免疫学及免疫学检验标记技术
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测机体免疫系统产生的抗体或抗原来诊断疾病的方法。
它基于免疫反应的原理，利用特定的抗体和抗原之间的相互作用来检测人体内的免疫反应物质。
目前，免疫学检验已经成为临床诊断和科研领域中不可或缺的重要手段之一1.免疫层析：免疫层析是一种将待检测物质（抗体或抗原）移动到特定层析纸或凝胶柱上，通过与特异抗体或抗原的结合来检测它们的方法。
这种方法操作简单，成本较低，适用于检测体液中的抗体或抗原。
2.酶联免疫吸附实验（ELISA）：ELISA是一种利用酶的催化作用检测抗体或抗原的方法。
它包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种形式。
ELISA具有高灵敏度、高特异性、操作简便和成本低廉等优点，广泛应用于临床诊断和科研领域。
3.放射免疫分析（RIA）：RIA是一种利用放射性标记物来检测抗体或抗原的方法。
它的原理是将放射性同位素标记在待测抗体或抗原上，通过测量标记物的放射活性来确定待测物质的含量。
RIA具有高灵敏度和高特异性的优势，但由于放射性标记物的使用，操作相对复杂且安全性要求较高。
4.免疫荧光：免疫荧光是一种利用荧光标记的抗体或抗原来检测待检测物质的方法。
它通过检测标记物的荧光强度或光谱来确定待测物质的存在。
免疫荧光具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优势，广泛应用于病原微生物、肿瘤标志物等的检测。
5.流式细胞术：流式细胞术是一种通过流式细胞仪检测细胞表面或细胞内的免疫分子的方法。
它通过将目标细胞与标记有特定抗体的荧光染料反应，再用流式细胞仪对标记的细胞进行激光照射并收集荧光信号来测定免疫分子的表达水平。
流式细胞术具有高灵敏度、多参数分析等优势，广泛应用于细胞免疫学研究和临床诊断。
6.免疫组化：免疫组化是一种利用特异抗体与待检测抗原结合，再通过染色等方法来检测组织或细胞中特定抗原的方法。
免疫组化具有高特异性、高灵敏度、可定量等优势，广泛应用于病理学研究和临床诊断。
免疫学诊断及检测技术
现已明确支气管哮喘是以气道炎症细胞（包括嗜酸性粒细胞、肥大细胞等）浸润为主要病理特征的免疫性疾病。
在其发病过程中，免疫系统的多种成分如T细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、免疫球蛋白、细胞因子和粘附因子等起着关键的作用。
对这些成分的免疫学监测有助于阐明支气管哮喘的病因、发病过程以及对疾病严重程度的r解，并可指导支气管哮喘的治疗。
这些检测大致可分为特异性的免疫学检测和非特异性的免疫学检测两大类。
第一节特异性免疫学检测试验特异性免疫试验主要包括体内过敏试验、体外特异性IgE抗体的检测、嗜碱性粒细胞释放能力的检测等，这些试验可以直接或间接反映引起支气管哮喘发作的过敏原、体内特异性IgE的水平。
一、体内过敏试验主要有过敏原皮试和激发试验两种。
（一）过敏原皮试过敏性哮喘患者产生的针对某一种或多种过敏原的IgE或IgG4与皮肤粘膜下层的肥大细胞、嗜碱性粒细胞Fe受体结合。
局部接触过敏原后，引起I型变态反应，从而使局部充血，水肿，形成风团和红晕等临床表现，故我们通过皮试来了解过敏性哮喘患者的过敏原以及机体的敏感状态和脱敏的疗效。
常用的过敏原皮试法有皮内试验、点刺法、抓痕法、斑贴法、被动皮肤转移试验法等五种，其中前两种的应用较为广泛。
皮试的部位一般采用上臂的伸侧，也可在大腿或背部。
1．皮内试验(intradermal test) 常用过敏原皮试液的浓度为1：100，对于花粉浸液则可用l1000或1:10000。
方法及步骤：酒精消毒局部皮肤后，用1ml注射器分别吸入不同过敏原的皮试液，在受试部位依次注入皮内0.02ml，使之形成一3-4mm直径的皮丘。
为避免结果互相影响，相邻皮丘间距为3cm左右。
15分钟后观察结果。
有些患者反应较迟，可在皮试后30分钟时再观察一次。
皮内试验的结果主要表现为风团和红晕，其分级判断标准参见表14-1。
皮内法结果敏感、准确、重复性较好，但由于其注入的过敏原量较多，有可能使高度敏感的病人产生过敏性哮喘或过敏性休克等全身反应，因此有一定的危险性。
免疫学研究相关技术
免疫学研究相关技术免疫学是研究机体对抗外界微生物、肿瘤以及其他异常物质的一门学科。
在免疫学研究中，涉及到的技术非常丰富多样，包括细胞培养、免疫标记、免疫沉淀、免疫印迹等等。
下面将详细介绍一些免疫学研究中常用的技术。
1.细胞培养技术：细胞培养技术是实验室进行细胞免疫学研究的基础。
通过细胞培养技术可以获得大量的细胞，方便进行后续的实验操作。
细胞培养技术主要包括培养基的配制、细胞的传代、细胞的分离和培养条件的控制等。
2.免疫标记技术：免疫标记技术是免疫学研究中常用的分析技术，通过标记抗原或抗体的分子探针可以定位细胞内外的抗原或抗体。
常用的免疫标记技术包括免疫荧光染色、酶免疫组化、放射免疫分析等。
特别值得一提的是流式细胞术，它是一种利用免疫标记技术结合流式细胞仪进行单个细胞分析的方法，可以快速准确地分析细胞表面和胞内分子的表达。
3. 免疫沉淀技术：免疫沉淀技术主要用于分离和富集抗原-抗体复合物。
常用的免疫沉淀技术有牛血清白蛋白（BSA）免疫沉淀法、ProteinA/G免疫沉淀法等。
免疫沉淀技术可用来鉴定蛋白质相互作用、研究蛋白质的修饰以及检测抗原-抗体的结合等。
4. 免疫印迹技术：免疫印迹技术（Western blotting）是一种通过探针抗体检测特定蛋白质的方法。
它首先通过SDS-将样品中的蛋白质进行分离，然后将蛋白质迁移到膜上，接着进行对抗原和抗体的结合，最后通过显色或荧光等方式进行检测。
免疫印迹技术广泛应用于蛋白质表达和鉴定、蛋白质定量、蛋白质修饰及磷酸化等方面的研究。
5. 免疫组化技术：免疫组化技术（Immunohistochemistry）是一种将免疫标记技术应用于组织切片的方法。
通过将切片中的抗原与标记抗体结合，可以准确地定位抗原在组织中的位置。
免疫组化技术可用于研究组织中特定蛋白质的表达和定位，从而对疾病的发生机制和治疗方法进行探索。
除了以上提到的技术，免疫学研究还应用了许多其他的技术，如ELISA（酶联免疫吸附试验）、免疫荧光共聚焦显微镜、流式细胞术等。
常用免疫学检验检测技术
要点一
总结词
要点二
详细描述
蛋白质分析的常用技术
免疫印迹技术是一种用于分离、检测和识别蛋白质的常用 技术。该技术通过将蛋白质混合物在凝胶上进行电泳分离 ，然后将其转移到膜上，再与特异性抗体结合，最后通过 显色反应检测目标蛋白质。免疫印迹技术具有高灵敏度、 高特异性和可同时检测多个蛋白质的特点，广泛应用于生 物学、医学和生物工程领域。
注意事项
由于放射性同位素具有放射性，操作过程中需要注意安全防护，避免对操作人员和环境造成污染。同 时，由于放射免疫分析需要使用放射性同位素标记的抗原，因此成本较高。
优缺点分析
优点
放射免疫分析具有较高的灵敏度和特异性， 可以用于痕量物质的定量检测；操作简便， 易于自动化；测量结果准确可靠。
缺点
由于使用放射性同位素，操作过程中存在安 全风险；成本较高，需要特殊仪器和实验室 条件；对于某些样品，可能存在交叉反应或 非特异性干扰。
化学发光免疫分析（CLIA）
总结词
快速、高灵敏度的定量检测技术
详细描述
化学发光免疫分析是一种基于化学发光反应 的免疫分析技术，通过测量化学发光反应过 程中释放的光子数量来检测抗原或抗体的浓 度。该技术具有快速、高灵敏度和低背景干 扰的优点，广泛应用于传染病、肿瘤标志物
和激素等生物分子检测领域。
免疫印迹技术（Western Blot）
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其他常用免疫学检验检测技术
时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）
总结词
高灵敏度、高特异性的定量检测技术
详细描述
时间分辨荧光免疫分析是一种基于荧光能量共振转移的免疫分析技术，通过测量荧光标 记物的发射光谱来检测抗原或抗体的浓度。该技术具有高灵敏度、高特异性和低背景干
临床免疫学检验方法与应用
临床免疫学检验方法与应用免疫学是一门研究机体对抗病原体、维持免疫平衡的科学，其在临床诊断中起着举足轻重的作用。
免疫学检验方法多种多样，能够准确地检测机体的免疫状态，有助于诊断和治疗各种疾病。
本文将介绍几种常见的临床免疫学检验方法及其应用。
1. ELISA法ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种常用的免疫学检验方法，通过酶标法测定抗体或抗原的存在量。
ELISA法可用于检测HIV、乙肝、梅毒等疾病的抗体水平，也可用于测定药物浓度或病毒载量。
由于ELISA法操作简便、灵敏度高，因此在临床诊断中得到广泛应用。
2. 免疫荧光法免疫荧光法是一种通过检测抗体或抗原在细胞或组织中的荧光信号来进行免疫检测的方法。
免疫荧光法被广泛用于自身免疫性疾病的诊断，如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
通过观察免疫荧光信号的强度和分布，可以判断患者的免疫状态和疾病程度。
3. 免疫印迹法免疫印迹法（Western Blot）是一种通过检测抗体与特定抗原结合而形成的免疫复合物来进行检测的方法。
免疫印迹法主要用于检测蛋白质的表达水平和鉴别不同蛋白质。
在临床上，免疫印迹法常用于肿瘤标记物的检测和分析，有助于早期发现恶性肿瘤。
4. 细胞免疫学方法细胞免疫学是研究机体免疫细胞及其功能的学科，其方法主要包括细胞毒活性测定、淋巴细胞亚群分析、细胞因子测定等。
这些方法在免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应的诊断和治疗中起着关键作用。
5. 其他免疫学检验方法除了上述几种常见的免疫学检验方法外，还有许多其他方法，如流式细胞仪、PCR法、化学发光法等。
这些方法在特定疾病的诊断和治疗中有其独特的应用价值，为临床医生提供了更多的诊断手段和治疗选择。
总结免疫学检验方法在临床诊断中发挥着不可替代的作用，能够帮助医生准确判断患者的免疫状态和疾病情况，指导治疗方案的制定和调整。
不断发展的免疫学技术为医学进步提供了强大的支持，相信随着科学技术的不断创新和进步，免疫学检验方法将在临床应用中发挥越来越重要的作用。
免疫学检验方法有哪些 (3)
免疫学检验方法有哪些
免疫学检验方法主要包括以下几种：
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：通过将待检样品加入特异性抗体或抗原包被的微孔板中，利用酶标记技术和底物发色反应来检测目标物的浓度或活性。
2. 免疫印迹（Western blot）：将蛋白质样品分离并转移到膜上，然后用特定抗体标记的酶或荧光染料检测目标蛋白质的存在。
通常用于检测抗体的特异性和蛋白质的表达量。
3. 免疫荧光染色（Immunofluorescence stning）：通过将待检样品与特定抗体结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测目标物的存在。
4. 免疫组织化学（Immunohistochemistry）：将组织切片或细胞片贴培养后，使用特异性抗体和酶、荧光染料或金粒等标记物来检测目标蛋白质在组织或细胞中的表达。
5. 流式细胞术（Flow cytometry）：将待检样品中的细胞与特异性抗体结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测目标细胞的存在和数量。
6. 中和试验（Neutralization assay）：通过将待检抗体与病毒或细菌感染的细胞或动物结合，观察抗体是否能够中和病毒或细菌的活性。
7. 结合力测定试验（Binding assay）：通过将待检抗体与其靶标物结合，并用荧光标记的二抗或直接标记的抗体检测结合的情况。
以上仅为免疫学检验方法的一部分，根据具体实验目的和样品特点，还可以使用其他更特殊的技术，如免疫电镜
（Immunoelectron microscopy）、免疫贴片（Immunospot assay）等。
免疫学检验的基本原理与方法
免疫学检验的基本原理与方法免疫学检验是一种常见的实验室技术，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
本文将介绍免疫学检验的基本原理和常用的方法，并探讨其在疾病诊断、病毒检测和药物研发中的应用。
一、免疫学检验的基本原理免疫学检验基于机体免疫系统的特性，利用抗原与抗体之间的特异性结合反应来检测和定量分析抗原或抗体的存在。
其基本原理如下：1. 特异性识别：抗体可以识别并结合与之对应的抗原，形成特异性的抗原-抗体复合物。
2. 高度敏感性：免疫学检验可以检测极低浓度的抗原或抗体，提供高度敏感的结果。
3. 双重验证：通过采用一对互补的抗原和抗体，可以用于验证检测结果的准确性。
二、常见的免疫学检验方法在免疫学检验中，常用的方法包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫印迹（Western Blotting）、免疫荧光等。
下面将对这些方法进行具体介绍：1. 酶联免疫吸附实验（ELISA）ELISA是一种常见且广泛应用的免疫学检验技术。
它利用酶标记的抗体与待检测样品中的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标记物复合物。
通过添加底物，酶标记物能够催化底物的反应，产生可测量的信号。
ELISA可用于定量或半定量测定目标物的浓度，并可应用于多种领域，如感染性疾病的诊断、蛋白质的定量等。
2. 免疫印迹（Western Blotting）免疫印迹是一种常用于检测特定蛋白质的免疫学技术。
该方法通过将复杂的蛋白质混合物经SDS-PAGE电泳分离后，将之转移到固体载体上。
然后，用特异性抗体与目标蛋白质结合，并通过酶标记的二抗与一抗结合，产生可见的信号。
免疫印迹可用于诊断疾病、检测蛋白质相对分子质量和检测表达水平等。
3. 免疫荧光免疫荧光是一种利用抗体对荧光染料标记的抗原进行特异性识别的免疫学技术。
该技术通过与荧光探针结合并激发荧光信号，来检测细胞或组织中特定抗原的定位和表达。
免疫荧光广泛应用于免疫组织化学、细胞信号转导、病毒感染等领域，可用于研究细胞和组织的结构、功能以及疾病的发生机制。
免疫学检验技术的研究与应用
免疫学检验技术的研究与应用免疫学检验技术是一种用于识别和量化人体内某些物质的分析方法。
这些物质可能是病原体、细胞表面标志物、蛋白质、激素等。
免疫学检验技术广泛应用于临床诊断、药物开发、基础研究等领域。
本文将介绍免疫学检验技术的基本原理、分类、优势以及未来研究方向和应用前景。
一、免疫学检验技术的基本原理免疫学检验技术的基本原理是利用免疫反应中特异性结合的原理，即抗原和抗体之间的结合。
免疫学检验技术主要分为两种类型：直接免疫法和间接免疫法。
直接免疫法是直接检测抗原，利用标记的抗体来检测待测物。
间接免疫法利用待测物作为抗原，检测与待测物特异性相对应的抗体。
常用的标记技术包括放射性同位素标记、酶标记、荧光标记等。
二、免疫学检验技术的分类免疫学检验技术主要可以分为下面几种类型：1. 免疫荧光技术免疫荧光技术是一种基于黏附于细胞表面的抗原和配对的荧光色素标记抗体之间的相互作用而建立的免疫试验法。
它可用于人类血液和组织的分子诊断，例如流感病毒、人类免疫缺陷病毒等。
2. 酶联免疫吸附测定法 (ELISA)ELISA是一种广泛应用的酶标记技术，其原理是将已知抗原或抗体附加在一种固体的基质上，使之便于识别。
它不仅能鉴定多种抗原和抗体，还可测定某些化学物质如激素、酶、细胞因子等，是目前临床和科研领域最常用的免疫学检验技术之一。
3. 免疫电泳技术免疫电泳技术是指先将蛋白质电泳分离，然后用识别特定蛋白质的抗体进行检测的方法。
它可用于检测肝病、血液疾病等多种疾病。
达成良好的信号和灵敏度的结果的基础在于平衡电场、硅胶不对称性、像淬火等过程的优化。
三、免疫学检验技术的优势1、高度特异性：免疫学检验技术基于抗原和抗体的特异性结合，能够高度准确地检测某种分子。
与其他检测技术相比如酶促荧光测定，免疫学检验技术具有更高的特异性。
2、高度灵敏性：免疫学检验技术可用于检查非常少量的生物分子。
例如，在HIV感染者的血液中检测HIV抗体，其灵敏度可达到非常关键的20 cd4 / mm3或更少。
免疫学及免疫学检验学题库答案
一、名词解释第1章概论1.免疫学：2.免疫分子：3.补体：4.临床免疫学：第2章抗原抗体反应5.抗原抗体反应：6.抗原抗体反应特异性7.可逆性8.比例性9.抗原抗体反应的等价带zoneofequivalence10.最适比optimalratio11.带现象zonephenomenon第3章免疫原和抗血清的制备12.免疫原immunogen13.半抗原14.免疫佐剂15.多克隆抗体polyclonal antibody, pcAb第5章凝集反应16.凝集反应17.直接凝集反应18.间接凝集反应19.明胶凝集试验第6章沉淀反应20.沉淀反应21.絮状沉淀试验22.免疫浊度测定23.凝胶内沉淀试验24.单项扩散试验25.双向扩散试验26.免疫电泳技术27.对流免疫电泳28.火箭免疫电泳29.免疫电泳30.免疫固定电泳第19章补体检测及应用31.补体32.免疫溶血法33.补体结合试验第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应36.Ⅰ型超敏反应37.Ⅱ型超敏反应38.Ⅲ型超敏反应39.Ⅳ型超敏反应第24章自身免疫性疾病及其免疫检测40.自身耐受41.自身免疫42.自身免疫病43.自身抗体44.抗核抗体第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测45.免疫增殖性疾病46.免疫球蛋白增殖病47.本周蛋白48.血清区带电泳49.免疫电泳50.免疫固定电泳第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验51.免疫缺陷病52.获得性免疫缺陷综合征第27章肿瘤免疫与免疫学检验53.肿瘤免疫学54.肿瘤抗原55.肿瘤标志物第28章移植免疫及其免疫检测56.移植57.主要组织相容性复合体58.移植排斥反应59.移植物抗宿主反应GVHR60.血清学分型法二、填空题;第1章概论1.推动现代生命科学前进的三架战车：分子生物学、免疫学、细胞生物学;2.免疫学的发展历史可分为三个时期：经验时期、免疫学科形成时期、现代免疫学时期;3.为保持机体内环境稳定,免疫系统的三大生理功能分别是：免疫防御、免疫自稳、免疫监视;4.免疫应答的过程主要分为：识别阶段、活化阶段、效应阶段5.免疫系统的组成包括三部分,分别是：免疫器官、免疫细胞、免疫分子;6.补体的三条激活途径分别是：经典途径、甘露糖结合凝集素途径、旁路途径;第2章抗原抗体反应7.在抗原抗体反应中,主要的结合力有：静电引力、范德华力、氢键、疏水作用力;8.在抗原抗体反应中,主要的特点有：特异性、可逆性、比例性、阶段性;第3章免疫原和抗血清的制备9.组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备过程中,常用的方法有：反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法任写出二种均可得分;10.在免疫原和抗血清的制备过程中,可溶性抗原的纯化方法：超速离心法、选择性沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等任写出二种均可得分;11.在免疫原和抗血清的制备过程中,纯化抗原的鉴定的内容主要有：蛋白含量测定、分子量测定、纯度鉴定、免疫活性鉴定;12.在免疫原和抗血清的制备过程中,抗血清的鉴定内容有：抗体特异性的鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲合力的鉴定;第5章凝集反应13.在凝集反应中,间接凝集反应的类型主要有：正向间接凝集反应、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应、协同凝集反应;14.抗球蛋白试验,又称Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法;第6章沉淀反应15.免疫电泳技术类型主要包括：对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、免疫固定电泳;第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.在外周血单个核细胞分离实验中,对分离介质的基本要求有：对细胞无毒、基本等渗、不溶于血浆或分离物质、有一定密度;17.在淋巴细胞分离过程中,其中的单核细胞去除方法有：贴壁黏附法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分层液法; 第15章免疫细胞功能检测技术18.在免疫细胞功能检测技术方面,针对T细胞功能检测方法有：T细胞增殖试验、 T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验、体内试验;第19章补体检测及应用第22章感染性疾病与感染免疫检测19.目前公认的肝炎病毒至少有5种：甲型肝炎病毒HAV、乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV、丁型肝炎病毒HDV、戊型肝炎病毒HEV;20.在乙肝病毒检测的过程中,主要检测的五项指标有：HBsAg、抗HBs、抗HBc、HBeAg、抗HBe;21.在先天性感染中,临床上将以上4种病原菌称为“TORCH”,为产前检查的重点项目,分别是：弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒;第23章超敏反应性疾病及其免疫检测22.根据免疫反应的速度和组织损伤的机制不同,将超敏反应分为四种类型,分别是：第 I 型速发型超敏反应、第II 型细胞毒或溶细胞型超敏反应、第III型免疫复合物型超敏反应、第IV 型延缓型或迟发型超敏反应;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测23.在抗核抗体ANA检测方法中,常见的ANA荧光图形有：周边型核膜性、均质性、斑点性、核仁型、着丝点型;第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测24.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有：多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病、轻链病、良性单克隆免疫球蛋白病;25.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有：血清区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白定量、本周蛋白的检测;第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验26.在免疫缺陷性疾病中,常见的免疫缺陷病一般特征包括：反复感染、恶性肿瘤、伴发自身免疫病、遗传倾向、多系统病变;27.在免疫缺陷性疾病中,原发性免疫缺陷性疾病主要有：原发性B细胞缺陷病、原发性T细胞缺陷病、原发性联合免疫缺陷病、原发性吞噬细胞缺陷病、原发性补体系统缺陷病;28.在免疫缺陷性疾病中,继发性免疫缺陷性疾病主要有：继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷、继发性补体缺陷;第27章肿瘤免疫与免疫学检验29.在常见肿瘤标志物中,胚胎抗原类肿瘤标志物主要有：甲胎蛋白、癌胚抗原;30.在常见肿瘤标志物中,酶类肿瘤标志物主要有：前列腺特异性抗原PSA 、神经元特异性烯醇化酶NSE、α-L-岩藻糖苷酶测定AFU;31.在常见肿瘤标志物中,激素类肿瘤标志物主要有：人绒毛膜促性腺激素 hCG、降钙素calcitonin, CT;32.在常见肿瘤标志物中,蛋白质类肿瘤标志物主要有：β2-微球蛋白β2M 、铁蛋白;第28章移植免疫及其免疫检测33.在移植免疫实验中,排斥反应类型主要包括四种,分别是：超急性排斥反应、急性排斥反应、慢性排斥反应、移植物抗宿主反应GVHR;34.常见的组织或器官移植有：肾脏移植、肝脏移植、心脏移植与心肺联合移植、骨髓与其他来源的干细胞移植;三、单项选择题1.免疫应答是一个复杂的连续过程,依次分为哪几个阶段AA. 识别阶段、活化阶段、效应阶段B. 效应阶段、识别阶段、活化阶段C. 活化阶段、效应阶段、识别阶段D. 活化阶段、识别阶段、效应阶段2.抗原抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为CA. 抗体略多于抗原B. 抗原略多于抗体C. 抗原抗体比例合适D. 抗体显着多于抗原3.用已知抗原或抗体检测相应的抗体或抗原,是根据抗原抗体反应的AA. 特异性B. 比例性C. 可逆性D. 阶段性4.弗氏不完全佐剂的组成包括 BA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗5.沉淀反应中的钩状效应是因为BA. 抗体过量B. 抗原过量C. pH浓度过高D. pH浓度过低6.细胞活力测定常用的简便方法是BA. 伊红染色B. 台盼蓝染色C. HE染色D. 美蓝染色7.正常人外周血T淋巴细胞转化率为CA. <40%B. 40%～50%C. 60%～80%D. 80%8.在CH50试验中,溶血程度和补体含量之间的关系为 BA. 直线B. S形曲线C. 抛物线D. 正态分布曲线9.正常血清中,补体含量最高的是CA. C1B. C2C. C3D. C410.发生III型超敏反应性疾病的始动环节是 BA. 大分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜B. 中等大小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜C. 小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜D. 补体激活11.用免疫荧光法检测ANA有多种核型,不正确的是DA. 周边型B. 均质型C. 斑点型或颗粒型D. 原生质型12.血清中检测到M蛋白不提示下列疾病DA. 多发性骨髓瘤B. 巨球蛋白血症C. 重链病或轻链病D. 肾病13.本-周蛋白的本质是BA. 尿中微球蛋白B. 尿中游离的免疫球蛋白轻链C. 尿中游离的白蛋白D. 尿中游离的管型物14.多发性骨髓瘤属于哪种细胞异常CA. T细胞B. B细胞C. 浆细胞D. 单核细胞15.血清中免疫球蛋白含量缺乏,一般应考虑何种病 CA. 轻链病B. 重链病C. 免疫缺陷病D. 免疫增殖病16.切除胸腺的新生动物的淋巴结中缺乏何种细胞 BA. B淋巴细胞B. T淋巴细胞C. 粒细胞D. 巨噬细胞17.沉淀反应中抗体过量的现象称为AA. 前带B. 后带C. 等价带D. 带现象18.弗氏完全佐剂的组成包括AA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗19.直接Coombs试验检测的抗体是AA. 结合在红细胞表面的IgGB. 游离的IgGC. 结合在红细胞表面的IgMD. 游离的IgM20.单项扩散试验出现双环的沉淀线是因为DA. 两种抗原B. 两种抗体C. 抗体为多克隆抗体D. 抗原为性质相同的两个组分扩散率不同21.Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为CA. 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B. 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C. 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞22.淋巴细胞转化为淋巴母细胞后,其形态学特征为BA. 细胞大小由大变小B. 出现核仁1～4个C. 胞浆内空泡逐渐消失D. 细胞伪足消失23.溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能BA. T细胞B. B细胞C. NK细胞D. 吞噬细胞24.Boyden小室常用于测定 BA. 白细胞吞噬功能B. 中性粒细胞趋化功能C. 白细胞杀伤功能D. 淋巴细胞抑制功能25.在溶血反应中检测试剂中,加入少量钙、镁离子的目的是CA. 使反应液保持等渗B. 抑制补体的活性C. 有助于补体激活D. 维持反应液的pH值26.乙型肝炎感染后最早出现的病毒标志物是AA. HBsAgB. HBeAgC. HBcAgD. 抗-HBs27.新生儿溶血症发生的条件是CA. 母亲Rh+、胎儿Rh+B. 母亲Rh+、胎儿Rh-C. 母亲Rh-、胎儿Rh+D. 母亲Rh-、胎儿Rh-28.造成系统性红斑狼疮病人免疫损伤的主要机制是 CA. I超敏反应B. II超敏反应C. III超敏反应D. IV超敏反应29.人类MHC位于第几对染色体上 CA. 第12对染色体短臂B. 第12对染色体长臂C. 第6对染色体短臂D. 第6对染色体长臂30.HLA交叉配型的目的是 BA. 检测供者血清有无抗受者HLA抗体B. 检测受者血清有无抗供者HLA抗体C. 检测供者淋巴细胞表面的HLA抗原D. 检测受者淋巴细胞表面的HLA抗原四、简答题第1章概论1.T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞的主要功能分别是什么2.在临床免疫学与免疫检验中,现代免疫学检验技术包括哪些方法第2章抗原抗体反应3.抗原抗体反应有哪些影响因素4.什么是标记免疫技术标记免疫技术按检测现象可分为哪些类型第3章免疫原和抗血清的制备5.常用的细胞破碎方法有哪些6.连接半抗原的载体有哪些制备半抗原性免疫原的方法有哪些7.免疫佐剂有哪些种类其作用机制是什么8.动物采血有哪些方法9.抗血清的鉴定包括哪些内容第5章凝集反应10.什么叫直接凝集反应什么叫间接凝集反应它们之间有何不同11.叙述抗球蛋白试验的类型、特点以及临床应用第6章沉淀反应12.单向扩散试验的概念和应用13.平板法双向免疫扩散试验的概念和应用14.免疫固定电泳的概念及临床应用15.抗原性质分析出现哪三种结果现象结果解释第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.外周血单个核细胞分离,其分离介质的基本要求是什么17.外周血单个核细胞悬液富含淋巴细胞,但又混杂有单核细胞、红细胞和血小板,请问去除单核细胞的方法有哪些第15章免疫细胞功能检测技术18.T细胞功能检测内容有哪些19.B细胞功能检测内容有哪些20.NK细胞活性测定方法有哪些21.在检测T细胞的功能时,可选择T细胞增殖试验,请回答其基本原理第19章补体检测及应用22.在补体总活性测定中,一般采用CH50测定法,请说明其基本原理;23.在单个补体成分的测定中,一般采用免疫溶血法,请简述其概念及原理;24.请简述补体结合试验的概念、实验原理及结果解释第22章感染性疾病与感染免疫检测25.请列出目前公认的肝炎病毒种类26.乙型肝炎的诊断标志物主要检测指标有哪些27.在临床中,乙肝病毒检测常见的指标俗称：两对半有哪些28.什么叫先天性感染常见的病原菌“TORCH”只要只的是哪些病毒第23章超敏反应性疾病及其免疫检测29.试比较Ⅰ～Ⅳ型超敏反应特点30.使用青霉素可能引起哪些类型超敏反应简述其发病机制; 答：青霉素临床应用时有可能引起的超敏反应类型有：I、II、III、IV型;1I 型超敏反应：指青霉素过敏性休克,其发病机制是青霉素本身并无免疫原性,其降解产物为半抗原,与体内蛋白质结合而产生免疫原性,刺激机体产生特异性IgE,使机体处于致敏状态;当机体再次使用青霉素时,可发生过敏性休克;2II 型超敏反应：指青霉素过敏性血细胞减少症,其发病机制是青霉素降解产物能与血细胞膜蛋白或血浆蛋白结合获得免疫原性,从而刺激机体产生抗体;这种抗体与和药物结合的红细胞、粒细胞和血小板作用,引起药物性溶血性贫血、粒细胞减少症和血小板减少性紫癜;3III型超敏反应：指使用大剂量青霉素等药物可引起类似血清病样的反应,其发病机制是因为患者体内已产生特异性抗体,而大剂量药物尚未完全排除,两者结合形成中等大小免疫复合物所致;4IV型超敏反应：指青霉素引起的接触性皮炎,其发病机制是青霉素小分子半抗原与体内蛋白质结合成完全抗原,使T细胞致敏;当机体再次接触青霉素时,可发生接触性皮炎;31.血清病与血清过敏性休克分属哪型超敏反应比较发病机制;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测32.自身免疫病都具有哪些共同特性33.什么叫自身抗体,其主要特点有哪些第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测34.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有哪些35.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有哪些第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验36.请列出免疫缺陷病的一般特征37.原发性免疫缺陷性疾病有哪些38.继发性免疫缺陷病有哪些39.什么叫获得性免疫缺陷综合征其临床特点及典型特征是什么第27章肿瘤免疫与免疫学检验40.什么叫肿瘤抗原,其产生的可能机制有哪些41.什么叫肿瘤标志物,理想的肿瘤标志物具有哪些特性第28章移植免疫及其免疫检测42.什么叫移植排斥反应,根据排斥反应发生的时间、免疫损伤机制和组织病理改变,如何进行分类43.常见的组织或器官移植有哪些44.排斥反应的免疫监测包括哪些方面。
免疫标记
• 实验目的 • 通过HBsAg的检测，了解酶联免疫吸附试验的原理和 类型，熟悉双抗体夹心法的原理及其临床意义。
【原理】
以特异性抗体(抗-HBs)包被载体表面，然后将待测标本 加入反应孔，混匀，37℃孵育，洗去未结合的抗原，加 入酶标特异抗体(酶标 抗-HBs)37℃孵育30min。酶标抗 体就连接到已结合于致敏载体表面的抗原上，孵育后， 洗去未结合的酶标抗-HBs。最后加入底物溶液，根据颜 色反应来判定抗原含量。
已包被抗-HBs的反应孔 + 被测标本→+ 酶标抗-HBs → 混匀 37℃30min →洗涤液手工冲洗5次，拍干→ 加显色剂A液，再加B液 各1滴混匀 → 37℃10min →观察判断结果。 先观察3个对照孔结果。
双抗体夹心法检测抗原原理示意图
取出水洗5次
酶标抗HBs-Ab 放37℃，30min
• 4. 结果判断须在10min内完成。
【临床意义】
• 血清中检测到HBsAg可确证有乙型肝炎
（HBV）感染。我国有1亿HBsAg多健康携带者
• 但不一定是乙型肝炎患者。 实验报告
1. 简述荧光免疫法检测ANA的实验原理
2. 试述酶联免疫法检测HBs-Ag的实验原理
3. 报告实验结果：标本号，阴性，阳性，对照结果
• 实验物品发放：被检血清，每人一份，报告标本号
【方法】 阴性对照、阳性对照、空白对照全班各作2分。共6分
于已包被抗-HBs的试验孔内加入待测血清标本，每孔50μl
空白孔不加血清 阴、阳、空白对照 各2孔，全班
加入酶标抗-HBs，每孔1滴 (50μl)充分混匀，37℃ 30min
手工洗板:弃去反应孔内液体、拍干、用洗涤液注满孔， 弃去拍干，同法反复洗涤五次后，拍干。每次泡20秒
7-2免疫学技术 标记免疫分析技术 华中农业大学免疫学基础及免疫学技术
标记免疫分析技术根据标记物不同分为： 免疫荧光技术 放射免疫测定技术 免疫酶技术 免疫电镜技术 胶体金标记分析技术 发光免疫分析技术 以及由此延伸的其它各种免疫检测方法
用途：对样品进行定性、定位及定量分析。
1、荧光抗体的制备
2、抗原标本的制备
3、抗原与荧光抗 体反应
4、荧光显微镜观察
细胞
含义：
先用酶标记抗体（或抗原）与被检样中的相 应抗原（或抗体）结合后，可形成抗原-抗体-酶 复合物，在相应底物作用下，产生可溶或不溶有 色反应产物，此产物颜色深浅与标本中的抗原 （或抗体）的结合量成正比。
免疫酶技术的种类
免疫酶技术按照抗原抗体系统是定位于组织细胞上还是存在 于液体样品中分为:
免疫酶组织抗原定位法（免疫酶定位技术，免疫酶组织化学技术）
凝集抑制试验 乳等颗粒和各种凝集 +++
协同凝集试验 现象
+++
抗球蛋白试验
+++
补体参与反应 补体溶血试验 以裸眼或光电比色仪 ++ 补体结合试验 观察测定溶血现象 +++
中和反应 病毒中和试验 病毒感染性丧失 + 毒素中和试验 外毒素毒性丢失 ++
免疫标记技术 荧光免疫技术 检测荧光现象
++++
125I是最常用的标记物
- 表达式： *
*
*
结合的Ag*；
游离Ag*
待测Ag 标记Ag
+
+
Ab
B
F
游离的标记Ag
B
F
结合的标记Ag
结合率（B/F)的计算
免疫学及免疫学检验
免疫学及免疫学检验
免疫放射分析（IRMA）
基本原理
单位点IRMA： 利用过量标记抗体与 待测抗原进行反应，形成抗原抗体复合 物，反应平衡后，用固相抗原结合反应 液中剩余的未结合标记抗体并将其分离， 测定上清液的放射量。
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免疫学及免疫学检验
放射免疫技术的应用
常用于各种激素、微量蛋白、肿瘤 标志物和药物等微量物质的测定。 问题：放射性污染、常用核素半衰 期短、试剂盒稳定期不长不易自动化 仪器分析等。
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免疫学及免疫学检验
第九章 免疫荧光技术
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免疫学及免疫学检验
第一节 荧光的基本知识
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免疫学及免疫学检验 异硫氰酸荧光素（FITC） 为黄色或橙黄色结晶粉末，分子量为389.4，最 大吸收光波长为490-495nm，最大发射光波长520530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，是应用最广泛的荧 光素。
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免疫学及免疫学检验
荧光抗体是将荧光素（如FITC）与特异性抗
体以化学方式共价结合而成。
标记方法：搅拌法(适合大样品)
透析法(适合小样品)
标记抗体的纯化：透析法
层析分离法
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免疫学及免疫学检验
荧光抗体的鉴定
免疫学及免疫学检验
测定方法与步骤
1.抗原抗体反应：平衡法或非平衡法 2.分离结合与游离标记物 沉淀剂沉淀复合物，离心分离。如第二抗体沉淀法、 聚乙二醇沉淀法或活性炭吸附法等。要求：分离彻 底，迅速；分离试剂和过程不影响反应平衡；操作 简便，重复性好且经济。 3.放射性测定及数据处理 晶体闪烁计数仪(γ射线)或液体闪烁计数仪( β射线) 绘制标准曲线，计算待检抗原浓度。
标记免疫技术
比色
比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的 液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架 中。用特定的波长测读吸光值。
比色结果的表达以往通用光密度（optical density，OD），现按规定用吸光度 （absorbence，A），两者含义相同。
通常的表示方法是，将吸收波长写于A字母的 右下角，如OPD的吸收波长为492nm，表示方法 为"A492nm"或"OD492nm"。
四、均相酶免疫吸测定
基本原理：利用酶标抗体结合抗原形成复 合物后，标记酶的活性发生改变的原理， 在不将复合物与游离酶标抗体分离的情 况下，直接测定系统中总的标记酶活性 的改变，进而推算出待检样品中的抗原 量。
生物素-亲和素 免疫放大技术
……
第一节 酶免疫技术
基本原理
利用酶催化底物反应的生物放大作用, 提高特异性抗原-抗体免疫学反应的检测 敏感性的一种标记免疫技术。
基本特点：
①标记后保留酶和抗原(抗体)的活性。 ②酶促反应专一性，保证特异性。 ③底物反应放大作用，提高敏感性。 ④酶标试剂保存稳定。 ⑤操作简便，安全易行。
低于HRP，且价高，故应用不如HRP普及。
（三）酶标记抗体或抗原
• 基本要求： 酶标记抗原纯度要高，抗原性完整；
抗体的特异性好，效价高，亲和力强， 比活性高以及易于批量生产和分离纯化。
• 酶标记方法
1.交联法
以双功能交联剂为“桥”，分别与酶和 抗体（抗原）连接形成结合物。如戊二 醛交联法。
2.直接法
标记免疫技术
邹全明
第三军医大学医学检验系 临床微生物学和免疫学教研室
免疫标记技术及分析应用
免疫标记技术及分析应用免疫标记技术是一种利用分子生物学和免疫学的方法，通过标记特定抗原或抗体来研究细胞和组织中的特定分子。
这一技术的应用非常广泛，包括生物医学研究、诊断和治疗。
下面将详细介绍免疫标记技术的原理、方法和应用。
免疫标记技术的原理基于抗原-抗体反应的特异性和亲和力。
在免疫标记技术中，抗原或抗体被标记上信号物质，如荧光染料、酶、放射性同位素等，使其在细胞或组织中可见或易于检测。
通常使用的标记方法包括直接标记和间接标记。
直接标记是将信号物质直接连接到抗体或抗原上。
例如，可以使用荧光染料标记抗体，然后通过荧光显微镜观察细胞或组织的荧光信号。
直接标记具有简单、快速和直接观察的优点，但标记物对抗体或抗原的结构和功能可能产生不良影响。
间接标记是通过两步反应来实现的。
首先，将非标记的第一抗体与目标分子特异性结合，然后使用第二抗体与第一抗体结合的位置标记。
常用的间接标记方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫组化和免疫印迹等。
间接标记方法更灵活，允许使用不同的信号物质，同时也可以放大信号，提高检测灵敏度。
在生物医学研究中，免疫标记技术被广泛应用于血液和组织中特定蛋白质的定量和定位分析。
例如，可以利用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中疾病标志物的浓度，以帮助早期诊断和监测疾病。
免疫标记技术还可以用来分析细胞和组织中蛋白质的表达和分布。
另外，免疫标记技术在免疫细胞学研究中也起到了重要的作用。
通过标记细胞表面的抗原，可以鉴定和定量不同类型的免疫细胞。
例如，通过标记CD4和CD8抗原，可以区分T淋巴细胞的不同亚群。
免疫标记技术还可以用来研究免疫细胞的功能和相互作用。
例如，流式细胞术（flow cytometry）结合多重免疫标记技术，可以同时检测多种细胞标记物，从而实现对细胞表型和功能的全面分析。
除了研究领域，免疫标记技术在临床诊断和治疗中也有重要应用。
例如，在肿瘤诊断中，可以利用免疫组织化学和免疫荧光技术来鉴定肿瘤组织中的抗原表达，指导肿瘤分型和治疗方案。
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B/F 60 (％)
50
40 30 20 10
0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 4.8 5.6 Ag(ng/ml)
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免疫学及免疫学检验
测定方法与步骤
1.抗原抗体反应：平衡法或非平衡法 2.分离结合与游离标记物
对游离的125I等试剂与标记物 进行分离
方法：分子筛凝胶过滤；离子 交换层析；聚丙烯酰胺凝胶电泳 （PAGE）；高效液相色谱（HPLC）
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免疫学及免疫学检验
标记物鉴定
放射化学纯度 单位标记物中结合在被标记物上的放射性
占总放射性的百分率。一般要求大于95％。
免疫活性
⋯⋯⋯
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免疫学及免疫学检验
第八章 放射免疫技术
类型：
放射免疫分析（radioimmunoassay,RIA） 免疫放射分析（immunoradiometric
assay,IRMA）
广义放射免疫技术还包括放射受体分析（使用受体测量抗原）和放射配体结 合分析（使用配体研究受体）。
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免疫学及免疫学检验
标记免疫技术= 免疫技术+标记技术
抗原抗体反应 示踪物标记
特异性
标记免疫技术的主要特点：
高特异性、高灵敏性
灵敏性
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免疫学及免疫学检验
标记免 疫技术
免疫组 化技术
免疫测 定技术
示踪物及 标记技术
放射免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 化学发光技术 金免疫技术
白质、酶 酸、组胺 易标记、 性功能区
残基等基 比放射性 的残基标
团
高
记
间接标记 甾类化合 不存在酪 可避免氧 添加基团
物、核苷 氨酸、组 化／还原 可能影响
酸等小分 胺残基等 剂对被标 被标记物
子化合物 基团,需 记物活性 活性
添加
的损伤等
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免疫学及免疫学检验
标记物纯化
免疫学及免疫学检验
抗血清鉴定
多克隆抗体的抗血清是放射免疫分
析的主要试剂之一，其质量直接影响方 法的特异性和灵敏度。
亲合力
选用亲和常数K值大(109~1012 L//mol)抗血清
特异性
ห้องสมุดไป่ตู้
其程度可直接影响结果的准确性
滴度
最大稀释度。在本技术方法中是指结合50％标记抗原时的
抗血清的稀释度。
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标记方法
125I的标记 原理：取代分子中酪氨酸或酪胺残基
及组胺残基上的氢原子 方法： 直接标记法
氯胺T法和乳过氧化物酶法
间接标记法 联接标记法
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免疫学及免疫学检验
适用分子 原理
特点
缺点
直接标记 肽类、蛋 存在酪氨 操作简便、不适于活
特点:灵敏度高(10-9-10-15g/L)、特异性强、 重复性好等
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免疫学及免疫学检验
标记物:
常用的核素有两大类 γ射线： 131I、125I、57Cr和60Co β射线：14C、3H和32P。 使用最广泛的是：125I
①性质活泼、易制备标记物 ②对被标记物的免疫活性影响小 ③测量方法简便、已推广 ④半衰期较长、核素丰度高
标记过程中，被标记物活性损伤程度。B/T％>80％，
B/T％ ↑ 抗原损伤↓。
比放射性
单位化学量标记物中所含的放射性强度. 常用Ci/g、
mCi/mg、Ci/mmol等单位表示。
比放射性↑ 方法更灵敏；过高 免疫活性影响大，储存稳定性差 。
辐射自损伤大，对标记物
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免疫放射分析（IRMA）
基本原理
单位点IRMA： 利用过量标记抗体与 待测抗原进行反应，形成抗原抗体复合 物，反应平衡后，用固相抗原结合反应 液中剩余的未结合标记抗体并将其分离， 测定上清液的放射量。
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免疫学及免疫学检验
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IRMA与RIA的异同点
标记物 在RIA中 核素标记抗原，抗原有不同种类，根
据其化学结构，标记时需用不同的核素和不同的方法。在 IRMA中 核素标记抗体。抗体为蛋白质，有利于碘化标记， 不同抗体标记方法基本相同。标记抗体的比活度高，提高了 分析的灵敏度。
反应速率 反应速度与反应物的浓度呈正比，在IRMA中
沉淀剂沉淀复合物，离心分离。如第二抗体沉淀法、 聚乙二醇沉淀法或活性炭吸附法等。要求：分离彻 底，迅速；分离试剂和过程不影响反应平衡；操作 简便，重复性好且经济。 3.放射性测定及数据处理 晶体闪烁计数仪(γ射线)或液体闪烁计数仪( β射线) 绘制标准曲线，计算待检抗原浓度。
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标记抗体是过量的，而且不存在竞争性结合复杂的反应，所 以反应速度较RIA快。在RIA中抗体量是微量的，所以一定要 用高亲和力的多克隆抗体，而在IRMA中应用亲和力较低的单 克隆体也能得到满意的结果。
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免疫学及免疫学检验
反应原理 RIA为竞争抑制，测得放射性的量与受检
免疫学及免疫学检验
放射免疫分析（ RIA ）
基本原理
采用定量的标记抗原（Ag＋）和非 标记抗原（Ag）竞争性结合有限量特异 性抗体（Ab）的反应。
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免疫学及免疫学检验
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免疫学及免疫学检验
抗原呈反比。IRMA为非竞争结合，剂量反应曲线为正相关 的直线关系。
特异性 在双位点IRMA中，一般均应用针对不同位
点的单克隆抗体，其交叉反应率低于应用多克隆抗体的 RIA。
检测范围 通常RIA的工作范围为2-3个数量级，而
免疫学及免疫学检验
双位点IRMA 先用固相抗体与抗原 反应结合,然后再用过量的标记抗体 与已结合于固相抗原的另一抗原决 定簇结合,形成固相抗体-抗原-标记 抗体复合物,洗弃反应液中剩余的标 记抗体,测定固相上的放射性。
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免疫学及免疫学检验
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