小一些。
1反相键合固定相色谱法的分离原理：它包括分配及吸附色谱原理（1）分配色谱原理假设在由水和有机溶剂组成的混合溶剂流动相中，极性弱的有机溶剂分子中的烷基官能团会被吸附在非极性固定相表面的烷基官能团上，而溶质分子在流动相中被溶剂化，并与吸附在固定相表面上的弱极性溶剂分子进行置换，从而构成溶质在固定相和流动相中的分配平衡。
Kp=Cs/Cm（2）吸附色谱原理当溶质分子进入极性流动相后，即占据流动相中相应的空间，而排挤部分溶剂分子，当溶质分子被流动相推动与固定相接触时，溶质分子的非极性部分（或非极性分子）会将非极性固定相上附着的溶剂膜排挤开，而直接与非极性固定相上的烷基官能团相结合（吸附）形成締合物，构成单分子吸附层。
这种疏溶剂的斥力作用是可逆的，当流动相极性减少时，这种斥力下降，会发生解缔，并将溶质分子释放而被洗脱下来。
烷基键合固定相对每种溶质分子締合作用和解締作用能力之差，就决定了溶质分子在色谱过程的保留值。
高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂的含量
ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｉｏｎｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ａ，２００７，１１３９（２）：１６５—１７０．
［９３ Ｌｉｕ Ｊｉｎｇｆｕ，Ｔｏｒａｎｇ Ｌ，Ｊｏｎｓｓｏｎ Ｊ Ａ．Ｐａｓｓｉｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｅａｎｕｐ ｏｆ ｐｈｅｎｏｘｙ ａｃｉｄ ｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ａ ｇｒｏｕｎｄｗａｔｅｒ ｐｌｕｍｅ
［１２］Ｍ ｕｔｈｕｒａｍａｎ Ｇ，Ｐａｌａｎｉｖｅｌｕ Ｋ．Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｏｆ ｔｅｘｔｉｌｅ ｄｙｅ ｉｎ ｖｅｇｅｔａｂｌｅ ｏｉｌｓ ｂａｓｅｄ ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｍｂｒａｎｅ［Ｊ］．Ｄｙｅｓ ａｎｄ Ｐｉｇｍｅｎｔｓ，
２００６，７０（２）：９９—１０４．
编 辑 ：琳 莉
［４］惠芸 华 ，沈 晓盛 ，等 ．固相 萃 取 一高效 液 相 色 谱 法 测 定 水 产 品 中 ７种 氟 喹 诺 酮类 药物 残 留［Ｊ］．农 药学 学 报 ，２００９，１１（４）：４６２—４６６．
［５］刘 嘉 ，李 韦 瑾 ．支 撑 液 膜 萃 取 技 术 及 其 在 肉 类 安 全 检 测 中 的应 用 ［刀 ．肉类 研 究 ，２００９，１３０（１２）：５０—５３．
高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂的含量
吴 谦 ，刘 素娟 ，廉 波 ，邵艳 秋 ，任 玉 兰 ，陈 爱
（牡 丹 江 师 范学 院 化 学 化 工 学 院 ，黑 龙 江 牡 丹 江 １５７０１１）
摘 要 ：构 建 一 种 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 化 妆 品 中 Ｍ ｅ— ＰＨＢＡ 和 Ｂｕ— ＰＨＢＡ 的 方 法．实 验 采 用 ＭＩＣＲＯＳＯＲＢ— ＭＶ Ｃ１８（２５０ ｍｉｌｌ×４．６ ＩＴｌｍ，５ ｍ）为 分 离柱 ，以 甲醇 一 水 （６０：４０，Ｖ／Ｖ）为 流 动 相 ，流速 为 １．５ ｍＬ／ｍｉｎ，检 测 波 长 ２５４ ｎｌＴｌ，用 ｕＶ 检 测 器在 ８ ｍｉｎ内可 将 两种 防 腐 剂 完 全 基 线 分 离 ．该 方 法 快 速 准 确 ，可 用 于 实 际 样 品 测 定 ．
高效液相色谱法快速测定化妆品及药品中4种防腐剂
高效液相色谱法快速测定化妆品及药品中4种防腐剂作者：刘素娟邵艳秋崔术新盛琦来源：《湖北农业科学》2015年第11期摘要：建立了灵敏、快速的高效液相色谱法测定化妆品及药品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯这4种常见防腐剂含量的方法。
采用Ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）为分离柱，以甲醇/水（80∶20，V/V）为流动相，流速为1.5 mL/min，紫外检测器检测波长为254 nm，柱温为30 ℃，在4 min内可将4种防腐剂基线分离，方法快速准确，可用于实际样品测定，结果滿意。
关键词：高效液相色谱；防腐剂；快速测定；化妆品；药品中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）11-2735-03DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.11.046Rapid Determination of Four Preservatives in Cosmetic and Medicine Using HPLCLIU Su-juan， SHAO Yan-qiu， CUI Shu-xin， SHENG Qi（Department of Chemistry and Industry， Mudanjiang Normal University， Mudanjiang 157011， Heilongjiang， China）Abstract： A high performance liquid chromatography method （HPLC） was developed for the determination of methyl p-hydroxybenzoate，ethyl p-hydroxybenzoate， propyl p-hydroxybenzoate and butyl p-hydroxybenzoate in cosmetic. A ultimate XB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm） was used as separation column with methanol and water （80∶20，V/V） as mobile phase， and flow rate was 1.5 mL/min， the UV-detection wavelength was 254 nm， the column temperature was 30 ℃. Four preservatives were separated within 4 min. The method was fast and accurate，which was available for practical samples with satisfactory results.Key words： HPLC； preservatives； rapid determination； cosmetic； medicine化妆品在日常清洁、美容、护肤中起重要作用。
反相高效液相色谱法测定化妆品中的抗氧化剂丁基羟基茴香醚和二丁基羟基甲苯
反相高效液相色谱法测定化妆品中的抗氧化剂丁基羟基茴香醚
和二丁基羟基甲苯
陈会明;王超
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2004(32)2
【摘要】为了保证化妆品质量，要添加一定量的抗氧化剂。
但抗氧化剂过量，会
损害人体健康。
合格食品的抗氧化剂的添加量必须符合国家卫生标准。
卫生部对化妆品中丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)的最大限量要求均为0.15％，但化妆品中BHA和BHT尚无行业及国家卫生检验标准。
食品中抗氧化剂的测定
一直沿用薄层法、比色法和气相
【总页数】1页(P271-271)
【作者】陈会明;王超
【作者单位】中国进出口商品检验技术研究所,北京,100025;中国进出口商品检验
技术研究所,北京,100025
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定辛伐他汀中的抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚 [J], 刘燕;孙启泉;莫羡忠
2.气相色谱-质谱选择离子法测定化妆品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚、二丁基羟基
甲苯 [J], 张伟亚;吴采樱;王成云;杨左军;刘丽
3.液质联用法测定化妆品中丁基羟基茴香醚含量 [J], 孙晓;张亚锋;李荣;董静
4.气相色谱-串联质谱法测定植物油中抗氧化剂丁基羟基茴香醚、2,6-二叔丁基对甲酚的不确定度评定 [J], 孙田垒;高雷;赵善仓;徐晓娟;孔秀
5.丁基羟基茴香醚和二丁基羟基甲苯的超高效液相色谱测定 [J], 熊齐荣
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定化妆品中24种常用防腐剂
高效液相色谱法测定化妆品中24种常用防腐剂
任菲菲;李晶平
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2022(49)21
【摘要】建立高效液相色谱同时检测化妆品中对羟基苯乙酮等24种防腐剂成分含量的方法。
样品经甲醇提取后,经CAPCELL MGⅢC18色谱柱分离,流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为230 nm、254 nm、280 nm,进样量为10μL。
结果表明,各成分在各自的线性范围内,线性关系良好,相关系数均为0.9998以上。
在水剂、乳液、膏霜三种基质中,24种成分低、中、高3个浓度水平的平均加标回收率在91.04%~111.16%之间,相对标准偏差(RSD)为0.7%~5.7%。
该方法操作简单,结果准确可靠,可同时检测化妆品中24种防腐剂的含量。
【总页数】5页(P223-227)
【作者】任菲菲;李晶平
【作者单位】珠海市食品药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】TQ
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定化妆品中对羟基苯乙酮等6种防腐剂
2.高效液相色谱法同时测定化妆品中16种防腐剂、防晒剂和去屑剂
3.高效液相色谱法同时测定化妆品中
3种防腐剂的含量方法学研究4.高效液相色谱法同时测定化妆品中4种表外防腐剂5.超高效液相色谱法快速测定化妆品中23种防腐剂
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
化妆品中防腐剂的检测方法(征求意见稿)
2.5
0.00008
0.00025
15
4-羟基苯甲酸苯酯
1
3
0.0001
0.0003
16
4-羟基苯甲酸异丁酯
1
3
0.0001
0.0003
17
4-羟基苯甲酸丁酯
1
3
0.0001
0.0003
18
4-羟基苯甲酸苄酯
1
3
0.0001
0.0003
19
苯甲酸乙酯
2
6
0.0002
0.0006
20
4-羟基苯甲酸戊酯
5
230nm，苯氧乙醇的测定可采用 270nm，脱氢乙酸的测定可采用 310nm。
5.4 测定
在“5.3”色谱条件下，取混合标准系列溶液（5.1）分别进样，进行色谱分析，以标准系
列溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
取“5.2”项下的待测溶液进样，进行色谱分析，根据保留时间和紫外光谱图定性，测得
以甲醇为溶剂提取化妆品中 23 种组分，用高效液相色谱仪分离，二级管阵列检测器检 测，采用保留时间和光谱扫描图定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。
本方法对 23 种组分的检出限、定量限和取样量为 1g 时的最低检出浓度，最低定量浓度
见表 1。
序号 1
表 1 23 种组分的检出限、定量限、检出浓度和最低定量浓度
液定容至刻度）溶解并定容至刻度，摇匀，置于冰箱中冷藏保存。各组分浓度见表 2。
2
表 2 甲基异噻唑啉酮等 23 种组分混合标准储备溶液浓度
序号
组分名称
混合标准储备溶 液浓度（μg/mL）
1
甲基异噻唑啉酮
250
液相色谱法测定化妆品中多种防腐剂
Ｏ 引 言
在化妆 品中使用防腐剂主要作用是防止微生物
在产品中生长 ， 保持护肤品的性质稳定 以及开盖使
用 后不 易变 质 。
３ 标准品（ ） 纯度 ＞ ５ ： ９ ％） 尼泊金 甲酯 、 尼泊金 乙酯 、 尼泊金丙酯、 尼泊金丁酯 ； 甲基异噻唑啉酮和 甲基 氯异 噻唑 啉酮 。 ４ 标准溶液储备 液： ） 准确称取各标准品 （ 精确 至０１ｇ ， ．ｍ ） 以甲醇配制成 １０ ｍ ／ ００ ｇ Ｌ的单个标准储 备液。根据检测需要用 甲醇 配制 １０ ｇＬ的混合 ０ｍ ／
４ 流动相 （ ） 见表 １ 所列 ） 甲醇 ＋ ， ： 水 经过滤脱 气， 梯度洗脱。
表１ 流 动相 的梯 度 洗 脱 程 序
因此 ， 正确使用防腐剂是生产企业应遵循的规 则， 而正确快捷的检验方法是对化妆品安全使用的 有 效监 管 。
时间（ ｉ） ｍｎ
００ ．
２． ５
分别取标准工作液系列 １１ 进行 高效液相色 ０Ｌ ｘ 谱 分析 ， 用峰 面积 与标 准 工 作溶 液 浓 度 作 图获 得 工
作 曲线 。混 合 标 准 溶 液 色 谱 图参 见 图 １ 图 ２ 图 、 。
ｍＶ
泊金甲酯； ④尼泊金乙酯 ； ⑤尼泊金丙酯； 尼泊金 ⑥
丁酯 。
Ｄ ｌ ｔ ｈ ： ４ ｍ ｅｅ ｏ ＡＣ ｌ ５ ｎ ｃｒ ２
５） （） （ ４ ）
＠ ⑨
受
’ 寸
【
，－ ｑ
甘
寸
ｍ Ｎ
Ｎ
譬
＼ 。
３ ） ｆ） ｆ
２０ ｏ ｌ０ ｏ
ｎ
∞
反相高效液相色谱测定化妆品中几种防腐剂
反相高效液相色谱测定化妆品中几种防腐剂摘要：建立了反相高效液相色谱法测定化妆品中四种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的含量，并对相关的实验条件进行了优化：采用乙醇作为提取剂提取化妆品中的对羟基苯甲酸酯类防腐剂，色谱柱为Shimpack VP-ODS C18烷基柱（4.6mm i.d×150mm，5μm）；进样体积为5uL；流动相为乙醇：2%的醋酸水溶液=45：35（v/v）；流速为0.8ml/min；柱温为30℃；紫外检测器，检测波长是254nm。
实验结果表明在25~1000μg/mL浓度范围内各防腐剂的含量与色谱峰面积有良好的线性关系，线性回归方程分别为对羟基苯甲酸甲酯(MP) y=2.556224×10-5 x-4.237644；对羟基苯甲酸乙酯(EP) y=2.62564×10-5 x＋1.636635；对羟基苯甲酸丙脂(PP)y=2.704263×10-5x＋7.964306；对羟基苯甲酸丁酯(BP) y=3.016108×10-5 x＋1.567237。
相关系数分别为R2=0.9997、0.9999、0.9994、0.9999（n=5）。
回收率为88.748%－115.042%，平均回收率为98.448%。
相对标准偏差（n=6）分别为4.56%、0.95%、2.56%、1.04%，而所测各种防腐剂在3倍噪音下的最低检测限分别为：1.35×10-4ug、0.8×10-4ug 、0.77×10-4ug 和5.85×10-4ug。
该实验体现了反相高效液相色谱法简便、快速、稳定，能准确测定化妆品中对羟基苯甲酸酯类防腐剂的含量的优势。
关健词：反相高效液相色谱法；化妆品；防腐剂Determination of preservatives in Cosmetic Products byReversed-Phase High Performance Liquid ChromatographyAbstract：In this paper, RP-HPLC was used to measure the content of preservatives in cosmetics.In RP-HPLC method, on the relevant experimental conditions were optimized, such as :the use of ethyl alcohol as the extraction solvent extraction of cosmetics preservative Parabens; column system was alkyl Shimpack VP-ODS C18 column (4.6mm i.d × 150mm, 5μm); Injection volume was 5ul；Mobile phase of acetonitrile：2% acetic acid aqueous solution = 45：35 (v / v)；The flow rate was 0.8ml/min；The column temperature was 30 ℃；the detector was UV detector and its wavelength was 254nm.The results show that the concentration in the range of 25 ~ 1000μg/mL preservative content of each chromatographic peak area with a good linear correlation and their Linear regression equation were Methylparaben (MP) y=2.556224×10-5 x-4.237644；Ethylparaben(EP) y=2.62564×10-5x＋ 1.636635；Propylparaben(PP) y=2.704263×10-5x＋7.964306；Butylparaben(BP) y=3.016108×10-5x＋1.567237 and their calibration coefficients were about 0.9997、0.9999、0.9994、0.9999（n=5）.Method recoveries were parabens content recovery was 88.748% -115.042% and the average recovery was 98.448%. Experiments show that the relative standard deviation（n=6）were 4.56%、0.95%、2.56%、1.04% .Measured that each antiseptic's limits under 3 time of noises lowest examination were 1.35×10-4ug、0.8×10-4ug 、0.77×10-4ug and 5.85×10-4ug.So the RP-HPLC method is simple, fast, stable and accurate determination of Parabens in cosmetics preservative content advantage.Key words : RP-HPLC；cosmetics；preservative目录摘要： (I)Abstract： (II)1前言 (1)1.1目前化妆品使用的防腐剂 (1)1.2防腐剂的性质 (1)1.3防腐剂的危害 (2)1.4目前防腐剂检测方法及其不足 (2)1.5本文防腐剂检测方法的选择 (3)1.6本研究的目的与意义 (4)2实验部分 (5)2.1实验仪器 (5)2.2 实验试剂 (5)2.3 色谱条件 (6)2.4标准溶液的制备 (6)2.4.1标准储备液的配制 (6)2.4.2标准使用液的配制 (6)2.4.3标准混合使用液的配制 (6)2.5 化妆品样品的选取及处理 (6)2.5.1化妆品的选取 (6)2.5.2化妆品萃取方法的选取 (6)2.5.3化妆品的处理 (6)3结果与讨论 (6)3.1检测波长的选择 (6)3.2固定相的选择 (7)3.3流动相的要求与选择 (8)3.4最佳色谱条件下各标准防腐剂样品的色谱图 (9)3.5对羟基苯甲酸酯类标准曲线的制作及检出限 (10)3.5.1对羟基苯甲酸酯类标准曲线的制作 (10)3.5.2对羟基苯甲酸酯类的检测限 (11)3.6精密度实验 (11)3.7准确度实验 (12)3.8实际化妆品样品的测定 (13)3.9某些化妆品样品的测定色谱图 (13)4 结论 (14)参考文献 (16)致谢 ...................................................... 错误！未定义书签。
化妆品中10种防腐剂的HPLC测试方法
Step3：平衡色谱柱：将流动相（0.05mol/L磷酸二氢 钠/甲醇/乙腈/（50/35/15），添加氯化十六烷三甲胺至最 终浓度为0.002mol/L，并用磷酸调pH至3.5）换入液相系 统，以1mL/min的流速冲洗色谱柱，待色谱图基线平稳 10min以上。
6
2 2、分析操作步骤部分（Step by Step）
◆ 测试原理：
按照《化妆品卫生规范（2007版）》中防腐剂的含量测定方法，称取一定 量均匀的化妆品（以下简称样品），加甲醇，超声处理，将待测样品溶液注入 高效液相色谱仪，采用反相色谱法分离，紫外检测器检测，标准工作曲线法定 量测定样品中防腐剂的含量。
2、分析操作步骤部分（Step by Step） ................................................................................... 6 ◆ 测试原理： 6 ◆ 实验室所需具备的要求: 6 ◆ 2.1 试剂溶剂配置 7 ◆ 2.2 标准工作曲线溶液的配制 7 ◆ 2.3 样品前处理 8 ◆ 2.4 色谱分析 8 ◆ 2.5 数据处理 10
3、分析方法验证部分（Method Validation） ....................................................................... 11 ◆ 3.1 精密度 11 ◆ 3.2 线性 12 ◆ 3.3 加标回收率 17 ◆ 3.4 检测限及定量限 18 ◆ 3.5 系统适用性实验 20
防腐剂检测方法
防腐剂主要分为以下几大类：酸类、酯类、酚类、卤化物类及季胺盐类等。
目前在化妆品中应用最多的防腐剂是毒性低、杀菌效果好的对羟基苯甲酸酯类。
防腐剂的测定方法有吸光光度法、滴定法、气相色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法。
吸光光度法多用于原料分析，例如4-氨基安替比林比色法适用含有羟基化合的定量。
滴定法主要用于季胺盐类防腐剂的定量。
气相色谱法在用于测定含有羟基和羧基等极性物质时，一般需经过甲基硅烷化、衍生化后再用气相色谱定性，定量。
因此，在防腐剂检测中受到一定限制。
薄层色谱法是防腐剂分析中最广泛应用的方法之一。
本法最大特点是能进行多种组分的定性，并且不需要特殊仪器设备，便于推广。
高效液相色谱法是当前使用最广泛的方法。
因为防腐剂大多是大分子有机物，并且有紫外吸收方法:采用HPLC法、FPD-GC法、分光光度法分析分妆品中9种防腐剂.采用ICP-MS 法分析化妆品中的Pb As Cd Hg.结果:化妆品中最常用的防腐剂是对羟基苯甲酸酯类:祛斑类化妆品样品中汞含量严重超标;FPD-GC法测定卡松的检出浓度为0.75μg/g,HPLC法测定卡松的检出浓度为4μg/g;甲醛检出率37%.结论:FPD-GC法测定卡松灵敏度较高.甲醛检出率较高,可能与某些防腐剂释放甲醛有关.特性，最适于用高效液相色谱分析。
该法具有操作简便、灵敏度高等优点。
气相色谱法(Gas ChromatograPhy，GC)是一种以气体为流动相采用冲洗法的柱色谱分离技术。
陈伟光等建立了化妆品中同时测定7种防腐剂的方法。
样品经甲醇溶解、超声提取离心，采用大口径非极性毛细管色谱柱DB一l(15m×0.53mm×0.5um)气相色谱法进行定性和定量分析，并探讨最佳实验条件。
该方法的线性范围为苯甲醇100一500ug·mL-1，，山梨酸200一600ug·mL-1，苯甲酸200一600ug·mL-1，对轻基苯甲酸酷类均为25一500ug·mL-1，其相关系数在0.9983一0.9999之间;方法最低检出限分别为5.5、57.1、29.6、6.2、5.5、6.2、6.2ng·mL-1，;样品加标回收率为91.6%一102.7%，相对标准偏差为2.2%一10.2%(n=3)。
高效液相色谱法测定化妆品中12种防腐剂 上海液相色谱仪检测案例
高效液相色谱法测定化妆品中12种防腐剂一、化妆品中12种防腐剂简介：随着国内外化妆品原料的日新月异，技术的日趋尖端，21世纪美容化妆品行业也发生了空前绝后的发展。
然而，化妆品里含有水分、胶质、脂肪酸、类脂物、蛋白质、激素与维生素等均易引起微生物繁殖变质，为使化妆品质量得到保证必须加入防腐剂。
由于防腐剂种类繁多且具有一定的毒性，因此我国《化妆品卫生规范》视其为限用物质，规定了55种防腐剂的使用限量。
目前防腐剂测定的方法主要有分光光度法、滴定法、气相色谱法、薄层色谱法和高效液相色谱法,但这些方法都有一定的局限性,不能满足现在检测的要求。
为了完善和补充原有的防腐剂测定方法，南京科捷应用研究所采用HPLC法建立了化妆品中多种防腐剂的同时测定方法。
使用本方法检测了洗发精、润肤霜、精华液、发胶、粉底、眼影、整发霜、脱毛膏、洗甲水、芳香油、止汗液露、除臭剂等多种化妆品,获得满意结果。
二、测定化妆品中12种防腐剂LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪配置：LC-10Tvp高压恒流泵：2台SPD-10Tvp紫外检测器：1台SCL-10Tvp 系统控制器：1台7725i手动进样阀：1套色谱工作站：1套（VI2010、N2000、N3000选用）液相色谱柱：1支（C18 4.6*250mn,5um）微量进样器：1支（50ul/100ul）进样支架：1只（进样阀用）三、LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪特点LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪是南京科捷分析仪器有限公司为了快速地满足多样化的客户需求，在原有的STI501液相色谱仪的基础上经过优化，利用美国先进技术开发设计，国内加工生产的的一款新型的液相色谱仪。
LC-10Tvp等度高效液相色谱仪实现了人机对话，可实时对仪器的运行状态进行监控，并可对潜在和已出现的故障做出判断，同时提供在线解决方案。
该仪器也全面实现了远程的准无人操作，大大提高了仪器的使用效率，同时通过高精度的AS1000自动进样系统，实现自动化进样，最大程度抑制了样品的交叉污染，提供样品分析精度。
高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂
高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂曾铭;喻零春;尹君玲;刘伟云【摘要】HPLC was applied to the determination of 7 preservatives, including 6 nipagin esters and benzoic acid, in cosmetics. The sample was ultrasonically extracted with methanol and separated with a mixture of acetonitrile-methanol-NaH2PO4 (15+35+50) as mobile phase on ZORBAX Extend XDB-C18 column (250 mm × 4.6 mm, 10 μm). The contents of 7 preservatives were determined at the wavelength 254 nm with DAD. Linear relationships between values of peak area and mass concentration of 7 preservatives were kept in the definite ranges, with their detection limits (3S/N) in the range of 0. 4-2. 5 mg·L^-1. Recovery and precision were tested by adding 7 preservatives standard solution to cosmetic samples of known preservative concentrations at 3 concentration levels, values of recovery found were in the range of 87.5%-98. 5%, and values of RSD's (n=6) found were in the range of 0. 41%-2.6%.%提出了高效液相色谱法同时测定化妆品中7种防腐剂（6种尼泊金酯和苯甲酸）含量的方法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
反相高效液相色谱法测定化妆品中的24种防腐剂
建立了同时检测化妆品中24种防腐剂含量的反相高效液相色谱法（RP2HPLC）。
采用KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，以磷酸盐缓冲溶液（pH=4.26）为流动相，梯度洗脱。
样品经甲醇超声提取，然后采用RP2HPLC2二极管阵列检测法测定，对样品前处理和色谱条件进行研究和优化。
1引言化妆品中的防腐剂是为了使化妆品在生产、使用和保存过程中免受微生物污染的一类化妆品添加剂。
但大多数防腐剂对人的皮肤会产生不同程度的刺激。
因此，化妆品中防腐剂的用量必须以安全性作为前提。
我国《化妆品卫生规范》对化妆品中防腐剂的使用浓度和范围做了相关的规定。
目前，国内外对化妆品中防腐剂的测定一般多采用高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱质谱法、胶束电动色谱法、毛细管电泳法和伏安法等，而同时测定的防腐剂一般仅为4～8种，最多可同时测定18种，采用的方法均为气相色谱-质谱法。
本实验研究了化妆品中的24种常用防腐剂的样品前处理方法和HPLC分离条件，建立了化妆品中24种常用防腐剂同时检测的HPLC法。
结果表明，本方法简便、快速、准确，应用于实际化妆品中防腐剂的测定，结果满意。
2实验部分2.1仪器与试剂高效液相色谱仪（美国Agilent1100系列），由四元低压泵、柱温箱、二极管阵列检测器及自动进样器组成；KQ-600型超声波清洗仪器（昆山市超声仪器有限公司）。
对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、水杨酸、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、苯甲醇、苯氧基乙醇、4-氯-3-甲苯酚、三氯生及三氯卡班（Sigma公司）；苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、苯甲酸苯酯及溴硝丙醇（AcrosOrgnics公司）；2，4-二氯-3，5-二甲酚、对羟基苯甲酸异丙酯、2-苯酚、4-氯-3，5-二甲酚、对羟基苯甲酸异丁酯及2-苄基-4-氯酚（东京化成工业株式会社）；苯甲酸、山梨酸（国家标准物质中心）。
乙腈为色谱纯，甲醇为优级纯；无水乙醇、四氢呋喃等试剂均为国产分析纯；Millipore超纯水。
2.2标准品混合溶液和供试品溶液的制备分别准确称取一定量的24种防腐剂标准品，用甲醇溶液定容，配制成2g/L的标准储备液。
分别移取一定体积的上述标准储备液至100mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配成混合标准储备液。
准确称取化妆品0.2g（精确到0.001g）于50mL锥形瓶中，加入10mL甲醇，超声提取30min，取部分溶液放入离心管中，在离心机上以5000r/min高速离心10min后，取上清液经0.22μm滤膜过滤，滤液供RP-HPLC检测。
2.3色谱条件色谱柱：伊利特KromasilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：A.甲醇，B.0.025mol/LNaH2PO4溶液，pH4.26。
线性梯度洗脱条件见表1。
流速：1.0mL/min；柱温：25℃；检测波长：程序可变波长扫描；进样量：10μL。
3结果与讨论3.1流动相的选择3.1.1缓冲溶液pH的选择在24种防腐剂中，受pH影响的只有苯甲酸、山梨酸和水杨酸。
因此，着重考察了不同pH值（2.5～5.5）对以上3种酸分离情况的影响。
发现在pH4.26时，苯甲酸、山梨酸和水杨酸能与溴硝丙醇、苯甲醇、苯氧基乙醇和对羟基苯甲酸甲酯达到很好的分离，峰形良好。
3.1.2NaH2PO4浓度的选择在考察了0.01、0.025和0.05mol/LNaH2PO4溶液对分离的影响后，发现0.025mol/LNaH2PO4可达到较好的分离，且峰形良好。
3.2检测波长的选择通过全波长扫描可得到24种物质各自的吸收图谱。
综合各物质在不同波长下的响应值和不同波长对基线的影响，最终确定采用程序可变波长进行扫描，即根据不同组分的出峰顺序，在不同时间段，分别用各组分的最佳吸收波长进行检测，从而提高检测的灵敏度，达到最佳的扫描效果。
3.3样品提取方法的选择3.3.1样品提取溶剂的选择在相同的色谱条件下，比较了甲醇、乙醇、四氢呋喃和流动相等4种溶剂对不同种类化妆品（膏霜类、水类、固体类）的提取效果。
结果表明，乙醇和四氢呋喃提取后的色谱图在2.0～
4.5min的色谱峰的峰形欠佳，无法准确计算溴硝丙醇和水杨酸的含量，而流动相提取口红时，不能将口红完全溶解，且在28.26min时基线干扰较大，影响被测物质含量的测定。
从提取结果可看出，乙醇、四氢呋喃和流动相对某些物质的提取率偏低，而甲醇对各物质的提取率都较高，提取效果最佳，因此选择甲醇作为样品超声提取的溶剂。
3.3.2超声波提取时间的选择研究了10～60min不同时间段内，超声波的提取率。
发现30min以上对提取率没有明显增大，且随着超声时间的延长，会使超声波仪器内的水温上升，导致某些易挥发的成分挥发，反而降低了提取率。
所以，综合考虑，选择30min为超声提取时间。
图1是24种防腐剂在确定的色谱条件下的液相色谱图。
3.4线性关系、检出限、回收率和精密度在确定的最佳分离色谱条件下，配制一系列不同浓度的混合标准溶液进行色谱测定，以各组分的峰面积（Y）对浓度X（mg/L）绘制标准曲线。
当信噪比（S/N）为3时，测得各防腐剂组分的检出限。
各组分的线性方程、相关系数和检出限。
称取3种经测定含防腐剂较少，且基线干扰较小的化妆品0.2g（精确到0.001g），分别添加高、中、低3个浓度水平的混合标准溶液，每种样品重复6次，按上述实验条件进行样品处理和测定，计算回收率和精密度。
3.5实际样品分析用所建立的检测方法，对膏霜类、水类和固体类等9个实际化妆品样品进行测定，以标准样品色谱图中各防腐剂的保留时间对化妆品中的防腐剂进行定性，以样品中各防腐剂色谱峰的峰面积与标准曲线相对应进行定量分析。
表4仅列出了9个化妆品中检测出的9种防腐剂的结果（其余15种防腐剂均未检出）。
从结果可以发现，大多数化妆品中都含有对羟基苯甲酸酯类和苯氧基乙醇，其它种类的防腐剂较少。
其中以对羟基苯甲酸甲酯最常见，含量也较高。
综上所述，采用超声波提取，高效液相色谱分析，程序可变波长检测，同时测定化妆品中24种常用防腐剂含量的方法，操作简便，结果可靠。
用于化妆品质量控制，及进出口化妆品检验具有重要意义。